definisi mikropipet
Post on 21-Feb-2018
372 Views
Preview:
TRANSCRIPT
-
7/24/2019 DEFINISI MIKROPIPET
1/12
DEFINISI MIKROPIPETSekilas Tentang Mikropipet
1. Multichannel Pipet (Image from sciencephoto.com)
Di berbagai bidang ilmu, termasuk biologi sel, mikrobiologi, biotechnologi, biokimia
dan kimia kuantitatif, pipetting merupakan keterampilan penting yang harus dikuasai. Pipet
adalah alat penting di berbagai bidang ilmu pengetahuan. Bekerja di laboratorium tentu tidak
akan terlepas dari urusan ukur-mengukur. Untuk sampel padatan, kita akan berurusan dengan
neraca analitik, sementara untuk sampel cairan, pipet volumetrik-lah andalannya. Akurasi dan
presisi pemipetan merupakan faktor utama keberhasilan analisa atau percobaan yang
melibatkan cairan. Pipet sudah digunakan sejak abad ke-! oleh "ouis Pasteur #$%%-$!&'
dan kini jenis pipet sudah berkembang luas dengan tingkat akurasi dan presisi yang
bermacam-macam pula.
2. Mengenal Jenis-Jenis Pipet Volumetrik
Pipet Serologis. Pipet ini terbuat dari pipa kaca silinder yang lurus dan memiliki
skala volume. (etelitian pipet serologis sesuai dengan skala terkecilnya.
Pipet Volumetrik Volume Tetap. Pipet jenis ini hanya memiliki garis tera dengan
volume tertentu, berbentuk silinder tetapi bagian tengahnya lebih gendut. (etelitiannya lebih
tinggi dibanding pipet pasteur karena garis tera berada pada bagian atas pipet yang memiliki
diameter kecil.
Pipet Volumetrik engan Piston. Pipet jenis ini mulai berkembang pada tahun !)*-
an. A+alnya pipet ini memiliki volume yang tetap, namun kemudian berkembang hinggamemiliki volume yang dapat diatur pada range tertentu. Pipet jenis ini lebih disukai karena
selain volumenya yang dapat diatur, akurasi dan presisi yang tinggi, pemakaiannya pun
simpel dan mudah.
!. "unakan Jenis Pipet #ang Sesuai
Pipet yang digunakan harus disesuaikan dengan jenis sampelnya
-
7/24/2019 DEFINISI MIKROPIPET
2/12
ampel airan Biasa. /unakan pipet jenis air-displacement
ampel airan (husus. Untuk cairan kental #gliserol, madu', mudah menguap
#chloroform, methanol', korosif dan mengandung radioaktif, gunakan pipet jenis positive-
displacement.
Untuk sampel biologi molekular yang harus terbebas dari kontaminasi D0A, 10A,nuclease dan bahan lain yang dapat menimbulkan degradasi pada sampel, maka bisa
digunakan pipet jenis air-displacement dengan menggunakan tips steril berfilter maupun
menggunakan pipet jenis positive-displacement juga dengan tips dan piston steril.
(a) $ir %ispacement & 'Positie %isplacemen Pipette
Pipet air-displacement selalu memiliki ruang udara #dead volume' antara piston pipet
dan sampel cairan, sedangkan pipet positive-displacement tidak, cairan kontak langsung
dengan piston.
Piston merupakan bagian permanen pada pipet air-displacement, tetapi pada pipet
positive-displacement bersifat disposable, menyatu dengan tips pipet.
*. Mikro Pipet
2ikropipet ini ditemukan dan dipatenkan pada tahun !)* oleh Dr. 3anns chmit4
#2arburg, 5erman'. etelah itu, mitra penemu dari perusahaan bioteknologi 6ppendorf, Dr.
3einrich 0etheler, me+arisi hak-hak yang melekat pada paten itu dan memulai penggunaan
mikropipet secara umum dan luas di laboratorium-laboratorium di dunia. Pada tahun !7%,
mikropipet yang dapat ditala ditemukan di Universitas 8isconsin92adison oleh beberapa
orang, terkhusus 8arren /ilson dan 3enry "ardy.
+. Perhatikan Volume ,airan #ang $kan %ipipet
-
7/24/2019 DEFINISI MIKROPIPET
3/12
Perhatikan range volume pipet yang akan digunakan. Setiap pipet memiliki range volume tertentu. Maka
angan !ampai !alah memilih pipet" karena produ!en tidak menamin akura!i pemipetan ika dilakukan
di luar angkauan yang !udah mereka tentukan.
elain itu jika volume yang kita kehendaki cocok dengan dua range volume pipet,
maka pilihlah yang mendekati volume maksimalnya. ontoh, jika kita ingin memipet
sebanyak .! u", bisa menggunakan pipet dengan range volume -* u" atau *.%-% u".
0amun sebaiknya gunakan pipet dengan range *.%-% u"
.
. "unakan Tip Pipet #ang aik
ekilas nampak semua tip pipet sama saja, namun tidak semua tip cocok untuk semua
pipet. :leh karena itu pemilihan tip sangat menentukan akurasi pemipetan. Ada baiknya
menggunakan tip dengan brand yang sama dengan pipet. 0amun jika ingin menggunakan
brand lain, maka harus memperhatikan hal-hal berikut ini
/unakan ;ips dengan (ualitas Baik
;ip harus bersih dan bebas dari partikel debu
Bentuk bagian kerah #yang menempel ke pipet' dan ujung tip harus benar-benar halusdan rapi
;ransparan
-
7/24/2019 DEFINISI MIKROPIPET
4/12
benar adalah dengan memasukkan ujung pipet ke dalam tip #tidak terlalu kencang', kemudian
pipet diputar untuk memperkuat posisi tip pada pipet. (husus untuk pipet multichannel,
cukup dengan digoyang sambil ditekan ke kiri dan kanan.
0. Moe Pemipetan orar atau 3eerse4
aat Ada menekan plunger pipet, maka Anda akan menemukan posisiplungerberhenti.
5ika plungerterus ditekan, maka ia akan berhenti lagi pada posisi kedua. 0ah, bagaimana cara
pemipetan yang benar= Apakahplungerpipet ditekan hingga posisi berhenti pertama atau
kedua=
Ada dua cara pemipetan, yaitu orar Moedan 3eerse Moe. Berikut ini ilustrasi
kedua proses tersebut
,ara Pemipetan Moe orar (image from "ilson "uie to Pipetting)
,ara Pemipetan Moe 3eerse (image from "ilson "uie to Pipetting)
Umumnya pipet jenis air-displacement menggunakan >or+ard 2ode ketika
melakukan kalibrasi, sehingga metode inilah yang harus kita gunakan. 2ode 1everse dapat
digunakan ketika menggunakan pipet jenis air-displacement untuk memipet cairan yang
kental atau mudah menguap. ementara itu pipet positive-displacement hanya menggunakan
mode >or+ard saja.
#. 5ati-hati engan 6ontaminasi
(ontaminasi pada Pemipetan #image from /ilson /uide to Pipetting'
-
7/24/2019 DEFINISI MIKROPIPET
5/12
Ada beberapa jenis kontaminasi, kenapa bisa sampai terjadi dan bagaimana cara
mencegahnya=
6ontaminasi Pipet-ke-Sampel. Penyebab 2enggunakan tip atau pipet yang sudah
terkontaminasi.Pencegahan Bersihkan dan sterilkan bagian pipet yang kontak dengan
sampel. /unakan tips steril, dan ganti tip setiap berganti sampel.
6ontaminasi Sampel-ke-Pipet.Penyebab ampel atau aerosol dari sampel kontak
dan memasuki bagian pipet. Pencegahan 5angan terlalu memiringkan pipet, simpan selalu
pipet secara vertikal, sedot cairan dengan perlahan dan gunakan filter tip atau gunakan pipet
positive-displacement.
6ontaminasi Sampel-ke-Sampel (sample carr#oer).Penyebab 2enggunakan tip
bekas untuk sampel yang berbeda.Pencegahan /anti tip setiap berganti sampel
$%. 6ali'rasi an Peraatan 3utin
(alibrasi akan menjamin akurasi. "akukanlah secara rutin minimal satu satun sekali.
(alibrasi bisa dilakukan sendiri atau dengan memanfaatkan jasa laboratorium kalibrasi yangsudah terakreditasi. 5angan lupa untuk melakukan hal-hal berikut ini
2engecek secara rutin kondisi pipet, periksa apakah ada bagian yang rusak, retak atau
ada komponen yang hilang.
2embersihkan pipet setiap sebelum dan sesudah pemakaian dengan alkohol atau
cairan khusus pembersih pipet.
2ensterilkan komponen-komponen pipet yang dapat disterilkan #dengan autoclave
atau penyinaran U?'
5ika terdapat kerusakan atau kelainan dan kejanggalan, segera periksakan kondisi
pipet Anda ke Distributor atau agen penjualnya.
emoga bermanfaat
MIKROPIPRT 100ML
TISSUE
GELAS ARLOJI
,ara Menggunakan Micropipet
%*.@) "A0DA ! comments
Mikropipet (micropipet) adalah suatu alat yang digunakan untuk memindahkancairan dalam jumlah kecil secara akurat. Penggunaan pipet gelas seperti pipet ukur
http://lansida.blogspot.com/2010/10/cara-menggunakan-micropipet.htmlhttp://lansida.blogspot.com/2010/10/cara-menggunakan-micropipet.html#comment-formhttp://lansida.blogspot.com/2010/10/cara-menggunakan-micropipet.html#comment-formhttp://lansida.blogspot.com/2010/10/cara-menggunakan-micropipet.htmlhttp://lansida.blogspot.com/2010/10/cara-menggunakan-micropipet.html#comment-form -
7/24/2019 DEFINISI MIKROPIPET
6/12
dan pipet gondok tidak mempunyai akurasi yang tinggi untuk volume kurang dari 1ml. Sehingga pada pemindahan cairan dengan volume kecil kurang dari 1000microliter, orang cenderung menggunakan mikropipet, biasa juga disebut denganpipet otomatis. Pipet otomatis ini mempunyai akuraritas dan presisi yang lebih baikdari pada pipet gelas. isamping itu setiap pipet dapat diset berapapun volumenya
selama dalam range volume pipet. !da beberapa macam merek mikropipet yangberedar dipasaran seperti "ilson, Pipetman, dll.Meskipun produk mikropipet telah dirancang akurat dan presisi oleh pabriknya, alattersebut tetap harus dikalibrasi jika digunakan untuk laboratorium yangterakreditasi.!da beberapa macam mikropipet yang biasa dipakai di laboratorium, sepertimisalnya merk "ilson ada tertulis P#0, P#00 dan P1000 pada kepala pipet.
Macam$macam ukuran mikropipet
P#0 dimaksudkan untuk memipet larutan pada volume antara # $ #0 ulP#00 untuk memipet larutan pada volume antara #0 % #00 ulP1000 untuk memipet larutan pada volume antara 100 % 1000 ul
&agian$bagian mikropipet
&agian$bagian dari mikropipet terdiri dari !utomatic Pipettor dan Pipette tips.!utomatic Pipettor ber'ungsi untuk memompa cairan yang akan dipindahkandengan volume yang telah diset, sedang Pipette tips merupakan pasanganmikropipet yang ber'ungsi untuk menampung cairan yang dipompa.
-
7/24/2019 DEFINISI MIKROPIPET
7/12
Pengoperasian Mikropipet
!da beberapa tahapan untuk mengoperasikan mikropipet secara benar yang antaralain
1. Set volume
#. Pasang tip disposable
. *ekan penyedot sampai pembatas pertama
+. Masukkan tip ke sampel
. !mbil sampel
-. *ahan
. *arik tip
/. eluarkan sampel
. *arik pipet
10.2epaskan tekanan penyedot
11.2epaskan tip
3ah, berikut ini saya uraian lengkapnya *ahap 1 !tur volume dengan cara memutar knop pengatur volume, sayacontohkan begini...
-
7/24/2019 DEFINISI MIKROPIPET
8/12
*ahap # Pasanglah tip disposable yang telah tertata pada 4adah dengan caramenancapkan ujung mikropipet seperti gambar di samping kanan.
*ahap *ekan penyedot pipet sampai pada batas pertama.
-
7/24/2019 DEFINISI MIKROPIPET
9/12
*ahap + &enamkan tip kedalam cairan yang akandipindahkan.
*ahap Pengambilan sampel5ntuk mengambil sampel ke dalam tip, jagalah tekanan balik berjalan secara
perlahan dan halus sampai penuh ke posisi sebelum penyedotan. 6angan birakanpenyedot bergerak cepat dan tiba$tiba. &iarkan tip tetap diba4ah permukaansampel selama pengambilan.
*ahap - &erhenti sesaat7 *unggu sesaat untuk memastikan seluruh sampel yang disedot sudah mengisi tip.7 *unggu lebih lama lagi untuk pengambilan volume yang lebih besar.7 *unggu lebih lama untuk sampel yang mempunyai viskositas yang lebih besar.
ara menghilangkan
cairan menempel
yang benar
ara menghilangkan
cairan menempel
yang salah
*ahap Penarikan tip dari sampelPindahkan tip dari cairan sampel. Perlu diperhatikan tidak boleh ada cairantertinggal di bagian luar tip dan lap8usap butiran cairan di luar dengan tissue,tetapi hanya dari bagian samping saja. 6angan sentuhkan tissue pada bagianba4ah8ujung tip.
*ahap / Pengeluaran Sampel5ntuk mengeluarkan sampel dari pipet caranya sebagai berikut
1. Sentuhkan tip pada dinding 4adah penampung sampel.
-
7/24/2019 DEFINISI MIKROPIPET
10/12
#. *ekan penyedot sampai pembatas pertama.
. *ahan paling tidak 1 detik, 1$# detik untuk P$1000, #$ detik untuk P$000atau lebih lama untuk sampel yang mempunyai viskositas yang lebih tinggi.
+. *ekan penyedot ke pembatas kedua untuk mengeluarkan sisa$sisa cairan.
2ulai mengeluarkan Pembatas Pembatas %
*ahap Penarikan pipet
engan penyedot masih dalam posisi tertekan tarik pipet dari 4adah penampungsampel dengan terus menempelkan tip didinding 4adah khususnya ketikapemipetan dalam jumlah kecil.
*ahap 10 Melepaskan tekanan penyedot
Secara pelan$pelan biarkan penyedot kembalia pada posisi 5P. 6angan biarkantertekan kembali.
*ahap 11 Melepas tip2epaskan tip dengan cara menekan ejector seperti gambar.
Akurasi dan Presisi!kurasi maksudnya kedekatan volume yang di keluarkan terhadap volume yangdiset di pipet. !kurasi ini ditunjukkandari angka rata$rata eror, penyimpangan pengukuran berulang terhadap volumeyang diset.Sedang presisi adalah reprodusibiliti pengukuran individual untuk volume yangsama. Presisi ditunjukkan oleh standar deviasi (S).
!kurasi relati' secara umum adalah 19 atau kurang, sedang presisi kurang dari 0,9 kecuali digunakan volume terkecil yang dianjurkan dari model.
-
7/24/2019 DEFINISI MIKROPIPET
11/12
"unakan mikropipet yang sesuai dengan volume yang akan diukur8dipipet.Menggunakan pipet diba4ah volume yang dianjurkan akan menghasilkan kesalahanyang lebih besar.
5ntuk mendapatkan reprodusibilitas optimal ikuti saran sebagai berikut
1. onsisten dalam :;:P!*!3 dan :
#. *ekanan yang konsisten dalam penekanan penyedot pada pembataspertama.
. edalaman penyedotan yang cukup dan konsisten.
+. Posisi pemipetan hampir vertikal.
. 6angan sampai ada gelembung udara.
-. 6angan pernah meninggalkan pipet pada posisi mendatar apalagi terbaliksaat tip terisi sampel.
engan demikian, jika !nda bekerja dengan mikropipet akan memperoleh hasilyang akurat, presisi dan alat tidak mudah rusak.Selamat bekerja.....
MIKRO PIPET
I. LATAR BELAKANG
Mikropipet ini ditemukn dn diptenkn pd t!un 1"#0 o$e! %r. &nn'
S(!mit) *Mr+ur,- Jermn. Sete$! itu- mitr penemu dri peru'!n
+iotekno$o,i Eppendor/- %r. &einri(! Net!e$er- meri'i !k!k 2n, me$ekt
pd pten itu dn memu$i pen,,unn mikropipet 'e(r umum dn $u' di
$+ortorium$+ortorium di duni. Pd t!un 1"34- mikropipet 2n, dptdit$ ditemukn di Uni5er'it' 6i'(on'in7Mdi'on o$e! +e+erp orn,-
terk!u'u' 6rren Gi$'on dn &enr2 Lrd2.
Mikropipet d$! $t untuk memind!kn (irn 2n, +er5o$ume (ukup ke(i$-
+i'n2 kurn, dri 1000 8$. Bn2k pi$i!n kp'it' d$m mikropipet-
mi'$n2 mikropipet 2n, dpt ditur 5o$ume pen,m+i$nn2 *d9u't+$e
5o$ume pipette ntr 18$ 'mpi 40 8$- tu mikropipet 2n, tidk +i' ditur
5o$umen2- !n2 ter'edi 'tu pi$i!n 5o$ume *:;ed 5o$ume pipette mi'$n2
mikropipet < 8$. d$m pen,,unnn2- mukropipet memer$ukn tip.
1. Prin'ipMemind!kn 'utu $rutn dri d! ke d! $in den,n men,,unkn
-
7/24/2019 DEFINISI MIKROPIPET
12/12
ukurn tertentu pd umum n2 prin'ip ker9 mikropipet 'm den,n pipet
+i'n2 nmun !n2 di+edkn den,n dn2 pen,ukurn 2n, kurt
4. Tu9un
. Untuk men,et!ui (r men,,unk mikropipet 2n, +ik dn +enr
+. Men,et!ui k$i+r'i pertn dn ke,unn dri mikropipet
=. Bentuk dn >un,'i
untuk men,m+i$ $rutn den,n 5o$ume 'edikit- den,n men,,unkn du
teknik 2itu (r /orrd dn re5er'e.
Ke,unn d$m +idn, ke'e!tn
untuk men,m+i$ $rutn tu 'mpe$ den,n 5o$ume 2n, ke(i$.
B,in +,in dri mikropipet
Terdir dri
1. Pippetor 2n, +er/un,'i untukmemomp (irn 2n, kn di pind!kn
4. Pippet tip p'n,n mikropipet 2n, +er/un,'i untuk menmpun, (irn
2n, di pompkn.
II. PROSE%UR
Pro'edur Pen,,unn
?r pen,,unn mi(ro' pipet di +,i men9di du (r 2itu@
1. >orrd den,n (r 1't 'top- 4nd 'top. Artin2- tekn 1;- m+i$ $rutn-
m'ukn ked$m t+un,- ke$urkn tekn 4;.
4. Re5er'e- den,n (r 4nd 'top 1't 'top- rtin2 m+i$ $rutn 4 k$i $$u
t!n m'ukn $rutn ked$m t+un, dn ke$urkn tekn 1 k$i.
Pro'edur Pertn
=. M'ukkn tip ked$m d! 2n, +eri'i ir
. Lp u9un, mikropipet den,n ti''ue kerin,
top related