plagiat merupakan tindakan tidak terpuji · streptozotosin, kadar glukosa darah, histologi...
Post on 27-Mar-2019
223 Views
Preview:
TRANSCRIPT
i
PENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK ETANOL DAUN SUKUN
(Artocarpus altilis (Park.) Fosberg.) PADA TIKUS TERINDUKSI
STREPTOZOTOSIN
SKRIPSI
Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat
Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.)
Program Studi Farmasi
Oleh:
Anggun Amalia Margita
(108114029)
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SANATA DHARMA
YOGYAKARTA
2014
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
ii
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
iii
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
iv
HALAMAN PERSEMBAHAN
Karya ini kupersembahkan untuk :
Allah SWT sebagai ungkapan syukur dan pujianku
Papa & Mama tersayang Kakak-kakakku & Adikku Dan untuk Almamaterku
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
v
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
vi
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
vii
PRAKATA
Puji syukur penulis panjatkan kepada Allah SWT atas segala berkat dan
pertolongan-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul
“Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun Sukun (Artocarpus altilis (Park.)
Fosberg.) pada Tikus Terinduksi Streptozotosin”. Skripsi ini disusun sebagai salah
satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi
Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.
Dalam penelitian ini dan penyusunan skripsi ini tentunya tidak terlepas
dari bantuan berbagai pihak. Oleh karena itu, dalam kesempatan ini penulis ingin
mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada :
1. Dekan Universitas Sanata Dharma.
2. Bapak Ipang Djunarko, M.Sc., Apt. selaku Dosen Pembimbing yang
telah bersedia membimbing, mengoreksi, memberi dukungan, dan saran
mulai dari awal persiapan hingga akhir penyusunan skripsi ini.
3. Ibu drh. Sitarina Widyarini, MP, Ph.D., selaku Dosen Pembimbing
kedua yang telah bersedia membimbing, mengoreksi, memberi
dukungan, dan saran mulai dari awal persiapan hingga akhir penyusunan
skripsi ini.
4. Bapak Prof. Dr. C. J. Soegihardjo, Apt, selaku Dosen Penguji yang
bersedia memberikan saran dan kritik selama penyusunan skripsi.
5. Ibu Phebe Hendra, M.Si., Apt., Ph.D., selaku Dosen Penguji yang
bersedia memberikan saran dan kritik selama penyusunan skripsi.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
viii
6. Ibu Phebe Hendra M.Si., Apt., Ph.D., selaku Dosen Pembimbing
Akademik yang telah mendampingi dan mendukung penulis selama
menekuni studi di Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma
Yogyakarta.
7. Ibu Dr. Sri Hartati Yuliani, M.Si., Apt., selaku Kepala Laboratorium
Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma yang telah memberikan
ijin penggunaan fasilitas laboratorium guna penelitian skripsi ini.
8. Laboran Pak Parjiman, Pak Heru, Paka Kayat, Pak Wagiran, Pak Parlan,
Pak Kunto, Mas Bimo, dan Pak Mus yang telah banyak membantu
menyediakan fasilitas yang dibutuhkan untuk melakukan penelitian ini.
9. Seluruh staff karyawan dan pengajar Fakultas Farmasi Universitas
Sanata Dharma Yogyakarta
10. Bapak drh. Sugiyono, M. Sc., selaku Dosen Fakultas Kedokteran Hewan
Universitas Gadjah Mada yang telah memberikan saran dan membantu
dalam melakukan penelitian.
11. Niang Ratna, Kakak-kakakku Evie Christanti Oktarina dan Anggara Eka
Nugraha, serta adikku Orchida Vidia Nadira, atas semangat, dukungan,
dan doa yang diberikan kepada penulis selama penulis menjalani masa
perkuliahan.
12. Chatarina Serafina Ika Wijayanti, Therezita Sahita Laksmi, dan Inggrid
Roswita Tokan, yang telah berjuang bersama penulis dalam penyusunan
skripsi ini yang merupakan syarat penulis untuk mendapat gelar Sarjana
Farmasi.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
ix
13. Puspita Sari Dewi sebagai sahabat yang telah memberikan dukungan,
saran dan bantuan selama penulis menjalani masa perkuliahan.
14. Teman-teman tercinta Ella Puspitasari, Kak Dolorosa Lintang Suminar,
Catharina, dan Tirzayana atas persahabatan, kebersamaan dan suka duka
yang dijalani selama ini.
15. Teman-teman FST A angkatan 2010 dan semua teman farmasi USD
khusunya angkatan 2010.
16. Semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu per satu oleh penulis yang
telah membantu selama proses penyusunan skripsi ini berlangsung.
Peneliti menyadari bahwa skripsi ini masih jauh dari kesempurnaan,
karena itu penulis menerima kritik dan saran yang membangun dan bermanfaat
khususnya bagi pengembangan ilmu pengetahuan, sehingga dapat menjadi acuan-
acuan untuk penelitian selanjutnya. Semoga tulisan ini dapat memberikan manfaat
khususnya di bidang farmasi, serta semua pihak baik mahasiswa, lingkungan
akademis, maupun masyarakat.
Yogyakarta, 20 November 2014
Penulis
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
x
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL ........................................................................................ i
HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING .............................................. ii
HALAMAN PENGESAHAN .......................................................................... iii
HALAMAN PERSEMBAHAN ...................................................................... iv
LEMBAR PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI KARYA
ILMIAH UNTUK KEPENTINGAN AKADEMIS ......................................... v
PERNYATAAN KEASLIAN KARYA .......................................................... vi
PRAKATA ....................................................................................................... vii
DAFTAR ISI .................................................................................................... x
DAFTAR TABEL ............................................................................................ xv
DAFTAR GAMBAR ....................................................................................... xvi
DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................... xvii
INISARI ......................................................................................................... xviii
ABSTRACT ....................................................................................................... xix
BAB I. PENGANTAR ..................................................................................... 1
A. Latar Belakang ............................................................................................ 1
1. Perumusan masalah ................................................................................. 3
2. Keaslian penelitian .................................................................................. 4
3. Manfaat penelitian ................................................................................... 4
B. Tujuan Penelitian ......................................................................................... 5
1. Tujuan umum ........................................................................................... 5
2. Tujuan khusus .......................................................................................... 5
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xi
BAB II. PENELAHAAN PUSTAKA.............................................................. 6
A. Uraian Tanaman Artocarpus altilis (Park.) Fosberg ................................... 6
1. Habitat dan morfologi ........................................................................... 6
2. Klasifikasi ............................................................................................. 7
3. Kandungan ............................................................................................ 7
4. Nama daerah.......................................................................................... 7
5. Manfaat ................................................................................................. 8
B. Ekstraksi ...................................................................................................... 8
C. Pankreas ....................................................................................................... 9
1. Eksokrin ................................................................................................. 10
2. Endokrin ................................................................................................. 12
D. Jenis Kerusakan Pankreas .......................................................................... 13
1. Pankreatitis akut ..................................................................................... 13
2. Pankreatitis kronis .................................................................................. 13
3. Infusiensi pankreas ................................................................................. 14
4. Karsinoma pankreas ............................................................................... 14
5. Diabetes melitus ..................................................................................... 15
E. Diabetes Melitus .......................................................................................... 15
1. Definisi ................................................................................................... 15
2. Klasifikasi ............................................................................................... 16
3. Diagnosis ................................................................................................ 18
F. Insulin .......................................................................................................... 18
G. Metode Penetapan Kadar Glukosa Darah .................................................. 19
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xii
1. Metode enzimatik .................................................................................... 19
2. Metode kondensasi dengan gugus amina ................................................ 20
3. Metode oksidasi-reduksi .......................................................................... 20
H. Streptozotosin .............................................................................................. 20
I. Landasan Teori ............................................................................................. 23
J. Hipotesis ....................................................................................................... 24
BAB III. METODE PENELITIAN.................................................................. 25
A. Jenis dan Rancangan Penelitian .................................................................. 25
B. Variabel dan Definisi Operasional .............................................................. 25
1. Variabel utama ....................................................................................... 25
2. Variabel pengacau .................................................................................. 25
3. Definisi operasional ............................................................................... 26
C. Bahan Penelitian .......................................................................................... 27
1. Bahan utama ............................................................................................ 27
2. Bahan kimia ............................................................................................. 27
D. Alat dan Instrumen Penelitian ..................................................................... 29
E. Tata Cara Penelitian ..................................................................................... 30
1. Determinasi tanaman sukun ..................................................................... 30
2. Pengumpulan bahan ................................................................................. 30
3. Pembuatan simplisia ................................................................................ 30
4. Pembuatan ekstrak etanol daun Artocarpus altilis (Park.) Fosberg ....... 31
5. Penetapan kadar air serbuk daun Artocarpus altilis (Park.) Fosberg ..... 31
6. Dosis ekstrak etanol Artocarpus altilis (Park.) Fosberg pada penelitian 32
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xiii
7. Pembuatan suspensi CMC Na 0,5% ........................................................ 32
8. Pembuatan dapar Na sitrat 50 mM pH 4,5 .............................................. 32
9. Penetapan dosis streptozotosin ................................................................ 33
10. Induksi hiperglikemia pada tikus ........................................................... 33
11. Pengukuran kadar glukosa darah ........................................................... 33
12. Desain dan perlakuan penelitian ............................................................ 34
13. Pengumpulan sampel ............................................................................. 35
14. Pembuatan slide histologi pankreas ....................................................... 35
F. Analisis Hasil ............................................................................................... 38
BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ........................................................ 40
A. Hasil Determinasi Serbuk Daun Artocarpus altilis (Park.) Fosberg .......... 40
B. Penetapan Kadar Air Serbuk Daun Artocarpus altilis (Park.) Fosberg...... 40
C. Penetapan Bobot Tetap Ekstrak Etanol Artocarpus altilis (Park.) Fosberg 41
D. Penentuan Dosis Pankreotoksik Streptozotosin ......................................... 42
E. Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Artocarpus altilis (Park.) Fosberg .... 43
1. Kadar glukosa darah ................................................................................ 43
2. Berat badan .............................................................................................. 48
F. Pemeriksaan Histologis Pankreas ................................................................ 49
1. Gambaran histologis kelompok kontrol basal ......................................... 50
2. Gambaran histologis kelompok kontrol negatif CMC Na 0,5% ............. 51
3. Gambaran histologis kelompok kontrol pankreotoksik streptozotosin 40
mg/kgBB ................................................................................................. 52
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xiv
4. Gambaran histologis kelompok perlakuan ekstrak etanol Artocarpus
altilis (Park.) Fosberg dosis 50 mg/kgBB ............................................... 54
G. Rangkuman Pembahasan............................................................................. 55
BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN .......................................................... 58
A. Kesimpulan ................................................................................................. 58
B. Saran ........................................................................................................... 58
DAFTAR PUSTAKA ...................................................................................... 59
LAMPIRAN ..................................................................................................... 64
BIOGRAFI PENULIS ..................................................................................... 76
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xv
DAFTAR TABEL
Tabel I. Kriteria Penegakan untuk penderita diabetes melitus ............... 18
Tabel II. Isi pereaksi enzim Glucose GOD-PAP .................................... 27
Tabel III. Volume bahan untuk pengukuran kadar glukosa ...................... 33
Tabel IV. Peningkatan rata-rata KGD (mg/dl) tikus jantan galur Wistar
pada hari ke-0, 4, dan 7. ........................................................... 45
Tabel V. Berat badan tikus jantan Wistar (mg/dl) pada kelompok
perlakuan hari ke- 0, 4, 7, kontrol basal, kontrol CMC, dan
kontrol pankreotoksik 50 mg/kgBB (n=4) ............................... 48
Tabel VI. Persentase kerusakan sel Islet Langerhans pankreas tikus
pada keempat kelompok dengan pengecatan Hematoksili
Eosin ......................................................................................... 50
Tabel VII. Hasil penetapan kadar air serbuk daun Artocarpus altilis
(Park.) Fosberg ......................................................................... 69
Tabel VIII. Hasil bobot pengeringan ekstrak etanol daun Artocarpus
altilis (Park.) Fosberg ............................................................... 69
Tabel IX. Hasil rendemen ekstrak etanol daun Artocarpus altilis (Park.)
Fosberg ..................................................................................... 70
Tabel X. Data penimbangan berat badan tikus pada kelompok basal,
kontrol negatif, kontrol pankreotoksik, dan kontrol perlakuan
EEAA ....................................................................................... 71
Tabel XI. Data pengukuran kadar glukosa darah tikus pada kelompok
basal, kontrol negatif, kontrol pankreotoksik, dan kontrol
perlakuan EEAA ...................................................................... 72
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xvi
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Anatomi pankreas ..................................................................... 10
Gambar 2. Foto mikroskopik eksokrin pankreas ....................................... 11
Gambar 3. Foto mikroskopik endokrin pankreas. ...................................... 12
Gambar 4. Struktur streptozotosin ........................................................... 20
Gambar 5. Skema Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Artocarpus altilis
(Park.) Fosberg ......................................................................... 39
Gambar 6. Kurva waktu vs rata-rata KGD tikus jantan Wistar (mg/dl)
pada pemberian ekstrak etanol Artocarpus altilis (Park.)
Fosberg dosis 50 mg/dl ........................................................... 46
Gambar 7. Kurva waktu vs rata-rata berat badan tikus pada kelompok
kontrol basal, kontrol negatif, kontrol pankreotoksik, dan
perlakuan EEAA ...................................................................... 48
Gambar 8. Foto mikroskopik organ pankreas tikus kelompok kontrol
basal perbesaran 400x .............................................................. 50
Gambar 9. Foto mikroskopik organ pankreas tikus kelompok kontrol
negatif CMC Na 0,5% perbesaran 400x .................................. 51
Gambar 10. Foto mikroskopik organ pankreas tikus kelompok kontrol
pankreotoksik streptozotosin 40 mg/kgBB perbesaran 400x ... 53
Gambar 11. Foto mikroskopik organ pankreas tikus kelompok kontrol
pankreotoksik streptozotosin 40 mg/kgBB perbesaran 400x ... 54
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xvii
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Surat pengesahan Medical and Health Researc Ethics
Committe (MHREC) .............................................................. 65
Lampiran 2. Surat pengesahan determinasi serbuk daun Artocarpus altilis
(Park.) Fosberg ......................................................................... 66
Lampiran 3. Daun Artocapus alitilis (Park.) Fosberg ................................... 67
Lampiran 4. Foto serbuk daun Artocarpus altilis (Park.) Fosberg ................ 67
Lampiran 5. Foto ekstrak etanol daun Artocarpus altilis (Park.) Fosberg ..... 68
Lampiran 6. Foto suspensi ekstrak etanol daun Artocarpus altilis (Park.)
Fosberg dalam CMC-Na 1% .................................................... 68
Lampiran 7. Nekropsi Tikus .......................................................................... 68
Lampiran 8. Penetapan kadar air serbuk daun Artocarpus altilis (Park.)
Fosberg ...................................................................................... 69
Lampiran 9. Bobot pengeringan ekstrak etanol daun Artocarpus altilis
(Park.) Fosberg .......................................................................... 69
Lampiran 10. Hasil rendemen ekstrak etanol daun Artocarpus altilis (Park.)
Fosberg ..................................................................................... 70
Lampiran 11. Data penimbangan berat badan tikus jantan Wistar ................. 71
Lampiran 12. Data pengukuran kadar glukosa darah tikus jantan Wistar ..... 72
Lampiran 13. Hasil pembacaan histopatologi organ pankreas tikus ................ 73
Lampiran 14. Leaflet GOD-PAP.................................................................... 74
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xviii
INTISARI
Penelitian ini bertujuan untuk membuktikan adanya pengaruh ekstrak
etanol daun Artocarpus altilis (Park.) Fosberg dalam penurunan kadar glukosa
darah pada tikus jantan Wistar yang terinduksi streptosozin.
Penelitian ini bersifat eksperimental murni dengan rancangan acak
lengkap pola searah. Penelitian ini menggunakan 16 ekor tikus jantan Wistar,
umur 1,5-2 bulan, dan berat 120-160 g. Kelompok I merupakan kontrol basal
yang diberikan akuades dari hari ke-1 hingga hari ke-7. Kelompok II merupakan
kontrol pankreotoksik streptozotosin dosis 40 mg/kgBB secara intraperitonial
yang diinduksi pada hari ke-1 dan hari ke-2 hingga hari ke-7 diberikan akuades.
Kelompok III merupakan kontrol negatif CMC Na dengan konsentrasi 0,5%
secara per oral diberikan dari hari ke-1 hingga hari ke-7. Kelompok IV merupakan
kelompok perlakuan ekstrak etanol daun Artocarpus altilis (Park.) Fosberg dosis
50 mg/kgBB yang diberikan 3 hari sebelum diinduksi streptozotosin dan
pemberian ekstrak dilanjutkan hingga hari ke-7 secara per oral, serta pada hari ke-
1 diinduksi streptozotosin 40 mg/kgBB secara intraperitonial. Hasil dilihat
berdasarkan kadar glukosa darah pada hari 0, 4, dan 7, serta histologis pankreas
pada hari ke-14. Kadar glukosa darah yang diperoleh di analisis menggunakan
mean ± SD.
Berdasarkan data yang diperoleh, ekstrak etanol daun Artocarpus altilis
(Park.) Fosberg dosis 50 mg/kgBB tidak memiliki pengaruh penurunan kadar
glukosa darah pada tikus jantan Wistar terinduksi streptozotosin 40 mg/kgBB.
Kata kunci: daun Artocarpus altilis (Park) Fosberg, ekstrak etanol,
streptozotosin, kadar glukosa darah, histologi pankreas.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xix
ABSTRACT
The aim of study research were prove the decrease levels of blood
glucose effect of ethanol extract Artocarpus altilis (Park.) Fosberg in male Wistar
induced streptozotocin.
The research was pure experimental research with randomized
complete direct sampling design. This research use 16 male Wistar rats, attain the
age 1.5-2 month, and 120-10 gram weight. Group I is the basal control was given
aquadest on 1st days until 7
th days . Group II is the streptozotocin pancreotoxin
control dose 40 mg/kgBB intraperitonial induce on first day and 2nd
days until 7th
days given aquadest. Group III is negative control CMC Na with 0.5%
concentration orraly from 2nd
days until 7th
days. Group IV is a treatment group
for ethanolic extract of Artocarpus altilis (Park.) Fosberg leaves with dose 50
mg/kgBB given 3 days prior to induced streptozotocin and extract continue until
7th
days orally, as well as on the first day induced streptozotocin 40 mg/kgBB
intraperitoneal. For pancreotoxic control group, animals were given streptozotocin
at the first day. Results based on blood glucose levels seen on days 0, 4, and 7, as
well as histological pancreas on day 14. Blood glucose levels were obtained in the
analysis using mean ± SD.
Based on the data that obtained, the ethanol extract of Artocarpus
altilis (Park.) Fosberg seed at dose of 50 mg/kgBB does not have effect decreased
levels of blood glucose in Wistar male rats induced by streptozotocin 40 mg/kgBB.
Keywords : Artocarpus altilis (Park.) Fosberg leaves, ethanol extract,
streptozotocin, blood glucose levels, histology of pancreas.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
1
BAB I
PENGANTAR
A. Latar Belakang
Diabetes adalah sekelompok penyakit metabolik yang ditandai dengan
hiperglikemi akibat cacat pada sekresi insulin, kerja insulin, atau keduanya yang
disertai dengan penurunan metabolisme karbohidrat, lemak dan protein.
Hiperglikemi kronik diabetes berhubungan dengan kerusakan jangka panjang,
disfungsi, dan kegagalan berbagai organ, terutama mata, ginjal, saraf, jantung, dan
pembuluh darah (American Diabetes Association, 2007; Craig, Hattersley, and
Donaghue, 2009).
Diabetes melitus terdiri dari beberapa tipe, yaitu diabetes tipe 1, diabetes
tipe 2, diabtes gestasional, dan diabetes tipe lainnya. Diabetes melitus tipe 1 biasa
disebut dengan insulin-dependent diabetes ini disebabkan destruksi sel beta (sel )
penghasil insulin pada pulau Langerhans pankreas. Diabetes melitus tipe 2 biasa
disebut non-insulin dependent terjadi karena kesalahan dalam produksi insulin,
resistensi terhadap insulin, atau berkurangnya sensitivitas sel terhadap insulin
yang melibatkan reseptor di membran (Holt & Hanley, 2007).
Organ tubuh yang menghasilkan insulin adalah pankreas. Apabila lebih
dari 70% sel pankreas mengalami kerusakan maka akan menimbulkan
disfungsi yang menyebabkan diabetes melitus (McPhee and William, 2007).
Kerusakan sel pankreas dapat disebabkan oleh karena faktor genetik, infeksi
oleh kuman, faktor nutrisi, zat diabetogenik, pembentukan spesies oksigen reaktif
induksi dari senyawa kimia seperti aloxan dan streptozotosin (Szkudelski, 2001).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
2
Diabetes melitus merupakan salah satu penyakit yang sering ditemukan
di dunia khususnya di Indonesia. Berdasarkan hasil penelitian yang dilakukan
Wild, Roglic, Green, Sicree, and King (2004) diperoleh bahwa prevalensi
diabetes untuk semua kelompok umur di seluruh dunia diperkirakan 2,8% pada
tahun 2000 dan 4,4% pada 2030. Perkiraan terakhir menunjukkan ada 171 juta
orang di dunia dengan diabetes pada tahun 2000 dan diproyeksikan meningkat
menjadi 366 juta pada tahun 2030. Di Indonesia sendiri diperkirakan bahwa pada
tahun 2030 prevalensi diabetes mellitus mencapai 21,3 juta orang.
Dengan semakin meningkatnya prevalensi penderita diabetes dan minat
masyarakat pada penggunaan bahan alam sebagai obat tradisional semakin meluas.
Berbagai macam ramuan obat dari alam yang sudah digunakan oleh nenek
moyang kita sejak dulu kala kini mendapat perhatian besar. Penelitian dan
pengujian terhadap sejumlah tumbuhan yang berkhasiat untuk pengobatan banyak
dilakukan oleh para ahli. Hal ini dikarenakan penggunaan bahan alam sebagai
obat tradisonal umumnya tidak menimbulkan efek samping yang berarti seperti
yang sering terjadi pada pengobatan kimiawi. Selain itu, obat tradisional mudah
diperoleh, harga murah, dan dapat di tanam sendiri sebagai Tanaman Obat
Keluarga (TOGA) (Latief, 2012).
Salah satu tanaman yang digunakan secara empiris adalah daun sukun
(Artocarpus altilis). Berdasarkan penelitian Marianne, Yoandani, and Rosnani
(2011) ekstrak etanol daun sukun memiliki kandungan alkaloid, flavonoid, tanin,
glikosida, antrakuinon, dan steroid/triterpenoid. Selain itu, penelitian Lukacinova
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
3
and J. Mojzis (2008) menunjukkan bahwa senyawa flavonoid merupakan senyawa
aktif yang berperan sebagai antidiabetes. Salah satu turunan flavonoid yang
terkandung dalam daun sukun adalah kuersetin dan artoindonesianin (Ramadhani,
2009). Kuersetin memiliki efek perlindungan pada pankreas yang diinduksi
streptozotosin dengan mengurangi stress okasidatif dengan menghambat
peroksida lipid dan secara tidak langsung meningkatkan produksi antioksidan
endogen (Adewole, 2007; Coskun, 2005).
Dari uraian diatas, penelitian ini dilakukan menggunakan ekstrak
etanol daun Artocarpus altilis (Park.) Fosberg karena etanol termasuk ke dalam
pelarut polar, sehingga dapat menarik senyawa golongan flavonoid (kuersetin)
yang merupakan salah satu senyawa polar yang berperan dalam memproteksi
organ pankreas (Marianne, dkk, 2011).
1. Permasalahan
Berdasarkan latar belakang di atas, dapat dirumuskan permasalahan
sebagai berikut :
a. Apakah pemberian ekstrak etanol daun Artocarpus altilis (Park.) Fosberg.
dosis 50 mg/kgBB memiliki pengaruh terhadap penurunan kadar glukosa
darah pada tikus yang terinduksi streptozotosin ?
b. Apakah pemberian ekstrak etanol daun Artocarpus altilis (Park.) Fosberg.
dosis 50 mg/kgBB memiliki pengaruh memperbaiki gambaran histologis
pankreas pada tikus yang terinduksi streptozotosin ?
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
4
2. Keaslian penelitian
1) Telah dilakukan pengujian daun Artocarpus altilis (Park.) Fosberg.yang
dilakukan oleh Ermin, dkk (1991) yang melaporkan bahwa daun sukun
efektif mengobati penyakit seperti liver, hepatitis, pembesaran limpa,
jantung, ginjal, tekanan darah tinggi dan kencing manis karena
mengandung fenol, kuersetin dan champorol.
2) Menurut Nublah (2011) dengan pembebanan glukosa monohidrat dosis
tunggal sebelum diberikan ekstrak air dan ekstrak etil asetat daun sukun
dapat menurunkan kadar glukosa darah meskipun belum sebanding
dengan glibenklamid.
3) Berdasarkan penelitian yang dilakukan oleh Gustina (2012) membuktikan
bahwa ekstrak etanol dan etil asetat berupa flavonoid daun sukun dapat
menghambat enzim α-glukosidase, sehingga berpotensi sebagai
antidiabetes.
Sejauh penelusuran penulis, penelitian tentang pencegahan hiperglikemi pada
ekstrak etanol daun sukun (Artocarpus altilis (Park.) Fosberg.) yang
terinduksi streptozotosin pada tikus jantan galur wistar belum pernah
dilakukan.
3. Manfaat penelitian
a. Manfaat teoritis. Penelitian ini diharapkan dapat memberikan sumbangan
ilmu khususnya ilmu kefarmasian mengenai pengaruh pemberian ekstrak
etanol daun Artocarpus altilis (Park.) Fosberg. dan dampaknya terhadap
pankreas.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
5
b. Manfaat praktis. Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi
mengenai pengaruh penggunaan tanaman Artocarpus altilis (Park.)
Fosberg. sebagai tanaman alternatif pencegahan diabetes melitus.
B. Tujuan Penelitian
1. Tujuan umum
Penelitian ini bertujuan untuk membuktikan adanya pengaruh penurunan
kadar glukosa darah pada pemberian ekstrak etanol daun Artocarpus altilis
(Park.) Fosberg pada dosis 50 mg/kgBB pada tikus terinduksi streptozotosin.
2. Tujuan khusus
Tujuan penelitian ini secara khusus adalah untuk :
a. Mengetahui pengaruh penurunan kadar glukosa darah pada pemberian
ekstrak etanol daun Artocarpus altilis (Park.) Fosberg dosis 50
mg/kgBB berdasarkan pengukuran kadar glukosa darah pada tikus
terinduksi streptozotosin.
b. Mengetahui pengaruh pemberian ekstrak etanol Artocarpus altilis
(Park.) Fosberg dosis 50 mg/kgBB berdasarkan gambaran histologi
pankreas pada tikus terinduksi streptozotosin.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
6
BAB II
PENELAAHAN PUSTAKA
A. Uraian Tanaman Artocarpus altilis (Park.) Fosberg.
1. Habitat dan morfologi
Tumbuhan sukun (Artocarpus altilis (Park.) Fosberg) memiliki tinggi
rata-rata 12-15 meter. Tumbuhan sukun dapat tumbuh baik sepanjang tahun
di daerah tropis basah dan beriklim penghujan. Tanaman sukun memiliki
batang yang besar, bergetah dan bercabang banyak. Daun tanaman sukun
kaku, tebal, dan memiliki bentuk oval sampai lonjong. Ukuran daun sukun
bervariasi, satu pohon memiliki ukuran daun dengan panjang 20-60 cm, lebar
20-40 cm, dan panjang tangkai daun 3-7 cm. Pada bagian ujung daun
meruncing, bagian pangkalnya membulat, dan tepi daun berlekuk meyirip.
Permukaan daun bagian atas licin, warnanya hijau mengkilap, sedangkan
bagian permukaan bawah daun kasar, berbulu dan berwarna kusam. Posisi
daun menyebar menghadap ke atas dengan jarak antar daun bervariasi antar
2-10 cm. Bunga tanaman sukun berkelamin tunggal tetapi berumah satu.
Bunganya keluar dari ketiak daun pada ujung cabang dan ranting. Bunga
jantan berbentuk tongkat panjang berwarna kuning, dan bunga betina
berbentuk bulat bertangakai pendek. Buah sukun terbentu dari keseluruhan
jambak bunga. Buah sukun berbentuk bulat dan sedikit membujur. Biji buah
sukun berbentuk ginjal dan berwarna hitam dengan panjang 3-5 cm. tanaman
sukun memiliki akar tunggang yang dalam dan akar samping yang dangkal
(Pitojo, 1992).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
7
2. Klasifikasi
Kingdom : Plantae
Divisi : Spermatophyta
Sub divisi : Angiospermae
Kelas : Dicotyledoneae
Bangsa : Urticales
Famili : Moraceae
Genus : Artocarpus
Spesies : Artocarpus altilis (Parkinson) Fosberg (Pitojo, 1992).
3. Kandungan
Tanaman sukun mengandung beberapa senyawa kimia seperti
alkaloid, flavon dan flavanon (Raman, Sudhahar, and Anandarajagopal,
2012), tanin, fenolik, glikosida, saponin, steroid, terpenoid dan antraquinon
(Sidsesha, Nataraju., dan Bannikuppe, 2011). Berdasarkan penelitian yang
dilakukan Syah, Achmad, Bakhriar, Hakim, Juliawaty, dan Latip (2006)
ditemukan dua turunan senyawa geranil dari dihidrokalkon dan flavanon,
yaitu 2-geranil-2’,4’,3’, 4’-tetrahidroksihidro-kalkon dan 8-geranil-4’, 5,7-
trihidroksi flavanon. Serta senyawa rutin dan kuersetin (Pham, An, Mai and
Le, 2011).
4. Nama daerah
Dari berbagai negara, yaitu breadfruit (English), arbre à pain(French),
árboldel pan (Spanish), Brotfruchtbaum (German), rimas (Philippines),
kulur/kuro (Malaysia), kapiak (New Guinea), uto/kulu(Fiji),
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
8
bia/nimbalu(Solomon Islands), beta (Vanuatu), ulu (Hawaii, Samoa), uru
(Tahiti and SocietyIslands), kuru (Cook Islands), mei/mai (Micronesia, Tonga,
Marquesas), lemai(Mariana Islands) and mos (Kosrae) (Ragone, 1997). Nama
daerah dari sukun adalah Sakon (Aceh), Hatopul (Batak), Bakara (Makasar),
Suku (Nias), Sukun (Sunda), Sukun (Jawa), Suun (Ambon) (Heyne, 1987).
5. Manfaat
Pada masyarakat Indonesia umumnya, sukun biasa digunakan sebagai
obat tradisional yang dapat mengobati berbagai penyakit seperti sirosis hati,
hipertensi, dan diabetes melitus (Mustafa, 1998). Secara tradisional air
rebusan daun sukun dilaporkan dapat mengobati penyakit kulit, menurunkan
tekanan darah, menyembuhkan penyakit asma, hepar, dan juga ginjal (Syah,
et al., 2006).
B. Ekstraksi
Ekstraksi merupakan proses penarikan zat yang dapat larut dari bahan
yang tidak dapat larut dengan pelarut cair (Direktorat Jenderal Pengawasan Obat
dan Makanan Republik Indonesia, 1986). Ekstraksi dengan menggunkan metode
maserasi merupakan cara ekstraksi (penyarian) sederhana yang dilakukan dengan
cara merendam serbuk dalam cairan penyari selama beberapa hari pada
temperatur kamar dan terlindung dari cahaya sambil diaduk (Badan Pengawasan
Obat dan Makanan Republik Indonesia, 2005). Maserasi digunakan untuk
penyarian simplisia yang mengandung zat aktif yang mudah larut dalam cairan
penyari. Cairan penyari yang dapat digunakan dalam proses maserasi, yaitu air,
etanol, air-etanol atau pelarut lain. Dalam maserasi cairan penyari akan menembus
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
9
dinding sel dan masuk ke dalam rongga sel yang mengandung zat aktif sehingga
zat aktif menjadi larut. Adanya perbedaan konsentrasi antara larutan zat aktif di
dalam sel dengan di luar sel menyebabkan larutan yang terpekat didesak keluar
(Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan Republik Indonesia, 1986).
Ekstrak merupakan sediaan kental yang diperoleh dengan mengekstraksi
senyawa aktif dari simplisia nabati atau simplisia hewani menggunkan pelarut
yang sesuai, kemudian semua atau hampir semua pelarut diuapkan dan massa atau
serbuk yang tersisa diperlakukan sedemikian rupa sehingga memenuhi standar
baku yang telah ditetapkan (Badan Pengawasan Obat dan Makanan Republik
Indonesia, 2005).
C. Pankreas
Pankreas memiliki berat sekitar 60 gram, panjang sekitar 12-15 cm,
berwarna abu-abu, dan berada di regio epigastrik dan hipokondriak rongga
abdomen. Pankreas terdiri atas bagian kepala yang luas yang berada di
lengkungan duodenum, badan berada di belakang lambung, dan ekor yang sempit
berada di depan ginjal kiri dan menyentuh lompa (Nurachmah dan Rida, 2010).
Pankreas adalah sebuah kelenjar yang memiliki fungsi endokrin yang
menghasilkan hormon-hormon (insulin, glukagon, dan somatostatin) dan eksokrin
yang menghasilkan enzim-enzim pankreas (amilase, peptidase, dan lipase) (lihat
gambar 1). Pankreas eksokrin mengandung banyak asinus yang mengeluarkan
getah pankreas ke dalam duodenum melalui ductus pankreaticus. Sedangkan,
pankreas endokrin terdiri atas banyak pulau Langerhans (McPhee and William,
2007).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
10
Gambar 1. Anatomi pankreas (Kearns , Merrigan , Schork, 2003).
1. Eksokrin
Pankreas eksokrin terdiri atas kelompok-kelompok asinus. Sel
asinus merupakan sel epitel yang berbentuk piramid, dengan granula
zymogen yang terletak di central. Setiap asinus pankreas terdiri atas
beberapa sel asinus yang mengelilingi lumen (McPhee dan William,
2007).
Dalam sel asinus terdapat granula zymogen yang mengandung
enzim pencernaan. Jumlah granula zymogen di dalam sel bervariasi, lebih
banyak sewaktu puasa dan berkurang setelah makan. Getah pankreas
merupakan kombinasi dari sel asinar dan sekresi sel duktus. Sifat getah
pankreas ini basa yang berperan penting dalam menetralkan asam lambung
yang memasuki duodenum bersama makanan dari lambung (McPhee dan
William, 2007).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
11
Pada gambar 2 merupakan gambar mikroskopik eksokrin
pankreas. Dari gambar terlihat empat bagian penyusun dari eksokrin, yaitu
acinar cells, centroacinar cells, intercalated duct, dan blood vessel.
Centroacinar cells tersambung dengan intercalated ducts yang terletak di
luar acinar cells. Struktur dari acinar cells dan centroacinar cells
menyerupai balon kecil (asinus) menuju intercalated duct. Intercalated
duct merupakan saluran yang pendek dan mengalir ke saluran pengumpul
intralobula (intralobular collecting duct).
Gambar 2. Foto mikroskopik eksokrin pankreas (Michael, Kaye, Gordon,
Pawlina, and Wojciech, 2002)
Enzim pankreas dapat mencerna sebagian zat makanan. Proenzim
yang terkandung dalam butiran zymogen pankreas, yaitu :
a. Endopeptidase proteolitik (tripsinogen, chymotrypsonogen) dan
eksopeptidase proteolitik (procarboxypeptidase, proaminopeptidase)
mencerna protein dengan membelah ikatan peptida internal
(endopeptidases) atau dengan membelah asam amino dari karboksil atau
amino akhir peptide.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
12
b. Enzim amilolitik (alfa-amilase) mencerna karbohidrat dengan membelah
hubungan glikosidik polimer glukosa.
c. Lipase mencerna lemak dengan membelah ikatan ester trigliserida,
menghasilkan asam lemak bebas,
d. Enzim nucleolytik (deoxyribonuclease dan ribonuklease) mencerna asam
nukleat, memproduksi mononucleotides (Michael, et al.,2002)
2. Endokrin
Pulau Langerhans adalah mikroorgan endokrin multihormon dari
pankreas, menempati 20% volume pankreas. membentuk 1-2% berat
pankreas. Pada manusia ada 1-2 juta pulau Langerhans. Pulau Langerhans
banyak di dalam kauda dibandingkan korpus dan kaput (Ganong,1995).
Gambar 3. Foto mikroskopik endokrin pankreas (Michael, et al.,2002)
Pada gambar diatas (gambar 3) merupakan gambar mikroskopik dari
endokrin pankreas yang terdiri dari Pulau Langerhans yang berbentuk bulat
dengan berbagai ukuran yang dikelilingi oleh sel asinus eksokrin. Pulau
Langerhans biasanya lebih besar dari asinus dan terlihat lebih padat seperti
yang ditunjukkan oleh tanda panah diatas (Michael, et al.,2002).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
13
Kelenjar pankreas yang tersebar berada dalam kelompok sel-sel khusus
yang disebut pulau pankreas (Langerhans). Pulau ini tidak memiliki duktus
(saluran) sehingga hormon berdifusi secara langsung ke dalam darah. Ada
tiga jenis pulau Langerhans, yaitu sel yang menyekresi glukagon, sel
yang menyekresi insulin, dan sel yang mensekresi somatostatin. Kelenjar
pankreas mensekresi hormon insulin dan glukagon, yang pada dasarnya
berhubungan dengan pengendalian kadar glukosa darah (Nurachmah dan
Rida, 2010).
D. Jenis Kerusakan Pankreas
1. Pankreatitis akut
Pankreatitis akut adalah suatu sindrom klinis yang terjadi akibat
peradangan akut dan autodigesti destruktif pankreas dan jaringan didekat
pankreas. Pankreatitisi akut dapat disebabkan oleh trauma, metabolik, infeksi,
herediter, racun dan toksin, obat, vaskular, mekanis, idiopatik, dan dua
penyakit tersering yang berkaitan dengan pankreatitis akut adalah
penyalahgunaan alkohol dan penyakit saluran empedu (McPhee and William,
2007).
2. Pankreatitis kronik
Pankreatitis kronik adalah penyakit kambuhan yang menimbulkan
nyeri abdomen hebat, insufisiensi pankreas eksokrin dan endokrin, kelainan
duktus yang parah, dan klasifikasi pankreas. Pankreatitis kronik disebabkan
oleh penyalahgunaan alkohol, obstruksi duktus (mis, batu empedu), pankreas
divisum, tropis (manutrisi, toksin), hiperkalsemia (mis, hiperparatiroidisme),
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
14
hiperlipidemia, obat, trauma, autoimun, herediter, fibrosis kistik
(mukovidosis), dan idiopatik (McPhee and William, 2007).
3. Infusiensi pankreas
Infusiensi eksokrin pankreas adalah sindrom maldigesti akibat
kelainan yang mengganggu efektivitas aktivitas enzim pankreas. Karena
lipase pankreas sangat penting untuk mencerna lemak, ketiadaan enzim ini
menyebabkan stearotea (terbentuknya tinja berlemak, berjumlah besar, dan
berwarna terang). Penyebab maldigesti pada infusiensi pankreas aksokrin
mencakup pankreatitis kronik, fibrosis kistik, kanker pankreas,
gastrektomiparsial atau total, dan reseksi pankreas (McPhee and William,
2007).
4. Karsinoma pankreas
Secara mikroskopis, 90% kanker pankreas adalah adenokarsinoma;
sisanya adalah karsinoma adenoskuamosa, anaplastik, atau sel asinus. Kanker
pankreas cenderung menyebar ke jaringan sekitar, yang menginvasi organ-
organ tetangga di sepanjang fasia perineural, dan menimbulkan nyeri hebat,
dan melalui limfe dan aliran darah, yang menimbulkan metstatis ke kelenjar
limfe regional, hati dan tempat-tempat jauh lainnya. Kausa penyakit ini tidak
diketahui. Sebagian besar kasus kanker pankreas bersifat sporadik; sejumlah
kecil (3%) terjadi pada pasien dengan predisposisi herediter. Penyakit ini 6
kali lebih sering pada wanita pengidap diabetes ketimbang dibandingan yang
bukan pengidap diabetes (tetapi tidak dibandingkan dengan pengidap
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
15
diabetes pria) dan 2,5-5 kali lebih sering pada perokok (McPhee and William,
2007).
5. Diabetes melitus
Diabetes melitus adalah suatu kumpulan gejala yang timbul pada
seseorang yang disebabkan oleh adanya peningkatan kadar gula darah akibat
dari kekurangan insulin, baik absolut maupuan relatif (Cahyono, 2008).
E. Diabetes Melitus
1. Definisi
Diabetes Mellitus adalah penyakit yang disebabkan oleh gangguan
metabolik yang ditandai dengan hiperglikemi. Diabetes terjadi karena cacat
pada sekresi insulin, kerja insulin atau keduanya. Diabetes dapat
menyebabkan komplikasi kronis yang mengakibatkan kerusakan berbagai
organ, terutama mata, ginjal, saraf, jantung dan pembuluh darah (Scobie,
2007).
Diabetes adalah suatu penyakit tunggal dimana merupakan kelompok
sindrom heterogen yang ditandai dengan poliuri (banyak kencing), polidipsi
(banyak minum) dan polifagi (banyak makan) (Lanywati, 2006) yang disertai
dengan peningkatan kadar glukosa darah atau hiperglikemia dengan kriteria
diagnostik mencakup glukosa plasma puasa 126 mg/dL, gejala diabetes
plus glukosa plasma sewaktu 200 mg/dL, atau kadar glukosa plasma 200
mg/dL setelah pemberian 75 g glukosa per oral (uji toleransi glukosa)
(McPhee and William, 2007). Pada tikus kadar glukosa normal, yaitu 50-135
mg/dL (Delaney, 2008).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
16
2. Klasifikasi
a. Diabetes tipe 1
Diabetes tipe 1 (insulin-dependent diabetes mellitus (IDDM))
ditandai dengan kerusakan sel yang menyebabkan kerusakan insulin
absolut yang biasanya terjadi pada anak-anak (Scobie, 2007).
Pada diabetes tipe 1 kerusakan sel disebabkan karena adanya
destruksi imunologis yang selektif terhadap sel pulau Langehans yang
diperantai oleh limfosit T. Limfosit T supresor CD8 diduga sebagai sel
utama yang bertanggung jawab dalam kerusakan sel . Destruksi
autoimun sel merupakan suatu proses yang diperkirakan diperantarai
oleh sitokin (McPhee and William, 2007). Gangguan autoimun yang
terkait dengan diabetes tipe 1, yaitu penyakit Celiac, Addison,
hipotiroidisme, dan anemia pernisiosa (Watkins, 2003).
b. Diabetes tipe 2
Diabetes tipe 2 (non-insulin-dependent diabetes mellitus
(NIDDM)) disebabkan oleh gangguan sekresi insulin karena fungsi sel
yang abnormal. Ada beberapa penyebab dari gangguan sekresi insulin
dalam DM tipe 2 dengan beberapa kelainan yang telah terbukti
mengganggu keseimbangan antar neogenesis dan apoptosis. Studi klinis
pada manusia dan hewan membuktikan tentang konsep glukotoksisitas,
dimana ketinggian kadar glukosa plasma dengan berkurangnya sel
dapat menyebabkan gangguan sekresi insulin. Selain itu, lipotoksisitas
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
17
juga dapat menyebabkan gangguan pada sel . Pasien dengan DM tipe 2
menunjukkan respon berkuranganya incretin glucagon-like peptide
(GLP)-1 dalam merespon glukosa oral, sementara administrasi GLP-1
meningkatkan respon sekresi insulin postprandial dan dapat
mengembalikan glikemia mendekati normal (Scobie, 2007).
Komplikasi yang dapat timbul akibat diabetes melitus, yaitu
gangguan pembuluh darah besar (makroangiopati), atherosklerosis,
infark miokardium, diabetes retinopati, diabetes neuropati, dan diabetes
nefropati (Price and Loraine, 1997)
c. Diabetes gestasional
Diabetes gestasional adalah intoleransi glukosa pada saat
kehamilan yang dapat disebabkan oleh diabtes tipe 1 atau tipe 2.
Penurunan toleransi glukosa terjadi selama kehamilan normal, terutama
diketahui pada trisemester ketiga. Kriteria untuk mendiagnosis toleransi
glukosa abnormal pada kehamilan belum disepakati di seluruh dunia
(Scobie, 2007).
d. Diabetes melitus lain-lain
Diabetes mellitus jenis lainnya, kejadiannya dikaitkan dengan
adanya kelainan genetic, yaitu Maturity Onset Diabetes of Youth
(MODY) yang dikarakteristikan oleh adanya gangguan sekresi insulin
yang sedikit atau bahkan tanpas disertai resistensi insulin. Pasien yang
mengalami MODY akan mengalami hiperglikemia pada usia dini
(Triplitt, Reasner, and Isley, 2008).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
18
3. Diagnosis
Diagnosis klinis umumnya akan dipikirkan apabila ada keluhan
khas DM. Tabel I menunjukkan kriteria untuk menyatakan seseorang
menderita diabetes melitus. Apabila ada keluhan khas, hasil pemeriksaan
kadar glukosa darah sewaktu > 200 mg/dL sudah cukup untuk
menegakkan diagnosis DM. Hasil pemeriksaan kadar glukosa darah puasa
> 126 mg/dL juga dapat digunakan sebagai patokan diagnosis.
Tabel I. Kriteria Penegakan Diagnosis untuk Penderita Diabetes Melitus
Glukosa Plasma
Puasa
Glukosa Plasma 2 Jam
Setelah Makan
Normal < 100 mg/dL < 140 mg/dL
Pra-diabetes 100 – 125 mg/dL -
IFG atau IGT - 140 – mg/dL
Diabetes ≥ 126 mg/dL > 200 mg/dL
(DirJen, 2005).
F. Insulin
Insulin adalah suatu polipeptida yang mengandung 50 asam amino yang
merupakan hormon yang disekresi oleh pankreas yang memiliki fungsi utama
untuk menurunkan kadar nutrien darah, glukosa, asam amino dan asam lemak
(Nurachman dan Rida, 2010).
Insulin menimbulkan efek dengan bekerja pada otot, hati , dan jaringan
lemak. Sekresi insulin dipengaruhi oleh beberapa faktor, yaitu peningkatan
glukosa plasma, peningkatan asam amino plasma, peningkatan GIP (glucose-
dependent insulinotropic peptide), peningkatan aktivitas parasimpatik,
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
19
penurunan aktivitas simpatik, dan penurunan plasma epineprin (Stanfield,
2011).
Pada saat kadar glukosa plasma meningkat akibat dari glukosa diangkut
ke dalam aliran darah dari saluran pencernaan menyebabkan terjadinya
peningkatan sekresi insulin oleh beta sel pankreas (Stanfield, 2011).
Pengangkutan glukosa dalam aliran darah dilaksanakan oleh suatu transporter
glukosa yang disebut GLUT. Ada enam bentuk GLUT, yaitu GLUT-1,
GLUT-2, GLUT-3, GLUT-4, GLUT-5, dan GLUT-6. GLUT-1 berfungsi
untuk memindahkan glukosa menembus sawar darah otak, GLUT-2 berfungsi
untuk memindahkan glukosa yang masuk ke sel ginjal dan usus ke aliran
darah sekitar melalui pembawa kontrasporter, GLUT-3 berfungsi untuk
pengangkut utama glukosa ke dalam neuron, dan GLUT-4 bertanggun jawab
atas sebegian besar penyerapan glukosa pada mayoritas sel tubuh . GLUT-4
bekerja hanya setelah berikatan dengan insulin (Sherwood, 2009).
G. Metode Penetapan Kadar Glukosa Darah
1. Metode enzimatik
Prinsip dari metode ini adalah enzim glukosa oksidase (GOD) akan
mengoksidasi glukosa oleh udara (O2) menjadi asam glukonat dan hidrogen
peroksida. Hidrogen peroksida akan bereaksi dengan 4-amino-antipirin dan
fenol yang dikatalis oleh enzim peroksidase membentuk senyawa kuinonimin
berwarna merah.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
20
Reaksi yang terjadi :
Glukosa + O2 + 2 H2O GOD
asam glukonat + H2O2
2 H2O2 + 2,4-dikloro phenol + 4-aminoantipirin PAP
quinonimine + 4H2O
(Anonim, 2012).
2. Metode kondensasi dengan gugus amina
Prinsip dari metode ini adalah aldose akan dikondensasikan dengan
orto-toloidin dalam suasana asam dan setelah dipanaskan akan
menghasilkan larutan yang berwarna hijau (Widowati, Dzulkarnain, dan
Sa’roni, 1997).
3. Metode oksidasi - reduksi
Penetuan kadar glukosa darah pada metode ini dilakukan dengan cara
dioksidasi menggunakan oksidan ferrisianida. Oksida ini direduksi
menjadi ferrosianida oleh glukosa dalam suasana basa dengan pemanasan,
kemudian kelebihan ferri ditritasi secara iodometri (Widowati,
Dzulkarnain, dan Sa’roni, 1997).
H. Streptozotosin
Gambar 4. Struktur streptozotosin (Lenzen, 2008).
Sterptozotosin (STZ) ( Gambar 4) adalah suatu senyawa glukosamin-
nitrosurea yang diisolasi dari fermentasi Streptomyces achromogenes. STZ
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
21
menyebabkan kerusakan sel pankreas, sehingga terjadi hiperglikemi (Lenzen,
2008). Streptozotosin berbentuk bubuk, berwarna kuning pucat yang dapat
digunakan untuk menginduksi diabetes tipe 1 maupun diabetes tipe 2 pada hewan
uji (Etuk, 2005).
Dosis sterptozotosin yang biasa digunkan dalam menginduksi diabetes
mellitus tipe 1 yaitu 40-60 mg/kgBB (intravena) dan lebih dari 40 mg/kgBB
(intraperitonial). Pemberian streptozosin secara berulang dapat menginduksi
diabetes mellitus tipe 1 yang diperantai sistem imun. Pada diabetes tipe 2
streptozotosin dapat diinduksi dengan dosis 100 mg/kgBB intravena atau
intraperitoneal pada tikus yang berumur 2 hari kelahiran (Nugroho, 2006). Pada
penelitian yang dilakukan oleh Astuti, Mulyani, Laksmindra dan Sismindari
(2001) pemberian streptozotosin sebesar 40 mg/kgBB dengan dosis tunggal pada
tikus Sprague Dawley memberikan respon yang stabil dan penurunan insulin yang
lebih cepat dibandingkan dengan dosis 60 mg/kgBB.
Streptozotosin masuk ke dalam sel pankreas melalui transporter
glukosa (GLUT2) dan menyebabkan alkilasi DNA melalui gugus nitrosourea
yang mengakibatkan kerusakan sel pankreas. Peningkatan ATP
dephosphorylation setelah penginduksian streptozotosin mengakibatkan
terbentuknya substrat untuk xanthine oxidase sehingga pembentukan radikal
superoksida. Akibatnya, hidrogen peroksida dan radikal hidroksil juga dihasilkan.
Selain itu, streptozotosin membebaskan sejumlah oksida nitrat yang menghambat
aktivitas akonitase dan berpartisipasi dalam kerusakan DNA. Sebagai hasil dari
tindakan streptozotocin, sel mengalami nekrosis (Szkudelski, 2001). Pada
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
22
penelitian yang dilakukan oleh Pathak, Helge, Vladmir and Daan (2008)
streptozotosin secara selektif akan menghambat aktivitas enzim O-G1cNAse yang
bersama-sama dengan O-G1cNAc transferase bertanggung jawab dalam
perpindahan O-G1cNAc dari protein. Akibaranya terjadi O-glikosilasi protein
intraseluler dengan adanya N-methylnitroso mengakibatkan sel mengalami
apoptosis, sehingga memberi efek toksik pada sel pankreas yang mengakibatkan
regulasi kadar produksi insulin menurun dan regulasi kadar glukosa darah menjadi
terganggu.
Degradasi sel yang terjadi akan terlihat 2-4 hari setelah pemberian
streptzotosin akibat adanya pembengkakan pada pankreas dapat dilihat dari
terjadinya peningkatan kadar glukosa darah (Akbarzadeh, et al., 2007).
Pemberian streptozotosin untuk menginduksi diabetes melitus lebih efektif
dibandingkan dengan aloksan (Etuk, 2005).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
23
I. Landasan Teori
Pankreas merupakan bagian dari sistem pencernaan yang bertugas
membuat dan mengeluarkan enzim pencernaan ke dalam usus, dan juga organ
endokrin yang bertugas membuat dan mengeluarkan hormon ke dalam darah
untuk mengontrol metabolisme energi dan penyimpanan seluruh tubuh
(Longnecker, 2014).
Kerusakan pada pankreas dapat menyebabkan terjadinya diabetes mellitus.
Diabetes mellitus merupakan sekelompok penyakit metabolik yang ditandai oleh
hiperglikemia akibat cacat sekresi insulin dan peningkatan resistensi seluler
terhadap insulin (Anonim,2009)
Sukun (Artocarpus altilis (Parkinson) Fosberg) merupakan tumbuhan tropik
yang memilki kandungan saponin, polifenol, asam hidrosianat, asetilkolin, tanin,
riboflavin, fenol dan kuersetin. Daun sukun dapat mengobati beberapa penyakit
seperti liver, hepatitis, ginjal, hipertensi, dan salah satunya diabetes melitus.
Menurut Chandrika, et al., 2006 dengan dosis 50 mg/kgBB pada pemberian
ekstrak air panas daun Artocarpus heterophyllus dapat memberikan efek
antihiperglikemik pada tikus.
Pankreas dapat dirusak dengan peninduksian senyawa tertentu, seperti
aloksan dan streptozotosin. Streptozotosin merupakan salah satu senyawa yang
secara selektif merusak sel sehingga menyebabkan terganggunya sekresi insulin
yang mengakibatkan glukosa dalam tubuh semakin meningkat sehingga
menimbulkan hiperglikemi (Szkudelski, 2001). Berdasarkan penelitian yang telah
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
24
dilakukan ekstrak etanol daun sukun mengandung flavanoid yang memiliki
aktivitas sebagai antioksidan, dimana antioksidan merupakan suatu senyawa yang
dapat mengikat radikal bebas sehingga kerusakan sel-sel pankreas dapat
dihambat dan juga mampu meregenerasi sel-sel pankreas yang rusak sehingga
defisiensi insulin dapat diatasi, serta dapat memperbaiki sensitifitas reseptor
insulin sehingga hiperglikemi dapat dicegah (Marianne, dkk, 2011).
J. Hipotesis
1. Ekstrak etanol daun Artocarpus altilis (Park.) Fosberg. dosis 50 mg/kgBB
memiliki pengaruh terhadap penurunan kadar glukosa darah pada tikus jantan
Wistar yang terinduksi streptozotosin.
2. Ekstrak etanol daun Artocarpus altilis (Park.) Fosberg. dosis 50 mg/kgBB
memiliki pengaruh terhadap gambaran histologi pankreas pada tikus jantan
Wistar yang terinduksi streptozotosin.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
25
BAB III
METODE PENELITIAN
A. Jenis dan Rancangan Penelitian
Penelitian ini termasuk jenis penelitian eksperimental murni dengan
rancangan penelitian acak lengkap pola searah. Penelitian ini dilakukan di
Laboratorium Farmakognosi-Fitokimia dan Farmakologi-Toksikologi Fakultas
Farmasi Universitas Sanata Dharma.
B. Variabel dan Definisi Operasional
Variabel-variabel yang digunakan adalah sebagai berikut :
1. Variabel utama
a. Variabel bebas. Variabel bebas dalam penelitian ini adalah perlakuan pada
hewan uji ( dosis ekstrak etanol daun Artocarpus altilis (Park.) Fosberg).
b. Variabel tergantung. Variabel tergantung dalam penelitian ini yaitu :
1. Kadar glukosa darah tikus jantan Wistar.
2. Hasil histologis pankreas tikus jantan Wistar.
2. Variabel pengacau
a. Variabel pengacau terkendali. Variabel pengacau terkendali dalam
penelitian ini adalah jenis kelamin, galur, berat badan, umur dari hewan
uji, jumlah asupan makanan, dan waktu pencuplikan darah. Hewan uji
yang digunakan adalah tikus jantan Wistar dengan berat badan 120-160 g
dan umur 1,5-2 bulan, jalur pemberian streptozotosin secara
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
26
intraperitonial, ekstrak etanol daun Artocarpus altilis (Park.) Fosberg.
secara per oral.
b. Variabel pengacau tak terkendali. Variabel pengacau tak terkendali dalam
penelitian ini adalah keadaan patologis dari hewan uji yang digunakan,
stabilitas streptozotosin, dan kondisi tanah.
3. Definisi operasional
a. Daun Artocarpus altilis (Park.) Fosberg. adalah daun segar berwarna hijau,
tidak berlubang dan tidak terlalu tua dan muda (diambil daun yang berada
tidak dipangkal dan diujung batang) yang diperoleh pada bulan November
2013 dari Desa Sewon, Bantul, Yogyakarta.
b. Ekstrak etanol daun Artocarpus altilis (Park.) Fosberg. adalah sediaan
pekat yang diperoleh dengan mengekstraksi zat aktif dari simplisia daun
Artocarpus altilis (Park.) Fosberg. menggunakan metode ekstraksi.
Metode ekstraksi yang digunakan adalah maserasi dengan pelarut etanol
96%. Proses ekstraksi dilakukan selama 7 hari.
c. Berat badan tikus adalah ukuran badan tikus dalam sisi berat yang
ditimbang menggunakan timbangan. Ukuran ini yang dipakai untuk
menilai keadaan gizi pada tikus. Perhitungan yang diperoleh dapat
dijadikan penanda dari kondisi hipoglikemik pada tikus.
d. Kadar glukosa darah tikus adalah banyaknya glukosa di dalam darah tikus.
Pengukuran kadar glukosa darah tikus menggunakan metode GOD-PAP.
Dimana tikus dikatakan hiperglikemia apabila kadar glukosa darah 11,1
mmol/L (200mg/dL).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
27
e. Gambaran hitologis pankreas adalah gambaran keadaan dari struktur
jaringan organ pankreas secara detail dengan menggunakan mikroskop.
Gambaran histologis pankreas akan mengalami perubahan apabila
terinduksi streptozotosin.
C. Bahan Penelitian
Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah sebagai berikut:
1. Bahan utama
a. Hewan uji yang digunakan, yaitu tikus jantan Wistar, dengan umur 6-8
minggu, berat badan 120-160 g yang diperoleh Laboratorium Hayati
Imono Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.
b. Bahan uji yang digunakan adalah daun Artocarpus altilis (Park.) Fosberg.
yang diperoleh dari desa Sewon, Bantul, Daerah Istimewa Yogyakarta.
2. Bahan kimia
a. Senyawa penginduksi (kontrol positif pankreotoksik) berupa
streptozotosin (STZ) merk Nacalai dari BIOZATIC yang diperoleh dari
Laboratorium Farmakologi FMIPA Unversitas Islam Indonesia
Yogyakarta.
b. Etanol 96 % sebagai pelarut dalam ekstraksi daun Artocarpus altilis
(Park.) Fosberg. yang diperoleh dari CV. General Labora, Yogyakarta.
c. Pereaksi untuk pengukuran glukosa darah yang digunakan adalah enzim
Glucose GOD FS* (DiaSys, Germany) yang terdiri dari:
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
28
Tabel II. Isi pereaksi enzim Glucose GOD-PAP
Reagen
Phosphat buffer pH 7,5 250 mmol/l
Phenol 5 mmol/l
4-aminoantipyrine 0,5 mmol/l
Glukosa oksidase (GOD) ≥ 10 kU/l
Phenol Amino Antipirin Peroksidase (PAP) ≤ 1 kU/l
Glukosa standar 100 mg/dl (5,5 mmol/dl)
d. Aquadest sebagai pelarut CMC Na 0,5%, Na sitrat, dan asam sitrat
diperoleh dari Laboratorium Farmakologi dan Toksikologi Universitas
Sanata Dharma Yogyakarta.
e. Buffer sitrat yang terdiri dari Na sitrat dan asam sitrat sebagai pelarut
streptozotosin diperoleh dari Laboratorium Kimia Organik Universitas
Sanata Dharma Yogyakarta.
f. Na CMC 0,5% sebagai pelarut glibenklamid dan ekstrak etanol Artocarpus
altilis (Park.) Fosberg. diperoleh dari Laboratorium Farmakologi dan
Toksikologi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.
g. Eter sebagai pembius hewan uji sebelum di nekropsi yang diperoleh dari
Laboratorium Patologi Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Gadjah
Mada Yogyakarta.
h. Formalin 10% sebagai pengawet organ pankreas yang diperoleh dari
Laboratorium Patologi Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Gadjah
Mada Yogyakarta.
i. Alkohol absolut 80%, dan 95% sebagai cairan dehidran yang diperoleh
dari Laboratorium Patologi Fakultas Kedokteran Hewan Universitas
Gadjah Mada Yogyakarta.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
29
j. Xylol sebagai clearing agent dan pewarnaan H&E yang diperoleh dari
Laboratorium Patologi Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Gadjah
Mada Yogyakarta.
k. Parafin sebagai bahan impregnasi yang diperoleh dari Laboratorium
Patologi Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Gadjah Mada
Yogyakarta.
l. Harris-Hematoxyline sebagai pewarna dalam pewarnaan H&E yang
diperoleh dari Laboratorium Patologi Fakultas Kedokteran Hewan
Universitas Gadjah Mada Yogyakarta.
m. Acid Alkohol sebagai larutan untuk pewarnaan H&E yang diperoleh dari
Laboratorium Patologi Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Gadjah
Mada Yogyakarta.
n. Eosin sebagai larutan untuk pewarnaan H&E yang diperoleh dari
Laboratorium Patologi Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Gadjah
Mada Yogyakarta.
D. Alat dan Instrument Penelitian
Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah sebagai berikut :
Mesin penyerbuk (Retsch), oven (Memmert), ayakan dengan nomor mesh 40,
timbangan analitik (OHAUSS), maserator, waterbath, hot plate, evaporator
(BUCHI), aluminium foil, moisture balance (HG5 Hologen Moisture Analyzer),
seperangkat alat gelas berupa Erlenmeyer, beaker gelas, gelas ukur, labu ukur,
cawan porselin, pengaduk (Pyrex Iwaki Glass), spuit injeksi, spuit injeksi oral,
alat sentrifugasi (Centurion Scientific), mikropipet, blue tip, yellow tip, tabung
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
30
efendorf, mikrovitalab (Microlab 200, Merck), micro haematocrit tubes, vortex
(Genie Wilten), timbangan tikus (OHAUSS), mortir dan stamper, stopwatch,
tabung reaksi, embedding casette, pisau skalpel No 22-24, balok kayu, mikrotom,
coverglass, inkubator, tabung film, silet, tissue embedding console, bunsen,
cetakan pagoda, balok kayu (ukuran 3 cm x 1 cm x 1 cm), mikrotom, panangas,
gelas obyek, gelas penutup, staining jar, corong gelas, lap, stop watch, kotak
preparat dan mikroskop, magnetic stirer, kertas saring, akuades dalam botol
semprot, styrofoam, jarum, mikrotip, label, keranjang preparat dan refrigerator.
E. Tata Cara Penelitian
1. Determinasi tanaman sukun
Determinasi daun sukun (Artocarpus altilis (Park.) Fosberg.) mengikuti
Bihrmann’s Caudiciforms dan Taxonomy, serta dilakukan di Laboratorium
Sistematika Tumbuhan, Fakultas Biologi, Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta.
2. Pengumpulan bahan
Daun Artocarpus altilis (Park.) Fosberg. diperoleh dari desa Sewon,
Bantul, Yogyakarta. Daun yang diambil adalah daun segar berwarna hijau, tidak
berlubang dan tidak terlalu tua dan muda (diambil daun yang berada tidak
dipangkal dan diujung batang).
3. Pembuatan simplisia
Pembuatan simplisia daun Artocarpus altilis (Park.) Fosberg. yang telah
dikumpulkan, dicuci dengan air mengalir, kemudian ditiriskan pada sinar
matahari, untuk meniadakan air pada daun. Selanjutnya, daun dikeringkan
kembali menggunakan oven pada suhu 50OC selama 24 jam dan diserbuk
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
31
menggunakan mesin penyerbuk di LPPT Universitas Gadjah Mada. Kemudian
serbuk diayak menggunakan ayakan dengan nomor 40 mesh.
4. Pembuatan ekstrak etanol daun Artocarpus altilis (Park.) Fosberg
Pembuatan ekstrak etanol daun sukun dilakukan dengan cara menyari
simplisia daun Artocarpus altilis (Park.) Fosberg. dengan derajat kehalusan 40
mesh. Serbuk seberat 100 g direndam dengan 75 ml pelarut etanol 96% di dalam
erlenmeyer selama 5 hari terlindung dari cahaya dan dilakukan pengadukan
setiap hari. Kemudian serbuk diremaserasi lagi dengan 25 ml pelarut etanol 96%
selama 2 hari, di tempat sejuk, terlindung dari cahaya dan dilakukan pengadukan
setiap hari. Setelah dimaserasi dan diremaserasi, hasil maserasi dan remaserasi
disaring dengan kertas saring. Hasil saringan kemudian dievaporasi dengan
evaporator pada suhu 50ºC, kemudian dipindahkan ke cawan porselin yang telah
ditimbang sebelumnya, dengan maksud untuk mempermudah perhitungan
rendemen ekstrak kental yang akan diperoleh. Selanjutnya, ekstrak kental didalam
cawan porselin diuapkan di waterbath dengan suhu 50oC kemudian dimasukkan
dalam oven untuk diuapkan dengan suhu 50oC agar mendapatkan ekstrak etanol
daun sukun dengan bobot ekstrak yang tetap.
5. Penetapan kadar air serbuk daun Artocarpus altilis (Park.) Fosberg.
Penetapan kadar dilakukan dengan cara susut pengeringan. Sebanyak 5,0 g
serbuk daun Artocarpus altilis ditimbang dan kemudian serbuk dimasukkan ke
dalam alat moisture balance pada suhu 105º C selama 15 menit dan kemudian
dilakukan perhitungan kadar air berdasarkan selisih bobot sebelum dimasukkan ke
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
32
dalam alat moisture balance. Selisih tersebut merupakan kadar air serbuk yang
diteliti.
6. Dosis ekstrak etanol Artocarpus altilis (Park.) Fosberg. pada penelitian
Dosis ekstrak etanol Artocarpus altilis (Park.) Fosberg. yang digunakan
adalah 50 mg/kgBB. Dosis ini mampu memberikan efek hipoglikemik pada tikus
dengan pemberian ekstrak air panas daun Artocarpus heterophyllus yang
mempunyai famili yang sama Artocarpus altilis (Park.) Fosberg. (famili
Moraceae) (Chandrika et al, 2006).
7. Pembuatan suspensi CMC Na 0,5%
Serbuk CMC ditimbang sebanyak 0,5 g, kemudian dilarutkan dengan
akuades yang telah dipanaskan sebelumnya. Diaduk sambil dipanaskan di atas hot
plate hingga semua serbuk larut, kemudian ad 100 ml dengan akuades.
8. Pembuatan dapar Na Sitrat 50 mM pH 4,5
Na sitrat ditimbang sejumlah 14,705 g, kemudian ditambahkan akuades
hingga 1 liter. Ditimbang juga asam sitrat 10,507 g ditambahkan akuades ad 1
liter. Dilakukan proses titrasi Na sitrat dengan menggunakan asam sitrat hingga
diperoleh pH 4,5 yang diukur dengan menggunakan pH-meter.
a. Asam sitrat
50 mM = 0,05 molar
Molar = 0,05 molar / 1 liter (Mr asam sitrat = 210,14)
Asam sitrat = 10,507 g dalam 1 liter
b. Na sitrat
50 mM = 0,05 molar
Molar = 0,05 molar / 1 liter (Mr Na sitrat = 294,1)
Na sitrat = 14,705 g dalam 1 liter
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
33
9. Penetapan dosis streptozotosin
Dosis STZ yang digunakan adalah dosis yang mampu meningkatkan
kadar glukosa darah tikus Sparague Dawley jantan berdasarkan penelitian
sebelumnya oleh Astuti, dkk. (2001), yaitu sebesar 40 mg/kgBB.
10. Induksi hiperglikemia pada tikus
Tikus dikatakan hiperglikemia jika kadar glukosa darah ≥ 200 mg/dL.
Pada hari ke-0, kadar glukosa darah diukur dengan metode GOD-PAP,
kemudian tikus kelompok positif pankreotoksik pada hari ke-1 diinduksi
dengan STZ dosis 40 mg/kgBB (single dose) yang sebelumnya telah
dilarutkan dengan buffer Na sitrat pH 4,5 dan diinjeksi secara intraperitonial.
Kelompok perlakuan diinduksi STZ dosis 40 mg/kgBB pada hari ke-1 dan
dilanjutkan dengan memberikan ekstrak etanol Artocarpus altilis (Park)
Fosberg dosis 50 mg/kgBB hingga hari ke-7. Hari ke-0, 4 dan 7 kadar
glukosa darah diukur dengan menggunakan metode GOD-PAP.
11. Pengukuran kadar glukosa darah
a. Pembuatan serum. Darah tikus diambil melalui sinus orbitalis mata pada
mata dan ditampung dalam tabung efendrof, kemudian disentrifugasi
dengan kecepatan 5000 rpm selama 15 menit dan diambil serumnya.
b. Pengukuran kadar glukosa. Alat yang digunakan dalam mennganalisis
kadar glukosa darah adalah mikrovitalab. Kadar glukosa dinyatakan dalam
mg/dl. Pengukuran kadar glukosa serum dilakukan di Laboratorium
Anatomi Fisiologi Manusia - Biokimia Fakultas Farmasi Universitas
Sanata Dharma Yogyakarta. Analisis dilakukan dengan mencampurkan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
34
bahan seperti pada tabel III., kemudian divortex dan dibaca serapannya
setelah didiamkan selama 20 menit (operating time) pada suhu 20-25ºC.
Tabel III. Volume bahan untuk pengukuran kadar glukosa
Bahan
Volume (µL)
Aquabidest Larutan baku
glukosa Supernatan
Pereksi
GOD-PAP
Blanko 10 - - 1000
Standart - 10 - 1000
Sampel - - 10 1000
12. Desain dan perlakuan penelitian
Penelitian akan dilakukan dengan menggunakan 16 ekor tikus jantan
Wistar yang dibagi ke dalam 4 kelompok perlakuan.
a. Kelompok I (Basal)
Hari ke-0, dan 4 tikus diukur kadar glukosa darah dan berat badannya.
Tikus tidak diberi perlakukan apapun hingga hari ke-7, kemudian hari ke-
7, tikus diukur kembali kadar glukosa darah dan berat badan.
b. Kelompok II (Kontrol Pankreotoksik)
Hari ke-0 tikus diukur kadar glukosa darah dan berat badan, kemudian hari
ke-1 diinduksi STZ 40 mg/kgBB i.p. Tikus tidak diberi terapi, kemudian
hari ke-4, dan 7 diukur kembali kadar glukosa darah dan berat badan.
c. Kelompok III (Negatif)
Hari ke-0 tikus diukur kadar glukosa darah dan berat badan, kemudian hari
ke-1 diberi CMC Na dengan dosis 50 mg/kgBB. Tikus tidak diinduksi
streptozotosin, kemudian hari ke-4 dan 7 diukur kembali kadar glukosa
darah dan berat badan.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
35
d. Kelompok IV (Perlakuan)
Hari ke-0, tikus diukur kadar glukosa darah dan berat badan yang tiga hari
sebelumnya diberikan ekstrak daun Artocarpus altilis (Park.) Fosberg. 50
mg/kgBB p.o., kemudian hari ke-1 diinduksi streptozotosin 40 mg/kgBB
i.p. dan hari ke-1 hingga hari ke-7 diberikan ekstrak etanol daun
Artocarpus altilis (Park.) Fosberg. 50 mg/kgBB p.o. Kemudian hari ke-4
dan 7. Hari Tikus diukur kembali kadar glukosa darah dan berat
badannya.
13. Pengumpulan sampel
Tikus yang akan digunakan untuk penelitian, diukur berat badannya
sebelum diukur kadar glukosa darahnya. Pengambilan darah dilakukan melalui
sinus orbitalis mata pada mata, diambil darahnya dan diukur menggunakan
mikrovitalab dengan metode enzimatik GOD-PAP (hari ke-0 , 4 dan 7). Pada hari
ke-14, tikus di bedah dan diambil pankreasnya untuk di amati gambaran histologi
pankreas tikus.
14. Pembuatan slide histologi pankreas
a. Trimming
Trimming dilakukan setelah proses fikasasi dengan melakukan pemotongan
jaringan setebal kurang lebih 4 mm dengan orientasi sesuai dengan organ
yang akan dipotong.setelah dilakukan pemotongan jaringan diletakkan
dalam embedding cassette.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
36
b. Dehidration
Dehidrasi jaringan dilakukan menggunakan “tissue processor” untuk
mengeluarkan air yang terkandung dalam jaringan, dengan menggunakan
cairan dehidran alkohol 80%, 95%, dan alkohol absolut. Cairan dehidran ini
kemudian dibersihkan dari dalam jaringan dengan menggunakan reagen
pembersih (clearing agent) dengan menggunkan xylol. Reagen pembersih
kemudian diganti dengan parafin dengan cara penetrasi ke dalam jaringan,
proses ini disebut impregnasi.
c. Embedding
Setelah proses dehidrasi, jaringan yang ada di dalam embedding cassette
dipindah ke dalam base mold. Kemudian diisi dengan parafin cair dan
diletakkan pada blok kayu ukuran 3x3 cm atau pada embedding cassette.
Jaringan yang sudah dilekatkan pada balok kayi atau cassette disebut blok.
Fungsi dari balok kayu atau cassette adalah untuk pemegang pada saat blok
dipotong pada mikrotom.
d. Cutting
Cutting adalah pemotongan jaringan yang sudah didehidrasi dengan
menggunakan mikrotom.
Metode :
1. Orientasi blok pada mikrotom
Blok diletakkan sejajar memanjang dengan pisau. Jaringan yang keras
harus diletakkan di bagian atas. Kemudian sediakan cukup ruangan
antara jaringan dengan tepi blok untuk memudahkan pemisahan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
37
jaringan. Hasil pemotongan yang rata dan tidak berkerut menandakan
ketajaman pisau yag digunakan.
2. Soaking
Jaringan dilembabkan dengan menempelkan kapas basah pada
permukaan blok.untuk menjaga agara suhu blok dan suhu pisau tetap
sama, masing-masing didinginkan dengan air es.
3. Mengambangkan lembaran potongan jaringan
Lembaran jaringan diapungkan dengan meletakkan salah satu ujung
potongan di atas permukaan air dalam waterbath. Kemudian untuk
menghilangkan kerutan jaringan dapat dilakukan dengan cara menekan
salah satu sisi dari potongan jaringan dengan ujung jari dan sisi lain
ditarik dengan menggunakan kuas kecil.
4. Pemisahan rangkaian lembaran jaringan
Dilakukan dengan menggunakan “pemisah jaringan” yang dipanaskan
kemudian dilakukan pemisahan rangkaian lembaran jaringan (ribbon)
5. Pengambilan ribbon dengan slide
Lembaran jaringan diambil dengan cara memasukkan slide bersih
secara diagonal ke dalam waterbath. Spesimen jaringan diletakkan tepat
di tengah slide. Dicegah agar jangan sampai ada gelembung udara di
bawah jaringan.
e. Staining/pewarnaan
Proses pewarnaan jaringan pankreas ini menggunakan teknik pewarnaan
H&E.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
38
f. Mounting
Setelah jaringan pada slide diwarnai, dilakukan “mounting” dengan cara
meneteskan bahan mounting (DPX, Entelan, Canada balsam) sesuai
kebutuhan dan ditutup dengan coverglass, cegah jangan sampai terbentuk
gelembung udara. Kemudian slide yang sudah jadi, diamati di bawah
mikrokop sinar.
F. Analisis Hasil
Pengukuran kadar glukosa darah dan berat badan melalui perhitungan
mean ± SD, yang mana kadar glukosa darah normal pada tikus yaitu 50-135
mg/dl, apabila kadar glukosa darah melebihi batas normal maka tikus mengalami
hiperglikemia (Delaney, 2008). Setelah itu, dilanjutkan dengan analisis histologi
pankreas secara kualitatif.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
39
Gambar 5. Skema Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Artocarpus altilis (Park.)
Fosberg
Hari ke-0
Tikus 16 ekor diambil darahnya pada daerah sinus orbitalis mata tikus,
diukur KGD dengan metode GOD-PAP dan ditimbang berat badannya
Hari ke-1
Tikus 4 ekor (kelompok basal) tidak diberikan apapun
Tikus 4 ekor (kelompok kontrol negatif) diberi CMC Na 0,5% p.o
Tikus 4 ekor (kelompok kontrol pankreotoksik) diinduksi STZ 40mg/kgBB
i.p ( Single dose)
Tikus 4 ekor (kelompok perlakuan ) diberikan ekstrak etanol daun sukun
p.o dan diinduksi STZ 40 mg/kgBB i.p (single dose).
Hari ke-4
16 ekor tikus diambil darahnya pada daerah sinus orbitalis mata, kemudian
diukur KGD dengan metode GOD-PAP, dan ditimbang berta badannya
Hari ke-7
Tikus 16 ekor diambil darahnya pada sinus orbitalis mata, diukur KGDP
dan ditimbang berat badannya
Hari ke-14
Tikus 16 ekor dibedah dan diambil organ pankreasnya
Perhitungan hasil
Kelompok
basal
Kelompok
kontrol
negatif
Kelompok
kontrol
pankreotoksik
Kelompok
perlakuan
EEA
Ekstrak EEA
50 mg/kgBB
p.o
Akuades
p.o
CMC Na
0.5% p.o
Akuades
p.o
Hari ke-2 hingga ke-7
Selama 3 hari sebelum diinduksi streptozotosin pada kelompok perlakuan
diberikan ekstrak etanol daun Artocarpus altilis (Park.) Fosberg 50
mg/kgBB p.o
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
40
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas penurunan kadar
glukosa darah ekstrak etanol daun Artocarpus altilis (Park.) Fosberg dosis 50
mg/kgBB pada tikus jantan galur Wistar terinduksi streptozotosin dosis 40
mg/kgBB dengan melihat Kadar Glukosa Darah (KGD), berat badan dan
gambaran histologis pankreas.
A. Hasil determinasi serbuk daun sukun (Artocarpus altilis (Park.) Fosberg)
Determinasi serbuk daun Artocarpus altilis (Park.) Fosberg. dilakukan
dengan tujuan untuk memastikan bahwa serbuk daun sukun yang digunakan
adalah benar serbuk daun sukun. Determinasi dilakukan di Laboratorium
Sistematika Tumbuhan, Fakultas Biologi, Universitas Gadjah Mada. Hasil
determinasi membuktikan bahwa benar serbuk daun sukun yang digunakan dalam
penelitian adalah serbuk daun Artocarpus altilis (Park.) Fosberg. Hasil
determinasi tertera dalam lampiran 2.
B. Penetapan kadar air serbuk daun sukun (Artocarpus altilis (Park.) Fosberg)
Penetapan kadar air daun Artocarpus altilis (Park.) Fosberg. bertujuan
untuk memastikan kadar air yang terkandung dalam daun Artocarpus altilis
(Park.) Fosberg. yang digunakan dalam penelitian memenuhi salah satu
persyaratan serbuk yang baik. Serbuk yang baik mengandung kadar air kurang
dari 10% (Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan, 1995).
Penetapan kadar air dilakukan di Laboratorium Kimia Analisis
Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. Metode yang
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
digunakan dalam penetapan kadar air yaitu Gravimetri dengan menggunakan alat
moisture balance dengan suhu 105º C selama 15 menit. Pada penetapan kadar air
digunakan suhu 105º C dimaksudkan agar kandungan air di serbuk Artocarpus
altilis (Park.) Fosberg. menguap dan waktu yang digunakan 15 menit karena
dianggap kadar air yang terkandung dalam daun Artocarpus altilis (Park.)
Fosberg. telah memenuhi persyaratan parameter standarisasi simplisia. Hasil
perhitungan menunjukkan bahwa daun Artocarpus altilis (Park.) Fosberg.
memiliki kadar air 7,15 % sehingga dapat dinyatakan bahwa serbuk daun
Artocarpus altilis (Park.) Fosberg. memenuhi persyaratan kadar air yang
ditetapkan.
C. Penetapan Bobot Tetap Ekstrak Etanol Daun Artocarpus altilis (Park.)
Fosberg)
Serbuk simplisia diekstraksi dengan metode maserasi menggunkan
etanol 96%. Metode maserasi digunakan karena proses pengerjaan dan peralatan
yang digunakan sederhana dan senyawa marker yang terkandung di dalam daun
sukun bersifat tidak tahan panas. Cairan penyari yang digunakan etanol 96%
karena memiliki indeks polaritas yang luas dan relatif aman.
Maserasi dilakukan selama 5 hari dengan perbandingan simplisia :
pelarut 1 : 10. Setelah 5 hari, kemudian disaring menggunakan penyaring
Buchner. Selanjutnya dilakukan remaserasi selama 2 hari. Kemudian maserat
dipekatkan menggunakan rotary evaporator dengan suhu 50º C. Pemekatan
bertujuan untuk memisahkan pelarut dengan ekstrak dengan menguapkan pelarut
sehingga ekstrak yang didapatkan menjadi lebih kental.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
42
Ekstrak kental yang didapatkan dilakukan bobot tetap. Tujuannya
untuk menghitung sisa zat dengan bobot tetap setelah dilakukan pengeringan
pada temperature 50º C. Bobot tetap dilakukan dengan cara menimbang ekstrak
dalam cawan porselen setiap satu jam hingga diperoleh bobot konstan. Hasil
menunjukkan bahwa sebanyak 10,0 g serbuk kering daun Artocarpus altilis
(Park.) Fosberg. menghasilkan kurang lebih 2 g ekstrak etanol daun Artocarpus
altilis (Park.) Fosberg. Keseluruhan pembuatan ekstrak etanol menggunakan
100,0 gram serbuk kering daun Artocarpus altilis (Park.) Fosberg. yang
menghasilkan 20,78 g ekstrak etanol daun Artocarpus altilis (Park.) Fosberg.
Dengan rata-rata setiap cawan 2,30 g ekstrak kental dengan % rendemen sebesar
20,78%.
D. Penentuan Dosis Pankreotoksik Streptozotosin
Penentuan dosis streptozotosin bertujuan untuk mengetahui dosis
streptozotosin yang dapat menyebabkan kerusakan pankreas pada tikus yang
ditunjukkan dengan peningkatan kadar glukosa darah lebih dari 200 mg/dL pada
2-3 hari setelah pemberian streptozotosin. Hal ini didasarkan pada penelitian
Akbarzadeh, et al (2007) tikus setelah diinduksi streptozotosin 2-3 hari setelah
induksi mulai menimbulkan gejala diabetes dengan peningkatan kadar glukosa
darah lebih dari 200 mg/kgBB.
Penelitian ini menggunakan streptozotosin sebagai pankreotoksik
(induksi diabetes mellitus) karena streptozotosin merupakan senyawa yang
menyebabkan kerusakan sel pankreas, sehingga terjadi defisiensi insulin yang
menyebabkan hiperglikemia pada hewan uji. Dosis yang digunkan pada penelitian
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
43
didasarkan pada penelitian yang dilakukan oleh Astuti, dkk. (2001) yang
menyatakan dosis 40 mg/kgBB dapat meningkatkan kadar glukosa darah pada
tikus secara bertahap.
E. Efek Pankreoprotektif Ekstrak Etanol Artocarpus altilis (Park.) Fosberg
Dosis 50 mg/kgBB pada Tikus Terinduksi Streptozotosin
1. Kadar glukosa darah
a. Kontrol basal
Tujuan dari pengujian kontrol basal adalah untuk mengetahui kadar
gluksosa normal tikus jantan dari hari ke-0 hingga hari ke-7 dan untuk
membandingkan kadar glukosa darah tikus antara kontrol basal, kontrol
pankreotoksik dan perlakuan ekstrak etanol Artocarpus altilis (Park.)
Fosberg.
Berdasarkan tabel IV kadar glukosa darah tikus jantan Wistar pada
kontrol basal berada pada rentang normal yaitu 50-135 mg/dl.
Berdasarkan hasil tersebut dapat dikatakan tikus jantan Wistar yang
digunakan dalam percobaan dalam kondisi normal.
b. Kontrol negatif (CMC Na 0,5%)
Kontrol negatif bertujuan untuk memastikan bahwa penurunan
KGD pada tikus adalah akibat pemberian ekstrak etanol daun Artocarpus
altilis (Park.) Fosberg dan bukan akibat pemberian pelarut ekstrak yaitu
CMC Na. Konsentrasi CMC Na yang digunakan, yaitu 0,5 %. Hal ini
dimaksudkan untuk mengetahui apakah dengan konsentrasi 0,5%, pelarut
(CMC Na) yang digunakan memberikan pengaruh terhadap penurunan
kadar glukosa darah atau tidak. Hasil yang didapatkan menunjukkan nilai
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
44
kadar glukosa darah tikus dapat dilihat pada tabel IV. Menunjukkan kadar
glukosa darah berada dalam rentang normal (50-135 mg/dl). Berdasarkan
hal tersebut dapat dikatakan bahwa pelarut CMC Na yang digunakan
tidak memberikan efek penurunan kadar glukosa darah pada hewan uji
tikus jantan Wistar.
c. Kontrol pankreotoksik (STZ 40 mg/kgBB)
Kontrol pankreotoksik bertujuan untuk mengetahui pengaruh
induksi streptozotosin 40 mg/kgBB terhadap sel pankreas tikus. Pengaruh
tersebut ditunjukkan dengan peningkatan kadar glukosa darah. Uji ini
dilakukan dengan cara menginjeksi tikus dengan streptozotosin 40
mg/kgBB secara intraperitonial. Setelah itu, dilakukan pencuplikan darah
pada hari ke-0, 4, dan 7 setelah pemejanan dan serum diukur nilai kadar
glukosa darah.
Dari data yang diperoleh menunjukkan bahwa streptozotosin dosis
40 mg/kgBB dapat meningkatkan kadar glukosa darah hingga lebih dari
200 mg/dL.
Pada penelitian yang dilakukan oleh Astuti, dkk. (2001) dosis
streptozotosin dengan dosis 40 mg/kgBB dapat meningkatkan kadar
glukosa darah tikus SD jantan secara bertahap sampai hari ke-28,
sedangkan pada penelitian ini dengan dosis yang sama (40 mg/kgBB)
kadar glukosa darah tikus naik pada hari ke-4, tetapi pada hari ke-7
mengalami penurunan dengan rata-rata kadar glukosa darah 165 mg/dL.
Hal ini dapat dikarenakan kemurnian dan stabilitas dari STZ yang
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
45
digunakan karena penyimpanan STZ yang baik yaitu disimpan pada suhu
-20º C, namun peneliti menyimpan STZ pada freezer kulkas yang
suhunya tidak mencapai -20º C sehingga kemurnian dan stabilitas dari
STZ menurun yang mengakibatkan efek kenaikan kadar glukosa darah
pada tikus tidak maksimal.
d. Kelompok perlakuan ekstrak etanol Artocarpus altilis (Park.) Fosberg
dosis 50 mg/kgBB pada tikus jantan galur Wistar terinduksi
streptozotosin dosis 40 mg/kgBB
Evaluasi terhadap pengaruh pemberian ekstrak etanol daun
Artocarpus altilis (Park.) Fosberg pada tikus jantan galur Wistar
terinduksi streptozotosin 40 mg/kgBB didasarkan pada ada tidaknya
penurunan kadar glukosa darah akibat pemberian ekstrak etanol daun
Artocarpus altilis (Park.) Fosberg pada tikus sebelum induksi
streptozotosin. Pemberian ekstrak etanol daun Artocarpus altilis (Park.)
Fosberg dosis 50 mg/kgBB dilakukan selama 10 hari dan pada hari ke-1
tikus diinduksi streptozotosin 40 mg/kgBB.
Tabel IV. Peningkatan rata-rata KGD (mg/dl) tikus jantan galur Wistar
pada hari ke-0, 4, dan 7.
Kelompok Rata-rata Kadar Glukosa Darah (mg/dl)
Hari ke-0 Hari ke-4 Hari ke-7
Kontrol basal 90,75 ± 19,52 106,00 ± 12,94 79,25 ± 8,66
Kontrol negative 101,25 ± 11,41 115,75 ± 1,71 79,50 ± 3,70
Kontrol
Pankreotoksik
(STZ)
110,00 ± 16,35 246,75 ± 21,88 165 ± 6,00
Perlakuan EEAA
+ STZ 107,75 ± 9,07 212 ± 134,95 213,5 ± 31,30
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
46
Gambar 6. Kurva waktu vs rata-rata KGD tikus jantan Wistar (mg/dl)
pada pemberian ekstrak etanol Artocarpus altilis (Park.)
Fosberg dosis 50 mg/dl.
Berdasarkan hasil pada tabel IV menunjukkan nilai rata-rata kadar
glukosa darah pada kelompok perlakuan ekstrak etanol Artocarpus altilis
(Park.) Fosberg mengalami peningkatan pada hari ke-4. Pada kelompok
perlakuan ekstrak etanol Artocarpus altilis (Park.) Fosberg mengalami
kenaikan kadar glukosa darah diatas normal (hiperglikemia) karena pada
hari ke-4 kelompok perlakuan ekstrak etanol daun Artocarpus altilis
(Park.) Fosberg mengalami peningkatan hingga 212 ± 134,95 mg/dl.
Berdasarkan hasil tersebut dapat dikatakan bahwa ekstrak etanol daun
Artocarpus altilis (Park.) Fosberg 50 mg/kgBB yang diberikan tiga hari
sebelum penginduksian streptozotosin tidak memiliki pengaruh dalam
penurunan kadar glukosa darah terhadap tikus jantan Wistar yang
terinduksi streptozotosin dosis 40 mg/kgBB. Hal ini dapat dimungkinkan
adanya interaksi antara ekstrak etanol daun Artocarpus altilis (Park.)
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
47
Fosberg dengan streptozotosin sehingga kadar glukosa darah tidak
mengalami penurunan.
Dalam penelitian ini, pada kelompok perlakuan ekstrak etanol daun
Artocarpus altilis (Park.)Fosberg dosis 50 mg/kgBB, ekstrak etanol daun
Artocarpus altilis (Park.) Fosberg diberikan tiga hari sebelum diinduksi
streptozotosin dan pemberian ekstrak dilanjutkan hingga akhir penelitian.
Selain itu, dalam desain mengalami kesalahan waktu penginduksian
streptozotosin antara kelompok kontrol pankreotoksi dan kelompok
perlakuan, yang mana pada kelompok pankreotoksi diinduksi
streptozotosin pada hari ke-1, sedangkan kelompok ekstrak pada hari ke-4
sehingga menyebabkan puncak kadar glukosa darah tikus setelah induksi
streptozotosin pada kelompok kontrol pankreotoksik dan kelompok
perlakuan tidak sama dan tidak dapat dibandingkan pengaruhnya.
2. Perubahan berat badan tikus
Perubahan berat badan tikus dalam penelitian ini digunakan sebagai
parameter hiperglikemia pada tikus.Pada tikus dengan kondisi hiperglikemia
biasanya ditandai dengan penurunan berat badan. Hal ini dikarenakan
glukosa akan terakumulasi di dalam darah dan glukosa tersebut akan
terbuang bersamaan dengan urin sehingga sel tidak mendapatkan asupan
glukosa dan terjadi pengurangan jumlah jaringan otot dan adiposa secara
signifikan yang dapat mengakibatkan berat badan penderita diabetes melitus
akan turun meskipun banyak asupan makanan yang masuk ke dalam tubuh
(Murray, Daryl, Victor, 2005).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
48
Dari data berat badan tikus berdasarkan tabel V, rata-rata berat badan
tikus jantan Wistar setelah diberi perlakuan (hari ke-4) mengalami
peningkatan berat badan jika dibandingkan dengan sebelum diberi perlakuan
(hari ke-0).
Tabel V. Berat badan tikus jantan Wistar (mg/dl) pada kelompok perlakuan
hari ke- 0, 4 dan 7, kontrol basal, kontrol CMC, dan kontrol
pankreotoksik 50 mg/kgBB (n=4).
Kelompok Berat badan (gram)
Hari ke-0 Hari ke-4 Hari ke-7
Kontrol basal 140,43 ±
4,73
148.53 ±
11,4
149,45 ±
11,4
Kontrol negative 138,99 ±
7,12
136,85 ±
6,57
135.06 ±
5,36
Kontrol Pankreotoksik
(STZ)
136,14 ±
4,08
159,45 ±
7,86 162,64 ± 13
Perlakuan EEAA + STZ 148,85 ±
9,43
157,02 ±
9,66
176,25 ±
18,3
Gambar 7. Kurva waktu vs rata-rata berat badan tikus pada kelompok
kontrol basal, kontrol negatif, kontrol pankreotoksik, dan
perlakuan EEAA.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
49
Menurut Kim et al. (2006) salah satu karakteristik tikus menderita
diabetes melitus yaitu tikus mengalami penurunan berat badan. Namun pada
penelitian ini berat badan tikus semakin meningkat dikarenakan waktu
perlakuan dengan kondisi akut (jangka pendek) sehingga berat badan tikus
belum mengalami penurunan. Selain itu, dapat disebabkan karena dosis
streptozotosin yang digunakan dosis kecil (40 mg/kgBB) yang menyebabkan
kerusakan yang reversible pada sel pankreas sehingga sel pankreas
masih mampu memproduksi insulin.
F. Pemeriksaan Histologis Pankreas
Pada penelitian ini histopatologi pankreas tikus dilihat melalui preparat
yang dibuat dengan metode blok paraffin dengan pewarnaan Hemotoxylen-Eosin.
Parameter yang diamati dari pewarnaan Hemotoxylen-Eosin pada preparat
pankreas adalah morfologi umum jaringan pankreas dan jumlah pulau Langerhans.
Tujuan dari pemeriksaan histologis pankreas adalah untuk melihat perubahan
struktural pada organ pankreas baik kelompok kontrol ataupun perlakuan.
Pembuatan preparat organ pankreas tikus dilakukan oleh pihak Fakultas
Kedokteran Hewan Universitas Gadjah Mada.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
50
Tabel VI. Persentase kerusakan sel Islet Langerhans pankreas tikus pada
keempat kelompok dengan pengecatan Hematoksilin Eosin
Kelompok Hasil
Presentase Kerusakan
(%)
Basal
Tidak ada perubahan patologi
0 Vakuolisasi sebagian sel Islet
Langerhans (tidak ada nekrosis)
Tidak ada berubahan patologi
Kontrol
negatif CMC
Na
Tidak ada perubahan patologi
0 Tidak ada perubahan patologi
Tidak ada perubahan patologi
Kontrol
Pankreotoksik
STZ
Nekrosis sel Islet Langerhans (+)
66,67 Tidak ada perubahan patologi
Nekrosis sel Islet Langerhans (+)
Perlakuan
EEAA + STZ
Vakuolisasi sebagian sel asiner (+)
66,67 Nekrosis sel Islet Langerhans (++)
Nekrosis sel Islet Langerhans (++)
1. Gambaran histologis kelompok kontrol basal
Pada kontrol basal 4 ekor tikus dibedah dan diambil organ
pankreasnya pada hari ke-14 setelah pengukuran kadar glukosa darah dan
berat badan, kemudian dilakukan pemeriksaan histologis pankreas. Pemilihan
tikus untuk gambaran histologis pankreasnya dilakukan secara acak.
Gambar 8. Foto mikroskopik organ pankreas tikus kelompok kontrol basal
perbesaran 400x ( ) menunjukkan sel Iset Langerhan dalam
kondisi normal.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
51
Dari hasil pemeriksaan diketahui bahwa pada kelompok kontrol
basal tidak terjadi kerusakan organ pankreas secara struktural. Dapat dilihat
susunan sel yang terlihat teratur, seragam dan tidak ada perubahan patologi.
Hal ini menunjukkan bahwa organ pankreas tikus pada kelompok kontrol
basal dalam keadaan normal (Gambar 8). Pada tabel VI dapat dilihat hasil
persentase kerusakan sel Islet Langerhans adalah 0 %. Jika dikaitkan secara
biokimiawi hasil kadar gula darah yang didapatkan pada kelompok ini masuk
dalam range normal. Hal ini dikarenakan tikus pada kontrol basal hanya
diberi makan dan minum tanpa dilakukan pemejanan.
2. Gambaran histologis kelompok kontrol negatif CMC Na 0,5%
Setelah pemejanan CMC Na 0,5%, 4 ekor tikus yang digunakan
sebagai kontrol negatif CMC Na 0,5% secara per oral, pada hari ke-14
setelah pemejanan dan pengukuran kadar glukosa darah, 4 ekor tikus dibedah
dan diambil pankreasnya untuk kemudian dilakukan pemeriksaan histologis.
Pemilihan tikus yang dilihat gambaran histologis pankreasnya dilakukan
secara acak.
Gambar 9. Foto mikroskopik organ pankreas tikus kelompok kontrol negatif
CMC Na 0,5% perbesaran 400x ( ) menunjukkan sel Iset
Langerhan dalam kondisi normal.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
52
Dari hasil pemeriksaan diketahui bahwa pada kelompok kontrol
basal tidak terjadi kerusakan organ pankreas secara struktural. Dapat dilihat
susunan sel yang terlihat teratur, seragam dan tidak ada perubahan patologi.
Hal ini menunjukkan bahwa organ pankreas tikus pada kelompok kontrol
basal dalam keadaan normal (Gambar 9). Pada tabel VI dapat dilihat hasil
persentase kerusakan sel Islet Langerhans adalah 0 %. Jika dikaitkan secara
biokimiawi hasil kadar gula darah yang didapatkan pada kelompok ini masuk
dalam range normal. Hal ini dikarenakan tikus pada kontrol negatif hanya
diberi CMC Na 0,5% yang berarti CMC NA 0,5% tidak mempengaruhi kadar
glukosa darah.
3. Gambaran histologis kelompok kontrol pankretoksik streptozotosin 40
mg/kgBB
Setelah pemejanan streptozotosin 40 mg/kgBB pada keempat ekor
hewan uji tikus yang digunakan sebagai kelompok pankreotoksik, maka pada
hari ke-14 setelah pemejanan dan pengukuran kadar glukosa darah dan berat
badan, 4 ekor tikus dibedah dan diambil pankreasnya untuk kemudian
dilakukan pemeriksaan histologis pankreas. Pemilihan tikus untuk gambaran
histologis pankreasnya dilakukan secara acak.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
53
Gambar 10. Foto mikroskopik organ pankreas tikus kelompok kontrol
pankreotoksik streptozotosin 40 mg/kgBB perbesaran 400x
( ) menunjukkan sel Iset Langerhan yang mengalami
nekrosis.
Sterptozotosin dengan dosis 40 mg/kgBB dapat menyebabkan
diabetes melitus tipe 1. Streptozotosin sebagai penginduksi diabetes melitus
dapat menyebabkan nekrosis pada sel β pankreas (Szkudelski, 2001).
Dari hasil pemeriksaan diketahui bahwa pada kelompok kontrol
pankreotoksik terjadi perubahan secara struktural pada organ pankreas tikus.
Perubahan patologi sel Islet Langerhans yaitu adanya nekrosis sel Islet
Langerhans pankreas. Kondisi sel Islet Langerhans yang mengalami nekrosis
ditandai dengan adanya ruang-ruang kosong pada jaringan (Gambar 10) dan
presentase kerusakan sel Islet Langerhans sebesar 66,67% (Tabel VI).
Nekrosis yaitu kematian sel akibat kerusakan yang fatal ditandai dengan
kerusakan struktur dan fungsi sel secara menyeluruh yang diikuti lisisnya sel
dan peradangan jaringan pada pankreas yang mengakibatkan penurunan
sekresi insulin, sehingga terjadi peningkatan kadar glukosa darah. Hal ini
berarti bahwa induksi streptozotosin 40 mg/kgBB mampu merusak sel
pankreas.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
54
4. Gambaran histologis kelompok perlakuann ekstrak etanol Artocarpus
altilis (Park.) Fosberg dosis 50 mg/kgBB
Setelah pemberian ekstrak etanol daun Artocarpus altilis (Park.)
Fosberg dosis 50 mg/kgBB selama 13 hari dan diinduksi streptozotosin dosis
40 mg/kgBB pada hari keempat setelah pemajanan ekstrak pada keempat
ekor hewan uji tikus yang digunakan sebagai kelompok perlakuan ekstrak,
maka pada hari ke-14 setelah pemejanan dan pengukuran kadar glukosa
darah dan berat badan, 4 ekor tikus dibedah dan diambil organ pankreasnya
untuk kemudian dilakukan pemeriksaan histologis pankreas. pemilihan tikus
untuk pengecekan gambaran histologis pankreasnya dilakukan secara acak.
Gambar 11. Foto mikroskopik organ pankreas tikus kelompok kontrol
pankreotoksik streptozotosin 40 mg/kgBB perbesaran 400x
( ) menunjukkan sel Iset Langerhan yang mengalami
nekrosis.
Dari hasil pemeriksaan, organ pankreas mengalami perubahan secara
struktural. Perubahan patologi yang terjadi yaitu terjadi nekrosis pada sel
Islet Langerhans pankreas. Berdasarkan hasil pengamatan jumlah nekrosis
Islet Langerhans pada kelompok perlakuan berjumlah +2 berarti dalam satu
tarikan terdapat dua sel Islet Langerhans yang mengalami nekrosis,
sedangkan kelompok pankreotoksik berjumlah +1 yang berarti kerusakan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
55
pada kelompok perlakuan EEAA lebih parah diabandingkan kelompok
pankreotosik. Hal ini, di dukung dengan hasil pengukuran kadar glukosa
darah tikus. Pada hari ke-14 kadar glukosa darah tikus kelompok perlakuan
lebih tinggi dibandingkan dengan kelompok pankreotoksi. Kondisi sel Islet
Langerhans yang mengalami nekrosis ditandai dengan adanya ruang-ruang
kosong pada jaringan (Gambar 11) dan presentase kerusakan sel Islet
Langerhans sebesar 66,7%. Hal ini berarti ekstrak etanol daun Artocarpus
altilis (Park.) Fosberg dosis 50 mg/kgBB tidak berpengaruh dalam
menurunkan kadar glukosa darah pada tikus yang terinduksi streptozotosin.
G. Rangkuman Pembahasan
Pada penelitian pengaruh pemberian ektrak etanol daun Artocarpus altilis
(Park.) Fosberg dosis 50 mg/kgBB pada tikus putih jantan Wistar terinduksi
streptozotosin 40 mg/kgBB dibuktikan bahwa tidak terjadi penurunan kadar
glukosa darah kelompok tikus jantan Wistar. Hal ini, berarti ekstrak etanol
Artocarpus altilis (Park.) Fosberg 50 mg/kgBB tidak memiliki pengaruh dalam
penurunan kadar glukosa darah tikus yang terinduksi streptozosin sehingga perlu
dilakukan peningkatan dosis dan kontrol ekstrak Artocarpus altilis (Park.)
Fosberg untuk melihat pengaruh pemberian ekstrak etanol Artocarpus altilis
(Park.) Fosberg terhadap fungsi organ pankreas tikus. Pada penelitian yang telah
dilakukan Nublah (2011) dosis ekstrak daun Artocarpus altilis (Park) Fosberg
yaitu 150 mg/kgBB mampu menurunkan kadar glukosa darah tikus sehingga
dalam penelitian selanjutnya dapat dilakukan variasi dosis hingga dosis 150
mg/kgBB. Pada kontrol pankreotoksik kadar glukosa darah mengalami penurunan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
56
pada hari ke-7. Hal ini dikarenakan adanya kemungkinan regenerasi sel pada sel
beta perkusor sehingga sel beta pankreas dapat kembali memproduksi insulin.
Hasil pengujian data perubahan berat badan tikus jantan Wistar
menunjukkan peningkatan terus menerus hingga hari ke-7. Umumnya, pada
penderita diabetes melitus peningkatan kadar glukosa darah dikuti dengan
penurunan berat badan. Namun pada penelitian ini berat badan semakin
meningkat dari hari ke hari. Hal ini, dikarenakan waktu penelitian yang singkat
sehingga belum memperlihatkan penurunan berat badan. Perubahan berat badan
pada tikus jantan disebabkan oleh proses pertumbuhan dan pola makan dari setiap
individual.
Selain pengukuran kadar glukosa darah dan berat badan dilakukan pula
pengecekan gambaran histologis organ pankreas tikus. Dari data histologis
pankreas ditemukan perubahan patologi pada pankreas tikus pada kelompok
kontrol pankreotoksik dan perlakuan ekstrak etanol daun Artocarpus altilis (Park.)
Fosberg dengan presentase kerusakan pada sel Islet Langerhans sama-sama
sebesar 66,7% (Tabel VI). Apabila dilihat dari jumlah presentasenya kerusakan
antara kelompok pankreotoksik dan kelompok perlakuan ekstrak etanol daun
Artocarpus altilis ( Park.) Fosberg sama, tetapi berdasarkan hasil kadar glukosa
darah tikus kelompok pankreotoksik memiliki kadar glukosa darah yang lebih
rendah dari kelompok perlakuan ekstrak etanol daun Artocarpus altilis (Park.)
Fosberg, sehingga tidak ada kolerasi antara kelompok perlakuan ekstrak etanol
daun Artocarpus altilis (Park.) Fosberg dengan kelompok pankreotoksik. Namun
apabila dilihat secara individual dari setiap tikus kerusakan Islet langerhans pada
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
57
kelompok perlakuan ekstrak etanol daun Artocarpus altilis (Park.) Fosberg
berjumlah +2, sedangkan kelompok pankreotoksik berjumlah +1 yang berarti
kerusakan pada kelompok perlakuan ekstrak etanol daun Artocarpus altilis (Park.)
Fosberg lebih parah dibandingkan kelompok pankreotosik, sehingga apabila
dilihat secara individual tiap tikus memiliki korelasi antara nekrosis pada sel Islet
langerhans dengan kadar glukosa darah. Perubahan patologi yang terjadi yaitu
nekrosis terjadi pada sel Islet Langerhans yang disebabkan oleh induksi
streptozotosin dosis 40 mg/kgBB. Perubahan patologi yang terjadi pada pankreas
bagian Islet Langerhans akan berpengaruh pada kadar glukosa darah karena Islet
Langerhans memproduksi hormon pensekresi, seperti insulin dan glukagon.
Semakin parah kerusakan pada sel Islet Langerhans maka semakin tinggi kadar
glukosa darah dalam tubuh.
Pada penelitian ini dalam mengamati organ pankreas menggunakan
pewarnaa HE yang hanya bisa melihat sel organ pankreas secara kualitatif
sehingga tidak diketahui jumlah sel beta pankreas yang mengalami nekrosis
dihasilkan setelah dilakukan perlakuan dan pemberian streptozotosin, maka
diperlukan pewarnaan jenis lain untuk melihat gambaran organ pankreas secara
kuantitatif seperti antibodi antiinsulin, gomori dan imunohistokimia.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
58
BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
A. Kesimpulan
Berdasarkan hasil data yang diperoleh dan hasil uji analisis yang dilakukan,
maka dapat disimpulkan bahwa :
1. Pemberian ekstrak etanol Artocarpus altilis (Park.) Fosberg dosis 50
mg/kgBB tidak memiliki pengaruh penurunan kadar glukosa darah pada
tikus jantan Wistar yang terinduksi streptozotosin.
2. Pemberian ekstrak etanol Artocarpus altilis (Park.) Fosberg dosis 50
mg/kgBB tidak memiliki pengaruh perbaikan berdasarkan gambaran
histologis pankreas pada tikus jantan Wistar yang terinduksi streptozotosin
karena mengalami nekrosis pada Islet Langerhans.
B. Saran
Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut tentang :
1. Pengaruh variasi dosis pemberian ekstrak etanol Artocarpus altilis (Park.)
Fosberg terhadap kadar glukosa darah tikus jantan Wistar.
2. Pengaruh kontrol ekstrak etanol Artocarpus altilis (Park.) Fosberg untuk
mengetahui pengaruhnya terhadap kadar glukosa darah tikus
3. Pengaruh pemberian pada ekstrak etanol Artocarpus altilis (Park.) Fosberg
pada pengecatan histologis pankreas yang lebih spesifik, seperti antibodi
antiinsulin, gomori, dan imunohistokimia.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
59
DAFTAR PUSTAKA
Adewole, S.O., Martins, E. A. C.,
and Ojewole, J. A. O., 2007, Protective Effect
of Quersetin On The Morphology of Pancreatic -Cells of
Streptozotocin-Treated Diabetic Rats, African Journal of Traditional
Complementary and Alternative Medicine, 4 (1), 64 – 74.
Aguirre, L., Noemi Arias, M., Teresa M., Ana, G., and Maria P. P., 2011,
Beneficial Effects of Quersetin on Obesity and Diabetes, The Open
Nutraceuticals Journal, 4, 189-198.
Akbarzadeh, A., Norouzian, D., Mehrabi, M.R., Jamshidi, Farhangi, A., Allah A.,
Verdi, et al., 2007, Induction of Diabetes by Streptozotocin in Rats,
Indian Journal of Clinical Biochemistry, 22 (2), 60-64.
American Diabetes Association, 2007, Diagnosis and Classification of Diabetes
Mellitus, Diabetes Care, 35 Suppl. 1, S64.
Anonim, 2009, Care of the Patient with Diabetes Mellitus, American Optometric
Association, USA, pp. 3.
Astuti, P.,Mulyani S., Laksmindra F., dan Sismindari S., 2001, Level Insulin of
Diabetic Rat Model by Streptozotocin-induced, Research Paper, Gadjah
Mada University, Yogyakarta.
Badan Pengawasan Obat dan Makanan RI, 2005, Stamdarisasi Ekstrak Tumbuhan
Obat Indonesia, Salah Satu Tahapan Penting dalam Pengembangan
Obat Asli Indonesia, Badan Pengawasan Obat dan Makanan RI, pp. 5.
Boorman, G.A., and Beth, W.G., 1999, Pathology of the Mouse, Cache River
Press, USA, pp.191.
Chandrika,U. G., Wedage,W.S., Wickramasinghe,S. M. D. N
and Fernando,W. S.,
2006, Hypoglycaemic Action of The Flavonoid Fraction of Artocarpus
Heterophyllus Leaf, African Journal of Traditional Complementary and
Alternative Medicine, Vol 3, No. 2, 42 – 50.
Coskun, O., Mehmet, K., Ahmet, K., Sukru, O., 2005, Quersetin, a Flavonoid
Antioxidant, Prevents and Protects Streptozotocin-induced Oxidative
Stress and -cell Damage in Rat Pancreas, Pharmacological Research,
51, 117–123.
Craig, M. E., Hattersley, A, and Donaghue, K.C., 2009, Definition, Epidemiology
and Classification of Diabetes in Children and Adolescents, Pediatric
Diabetes, 10 (Suppl. 12), 3–12.
Delaney, C.A.J, DVM, Dipl ABVP-Avian, 2008, Exotic Companion Medicine
Hanbook for Veterinarians, Zoological Education Network, Washington,
pp.19.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
60
Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan Republik Indonesia, 1986,
Sediaan Galenik, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta, pp.
25.
Direktorat Jenderal, 2005, Pharmaceutical Care untuk Penyakit Diabetes,
Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta, hal 14-15.
Ermin, T, Atmodjo, D, Winarno, dan Soemantri, A.G., 1991, Penatalaksanaan
Kegawatan Neonates, Balai Penerbit Fakultas Kedokteran Universitas
Diponegoro, Semarang, hal. 46-90.
Etuk, E. U., 2010, Animal Models for Studying Dabetes Mellitus, Agriculture and
Biology Journal of North America, Nigeria. 1 (2), 130-134.
Ganong W.F., 1995, Buku Ajar Fisiologi Kedokteran. 14th
ed, EGC, Jakarta, pp.
313-4.
Gustina, N. M. R. A., 2012, Aktivitas Ekstrak, Fraksi Pelarut, dan Senyawa
Flavonoid Daun Sukun (Artocarpus altilis) terhadap Enzim α-Glukosida
sebagai Antidiabetes, Tesis, ITB, Bogor, pp.7-10.
Guz, Y., Irem, N., and Gladys, T., 2001, Regeneration of Pancreatic Cells from
Intra-Islet Precursor Cells in an Experimental Model of Diabetes,
Endocrinology, 142(11), 4956–4968.
Hanasaki, Y, Ogawa S, and Fukui S., 1994, The Correlation Between Active
Oxygen Scavenging and Antioxidative Effects of Flavonoids, Free
Radical Biology and Medicine Journal, 16, 845-850.
Harborne, J., 1987, Phytochemical Methods, diterjemahkan oleh Kosasih
Padmawinat dan Iwang Soediro, Edisi II, Penerbit ITB, Bandung, pp.34.
Holt, R. I. G., and Hanley, N.A., 2007, Essential, Endocrinology and Diabetes
(Essentials), Willey-Blackwell, New York, pp. 28-35.
Jackson R., Knisley D., McIntosh C., Pfeiffer P., 2011, Predicting Flavonoid UGT
Regioselectivity, Hindawi Publishing Corporation, Advances in
Bioinformatics. Volume 2011.
Kaufman, Peter B., 1999, Natural Products from Plants, CRC Press LLC, USA,
pp. 22-23.
Kearns J., Merrigan J., and Schork J.S., 2003, Artificial Pancreas,
http://www.medicine.tcd.ie, diakses pada tanggal 18 Juli 2014.
Kim, J.D., Seock, M. K., Bu, I. S,, Hae, Y. C., Yun,C., Hong S. C., and Sae, K.,
2006, Anti-diabetic Activity of SMK001, a Poly Herbal Formula in
Streptozotocin Induced Diabetic Rats: Therapeutic Study, Biological and
Pharmaceutical Bulletin, pp. 479-481.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
61
Lakhanpal, P., and Deepak, K.R., 2007, Kuersetin: A Versatile Flavonoid, Internet
Journal of Medical Update, Vol. 2, No. 2.
Lamson, D., Matthew, S., and Brignall, 2000, Antioxidant and Cancer III:
Quersetin, Alternative Medicine Review, 5(3), 196-208.
Lanywati, E., 2006, Diabetes Mellitus Penyakit Kencing Manis, Kanisius,
Yogyakarta, hal. 30.
Latief, A., 2012, Obat Tradisional, Penerbit Buku Kedokteran EGC,
Jakarta,hal.1-5.
Lenzen, S., 2008, The Mechanisms of Alloxan-and Streptozotocin-Induced
Diabetes, Diabetologia, 51 (2), 216-226.
Longnecker, D., 2014, Anatomy and Histology of the Pancreas, Department of
Pathology, Geisel School of Medicine at Dartmouth, Lebanon, pp. 1-2.
Lukacinova, Mojzis, J., Benacka, R., Keller, J., Maguth, T., Kurila, P., Vasko, L.,
Racz, O., and Nistiar,F., 2008, Preventive Effects of Flavonoids on
Alloxan-induce Diabetes Mellitus in Rats, Acta Veterinaria Brno, 77,
175-182.
Marianne, Yuandani, and Rosnani, 2011, Antidiabetic Activity from Ethanol
Extract of Kluwih’s Leaf (Artocarpus comansi), Jurnal Natural, Vol.11,
No.2.
McPhee, S.J. and William, F.G., 2007, Patofisiologi Penyakit : Pengantar Menuju
Kedokteran Klinis, Ed. 5, Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta, hal.
464-490, 557-572.
Michael, H., Kaye, Gordon, I., Pawlina, and Wojciech, 2002, Histology: A Text
and Atlas, 4th
Edition, Lippincott Williams & Wilkins, Philadelphia, pp.
552-556.
Murray, R.K., Daryl, K.G., and Victor, W.R., 2005, Biokimia Harper, Edisi 27,
Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta, hal. 582-593.
Mustafa, A.M.,1998, Isi kandungan Artocarpus communis. Food Science, 9, 23.
Nublah, 2011, Identifikasi Golongan Senyawa Penurun Kadar Glukosa Darah
Tikus Putih (Rattus Norvegicus Berkenhout, 1769) Hiperglikemi pada
Daun Sukun (Artocarpus altilis (Park.) Fosberg.), Tesis, 78-82
Universitas Gadjah Mada, Yogayakarta.
Nugroho, AE., 2006, Hewan Percobaan Diabetes Mellitus : Patologi dan
Mekanisme Aksi Diabetogenik, Biodiversitas, Vol (7), 378-382.
Nurachman, E., dan Rida, A., 2010, Dasar-dasar Anatomi Fisiologi, Salemba
Medika, Jakarta, hal.137-139, 191-194.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
62
Pathak, S., Helge, C. D., Vladimir, S.B., and Daan, M.F.V.A, 2008, Chemical
Dissection of the Link Between Streptozotocin, O-GlcNAc, and
Pancreatic Cell Death, Chemistry & Biology Article, 15, 799-807.
Pham, N.A., Pham, T.N.T., Mai, D.T., and Le, T.D., 2011, Nghiên cứu thành
phần hoá học lá cây sa kê Artocarpus altilis (Park) Fosberg, Chemistry
magazine, 49, 87-91.
Pitojo, S.,1992. Budi Daya Sukun. Kanisius. Yogayakarta. Hal. 11-21.
Price, S.A., and Loraine, M.W., 1997, Patofisiology: Clinical Concepts of Disease
Processes, Michigan : Mosby, pp. 103.
Ragbetli, C., and Ebubekir, C., 2010, Effect of Streptozotocin on Biochemical
Parameters in Rats, Asian Journal of Chemistry, Turkey, 22, 2375-2378.
Ragone, 2006, Artocarpus altilis (Breadfruit), Species Profiles for Pacific Island
Agroforestry, www. Traditioanltree.org, pp. 2-3, diakses pada tanggal 22
September 2013.
Ramadhani, A. N., 2009, Uji Toksisitas Akut Ekstrak Etanol Daun Sukun
(Artocarpus Altilis) terhadap Larva Artemia Salina Leach dengan
Metode Brine Shrimp Lethality Test (BST), Karya Tulis Ilmiah, Fakultas
Kedokteran, Universitas Diponegoro, Semarang.
Raman V., Sudhahar, D., and Anandarajagopal, K., 2012, Preliminary
Phytochemical Inverstigation and Screening of Antimicrobila Activity of
Leaf Extracts of Artocarpus altilis, Asian Journal of Biological and Life
Sciences, Vol 1, Issue 2.
Ramesh, B., and K.V. Pugalendi., 2006, Antyhipergycemic Effect of
Umbelliferone in Streptozotocine-Diabetic Rats, Journal Medicine and
Food, 9(4),562-6.
Robinson, T., 1995, The Constituent of Higher Plants, diterjemahkan oleh
Kosasih Padmawinat dan Iwang Soediro, Edisi 6, Penerbit ITB,
Bandung, pp. 191-213.
Scobie, I. N., 2007, Atlas of Diabetes Mellitus, Third Edition, Informa Healthcare,
UK, pp. 1-2, 6-7, 9-11.
Sherwood, L., 2009, Fisiologi Manusia : Dari Sel ke Sistem, Ed. 6, Penerbit Buku
Kedokteran EGC, Jakarta, pp. 781-784, 788. Terjemahan dari human
physilogy :from cells to system, 6th Ed. Penerjemah dr. Brahm U. Pendit.
Sidsesha, J.M., Nataraju, A., and Bannikuppe, S.V., 2011, Phytochemical
Screening and Evaluation of In Vitro Angiotensin-converting Enzyme
Inhibitory Activity of Artocarpus altilis Leaf, Natural Product Research:
Formerly Natural Product Letters, 25:20, 1931-1940.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
63
Stanfield, C.L., 2011, Principle of Human Physiology, 4th Ed., Pearson
Education, Inc, San Fransisco, pp. 612-613.
Syah, Y.M., Achmad, S.A., Bakhriar, E., Hakim, E.H., Juliawaty, L.D., dan Latip,
J., 2006, Dua flavonoid Tergeranilasi dari Daun Sukun (Artocarpus
altilis), Jurnal Matematika dan Sains, Vol.11, No. 3.
Szkudelski, T., 2001, The Mechanism Of Alloxan And Streptozotocin Action In β
Cells Of The Rat Pancreas, Physiology Research, 50, 536-54.
Triplitt, C.L., Reasner, C.A., and Isley, W.L., 2008, Pharmacotherapy : A
Pathophysiology Approach, Mc Graw Hill, New York, pp. 1205-1238.
Watkins, P. J., 2003, ABC of Diabetes, Fifth Edition, BMJ Books, London, pp. 2.
Widowati, L., Dzulkarnain, B., dan Sa’roni, 1997, Tanaman Obat untuk
Diabetes Mellitus, Cermin Dunia Kedokteran, No. 116, Jakarta, hal.53-
60.
Wijayanti, M., 2013, Antidiabetes Ekstrak Kangkung Darat (Ipomoea reptans
Poir) Pada Tikus Jantan Wistar Yang Diinduksi Sterptozotocin, Skripsi,
Universitas Islam Indonesia, Yogyakarta.
Wild, S., Roglic, G., Green, A., Sicree, R., and King, H., 2004, Global Prevalence
of Diabetes: Estimates for the year 2000 and projections for 2030,
DiabetesCare, 27, 1047-1053.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
64
LAMPIRAN
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
65
LAMPIRAN
Lampiran 1. Surat pengesahan Medical and Health Research Ethics Committe
(MHREC)
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
66
Lampiran 2. Surat pengesahan determinasi serbuk daun Artocarpus altilis
(Park.) Fosberg
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
67
Lampiran 3. Daun Artocapus alitilis (Park.) Fosberg
Lampiran 4. Foto serbuk daun Artocarpus altilis (Park.) Fosberg
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
68
Lampiran 5. Foto ekstrak etanol daun Artocarpus altilis (Park.) Fosberg
Lampiran 6. Foto suspensi ekstrak etanol daun Artocarpus altilis (Park.)
Fosberg dalam CMC-Na 0,5%
Lampiran 7. Nekropsi Tikus
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
69
Lampiran 8. Penetapan kadar air serbuk daun Artocarpus altilis (Park.)
Fosberg
Tabel VII. Hasil penetapan kadar air serbuk daun Artocarpus altilis (Park.)
Fosberg
Bobot Replikasi I Replikasi II Replikasi III
Sebelum
pemanasan
5,012 5,018 5,002
Sesudah
pemanasan
4,641 4,672 4,644
Kadar air 7,40 % 6,89 % 7,16 %
Rata-rata kadar air 7,15 %
Kadar air =
100%
Replikasi I
Replikasi II
Replikasi III
Lampiran 9. Bobot pengeringan ekstrak etanol daun Artocarpus altilis
(Park.) Fosberg
Tabel VIII. Hasil bobot pengeringan ekstrak etanol daun Artocarpus altilis
Cawan Berat cawan
kososng (gram)
Jam ke-
0 1 2 3 4 5 6
08.00 09.00 10.00 11.00 12.00 13.00 14.00
1. 63,29 67,19 66,84 66,64 65,97 65,46 65,46 65,33
2. 64,92 70,49 69,41 69,23 67,95 67,30 67,25 67,15
3. 66,86 72,88 72,11 71,87 70,66 69,56 69,20 69,20
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
70
Lampiran 10. Hasil rendemen ekstrak etanol daun Artocarpus altilis (Park.)
Fosberg
Tabel IX. Hasil rendemen ekstrak etanol daun Artocarpus altilis (Park.)
Fosberg
Keterangan
(gram)
Cawan 1 Cawan
2
Cawan 3 Cawan 4 Cawan 5
Cawan kosong 33,09 63,29 64,92 66,86 50,74
Cawan +
ekstrak
35,56 65,33 67,15 69,20 53,18
Rendemen 2,47 2,04 2,23 2,34 2,44
= = 2,304 g
% Rendemen ekstrak kental = = 20,78 %
Jumlah serbuk yang digunakan untuk pembuatan ekstrak kental sebanyak 100 g
serbuk kering daun Artocarpus altilis, pada tiap cawannya digunakan 10 g serbuk
kering dalam 100 mL pelarut etanol 96%. Rata-rata rendemen setiap 10 gram
serbuk kering adalah sebesar 2,304 g ekstrak kental. Pada pembuatan 100 gram
serbuk kering daun Artocarpus altilis menghasilkan 20,78 g ekstrak kental
dengan % rendemen 20,78%.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
71
Lampiran 11. Data penimbangan berat badan tikus jantan Wistar
Tabel X. Data penimbangan berat badan tikus pada kelompok kontrol basal,
kontrol negatif, kontrol pankreotoksik, dan kontrol perlakuan EEAA
Kelompok Waktu Hewan coba
1 2 3 4
Kelompok basal
0 135.14 137.77 143.89 144.9
4 133.16 146.9 159.24 154.83
7 133.96 146.9 157.15 159.8
Kelompok kontrol
negatif
0 142.64 140.02 128.69 144.6
4 143.08 140.67 135.4 128.24
7 141.76 134.6 128.64 135.22
Kelompok kontrol
pankreotoksik
0 137.91 138.17 130.02 138.45
4 155.31 159.04 152.85 170.61
7 172.32 172.8 160.37 145.08
Kelompok perlakuan
0 151.53 154.91 154.08 134.87
4 162.88 155.04 165.89 144.25
7 190.03 152.79 191.49 170.69
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
72
Lampiran 12. Data pengukuran kadar glukosa darah tikus jantan
Tabel XI. Data pengukuran kadar glukosa darah (mg/dl) tikus pada
kelompok basal, kontrol negatif, kontrol pankreotoksik, dan kontrol
perlakuan EEAA
Kelompok Waktu Hewan coba
1 2 3 4
Kelompok basal
0 110 105 76 72
4 102 107 92 123
7 79 68 89 81
Kelompok kontrol
negatif
0 110 110 86 99
4 118 145 114 116
7 84 76 81 77
Kelompok kontrol
pankreotoksik
0 90 115 129 106
4 268 263 231 225
7 156 168 168 168
Kelompok
perlakuan EEAA
0 99 101 114 117
4 184 410 117 137
7 204 260 196 194
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
73
Lampiran 13. Hasil Pembacaan Histopatologi Organ Pankreas Tikus
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
74
Lampiran 14. Leaflet GOD-PAP
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
75
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
76
BIOGRAFI PENULIS
Penulis skripsi berjudul Pengaruh Pemberian
Ekstrak Etanol Daun Sukun (Artocarpus altilis
(Park.) Fosberg.) pada Tikus Terinduksi
Streptozotocin bernama lengkap Anggun Amalia
Margita. Dilahirkan pada tangga 17 Maret 1992, di
Negara, Kabupaten Jembrana, Bali. Penulis
merupakan anak ketiga dari empat bersaudara
pasangan Sadiran dan A.A.A Enny Guna Prawati.
Riwayat pendidikan penulis dimulai tahun
1996-1998 di TK Pertiwi, Negara. Tahun 1998-2004
di SD 6 Dauhwaru Negeri, Negara. Pada tahun
2004-2007 di SMP Negeri 2, Negara. Tahun 2007-
2010 di SMA Negeri 1, Negara. Tahun 2010 penulis
melanjutkan pendidikan S1 di Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma
Yogyakarta. Selama menjalani masa perkuliahaan, penulis aktif dalam berbagai
kegiatan antara lain : Anggota divisi QC DPMF 2011-2012 dan 2012-2013;
Panitia Pharmacy Performance 2012 (Koordinataor sie Dana dan Usaha);
Koordinator UKF FISTARA 2011-2012; Panitia KPU 2012 (sie. Konsumsi).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
top related