validasi metode analisis logam timbal (pb) pada daun
TRANSCRIPT
VALIDASI METODE ANALISIS LOGAM TIMBAL (Pb) PADA
DAUN MANGGA (Mangifera indica L.) MELALUI DESTRUKSI
ASAM DENGAN SPEKTROFOTOMETRI SERAPAN ATOM
SKRIPSI
FITRIYANI ADWIWARTIKA
PROGRAM STUDI KIMIA
FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI
UNIVERSITAS ISLAM NEGERI SYARIF HIDAYATULLAH
JAKARTA
2020 M/ 1442 H
VALIDASI METODE ANALISIS LOGAM TIMBAL (Pb) PADA DAUN
MANGGA (Mangifera indica L.) MELALUI DESTRUKSI ASAM DENGAN
SPEKTROFOTOMETRI SERAPAN ATOM
Skripsi
Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Sains
Program Studi Kimia
Fakultas Sains dan Teknologi
Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta
Oleh
FITRIYANI ADWIWARTIKA
NIM. 11160960000026
PROGRAM STUDI KIMIA
FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI
UNIVERSITAS ISLAM NEGERI SYARIF HIDAYATULLAH
JAKARTA
2020 M/ 1442 H
VALIDASI METODE ANALISIS LOGAM TIMBAL (Pb) PADA DAUN
MANGGA (Mangifera indica L.) MELALUI DESTRUKSI ASAM DENGAN
SPEKTROFOTOMETRI SERAPAN ATOM
Skripsi
Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Sains
Program Studi Kimia
Fakultas Sains dan Teknologi
Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta
Oleh
FITRIYANI ADWIWARTIKA
NIM. 11160960000026
Menyetujui,
Pembimbing I Pembimbing II
Nurhasni, M. Si Bambang Hindratmo M. Pd
NIP. 19740618 200501 2 005 NIP. 19700325 199803 1 001
Mengetahui,
Ketua Program Studi Kimia
Dr. La Ode Sumarlin, M. Si
NIP. 19750918 200801 1 007
PENGESAHAN UJIAN
Skripsi yang berjudul “Validasi Metode Analisis Logam Timbal (Pb) Pada
Daun Mangga (Mangifera Indica L.) Melalui Destruksi Asam Dengan
Spektrofotometri Serapan Atom” telah diuji dan dinyatakan LULUS pada Sidang
Munaqosah Fakultas Sains dan Teknologi Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah
Jakarta pada Jumat, 20 November 2020. Skripsi ini telah diterima sebagai salah satu
syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Sains Program Studi Kimia.
Menyetujui,
Penguji I Penguji II
Dr. Hendrawati, M. Si Dr. Sandra Hermanto, M. Si
NIP. 19720815 200312 2 001 NIP. 19750810 200501 1 005
Pembimbing I Pembimbing II
Nurhasni, M. Si Bambang Hindratmo M. Pd
NIP. 19740618 200501 2 005 NIP. 19700325 199803 1 001
Mengetahui,
Dekan Fakultas Sains dan Teknologi Ketua Program Studi Kimia
Prof. Dr. Lily Surayya Eka Putri, M. Env.Stud Dr. La Ode Sumarlin, M. Si
NIP. 19690404 200501 2 005 NIP. 19750918 200801 1 007
PERNYATAAN
DENGAN INI MENYATAKAN BAHWA SKRIPSI INI ADALAH HASIL
KARYA SAYA SENDIRI DAN BELUM PERNAH DIAJUKAN SEBAGAI
SKRIPSI ATAU KARYA ILMIAH PADA PERGURUAN TINGGI ATAU
LEMBAGA MANAPUN
Jakarta, November 2020
Fitriyani Adwiwartika
11160960000026
© Hak Cipta Milik UIN, Tahun 2020
Hak Cipta Dilindungi Undang-Undang
Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan
atau menyebutkan sumbernya. Pengutipan hanya untuk kepentingan pendidikan,
penelitian, penulisan karya ilmiah, penyusunan laporan, penulisan kritik, atau
tinjauan suatu masalah dan pengutipan tersebut tidak merugikan kepentingan
UIN.
Dilarang mengumumkan dan memperbanyak sebagian atau seluruh karya tulisan
ini dalam bentuk apapun tanpa izin UIN dan Pusat Penelitian dan Pengembangan
Kualitas Laboratorium Lingkungan – Kementerian Lingkungan Hidup dan
Kehutanan (P3KLL - KLHK) Serpong.
ABSTRAK
FITRIYANI ADWIWARTIKA. Validasi Metode Analisis Logam Timbal (Pb)
Pada Daun Mangga (Mangifera Indica L.) Melalui Destruksi Asam Dengan
Spektrofotometri Serapan Atom. Dibimbing oleh NURHASNI dan BAMBANG
HINDRATMO
Validasi metode destruksi asam untuk analisis logam timbal (Pb) dengan
menggunakan spektrofotometer serapan atom perlu dilakukan mengingat Pb
termasuk kategori logam berat yang memiliki sifat berbahaya dan beracun
terhadap tubuh sehingga kadarnya perlu diukur secara valid. Pada penelitian ini,
sampel yang digunakan adalah daun mangga. Tujuan penelitian ini adalah untuk
mengetahui hasil uji validasi meliputi ketahanan dan kekuatan metode serta hasil
uji verifikasi meliputi nilai LOQ, IDL, MDL, Linearitas, Akurasi, dan Presisi dan
juga mengetahui kadar Pb di dalam daun mangga. Metode yang dilakukan adalah
destruksi asam dilakukan dengan menggunakan HNO3 65% dan HClO4 70%,
dimana metode tersebut mengacu pada 3030-H APHA 2017 dan akan diukur
dengan Spektrofotometer Serapan Atom HITACHI Z-2300 dilakukan
pengulangan pengukuran sebanyak 20 kali. Penelitian menunjukkan hasil
linearitas sebesar 0,997, nilai MDL0,06 µg/mL, nilai LoQ 0,19 µg/mL, nilai
repitabilitas analis 1 dan 2 yaitu 3,9458 dan 1,5752, nilai reprodusibiltas (% RSD)
4,0442, dan nilai akurasi sebesar 99,88%. Hasil kadar timbal yang diperoleh dari
analis 1 diperoleh 0,00 mg/kg dan pada analis 2 diperoleh berkisar antara -0,5-2,5
mg/kg dimana melebihi batas maksimum yang telah tertera pada SNI 7387 tahun
2009 untuk buah-buahan dan sayuran yaitu sebesar 0,5 mg/kg.
Kata Kunci: Destruksi Asam, SSA, Timbal, Validasi, Verifikasi,
ABSTRACT
FITRIYANI ADWIWARTIKA. Validation of Lead Metal (Pb) Analysis
Method in Mango (Mangifera Indica L.) Leaves Through Acid Digestion Using
Atomic Absorption Spectrophotometry. Supervised by NURHASNI and
BAMBANG HINDRATMO
Validation of the acid digestion method for lead metal (Pb) analysis using an
atomic absorption spectrophotometer needs to be done considering that Pb is a
heavy metal category that has dangerous and toxic properties to the body so that
its levels need to be measured validly. In this study, the sample used was mango
leaves. The purpose of this study was to determine the results of the validation test
including the durability and strength of the method and the results of the
verification tests including the values of LOQ, IDL, MDL, Linearity, Accuracy,
and Precision and also to determine the Pb levels in mango leaves. The method
used is acid digestion using HNO3 65% and HClO4 70%, where the method
refers to the 2017 APHA 3030-H and will be measured with the HITACHI Z-
2300 Atomic Absorption Spectrophotometer and the measurement is repeated 20
times. The study showed a linearity of 0.997, an MDL value of 0.06 µg / mL, a
LoQ value of 0.19 µg / mL, 1 and 2 analysis of repitability values were 3.9458
and 1.5752, a reproducibility value (% RSD) 4.0442, and accuracy value of
99.88%. The result of lead content obtained from analysis 1 obtained 0.00 mg / kg
and in analysis 2 obtained ranged from -0.5-2.5 mg / kg which exceeds the
maximum limit stated in SNI 7387 of 2009 for fruits and vegetables, which is 0.5
mg / kg.
Keywords: acid destruction, SSA, lead, validation, verification
ix
KATA PENGANTAR
Bismillahirrohmanirrohim
Assalamu’alaikum Warahmatullahi Wabarakatuh.
Alhamdulillah, puji dan syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT.,
karena berkat rahmat dan karunia-Nya penulis dapat menyelesaikan skripsi
penelitian yang berjudul “Validasi Metode Analisis Logam Timbal (Pb) Pada
Daun Mangga (Mangifera Indica L.) Melalui Destruksi Asam Dengan
Spektrofotometri Serapan Atom”. Skripsi penelitian ini untuk memenuhi syarat
memperoleh gelar Sarjana Sains, Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah
Jakarta. Pada kesempatan ini, penulis ingin mengucapkan terimakasih yang
sebesar-besarnya kepada:
1. Nurhasni, M. Si selaku Pembimbing I yang telah memberikan wawasan, ilmu,
bimbingan, dan arahan sehingga banyak membantu penulis dalam
menyelesaikan penelitian dan penulisan skripsi;
2. Bambang Hindratmo, M. Pd selaku Pembimbing II di Pusat Penelitian dan
Pengembangan Kualitas dan Laboratorium Lingkungan (P3KLL) yang telah
memberikan wawasan, ilmu, bimbingan, dan arahan sehingga banyak
membantu penulis dalam menyelesaikan penelitian dan penulisan skripsi;
3. Dr. Hendrawati, M. Si selaku Penguji I yang telah memberikan masukan dan
saran kepada penulis selama penyusunan skripsi penelitian;
4. Dr. Sandra Hermanto, M. Si selaku Penguji II yang telah memberikan
masukan dan saran kepada penulis selama penyusunan skripsi penelitian;
5. Dr. La Ode Sumarlin. M. Si selaku Ketua Program Studi Kimia Fakultas
Sains dan Teknologi UIN Syarif Hidayatullah Jakarta;
x
6. Prof. Dr. Lily Surayya Eka Putri, M. Env. Stud. selaku Dekan Fakultas Sains
dan Teknologi UIN Syarif Hidayatullah Jakarta;
7. Ir. Herman Hermawan, M. M selaku Kepala Pusat Penelitian dan
Pengembangan Kualitas dan Laboratorium Lingkungan (P3KLL) Puspitek,
Serpong;
8. Kedua orang tua dan kakakku tercinta atas segala do’a, motivasi dan
dukungan moril maupun materil yang diberikan kepada penulis;
9. Bu Siti, Ka Onig, Ka Endah, Ka Ness, Ka Riris yang telah banyak
memberikan bantuan dan pengetahuan kepada penulis selama melakukan
penelitian di laboratorium;
10. Didik Sodikin, Miya Riski Utari, Meydina Syafanti, M. Alfatih Hardiyanto,
Ribbialif Wiga F., dan Shohibul Fiqri sebagai rekan penelitian serta Syarif
Jumal sebagai pacar yang telah memberikan semangat sampai saat ini hingga
penulis dapat menyelesaikan skripsi;
11. Semua pihak yang telah membantu secara langsung maupun tidak langsung,
yang tidak dapat disebutkan satu persatu.
Demikian skripsi ini penulis buat, semoga dapat bermanfaat bagi kita semua
dan memiliki kontribusi bagi perkembangan penelitian ini. Aamiin.
Wassalamu’alaikum Warahmatullahi Wabarakatuh
Jakarta, Desember 2020
Penulis
xi
DAFTAR ISI
Halaman
KATA PENGANTAR .......................................................................................... ix
DAFTAR ISI ......................................................................................................... xi
DAFTAR GAMBAR .......................................................................................... xiii
DAFTAR TABEL .............................................................................................. xiv
DAFTAR LAMPIRAN ....................................................................................... xv
BAB I PENDAHULUAN ...................................................................................... 1
1.1 Latar Belakang ............................................................................................. 1
1.2 Rumusan Masalah ........................................................................................ 5
1.3 Hipotesis Penelitian ...................................................................................... 5
1.4 Tujuan Penelitian ......................................................................................... 5
1.5 Manfaat Penelitian ....................................................................................... 6
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ........................................................................... 7
2.1 Logam Timbal (Pb) ...................................................................................... 7
2.2 Tanaman Mangga (Mangifera indica L.) ..................................................... 9
2.2.1 Taksonomi dan Morfologi Tanaman Mangga..................................... 9
2.3 Destruksi Asam .......................................................................................... 11
2.3.1 Destruksi Asam Basah ...................................................................... 11
2.3.2 Destruksi Asam Kering ..................................................................... 12
2.4 Validasi Metode Uji ................................................................................... 13
2.5 Spektrofotometri Serapan Atom (SSA) ..................................................... 16
2.5.1 Instrumentasi Spektrofotometri Serapan Atom ................................. 17
2.5.2 Faktor-faktor Interferensi dalam Spektrofotometri Serapan Atom ... 20
2.6 Sumber-sumber Ketidakpastian Pengukuran ............................................. 25
BAB III METODE PENELITIAN .................................................................... 27
3.1 Waktu dan Tempat Penelitian .................................................................... 27
3.2 Alat dan Bahan ........................................................................................... 27
3.2.1 Alat .................................................................................................... 27
3.2.2 Bahan ................................................................................................. 27
3.4 Penentuan Lokasi Pengambilan Sampel .................................................... 29
3.5 Teknik Pengambilan Sampel Daun Mangga (P3KLL-KLHK) .................. 29
xii
3.6 Preparasi Sampel Daun Mangga (AOAC, 2005) ....................................... 30
3.7 Pembuatan Larutan Uji .............................................................................. 30
3.7.1 Pembuatan larutan baku standar Pb 100 ppm ................................... 30
3.7.2 Pembuatan Spike (Standar + Sampel) Pb 0,4 ppm............................ 30
3.7.3 Pembuatan Larutan Standar Pb ......................................................... 30
3.8 Destruksi Asam (AOAC, 2005) ................................................................. 30
3.9 Pengukuran kurva kalibrasi dan pengukuran kadar logam (APHA, 2017) 31
3.10 Pembuatan Kurva Kalibrasi (Linearitas) (ICH, 2005) ............................... 31
3.11 Penentuan Limit of Linearity (LOL) (Eurachem, 2014)............................. 32
3.12 Penentuan Akurasi dengan Standar Tengah (Eurachem, 2014) ................. 32
3.13 Penentuan Methods Detection Limit (MDL) .............................................. 33
3.14 Penentuan Presisi (Eurachem, 2014) ......................................................... 35
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ............................................................. 36
4.1 Sampel Daun Mangga ................................................................................ 36
4.2 Hasil Destruksi Asam ................................................................................. 37
4.3 Hasil Validasi Metode Analisis .................................................................. 40
4.3.1 Kurva Kalibrasi (Linearitas) .............................................................. 40
4.3.2 Penentuan Batas Linearitas ............................................................... 41
4.3.3 Penentuan Method Detection Limit (MDL) ...................................... 43
4.3.4 Penentuan Repitabilitas, Reprodusibilitas dan Akurasi .................... 45
4.4 Hasil Pengukuran Kadar Timbal (Pb) dalam Daun Mangga ..................... 47
4.5 Sumber – sumber Ketidakpastian dalam Pengukuran ................................ 50
BAB V PENUTUP ............................................................................................... 53
5.1 Simpulan .................................................................................................... 53
5.2 Saran ........................................................................................................... 54
DAFTAR PUSTAKA .......................................................................................... 55
LAMPIRAN ......................................................................................................... 59
xiii
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Daun Mangga....................................................................................... 9
Gambar 2. Skema Umum Komponen pada Alat SSA ......................................... 16
Gambar 3. Diagram Alir Penelitian ..................................................................... 28
Gambar 4. Lokasi Pengambilan Sampel.............................................................. 29
Gambar 5. Kurva Kalibrasi Timbal (Pb) ............................................................. 41
xiv
DAFTAR TABEL
Tabel 1. Rentang Kesalahan pada Matriks ........................................................... 14
Tabel 2. Batas Linearitas ...................................................................................... 42
Tabel 3. Hasil Evaluasi Batas Linearitas .............................................................. 43
Tabel 4. Penentuan Method Limit Detection (MDL) ........................................... 44
Tabel 5. Data Repitabilitas, Reprodusibilitas dan Akurasi................................... 46
Tabel 6. Kadar Logam Timbal (Pb) Analis 1 ....................................................... 48
Tabel 7. Kadar Logam Timbal (Pb) Analis 2 ....................................................... 49
xv
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. RAB penelitian ............................................................................... 59
Lampiran 2. Timeline Penelitian ......................................................................... 60
Lampiran 3. Contoh Perhitungan ........................................................................ 61
Lampiran 4. Dokumentasi Penelitian .................................................................. 64
Lampiran 5. Data Limit of Linearity .................................................................... 65
Lampiran 6. Data Hasil Kadar timbal analis 1 .................................................... 66
Lampiran 7. Data Hasil Kadar timbal analis 2 .................................................... 67
1
BAB I
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Timbal (Pb) adalah logam lunak berwarna abu-abu kebiruan mengilat serta
mudah dimurnikan sehingga banyak digunakan pada berbagai aktivitas manusia
misalnya pertambangan, industri, dan rumah tangga. Pada pertambangan timbal
berbentuk senyawa sulfide (PbS). Timbal meleleh pada suhu 328 oC (662
oF), titik
didih 1740 oC (3164
oF) (Widowati et al, 2008). Logam Pb diklasifikasikan oleh
U.S. Environmental Protection Agency sebagai senyawa yang sangat beracun atau
bersifat karsinogen bagi manusia karena senyawa Pb bukan senyawa yang
dibutuhkan oleh organisme dan sistem biologis organisme. Pb dapat masuk ke
dalam tubuh manusia melalui jalur pernapasan dan oral (Ghasemidehkordi et al,
2018).
Sumber timbal (Pb) terdapat dari beberapa industri yang menggunakan
timbal sebagai bahan baku ataupun bahan tambahan. Seperti industri pengecoran,
industri ini menghasilkan konsentrat timbal (primary lead), serta secondary lead
yang berasal dari logam bekas. Industri baterai, merupakan industri yang
menggunakan timbal dalam jumlah yang banyak terutama paduan antimon timbal
serta timbal oksida yang digunakan untuk menjadi bahan industri kabel. Pada
industri kabel timbal digunakan untuk melapisi kabel. Industri kimia, yang
menggunakan pewarna sering menggunakan timbal (Pb) karena toksisitasnya
relatif lebih rendah jika dibandingkan dengan logam pigmen
2
lainnya. Sebagai pewarna merah dalam cat, biasanya digunakan timbal merah,
sedangkan untuk kuning, timbal kromat yang digunakan (Sudarmadji, 2006).
Timbal memiliki dua jenis yaitu timbal organik dan timbal anorganik.
Timbal organik merupakan jenis timbal yang sangat berbahaya (lebih berbahaya
dari timbal anorganik) karena dapat diserap melalui kulit dan sangat beracun bagi
otak dan sistem saraf pusat. Tetraethyl dan timbal tetramethyl adalah bentuk
timbal organik yang digunakan dalam bahan bakar yang mengandung timbal
untuk meningkatkan nilai oktan bahan bakar tersebut. Pembakaran timbal organik
ketika ditambahkan ke bensin sebagai tambahan bahan bakar akan menghasilkan
pelepasan timbal ke atmosfer. Namun demikian, penggunaan timbal dalam bahan
bakar telah dilarang sejak tahun 1996 (ATSDR, 2007).
Mengingat bahwa logam timbal (Pb) termasuk dalam kategori logam berat
yang memiliki sifat berbahaya dan beracun maka kadarnya perlu diukur secara
valid dan membutuhkan ketelitian yang tinggi. Di dalam Al-Qur’an, Allah SWT
berfirman dalam surah Al-Hujurat [49] ayat 6:
ا ان جاءكم فاسق بنب ا ان تصيبوا قوما يايها الذين امنو ا فتبينو
علتم ندمين على ما ف صبحوا بجهالة فت
Artinya:
“Wahai orang-orang yang beriman, jika datang kepadamu orang fasik membawa
suatu berita, maka telitilah kebenarannya, agar kamu tidak mencelakakan suatu
kaum karena kebodohan (kecerobohan), yang akhirnya kamu menyesali
perbuatanmu itu.” Al-Hujurat [49]: 6)
Dari ayat di atas, sudah terlihat jelas sekali bahwa, jika kita ingin membagi
ataupun menyebarkan suatu pengajaran kepada manusia lain yang nantinya ilmu
tersebut akan berguna sampai ke masa yang akan datang, maka hendaklah
pengajaran tersebut dapat dipahami dan diteliti terlebih dahulu sanpai ke akar-
3
akarnya, agar ke depannya tidak terjadi hal-hal yang tidak diinginkan dari
pengaruh pengajaran. Maka dari itu, sebagai manusia harus berpikir jernih dan
teliti disetiap menerima pelajaran ataupun berita yang didapat dari manusia
lainnya.
Validasi ini harus dilakukan karena mengingat bahwa alat spektrofotometri
serapan atom digunakan untuk menganalisis lebih dari satu matriks. Maka,
ditakutkan saat pergantian matriks yang akan diuji dialat tersebut, sensitifitas dari
alat spektrofotometri serapan atom itu akan berubah dan menghasilkan nilai
validasi yang tidak sesuai dengan acuannya. Penelitian sebelumnya, dilakukan
Handayani dan Ridha (2017) menggunakan metode yang sama dengan sampel
rambut manusia dan mendapatkan hasil uji validasi metode analisa kadar logam
timbal (Pb) menggunakan pengoksidasi HNO3 dan HClO4 dengan
Spektrofotometer serapan atom dapat digolongkan dalam kategori teliti. Penelitian
lain dilakukan oleh Ratnawati et al., (2019) dilakukan dengan menggunakan
sampel sedimen banjir di daerah Semarang dengan menggunakan 2 variasi
perbandingan. Metode destruksi yang mendapatkan hasil yang paling valid untuk
analisis logam timbal di dalam sedimen tersebut adalah campuran HNO3 dan HCl.
Pencemaran timbal pada tanaman sebagian besar diakumulasikan oleh
organ tanaman, yaitu daun, kulit kayu, akar, dan akar umbi. Mekanisme masuknya
partikel timbal ke dalam jaringan daun, yaitu melalui stomata daun yang besar dan
ukuran partikel Pb lebih kecil, sehingga Pb mudah memasuki jaringan daun
melalui proses penyerapan pasif (Dahlan, 2004). Tingginya akumulasi timbal
dalam tanaman di kawasan industri adalah salah satu faktor penting untuk
melakukan penelitian tentang studi toksisitas dan biogeokimia logam timbal (Pb)
4
pada tanaman. Tanaman yang digunakan dalam penelitian ini adalah daun
mangga, sampel yang dapat digunakan untuk penelitian ini dapat dipilih secara
acak, karena validasi ini memiliki cakupan untuk semua jenis tumbuhan.
Pemilihan daun mangga ini pun disebabkan karena ekonomis dan mudah
ditemukan dimana saja. Logam Pb dengan berbagai konsentrasi akan terpaparkan
ke tanaman mangga yang telah ditanam. Hasil paparan kemudian dianalisis atau
ditentukan kadar timbal.
Metode yang digunakan dalam penetapan kadar timbal dalam penelitian
ini adalah metode destruksi asam dengan menggunakan spektrofotometri serapan
atom (SSA). Spektrofotometri serapan atom dapat menentukan kadar logam tanpa
dipengaruhi oleh keberadaan logam yang lain. Selain itu cara kerjanya sederhana,
interferensinya sedikit, dan cocok untuk analisis sekelumit logam karena
mempunyai kepekaan yang tinggi (batas deteksi kurang dari 1 ppm) (Rohman,
2007). Penelitian ini dilakukan di wilayah Serpong daerah pemukiman warga,
juga dengan jalur transportasi industri seperti truk dan tronton yang dapat dibilang
padat. Dimana daerah ini, ada kemungkinan bahwa udaranya tercemar dengan
logam timbal (Pb) dari pabrik aki bekas, pabrik tekstil dan industri kimia yang
menggunakan bahan dasar logam timbal (Pb). Penelitian ini, menggunakan
pelarut HNO3 pekat dan HClO4 pekat sesuai dengan acuannya yaitu APHA, serta
untuk menunjukkan bahwa metode destruksi asam yang digunakan dalam suatu
penelitian tersebut memenuhi persyaratan serta menunjukkan data hasil yang baik
dan dapat dipercaya.
5
1.2 Rumusan Masalah
1. Apakah hasil validasi metode destruksi asam dalam pengukuran logam
berat timbal pada sampel daun mangga valid dan sesuai dengan parameter
yang telah ditentukan meliputi linearitas, akurasi, presisi, dan batas deteksi
metode untuk penggunaan alat spektrofotometer serapan atom?
2. Berapa kadar rata-rata timbal (Pb) pada sampel daun mangga yang diuji?
1.3 Hipotesis Penelitian
1. Hasil validasi metode destruksi asam dalam pengukuran logam berat
timbal (Pb) pada sampel daun mangga dengan spektrofotometri serapan
atom menunjukkan hasil yang valid dan sesuai dengan parameter validasi
metode, yaitu linearitas, akurasi, presisi dam batas deteksi metode yang
telah ditentukan.
2. Kadar rata-rata timbal (Pb) pada sampel daun mangga di bawah batas
kandungan untuk buah dan sayur sesuai dengan SNI 7387 : 2009
1.4 Tujuan Penelitian
1. Menjamin metode analisis yang digunakan mampu memberikan hasil yang
cermat, handal, dan dapat dipercaya serta sesuai dengan parameter validasi
metode, yang meliputi linearitas, akurasi, presisi, batas deteksi metode.
2. Menentukan kadar rata-rata timbal (Pb) pada sampel daun mangga.
6
1.5 Manfaat Penelitian
Manfaat dari penelitian ini adalah untuk mengkonfirmasi atau
membuktikan bahwa metode destruksi asam yang digunakan dalam suatu
penelitian memenuhi persyaratan sehingga dapat dinyatakan bahwa data
yang diperoleh selama penelitian merupakan hasil yang baik dan dapat
dipercaya.
7
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Logam Timbal (Pb)
Timbal merupakan jenis logam yang bertekstur lunak dan berwarna coklat
kehitaman, dan juga mudah dimurnikan. Dalam bahasa ilmiahnya timbal
dinamakan plumbum, dan logam ini disimbolkan dengan Pb. Logam timbal ini
termasuk ke dalam logam golongan IVA pada tabel periodik unsur kimia, dan
mempunyai nomor atom (NA) 82 dengan berat atom (BA) 207,2 (Musriadi,
2014). Pb memiliki titik leleh 327oC dan titik didih 1.725
oC. Pada suhu 550-600
oC menguap dan membentuk oksigen dalam udara lalu membentuk timbal oksida.
Merupakan logam yang tahan terhadap peristiwa korosi atau karat, kecuali emas
dan merkuri, merupakan logam yang lunak sehingga dapat dipotong dengan
menggunakan pisau atau dengan tangan dan dapat dibentuk dengan mudah.
Namun, timbal sangat rapuh dan mudah mengkerut dalam pendinginan, sulit larut
dalam air dingin, air panas, dan air asam. Timbal dapat larut dalam asam nitrit,
asam asetat, dan asam sulfat pekat (Palar, 2008)
Garam dari logam timbal antara lain, yaitu PbF2, PbCl2, Pb(OH)+, dan
PbI2. Menurut Darmono (2001), penggunaan timbal dalam jumlah yang paling
besar adalah umtuk bahan produksi baterai pada kendaraan bermotor. Timbal
banyak digunakan dalam arsitektur dan konstruksi bangunan. Lembaran timbal
digunakan sebagai bahan atap, kelongsong, talang, dan tembok atap. Timbal juga
masih digunakan sebagai bahan patung, termasuk pada angkurnya. Dulunya
timbal juga digunakan untuk menjaga keseimbangan roda mobil, tetapi diganti
8
bahan lain karena alasan kesehatan dan lingkungan (USGS, 2017). Timbal juga
digunakan sebagai peredam suara, getaran, atau radiasi. Hal ini disebabkan
kepadatan dan nomor atom timbal yang tinggi, serta sifatnya yang mudah
dibentuk. Timbal tidak memiliki frekuensi resonansi alami, alhasil lembaran
timbal digunakan sebagai insulasi pada tembok, lantai, dan langit-langit studio
suara (Rich, 1994). Pipa organ sering dibuat dari timbal yang dipadukan dengan
timah untuk mengendalikan nada tiap pipa. Timbal merupakan bahan utama
untuk penangkal radiasi dalam ruangan sinar X maupun penelitian nuklir, karena
kepadatannya yang tinggi dan sifatnya yang sulit ditembus radiasi. Timbal cair
digunakan sebagai pendingin pada jenis reaktor nuklir yang disebut reaktor cepat
berpendingin timbal (Guruswamy, 2000)
Pb yang terakumulasi di udara dan terhirup oleh manusia setiap hari akan
diserap, disimpan dan kemudian tertampung dalam darah. Komponen Pb organik
seperti tetraethil Pb dapat langsung diserap oleh tubuh melalui kulit dan selaput
lendir (membram mukosa). Pb organik diserap terutama melalui saluran
pencernaan dan pernapasan yang merupakan sumber utama Pb dalam tubuh.
Tidak semua Pb yang terhirup atau tertelan ke dalam tubuh akan tertinggal di
dalam tubuh. Sekitar 5-10% dari jumlah yang tertelan akan diserap melalui
saluran pencernaan, dan juga sekitar 30% dari jumlah yang terhirup melalui
hidung akan diserap melalui saluran pernapasan akan tetap di dalam tubuh karena
dipengaruhi oleh ukuran dari partikel (Olivares, 2003). Akumulasi Pb pada anak
dengan umur di bawah 12 tahun dapat menyebabkan penurunan IQ. Selain itu Pb
dapat menghambat pertumbuhan otak, mengurangi kemampuan belajar dan
membaca, kurang pendengaran, gagap, dan kecenderungan menggunakan
9
kekerasan. Pada orang dewasa, PB dapat menyebabkan penyakit kardiovaskular,
tekanan darah tinggi, serangan jantung, kerusakan paru-paru, gangguan sistem
reproduksi, keguguran dan bahkan menyebabkan kanker (Ebadi et al., 2005).
2.2 Tanaman Mangga (Mangifera indica L.)
Mangga yang berkembang di Indonesia diperkirakan berasal dari India,
pemeliharaannya pun dipercaya telah ada seiring peradaban India. Tercatat dalam
sejarah bahwa mangga pertama kali ditemukan di lembah Indus, India oleh
Alexander Agung. Kata “manga” berasal dari bahasa Tamil, yang berarti mangas
atau man-kay. Dalam bahasa botani, mangga disebut Mangifera indica L. yang
berarti tanaman mangga berasal dari India (Pracaya, 2011)
Gambar 1. Daun Mangga
(Sumber: http://pilmapres.ristekdikti.go.id/)
2.2.1 Taksonomi dan Morfologi Tanaman Mangga
Dalam tatanama sistematika (taksonomi) tumbuhan, tanaman mangga
diklasifikasikan sebagai berikut:
Kingdom : Plantae
10
Divisi : Spermatophyta
Sub divisi : Angiospermae
Kelas : Dicotyledonae
Ordo : Sapindales
Famili : Anacardiaceae
Genus : Mangifera
Spesies : Mangifera spp
Tanaman mangga tumbuh dalam bentuk pohon berbatang tegak, banyak
cabang, berdaun rindang dan hijau sepanjang tahun. Tinggi tanaman manga
dewasa dapat mencapai sekitar 10-40 m dengan umur yang juga bisa sampai lebih
dari 100 tahun. Tanaman mangga rata-rata berbunga lebih dari satu kali sehingga
panen buah dapat dilakukan beberapa kali dalam satu periode karena buah manga
tidak matang secara bersamaan. Mangga yang dicangkok akan mulai berbuah
pada usia 4 tahun sementara mangga dengan pertumbuhan okulasi pada usia 5-6
tahun. Buah pertama yang nantinya dipanen hanya mencapai 10-15 buah, pada
umur pohon mangga yang ke 10 tahun jumlah buah yang dapat dipanen
meningkat sekitar 300-500 buah / pohon, dan terjadi peningkatan lagi pemanenan
pohon mangga pada umur 15 tahun mencapai 1000 buah / pohon, dan produksi
maksimum akan terjadi pada usia 20 tahun dengan potensi produksi hingga 2000
buah / pohon / tahun. (Tafajani, 2011).
Buah mangga mempunyai berbagai bentuk seperti bundar, bundar pendek
dengan ujung pipih, dan pipih agak bulat. Di dalam tubuh buah terdiri dari
beberapa bagian, yaitu:
a. Kulit buah mangga yang masih muda memiliki kulit berwarna hijau, tetapi
sebelum buah tersebut matang, warna daun akan berubah warna sesuai
dengan jenis dan ragamnya.
11
b. Daging buah mangga yang masih muda pada umumnya memiliki daging
kuning keputihan. Menuju daging buah tua atau matang akan berubah
menjadi warna kuning atau jingga. Rasa daging mangga yang bermacam-
macam, yaitu asam hingga manis dengan aroma khas di setiap jenis mangga.
c. Biji mangga berkeping dua dan memiliki sifat poliembrional, karena dari satu
biji dapat tumbuh lebih dari satu bakal tanaman (Rukmana, 1997).
2.3 Destruksi Asam
Destruksi menurut (Muchtadi, 2009) merupakan tahapan preparasi yang
bertujuan untuk menghilangkan efek matriks pada sampel, maka dalam
pendestruksi hendaknya memilih zat pengoksidasi yang cocok baik untuk logam
maupun jenis makanan yang akan dianalisis. Penggunaan destruksi basah
bertujuan untuk mengurangi resiko hilangnya logam yang diakibatkan pemanasan
yang sangat tinggi. Selain itu destruksi basah tidak memerlukan waktu pemanasan
yang lama, dan menghasilkan kadar logam yang maksimal. Destruksi basah
digunakan untuk perombakan sampel organik dengan asam-asam kuat, baik
tunggal maupun campuran seperti asam nitrat (HNO3), asam sulfat (H2SO4), asam
perklorat (HClO4) dan asam peroksida (H2O2) dengan pemanasan pada suhu
tertentu sampai larutan berwarna jernih. Destruksi asam ini dibagi menjadi 2,
yaitu destruksi basah dan destruksi kering.
2.3.1 Destruksi Asam Basah
Destruksi basah proses pengubahan sampel menggunakan asam kuat baik
tunggal maupun campuran, setelah itu, dioksidasi menggunakan zat pengoksidasi.
Hasil destruksi yang optimal ditandai dengan konstituen yang telah larut
12
sempurna (Raimon, 1993). Terdapat dua macam destruksi basah yaitu basah
terbuka dan basah tertutup. Destruksi basah terbuka yaitu campuran sampel dan
reagen asam dipanaskan secara terbuka dengan hot plate. Sedangkan destruksi
basah tertutup yaitu reaksi pelarutan dan pemecahan dilakukan dalam wadah
tertutup yang lebih aman terhadap penguapan dan pemuaian dari bahan. Destruksi
basah menggunakan pemanasan di atas hotplate dengan suhu yang telah
ditentukan dengan penambahan zat pengkosida asam-asam kuat. Apabila
penambahan sampel dengan zat pengoksidasi kemudian dipanaskan pada
temperatur yang cukup tinggi secara kontinu pada waktu yang cukup lama maka
sampel dapat teroksidasi sempurna dan meninggalkan elemen anorganik yang
sesuai untuk dianalisis (Anderson, 1987).
2.3.2 Destruksi Asam Kering
Dekstruksi kering menurut (Ervina, 2014) merupakan yang paling umum
digunakan dengan cara membakar habis bagian organik dan meninggalkan residu
anorganik sebagai abu untuk analisis lebih lanjut. Pada destruksi kering suhu
pengabuan harus diperhatikan karena banyak elemen abu yang dapat menguap
pada suhu tinggi, selain itu suhu pengabuan juga dapat menyebabkan dekomposisi
senyawa tertentu. Oleh karena itu suhu pengabuan untuk setiap bahan berbeda-
beda bergantung komponen yang ada dalam bahan tersebut. Pengabuan kering
dapat diterapkan pada hampir semua analisa mineral, kecuali merkuri dan arsen.
Cara ini lebih membutuhkan sedikit ketelitian sehingga mampu menganalisa
bahan lebih banyak dari pada pengabuan basah (Apriyanto, 1989). Namun pada
destruksi kering sering terjadi kehilangan unsur-unsur mikro tertentu karena suhu
pemanasan yang tinggi, dapat juga terjadi reaksi antara unsur dengan wadah.
13
2.4 Validasi Metode Uji
Validasi metode analisis merupakan penilaian untuk suatu parameter
tertentu, berdasarkan pada percobaan yang dilakukan di laboratorium, untuk
membuktikan bahwa parameter ini dapat memenuhi persyaratan untuk
penggunaannya (Harmita, 2004). Laboratorium harus memvalidasi dan
memverifikasi untuk setiap metode non-standar, metode yang dirancang atau
dikembangkan laboratorium, metode standar yang digunakan di luar ruang
lingkup, metode standar yang dimodifikasi dan metode standar untuk
mengkonfirmasi bahwa metode ini sesuai untuk digunakan (BSN, 2006)
Parameter verifikasi metode meliputi akurasi (ketepatan), presisi,
linearitas, batas deteksi (Limit of Detection) dan batas kuantifikasi (Limit of
Quantification), sensitivitas, spesifisitas (selektivitas), ketangguhan dan
ketahanan. Dalam memverifikasi metode pengujian ada parameter minimum yang
setidaknya harus dipenuhi yaitu presisi dan akurasi. (Sa’adah, & Ari, 2010).
1. Linearitas
Linearitas adalah kemampuan cara kerja analisis yang menghasilkan
tanggapan atau hasil analisis yang langsung dan proporsional terhadap konsentrasi
analit dalam sampel uji (Maryati, 2011). Uji linearitas suatu larutan memenuhi
syarat dapat dikatakan jika koefisien relasi mendekati nilai 1 (Supriatno, 2009)
2. Kecermatan (Accuracy)
Kecermatan merupakan ukuran yang menunjukkan derajat kedekatan hasil
analisis dengan kadar analit yang sebenarnya. Kecermatan juga dapat dikatakan
sebagai persen perolehan kembali (recovery) dari analit yang telah ditambahkan.
14
Kecermatan hasil analisis ini sangat bergantung kepada sebaran galat secara
sistematik di dalam keseluruhan tahapan analisis. Oleh karena itu, hanya dengan
mengurangi galat sistematik akan mencapai kecermatan yang tinggi contohnya
seperti menggunakan pelarut yang baik, pengontrolan suhu, menggunakan
peralatan yang telah dikalibrasi, dan pelaksanaan yang tepat, serta tata asas sesuai
prosedur. (Harmita, 2004)
Rentang kesalahan yang diizinkan pada setiap konsentrasi analit pada
matriks dapat dilihat pada Tabel 1 di bawah ini.
Tabel 1. Rentang Kesalahan pada Matriks
Analit pada matriks sampel Rata-rata yang diperoleh (%)
100 % 98-102
>10 % 98-102
>1 % 97-103
>0,1 % 95-105
0,01 % 90-107
0,001 % 90-107
1 ppm 80-110
100 ppb 80-110
10 ppb 60-115
1 ppb 40-120
3. Keseksamaan (precision)
Presisi dapat diartikan sebagai tingkat akurasi nilai dari hasil beberapa tes
yang dilakukan berulang kali. Presisi dibagi menjadi 3 jenis, yaitu repitabilitas
(laboratorium, peralatan dan analis yang sama), reproduksibilitas intra
(laboratorium dan peralatan yang sama dengan analis yang berbeda), dan
reproduksibilitas antar (laboratorium, peralatan, dan analis yang berbeda). (Arifin,
2006)
15
4. Batas Deteksi (Limit of Detection) dan Batas Kuantitasi (Limit of Quantity)
Batas deteksi (LOD) adalah batas terendah konsentrasi analit yang dapat
dideteksi bukan secara kuantitatif, sedangkan batas kuantifikasi (LOQ) adalah
batas terendah konsentrasi analit yang dapat diterapkan secara kuantitatif dengan
tingkat akurasi dan presisi yang dapat diterima ketika metode yang dimaksud
diaplikasikan (Vera, 2011)
5. Limit of Linearity (LOL)
Limit of Linearity adalah rentang kerja yang dibuat dan disesuaikan dengan
rentang sampel lalu nantinya akan dianalisis. Dari batas yang paling rendah
sampai batas yang paling tinggi. Dimulai dengan pembuatan deret standar rendah
disesuaikan dengan sampel. Setelah itu absorbansi dari deret standar akan dibaca
dengan dibentuknya kurva kalibrasi, yang menunjukkan bahwa konsentrasi
ditandai dengan sumbu x dan absorbansi ditandai dengan sumbu y. (Harmita,
2004).
6. Methods Detection Limit (MDL)
Methods Detection Limit merupakan batas deteksi metode yang bisa diuji
pada konsentrasi paling rendah. Proses MDL meliputi dari preparasi sampel
hingga pengukuran dengan isntrumen atau bisa dibilang proses pada metode yang
dilakukan hingga didapatkan hasil pengukuran. Biasanya sampel yang digunakan
Certified Raw Material (CRM) atau larutan standar tengah (Harmita, 2004).
16
2.5 Spektrofotometri Serapan Atom (SSA)
Spektrofotometri Serapan Atom (SSA) merupakan metode analisis unsur
kuantitatif berdasarkan penyerapan cahaya dengan panjang gelombang tertentu
oleh atom-atom logam dalam keadaan bebas (Skoog, 2000). Teknik analisis
spektroskopi adalah salah satu teknik analisis instrumen selain teknik
kromatografi kimia dan elektroanalisis. Teknik ini memanfaatkan fenomena
antara interaksi materi dengan gelombang elektromagnetik seperti sinar-X,
ultraviolet, cahaya tampak, dan inframerah. Fenomena interaksi bersifat spesifik,
baik absorbansi maupun emisi. Dari interaksi ini kita mendapatkan sinyal yang
disadap sebagai alat analisis kuantitatif dan kualitatif. Contoh teknik serapan atom
(SSA) yang merupakan alat yang tepat dalam analisis logam.
Alat SSA terbagi menjadi 2 bagian utama yaitu suatu sel atom yang
menghasilkan atom-atom gas bebas dalam keadaaan dasarnya dan suatu sistem
optik untuk pengukuran sinyal. Suatu skema umum dari alat SSA adalah sebagai
berikut:
Gambar 2. Skema Umum Komponen pada Alat SSA
(sumber:(Haswell,1991))
Cara kerjanya adalah SSA berdasarkan penguapan larutan sampel, setelah
logam yang terkandung di dalamnya akan diubah menjadi atom bebas dalam SSA
17
adalah alat penyemprot atau atomizer. Larutan unsur pertama disedot ke dalam
nebulizer yang berfungsi untuk mengubah larutan aerosol, yang merupakan
butiran butiran cair yang sangat halus, yang tersebar di udara. Kemudian, larutan
tersebut diubah ke dalam bentuk kabut (tetesan yang sangat halus dalam fase gas
atau aerosol di dalam spray chamber) yang berfungsi untuk membuat campuran
homogen dari gas oksidan dan bahan bakar aerosol. Kemudian dengan
penambahan gas, campuran homogen terjadi tepat sebelum dimasukkan ke dalam
pembakar. Atom menyerap radiasi dari sumber cahaya yang dipancarkan dari
lampu katoda (Hollow Cathode Lamp) yang mengandung unsur yang akan
ditentukan. Jumlah penyerapan radiasi kemudian diukur pada panjang gelombang
tertentu sesuai dengan jenis logamnya. (Darmono, 1995). Panjang gelombang
yang dihasilkan oleh sumber radiasi sama dengan panjang gelombang yang
diserap oleh atom-atom dalam nyala api. Absorbansi mengikuti hukum Lambert-
Beer, yaitu absorbansi berbanding lurus dengan panjang nyala api yang
melaluinya cahaya dan konsentrasi uap atom berada dalam nyala api. Kedua
variabel ini sulit untuk ditentukan tetapi panjang nyala dapat dijaga konstan
sehingga absorbansi hanya berbanding lurus dengan konsentrasi analit dalam
larutan sampel. (Suryati, 2011)
2.5.1 Instrumentasi Spektrofotometri Serapan Atom
Alat spektrofotometer serapan atom terdiri dari rangkaian dalam diagram
skematik berikut: Komponen-komponen Spektrofotometri Serapan Atom (SSA)
18
1. Sumber Sinar
Sumber radiasi SSA adalah Hollow Cathode Lamp (HCL). Setiap
pengukuran dengan SSA kita harus menggunakan Hollow Cathode Lamp
khusus. Hollow Cathode akan memancarkan energi radiasi yang sesuai dengan
energi yang dibutuhkan untuk proses transisi elektron atom. Hollow Cathode
Lamp terdiri dari katoda cekung silindris yang terbuat dari elemen yang sama
untuk dianalisis dan anoda yang terbuat dari tungsten. Pada sumber sinar ini
akan dialirkan tegangan dengan besar arus tertentu, pijaran yang dihasilkan
oleh atom logam katoda akan diuapkan. Eksitasi atom akan terjadi dan
Panjang gelombang tertentu akan muncul yang disebabkan pancaran radiasi.
Sumber radiasi lain yang sering digunakan adalah "Electrodless Discharge
Lamp" Lampu ini memiliki prinsip kerja yang hampir sama dengan Hollow
Cathode Lamp (lampu katoda cekung), tetapi memiliki output radiasi yang
lebih tinggi dan biasanya digunakan untuk analisis As dan Se, karena lampu
HCL untuk unsur ini memiliki sinyal lemah dan tidak stabil.
2. Sumber atomisasi
a. Nyala udara asetilen
Nyala udara asetilen ini lebih sering digunakan untuk analisis logam
menggunakan spektrofotometri serapan atom. Atom netral akan terbentuk
karena temperature nyalanya yang dapat dibilang lebih rendah, dan oksida
akan terbentuk dari nyala yang kaya bahan bakar.
19
b. Nitrous oksida-asetilen
Nitrous oksida-asetilen disarankan untuk menentukan unsur-unsur yang
mudah membentuk oksida dan juga yang sulit terurai. Hal ini disebabkan suhu
nyala yang dihasilkan relatif tinggi. Unsur-unsurnya adalah: Al, B, Mo, Si, So,
Ti, V, dan W.
3. Monokromator
Monokromator adalah perangkat yang berguna untuk memisahkan radiasi
yang tidak dibutuhkan lagi dari spektrum radiasi lain yang telah dihasilkan
oleh Hollow Cathode Lamp.
4. Detektor
Detektor adalah perangkat yang dapat mengubah energi cahaya menjadi
suatu energi listrik, yang nantinya akan memberikan sinyal listrik terkait
dengan daya radiasi kemudian diserap oleh permukaan yang sensitif.
5. Sistem pengolah
Suatu sistem yang berguna untuk memproses arus yang besar dari detektor
untuk menjadi jumlah daya serap atom transmisi yang kemudian dikonversi
menjadi data dan masuk ke dalam sistem pembacaan.
6. Sistem pembacaan
Sistem pembacaan ini merupakan bagian yang menampilkan suatu angka
atau gambar yang nantinya akan diproses dan dapat dibaca oleh mata.
(Khopkar, 1990)
20
2.5.2 Faktor-faktor Interferensi dalam Spektrofotometri Serapan Atom
1. Chemical Interference (Gangguan Kimia)
Penyebab : Terjadinya reaksi kimia antara pengotor/pengganggu
(kontaminan) dengan analit yang menghasilkan senyawa stabil secara
thermal Senyawa stabil tersebut dapat berupa:
a. Pembentukan garam ahuninat, silikat, phospat dan sulfat pada
penentuan logam-logam terutama logam alkali tank
b. Pembentukan senyawa refraktori Oxida ( oxida yang sangat stabil )
akibat reaksi antara gas oksigen dan atom analit pada nyala udara-
asetilen
Akibat : Pengurangan pembentukan atom-atom gas pada keadaan
dasar, sehingga menurunkan absorbansi logam yang dianalisa ( sensitifitas
berkurang )
Solusi :
a. Penggunaan nyala yang lebih panas akan dengan mudah
mendekomposisikan sampel.
b. Penggunaan zat pembebas (releasing agent). Releasing agent
(kation pesaing) akan lebih mudah bereaksi dengan interferent
melepaskan analit. Releasing agent yang biasa digunakan adalah
EDTA, La/Sr ( sebagai nitrat/clorida ), polyhidroxi alkohol.
c. Dengan ekstraksi selektif yang dapat mengurangi zat pengganggu,
sampai pada konsentrasi zat pengganggu yang tidak mengganggu.
Bila perlu ekstraksi diulang untuk memurnikan sampel dari
pengotor.
21
d. Menambah kecepatan aliran bahan bakar (membuat nyala kaya
bahan bakar/fuel rich). Hal ini akan mengurangi pembentukan
refraktori oksida.
2. Ionization Interference (Gangguan Interferensi )
Penyebab : Ionisasi atom gas. Terjadi karena temperatur nyala
mempunyai cukup energi untuk menyebabkan elektron lepas dari atom
membentuk ion.
Akibat : Atom-atom pada keadaan dasar berkurang sehingga
mengurangi sensitifitas. Terjadi pada unsur-unsur yang mempunyai
potensial ionisasi rendah ( Gol IA dan IIA) pada nyala udara-asetilen atau
N2O-asetilen. karena garis spektrum dari ion-ion unsur tidak terjadi pada
yang sama dengan garis spektrum atom unsur tersebut, maka ionisasi
cenderung menurunkan absorbansi.
Solusi :
a. Penambahan excess garam-garam alkali klorida yang mempunyai
potensial ionisasi lebih rendah ke dalam sampel dan standart untuk
menekan ionisasi. Atom-atom yang lebl mudah terionisasi
menyebabkan konsentrasi elektron besar dalam fasa uap. Elektron-
elektron ini dengan aksi massa akan menekan ionisasi atom-atom
yang dianalisa.
b. Menggunakan nyala yang lebih dingin seperti nyala udara-propana,
tapi gangguan kimia mungkin saja terjadi.
22
3. Matrix Interference
Penyebab : Perbedaan sifat-sifat fisis seperti viskositas dan tegangan
pengukpan antara sampel dan larutan standar. Hal ini disebabkan oleh
karena sampel mengandung garam/asam, suhu yang berbeda atau karena
pelarut yang berbeda antara sampel dan standart. Bisa juga karena beda
kecepatan dan efisiensi nebulization yang menyebabkan viskositas dan
tegangan permukaan sampel dan viskositas berbeda.
Akibat : dapat memperkuat sinyal analit/sensitifitas atau
sebaliknya.
a. Penambahan pelarut organik : memperkuat sensitifitas/sinyal
analit. Larutan dengan pelarut air yang berlebihan cenderung
menyebabkan terjadinya interferensi, karena terbentuknya radikal-
radikal yang tidak bisa dipecahkan atau bahkan membentuk oxida-
oxida dengan logam. Efek mi bisa dikurangi dengan penambahan
pelarut organik. Karena viskositas pelarut organik lebih kecil
daripada air, sehingga dapat menurunkan ukuran tetesan. Karena
terjadinya penurunan tegangan permukaan inilah maka menambah
kecepatan penguapan solvent yang diakibatkan oleh titik didih
solvent yang berkurang.
b. Adanya kadar garam/asam yang tinggi menyebabkan sampel
memiliki viskositas yang lebih besar dari standar sehingga
menekan sinyal analit/mengurangi sensitifitas.
23
Solusi :
a. Menyamakan komponen matrix antara standar dan sampel.
Beberapa reagen yang ditambahkan pada sampel selama preparasi
juga harus ditambahkan pada standart. Jika menggunakan pelarut
organik, maka sampel dan standar harus menggunakan pelarut
organik yang sama.
b. Dengan pengenceran sampel sampai efek-efek garam/asam yang
larut terabaikan.
c. Sampel dan standart harus didinginkan sampai mencapai
temperatur yang sama sebelum diinjeksikan.
d. Mengekstrak kation analit yang ditentukan dengan menggunakan
pelarut (releasing agent ) atau ion exchange.
4. Spektral Interference (Gangguan Spektrum )
Penyebab :
a. Terdapat garis-garis spektr un yang sangat berdekatan antara garis
spektrum analit dengan garis spektrum unsur atau pita moiekul
yang tidak ditentukan sehingga gagal dipisahkan oleh
monokromator sehingga akan dibaca seluruhnya oleh detektor.
b. Keterbatasan kemampuan monokromator untuk memisahkan garis
spektrum analit dan unsur-unsur lain.
Akibat : Hasil analisa yang lebih besar ( karena adanya kontribusi
unsur /molekul lain )
Solusi :
a. Penggunaan lampu single elemen
24
b. Menggunakan slit monokromator yang lebih sempit
c. Memilih panjang gelombang garis spektrum yang lain yang tidak
overlap
d. Memodulasi amplitudo sumber radiasi ( memodulasi sumber
radiasi sehingga dapat dibedakan dengan emisi sumber-sumber
lain. Dengan demikian sinyal dari flame yang tidak dimodulasi
ditolak )
e. Dengan mengekstraksi pelarut untuk mengisolasi analit.
5. Background Absorption (Absorpsl Background)
Penyebab :
a. Penghamburan cahaya hollow cathode oleh partikel-partikel gas
dalam nyala.
b. Absorpsi molekular ( pita lebar ) yang tidak stabil secara thermal
cahaya hollow cathode oleh molekul-molekul dalam nyala.
Akibat : Cahaya yang diteruskan menjadi berkurang maka absorbsi
sinyal bertambah.
Solusi :
a. Penggunaan nyala temperatur yang lebih tinggi yang dapat
memecahkan zat-zat pengabsorpsi molekular ( lihat solusi
gangguan kimia )
b. Penggunaan "background correction" yaitu suatu sumber
continuum lampu deuterium arc dengan panjang gelombang UV,
atau lampu Tungsteniodida dengan panjang gelombang vissbel.
25
6. Emission Interference (Gangguan Emisi )
Penyebab : Konsentrasi analit yang tinggi sehingga sinyal emisi
masuk ke dalam bandpass spektrum yang digunakan.
Akibat : kesalahan analisa ( mengurangi jumlah absorbansi )
Solusi :
a. Pengurangan lebar slit
b. Menaikkan arus lampu
c. Mengencerkan sampel
d. Menggunakan nyala yang lebih dingin (D. Cholid , 2018)
2.6 Sumber-sumber Ketidakpastian Pengukuran
Ketidakpastian adalah suatu parameter yang menetapkan rentang nilai
yang didalamnya diperkirakan nilai benar yang diukur berada. Menghitung
rentang tersebut dikenal sebagai pengukuran ketidakpastian. Perhitungan
ketidakpastian merupakan bagian yang tidak terpisahkan dalam pengukuran
kimia. Hasil ukur terhadap besaran kimia pasti memiliki simpangan/deviasi. Hal
ini antara lain disebabkan oleh alat yang digunakan dalam pengukuran
mempunyai keterbatasan ukur. pengukuran yang akurat dan berkualitas menjadi
hal yang penting sebagai jaminan bahwa hasil yang diperoleh bersifat sebanding
dan dapat dipertanggungjawabkan karena berkaitan erat dengan perlindungan dan
keselamatan konsumen. Salah satu parameter yang dapat digunakan sebagai
jaminan keandalan dari suatu pengukuran adalah estimasi ketidakpastiannya.
Menurut ISO (atau VIM, Vocabulaire international de Métrologie), definisi
ketidakpastian secara metrologis adalah suatu parameter non-negative yang
menggambarkan sebaran nilai kuantitatif suatu hasil pengujian berdasarkan
26
informasi yang digunakan. Ketidakpastian pengukuran merupakan nilai
ketidakpastian yang diperoleh dari pengukuran suatu bahan atau material dengan
menggunakan peralatan dan instrumen yang terkalibrasi, sehingga nilai
ketidakpastian yang diperoleh merupakan nilai ketidakpastian gabungan dari
setiap langkah atau proses pengukuran.
Dalam tahap ini perlu dibuat daftar yang menyeluruh dari semua sumber
ketidakpastian. Tujuannya adalah untuk mempunyai gambaran yang jelas tentang
keseluruhan sumber yang mungkin berpengaruh pada ketidakpastian. Cara
termudah untuk melakukannya dimulai dari rumus perhitungan. Semua parameter
yang terdapat dalam rumus pasti memiliki ketidakpastian yang menjadi sumber
ketidakpastian yang utama. Selain itu mungkin terdapat parameter lain yang tidak
muncul secara eksplisit dalam rumus tapi secara nyata berkontribusi terhadap
hasil uji, seperti presisi, recovery dan suhu. Semua parameter itu harus
diikutsertakan dalam perhitungan ketidakpastian. Masing-masing sumber
ketidakpastian yang telah teridentifikasi dijabarkan kedalam bentuk diagram
sebab akibat yang biasa disebut sebagai diagram Fishbone. Secara umum sumber-
sumber ketidakpastian meliputi seperti hal-hal berikut ini:
• Sampling
• Spesifikasi instrumen
• Kemurnian reagen dan zat standar
• Kesalahan acak (repeatabilitas, reprodusibilitas)
• Personel
• Preparasi contoh
• Kurva kalibrasi (Susanto, 2010)
27
BAB III
METODE PENELITIAN
3.1 Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian ini dimulai pada bulan Oktober – Desember 2019 di Pusat
Penelitian dan Pengembangan Kualitas dan Laboratorium-Kementerian
Lingkungan Hidup dan Kehutanan (P3KLL-KLHK), Serpong.
3.2 Alat dan Bahan
3.2.1 Alat
Peralatan yang digunakan dalam sampling adalah box, gunting, plastik.
Peralatan dalam penelitian adalah timbangan analitik OHAUS, spatula, penangas
listrik, cawan porselin, desikator, kertas saring whatman 0,45 µm, mortar, botol
polyetilen, dan oven. Spektrofotometer serapan atom nyala Hitachi Z-2300 dan
peralatan gelas lainnya.
3.2.2 Bahan
Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah daun Mangga,
larutan standar Pb 1000 ppm, air suling deionisasi bebas CO2 /ASTM (D1193-
91) tipe 2, CRM ERA 282-500, batu didih, asam nitrat (HNO3) pekat 65%, dan
asam perklorat (HClO4) pekat 70%.
28
3.3 Diagram Alir
Gambar 3. Diagram Alir Penelitian
Daun
Mangga Penentuan Lokasi dan Pengambilan Sampel
Daun Mangga dicuci bersih dan dikeringkan
Daun mangga dicacah dan dioven dengan
suhu 80oC selama 24 jam
20 Sampel
Analis 1
20 Sampel
Analis 2
Penambahan spike
Penambahan HNO3 10 mL dan
diamkan 24 jam
Destruksi Asam dengan HNO3
65% dan HClO4 70%
Larutan Sampel
Analis 1 dan 2
Analisa Pengukuran Kadar Pb
dengan AAS Z-2300 flame
Penyaringan Sampel
Validasi Metode
(Linearitas, Akurasi, Presisi,
Batas Deteksi Metode)
29
3.4 Penentuan Lokasi Pengambilan Sampel
Dilakukan pengambilan sampel ialah di perumahan Citra Prima Serpong,
Setu, Tangerang Selatan, Banten yang terdapat pada gambar 4.
Gambar 4. Lokasi Pengambilan Sampel
(Sumber : https://www.google.com/maps/place/)
3.5 Teknik Pengambilan Sampel Daun Mangga (P3KLL-KLHK)
Pengambilan daun pada pohon dengan usia ±6-7 tahun dibagi dalam 3
bagian tajuk, yaitu tajuk atas, tajuk tengah, tajuk bawah dengan posisi daun yang
diambil berdasarkan arah mata angin. Diambil daun mangga mencapai berat
sekitar 40 gram. Sampel daun diambil 2 kali ulangan. Kemudian dimasukkan
kedalam plastik lalu dimasukan ke dalam box pendingin dengan suhu ± 4o
C untuk
dibawa ke Laboratorium.
30
3.6 Preparasi Sampel Daun Mangga (AOAC, 2005)
Daun mangga dari pohon dicuci dan dibersihkan dari debu yang menempel
didaun dengan aquades DHL < 2 μS/cm, kemudian sampel dikeringkan dengan
udara pada suhu ruang, sampel dipotong kecil-kecil lalu dihomogenkan, kemudian
dipanaskan dalam oven pada suhu 80o C selama 24 jam, digerus sampel sampai
halus dengan mortar, lalu disimpan dalam botol polietilen bertutup.
3.7 Pembuatan Larutan Uji
3.7.1 Pembuatan larutan baku standar Pb 100 ppm
Dipipet 10 mL larutan induk standar logam Pb (1000 ppm) ke dalam labu
ukur 100 mL kemudian ditambahkan aquadest sampai tanda tera.
3.7.2 Pembuatan Spike (Standar + Sampel) Pb 0,4 ppm
Dipipet 0,2 mL larutan standar Pb 100 ppm kedalam sampel yang akan di
destruksi dan dimasukan kedalam labu 50 mL, lalu himpitkan dengan larutan
sampel dan aquades sampai tanda tera.
3.7.3 Pembuatan Larutan Standar Pb
Dibuat deret standar proporsional dengan rentang konsentrasi sesuai
dengan APHA 2017 Tabel 3111A.1 yaitu 1-20 ppm. Larutan baku standar Pb 0,2
ppm ditambahkan sebagai konsentrasi terendah sesuai dengan APHA 3030H
2017.
3.8 Destruksi Asam (AOAC, 2005)
Dimasukan sebanyak 1 gram daun hasil preparasi kedalam beaker glass
250 mL, 10 mL HNO3 pekat ditambahkan kedalam beaker glass kemudian ditutup
31
dengan kaca arloji dam didiamkan selama 24 jam. Kemudian ditambahkan 25 mL
akuadest dan 3 – 5 butir batu didih. dan dipanaskan diatas penangas listrik hingga
volume larutan setengah dari volume awal dengan suhu penangas 105-120o
C.
Selanjutnya diangkat dan didinginkan, lalu ditambahkan 5 mL HNO3 pekat 65%
dan 2 mL HClO4 pekat 70%. Contoh uji dipanaskan kembali hingga timbul asap
putih dan larutan menjadi lebih jernih. Pemanasan dilanjutkan sampai volume ± 5
mL. Contoh uji didinginkan kemudian disaring, filtrat ditempatkan pada labu ukur
50 mL dan ditambahkan akuades sampai tanda tera, selanjutnya diukur dengan
menggunakan spektrofotometri serapan atom.
3.9 Pengukuran kurva kalibrasi dan pengukuran kadar logam (APHA,
2017)
Alat SSA diatur dan dioptimalkan untuk analisis logam berat sesuai
dengan petunjuk penggunaan alat. Larutan kerja diaspirasikan, ke dalam SSA
pada panjang gelombang optimal pada logam timbal (Pb). Panjang gelombang
yang digunakan untuk logam timbal (Pb) adalah 248,3 nm. Kurva kalibrasi dibuat
dari data diatas atau ditentukan persamaan garis lurusnya, dengan batas linearitas
kurva kalibrasi (r) > 0,995. Kemudian, diaspirasikan larutan SRM, blanko contoh
uji yang didapat dari kurva kalibrasi dalam SSA pada panjang gelombang
optimal logam timbal (Pb).
3.10 Pembuatan Kurva Kalibrasi (Linearitas) (ICH, 2005)
Batas yang digunakan agar penentuan kurva kalibrasi ini valid adalah jika
nilai koefisien korelasinya lebih dari 0,995 (r ≥ 0,995). Kurva Standar dibuat
dengan grafik antara Konsentrasi (C) dengan Absorbansi (A) yang akan
32
membentuk garis linier atau garis lurus melewati titik nol. Larutan standar 0 ; 0,2 ;
6 ; 10 ; 15 ; 20 ppm diabsorbansi hingga membentuk kurva linear yang sesuai
(dengan r > 0.9995).
3.11 Penentuan Limit of Linearity (LOL) (Eurachem, 2014)
Batas yang digunakan agar penentuan limit dari linearitas ini valid adalah
jika besar nilai F tabel lebih besar daripada nilai F hitung (F tabel > F hitung).
Nilai F tabel adalah 5,3510.
Nilai F hitung dapat dihitung dengan persamaan sebagai berikut.
........................................................................(1)
Keterangan :
SDkonsentrasi rendah : standar deviasi nilai absorbansi yang dihasilkan dari
larutan berkonsentrasi rendah
SDkonsentrasi tinggi : standar deviasi nilai absorbansi yang dihasilkan dari
larutan berkonsentrasi tinggi
3.12 Penentuan Akurasi dengan Standar Tengah (Eurachem, 2014)
Batas yang digunakan agar penentuan akurasi dengan standar tengah ini
valid adalah jika nilai % RSD ≈ 9,17 %, nilai % Trueness ≈ % R≈ 80% - 115%,
dan nilai % Bias ≈ - 20% - (+15%).
Persamaan untuk menghitung nilai % RSD adalah sebagai berikut.
.........................................................................................(2)
33
Keterangan:
% RSD: standar deviasi relatif (%)
: nilai rata-rata konsentrasi hasil pengukuran
SD : standar deviasi
Persamaan untuk menghitung nilai % R adalah sebagai berikut.
.....................................................................(3)
Keterangan:
% R : nilai perolehan kembali (recovery) dalam persen
Persamaan untuk menghitung nilai % bias adalah sebagai berikut.
..........................................................................................(4)
Keterangan:
% bias : selisih nilai rerata hasil pengujin dengan nilai sebenarnya
% R : nilai perolehan kembali (recovery) dalam persen
3.13 Penentuan Methods Detection Limit (MDL)
Batas yang digunakan agar penentuan MDL ini valid adalah jika nilai
MDL lebih kecil daripada kadar spike, besar kadar spike lebih kecil dibanding 10
kali nilai MDL, besar signal/noise (S/N) berkisar antara 2.5 sampai 10, nilai %
RSD lebih kecil sama dengan 0,67 CV Horwitz. Dan nilai % R ≈ 70% - 125%.
Persamaan untuk menghitung nilai % RSD dapat dilihat pada persamaan (2). Nilai
MDL dapat dihitung dengan persamaan sebagai berikut.
…………………………………………………………...…..(5)
34
Keterangan:
MDL : nilai method detection limit
SD : standar deviasi
Persamaan untuk menghitung nilai LoQ adalah sebagai berikut.
………………………………………………………………..(6)
Keterangan:
LoQ : nilai batas kuantitas
MDL : nilai method detection limit
Persamaan untuk menghitung nilai S/N adalah sebagai berikut.
……………………………………………………..…………………(7)
Keterangan:
S/N : nilai signal to noise
: nilai rata-rata konsentrasi hasil pengukuran
SD : standar deviasi
Persamaan untuk menghitung nilai CV (Koefisien Variasi) Horwitz adalah
sebagai berikut
…………………………………………(8)
Keterangan:
CV Horwitz : koefisien variasi Horwitz
35
3.14 Penentuan Presisi (Eurachem, 2014)
Bila pengulangan penelitian yang dilakukan lebih dari dua kali, maka
presisi ditentukan berdasarkan nilai simpangan baku relatif yang dinyatakan
dalam prosentase (relative standard deviation), yaitu:
% RSD = x 100 % ……………………………..………………...…(9)
Nilai % RSD yang diperoleh dari hasil pengulangan penelitian tidak
diperkenankan melebihi batasan presisi yang dirumuskan oleh persamaan
modifikasi Dr. Horwitz, yaitu:
Horwitz = ………………………………..…………...……(10)
Keterangan:
Horwitz = % RSD yang diharapkan
C = kadar analit berkaitan dengan hasil pengulangan penelitian yang
dinyatakan dalam bentuk fraksi
36
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian ini dilakukan dengan melewati beberapa tahapan, seperti:
Pemilihan dan pengambilan sampel, preparasi sampel menggunakan metode
destruksi asam, penentuan kadar timbal (Pb) pada sampel daun mangga, dan
analisis data yang diperoleh dari hasil penelitian sesuai dengan parameter validasi
yang telah ditentukan. Sampel yang digunakan pada penelitian ini adalah daun
mangga. Sampel dipilih secara random, karena pada penelitian ini mencakup pada
validasi seluruh tumbuhan tidak hanya digunakan untuk daun mangga saja.
Pemilihan sampel tentunya dipilih dengan pertimbangan-pertimbangan
dan disesuaikan dengan kriteria seperti tingkat ke-ekonomisan dari sampel yang
mudah dicari, dan juga karena daun mangga mudah dipisahkan dari tulang
daunnya sehingga penelitian dapat berjalan sesuai dengan tujuan yang diharapkan.
Pengambilan sampel dilakukan disatu titik, dengan tempat yang telah
dipertimbangkan terdapat potensi pencemaran logam timbal (Pb) pada lingkungan
tersebut, dimana lokasi pengambilan sampel ini dijadikan sebagai tempat
masyarakat untuk beraktifitas sehari-hari. Di lokasi tersebut dilakukan 2 kali
pengambilan sampel dengan analis yang berbeda dan dengan waktu yang berbeda
juga.
4.1 Sampel Daun Mangga
Proses preparasi sampel daun mangga yang telah dicuci, dikeringkan, dan
dipisahkan dari serat serat kasar selanjutnya sampel daun mangga dimasukkan ke
37
dalam oven dalam waktu 24 jam untuk mendapatkan sampel dengan kekeringan
yang sempurna, karena untuk menghilangkan kadar air yang ditakutkan akan
mengkontaminasi sampel. Setelah 24 jam, penumbukan sampel dengan
menggunakan mortar harus dilakukan satu persatu saat sampel masih panas,
dikarenakan jika ditumbuk secara bersamaan, ditakutkan sampel yang lainnya
akan layu dan sulit untuk ditumbuk sampai halus. Sampel yang sudah halus,
dimasukkan ke dalam beaker glass 250 mL dengan bobot masing-masing ± 1
gram dan totalnya adalah 20 beaker glass untuk analis 1 dan 20 beaker glass
untuk analis 2, yang dimana 10 sampel untuk setiap analis sudah diberikan spike.
Sampel yang sudah dimasukkan ke dalam beaker glass akan ditambahkan HNO3
pekat, lalu ditutup dengan kaca arloji, dan didiamkan selama semalam di dalam
lemari asam.
4.2 Hasil Destruksi Asam
Destruksi asam atau destruksi basah tertutup digunakan pada penelitian ini
karena suhu yang digunakan relatif lebih rendah dibandingkan dengan destruksi
kering sehingga hilangnya unsur-unsur sangat kecil yaitu menggunakan suhu 105-
120°C. Peralatan yang digunakan pun lebih sederhana seperti penangas, beaker
glass, kaca arloji dan lainnya, sedangkan destruksi kering menggunakan tanur
untuk proses pengabuan sampel. Proses oksidasi lebih cepat dikarenakan dengan
pengabuan basah dimana penggunaan asam nitrat untuk penghancuran sampel
tanpa menggunakan suhu yang tinggi dengan maksud menghindari kehilangan
mineral akibat penguapan sehingga saat ditambahkan asam perklorat pada proses
pemanasan sampel akan langsung teroksidasi dengan cepat dan sempurna dan
38
waktu yang dibutuhkan juga relatif lebih cepat dari destruksi kering karena
destruksi kering melalui proses tanur selama 8 jam. Setelah penyimpanan sampel
di dalam lemari asam selama semalaman, sampel ditambahkan aquadest dan batu
didih, setelah itu dipanaskan di atas hotplate, pemanasan bertujuan untuk
menyempurnakan proses destruksi dan mempercepat proses pemutuskan ikatan
senyawa kompleks antara logam dengan senyawa organik. Pemanasan
memberikan energi yang memungkinkan untuk memutus ikatan kimia sehingga
logam terbebas dari sampel yang banyak disusun oleh senyawa organik.
Penggunaan variasi zat pengoksidasi bertujuan untuk memperoleh kadar logam
maksimal dalam proses destruksi. Asam nitrat merupakan asam yang paling
utama dan sering digunakan dalam proses destruksi. Dalam keadaan panas, asam
nitrat akan mengoksidasi logam, sehingga logam dapat larut dengan sempurna
dalam asam nitrat. Proses terjadinya oksidasi ketika terbentuk asap kecokelataan
dari larutan sampel. Pada proses destruksi logam diubah menjadi bentuk
garamnya yaitu M-(NO)x yang mudah larut dalam air (Wulandari, 2013)
Reaksi yang terjadi ketika sampel didestruksi dengan asam nitrat sebagai
berikut:
2Pb(CHO)x(s) + 2HNO3(aq) → Pb(NO3)2(aq) + 2CO2(g) + 2NO(g) + 2H2O(l)
Logam Pb pada sampel daun mangga yang berikatan dengan senyawa
organik (CHO)x akan dioksidasi oleh asam nitrat menjadi bentuk garamnya
(Pb(NO3)2), sedangkan senyawa organiknya akan membentuk gas CO2 dan NO.
Gas ini akan meningkatkan tekanan saat destruksi berlangsung. Saat pemanasan
berlangsung, volume larutan akan berkurang dari volume sebelumnya. Hal ini
39
dikarenakan senyawa yang mempunyai titik didih dibawah 100°C dapat menguap
seperti H2O. Sedangkan senyawa Pb(NO3)2 masih tetap tertinggal dalam sampel
karena timbal mempunyai titik didih 1740°C. Timbal (II) nitrat akan terionisasi
membentuk ion Timbal (II) dan ion nitrat seperti pada rekasi berikut:
Pb (NO3)2 (aq) → Pb2+
+ 2NO3-
Dalam penelitian ini juga digunakan HClO4 untuk membantu
mendestruksi sampel. Larutan pengoksidasi HClO4 dapat memaksimalkan
pemutusan logam timbal dari senyawa organik yang ada dalam sampel yang tidak
dapat tereduksi oleh larutan HNO3 (Oktrin, 2016) Reaksi yang terjadi sebagai
berikut:
Pb(CHO)x(s) + HNO3 (aq) + HClO4(aq) → Pb(NO3)x(aq) + CO2(g) + NO2(g) +
HClO3(l)
Pada HClO4 akan mengalami reduksi dengan HClO3 yang berawal memiliki
bilangan oksidator +7 menjadi +5 sehingga bersifat oksidator. Kemudian pada
HNO3 mengalami reduksi dengan NO. Kelarutan perklorat umumnya larut dalam
air. Kalium perklorat adalah salah satu dari yang paling sedikit larut dan natrium
perklorat adalah salah satu dari yang paling banyak larut. (Vogel, 1990)
Perubahan warna larutan dari kuning keruh menjadi kuning jernih terjadi
saat proses destruksi berlangsung. Gelembung gas NO2 disekitar labu alas bulat
yang keluar mengindikasikan adanya proses oksidasi sampel yang disebabkan
oleh pemanasan. Proses destruksi dihentikan apabila diperoleh larutan yang
jernih, yang mengindikasikan bahwa ikatan logam pada sampel telah terputus,
sehingga diperoleh analit berupa Pb ionik. Akibat dekomposisi bahan organik
40
oleh asam nitrat, senyawa organik dalam sampel yang berikatan dengan logam
timbal (Pb) akan terlepas, kemudian diubah ke dalam bentuk garamnya menjadi
Logam (NO3)x yang mudah larut dalam air. Penggunaan dua jenis asam kuat
berupa HNO3 dan HClO4 sebagai zat pengoksidasi akan meningkatkan kekuatan
asam, sehingga proses destruksi berlangsung maksimal. Penggunaan kombinasi
asam sebagai zat pengoksidasi lebih menguntungkan jika dibandingkan dengan
asam tunggal karena kombinasi asam akan memberikan kekuatan asam yang lebih
baik, khususnya untuk melarutkan logam-logam yang terdapat dalam sampel
organik dan mendegradasi sampel organik. (Oktrin, 2016).
4.3 Hasil Validasi Metode Analisis
Validasi metode analisis pada dasarnya perlu dilakukan untuk menjamin
bahwa metode yang digunakan spesifik, akurat dan reprodusibel sehingga hasil
penelitian dapat dipertanggungjawabkan. Pada penelitian ini, peneliti mengukur
beberapa parameter validasi yaitu linearitas, akurasi, presisi, batas deteksi metode.
4.3.1 Kurva Kalibrasi (Linearitas)
Kurva kalibrasi merupakan perhitungan empiris yang menghubungkan
respon alat terhadap konsentrasi dari analit tertentu. Absorbansi yang dihasilkan
akan memiliki hubungan linear dengan konsentrasi analit yang diukur (Stone and
Ellis, 2008). Linearitas berguna untuk melihat apakah detektor memberikan hasil
yang linear terhadap konsentrasi analit yang kemudian dibuat kurva kalibrasi
untuk mendapatkan persamaan regresi linear. Persamaan regresi linear sebagai
berikut: Y = a ± bx Dimana y = respon detektor, a = intercept, b = slope, x =
kadar. Rekomendasi dari ICH, dalam menguji linearitas setidaknya 5 tingkat
41
konsentrasi yang harus digunakan dan linearitas tercapai ketika nilai dari
coefficient of determination (r2) ≥ 0,997 atau r ≥ 0,9985. Slope dari regresi linear
akan memberikan gambaran tentang sensitivitas (Chan, 2004). Kurva kalibrasi
timbal (Pb) sampel daun mangga dapat dilihat pada gambar dibawah ini.
Gambar 5. Kurva Kalibrasi Timbal (Pb)
Terlihat pada Gambar 5, diperoleh persamaan regresi linearnya serta nilai
koefisien korelasinya dari kurva kalibrasi yang telah dibuat. Nilai persamaan
regresi yang diperoleh adalah y = 0,0107x + 0,0078 dan nilai linearitas (R2)
0,9979 berarti ± 99,79%. Sensitivitas merupakan rasio perubahan sinyal tiap unit
perubahan konsentrasi analit. Nilai sensitifitas yang besar menunjukkan
perubahan konsentrasi analit yang kecil dan memberikan respon yang signifikan.
(Dewi, 2012). Pada kurva kalibrasi timbal (Pb) ini ditentukan kembali batas
linearitas tersebut.
4.3.2 Penentuan Batas Linearitas
Batas Linearitas atau Limit of Linearity (LOL) merupakan rentang kerja
yang dibuat mulai dari batas terendah hingga batas tertinggi dengan pengulangan
sebanyak 10 kali. LOL berarti titik akhir nilai konsentrasi garis regresi ini masih
42
linear pada konsentrasi tersebut. Kurva kalibrasi dibuat dengan menggunakan
deret standar sampai titik dimana terjadi penurunan nilai absorbansi. Kemudian
dilakukan pengukuran absorbansi larutan ekstraksi dari CRM sebanyak 7 kali
pengulangan dengan mengaspirasikannya ke dalam SSA. Setelah didapatkan nilai
absorbansinya, dihitung nilai MDL (Method Detection Limit) dengan batas
keberterimaan yang dipersyaratkan ( %RSD < 0,67 horwitz) (Rodiana et al.,
2013). Berikut merupakan tabel yang menunjukkan konsentrasi dan absorbansi
dari setiap larutan standar yang diperhitungkan sesuai dengan batas
keberterimaannya.
Tabel 2. Batas Linearitas
Larutan
Standar Konsentrasi (mg/L) Absorbansi
1 1,00 0,0132
2 3,00 0,0384
3 6,00 0,0734
4 8,00 0,0962
5 10,00 0,1184
6 12,00 0,1382
7 14,00 0,1578
8 16,00 0,1791
9 18,00 0,1972
10 20,00 0,2172
Slope 0,0107
Intercept 0,0078
Correlation Determination ( R ) 0,9979
Correlation Coefficien ( r ) 0,9990
Batas Keberterimaan r ≥ 0.995
KESIMPULAN LINEARITAS Diterima
43
Correlation Coefficien (r) yang didapatkan sebesar 0,9990, sehingga
memenuhi kriteria parameter linearitas. Untuk menentukan bahwa nilai hasil
penentuan ini dapat diterima atau tidak, digunakan persamaan Fhitung<Ftabel,
dimana Ftabel adalah 5,351 dan nilai Fhitung 0,0084. Tabel berikut merupakan hasil
evaluasi batas linearitas dari metode destruksi asam yang digunakan untuk sampel
daun mangga.
Tabel 3. Hasil Evaluasi Batas Linearitas
Hasil Evaluasi Metode Destruksi Asam
Fhitung 0,0084
Ftabel 5,3511
Batas keberterimaan
Fhitung < Ftabel 0,0084 < 5,3510
Kesimpulan Uji F Diterima
Nilai LOL 20,0 mg/L
(*contoh perhitungan dapat dilihat di lampiran 3
Nilai Fhitung yang diperoleh dibandingkan dengan nilai Ftabel pada tingkat
kepercayaan 99 %, dengan kesimpulan sebagai berikut:
1. Jika Fhitung < Ftabel, garis yang terbentuk adalah regresi linear.
2. Jika Fhitung > Ftabel, garis yang terbentuk adalah regresi non-linear.
Maka, dapat disimpulkan garis yang terbentuk pada metode destruksi asam
adalah regresi linear sehingga dapat diterima dan nilai LOL 20,0 mg/L.
4.3.3 Penentuan Method Detection Limit (MDL)
limit deteksi metode adalah konsentrasi terendah yang terbaca dari
pengukuran suatu unsur yang mengaplikasikan secara lengkap metode
pengukuran suatu unsur tersebut dan hasil pembacaannya dapat dipercaya dengan
tingkat kepercayaan 99 % bahwa konsentrasi tersebut berbeda dengan pembacaan
blanko. (Greenberg, 2005). Untuk penentuan MDL ini dibutuhkan larutan
44
campuran antara sampel dengan larutan standar yang paling rendah (0,01 mg/L)
yang disebut spike. Spike digunakan untuk mengetahui nilai %recovery. Batas
kuantitasi (LOQ) adalah konsentrasi analit terendah dalam sampel yang masih
dapat memenuhi kriteria akurasi dan presisi pada kondisi metode yang digunakan.
Batas kuantitasi merupakan suatu kompromi antara konsentrasi dengan presisi dan
akurasi yang dipersyaratkan. (Gandjar dan Rohman, 2007). Tabel 4 menunjukkan
hasil perhitungan dari penentuan MDL dan LoQ sesuai dengan batas
keberterimaannya
Tabel 4. Penentuan Method Limit Detection (MDL)
Pengulangan Sampel Kons. Spike (mg/kg) Kons. Target
(mg/kg)
%
Recovery
1 22,38 19,895 95,1
2 22,87 19,895 93,2
3 20,88 19,895 93,3
4 21,40 19,895 95,1
5 23,30 23,903 93,2
6 22,73 23,903 95,1
7 23,31 23,903 95,3
Rerata 22,410 94,31
Standar Deviasi (SD) 0,936
MDL = 3.143xSD 2,942
LoQ = 10xSD 9,361
% RSD 4,177
Batas Keberterimaan
1) 10% Spike < MDL < Spike 0,02 < 0,06 < 0,2 Diterima
2) %R = 70-125% 94,31 Diterima
3) %RSD ≤ 2/3 Horwitz 4,177 < 6,317 Diterima
KESIMPULAN MDL 0,06
KESIMPULAN LoQ 0,19
(*contoh perhitungan dapat dilihat di lampiran 3
45
Berdasarkan pada Tabel 4, didapatkan nilai MDL untuk logam timbal (Pb)
adalah 0,06 dan nilai LoQ sebesar 0,19. Dimana, nilai tersebut lebih besar
daripada nilai 10% spike. Nilai RSD lebih kecil daripada 2/3 Horwitz dan dapat
diartikan bahwa metode destruksi asam yang digunakan pada sampel daun
mangga ini menghasilkan nilai MDL dan LoQ yang masih dalam batas
keberterimaan.
4.3.4 Penentuan Repitabilitas, Reprodusibilitas dan Akurasi
Akurasi merupakan perbandingan antara nilai rerata hasil pengulangan
dengan nilai benar dari bahan acuan bersetifikat (CRM) yang dinyatakan dalam
prosentase. Jika hasil akurasi 100% maka pengujian yang dilakukan memiliki
akurasi yang sangat baik. Repitabilitas merupakan perbedaan ukuran presisi yang
terkecil. Semakin kecil nilai repitabilitas maka semakin kecil presisi hasil
pengulangan pengujian yang dilakukan oleh seorang analis. Bila pengulangan
pengujian dilakukan lebih dari dua kali maka presisi ditentukan berdasarkan nilai
simpangan baku relatif yang dinyatakan dalam prosentase (relative standard
deviation).
Reprodusibilitas adalah hasil keberulangan dari suatu pengukuran yang
dilakukan satu laboratorium dengan: 1) sampel dan metode analisis yang sama; 2)
analis, peralatan dan waktu yang sama atau berbeda atau hasil keberulangan dari
suatu pengukuran yang dilakukan oleh personil dan laboratorium yang berbeda.
(Rodiana et al, 2013). Data Repitabilitas, Reprodusibilitas dan akurasi untuk
pengukuran kadar timbal pada sampel daun mangga dapat dilihat pada tabel 5.
46
Tabel 5. Data Repitabilitas, Reprodusibilitas dan Akurasi
Ulangan Hasil Analis 1 (ug/g) Hasil Analis 2 (ug/g)
1 20,392 22,72
2 20,883 22,67
3 21,402 22,80
4 21,391 23,30
5 22,381 22,78
6 22,870 23,31
7 21,882 22,29
Rata-rata 21,60 22,84
Standar Deviasi (SD) 0,852 0,360
% RSD 3,946 1,575
Nilai Horwitz 10,075 9,991
Repitabilitas analis 1 :
% RSD ≤ 0.67 nilai Horwitz 3,9458 < 6,7506
Repitabilitas analis 2:
% RSD ≤ 0.67 nilai Horwitz 1,5752 < 4,9957
Repitabilitas DITERIMA
Grand mean 22,219
Standar Deviasi (SD) 0,8986
%RSD 4,0442
Nilai Horwitz 10,0327
Reprodusibilitas :
% RSD ≤ nilai Horwitz 4,0442 < 10,0327
Reprodusibilitas DITERIMA
Akurasi 99,88 %
Batasan akurasi 75-120 %
Akurasi DITERIMA
Bias 0,114
Berdasarkan pada Tabel 5, hasil uji repitabilitas timbal (Pb) analis 1 yaitu
penulis sebesar 3,9458 yang masih berada dibawah nilai 0,67 Horwitz yaitu
6,7506 dan nilai repitabilitas analis 2 yaitu Ribbi sebesar 1,5752 yang juga masih
berada di bawah dari nilai 0,67 Horwitz sebesar 4,9957. Hal ini menunjukan
bahwa uji repeatibilitas telah memenuhi persyaratan yang berlaku yaitu % RSD ≤
0,5 horwizt. Sedangkan untuk mengetahui kinerja atau kehandalan laboratorium,
47
untuk mengetahui identifikasi metode (aplikasi) dan untuk meningkatkan mutu
laboratorium adalah menggunakan uji reprodusibilitas dengan syarat
keberterimaan %RSD ≤ nilai Horwitz. Dimana, nilai %RSD yang didapatkan
sebesar 4,0442 lebih kecil dari nilai Horwitz sebesar 10,0327. Uji perolehan
kembali (recovery test) pada logam Pb berkisar diantara 75-120%, hal ini
menunjukkan bahwa metode destruksi asam dengan acuan AOAC telah
memenuhi syarat keberterimaan, artinya metode AOAC dapat digunakan di
laboratorium.
4.4 Hasil Pengukuran Kadar Timbal (Pb) dalam Daun Mangga
Logam berat timbal sebagian besar terakumulasi pada organ tanaman yaitu
daun, batang dan akar. Perpindahan timbal (Pb) dari tanah ke tanaman tergantung
pada komposisi dan pH tanah serta kapasitas tukar kationnya (KTK). Tanaman
akan dapat menyerap logam Pb pada saat kondisi kesuburan tanah dan kandungan
bahan organik yang rendah serta KTK tanah tinggi. Mobilitas timbal di dalam
tanah dan tumbuhan cenderung lambat dengan memiliki kadar normalnya, kadar
normal logam berat timbal (Pb) pada tumbuhan berkisar 0,5- 3 ppm. (Charlena,
2004)
Logam timbal yang terdapat pada daun mangga ini pun juga dapat
disebabkan oleh Pb yang tersebar di udara area pohon mangga tumbuh, dimana
logam Pb yang terdapat di udara dihasilkan dari sisa pembuangan gas dari
berbagai macam industri yang menggunakan logam timbal sebagai bahan
produksi. Sehingga, gas buangan industri tersebuat terbawa oleh angin lalu
terjerap dalam daun mangga. Akumulasi dari timbal yang terserap dari tanah dan
48
udara nantinya dapat menyebabkan tingginya kadar timbal (Pb) di dalam sampel.
Kadar logam berat timbal (Pb) dalam sampel daun mangga dapat dilihat pada
tabel 6 dan 7.
Tabel 6. Kadar Logam Timbal (Pb) Analis 1
No. Jenis/Contoh
Bobot
Contoh
(g)
Bobot
Kering
(g)
Absorbansi Kons.
(ug/mL)
Hasil uji
(ug/g) Rata-
rata
1 Std 10 - - 0,1085 9,970 9,970 9,970
2 BLANKO - - -0,0002 -0,0400 -0,0400 -0,0400
3 Sampel A 1,0049 1,0049 0,0004 0,01 0,000000 0,00
4 Sampel B 1,0053 1,0053 0,0002 -0,01 0,000000 0,00
5 Sampel C 1,0049 1,0049 0,0006 0,03 0,000000 0,00
6 Sampel D 1,0049 1,0049 0,0002 -0,02 0,000000 0,00
7 Sampel E 1,0048 1,0048 0,0001 -0,02 0,000000 0,00
8 Sampel F 1,0047 1,0047 0,0002 -0,01 0,000000 0,00
9 Sampel G 1,0047 1,0047 0,0001 -0,02 0,000000 0,00
10 Sampel H 1,0053 1,0053 0,0001 -0,02 0,000000 0,00
11 Sampel I 1,0054 1,0054 0,0002 -0,01 0,000000 0,00
12 Sampel J 1,0057 1,0057 0,0001 -0,02 0,000000 0,00
13 R1 1,0050 1,0050 0,0042 0,36 17,910448 17,91
14 R2 1,0057 1,0057 0,0042 0,36 17,897982 17,90
15 R3 1,0053 1,0053 0,0037 0,32 15,915647 15,92
16 R4 1,0053 1,0053 0,0047 0,41 20,391923 20,39
17 R5 1,0056 1,0056 0,0048 0,42 20,883055 20,88
18 R6 1,0046 1,0046 0,0049 0,43 21,401553 21,40
19 R7 1,0051 1,0051 0,0049 0,43 21,390906 21,39
20 R8 1,0053 1,0053 0,0051 0,45 22,381379 22,38
21 R9 1,0057 1,0057 0,0053 0,46 22,869643 22,87
22 R10 1,0054 1,0054 0,0050 0,44 21,881838 21,88
49
Tabel 7. Kadar Logam Timbal (Pb) Analis 2
No. Jenis/Contoh
Bobot
Contoh
(g)
Bobot
Kering
(g)
Absorbansi Kons.
(ug/mL)
Hasil uji
(ug/g) Rata-
rata
1 Std 10 - - 0,1085 9,970 9,970 9,970
2 BLANKO - - -0,0002 -0,0400 -0,0400
-
0,0400
3 Sampel A 1,0046 1,0046 0,0002 -0,01 -0,497711 -0,50
4 Sampel B 1,0102 1,0102 0,0008 0,05 2,474757 2,47
5 Sampel C 1,0034 1,0034 0,0007 0,04 1,993223 1,99
6 Sampel D 1,0052 1,0052 0,0007 0,04 1,989654 1,99
7 Sampel E 1,0050 1,0050 0,0007 0,04 1,990050 1,99
8 Sampel F 1,0040 1,0040 0,0006 0,03 1,494024 1,49
9 Sampel G 1,0076 1,0076 0,0007 0,04 1,984915 1,98
10 Sampel H 1,0031 1,0031 0,0007 0,04 1,993819 1,99
11 Sampel I 1,0029 1,0029 0,0006 0,03 1,495663 1,50
12 Sampel J 1,0038 1,0038 0,0006 0,03 1,494322 1,49
13 R1 1,0055 1,0055 0,0056 0,49 24,365987 24,37
14 R2 1,0077 1,0077 0,0056 0,49 24,312792 24,31
15 R3 1,0026 1,0026 0,0056 0,49 24,436465 24,44
16 R4 1,0024 1,0024 0,0057 0,50 24,940144 24,94
17 R5 1,0034 1,0034 0,0056 0,49 24,416982 24,42
18 R6 1,0021 1,0021 0,0057 0,50 24,947610 24,95
19 R7 1,0028 1,0028 0,0055 0,48 23,932988 23,93
20 R8 1,0054 1,0054 0,0056 0,49 24,368411 24,37
21 R9 1,0036 1,0036 0,0055 0,48 23,913910 23,91
22 R10 1,0052 1,0052 0,0056 0,49 24,373259 24,37
Kadar yang diperoleh ini kemudian dikonversi ke dalam satuan mg/kg
segingga diperoleh kadar logam dalam sampel (bobot kering). Dengan
memperhitungkan susut pengeringan, maka dapat dihitung kadar logam dalam
50
sampel dengan satuan mg/kg bobot basah sehingga dapat dibandingkan dengan
kadar batas cemaran yang diizinkan. (Vera, 2011). Tabel 6 dan tabel 7
menunjukkan hasil perhitungan kadar logam timbal (Pb) untuk analis 1 dan analis
2 serta pengulangan spike dengan menggunakan alat spektrofotmetri serapan
atom.
Berdasarkan data dalam Tabel 6, data untuk pengukuran kadar timbal
analis 1 pada sampel A-J tidak terdeteksi kandungan logam timbal (Pb) di
dalamnya dengan menunjukkan konsentrasi sebesar 0,00 mg/kg, sedangkan untuk
pengulangan dengan penggunaan spike dari data R1-R10, nilai terendah ada pada
R3 sebesar 15,92 mg/kg dan nilai terbesar pada R9 yaitu sebesar 22,87 mg/kg.
Pada Tabel 7, data untuk pengukuran kadar timbal analis 2, sampel A-J terlihat
nilai terendah ada pada sampel A, dan nilai terbesar pada sampel B yaitu sebesar
2,47 mg/kg. Lalu, pada pengulangan menggunakan spike, nilai terendah terdapat
pada sampel R9 yaitu sebesar 23,91 mg/kg dan nilai terbesar pada sampel R6
sebesar 24,95 mg/kg. Kadar timbal yang diuji oleh analis 1 dapat dikatakan tidak
melebihi batas. Tetapi, kadar timbal yang diuji oleh analis 2 melebihi batas
maksimum yang telah tertera pada SNI 7387 tahun 2009 untuk buah-buahan dan
sayuran yaitu sebesar 0,5 mg/kg
4.5 Sumber – sumber Ketidakpastian dalam Pengukuran
Sumber – sumber ketidakpastian dalam pengukuran ini dapat
mempengaruhi hasil yang didapatkan diakhir. Sumber ini nantinya akan
dipertimbangkan menjadi suatu kesalahan yang fatal atau tidak dalam suatu
pengukuran sehinggan data yang didapatkan diterima serta memenuhi syarat skala
laboratorium yang digunakan.
51
a. Sampling
Teknik dan tempat pengambilan sampel biasanya dipertimbangkan dahulu
sesuai dengan tujuan yang akan dicapai. Seperti tujuan dari penelitian ini adalah
mengkaji validitas mrtode destruksi asam dan seberapa besar pencemaran logam
timbal (Pb) diruang lingkup masyarakat sehingga dapat menyebabkan keracunan,
maka dari itu sampling perlu dilakukan disekitar tempat tinggal masyarakat.
Teknik pengambilan sampel pun sebaiknya mengambil daun yang paling tua,
dikarenakan daun yang tua ini terdapat akumulasi logam timbal dalam jumlah
yang banyak jika dibandingkan dengan daun yang usianya masih muda. Sehingga,
memungkinkan logam timbal akan terdeteksi. Pengambilan sampel sebaiknya
diusahakan menggunakan alat yang memadai serta dilakukan secara rapih agar
tetap menjaga sampel agar tidak rusak sampai nantinya dibawa ke laboratotium.
b. Preparasi Sampel
Preparasi ini dimulai dari sampel masuk ke laboratorim sampai melewati
metode destruksi asam. Pekerjaan ini harus dilakukan secara teliti karena
ditakutkan sampel terkontaminasi dengan bahan kimia lain yang ada di
laboratorium, dari mulai penggunaan alat yang bersih, dan analis bekerja secara
rapih. Pada saat metode destruksi sampel dapat dilihat apakah sampel sudah
memenuhi syarat seperti warna larutan sudah berwarna kuning jernih dan sudah
disaring tanpa meninggalkan endapan sehingga dapat lanjut untuk diukur
menggunakan spektrofotometri serapan atom.
52
c. Instrumen
Alat instrumen sebelum digunakan untuk mengukur sampel, harus
dilakukan pengoptimasian alat agar analis tahu bahwa instrumen dalam keadaan
stabil dan siap untuk digunakan pada pengukuran sampel logam timbal.
Pengecekan ini diawali dengan melihat lajur alir gas dengan nyala api pada flame.
Nyala api pada flame akan mempengaruhi atom yang nantinya diubah dalam
keadaan dasar menjadi tereksitasi. Jika flame dalam keadaan kotor, maka suhu
pada nyala api tidak stabil dan menyebabkan kesalahan pengukuran.
53
BAB V
PENUTUP
5.1 Simpulan
Berdasarkan hasil penelitian yang diperoleh dapat disimpulkan sebagai
berikut:
1. Hasil uji lineritas sebesar 0,997. Nilai Method Detection Limit (MDL) 0,06
µg/mL dan nilai LoQ 0,91 µg/mL. Hasil uji repitabilitas timbal (Pb) analis
1 sebesar 3,9458 analis 2 sebesar 1,5752. Uji reprodusibilitas
menghasilkan nilai %RSD 4,0442. Uji perolehan kembali (recovery test)
pada logam Pb sebesar 99,88 %. Nilai dari setiap parameter menunjukkan
bahwa validasi yang dilakukan untuk metode destruksi asam ini
mengahsilkan data yang valid, dikarenakan semua nilai yang didapatkan
sesuai dengan batas keberterimaan sesuai dengan acuan.
2. Hasil data yang diperoleh pada pengukuran kadar timbal analis 1, pada
sampel daun mangga tidak terdapat Pb ditunjukkan dengan konsentrasi
sebesar 0,00 mg/kg, sedangkan untuk pengulangan dengan penggunaan
spike, nilai terendah 15,92 mg/kg dan nilai terbesar 22,87 mg/kg. Data
untuk pengukuran kadar timbal analis 2, nilai terbesar pada sampel daun
mangga yaitu 2,47 mg/kg. Lalu, pada pengulangan menggunakan spike,
nilai terendah yaitu 23,91 mg/kg dan nilai terbesar 24,95 mg/kg.
54
5.2 Saran
Saran untuk peneliti selanjutnya yang akan melakukan validasi untuk
logam timbal menggunakan metode lain ataupun modifikasi metode lainnya.
Sehingga dapat membandingkan metode seperti apa yang memang cocok jika
diuji menggunakan alat spektrofotometri serapan atom. Sampel yang digunakan
juga harus lebih bervariasi begitu juga dengan tempat pengambilan sampel.
55
DAFTAR PUSTAKA
(ATSDR), A. fo T. S. and D. R. (2007). Toxicological Profile of Xyelene. U.S
Derpartement of Health and Human Service.
www.atsdr.cdc.gov/toxprofiles/tp71.pdf
Anderson, R. (1987). Sample Pretreatment and Separation. John Willey & Sons.
AOAC. (2005). Official Methods of Analysis of The Association of Official
Analytical Chemist. AOAC Inc., Washington.
APHA. (2017). Standard Methods for The Examination of Water and Wastewater
23th Edition. 8-57. America Public Health Association.
Apriyanto. (1989). Analisis Pangan. Departemen Pendidikan dan Kebudayaan.
Arifin, Z., Darmono., Safuan, A., & Pratama, R. (2006). Validasi Metode Analisis
Logam Copper (Cu) dan Plumbum (Pb) Dalam Jagung Dengan Cara
Spektrofotometer Serapan Atom (Seminar Na).
BSN. (2006). Persyaratan Umum Kompetensi Laboratorium Pengujian dan
Laboratorium Kalibrasi, SNI -17025-2005.
Chan, C. C., Lam, H., Lee, Y. C., & Zhang, X.-M. (2004). Analytical Method
Validation and Instrument Performance Verification. Wiley-Interscience,
303.
Charlena. (2004). Pencemaran logam berat timbal (Pb) dan cadmium (Cd) pada
sayur-sayuran. Falsafah Sain, PSL 702, 1–12.
http://www.rudyct.com/PPS702-ipb/09145/charlena.pdf
Dahlan, E. . (2004). Studi Kemampuan Tanaman dalam Menjerap dan Menyerap
timbal Emisi dari Kendaraan Bermotor. Institut Pertanian Bogor.
Darmono. (1995). Logam Dalam Sistem Biologi Makhluk hidup. UI Press.
Darmono. (2001). Lingkungan Hidup dan Pencemaran : Hubungannya dengan
Toksikologi Senyawa Logam. UI Press.
Dewi, D. C. (2012). Determinasi Kadar Logam Timbal (Pb) dalam Makanan
Kaleng Menggunakan Destruksi Basah dan Destruksi Kering. Alchemy, 2 (1),
12–25.
Dr. M. Cholid Djunaidi, S.Si, M. S. (2018). Studi Interferensi Pada AAS.
Ebadi, A. G., Zare, S., Mahdavi, M., & Babaee, M. (2005). Study and
Measurement of Pb, Cd, Cr and Zn in Green Leaf of Tea Cultivated in Gillan
Province of Iran. 4, 270–272. https://doi.org/10.3923/pjn.2005.270.272
56
Ervina, N. H. (2014). Perbandingan Metode Destruksi pada Analisis b Dalam
Rambut dengan AAS. Indonesian Journal of Chemical Science, 3(1).
Eurachem. (2014). The Fitness for Purpose of Analytical Methods (A Laboratory
Guide to Method Validation and Related Topics). Eurachem Guide, 70.
www.eurachem.org
Gandjar, I., dan Rohman, A. (2007). Kimia Farmasi Analisis. Pustaka Pelajar.
Ghasemidehkordi, Bahareh., Malekirad, Ali Akbar., Nazem, Habibillah., et al.
(2018). Concentration of lead and mercury in collected vegetables and herbs
from Marzaki province, Iran: a non-carcinogenic rish assessment. Food and
Chemical Toxicology, 113, 204–210.
Greenberg, A. E. (2005). Standard Methods for the Examination of Water and
Wastewater (21st ed.). American Public Health Association.
Guruswamy, S. (2000). Engineering Properties And Applications of Lead Alloys.
ISBN 978-0-8247-8247-4.
Handayani, C., & Ridha, Z. (2017). Validasi Metode Analisa Kadar Timbal (Pb)
dalam Rambut Karyawan SPBU di Indarung. Chempublish Journal, 2(1),
54–61.
Harmita. (2004). Petunjuk Pelaksanaan Validasi Metode dan Cara
Perhitungannya. Majalah Ilmu Kefarmasian, 1(3);7-8.
Harmonization, I. C. on, & [ICH]. (2005). Validation of Analytical Procedures:
Text and Methodology Q2 (R1).
Haswell, S. J. (1991). Atomic Absorption Spectrometry Theory, Design, and
Application. Elsevier Science Publishing Company Inc.
Khopkar, S. . (1990). Konsep Dasar Kimia Analitik Edisi kedua (2nd ed.). UI
Press.
Maryati, S. (2011). Verifikasi dan evaluasi penerapan metode uji cemaran arsen
dalam makanan secara spektrofotometri. Beritan Litbang Industri XLVI, (1) :
6-13.
Muchtadi. (2009). Destruksi Basah dan Kering.
Musriadi. (2014). Akumulasi Logam Tembaga ( Cu ) Dan Timbal ( Pb ) Pada
Karang Acropora Formosa Dan Acropora Hyacinthus Di Pulau Samalona ,
Barranglompo Dan Bonebatang, Kota Makassar. 56.
Oktrin, R. K. (2016). Analisis Kadar Logam Timbal (Pb) Pada Bedak Tabur
Dengan Variasi Zat Pengoksidasi dan Metode Destruksi Basah
Menggunakan Spektroskopi Serapan Atom (SSA).
57
Olivares, E. (2003). The Effect of Lead on Phytochemistry of Tithonia diversifolia
Exposed to Roadside Automotive Pollution or Grown in Pots of Pb-
suplemented Soil. Brazilian. Journal Plant Physiology, 15(3), 149–158.
Palar, H. (2008). Pencemaran dan Toksikologi Logam Berat. PT. Rineka Cipta.
Pracaya. (2011). Bertanam Mangga. Penebar Swadaya.
Raimon. (1993). Perbandingan Metode Destruksi Basah dan Kering Secara
Spektrofotometri Serapan Atom (Lokarya Na). Jaringan Kerjasama Kimia
Analitik Indonesia.
Ratnawati, N. A., Prasetya, A. T., & ... (2019). Validasi Metode Pengujian Logam
Berat Timbal (Pb) dengan Destruksi Basah Menggunakan FAAS dalam
Sedimen Sungai Banjir Kanal Barat Semarang. Indonesian Journal of …,
8(1). https://journal.unnes.ac.id/sju/index.php/ijcs/article/view/28030
Rich, V. (1994). The International Lead Trade. Woodhead Publishing, ISBN 978-
0-85709-994-5.
Rodiana, yayah, Masitoh, S., Maulana, H., & Nurhasni, N. (2013). Pengkajian
Metode Untuk Analisis Total Logam Berat Dalam Sedimen Menggunakan
Microwave Digestion. Jurnal Ecolab, 7(2), 71–80.
https://doi.org/10.20886/jklh.2013.7.2.71-80
Rohman, A. (2007). Kimia Farmasi Analisis. Pustaka Pelajar Universitas Islam
Indonesia.
Rukmana, R. (1997). Mangga: Budidaya dan Pasca Panen. Kanisius.
Sa’adah, E., & Ari, S. W. (2010). Validasi Metode Pengujian Logam Tembaga
pada Produk Air Minum dalam Kemasan secara Spektrofotometri Serapan
Atom Nyala. Biopropal Industri.
Skoog, D. A. (2000). Principle of Instrumental Analysis. Saunders.
Stone, D. and Ellis, J. (2008). Calibration and Linear Regression Analysis: A
SelfGuided Tutorial. http://www.chem.utoronto.ca/coursenotes/analsci/%0A
Sudarmadji, J. M. dan C. I. . (2006). Toksikologi logam berat B3 dan dampaknya
terhadap kesehatan. Jurnal Kesehatan Lingkungan, 2(2), 129–142.
Supriatno., & L. (2009). Analisis Logam Berat Timbal dan Kadmium Dalam
Sampel Ikan Dan Kerang Secara Spektrofotometri Serapan Atom. Jurnal
Rekayasa Kimia Dan Lingkungan, 7(1):5-8.
Suryati. (2011). Analisa Kandungan Logam Berat Pb dan Cu dengan Metode
(SSA) Spektrofotomerti Serapan Atom Terhadap Ikan Baung (Hemibagrus
nemurus) di Sungai Kampar Kanan Desa Muara Takus Kecamatan XIII Koto
Kampar Kabupaten Kampar. Jurnal Ilmiah Mahasiswa, 10(3), 23–31.
58
Susanto, Y. (2010). Estimasi Ketidakpastian Pengukuran/Pengujian Dalam
Pengukuran/Pengujian Kimia. http://kimia.lipi.go.id/news/read/estimasi-
ketidakpastian-pengukuran- pengujian-dalam-pengukuran-pengujian-kimia
Tafajani, D. S. (2011). Panduan Komplit Bertanam Sayur dan Buah-Buahan.
Cahaya Atma.
United States Geological Survey. (2017). Lead. Mineral Commodities Summaries.
Vera. (2011). Analisis Logam Timbal (Pb), Timah (Sn), Dan Kadmium (Cd)
Dalam Buah Lengkeng Kemasan Kaleng Secara Spektrofotometri Serapan
Atom.
Vogel, R. M. (1990). Buku Teks Analisis Anorganik Kualitatif Makro dan
Semimikro (G. Svehla). PT. Kalman Media Pustaka.
Widowati, W., Sastiono, A., dan Jusuf, R. (2008). Efek Toksik Logam,
Pencegahan dan Penanggulangan Pencemaran. Andi Offset.
Wulandari, E. A., & S. (2013). Preparasi Penentuan Kadar Logam Pb , Cd dan Cu
dalam Nugget Ayam Rumput Laut Merah (Eucheuma cottonii). Jurnal Sains
Dan Seni Pom ITS, 2 (2), 12–14.
59
LAMPIRAN
Lampiran 1. RAB penelitian
No Nama Produk Volume Pembelian Harga
1
Lead
Standard
Solution
1000 ppm
500 mL ERA Rp. 1.147.000
2 CRM ERA
282-500 100 mL ERA Rp. 951.000
4 Batu didih 1 tabung P3KLL Rp. 425.000
5 Nitric Acid
65% 2,5 L MCLS Rp. 1.115.000
6 Perchloric
Acid 70% 2,5 L MCLS Rp8.396.000
7 Gas Acetylen
(C2H2) 1 tabung P3KLL Rp1.500.000
Instrument
8 Sampel 40 Sampel P3KLL Rp. 5.000.000
Total Rp. 18.535.147
60
Lampiran 2. Timeline Penelitian
Kegiatan
Bulan
Okt
2019
Nov
2019
Des
2019
Jan
2020
Feb
2020
Mar
2020
Apr
2020
Mei
2020
Pengambilan
uji contoh
Penyusunan
draft skripsi
Seminar
Skripsi
Analisis
Sampel
Analisis data
dan
pembuatan
skripsi
Seminar
Hasil O k t o b e r 2 0 2 0
Sidang N o v e m b e r 2 0 2 0
61
Lampiran 3. Contoh Perhitungan
1. pembuatan larutan standar campuran logam Pb 100 ppm
V1 x M1 = V 2 x M2
V1 = Volume sebelum pengenceran
M1 = Konsentrasi sebelum pengenceran
V 2 = Volume setelah pengenceran
M2 = Konsentrasi setelah pengenceran
V1 x M1 = V 2 xM 2
1000 x V1 = 100 x 100
V1 =
V1 = 10 mL
2. Perhitungan pembuatan deret standar kurva kalibrasi 0.2 ppm, 5 ppm, 10
ppm, 15 ppm, 20 pmm
Contoh perhitungan 0,2 ppm :
V1 x M1 = V 2 x M2
100 x 0,2 = V2 x 100
V2
0,2 mL = V2
3. Perhitungan Spike Pb untuk Sampel Daun Mangga
Spike Pb 0,4 ppm untuk Daun :
V1 xM1 = V 2 xM2
50 x 0.4 = V2 x 100
V2
0,2 mL = V2
62
4. Fhitung dalam LOL di metode destruksi asam
5. % Recovery (akurasi)
6. % Bias dalam akurasi di metode destruksi asam
7. Nilai Method Detection Limit (MDL) dan Limit Of Quantity (LOQ) di
metode SNI
8. Nilai Signal/Noise (S/N) dalam MDL di metode SNI
63
9. 0,67 CV Horwitz dalam MDL di metode destruksi asam
10. Mengubah satuan MDL
MDL = 0,05884 µg/mL
64
Lampiran 4. Dokumentasi Penelitian
Penambahan HNO3 pekat
Larutan sampel dan standar yang
akan diukur
Spektofotometri Serapan Atom
HITACHI Z-2300
Proses penyaringan sampel Pemanasan sampel diatas hot plate
Penyimpanan sampel+HNO3 pekat
selama 1 malam
65
Lampiran 5. Data Limit of Linearity
6 12,00 0,1382
7 14,00 0,1578
8 16,00 0,1791
9 18,00 0,1972
10 20,00 0,2172
Slope 0,0107
Intercept 0,0078
Correlation Determination ( R ) 0,9979
Correlation Coefficien ( r ) 0,9990
Batas keberterimaan r ≥ 0.995
KESIMPULAN LINEARITAS Diterima
2. Penentuan Limit of Linearity (LoL )
Standar Kons (mg/L) Abs-1 Abs-2 Abs-3 Abs-4 Abs-5 Abs-6 Abs-7 Abs-8 Abs-9 Abs-10 SD
1 1,000 0,0132 0,0132 0,0131 0,0131 0,0132 0,0132 0,0133 0,0132 0,0131 0,0131 6,7E-05 6,74949E-05
2 3,000 0,084
3 6,000 0,1133
4 8,000 0,1574
5 10,000 0,1701
6 12,000 0,2007
7 14,000 0,2438
8 16,000 0,2572
9 18,000 0,315
10 20,000 0,2162 0,2178 0,2175 0,217 0,2184 0,2177 0,2172 0,2159 0,2173 0,2172 7,4E-04 0,000736056
Evaluasi : 8,4E-03
8,4E-03
Derajat kebebasan, df = n - 1 dan tingkat kepercayaan 99%, α = 0.01 maka F tabel = F(0,01; 9; 9) = 5,3511289
Batas keberterimaan: Fhitung < Ftabel Kesimpulan Uji F: diterima maka LoL = 20,0
3. Penentuan Method Detection Limit (MDL ) dan Limit of Quantitation (LoQ )
Larutan Konsentrasi Absorbansi
Standar (mg/L)
Std-1 0,0000 0
Std-2 1,0000 0,0114
Std-3 5,0000 0,0554
Std-4 10,0000 0,1089
Std-5 15,0000 0,1601
2
2
2
1
SD
SDFhitung
y = 0,0107x + 0,0078R² = 0,9979
0
0,05
0,1
0,15
0 5 10 15 20 25
ab
so
rb
an
si
konsentrasi (mg/L)
y = 0,0108x + 0,0003R² = 0,9997
0
0,05
0,1
0,15
0,2
0,25
0,0000 5,0000 10,0000 15,0000 20,0000 25,0000
Chart Title
66
Lampiran 6. Data Hasil Kadar timbal analis 1
No.FR : 08/B/P3KLL
Revisi : 0
Penentuan Kadar Total Timbal ( Pb )
Kode contoh : 37A-O/B3/P3KLL/06/2019 No./Tgl. Disposisi : 37/PJB/B3/06/19
Jenis contoh : daun Bahan pembanding : SRM Montana Soil
Tanggal penerimaan : 02/06/2019 Dikerjakan oleh/paraf : Onig, Hisyam, Bambang /
Metode : IK-08/B/P3KLL Diperiksa oleh/paraf : Inez/
Tanggal pengerjaan : 02/06/2019 Keterangan : Sampel kelti Pb
Tanggal selesai : 11/07/2019
Jenis RPD
contoh I II I II I II Rata-rata %
1 std 10 0,1085 9,970 9,970 9,970
2 BLANKO -0,0002 -0,0400 -0,0400 -0,0400
3 Sampel A 1,0049 1,0049 0,0004 0,01 0,000000 0,00
4 Sampel B 1,0053 1,0053 0,0002 -0,01 0,000000 0,00
5 Sampel C 1,0049 1,0049 0,0006 0,03 0,000000 0,00 19
6 Sampel D 1,0048 1,0048 0,0001 -0,02 0,000000 0,00 14
7 Sampel E 1,0047 1,0047 0,0002 -0,01 0,000000 0,00
8 Sampel F 1,0047 1,0047 0,0001 -0,02 0,000000 0,00
9 Sampel G 1,0053 1,0053 0,0001 -0,02 0,000000 0,00
10 Sampel H 1,0054 1,0054 0,0002 -0,01 0,000000 0,00
11 Sampel I 1,0057 1,0057 0,0001 -0,02 0,000000 0,00 -0,004000
12 R1 1,0050 1,0050 0,0042 0,36 17,910448 17,91 95,07169
13 R2 1,0057 1,0057 0,0042 0,36 17,897982 17,90 94,84914
14 R3 1,0053 1,0053 0,0037 0,32 15,915647 15,92 95,36654
15 R4 1,0053 1,0053 0,0047 0,41 20,391923 20,39 97,47374
16 R5 1,0056 1,0056 0,0048 0,42 20,883055 20,88 95,28503
17 R6 1,0046 1,0046 0,0049 0,43 21,401553 21,40 97,50498
18 R7 1,0051 1,0051 0,0049 0,43 21,390906 21,39 93,26018
19 R8 1,0053 1,0053 0,0051 0,45 22,381379 22,38 95,08183
20 R9 1,0057 1,0057 0,0053 0,46 22,869643 22,87 93,18037
21 R10 1,0054 1,0054 0,0050 0,44 21,881838 21,88 95,10211 1,0053
Fp = Faktor Pengenceran
Hasil Uji = [(Kons. (mg/mL) x Fp) - Kons. Blanko) x Vol akhir (mL)]
Bobot Kering Contoh (g)
MDL = 0,1 mg/kg Konsentrasi std = 100 ug/mL ; 0,2 mL 5 21,88
DHL akuades = 0,86 us/Cm Konsentrasi spike I = 19,8946
SRM ERA P257-500 = 755 ± 3,4881 mg/L % Recovery sampel I = 109,99 %
Contoh perhitungan : Hasil uji :
Hasil Uji O = [(Kons. (mg/L) x Fp) - Kons. Blanko) x Vol akhir (mL)] A = 0,0 mg/kg
(data I) B = 0,0 mg/kg
= [(19,4 x 1) - 0) x 50] C = 0,0 mg/kg
D = 0,0 mg/kg
= 21,40 mg/g E = 0,0 mg/kg
% recovery = [(Kons. Spike - Kons. Sampel)/Spike yg ditambahkan] x 100 F = 0,0 mg/kg
Sampel F8 = [(1637,06 - 1597,54) / 39,8069] x 100 G = 0,0 mg/kg
= 109,99 % H = 0,0 mg/kg
I = 0,0 mg/kg
J = 17,9 mg/kg
K = 17,9 mg/kg
L = 15,9 mg/kg
M = 20,4 mg/kg
N = 20,9 mg/kg
O = 21,4 mg/kg
Bobot Kering Contoh (g)
1,0046
LEMBAR KERJA ANALIS (worksheet)
No Bobot Contoh (g) KA Bobot Kering FpAbsorbansi Kons. (mg/mL) Hasil uji (mg/g)
67
Lampiran 7. Data Hasil Kadar timbal analis 2
No.FR : 08/B/P3KLL
Revisi : 0
Penentuan Kadar Total Timbal ( Pb )
Kode contoh : 37A-O/B3/P3KLL/06/2019 No./Tgl. Disposisi : 37/PJB/B3/06/19
Jenis contoh : daun Bahan pembanding : SRM Montana Soil
Tanggal penerimaan : 02/06/2019 Dikerjakan oleh/paraf : Onig, Hisyam, Bambang /
Metode : IK-08/B/P3KLL Diperiksa oleh/paraf : Inez/
Tanggal pengerjaan : 02/06/2019 Keterangan : Sampel kelti Pb
Tanggal selesai : 11/07/2019
Jenis
contoh I II I II I II Rata-rata
1 std 10 0,1085 9,970 9,970 9,970
2 BLANKO -0,0002 -0,0400 -0,0400 -0,0400
3 Sampel A 1,0046 1,0046 0,0002 -0,01 -0,497711 -0,50
4 Sampel B 1,0102 1,0102 0,0008 0,05 2,474757 2,47
5 Sampel C 1,0034 1,0034 0,0007 0,04 1,993223 1,99
6 Sampel D 1,0052 1,0052 0,0007 0,04 1,989654 1,99
7 Sampel E 1,0050 1,0050 0,0007 0,04 1,990050 1,99
8 Sampel F 1,0040 1,0040 0,0006 0,03 1,494024 1,49
9 Sampel G 1,0076 1,0076 0,0007 0,04 1,984915 1,98
10 Sampel H 1,0031 1,0031 0,0007 0,04 1,993819 1,99
11 Sampel I 1,0029 1,0029 0,0006 0,03 1,495663 1,50
12 Sampel J 1,0038 1,0038 0,0006 0,03 1,494322 1,49
12 R1 1,0055 1,0055 0,0056 0,49 24,365987 24,37
13 R2 1,0077 1,0077 0,0056 0,49 24,312792 24,31
14 R3 1,0026 1,0026 0,0056 0,49 24,436465 24,44
15 R4 1,0024 1,0024 0,0057 0,50 24,940144 24,94
16 R5 1,0034 1,0034 0,0056 0,49 24,416982 24,42
17 R6 1,0021 1,0021 0,0057 0,50 24,947610 24,95
18 R7 1,0028 1,0028 0,0055 0,48 23,932988 23,93
19 R8 1,0054 1,0054 0,0056 0,49 24,368411 24,37
20 R9 1,0036 1,0036 0,0055 0,48 23,913910 23,91
21 R10 1,0052 1,0052 0,0056 0,49 24,373259 24,37
Fp = Faktor Pengenceran
Hasil Uji = [(Kons. (mg/mL) x Fp) - Kons. Blanko) x Vol akhir (mL)]
Bobot Kering Contoh (g)
MDL = 0,1 mg/kg Konsentrasi std = 100 ug/mL ; 0,2 mL
DHL akuades = 0,86 us/Cm Konsentrasi spike I = 23,9027
SRM ERA P257-500 = 755 ± 3,4881 mg/L % Recovery sampel I = 93,64 %
Contoh perhitungan : Hasil uji :
Hasil Uji O = [(Kons. (mg/L) x Fp) - Kons. Blanko) x Vol akhir (mL)] A = -0,5 mg/kg
(data I) B = 2,5 mg/kg
= [(19,4 x 1) - 0) x 50] C = 2,0 mg/kg
D = 2,0 mg/kg
= 24,95 mg/g E = 2,0 mg/kg
% recovery = [(Kons. Spike - Kons. Sampel)/Spike yg ditambahkan] x 100 F = 1,5 mg/kg
Sampel F8 = [(1637,06 - 1597,54) / 39,8069] x 100 G = 2,0 mg/kg
= 93,64 % H = 2,0 mg/kg
I = 1,5 mg/kg
J = 24,4 mg/kg
K = 24,3 mg/kg
L = 24,4 mg/kg
M = 24,9 mg/kg
N = 24,4 mg/kg
O = 24,9 mg/kg
Bobot Kering Contoh (g)
1,0021
LEMBAR KERJA ANALIS (worksheet)
No Bobot Contoh (g) KA Bobot Kering FpAbsorbansi Kons. (mg/mL) Hasil uji (mg/g)