uji efektivitas sedatif suspensi ekstrak daun selada
TRANSCRIPT
UJI EFEKTIVITAS SEDATIF SUSPENSI
EKSTRAK DAUN SELADA (Lactuca sativa)
TERHADAP MENCIT PUTIH JANTAN
Proposal Penelitian
DisusunOleh :
Lidya Indhayani S.Si., M.Si., Apt (NIDN 0021098001)
Drs. M. Ali (NIDK 8816410016)
Irma Yuliati (NIM 01016351)
Anjas Teja (NIM 01015022)
Maulana (NIM 01014192)
SEKOLAH TINGGI FARMASI YPIB CIREBON
PROGRAM PENDIDIKAN STRATA 1 (S.1) FARMASI
CIREBON
2018
i
HALAMAN PENGESAHAN
PROPOSAL PENELITIAN STF YPIB
1. Judul Penelitian UJI EFEKTIVITAS SEDATIF SUSPENSI EKSTRAK
DAUN SELADA (LACTUCA SATIVA) TERHADAP
MENCIT PUTIH JANTAN.
2. Ketua Peneliti
a. Nama Lengkap
b. NIDN
c. Jenis Kelamin
3. Anggota 1
a. Nama Lengkap
b.NIDN
c. Jenis Kelamin
4. Anggota 2
a. Nama Lengkap
b. NIM
c. Jenis Kelamin
5. Anggota 3
a. Nama Lengkap
b. NIM
c. Jenis Kelamin
6. Anggota 4
a. Nama Lengkap
b. NIM
c. Jenis Kelamin
7. Alamat
Lidya Indhayani S.Si.,Apt.,M.Farm
0021098001
Perempuan
Drs. M. Ali,M.Si
8816410016
Laki-laki
Irma Yuliati
01016351
Perempuan
Anjas Teja
01015022
Laki-laki
Maulana
01015022
Laki-laki
Sekolah Tinggi Farmasi (STF) YPIB Cirebon
Jl. Perjuagan Majasem Cirebon
8.. Lama Penelitian 6 Bulan (Agustus 2018 – Januari 2019)
9. Biaya Rp. 10.000.000.,00
10. Sumber Dana Yayasan Sekolah Tinggi Farmasi YPIB Cirebon
ii
Cirebon, Agustus 2018
Mengetahui
Ketua LPPM
Fitri Zakiah S.Si M.Farm.,Apt
Ketua STF YPIB Cirebon
H. Ahmad Azrul Zuniarto., M.Farm., Apt
iii
RENCANA ANGGARAN PENELITIAN
UJI EFEKTIVITAS SEDATIF SUSPENSI EKSTRAK DAUN SELADA (LACTUCA
SATIVA) TERHADAP MENCIT PUTIH JANTAN.
NO Uraian Satuan Total Harga
1 Pembentukan tim penelitian
- kordinator (1orang) 500.000 500.000
- Peneliti (1orang) 1.200.000 1.200.000
- Pembantu peneliti (3orang) 500.000 1.500.000
2 Pengumpulan Data dan Studi Literatur 1.000.000
3 Percobaan Laboratorium
- Belanja Bahan Baku 2.100.000 2.100.000
4 Penerapan
- pengujian laboratorium 3.000.000 3.000.000
5 Evaluasi dan Pembuatan Laporan
- Atk 500.000 500.000
- Penjilidan dan Penggadaan Laporan 200.000 200.000
Total Anggaran 10.000.000
iv
KATA PENGANTAR
Segala puji kita panjatkan kehadirat Tuhan Yang Maha Esa yang telah memberikan rahmat dan
hidayahnya sehingga kami dapat menyelesaikan proposal penelitian ini dengan lancar.
Penyusunan proposal penelitian ini bertujuan untuk pengembangan ilmu pengetahuan
dalam mendapatkan suatu alternative bahan alam sebagai produk yang dapat dijadikan
pengobatan dan memotifasi mahasiswa. Dalam hal ini penulis mengucapkan terimakasih kepada
:
1. Allah SWT yang mendengarkan dan mengabulkan doa penulis
2. Bapak H. Satmaja., BA, sebagai Ketua Yayasan Pendidikan Imam Bonjol
3. Bapak H. Ahmad Azrul Zuniarto., M.Farm., Apt, selaku Ketua Sekolah Tinggi Farmasi
YPIB Cirebon
Akhirnya pada Allah lah penulis memohon perlindungan, mudah-mudahan proposal
penelitian ini dapat bermanfaat dan dapat menjadi bahan pertimbangan dan pengkajian
ilmu pengetahuan yang lebih luas bagi penulis, mahasiswa dan semua pihak yang
membaca.
Wasalam,
Cirebon, Juli 2019
Penulis
v
DAFTAR ISI
Judul Halaman
HALAMAN JUDUL .................................................................................. i
LEMBAR PENGESAHAN ........................................................................ i
ANGGARAN BIAYA.................................................................................... . ii
ABSTRAK ................................................................................................... iii
ABSTRACT................................................................................................. iv
KATA PENGANTAR ................................................................................ v
DAFTAR ISI .............................................................................................. vi
DAFTAR GAMBAR ................................................................................... ix
DAFTAR TABEL ....................................................................................... x
DAFTAR GRAFIK ..................................................................................... xi
BAB I PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang ........................................................................ 1
1.2 Pembatasan Masalah ................................................................ 2
1.3 Identifikasi Masalah ................................................................. 3
1.4 Rumusan Masalah .................................................................... 3
1.5 Tujuan Penelitian ..................................................................... 3
1.6 Manfaat Penelitian ................................................................... 4
1.7 Tempat dan Waktu Penelitian ................................................... 4
1.8 Hipotesa ................................................................................. 5
BAB II TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Tanaman Selada(Lactuca sativa) .............................................. 6
2.1.1.Taksonomi Selada.................................................... .. .... ... 6
2.1.2. Morfologi Tanaman Selada ..................................... ......... 7
2.1.3. Kandungan Kimia Daun Selada ........................................ 8
2.1.4. Kegunaan Daun Selada ..................................................... 8
2.2 Simplisia ................................................................................ ` 9
2.2.1. Pengertian Simplisia ......................................................... 9
2.2.2. Pengumpulan Simplisia.................................................... . 10
2.2.3. Pencucian dan Pengeringan .............................................. 10
2.3 Penyarian ................................................................................. 11
2.3.1. Pengertian Penyarian ....................................................... . 11
vi
2.3.2. Ekstrak ............................................................................. . 11
2.3.3. Maserasi ........................................................................... 11
2.3.4. Pelarut ............................................................................... 11
2.4 Suspensi .................................................................................. 12
2.4.1. Pengertian Suspensi .......................................................... 12
2.4.2. Syarat Suspensi ................................................................ 12
2.4.3. Bahan Pensuspensi .......................................................... . 12
2.4.4. Cara Mengerjakan Obat Dalam Suspensi ........................ . 13
2.4.5. Bahan Pengawet Suspensi ............................................... . 14
2.4.6. Penilaian Stabilitas Suspensi ............................................ 14
2.5 Tinjauan Tentang Hewan Uji ...................................................... 17
2.5.1. Klasifikasi Mencit ............................................................ 17
2.5.2. Metode Penanganan Mencit ............................................ . 17
2.6 Tidur .......................................................................................... . 18
2.6.1. Fisiologi Tidur ................................................................. . 18
2.6.2. Insidensi Gangguan Tidur ................................................ 18
2.7 Sedatif ........................................................................................... 19
2.7.1. Pengertian Sedatif ............................................................... 19
2.7.2. Penggolongan Obat Sedatif ................................................ 19
BAB III METODE PENELITIAN
3.1 Objek Penelitian........................................................................... 22
3.1.1. Populasi ............................................................................ 22
3.1.2. Sampel dan Penarikan Sampel ......................................... 22
3.1.3. Variabel dan Operasional Variabel .................................. 22
3.2 Metode Penelitian ......................................................................... 24
3.3 Desain Penelitian ......................................................................... 24
3.4 Alat dan Bahan Penelitian ........................................................... 25
3.4.1. Alat Penelitian .................................................................. 25
3.4.2. Bahan Penelitian ............................................................ ... 26
3.5 Langkah Kerja ............................................................................ . 27
3.5.1. Determinasi Tanaman Selada ........................................ ... 27
3.5.2. Pengumpulan Tanaman Selada ................................. ....... 27
3.5.3. Pembuatan Simplisia Daun Selada ..................................... 24
3.5.4. Pembuatan Ekstrak Daun Selada ........................................ 24
vii
3.5.5. Pengujian Skrining Fitokimia Senyawa Alkaoid ...............27
3.5.6. Pembuatan Larutan Diazepam ........................................... 27
3.5.7. Pembuatan Suspensi Ekstrak Daun Selada ... .............. ..... 27
3.5.8. Evaluasi Sediaan ................................................................ 31
3.5.9. Uji Efektivitas Sedatif Ekstrak Daun Selada...................... 32
3.6 Sumber Data dan Alat Pengumpulan Data ................................... 34
3.6.1. Sumber Data ................................................................... .. 34
3.6.2. Pengumpulan Data .......................................................... . 34
3.7 Teknik Analisa Data ..................................................................... 34
DAFTAR PUSTAKA
viii
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 2.1 Tanaman Selada (Lactuca sativa) ........................................... 6
Gambar 2.2 Mencit Putih Jantan ................................................................ 16
Gambar 2.3 Mekanisme kerja benzodiazepin ............................................. . 20
Gambar 3.1 Operasional Variabel ............................................................. 23
Gambar 3.2 Kerangka Konsep ....................................................................... 24
Gambar 3.3 Skema Pemberian Perlakuan pada Hewan Uji ......................... 33
ix
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1.1 Rancangan Kegiatan Tugas Akhir ............................................. 4
Tabel 3.1 Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ................................. 25
Tabel 3.2 Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian .......................... 26
Tabel 3.3 Formula Suspensi Ekstrak Daun Selada. .................................... 29
Tabel 3.4 Anava Satu Arah ...................................................................... 35
10
1
BAB I
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Masalah kesehatan jiwa di indonesia merupakan masalah kesehatan masyarakat yang
sangat penting dan harus mendapat perhatian sungguh-sungguh dari seluruh jajaran lintas
sektor pemerintah baik di tingkat pusat ataupun daerah. Menurut penelitian yang telah
dilakukan Organisasi Kesehatan Dunia (WHO) tahun 2007 di berbagai negara menunjukkan,
sebesar 20-30 % pasien yang datang ke pelayanan kesehatan dasar menunjukkan gejala
gangguan jiwa. (Nursito,2012)
Puskesmas adalah unit pelaksana teknis Dinas Kesehatan Kabupaten/Kota yang
bertanggung jawab menyelenggarakan pembangunan kesehatan disatu atau sebagian wilayah
kecamatan. Puskesmas Lebaksiu merupakan salah satu puskesmas di wilayah kabupaten
tegal. Berdasarkan data kunjungan pasien rawat jalan dengan diagnosa kesehatan jiwa
tercatat dari tahun 2015-2017 semakin bertambah. Data rekam medik tahun 2017 untuk
pasien diagnosa gangguan jiwa adalah 62 orang. (Laporan Bulanan Puskesmas
Lebaksiu,2017)
Gangguan jiwa berat adalah gangguan jiwa yang ditandai oleh terganggunya
kemampuan menilai realitas yang buruk. Gejala yang menyertai gangguan ini diantaranya
adalah susah tidur (insomnia). Kondisi susah tidur ini sering dikeluhkan oleh keluarga
penderita. Karena waktu tidur yang tidak cukup ini membuat emosi penderita naik turun,
tingkah laku aneh yang dapat merugikan keluarga penderita bahkan lingkungan di
sekitarnya.
Pengobatan pada penderita gangguan jiwa salah satunya adalah obat yang memberikan
efek sedatif yaitu phenobarbital atau diazepam. Akan tetapi, kepatuhan pengobatan pada
penderita gangguan jiwa belum terlaksana dengan baik karena beberapa faktor dintaranya
adalah penderita menolak untuk mengkonsumsi obat dan kekhawatiran dari keluarga
penderita untuk efek samping yang akan muncul dari pengobatan tersebut.
Untuk mengatasi masalah tersebut penggunaan tanaman untuk obat tradisional dapat
menjadi alternatif dikarenakan adanya kepercayaan masyarakat bahwa obat tradisional
berbahan alami, lebih aman dan tidak menimbulkan efek samping. Akan tetapi selama ini
pengetahuan mengenai khasiat dan keamanan obat tradisional hanya diperoleh melalui
2
informasi secara turun temurun yang belum semuanya teruji secara ilmiah. Untuk itu
diperlukan penelitian mengenai penggunaan obat tradisional, sehingga nantinya penggunaan
obat tradisional dapat digunakan dengan aman dan efektif. (Depkes, 2007)
Salah satu manfaat dari penggunaan obat tradisional adalah dalam mengatasi masalah
susah tidur yang merupakan salah satu keluhan penderita gangguan jiwa. Tidur merupakan
salah satu cara untuk melepaskan kelelahan jasmani dan kelelahan mental. Tidur bagi
manusia merupakan hal yang penting, karena tidur dapat mengendalikan irama kehidupan
manusia sehari-hari.(Japardi, 2002)
Beberapa individu menggunakan obat-obatan tradisional dari tanaman yang dapat
mempercepat induksi tidur. Salah satu tanaman obat yang dapat digunakan untuk mengatasi
masalah insomnia atau gangguan tidur adalah daun selada (Lactuca sativa) yang memiliki
efek penenang dan mempromosikan tidur.
Menurut karya ilmiah adawiah, menyatakan bahwa daun selada memiliki kandungan
Lactucarium yang berguna sebagai penenang (sedatif). Senyawa ini aman sebagai pengganti
opium karena tidak menimbulkan ketergantungan bahkan jika digunakan dalam dosis tinggi.
Senyawa tersebut akan berikatan dengan sistem GABA. Dengan adanya interaksi ini,
afinitas GABA terhadap reseptornya meningkat dan kerja GABA akan meningkat. Aktifnya
reseptor GABA menyebabkan saluran ion clorida akan membuka sehingga ion clorida akan
masuk ke dalam sel menyebabkan hiperpolarisasi. Hal ini diduga mendepresi susunan saraf
pusat dan merangsang pusat inhibisi di formatioreticularissebagai pusat pengaturan
kesadaran sehingga menimbulkan rasa kantuk dan menurunnya kesadaran.
Menurut hasil penelitian sebelumnya yang dilakukan oleh EM Sutrisna dengan judul
The Potency Of Lactuca sativa andApium graveolens L. From Indonesia as Tranquilizer.
Dimana dosis terapi Lactuca sativa 200; 400 dan 800 Mg/kg BB masing-masing memiliki
efek sedatif. Berdasarkan hal tersebut, peneliti tertarik untuk melakukan penelitian tentang
“ Uji Efektivitas Sedatif Suspensi Ekstrak Daun Selada (Lactuca sativa) Terhadap
Mencit Putih Jantan”
1.2 Pembatasan Masalah
Masalah yang dibatasi penulis pada penelitian ini adalah pengujian efek suspensi ekstrak
daun selada (Lactuca sativa) sebagai sedatif terhadap mencit putih jantan.
Pembatasan masalah dari penelitian ini adalah :
1) Uji efektivitas suspensi ekstrak daun Selada (Lactuca sativa) pada mencit putih jantan
2) Sampel yang digunakan adalah daun Selada (Lactuca sativa) yang berwarna hijau dan
masih segar
3
3) Hewan uji yang digunakan adalah mencit putih jantan
4) Ekstrak yang dibuat dengan metode maserasi menggunakan pelarut etanol 70 %.
5) Suspensi ekstrak daun Selada (Lactuca sativa) dengan dosis 3,12 Mg/20 g BB, dosis
6,24 Mg/20 g BB dan dosis 12,48 Mg/20 g BB yang mengacu pada dosis pendekatan
pada penelitian sebelumnya.
6) Kontrol positif yaitu tablet diazepam dan kontrol negatif yaitu suspending agent
7) Uji stabilitas sediaan suspensi ekstrak daun Selada (Lactuca sativa) dilakukan dengan
metode freeze thaw cycle pada suhu 0oC, dan 40 oC selama 6 siklus. Pengujian yang
dilakukan meliputi uji organoleptis, uji pH, uji viskositas dan uji sedimentasi.
1.3 Identifikasi Masalah
Identifikasi masalah dalam penelitian ini adalah :
1) Menguji efektivitas sedatif suspensi ekstrak daun selada (Lactuca sativa) pada mencit
putih jantan.
2) Mengetahui dosis efektifitas suspensi ekstrak daun selada (Lactuca sativa) yang paling
efektif sebagai obat sedatif pada mencit putih jantan.
3) Mengetahui stabilitas suspensi ekstrak daun selada (Lactuca sativa) selama penyimpanan
pada suhu dan waktu tertentu.
1.4 Rumusan Masalah
Berdasarkan latar belakang diatas, maka penulis mencoba merumuskan masalah yang
akan dibahas pada penelitian, yaitu sebagai berikut :
1) Apakah suspensi ekstrak daun Selada (Lactuca sativa) memiliki efek sedatif terhadap
mencit putih jantan ?
2) Pada dosis berapakah suspensi ekstrak daun Selada (Lactuca sativa) mempunyai efek
sedatif yang setara dengan kontrol positif ?
3) Apakah sediaan suspensi ekstrak daun Selada (Lactuca sativa) stabil selama
penyimpanan pada suhu dan waktu tertentu?
1.5 Tujuan Penelitian
1) Mengetahui efektivitas sedatif suspensi ekstrak daun selada (Lactuca sativa) pada mencit
putih jantan.
2) Mengetahui dosis suspensi ekstrak daun selada (Lactuca sativa) yang memberikan efek
setara dengan kontrol positif.
3) Untuk mengetahui stabilitas sediaan suspensi ekstrak daun Selada (Lactuca sativa)
selama penyimpanan pada suhu dan waktu tertentu.
4
1.6 Manfaat Penelitian
1) Manfaat Individu
Dapat mengetahui perbandingan efek sedatif suspensi ekstrak daun Selada dengan
diazepam.
2) Institusi Pendidikan
Penelitian ini diharapkan dapat dijadikan sebagai referensi dilingkungan institusi
pendidikan untuk Sekolah Tinggi Farmasi YPIB Cirebon.
3) Masyarakat
Penelitian ini diharapkan dapat menambah pengetahuan dan wawasan bagi masyarakat
dalam upaya pengembangan dan pemanfaatan ekstrak daun selada dalam pengobatan
yang lebih rasional.
1.7 Tempat dan Waktu Penelitian
Tempat
Penelitian akan di laksanakan di Laboratoriom Farmakologi dan Farmasetika Sekolah
Tinggi Farmasi (STF) YPIB Cirebon di jalan Perjuangan, Majasem, Cirebon, Jawa Barat.
1.8 Hipotesa
Ho :Suspensi ekstrak daun Selada (Lactuca sativa) pada dosis tertentu tidak efektif sebagai
sedatif pada mencit putih jantan.
H1 :Suspensi ekstrak daun Selada (Lactuca sativa) pada dosis tertentu efektif sebagai sedatif
pada mencit putih jantan.
5
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Tanaman Selada
2.1.1 Taksonomi Selada (Lactuca sativa)
Gambar tanaman selada (Lactuca sativa) dapat dilihat pada gambar sebagai berikut :
Gambar 2.1. Tanaman Selada
Taksonomi tanaman selada (http://www.wikipedia.org), adalah sebagai berikut:
Kingdom : Plantae (Tumbuhan)
Divisi : Magnoliophyta (Tumbuhan berbunga)
Kelas : Magnoliopsida (Biji berkeping dua/dikotil)
Ordo : Asterales
Famili : Asteraceae/Compositae
Genus : Lactuca
Spesies : Lactuca sativa
Menurut (Pracaya, 1999) selada yang dibudidayakan dan dikembangkan saat ini
mempunyai empat varietas sebagai berikut :
a. Selada kepala (Lactuca Sativa Var.Capitata L.)
Selada ini disebut juga selada kol. Susunan daunnya kompak seperti kepala.
Daunnya lebar, membulat, halus, dan lembut. Umumnya, selada ini hanya membentuk
kepala bila ditanam di daerah dataran tinggi, kecuali jenis Great Lakes.
b. Selada silindris (Lactuca Sativa Var.Longifolia Lam)
Varietas ini disebut juga sebagai selada kerucut, selada romain, dan selada cos.
Susunan daun selada berbentuk silinder atau kerucut. Bentuk daunnya seperti segi
6
empat memnajang dengan ujung daun lengkung. Tekstur daun keras, kaku, dan agak
kasar.
c. Selada daun atau selada keriting (Lactuca Sativa Var.Crispa.L)
Tanaman ini membentuk roset yang longgar. Tekstur daunnya mirip dengan
tekstur selada kepala dengan tepi berumbia. Umumnya dipanen dengan cara dipetik
daunnya satu persatu. Biasanya tipe selada ini lebih enak dikonsumsi dalam keadaan
mentah.
d. Selada batang atau asparagus (Lactuca Sativa Var.Asparagina Bailey,Sin.L.Sativa
Var.Angustana Irish)
Selada ini memiliki batang yang berdaging tebal yang dapat dikonsumsi. Daunnya
tidak dikonsumsi karena tidak enak dan bertekstur kasar. Selada ini tidak membentuk
krop, daun berukuran besar, bulat panjang, tangkai daun lebar dan berwarna hijau tua
serta memiliki tulang daun menyirip.
2.1.2 Morfologi Tanaman Daun Selada
a. Akar
Akar yang dimiliki oleh tanaman selada adalah akar tunggang dan serabut. Akar
tunggang tersebut tumbuh ke dalam tanah lurus cukup, sedangkan akar serabutnya
menempel pada batang selada kemudian mereka menyebar sekitar tanaman ini tumbuh
hingga sekitar 20-50 cm. Perakarannya juga bisa tumbuh dengan baik pada tanah
subur, mudah meyerap air dan gembur.
b. Batang
Batang pada selada merupakan batang sejati, yang membentuk crop dan tidak
membentuk crop. Batang tersebut pendek dan hampir tidak terlihat pada bagian dasar
di dalam tanah ada juga yang sebaliknya. Batang yang dimiliki selada memiliki sifat
kokoh, tegap, serta kuat berdiameter antar 2-7 cm.
c. Daun
Bentuk daun selada adalah bulat panjang bergerigi atau panjang dengan warna
hijau muda, terang dan merah. Tangkai pada daun selada adalah lebar dan tulang
daunnya menyirip yang mana setiap tangkainya kuat dan juga halus. Daun selada
memiliki sifat lunak dan renyah serta memiliki rasa manis ketika dimakan. Daun
tersebut memiliki ukuran sekitar 20-25 panjangnya sedangkan lebarnya 15 cm bahkan
lebih.
d. Bunga
7
Bunga pada tanaman selada adalah berwarna kuning yang tumbuh dalam satu
rangkaian secara lengkap. Bunga tersebut memiliki panjang sekitar 80 cm bahkan
lebih. Tanaman selada sendiri akan bisa tumbuh secara cepat dan berbuah jika di
tanam di daerah beriklim sedang atau subtropis.
e. Biji
Biji yang dimiliki oleh selada termasuk ke dalam biji berkeping dua yang
berbentuk lonjong pipih, agak keras, berbulu dan memiliki warna cokelat tua serta
berukuran sangat kecil sekitar 4 mm panjangnya sedangkan lebar sekitar 1 mm. Biji-
biji tersebut termasuk biji tertutup, sehingga bisa digunakan untuk memperbanyak
tanaman atau untuk perkembangbiakan.(http://agroteknologi.web.id/klasifikasi-dan-
morfologi-tanaman-selada-keriting/)
2.1.3 Kandungan Kimia Daun Selada
Selada mempunyai kandungan gizi yang sangat tinggi terutama mineralnya.
Dalam 100 gram selada mengandung kalori 15000 kal, lemak 0,2 g, karbohidrat 2,9 g,
protein 1,20 g, P 25 mg, Ca 22 mg, vitamin A 540 SI, vitamin B 0,04 mg, Fe 0,5 mg
dan air 94,80 g. Daun selada mengandung lectucarium yang dapat merangsang tidur.
Zat ini merupakan jenis alkaloid, dan komponen utamanya adalah lactucerin, lactucin,
lactucicacid. Daun selada juga memiliki antioksidan yang tinggi, lutein, indo dan
betakarotin yang memiliki manfaat untuk menjaga tubuh dan melindungi tubuh dari
serangan kanker. Dapat juga menjaga kesehatan organ pencernaan dengan kandungan
serat yang tinggi. (http://agroteknologi.web.id/klasifikasi-dan-morfologi-tanaman-
selada-keriting/)
2.1.4 Kegunaan Daun Selada
Tanaman selada selain terkenal sebagai tanaman salad, selada ternyata dapat
dimanfaatkan sebagai bahan obat tradisional. Dengan mengkonsumsi daun selada
pada dosis 1200 mg sebelum tidur, mampu membantu mengatasi insomnia atau
gangguan susah tidur. (Adawiah, 2012)
Daun selada juga dapat mengobati beberapa macam penyakit, diantaranya
untuk demam, sakit kepala, infeksi paru-paru,rasa mual dilambung, muntaber, radang
kulit, wasir, rasa panas dan kering disertai dahak. (Muhlisah dan Hening, 2013)
2.2 Simplisia
2.2.1 Pengertian Simplisia
Simplisia adalah bahan alam yang digunakan sebagai obat yang belum
mengalami pengolahan apapun juga, kecuali dinyatakan lain berupa bahan yang telah
8
dikeringkan. Simplisia nabati adalah simplisia berupa tanaman utuh, bagian tanaman
dan eksudat tanaman kehalusan tertentu. Simplisia hewani adalah simplisia berupa
hewan utuh, bagian hewan atau zat yang dihasilkan hewan yang masih belum berupa
zat kimia murni. (Anonim, 1979)
2.2.2 Pengumpulan Simplisia
Untuk mendapatkan bahan yang terbaik dari tumbuhan obat, perlu diperhatikan
saat-saat pengumpulan atau pemetikan bahan berkhasiat. Berikut ini pedoman waktu
pengumpulan bahan obat secara umum, bila tidak dinyakatakan lain.
a. Daun dikumpulkan sewaktu tanaman berbunga dan sebelum buah menjadi masak.
b. Bunga dikumpulkan sebelum atau segera setelah mekar.
c. Buah dipetik dalam keadaan masak.
d. Biji dikumpulkan dari buah yang masak sempurna.
e. Akar, rimpang (rhizoma), umbi (tuber), dan umbi lapis (bulbus) dikumpulkan
sewaktu proses pertumbuhannya terhenti. (Dalimartha, 1999)
2.2.3. Pencucian dan Pengeringan
Bahan obat yang sudah dikumpulkan segera dicuci bersih, sebaiknya dengan air
yang mengalir. Setelah bersih, dapat segera dimanfaatkan bila diperlukan pemakaian
bahan segar. Namun, bisa juga dikeringkan untuk disimpan dan digunakan bila
sewaktu-waktu dibutuhkan.
Pengeringan bertujuan untuk mengurangi kadar air dan mencegah pembusukan
oleh cendawan atau bakteri. Dengan demikian, bahan dapat disimpan lebih lama
dalam toples atau wadah yang tertutup rapat. Bahan kering juga mudah dihaluskan
bila ingin dibuat serbuk. Berikut ini cara mengeringkan bahan obat.
a. Bahan berukuran besar atau banyak mengandung air dapat dipotong-potong
seperlunya terlebih dahulu.
b. Pengeringan bisa langsung dibawah sinar matahari, atau memakai pelindung
seperti kawat halus jika menghendaki pengeringan yang tidak terlalu cepat.
c. Pengeringan bisa juga dilakukan dengan mengangin-anginkan bahan di tempat
yang teduh atau di dalam ruang pengering yang aliran udaranya baik. (Dalimartha,
1999)
9
2.3 Penyarian
2.3.1 Pengertian Penyarian
Penyarian adalah peristiwa pemisahan masa zat aktif yang semula berada di
dalam sel tertarik oleh larutan penyari sehingga zat larut di dalam pelarut penyari.
(Ansel, 1989)
Sistem pelarut yang digunakan dalam ekstrak harus dipilih berdasarkan
kemampuannya melarutkan jumlah maksimum dari zat aktif dan seminimal mungkin
zat yang tidak digunakan. (Ansel, 1989)
Ekstraksi adalah suatu cara untuk menarik satu atau lebih zat dari bahan asal.
Tujuan utama ekstraksi adalah mendapatkan atau memisahkan sebanyak mungkin zat-
zat yang memiliki khasiat pengobatan (concentrata) dari zat-zat yang tidak berfaedah,
agar lebih mudah dipergunakan (kemudahan diabsorpsi, rasa, pemakaian dan lain-lain)
dan disimpan dibandingkan simplisia asal, dan pengobatannya lebih terjamin.
(Syamsuni, 2006)
2.3.2 Ekstrak
Ekstrak adalah sediaan yang dapat berupa kering, kental dan cair, dibuat dengan
menyari simplisia nabati atau hewani menurut cara yang sesuai, yaitu maserasi,
perkolasi atau penyeduhan dengan air mendidih.
Pembuatan sediaan ekstrak dimaksudkan agar zat berkhasiat yang terdapat di
simplisia terdapat dalam bentuk yang mempunyai kadar yang tinggi dan hal ini
memudahkan zat berkhasiat dapat diatur dosisnya. (Anief, 1997)
2.3.3 Maserasi
Maserasi adalah proses perendaman sampel menggunakan pelarut organik pada
temperatur ruangan. Proses ini sangat menguntungkan dalam isolasi senyawa bahan
alam karena dengan perendaman sampel tumbuhan akan terjadi pemecahan dinding
dan membran sel akibat perbedaan tekanan antara di dalam dan di luar sel, sehingga
metabolit sekunder yang ada dalam sitoplasma akan terlarut dalam pelarut organik dan
ekstraksi senyawa akan sempurna karena dapat diatur lama perendaman yang
dilakukan. Pemilihan pelarut untuk proses maserasi akan memberikan efektivitas yang
tinggi dengan memperhatikan kelarutan senyawa bahan alam dalam pelarut tersebut.
Secara umum pelarut metanol merupakan pelarut yang banyak digunakan dalam
proses isolasi senyawa organik bahan alam karena metanol dapat melarutkan hampir
seluruh golongan metabolit sekunder. (https://id.wikipedia.org/wiki/Maserasi)
10
Kecuali dinyatakan lain, maserasi dilakukan sebagai berikut : sepuluh bagian
simplisia atau campuran simplisia dengan derajat halus yang cocok dimasukkan ke
dalam sebuah bejana, lalu dituangi 75 bagian cairan penyari, ditutup dan dibiarkan
selama 5 hari terlindung dari cahaya sambil sering diaduk. Setelah 5 hari campuran
tersebut diserkai, diperas, dicuci ampasnya dengan cairan penyari secukupnya hingga
diperoleh 100 bagian. Lalu maserat dipindah dalam bejana tertutup dan dibiarkan di
tempat sejuk, terlindung dari cahaya selama 2 hari, maserat dienaptuangkan atau
disaring. Kemudian maserat disuling atau diuapkan pada tekanan rendah pada suhu
tidak lebih dari 500C hingga konsistensi yang dikehendaki. (Anief , 1997)
2.3.4 Pelarut
Macam-macam cairan pelarut menurut (Syamsuni : 2006) antara lain :
a. Air
Termasuk pelarut yang murah dan mudah digunakan dengan pemakaian yang luas.
Pada suhu kamar, air adalah pelarut yang baik untuk berbagai zat, misalnya glukosida,
sakarida, asam tumbuh-tumbuhan dan garam-garam mineral. Akan tetapi, air memiliki
kekurangan sebagai pelarut, yaitu karena air dapat menarik banyak zat, namun banyak
di antara zat tersebut yang merupakan media yang baik untuk pertumbuhan jamur dan
bakteri, akibatnya simplisia mengembang sedemikian rupa sehingga mempersulit
proses penarikan. (Syamsuni, 2006)
b. Etanol
Etanol hanya dapat melarutkan zat-zat tertentu, tidak sebanyak air dalam
melarutkan berbagai jenis zat; oleh karena itu lebih baik dipakai sebagai cairan
penarik untuk sediaan galenik yang mengandung zat berkhasiat tertentu. Umumnya
etanol adalah pelarut yang baik untuk alkaloid, glukosida, damar-damar, dan minyak
atsiri, tetapi tidak untuk jenis gom, gula, dan albumin. Etanol juga menyebabkan
enzim-enzim tidak bekerja, termasuk peragian, serta menghalangi pertumbuhan jamur
dan sebagian besar bakteri sehingga disamping sebagai cairan penyari, juga berguna
sebagai pengawet. (Syamsuni, 2006)
c. Glycerinum
Terutama dipergunakan sebagai cairan tambahan pada cairan hidroalkoholik untuk
penarikan simplisia yang mengandung zat-zat samak. Gliserin adalah pelarut yang
baik untuk tanin dan hasil-hasil oksidasinya, jenis-jenis gom dan albumin juga larut
dalam gliserin.
11
d. Eter
Kebanyakan zat dalam simplisia tidak larut dalam cairan ini, tetapi beberapa zat
mempunyai kelarutan yang baik, misalnya lemak-lemak, damar, dan minyak-minyak.
Karena eter bersifat sangat atsiri, maka di samping mempunyai efek farmakologi,
cairan ini kurang tepat digunakan sebagai menstrum sediaan galenik cair, baik untuk
pemakaian dalam maupun untuk sediaan yang nantinya disimpan lama. (Syamsuni,
2006)
e. Solvent hexane
Merupakan pelarut yang baik untuk lemak-lemak dan minyak-minyak. Biasanya
digunakan hanya untuk mengawal lemakkan simplisia yang mengandung lemak-
lemak yang tidak diperlukan sebelum simplisia tersebut dibuat sediaan galeniknya.
(Syamsuni, 2006)
2.4 Suspensi
2.4.1 Pengertian Suspensi
Suspensi adalah sediaan yang mengandung bahan obat padat dalam bentuk halus
dan tidak larut, terdispersi dalam cairan pembawa. Suspensi oral adalah sediaan cair
yang mengandung partikel padat dalam bentuk halus yang terdispersi dalam cairan
pembawa dengan bahan pengaroma yang sesuai yang ditujukan untuk penggunaan
oral. Zat yang terdispersi harus halus, tidak bolecepat mengendap, dan bila digojog
perlahan-lahan, endapan harus segera terdispersi kembali. (Anief , 1997)
2.4.2 Syarat Suspensi
Persoalan suspensi yang pokok adalah mencegah fase dispersi mengendap
begitu cepat dan fase dispersi yang mengendap pada dasar tempat wadah tidak boleh
membentuk endapan yang keras (cake) tetapi dapat segera terdispersi kembali menjadi
campuran yang homogen bila wadah di gojog kembali. (Anief, 1997)
2.4.3 Bahan Pensuspensi (Suspending Agent)
a. Bahan pensuspensi dari alam
Bahan alam dari jenis gom sering disebut “gom atau hidrokoloid”. Gom dapat
larut dan mengembang atau mengikat air sehingga campuran tersebut membentuk
musilago atau lendir. Dengan terbentuknya musilago, viskositas cairan tersebut
bertambah dan akan menambah stabilitas suspensi. Golongan gom dari alam antara
lain, akasia (pulvis gummi arabic), chondrus, tragakan, algin. (Syamsuni, 2006)
b. Bahan pensuspensi alam bukan gom
12
Suspending agent dari alam bukan gom adalah tanah liat. Tanah liat yang
sering dipergunakan untuk tujuan menambah stabilitas suspensi ada tiga macam yaitu
bentonite, hectorite dan veegum. Apabila tanah liat dimasukkan ke dalam air mereka
akan mengembang dan mudah bergerak jika dilakukan penggojokan. Peristiwa ini
disebut “tiksotrofi”. Karena peristiwa tersebut, kekentalan cairan akan bertambah
sehingga stabilitas dari suspensi menjadi lebih baik. (Syamsuni, 2006)
c. Bahan pensuspensi sintetis
1) Derivat selulosa
Termasuk dalam golongan ini adalah metil selulosa (methosol, tylose),
karboksi metil selulosa (CMC), hidroksi metil selulosa. Dibelakang dari nama
tersebut biasanya terdapat angka atau nomor, misalnya methosol 1500. Angka
ini menunjukkan kemampuan cairan pelarut untuk menambah viskositasnya.
Semakin besar angkanya, kemampuannya semakin tinggi. Golongan ini tidak
diabsorbsi oleh usus halus dan tidak beracun sehingga banyak dipakai dalam
produksi makanan. CMC Na digunakan untuk suspending agent dalam sediaan
cair (pelarut air) yang ditujukan untuk pemakaian oral, eksternal, atau
parenteral. Untuk tujuan-tujuan ini 0,25% - 1% atau 0,5% - 2% CMC Na dengan
derajat viskositas medium umumnya mencukupi. Dalam farmasi selain untuk
bahan pensuspensi juga digunakan sebagai laksansia dan bahan penghancur
(disintergator) dalam pembuatan tablet.
2) Golongan organik polimer
Yang paling terkenal dalam kelompok ini adalah Cabophol 934 (nama
dagang suatu pabrik). Merupakan serbuk putih bereaksi asam, sedikit larut
dalam air, tidak beracun dan tidak mengiritasi kulit, serta sedikit pemakaiannya
sehingga bahan tersebut banyak digunakan sebagai bahan pensuspensi. Untuk
memperoleh viskositas yang baik diperlukan kadar ± 1%. Carbophol sangat
peka terhadap panas dan elektrolit. Hal tersebut akan mengakibatkan penurunan
viskositas dari larutannya. (Syamsuni, 2006)
2.4.4 Cara Mengerjakan Obat Dalam Suspensi
a. Metode dispersi
Dengan cara menambahkan serbuk bahan obat kedalam musilago yang telah
berbentuk, kemudian baru diencerkan. Perlu diketahui bahwa kadang-kadang terjadi
kesukaran pada saat mendispersikan serbuk ke dalam pembawa.Hal tersebut terjadi
karena adanya udara, lemak atau, kontaminan pada serbuk. Serbuk yang sangat halus
13
mudah termasuki udara sehingga sukar dibasahi. Mudah dan sukarnya serbuk dibasahi
tergantung pada besarnya sudut kontak antara zat terdispersi dengan medium. Bila
sudut kontak ± 90º serbuk akan mengambang diatas cairan. Serbuk yang demikian
disebut memiliki sifat hidrofob. Untuk menurunkan tegangan antar permukaan antara
partikel zat padat dengan cairan tersebut perlu ditambahkan zat pembasah atau wetting
agent. (Syamsuni, 2006)
b. Metode presipitasi
Zat yang hendak didispersi dilarutkan dahulu ke dalam pelarut organik yang
hendak dicampur dengan air. Setelah larut dalam pelarut organik, larutan zat ini
kemudian diencerkan dengan larutan pensuspensi dalam air sehingga akan terjadi
endapan halus tersuspensi dengan bahan pensuspensi. Cairan organik tersebut
adalahetanol, propilenglikol, dan polietilenglikol. (Syamsuni, 2006)
2.4.5 Bahan Pengawet Suspensi
Penambahan bahan lain dapat pula dilakukan untuk menambah stabilitas
suspensi, antara lain dengan penambahan bahan pengawet. Bahan ini sangat
diperlukan terutama untuk suspensi yang menggunakan hidrokoloid alam, karena
bahan ini sangat mudah dirusak oleh bakteri. (Syamsuni, 2006)
Sebagai bahan pengawet dapat digunakan butil parabenzoat, etil parabenzoat,
nipasol (digunakan untuk larutan minyak), propil parabenzoat, nipagin ( larutan air)
0,1% - 0,2%. Cara melarutkan nipagin dalam air yaitu dengan pemanasan sambil
digoyang-goyangkan.
2.4.6 Penilaian Stabilitas Suspensi
a. Uji organoleptis
Uji organoleptis ini dilakukan dengan pengamatan dari segi bau, bentuk, warna
yang memenuhi syarat suspensi.
b. Volume sedimentasi
Endapan yang terbentuk harus dengan mudah didispersikan kembali dengan
pengocokan sedangkan agar menghasilkan sistem homogen maka pengukuran volume
endapan dan mudah mendispersi membentuk dua prosedur evaluasi dasar yang paling
umum.
Volume sedimentasi adalah perbandingan antara volume sedimentasi akhir (Vu)
terhadap volume mula-mula suspensi (Vo) sebelum mengendap.
F = Vu / Vo
Volume sedimentasi dapat mempunyai harga dari <1 sampai >1. (Anief, 1993)
14
c. PH
PH merupakan penentu utama dalam kestabilan suatu obat yang cenderung
penguraian hidrolitik. Untuk kebanyakan obat pH kestabilan optimum adalah pada
situasi asam antara pH 5-6. Oleh karena itu, melalui penggunaan zat pendapar yang
tepat kestabilan senyawa yang tidak stabil dapat ditinggikan (Ansel, 1989). PH standar
suspensi menurut Kulshreshta, Singh, dan Wall antara 5-7.
d. Kekentalan (viskositas)
Kekentalan suatu cairan mempengaruhi pola kecepatan aliran dari suatu cairan
tersebut. Makin kental kecepatan alirannya, makin turun kecepatan aliran dari cairan
tersebut akan mempengaruhi pula gerakan turunnya partikel yang terdapat didalamnya
dengan menambah viskositas cairan. Gerakan turun dari partikel yang dikandungnya
akan diperlambat. Untuk lebih mudah viskositas dapat dianggap sebagai suatu sifat
yang relatf dengan air sebagai bahan rujukan dan semua viskositas dinyatakan dalam
istilah viskositas air murni pada suhu 20oC dengan nilai dianggap 1 cps.
Karena viskositas berubah-ubah tergantung pada temperatur, maka penentuan
temperatur jadi penting, umumnya viskositas cairan berkurang dengan meningkatnya
temperatur. (Ansel, 1989)
Perhitungan kekentalan (viskositas) dapat menggunakan rumus sebagai berikut :
η1
η2 =
𝜌1 𝑡1
𝜌2𝑡2
Keterangan :
η1 =viskositas cairan yang tidak diketahui
η2 = viskositas standar
ρ1dan ρ2 = bobot jenis masing-masing cairan
t1dan t2 = lamanya mengalir dalam detik
e. Perubahan ukuran partikel
Untuk menekankan tujuan pemeriksaan, stabilitas suspensi digunakan
carafreezing thaw cycling, yaitu dengan cara menurunkan suhu sampai titik beku lalu
dinaikkan sampai mencair kembali (> titik beku). Cara ini menaikkan pertumbuhan
kristal dan dapat menunjukkan kemungkinan keadaan berikutnya setelah disimpan
lama pada temperatur kamar. Yang pokok yaitu menjaga tidak akan terjadi perubahan
dalam ukuran partikel, distribusi ukuran partikel dan sifat kristal.
15
Meskipun freezing thawing cycle berguna sebagai pegangan, tapi informasi
stabilitas suspensi yang paling baik adalah diperoleh dari suspensi pada penyimpanan
suhu kamar. (Anief, 1993)
2.5 Tinjauan Tentang Hewan Uji
2.5.1 Klasifikasi Mencit
Mencit adalah binatang asli Asia, India, dan Eropa barat. Jenis ini sekarang
ditemukan di seluruh dunia karena pengenalan oleh manusia. Mencit peliharaan
memiliki periode kegiatan selama siang dan malam. Mencit (Mus musculus) adalah
anggota muridae (tikus-tikusan) yang berukuran kecil. Mencit percobaan
(laboratorium) dikembangkan dari mencit, melalui proses seleksi. Sekarang mencit
juga dikembangkan sebagai hewan peliharaan.
Klasifikasi mencit sebagai hewan uji dalam penelitian ini adalah sebagai berikut :
Gambar 2.2 Mencit putih jantan
Kerajan : Animalia
Filum : Chordata
Kelas : Mammalia
Ordo : Rodentia
Famili : Muridae
Subfamily : Murinae
Genus : Mus
Spesies : M. musculus
Nama Binomial : Mus musculus
(http://id.wikipedia.org/wiki/mencit)
16
2.5.2 Metode Penanganan Mencit
Kehadiran manusia akan menghambat aktivitas mencit, dalam laboratorium
mencit mudah ditangani, bersifat penakut, takut terhadap cahaya (fotofobik),
berkumpul sesamanya, punya kecenderungan untuk bersembunyi dan lebih aktif pada
malam hari. Lama hidup mencit 1 sampai 2 tahun, bisa mencapai 3 tahun. Berat badan
mencit yang berumur 4 minggu berkisar antara 20 g, berat meningkat sampai 30 g saat
dewasa. Dalam penanganan mencit dapat dilakukan dengan dua metode yaitu :
a. Metode yang paling umum dalam penanganan tikus/mencit dengan memegang
pangkal ekornya.
b. Metode yang paling aman adalah dengan memegang tubuh tikus/mencit dari
belakang dengan satu tangan dan tangan yang lain memegang pangkal ekor.
(Anonim, 2007)
2.6 Tidur
2.6.1 Fisiologi Tidur
Tidur merupakan salah satu cara untuk melepaskan kelelahan jasmani dan
kelelahan mental. Bagian susunan saraf pusat yang mengadakan kegiatan sinkronisasi
terletak pada substansia ventrikulo retikularis medulo oblogata yang disebut sebagai
pusat tidur. Bagian susunan saraf pusat yang menghilangkan
sinkronisasi/desinkronisasi terdapat pada bagian rostral medulo oblogata disebut
sebagai pusat penggugah atau aurosal state. (Japardi, 2002)
Fase awal tidur didahului oleh fase NREM (Non Rapid Eye Movement) yang
terdiri dari 4 stadium, lalu diikuti oleh fase REM (Rapid Eye Movement). Keadaan
tidur normal antara fase NREM dan REM terjadi secara bergantian antara 4-7 kali
siklus semalam. Bayi baru lahir total tidur 16-20 jam/hari, anak-anak 10-12 jam/hari,
kemudian menurun 9-10 jam/hari pada umur di atas 10 tahun dan kira-kira 7-7,5
jam/hari pada orang dewasa. (Japardi, 2002)
a. Tipe tidur NREM (Non Repaid Eye Movement)
Menurut ( Japardi, 2002 ) tipe NREM terdiri dari 4 stadium, antara lain :
1) Tidur stadium Satu.
Fase ini merupakan antara fase terjaga dan fase awal tidur. Fase ini
didapatkan kelopak mata tertutup, tonus otot berkurang dan tampak
gerakan bola mata kekanan dan kekiri. Fase ini hanya berlangsung 3-5
menit dan mudah sekali dibangunkan. Gambaran EEG (Elektro Encefalo
Gram) biasanya terdiri dari gelombang campuran alfa, betha dan kadang
17
gelombang theta dengan amplitudo yang rendah. Tidak didapatkan adanya
gelombang sleep spindle dan kompleks K.
2) Tidur stadium dua
Pada fase ini didapatkan bola mata berhenti bergerak, tonus otot masih
berkurang, tidur lebih dalam dari pada fase pertama. Gambaran EEG terdiri
dari gelombang theta simetris. Terlihat adanya gelombang sleep spindle,
gelombang verteks dan komplek K.
3) Tidur stadium tiga
Fase ini tidur lebih dalam dari fase sebelumnya. Gambaran EEG terdapat
lebih banyak gelombang delta simetris antara 25%-50% serta tampak
gelombang sleep spindle.
4) Tidur stadium empat
Merupakan tidur yang dalam serta sukar dibangunkan. Gambaran EEG
didominasi oleh gelombang delta sampai 50% tampak gelombang sleep
spindle.
Fase tidur NREM, ini biasanya berlangsung antara 70 menit sampai 100
menit, setelah itu akan masuk ke fase REM. (Japardi, 2002)
b. Tipe tidur REM
Pada waktu REM jam pertama prosesnya berlangsung lebih cepat dan menjadi
lebih insten dan panjang saat menjelang pagi atau bangun. Pola tidur REM
ditandai adanya gerakan bola mata yang cepat, tonus otot yang sangat rendah,
apabila dibangunkan hampir semua organ akan dapat menceritakan mimpinya,
denyut nadi bertambah dan pada laki-laki terjadi eraksi penis, tonus otot
menunjukkan relaksasi yang dalam. (Japardi, 2002)
2.6.2 Insidensi Gangguan Tidur
Gangguan tidur merupakan masalah umum pada pasien yang berusia
tua. Hampir semua orang pernah mengalami gangguan tidur selama masa
kehidupannya. Diperkirakan tiap tahun 20%-40% orang dewasa mengalami kesukaran
tidur dan 17% diantaranya mengalami masalah serius.
Prevalensi gangguan tidur setiap tahun cendrung meningkat, hal ini juga sesuai
dengan peningkatan usia dan berbagai penyebabnya. Kaplan dan Sadock melaporkan
kurang lebih 40-50% dari populasi usia lanjut menderita gangguan tidur. Gangguan
tidur kronik (10-15%) disebabkan oleh gangguan psikiatri, ketergantungan obat dan
alkohol.
18
Menurut data internasional of sleep disorder, prevalensi penyebab-penyebab
gangguan tidur adalah sebagai berikut: Penyakit asma (61-74%), gangguan pusat
pernafasan (40-50%), kram kaki malam hari (16%), psychophysiological (15%),
sindroma kaki gelisah (5-15%), ketergantungan alkohol (10%), sindroma terlambat
tidur (5-10%), depresi (65). Demensia (5%), gangguan perubahan jadwal kerja (2-
5%), gangguan obstruksi sesak saluran nafas (1-2%), penyakit ulkus peptikus (˂ 1 %),
narcolepsy (mendadak tidur) (0,03%-0,16%). (Japardi, 2002)
2.7 Sedatif
2.7.1 Pengertian Sedatif
Sedatif merupakan golongan obat depresan susunan saraf pusat (SSP) yang
relatif tidak selektif, mulai dari yang ringan yaitu menyebabkan tenang atau kantuk,
menidurkan, hingga yang berat yaitu hilangnya kesadaran, keadaan anestesi, koma dan
mati, bergantung pada dosis. Pada dosis terapi obat sedatif menekan aktivitas,
menurunkan respons terhadap merangsangan emosi dan menenangkan. Obat ini
menyebabkan kantuk dan mempermudah tidur serta mempertahankan tidur yang
menyerupai tidur fisiologis. (Anonim, 2005)
2.7.2 Penggolongan Obat Sedatif
a. Barbiturat
Barbiturat selama beberapa saat telah digunakan secara ekstensif sebagai hipnotik
dan sedatif. Efek hipnotik sedatif barbiturat dapat dicapai dalam waktu 30-60 menit
dengan dosis hipnotik. Tidurnya menyerupai tidur fisiologis, tidak disertai mimpi
yang menggangu. Fase tidur REM dipersingkat. Barbiturat sedikit menyebabkan sikap
masa bodoh terhadap rangsangan luar. (anonim, 2005)
Barbiturat yang kerjanya sedang hanya digunakan pada pengobatan insomnia
yang sulit diobati dan berat; pada pasien-pasien yang sebelumnya telah mendapat
barbiturat. Efek samping yang dapat terjadi pada penggunaan barbiturat diantaranya
adalah vertigo, mual, diare, kelainan emosional, mialgia (nyeri otot), neuralgia (nyeri
saraf). Pada beberapa individu, pemakaian ulang barbiturat terutama fenobarbital lebih
menimbulkan eksitasi (kesadaran hilang dan terjadi kegelisahan ) dari pada depresi.
Seperti halnya depresan SSP yang lain, barbiturat dapat disalahgunakan dan pada
beberapa individu dapat menimbulkan ketergantungan. Beberapa obat golongan
barbiturat adalah amobarbital, butabarbital, pentobarbital, fenobarbital. Namun
sekarang kecuali unutk beberapa penggunaan yang spesifik, barbiturat telah bnayk
digantikan oleh benzodiazepin yang lebih aman. (Anonim, 2005)
19
b. Benzodiazepin
Efek benzodiazepin hampir semua merupakan hasil kerja golongan ini pada SSP
dengan efek utama : sedasi, hipnosis, pengurangan terhadap perangsangan
emosi/ansietas, relaksasi oto dan anti konvulsi. Keunggulan benzodiazepin dibanding
barbiturat yaitu potensi penyalahgunaan yang rendah, margin dosis yang aman yang
lebar, dan rendahnya toleransi obat. (Anonim, 2005)
Selain efek sampingnya yang luas, secara umum benzodiazepin merupakan obat
yang relatif aman. Bahkan dosis tinggi jarang menimbulkan kematian kecuali jika
digunakan bersama-sama dengan depresan SSP yang lain misalnya alkohol. Beberapa
obat golongan benzodiazepin adalah diazepam, klordiazepokzid, flurazepam,
lorazepam, oksazepam, triazolam. (Anonim, 2005)
Diazepam adalah benzodiazepin yang sangat larut dalam lemak dan memiliki
durasi kerja yang panjang. Diazepam dilarutkan dengan pelarut organik seperti
propilen glikol karena tidak larut dalam air. Apabila digunakan untuk mengobati
kecemasan atau gangguan tidur, sedatif hipnotik biasanya diberikan secara oral.
Diazepm diabsorpsi dengan baik di saluran cerna. Secara oral onsetnya 30 menit,
dengan waktu puncak 1-2 jam dan durasi 2-3 jam.
Gambar 2.3 Mekanisme kerja benzodiazepin
Mekanisme kerja diazepam yaitu dengan meningkatkan reseptor GABA (
gamma-aminobutyric acid) terhadap neurotransmiter penghambat sehingga kanal
klorida terbuka dan terjadi hiperpolarisasi sinaptik membran sel dan mendorong post
20
sinaptik membran sel tidak dapat dieksitasi. Benzodiazepin tidak menggantikan
GABA tetapi meningkatkan frekuensi pembukaan saluran yang mengarah ke
peningkatan konduktansi ion klorida dan penghambatan potensial aksi. Hal ini yang
kemudian akan menghasilkan efek anxiolisis, sedasi atau relaksasi otot skeletal.
21
BAB III
METODE PENELITIAN
3.1 Objek penelitian
3.1.1 Populasi
Populasi adalah himpunan yang lengkap dari satuan-satuan atau individu-individu
yang karakteristiknya ingin kita ketahui. (Anggoro, 2011)
Populasi yang digunakan dalam penelitian ini adalah tanaman Selada (Lactuca
sativa.) dan mencit putih.
3.1.2 Sampel dan Penarikan Sampel
a. Sampel
Sampel adalah sebagian anggota populasi yang memberikan keterangan atau data
yang diperlukan dalam suatu penelitian. (Anggoro, 2011 )
Sampel yang digunakan dalam penelitian ini adalah Daun Selada (Lactuca sativa)
yang berwarna hijau dan masih segar dan mencit putih jantan.
b. Penarikan Sampel
Pengambilan sampel dilakukan dengan metode purposive sampling yaitu sampel
yang anggota sampelnya dipilih secara sengaja atas dasar pengetahuan dan keyakinan
peneliti. Anggota sampel dipilih yang memenuhi kualifikasi atau sesuai dengan
kriteria-kriteria yang ditentukan dan dapat dipertanggungjawabkan secara ilmiah.
Peneliti biasanya menggunakan informasi dari studi-studi terdahulu untuk
memperkuat alasan pemilihan anggota sampelnya. (Anggoro, 2011)
3.1.3 Variabel dan Operasional Variabel
Menurut (Anggoro : 2011), macam-macam variabel dengan penjelasannya sebagai
berikut:
a. Variabel Penelitian
1) Variabel Bebas
Variabel bebas atau independen (X) merupakan variabel resiko, sebab,
atau yang mempengaruhi variabel terikat (dependen). Variabel bebas dalam
penelitian ini adalah Suspensi ekstrak Daun Selada (Lactuca sativa) dengan
dosis 3,12 Mg/20 g BB ; 6,24 Mg/20 g BB ; 12,48 Mg/20 g BB.
2) Variabel Terikat
22
Variabel terikat atau dependen (Y) merupakan variabel akibat, efek, atau
yang terpengaruh setelah diberikan perlakuan. Variabel terikat dalam
penelitian ini adalah pengaruh efek sedatif pada mencit putih jantan.
3) Variabel Kontrol
Variabel kontrol merupakan variabel yang dikendalikan atau dibuat
konstan sehingga pengaruh variabel independen terhadap dependen tidak
dipengaruhi oleh faktor luar yang tidak diteliti. Variabel kontrol dalam
penelitian ini terdiri dari 2 variabel yaitu:
a) Kontrol positif (K+) adalah variabel kendali positif sebagai pembanding
yang berkaitan dengan variabel bebas. Yang menjadi kontrol positif
dalam penelitian ini adalah diazepam.
b) Kontrol negatif (K-) adalah variabel kendali negatif yang digunakan
sebagai variabel netral. Yang menjadi kontrol negatif dalam penelitian ini
adalah suspending agent.
b. Operasional Variabel
Gambar 3.1 Operasiaonal Variabel
Keterangan :
X1 : Suspensi Ekstrak Daun Selada dosis 3,12 Mg/20 g BB
X2 : Suspensi Ekstrak Daun Selada dosis 6,24 Mg/20 g BB
X3 : Suspensi Ekstrak Daun Selada dosis 12,48 Mg/20 g BB
K+ : Suspensi diazepam
K- : Suspending agent
Y : Efek sedatif yang ditimbulkan pada mencit
X1
K-
Y
X2
X3
K+
23
3.2 Metode Penelitian
Metode penelitian yang digunakan yaitu metode eksperimental, yaitu melakukan
perlakuan atau percobaan pada objek yang sedang diteliti, dengan tujuan untuk mengetahui
segala yang timbul akibat perlakuan yang telah diberikan dan untuk memperoleh data.
Metode eksperimental secara khusus dimaksudkan untuk mengontrol hipotesis tandingan,
yaitu variabel yang bersaing dengan variabel independen yang sengaja dirancang. (Anggoro,
2011)
3.3 Desain Penelitian
Gambar 3.2 Kerangka Konsep
Determinasi
Daun Selada
Proses
Ekstraksi
Daun Selada
Proses Pembuatan
Suspensi Daun
Seladadengan
berbagai dosis
Pengujian efek
sedatif pada
hewan uji
Pengumpula
n Bahan
Pembuatan
Simplisia
Data
Pengamatan
Pengolahan
Data
Kesimpulan
Uji stabilitas
suspensi
Data Pengamatan
Kesimpulan
Uji fitokimia
(perekasi mayer)
Kesimpulan
24
3.4 Alat dan Bahan Penelitian
3.4.1 Alat Penelitian
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini diantaranya adalah sebagai berikut :
Tabel 3.1 Alat – alat yang digunakan dalam penelitian
No Nama Alat Keterangan
1 Maserator Untuk membuat ekstrak.
2 Kain planel Untuk menyaring pada proses
pembuatan ekstrak.
3 Beker gelas Untuk menampung ekstrak dan bahan
lain yang bersifat cair.
4 Gelas ukur Untuk mengukur volume zat cair.
5 Evaporator Untuk membuat ekstrak kental
5 Batang pengaduk Untuk mengaduk pada proses pembuatan
ekstrak.
6 Mortir dan Stemper Untuk menggerus atau menyatukan
semua bahan menjadi homogeny.
7 Sonde Untuk memudahkan memasukkan obat
pada hewan uji.
8 Pipet tetes Untuk mengambil zat cair.
9 Stopwatch Untuk mengukur waktu .
10 Bejana tempat mencit Untuk menempatkan mencit
11 Jembatan besi Untuk pengujian sedatif pada mencit
12 pH meter Untuk mengukur pH sediaan.
13 Timbangan analitik Untuk menimbang ekstrak dan CMC.
25
3.4.2 Bahan Penelitian
Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini diantaranya adalah sebagai
berikut :
Tabel 3.2 Bahan yang digunakan dalam penelitian
No Bahan Keterangan
1 Ekstrak Daun Selada Sebagai sampel yang digunakan
2 CMC Sebagai kontrol suspending agent
3 Diazepam tablet Sebagai kontrol positif
4 Nipagin Sebagai pengawet
5 Sirup simplex Sebagai pemanis
6 Etanol 70% Sebagai pelarut ekstraksi
7 Mencit putih jantan Sebagai hewan uji
3.5 Langkah Kerja
3.5.1 Determinasi Tanaman Daun Selada
Determinasi tanaman Daun Selada (Lactuca sativa), bertujuan untuk menetapkan
dan mencocokkan kebenaran yang berkaitan dengan ciri-ciri morfologi secara
makroskopis tanaman terhadap pusaka buku Flora Untuk Sekolah Indonesia C.G.G.J.
Van Steins (1978). Determinasi tanaman dilakukan di Laboraturium Sekolah Tinggi
Farmasi YPIB Cirebon di Jalan Perjuangan, majasem, cirebon.
3.5.2 Pengumpulan Tanaman Selada
Dari tanaman Selada (Lactuca sativa) diambil dan dipilih daunnya yang masih
segar dan berwarna hijau sebanyak 4 kg yang diperoleh dari bumijawa kabupaten
tegal.
3.5.3 Pembuatan Simplisia Daun Selada
Proses pembuatan simplisiaDaun Selada(Lactuca sativa) dilakukan dengan
cara, Daun Selada yang telah dikumpulkan,di sortasi basah agar bersih dari pengotor
yang melekat, lalu dicuci bersih dengan menggunakan air mengalir dan ditiriskan,
kemudian dilakukan pengeringan dengan cara diangin-anginkan terlebih dahulu,
kemudian dikeringkan dibawah sinar matahari tidak langsung untuk mencegah
pertumbuhan jamur atau bakteri, jika dimungkinkan dengan menggunakan oven.
Setelah dikeringkan kemudian disortasi kering untuk memisahkan bahan yang rusak
atau dibersihkan dari pengotor. Bahan yang sudah kering dan bersih kemudian
diserbuk dengan ditumbuk dahulu lalu diblender untuk mendapatkan serbuk yang
26
lebih halus. Serbuk yang telah jadi kemudian disimpan dalam botol cokelat atau
wadah palstik yang tertutup rapat.
3.5.4 Pembuatan Ekstrak Daun Selada Dengan Metode Maserasi
Pembuatan ekstrak Daun Selada dilakukan dengan cara maserasi menggunakan
pelarut etanol 70%. Sebanyak 100 gram simplisia Daun Selada dimasukkan kedalam
maserator, kemudian dituangi dengan 75 bagian cairan penyari (750ml), ditutup dan
dibiarkan terendam selama 5 hari sambil sering diaduk. Kemudian hasil rendaman
disaring dengan kain flanel. Ampas ditambahkan cairan penyari hingga diperoleh 100
bagian (1000ml). Setelah itu rendam selama 2 hari, kemudian disaring (Anief, 1997).
Semua maserat kemudian dipekatkan dengan evaporator sehingga diperoleh ekstrak
kental.
3.5.5 Pengujian Skrining Fitokimia Senyawa Alkaloid (Lactucarium)
Pengujian skrining fitokimia senyawa alkaloid dengan menggunakan pereaksi
mayer, yaitu sejumlah sampel dilarutkan dalam beberapa tetes asam sulfat 2 N
kemudian ditambah pereaksi mayer. Hasil uji dinyatakan positif bila dengan pereaksi
mayer terbentuk endapan putih kekuningan.
3.5.6 Pembuatan Larutan Diazepam
a. Perhitungan dosis
Dosis konversi yang diberikan untuk manusia (70 kg) terhadap mencit (20 gram)
adalah 0,0026.
Sediaan diazepam tablet = 5 mg
0,0026 x 5 mg = 0,013 mg
Jadi dosis untuk mencit dengan berat badan 20 gram adalah 0,013 mg.
Volume pemberian peroral untuk mencit dengan berat badan 20 gram adalah 0,5 ml
sehingga dosisnya adalah 0,013 mg / 0,5 ml.
Maka konsentrasi suspensi diazepam
= 0,013 𝑚𝑔
0,5 𝑚𝑙 (𝑝𝑒𝑟𝑙𝑎𝑘𝑢𝑎𝑛 𝑝𝑒𝑚𝑏𝑒𝑟𝑖𝑎𝑛 𝑝𝑎𝑑𝑎 𝑚𝑒𝑛𝑐𝑖𝑡
= 0,026 mg/ml
b. Formulasi suspensi diazepam
R/ Diazepam 0,026 mg/ml
CMC Na 1%
Nipagin 0,1%
Sirup simplex 10%
27
Aquadest ad 150 ml
M.F.Susp. 150 ml
c. Penimbangan bahan
Diazepam tablet = 0,026 mg/ml x 150 ml
=3,9 mg
3,9 mg / 5 mg x berat tablet diazepam = a mg
CMC Na = 1/100 x 150 ml = 1,5 gr
Nipagin = 0,1/100 x 150 ml = 0,15 gr
Syr.simplex = 10/100 x 150 ml = 15 ml
Aqua pro CMC Na = 1,5 gr x 20 ml = 30 ml
Aqua ad 150 ml
d. Pembuatan suspensi diazepam
1) Menyiapkan alat dan bahan.
2) Mengkalibrasi botol 150 ml.
3) Menggerus tablet diazepam 5 mg, kemudian ditimbang sebanyak a mg.
4) Menimbang CMC-Na sebanyak 1,5 gram dan nipagin sebanyak 0,15 gram.
5) Mencampurkan CMC-Na dengan 30 ml aqua pro CMC-Na yang telah
dipanaskan pada mortir biarkan sampai mengembang, gerus samapai
homogen.
6) Menambahkan diazepam yang telah ditimbang sebnayak a mg, gerus sampai
homogen.
7) Menambahkan syr.simples sebanyak 15 ml, gerus sampai homogen.
8) Menambahkan nipagin sebanyak 0,15 gr, gerus sampai homogen.
9) Memasukkan semua campuran dalam botol yang telah dikalibrasi dan beri
tanda K+ (kontrol positif).
e. Volume pemberian untuk mencit
=𝐵𝑒𝑟𝑎𝑡 𝐵𝑎𝑑𝑎𝑛 𝑠𝑒𝑏𝑒𝑛𝑎𝑟𝑛𝑦𝑎
𝐵𝑒𝑟𝑎𝑡 𝑏𝑎𝑑𝑎𝑛 𝑠𝑡𝑎𝑛𝑑𝑎𝑟𝑥 𝑉𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒 𝑝𝑒𝑚𝑏𝑒𝑟𝑖𝑎𝑛
Volume pemberian mencit dengan BB 20 g
=20
20x 0,5
= 0,5 ml
3.5.7 Pembuatan Suspensi Ekstrak Daun Selada (Lactuca sativa)
a. Dosis suspensi ekstrak daun selada
Dosis yang di gunakan untuk penelitian yaitu :
28
Dosis 1 = 3,12Mg / 20 g BB mencit
Dosis 2 = 6,24Mg / 20 g BB mencit
Dosis 3 = 12,48Mg / 20 g BB mencit
Volume pemberian per oral untuk mencit dengan berat badan 20 gram adalah 0,5 ml
sehingga dosisnya adalah 3,12 Mg / 0,5 ml ; 6,24 Mg / 0,5 ml ; 12,48 Mg / 0,5 ml.
b. Formula suspensi ekstrak Daun Selada
Untuk pembuatan formula suspensi ekstrak daun selada digunakan metode
konversi ke dosis manusia dan metode pengenceran. Dosis yang diperhitungkan untuk
pendekatan pembuatan formula suspensi adalah 12,48 Mg/ 20 g BB mencit.
Tabel 3.3 Formula Suspensi Ekstrak Daun Selada
Bahan yang
digunakan
Formula
Ekstrak daun selada K-
Ekstrak daun selada 15 gram 0
CMC-Na 1,5 gram 1,5 gram
Aqua pro CMC-Na 30 ml 30 ml
Nipagin 0,15 gram 0,15 gram
Syr. Simplex 15 ml 15 ml
Aquadest Ad 150 Ad 150
c. Tekhnik Pembuatan
1) Menyiapkan alat dan bahan
2) Mengkalibrasi botol 150 ml
3) Menimbang ekstrak Daun Selada sebanyak 15 gram
4) Menimbang CMC-Na sebanyak 1,5 gram dan nipagin sebanyak 0,15 gram
5) Mencampurkan CMC-Na dengan aqua pro CMC-Na (air panas 30 ml) pada
mortir biarkan sampai mengembang, gerus sampai homogen.
6) Memasukkan ekstrak Daun Selada yang telah ditimbang, gerus sampai
homogen.
7) Menambahkan sirup simplex sebanyak 15 ml, gerus sampai homogen.
8) Menambahkan nipagin masing-masing sebanyak 0,15 gram, gerus sampai
homogen.
9) Menambahkan sebagian aquadest aduk sampai homogen kemudian
masukkan kedalam botol 150 ml, tambahkan aquadest sampai tanda batas
kalibrasi.
29
10) Memberi tanda label suspensi ekstrak daun selada.
11) Untuk kontrol negatif dibuat hanya menggunakan suspending agent tanpa
zat aktif, lalu diberi label kontrol negatif.
d. Volume pengenceran dosis suspensi ekstrak daun selada
Formulasi suspensi ekstrak daun selada yaitu 15 gr/ 150 ml atau 0,1 gr/ml atau
100 mg/ml, sehingga pengenceran untuk masing-masing dosis adalah sebagai
berikut :
Dosis 3,12 mg/ 0,5 ml = 6,24 mg/ ml
V1 × P1 = V2 × P2
V1 × 6,24 = 1 × 100
V1 = 16,02 ml
Diambil 1 ml suspensi ekstrak daun selada, kemudian diencerkan dengan aquadest
sampai 16 ml.
Dosis 6,24 mg/ 0,5 ml = 12,48 mg/ ml
V1 × P1 = V2 × P2
V1 × 12,48 = 1 × 100
V1 = 8 ml
Diambil 1 ml suspensi ekstrak daun selada, kemudian diencerkan dengan aquadest
sampai 8 ml.
Dosis 12,48 mg/ 0,5 ml = 24,96 mg/ ml
V1 × P1 = V2 × P2
V1 × 24,96 = 1 × 100
V1 = 4 ml
Diambil 1 ml suspensi ekstrak daun selada, kemudian diencerkan dengan aquadest
sampai 4 ml.
e. Volume pemberian untuk mencit
=𝐵𝑒𝑟𝑎𝑡 𝐵𝑎𝑑𝑎𝑛 𝑠𝑒𝑏𝑒𝑛𝑎𝑟𝑛𝑦𝑎
𝐵𝑒𝑟𝑎𝑡 𝑏𝑎𝑑𝑎𝑛 𝑠𝑡𝑎𝑛𝑑𝑎𝑟𝑥 𝑉𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒 𝑝𝑒𝑚𝑏𝑒𝑟𝑖𝑎𝑛
Volume pemberian mencit dengan BB 20 g
=20
20x 0,5
= 0,5 ml
30
3.5.8 Evaluasi Sediaan
a. Uji Organoleptis
Pengujian organoleptis dilakukan dengan mengamati sediaan suspensi dari segi
bentuk, warna dan bau dengan cara masing-masing di ambil 3 ml kemudian di
amati.
b. Uji pH
pH suspensi berkisar antara 5-7, pengujian dilakukan dengan mengambil
sebanyak 3 ml masing-masing sediaan suspensi, kemudian celupkan pH stick
selama 1 menit, perubahan warna yang terjadi pada pH stik menunjukkan nilai pH
sediaan.
c. Uji Viskositas
Uji viskositas sediaan didapatkan dengan menggunakan alat viskometer.
1) Sediaan masing-masing dimasukkan ke dalam viskometer sebanyak 5 ml.
2) Kemudiaan dipipet kembali menggunakan balpipet sampai batas garis batas
atas.
3) Catat waktu yang digunakan cairan sampai pada garis batas bawah pada alat
viscometer.
4) Sebelum menggunakan sediaan dihitung dulu viskositas air yang berkisar
antara 37cp – 396cp atau setara dengan0,37 poise sampai 3,96 poise
d. Uji Sedimentasi
Uji sedimentasi adalah perbandingan antara volume sedimentasi akhir (Vu)
terhadap volume mula-mula (Vo) sebelum mengendap. Uji sedimentasi dapat
dilakukan dengan cara :
1) Masukkan sediaan yang sudah jadi kedalam beakerglass sebanyak 5 ml
2) Biarkan dan amati pemisahannya atau pengendapannya dalam waktu yang
telah ditentukankan yaitu selama 12 hari
3) Kemudian amati sediaan memisah atau tidak, jika tampak memisah maka
bagian bening yang akan diuku.
e. Uji Stabilitas
Uji stabilitas ini bertujuan untuk membuktikan bagaimana zat aktif sediaan
atau suspensi berubah seiring waktu, dibawah faktor lingkungan seperti temperatur,
kelembapan dan cahaya. Uji stabilitas ini dilakukan beberapa uji yaitu organoleptis,
uji pH, uji viskositas dan uji sedimentasi. Metode yang digunakan adalah freeze
thaw cycling, dimana sediaan dibiarkan pada suhu 00C dan 400C masing-masing 24
31
jam dan diuji setiap siklus ( 1 siklus = 48 jam). Uji stabilitas akan dilakukan 6 kali
siklus.
3.5.9 Uji Efektivitas Sedatif Ekstrak Daun Selada (Lactuca sativa).
a. Penyiapan Hewan Uji
Hewan uji yang digunakan adalah mencit putih jantan yang sudah dewasa, sehat
dan aktivitas normal dengan bobot badan rata-rata 20 gram. Hewan tersebut
diadaptasikan dengan lingkungan sekitarnya selama 1-2 hari. Hal ini dilakukan untuk
menghindari stress pada saat perlakuan. Mencit putih jantan disiapkan sebanyak 15
ekor yang dibagi dalam 5 kelompok, masing-masing kelompok terdiri dari 3 ekor
mencit dan dipuasakan selama 2 jam dan hanya diberi munum. Tujuannya adalah agar
sistem atau saluran pencernaannya kosong sehingga tidak akan mempengaruhi
absorpsi obat yang diberikan.
b. Uji Sedatif
1) Menimbang masing-masing berat badan mencit.
2) Memberi tanda pada semua mencit agar mudah membedakan mencit sesuai
dengan kelompoknya yaitu kontol positif, kelompok bahan uji dan kontrol
negatif.
3) Memberi perlakuan sediaan uji pada masing-masing kelompok.
4) Kelompok I diberi diazepam sebanyak 0,5 ml sebagai kontrol positif.
5) Kelompok II diberi suspending agent sebanyak 0,5 ml sebagai kontrol negatif.
6) Kelompok III diberi suspensi ekstrak Daun Selada (Lactuca sativa) dengan
dosis 3,12 Mg / 0,5 ml
7) Kelompok IV diberi suspensi ekstrak Daun Selada (Lactuca sativa) dengan
dosis 6,24 Mg / 0,5 ml
8) Kelompok V diberi suspensi ekstrak Daun Selada (Lactuca sativa) dengan
dosis 12,48 Mg / 0,5 ml
9) Setelah perlakuan mencit kemudian diletakkan pada jembatan besi.
10) Catat berapa kali frekuensi mencit terjatuh dari jembatan besi dalam waktu 10
menit, mencit normal mampu mempertahankan posisi pada jembatan besi.
11) Adanya gangguan neurologi minimum ( misalnya sedasi, ataksia) ditunjukkan
oleh ketidakmampuan mencit mempertahankan posisinya di jembatan besi dan
jatuh lebih cepat.
12) Perlakuan diulangi sebanyak 3 kali.
13) Mengolah dan menganalisa data yang diperoleh.
32
Skema uji pada mencit
Gambar 3.3. Skema pemberian perlakuan pada hewan uji
Keterangan :
Kelompok I : kelompok kontrol positif, diazepam
Kelompok II : kelompok kontrol negatif, suspending agent
Kelompok III : Suspensi ekstrak Daun Selada dosis 1 (3,12 Mg/ 0,5 ml)
Kelompok IV : Suspensi ekstrak Daun Selada dosis 2 (6,24 Mg/ 0,5 ml)
Kelompok V : Suspensi ekstrak Daun Selada dosis 3 (12,48 Mg/ 0,5 ml)
Disiapkan 15 ekor mencit putih jantan
Dibagi menjadi 5 kelompok perlakuan masing-masing 3 ekor
Dipuasakan selama 2 jam dengan tetap diberi minum
Menimbang berat badan masing-masing mencit dan beri tanda
mencit
III
Suspensi
ekstrak
Daun
Selada dosis
I
I
Kontrol (+)
diazepam
II
Kontrol (-)
suspending
agent
V
Suspensi
ekstrak
Daun Selada
dosis III
IV
Suspensi
ekstrak
Daun Selada
dosis II
Mencit diletakkan pada jembatan besi dan hitung berapa kali mencit
jatuh selama 10 menit
Memberi perlakuan sediaan uji pada mencit
33
3.6 Sumber Data dan Alat Pengumpulan Data
3.6.1 Sumber Data
Sumberdata yang diperoleh dalam penelitian ini terbagi kedalam 2 bagian yaitu:
1. Sumber Data Primer
Data primer merupakan data yang diperoleh langsung dari objek yang diteliti.
Dalam penelitian ini data primer yang diperoleh dari hasil uji efek sedatif suspensi
ekstrak Daun Selada pada mencit putih jantan.
2. Sumber Data Sekunder
Data sekunder merupakan data yang diperoleh dalam bentuk data yang sudah jadi,
seperti data dalam dokumen dan publikasi. Adapun sumber data yang diperoleh
penulis yaitu data yang didapatkan dari berbagai macam bahan pustaka dan jurnal
penelitian ilmiah yang berhubungan dengan uji efek sedatif pada mencit putih jantan.
3.6.2 Pengumpulan Data
Pengumpulan data pada penelitian ini dilakukan dengan cara observasi, yaitu
melakukan pengamatan terhadap timbulnya ketidakmampuan mencit untuk
mempertahankan posisinya dan jatuh lebih cepat dari jembatan besi setelah diberi
perlakuan kontrol positif, kontrol negatif dan bahan uji.
3.7 Teknik Pengolahan dan Analisa Data
Analisis data yang berupa ketidakmampuan mencit mempertahankan posisi tubuh (jatuh)
dari jembatan besi hasil uji efektivitas sedatif suspensi ekstrak Daun Selada (Lactuca sativa)
pada mencit putih jantandilakukan dengan menggunakan uji Anava satu arah (One Way
Anova) bertujuan untuk membuktikan hipotesis yang telah dibuat apakah terdapat aktivitas
atau tidak. Kemudian dilanjutkan denganuji T pada tingkat kepercayaan 95% bertujuan
untuk menguji atau membandingkan perlakuan mana yang memiliki signifikansi yang
akurat.
a. Uji Normalitas
Langkah awal untuk melakukan uji ANAVA satu arah yaitu dilakukan uji
normalitas. Data dikatakan normal jika nilai (sig) > 0,05. Nilai 0,05 (5%) didapat dari
nilai probabilitas keyakinan untuk analisa data. Tujuan dilakukannya uji normalitas yaitu
untuk mengetahui apakah data yang didapatkan dari penelitian berdistribusi normal atau
tidak.
34
b. Uji Homogenitas
Uji homogen juga diperlukan seb
elum melakukan uji ANAVA satu arah. Data dikatakan homogen jika nilai (sig) >
0,05. Tujuan dilakukannya uji homogenitas yaitu untuk mengetahui apakah data yang
didapatkan homogen atau tidak.
c. Analisis Varian (Anava)
Kriterian pembacaan hasil yaitu sebagai berikut:
1) Jika nilai signifikannya < 0,05dan atau jika Fhitung > Ftabel maka Ho ditolak dan H1
diterima.
2) Jika nilai signifikannya > 0,05 dan atau jika Fhitung < Ftabel maka Ho diterima dan H1
ditolak
Tabel 3.4 Anava satu arah (One Way Anova)
Sumber
Variasi
Derajat
Kebebasan
(DK)
Jumlah
Kuadrat
(JK)
Kuadrat Tengah
(KT)
F hitung
Rata-rata 1 Ry R
1
KTP
KTK
Antar
Perlakuan K – 1 Py KTP =
Py
( K−1 )
Kekeliruan
Eksperimen ∑ ( n – 1 ) Ey KTK =
Ey
∑( n−1 )
Jumlah
Total ∑ n ∑y²
Keterangan tabel dapat dilihat sebagai berikut :
∑y² = Jumlah kuadrat-kuadrat (JK) semua nilai penelitian
Ry = Jumlah kuadrat-kuadrat (JK) untuk rata-rata = J²
∑𝑛
Py = Jumlah kuadrat-kuadrat (JK) antar perlakuan = ∑ ( J²
𝑛𝑖 ) – Ry
Ey = Jumlah kuadrat-kuadrat (JK) kekeliruan eksperimen= ∑y²-Py-Ry
KTP = Kuadrat tengah perlakuan
KTK = Kuadrat tengah kekeliruan
d. Analisis Uji t
Kriteria pembacaan hasil yaitu sebagai berikut:
35
1) Jika nilai thitung> ttabel maka Ho ditolak dan H1 diterima
2) Jika nilai thitung< ttabel makamaka Ho diterima dan H1 ditolak
Hipotesis pembacaan uji t yaitu:
HO = Tidak terdapat perbedaan yang signifikan antara suspensi ekstrak Daun Selada
(Lactuca sativa) dengan kontrol positif.
H1 = Terdapat perbedaan yang signifikan antara suspensi ekstrak Daun Selada
(Lactuca sativa) dengan kontrol positif.
Rumus :
a. S2 = 𝑛∑𝑋i
2− (∑𝑋i)²
𝑛(𝑛−1)
b. S = √∑ (𝑥ᵢ−�̅�𝑛
𝑖=1 )²
𝑛−1
c. r = ∑𝑥𝑦−
(∑𝑥)(∑𝑦)
𝑛
√(∑𝑥2−(∑𝑥)2
𝑛)( ∑𝑦2−
(∑𝑦)2
𝑛)
d. thitung = �̅�1−�̅�2
√𝑆1
2
𝑛1+
𝑆22
𝑛2−2𝑟(
𝑆1
√𝑛1)(
𝑆2
√𝑛2)
Keterangan :
𝑋1̅̅ ̅ = Rata-rata sampel
S1 = Simpangan Baku Sampel
S2 = Varians Sampel
R = Korelasi Antara dua Sampel
e. Statistik Non Parametrik
Statistik Non Parametrik, yaitu statistika bebas sebaran (tidak mensyaratkan bentuk
sebaran parameter populasi, baik normal atau tidak). Metode statistik non parametrik
yang digunakan adalah Kruskal Wallis dan uji Mann Whitney U Test.
Uji Kruskal Wallis identik dengan uji One Way Anova pada pengujian parametris,
sehingga uji ini alternatif bagi uji One Way Anova apabila tidak memenuhi asumsi misal
asumsi normalitas. Sehingga pada uji Kruskal Wallis, asumsi normalitas dapat di abaikan
Kriterian pembacaan hasil yaitu sebagai berikut:
1) Jika nilai signifikannya < 0,05dan atau jika Fhitung > Ftabel maka Ho ditolak dan H1
diterima.
2) Jika nilai signifikannya > 0,05 dan atau jika Fhitung < Ftabel maka Ho diterima dan H1
ditolak
36
Uji Mann Whitney U Test digunakan untuk mengetahui perbedaan median 2
kelompok bebas apabila skala data variabel terikatnya adalah interval/ratio tetapi tidak
berdistribusi normal. Uji ini digunakan sebagai alternatif jika uji independent T test tidak
dapat dilakukan oleh karena normalitas tidak terpenuhi.
Kriteria pembacaan hasil yaitu sebagai berikut:
1) Jika nilai nilai signifikannya < 0,05 dan atau thitung> ttabel maka Ho ditolak dan H1
diterima
2) Jika nilai nilai signifikannya > 0,05 dan atau thitung< ttabel maka Ho diterima dan H1
ditolak
Hipotesis pembacaan uji Mann Whitney U test yaitu:
HO = Tidak terdapat perbedaan yang signifikan antara suspensi ekstrak Daun Selada
(Lactuca sativa) dengan kontrol positif.
H1 = Terdapat perbedaan yang signifikan antara suspensi ekstrak Daun Selada
(Lactuca sativa) dengan kontrol positif.
37
DAFTAR PUSTAKA
Adawiah, rabiatul. 2012. Cara Pemanfaatan Daun Selada (Lactuca Sativa) Sebagai Obat
Penyakit Insomnia. Ungaran: Fakultas Farmasi Universitas Ngudi Waluyo
Anggoro, M. Toha, dkk. 2011. Metode Penelitian. Jakarta: Universitas Indonesia
Anief, Moh. 1997. Ilmu Meracik Obat. Yogyakarta: Gajahmada University Press
. 1993. Farmasetika. Yogyakarta: Gajahmada University Press
Anonim. 1979. Farmakope Indonesia Edisi Tiga. Jakarta: Departemen Kesehatan Republik
Indonesia
. 1995. Farmakope Indonesia Edisi Empat. Jakarta: Departemen Kesehatan Republik
Indonesia
. 2000. Informatorium Obat Nasional Indonesia. Jakarta: Direktorat Jenderal
Pengawasan Obat dan Makanan Departemen Kesehatan Republik Indonesia
. 2005. Farmakologi dan Terapi Edisi 4. Jakarta: Fakultas Kedokteran Universitas
Indonesia
. 2007. Kebijakan Obat Tradisional Nasional Tahun 2007. Jakarta: Departemen
Kesehatan Republik Indonesia.
. 2007. Petunjuk Praktikum Farmakologi. Yogyakarta: Poltekkes Permata Indonesia
Ansel, H.C. 1989. Pengantar Bentuk Sediaan Farmasi Edisi IV. Jakarta: Universitas Indonesia
Press
Dalimartha, Setiawan dr. 1999. Atlas Tumbuhan Obat Indonesia Jilid I. Jakarta: PT Pustaka
Pembangunan Swadaya Nusantara
Darmawan, Ujang. 2012. Uji Efektivitas Infusa Daun Kecubung (Datura Metel L.) Sebagai
Hipnotik Sedativa Pada Mencit. Cirebon: Sekolah Tinggi Farmasi YPIB
Fitriani, Yuyun, dll. 2015. Formulasi dan Evaluasi Stabuilitas Fisik Suspensi Ubi Cilembu
(Ipomea Batatas L.) dengan Suspending Agent CMC Na dan PGS sebagai
Antihiperkolesterol. Journal Of Pharmacy Science and Practice Vol.2 No 1. Kediri:
Institut Ilmu Kesehatan Bhakti Wiyata Kediri
Iskandar, Japardi. 2002. Gangguan Tidur. Sumatera: Universitas Sumatera Utara
Di ambil dari : Journal.library.usu.ac.id/download/fk/bedah-iskandar%20japardi.pdf
38
Lachman, Leon. 2012. Teori dan Praktek Farmasi Industri II Edisi Ketiga. Jakarta: Universitas
Indonesia
Lestari, Dini Ayu. 2015. Uji Efektivitas Ekstrak Buah Matoa (Pomitea Pinata) Sebagai Obat
Penenang Terhadap Mencit Putih. Cirebon: Sekolah Tinggi Farmasi YPIB
Muhlisah, Fauziah dan Sapra Hening. 2013. Sayur dan Bumbu Dapur Berkhasiat Obat. Jakarta:
PT Penebar Swadaya
Pracay, Ir. 2009. Bertanam Sayur Organik. Jakarta: Penebar Swadaya
Steenis, Van. 1978. Flora untuk Sekolah di Indonesia Cetakan Kedua. Jakarta: PT Pradnya
Paramita
Syamsuri, H.A,drs, Apt. 2006. Ilmu Resep. Jakarta: Buku Kedokteran EGC
Syaiful, Aris. 2009. Pengaruh Ekstrak Herba Putri Malu (Mimosa Pudica Linn) terhadap Efek
Sedasi pada Mencit BALB/C. Semarang: Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro
Wahyuni, Rina, dll. 2017. Formulasi dan Evaluasi Stabilitas Fisik Suspensi Ibuprofen
menggunakan Kombinasi Polimer Serbuk Gom Arab dan Natrium Karboksimetilselulosa.
Jurnal Farmasi Higea
http://docslide.net/documents/insomnia-558463c27b304.html
https://agroteknologi.web.id/klasifikasi-dan-morfologi-tanaman-selada-keriting/
https://id.wikipedia.org/wiki/insomnia
https://id.wikipedia.org/wiki/maserasi
https://id.wikipedia.org/wiki/mencit
https://id.wikipedia.org/wiki/selada