uji efektifitas dan metode pengujian ekstrak teh hijau sebagai obat alami pnyembuh jerawat1

8/10/2019 Uji Efektifitas Dan Metode Pengujian Ekstrak Teh Hijau Sebagai Obat Alami Pnyembuh Jerawat1

1/26

6

BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Fase pertumbuhan seorang anak menuju fase remaja biasanya disertai dengan banyak

perubahan fisik, salah satunya adalah mulai timbulnya jerawat pada kulit. Jerawat timbul karena

kelenjar minyak yang berlebih yang dikontrol oleh hormon androgen uang bercampur dengan

sel sel kulit mati. Ketika sel-sel kulit itu bercampur dengan jumlah debu atau kotoran yang

sudah meningkat itu, campuran yang tebal dan lengket itu dapat membentuk penyumbat yang

menjadi bintik hitam atau putih. Di dalam kotoran dan debu terdapat bakteri P.Acne

berkembang biak di dalam kelenjar minyak yang tersumbat sehingga menyebabkan kulitmenjadi iritasi disekitarnya. Kelenjar itu terus membengkak dan akhirnya pecah. Ditambah lagi

dengan kehadiran bakteri S. aureusyang dapat menyebabkan infeksi pada kulit yang iritasi.

Tetapi sayangnya, pengobatan jerawat di Indonesia masih terhitung susah dan mahal,

seperti pergi untuk ke dokter dengan harga yang mahal serta ketidakaman obat-obat penyembuh

jerawat yang memakai bahan-bahan kimia buatan yang dapat menimbulkan efek samping

lainnya seperti penyakit kulit.

Dalam kandungan daun teh hijau terdapat senyawa alami polifenol yang bersifat sebagai

antimikroba, antioksidan, antiradiasi dan pembunuh sel kanker. Antimikroba pada teh dapat

berfungsi sebagai anti bakteri dan virus sehingga dapat melawan bakteri pada jerawat dan

mencegah infeksi pada kulit. Sedangkan antioksidan pada teh hijau dapat bekerja dengan cara

eksfoliasi pada kulit yang berjerawat. Eksfoliasi adalah kemampuan untuk mengelupaskan sel-

sel kulit yang telah mati. Semakin tinggi kadar polifenol dalam teh, semakin tinggi pula

kapasitas antioksidan dalam teh.

Salep adalah sediaan setengah padat yang mudah dioleskan dan digunakan sebagai obat

luar. Bahan obatnya larut atau terdispersi homogen dalam dasar salep yang cocok. Ekstrak daun

teh dijadikan salep karena salep mudah dibuat dengan cara yang sederhana dan paling cocok

digunakan untuk obat luar seperti obat menyembuhkan jerawat


2/26

7

1.2 Tujuan

1. Menguji konsentrasi ekstrak daun teh hijau yang paling efektif sebagai obat alami untuk

menyembuhkan jerawat.

2. Untuk mengetahui minimum komposisi kandungan yang paling efektif sebagai salep

penyembuh jerawat

1.3 Rumusan Masalah

1. Pada konsentrasi berapakah ekstrak daun teh hijau paling efektif dalam menyembuhkan

jerawat?

2.

Bagaimana minimum komposisi kandungan yang paling efektif dalam pembuatan obat

penyembuh jerawat?

1.4 Batasan Masalah

1. Uji kandungan variasi konsentrasi 25%, 50%, 75%

2. Pengujian dilakukan secara invitro menggunakan bakteriP.Acne danS. aureus

1.5 Manfaat Penelitian

1. Untuk menemukan obat penyembuh jerawat dari bahan alami dengan harga terjangkau

2. Agar salep ekstrak daun the hijau penyembuh jerawat yang telah layak dijual di pasaran

1.6 Hipotesis

1. Antibakteri dari ekstrak daun teh hijau efektif sebagai obat alami penyembuh jerawat.

2. Salep adalah metode yang paling tepat sebagai obat alami penyembuh jerawat

3. Semakin tinggi konsenrasi dari ekstrak daun teh hijau, semakin efektif dalam membunuh

bakteriP.acne dan S.aureus


3/26

8

BAB II

LANDASAN TEORI

2.1 Teh (Camell ia sinensis)

2.1.1 Deskripsi Teh (Camell ia sinensis)

Tanaman teh termasuk jenis pohon, tapi karena pemangkasan kerapkali seperti perdu, tinggi 5-

10 m. Ujung ranting dan daun muda berambut halus. Daun tersebar, tunggal, helaian daun elipis

memanjang, dengan pangkal runcing, bergigi, seperti kulit tipis, 6-18 x 2-6 cm. Bunga diketiak,

berkelamin dua, bunga yang membuka menunduk, garis tengah 3-4 cm, sangat harum, putih

cerah (Steenis, 2008).

Daun kelopak tetap 5-6, sangat tidak sama. Daun mahkota pada pangkalnya melekat ringan.

Benang sari berlingkaran banyak, yang terluar pada pangkalnya bersatu, melekat dengan daun

mahkota, yang terdalam terlepas. Tangkai putik bercabang tiga. Buah kotak berkayu lebarnya

lebih daripada panjangnya, pecah menurut ruang, biji berjumlah 1-3 (Steenis, 2008).

2.1.2 Klasifikasi Cameli a sinensis

Kerajaan : Plantae

Divisi : Magnoliophyta

Kelas : Magnoliopsida

Ordo : Ericales

Famili : Theaceae

Genus : Camellia

Spesies : Camellia sinensis


4/26

9

2.1.3 Proses

Untuk mendapatkan teh hijau dari daun teh segar, ternyata harus melalui beberapa proses, antara

lain

1. Proses Pelayuan

a. Setelah penerimaan pucuk dari kebun, daun teh ditebar & diaduk aduk untuk mengurangi

kandungan air yang terbawa pada daun.

b. Setelah itu daun teh dilayukan dengan melewatkan daun tersebut pada silinder panas sekitar

5 menit (sistem panning) atau dilewatkan beberapa saat pada uap panas bertekanan tinggi

(sistem steaming), proses pelayuan ini bertujuan untuk mematikan aktivitas enzim sehingga

akan menghambat timbulnya proses fermentasi.

c. Menurunkan kadar air menjadi sekitar 60 - 70 %.

2. Proses Pendinginan

Bertujuan untuk mendinginkan daun setelah melalui proses pelayuan.

3. Proses Penggulungan Daun

a. Bertujuan untuk memecah sel-sel daun sehingga teh yang dihasilkan akan mempunyai rasa

yang lebih sepet

b. Proses ini hampir sama dengan proses penggilingan pada proses pembuatan teh hitam, tetapi

untuk proses pembuatan teh hijau daun yang dihasilkan sedapat mungkin tidak remuk / hanya

tergulung, dan mempunyai rasa yang lebih sepet. Proses penggulungan berkisar antara 15 - 30

menit.

4. Proses Pengeringan

a. Proses pengeringan yang pertama dilakukan adalah dengan menggunakan ECP drier,

kemudian setelah itu langsung dilanjutkan dengan pengeringan menggunakan rotary drier.


5/26

10

b. Proses pengeringan pertama akan menurunkan kadar air menjadi 30 - 35 %, dan akan

memperpekat cairan sel. Proses ini dilakukan pada suhu sekitar 110 - 135 C selama 30

menit.

c. Proses pengeringan kedua akan memperbaiki bentuk gulungan daun, suhu yang dipergunakan

berkisar antara 70 - 95 C dengan waktu sekitar 60 - 90 menit.

d. Produk teh hijau yang dihasilkan mempunyai kadar air 4 - 6 %.

5. Proses Sortasi

Proses ini bertujuan untuk mendapatkan teh hijau dengan berbagai kualitas mutu :

a. Peko (daun pucuk).

b. Jikeng (daun bawah / tua).

c. Bubuk / kempring (remukan daun).

d. Tulang (Andi Nur Alam Syah,2006).

2.1.4 Manfaat Teh

1. Mencegah dan mengobati kanker

Teh dikenal sebagai zat anti kanker, diantaranya kanker payudara, kanker lambung, kanker

prostat dan kanker rongga mulut. Kandungan pada teh yang berperan sebagai zat antikanker

adalah polifenol yang menyusun 25-35% berat kering teh. Salah satu polifenol yang populer

yaitu katekin terutama dalam bentuk EGCG (Epigallo catechin gallate). Dalam penelitian

EGCG terbukti menghambat pertumbuhan sel kanker payudara pada tikus (Alamsyah, 2006).

2. Antibakteri

Teh mempunyai manfaat sebagai antibakteri. Kandungan dalam teh yang berperan sebagai

antibakteri adalah katekin. Bakteri yang menyebabkan penyakit pada sistem pencernaan seperti

Clostridium perfringens dan C. Botulinum dapat dihambat pertumbuhannya oleh teh. Menurut


6/26

11

beberapa penelitiaan yang telah dilakukan teh hijau dapat membunuh bakteri Staphylococcus

aureus dan P.acnes. Bakteri penyebab plak gigi yaitu Streptococcus mutans dapat dihambat

aktivitas bakterinya (Alamsyah, 2006).

3. Teh meningkatkan kekebalan tubuh

Teh mempunyai kemampuaan untuk merangsang sel pada sistem kekebalan tubuh untuk

menjinakkan bakteri yang masuk ke dalam tubuh. Kandungan yang berperan adalah L-theanin

dan E-thylamine (Alamsyah, 2006)

4. Menjaga kesehatan kulit

Radikal bebas dapat mengganggu struktur kolagen pada kulit sehingga dapat mengganggu

kelembutan dan kesehatan kulit. Antioksidan yang terdapat pada teh mampu melindungi kulit

dari kerusakan akibat serangan radikal bebas (Alamsyah, 2006).

2.1.5 Mekanisme Aktivitas Antibakteri Teh

Kandungan teh yang berperan sebagai antibakteri adalah katekin (Tiwari et al, 2005). Katekin

merupakan prekursor pembentuk tanin. Tanin termasuk dalam kelompok polifenol yang

menghambat fungsi membran sitoplasma dan mendenaturasi protein. Katekin menghancurkan

membran lipid bilayer sehingga sel kehilangan struktur dan fungsinya dan akhirnya lisis (Ciraj

et al, 2005). Epigalokatekin, epigalokatekin galat dan flavanol memiliki peranan utama dalam

hambatan terhadap sintesis asam lemak bakteri (Zhang, 2004). Asam lemak dalam bakteri

digunakan terutama untuk membentuk membran sel bakteri. Oleh karena adanya hambatan

sintesis asam lemak maka pembentukan membran sel bakteri akan terganggu. Hal ini

mengakibatkan struktur dan fungsi membran sel bakteri rusak dan pada akhirnya sel bakteri

akan mengalami lisis dan mati (Rizky, 2006). Sifat katekin yang sangat larut air dan juga

lipofilik menyebabkan katekin sangat mudah melekat pada protein bakteri serta toksin yang


7/26

12

dihasilkan bakteri. Sehingga terbentuk ikatan yang menghambat perlekatan pada sel tubuh

manusia

b. Mekanisme kerja antibakteri

1. Menghambat sintesis dinding sel

Dinding sel bakteri terdiri dari peptidoglikan yaitu suatu kompleks polimer mukopeptida

(glikopeptida). Oleh karena tekanan osmotik dalam bakteri lebih tinggi daripada di luar sel

maka kerusakan dinding sel bakteri akan menyebabkan terjadinya lisis (Gunawan, 2007).

2. Menghambat metabolisme sel

Bakteri membutuhkan asam folat untuk kelangsungan hidupnya. Kuman patogen harus

mensisntesis sendiri asam folat dari asam amino benzoat (PABA) untuk kebutuhan hidupnya.

Efek antibakteri bekerja menghambat sintesis asam folat atau bersaing dengan PABA

(Gunawan, 2007).

3. Menganggu keutuhan membran sel

Membran sitoplasma mempertahankan bahan-bahan tertentu di dalam sel serta mengatur aliran

keluar masuknya bahan-bahan tertentu di dalam sel lain. Membran memelihara integritas

komponen-komponen seluler. Kerusakan pada membran ini akan menyebabkan keluarnya

berbagai komponen penting dari dalam sel yaitu protein, asam nukleat dan nukleotida. Efek

antibakteri dalam merusak membran sel dengan cara bereaksi dengan fosfat pada fosfolipid

membran sel bakteri dan bereaksi dengan struktur sterol sehingga mempengaruhi permeabilitas

selektif membran (Gunawan, 2007).

4. Menghambat sintesis protein sel

Untuk kehidupannya, sel bakteri perlu mensintesis berbagai protein. Sintesis protein

berlangsung di ribosom, dengan bantuan mRNA dan tRNA. Pada bakteri, ribosom 30S dan 50S.

Untuk berfungsi pada sintesis protein, kedua komponen ini akan bersatu pada pangkal rantai

mRNA menjadi ribosom 70s (Gunawan, 2007).


8/26

13

5. Menghambat sintesis asam nukleat sel

DNA, RNA dan protein memegang peranan amat penting di dalam proses kehidupan normal

sel. Hal itu berarti bahwa gangguan apapun yang terjadi pada pembentukan atau fungsi zat-zat

tersebut dapat mengakibatkan kerusakan total pada sel (Gunawan, 2007).

2.2 Jerawat

Jerawat merupakan suatu penyakit kulit yang mengalami pembengkakan (abses) pada per-

mukaannya, dimana kelenjar yang memproduksi minyak tersumbat dan terkontaminasi oleh

bakteri. Jerawat lebih sering terjadi di kalangan remaja, karena pada usia ini terjadi peningkatan

produksi hormon androgen. Hormon ini dapat meningkatkan kadar minyak, yang dapat

menyebabkan terjadinya penyumbatan dan penimbunan yang disebut ko-medo. Jerawat

mungkin lebih sering timbul pada remaja yang mempunyai jenis kulit berminyak, namun ada

beberapa kasus dimana jerawat juga dapat timbul pada seseorang yang sudah berumur puluhan

tahun Adapun Faktor penyebab timbul-nya jerawat adalah :

1) Adanya sumbatan di pori-pori kulit oleh sebum yang berubah menjadi padat.

2) Peningkatan produksi sebum akibat pengaruh hormonal, kondisi fisik, dan psikologis. Jika

di-sertai dengan sumbatan di muara kelenjar se-basea, aliran keluar sebum akan terbendung.

3) Peningkatan populasi dan aktivitas Propioni-umbacteri acnes karena bakteri ini terdapat di

bawah muara kelenjar sebasea dan suka memakan lemak sebum.

4) Reaksi radang akibat serbuan set darah putih ke sekitar kelenjar sebasea yang sudah meng-

alami bendungan dan akhimya pecan. Isi lemak sebum tumpah ke dalam jaringan kulit jangat

atau dermis, dan dianggap benda asing sehingga memancing serbuan set darah putih ke tempat

tersebut


9/26

14

2.3 Bakteri

2.3.1 Propionibacter ium acnes

Propionibacterium acnes termasuk dalam kelompok bakteri Corynebacteria. Bakteri ini

termasuk flora normal kulit. Propionibacterium acnes berperan pada patogenesis jerawat dengan

menghasilkan lipase yang memecah asam lemak bebas dari lipid kulit. Asam lemak ini dapat

mengakibatkan inflamasi jaringan ketika berhubungan dengan sistem imun dan mendukung

terjadinya akne. Propionibacterium acnes termasuk bakteri yang tumbuh relatif lambat. Bakteri

ini tipikal bakteri anaerob gram positif yang toleran terhadap udara. Genome dari bakteri ini

telah dirangkai dan sebuah penelitian menunjukkan beberapa gen yang dapat menghasilkan

enzim untuk meluruhkan kulit dan protein, yang mungkin immunogenic (mengaktifkan sistem

kekebalan tubuh). Ciri-ciri penting dari bakteri Propionibacterium acnes adalah berbentuk

batang tak teratur yang terlihat pada pewarnaan gram positif. Bakteri ini dapat tumbuh di udara

dan tidak menghasilkan endospora. Bakteri ini dapat berbentuk filamenbercabang atau

campuran antara bentuk batang/filamen dengan bentuk kokoid. Propionibacterium acnes

memerlukan oksigen mulai dari aerob atau anaerob fakul- tatif sampai ke mikroerofilik atau

anaerob. Beberapa bersifat patogen untuk hewan dan tanaman.

2.3.2 Klasifikasi Propionibacteri um acnes

Kingdom :Bacteria

Phylum :Actinobacteria

Class :Actinobacteridae

Order :Actinomycetales

Family :Propionibacteriaceae

Genus :Propionibacterium

Spesies :Propionibacterium acnes


10/26

15

2.3.3 Mekanisme kerja Propionibacteri um acnes

Akne terjadi ketika lubang kecil pada permukaan kulit yang disebut pori-pori tersumbat. Pori-

pori merupakan lubang bagi saluran yang disebut folikel, yang mengandung rambut dan

kelenjar minyak. Biasanya, kelenjar minyak membantu menjaga kelembaban kulit dan

mengangkat sel kulit mati. Ketika kelenjar minyak memproduksi terlalu banyak minyak, pori-

pori akan banyak menimbun kotoran dan juga mengandung bakteri. Mekanisme terjadinya

jerawat adalah bakteri Propionibacterium acnes merusak stratum corneum dan stratum germinat

dengan cara menyekresikan bahan kimia yang menghancurkan dinding pori. Kondisi ini dapat

menyebabkan inflamasi. Asam lemak dan minyak kulit tersumbat dan mengeras. Jika jerawat

disentuh maka inflamasi akan meluas sehingga padatan asam lemak dan minyak kulit yang

mengeras akan membesar.

2.3.4Staphylococcus aureus

Staphylococcus aureus adalah bakteri gram positif, tidak bergerak ditemukan satu-satu,

berpasangan, berantai pendek atau bergerombol, tidak membentuk spora, tidak berkapsul, dan

dinding selnya mengandung dua komponen utama yaitu peptidoglikan dan asam teikhoat.

Metabolisme dapat dilakukan secara aerob dan anaerob. Infeksi yang disebabkan di golongkan

sebagai penyakit menular/lokal (biasanya) atau menyebar (jarang). Staphylococcus adalah sel

yang berbentuk bola dengan garis tengah sekitar 1m dan tersusun dalam kelompok tak

beraturan. S.aureus menghasilkan koagulase,suatu protein mirip enzim yang dapat

menggumpalkan plasma yang telah diberi oksalat atau sitrat dengan bantuan suatu faktor yang

terdapat dalam banyak serum. Bakteri yang membentuk koagulase dianggap mempunyai

potensi menjadi patogen invasif. S. ureus dapat ditemukan di kulit dan di hidung

manusia,(Hidung biasanya dianggap tempat utama berkembangnya kolonisasinya) dan ada

kalanya dapat menyebabkan infeksi dan sakit parah.


11/26

16

2.3.5 Klasifikasi Staphylococcus aureus

Domain : Bacteria

Kingdom : Eubacteria

Phylum : Firmicutes

Class : Bacilli

Order : Bacillales

Family : Staphylococcaceae

Genus : Staphylococcus

Species : S. aureus

2.3.6 Mekanisme Staphylococcus aureus

Pada dasarnya bakteri ini adalah bakteri komensal yang banyak berada di kulit. Tetapi, jika

kondisi kulit terbuka karena adanya luka, maka bakteri ini akan bersifat patogenik. Patogenitas

bakteri ini dikarenakan karena bakteri memproduksi toksin dan enzim. Salah satu toksin yang

dihasilkan oleh bakteri ini adalah hemolisin tipe beta, yang mampu melisiskan sel darah merah.

Sedangkan enzim yang dimiliki adalah koagulase. Enzim ini akan menyebabkan terjadi

koagulase dari plasma darah. Enzim koagulase adalah enzim yang membedakan Staphylococcus

aureus dengan bakteri genus Staphylococcus lainnya yang tidak pathogen. Enzim katalase adalah

sebuah enzim yang mampu mengubah Hidrogen Peroksida menjadi air dan Gas Oksigen

2.4 Ekstraksi

Ekstraksi merupakan proses penyarian dengan penarikan zat berkhasiat atau kandungan dari

bahan baku obat baik yang berasal dari tanaman obat maupun dari hewan dengan menggunakan

pelarut yang sesuai dimana zat yang diinginkan dapat larut dalam pelarut tersebut. Dengan

dilakukan proses ekstraksi maka akan diperoleh sari / hasil ekstrak yang mengandung zat aktif

berkhasiat obat tanpa adanya zat yang tidak diinginkan dan ampas dari bahan baku obat

tersebut. Tahapan proses ekstraksi : bahan baku herbal penghalusan ukuran serbuk bahan


12/26

17

penambahan bahan pelarut yang sesuai dan proses ekstraksi (maserasi/perkolasi/digestive)

hasil ekstrak cair proses destilasi ekstrak kental/ liquid kental (Asimas, 2007).Ekstrak dapat

berupa sediaan kental, sediaan kering atau cair yang dibuat dengan mengambil simplisia nabati

atau hewani menurut cara yang cocok, diluar pengaruh cahaya matahari langsung. Sebagai

cairan penyaring digunakan air, eter, campuran etanol dan air. Pembuatan sediaan ekstrak

dimaksudkan agar zat berkhasiat dalam simplisia terdapat dalam bentuk yang mempunyai kadar

yang tinggi dan hal ini memudahkan mengatur dosisnya. Dalam sediaan ekstrak dapat

distandardisasikan kadar zat berkhasiat sedangkan kadar zat berkhasiat dalam simplisia sukar

didapat yang sama ( Moh Anief, 2003).

2.5 Sediaan Topikal

Sediaan topikal adalah sediaan yang penggunaannya pada kulit dengan tujuan untuk

menghasilkan efek lokal, contoh : lotion, salep, dan krim.

2.5.1 Salep

Salep adalah sediaan setengah padat yang mudah dioleskan dan digunakan sebagai obat luar.

Bahan obatnya larut atau terdispersi homogen dalam dasar salep yang cocok. Salep tidak boleh

berbau tengik. Menurut pemikiran modern salep adalah sediaan semipadat untuk pemakaian

pada kulit dengan atau tanpa penggosokan. Oleh karena itu salep dapat terdiri dari substansi

berminyak atau terdiri dari emulsi lemak atau lilin yang mengandung air dalam proporsi relatif

tinggi. (Anief, 1999)

2.5.2 Krim

Krim adalah bentuk sediaan setengah padat yang mengandung satu atau lebih bahan obat yang

terlarut atau terdispersi dalam bahan dasar yang sesuai. Krim mempunyai konsistensi relatif cair

diformulasi sebagai emulsi air dalam minyak atau minyak dalam air. Sekarang batasan tersebut

lebih diarahkan untuk produk yang terdiri dari emulsi minyak dalam air atau dispersi

mikrokristal asam-asam lemak atau alkohol berantai panjang dalam air yang dapat dicuci

dengan air. Prinsip pembuatan krim adalah berdasarkan proses penyabunan (safonifikasi) dari

suatu asam lemak tinggi dengan suatu basa dan dikerjakan dalam suasana panas yaitu

temperatur 700- 800C. (Dirjen POM,1995).


13/26

18

Krim merupakan obat yang digunakan sebagai obat luar yang dioleskan ke bagian kulit badan.

Obat luar adalah obat yang pemakaiannya tidak melalui mulut, kerongkongan, dan ke arah

lambung. Menurut defenisi tersebut yang termasuk obat luar adalah obat luka, obat kulit, obat

hidung, obat mata, obat tetes telinga, obat wasir dan sebagainya. ( Anief, 1999 ).

Ada beberapa tipe krim seperti emulsi, air terdispersi dalam minyak (A/M) dan emulsi minyak

terdispersi dalam air (M/A). sebagai pengemulsi dapat digunakan surfaktan anionik, kationik

dan non anionik. Untuk krim tipe A/M digunakan : sabun monovalen, tween, natrium

laurylsulfat, emulgidum dan lain-lain. Krim tipe M/A mudah dicuci. (Anief,1994). Dalam

pembuatan krim diperlukan suatu bahan dasar.

Fungsi krim adalah:

a. Sebagai bahan pembawa substansi obat untuk pengobatan kulit

b. Sebagai bahan pelumas bagi kulit

c. Sebagai pelindung untuk kulit yaitu mencegah kontak langsung dengan zat-zat berbahaya.


14/26

19

BAB III

METODOLOGI

3.1. Metode yang digunakan

Daun teh hijau yang digunakan adalah daun teh hijau yang sudah tidak dipakai lagi dan

sisa sortir yang didapatkan langsung dari gunung teh di puncak. Metode yang digunakan untuk

pengujian antibakteri adalah metode difusi. Metode ini memiliki prinsip kerja yang sederhana,

dimana kertas saring yang sudah mengandung ekstrak daun teh hijau dengan berbagai

konsentrasi ditaruh pada permukaan media padat yang sebelumnya telah diinokulasi bakteri,

maka ekstrak daun teh hijau yang diperkirakan mempunyai kandungan antibakteri, akan

berdifusi, sehingga nantinya akan membentuk clear zone di sekitar kertas saring, jika bakteri

sudah tumbuh dan ekstrak tersebut mengandung antibakteri. Semakin besar clear zone tersebut,

maka artinya semakin peka bakteri P.acne dan S. aureus terhadap ekstrak daun teh hijau.

Penelitian ini dilakukan dari tanggal 15 April 2014 sampai 13 Mei 2014 di laboratorium kimia

dan biologi St. Laurensia, Serpong.

3.2 Alat dan Bahan

600 gr daun teh hijau yang sudah busuk

Kaldu ayam

Alkohol 96%

Shaker

Beaker glass

Tabung Elenmeyer

Blender

Ayakan

Plastik

Karet gelang

Spidol

Evaporating dish

Kompor


15/26

20

Stirring rod

Corong Buchner

Wadah

Bakteri P. acne

Bakteri S.aureus

Kertas kopi

Ose

Filter paper

Petri Dish

Gunting

Aquadest

Pinset

Penggaris

Test tube

3.3 Tahapan Penilitian

Pengumpulan bahan

Pembuatan Simplisia

Pengembangbiakkan

bakteri

Membuat kepekatan

konsentrasi

Membuat ektrak daun

teh hijau


16/26

21

3.4 Prosedur Penelitian

3.4.1 Pengumpulan bahan

Mengumpulkan alat dan bahan baku untuk eksperimen yang berupa daun teh hijau yang sudah

tidak terpakai sebanyak kurang lebih 800 gram yang didapatkan di gunung teh, puncak, Jawa

Barat

3.4.2 Pembuatan Simplisia

Daun teh hijau yang sudah kering dimasukan kedalam blender hingga halus lalu diayak.

3.4.3 Ekstraksi

Serbuk daun teh hijau yang sudah halus dicampurkan alcohol 96% secukupnya lalu diletakkan

di dalam shaker selama 2-3 jam dan biarkan mengendap selama satu hari. Setelah satu hari,

didapatkan endapan, ambil larutan teh yang tidak mengendap dan saring menggunakan corong

Buchner sehingga tidak ada bubuk tersisa. Setelah itu, letakan cairan/larutan di dalam

evaporating dish untuk mengevaporasi alkohol sehingga didapatkan cairan berwarna pekat dan

kental yang digunakan sebagai ekstrak.

3.4.4 Membuat Kepekatan Konsentrasi

Konsentrasi yang dibutuhkan adalah 25%, 50% dan 75%. Aquadest sebanyak 20 ml menjadi

kontrol negatif. Untuk konsentrasi 25%, diperlukan aquadest sebanyak 15ml dan ekstrak

sebanyak 5ml. Aduk hingga rata. Maasukkan filter paper yang sudah digunting kecil kedalam

larutan. Untuk konsentrasi 50%, diperlukan aquadest sebanyak 10 ml dan ekstrak sebanyak

10ml. Lakukan hal yang sama seperti tadi. Untuk konsentrasi 75%, diperlukan aquadest

sebanyak 5 ml dan ekstrak sebanyak 15ml. Lalu lakukan hal yang sama seperti larutan

Pengujian ekstrak

terhadap bakteri


17/26

22

konsentrasi 25% dan 50%. Selanjutnya letakkan filter paper di petri dish yang sudah

diinokulasi bakteriP. Acne danS. aureus

3.4.5 Pembuatan Media

Siapkan 650 cc kaldu ayam yang telah diendapkan selama satu hari. Panaskan kembali lalu

saring dengan menggunakan filter paper ke dalam tabung elenmeyer. Tambahkan 6 gram agar

serta 4 gram garam dan 1 gram gula. Bungkus dengan kertas kopi dan diamkan selama 3 jam.

3.4.6 Pengembangbiakan bakteri

(i) Steril Alat dan Bahan

Sebelum memulai penanaman bakteri semua alat yang dibungkus kertas kopi harus disterilkan

dengan autoklaf terlebih dahulu selama kurang lebih 15 menit

(ii) Penanaman bakteri dengan metode gores (streak plate)

Ambil biakan bakteri P. Acne dengan menggunakan ose tanamakan di media padat yang telah

dibuat sebelumya. yang sudah ditanam oleh bakteri P. acne dibiarkan lalu dengan menggunakan

teknik pour plate pindahkan larutan ke petri dish. Dengan menggunakan pipet, ambil 1 ml dan

teteskan di petri dish lalu ratakan dengan menggoyang-goyangkan petri dish. Dengan

menggunakan pinset, letakkan berbagai macam konsentrasi ektrak dengan menggunakan filter

paper di petri dish lalu diamkan selama satu sampai dua hari. Metode ini harus dilakukan

secara aseptis dengan Bunsen burner. Lalu lakukan hal yang sama dengan menggunakan biakan

bakteri S.aureus

3.4.6. Pengujian ekstrak terhadap bakteri

Setelah satu sampai dua hari didiamkan, media akan terlihat clear zone atau daerah hambat dari

ekstrak filter paper. Bandingkan dan ukur diameter clear zone yang paling jauh dengan

menggunakan penggaris.


18/26

23

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Hasil

4.1.1 Hasil Simplisia

Simplisia yang dihasilkan dari 600 gram daun teh hijau yang sudah kering adalah 508 gram.

Diperkirakan banyak serbuk yang terbang pada saat proses pengayakan. Berikut adalah

karakteristik dari simplisia daun teh hijau

Karakteristik simplisia Hasil

Bentuk

Warna

Bau

Serbuk halus

Hijau halus

Daun teh hijau

4.1.2 Hasil Ekstrak

Berikut ini hasil ekstrak daun teh hijau :

Karakteristik ekstrak Hasil

Bentuk

Warna

Bau

Kental

Hitam pekat

Khas daun teh hijau


19/26

24

4.1.3 Data Uji Antibakteri

4.1.3.1 Hasil Uji Antibakteri P.acne

Konsentrasi Ekstrak Zona Hambat

0% (Kontrol negative) 0 mm

25% 1. mm

50% 2.0 mm

75% 2.5 mm

Tabel 4.1

Grafik 4.2

Pada tabel 4.1 dapat dilihat kemampuan zona hambat dari konsentrasi ekstrak daun teh

hijau terhadap bakteri P.acne; bahwa semakin tinggi konsentrasi dari ekstrak daun teh hijau,

semakin panjang pula daerah zona hambat yang terlihat. Mulai dari kadar konsentrasi ekstrak

0% yang tidak memiliki daerah clear zone. Konsentrasi ekstrak 25% memiliki clear zone 1 mm.

Konsentrasi ekstrak 50% memiliki clear zone sepanjang 2 mm sedangkan konsentrasi 75%

memiliki clear zone sepanjang 2.5 mm. Dapat dilihat dari grafik 4.2, bahwa kenaikan zona

hambat paling signifikan pada konsentrasi 25% dan antara konsentrasi 50% setelah itu ratio

kenaikannya kembali menurun. Konsentrasi ekstrak daun teh hijau yang paling efektif adalah

75%.

0

0.5

1

1.5

2

2.5

3

0 10 20 30 40 50 60 70 80

Zonahambat(mm)

Konsentrasi ekstrak (%)

Grafik Perbandingan Ekstrak

terhadap antibakteri P.acne


20/26

25

4.1.3.2 Hasil Uji Antibakteri S.aureus

Konsentrasi Ekstrak Zona Hambat

0% (Kontrol negative) 0 mm

25% 1.5 mm

50% 3.0 mm

75% 3.5 mm

Tabel 4.3

Grafik 4.4

Pada tabel 4.3 dapat dilihat kemampuan antibakteri ekstrak daun teh hijau terhadap bakteri

S.aureus. Dapat dilihat dari konsentrasi 0% atau kontrol negatif yang memiliki zona hambat 0

mm lalu Konsentrasi ekstrak 25% memiliki clear zone 1.5 mm. Konsentrasi ekstrak 50%

memiliki clear zone sepanjang 3.0 mm sedangkan konsentrasi 75% memiliki clear zone

sepanjang 3.50 mm. Dapat dilihat dari grafik 4.4, bahwa kenaikan zona hambat paling

signifikan pada konsentrasi 0% dan antara konsentrasi 25% setelah itu ratio kenaikannya

kembali menurun. Konsentrasi ekstrak daun teh hijau yang paling efektif adalah 75%.

0

0.5

1

1.5

2

2.5

3

3.5

4

0 10 20 30 40 50 60 70 80

Zonahambat(mm)

Konsentrasi ekstrak (%)

Grafik perbandingan Ekstrak

terhadap antibakteri S.aureus


21/26

26

Grafik 4.5

Pada grafik 4.5 merupakan grafik perbandingan ekstrak terhadap bakteri S.aureus dan

bakteri P.acne. Dapat dilihat, kedua grafik berbanding lurus dengan konsentrasi ekstrak. Yaitu

semakin pekat konsentrasi ekstrak, semakin luas zona hambat dari filter paper baik terhadap

bakteri P.acne dan bakteri S.aureus. Pada grafik, kita dapat melihat bahwa konsentrasi ekstrak

daun teh hijau lebih efektif terhadap bakteri S.aureus dibandingkan dengan bakteriP.acne.Dari

konsentrasi ekstrak 25% sudah terlihat perbedaan kenaikan grafiknya. zona hambat terbesar dari

bakteri S.aureus yaitu 3.5mm sedangkan zona hambat terbesar terhadap bakteri P.acne yaitu

3mm. Tetapi keduanya memiliki konsentrasi yang paling efektif adalah 75% .

0

0.5

1

1.5

2

2.5

33.5

4

0 10 20 30 40 50 60 70 80

zonahambat(mm)

Konsentrasi ekstrak

Grafik Perbadandingan ekstrak

terhadap antibakteri

Terhadap bakteri S.aureus

Terhadap bakteri P.acne


22/26

27

Penelitian ini merupakan penelitian in vitro untuk mengetahui apakah ekstrak daun teh

hijau memiliki efek antibakteri terhadap P. Acne. Kemampuan ekstrak daun teh hijau dalam

menghambat pertumbuhan bakteri P. Acne disebabkan adanya bahan aktif yang memiliki daya

antibakteri, yaitu katekin terutama dalam bentuk EGCG (Epigallo catechin gallate) yang terdiri

dari flavanoid yang dapat merusak dinding sel bakteri.

Menurut dari teori, semakin pekat konsentrasi ekstrak, akan semakin luas zona

hambatnya. Dari data-data diatas pun terlihat semakin tingginya konsentrsasi dari ekstrak daun

teh hijau, semakin luas daerah clear zone atau zona hambat yang terlihat.

Hasil panjang clear zone tersebut sangat kecil sehingga susah untuk terlihat dan diukur

oleh penggaris sehingga dibulatkan karena alat ukur yang tidak memadai. Selain itu, percobaan

hanya dilakukan sebanyak sekali karena media-media lainnya yang tidak bagus dan

terkontaminasi, sehingga hasil tidak sepenuhnya akurat.


23/26

28

BAB V

KESIMPULAN & SARAN

5.1 Kesimpulan

Ekstrak daun teh hijau telah terbukti efektif menghambat pertumbuhan bakteri P. Acne dan

S.aureus.Konsentrasi ekstrak yang paling efisien adalah yang 75% karena disekitarnya

terdapat clear zone yang paling lebar, yaitu 3mm untuk bakteri P.acne dan 3.5mm untuk

bakteri S.aureus

5.2 Saran

Beberapa saran untuk melaksanakan penelitian serupa di masa yang mendatang:

1. Pengujian Antibakteri akan dilakukan kepada beberapa sampel sehingga didapatkan hasil

yang akurat.

2. Kontrol positif harus hadir sebagai pembanding

3. Observasi harus dilakukan beberapa hari sehingga dapat diketahui berapa lama antibakteri

dari ekstrak tersebut.


24/26

29

LAMPIRAN

Hasil clear zone: konsentrasi ekstrak daun teh hijau terhadap bakteri P.acne

Hasil clear zone: konsentrasi ekstrak daun teh hijau terhadap bakteri S.aureus

Konsentrasi 25%, 50%, dan 75%

Hasil ekstrak daun teh hijau


25/26

30

Hasil sampel simplisia daun teh hijau

Bakteri P.acne


26/26

DAFTAR PUSAKA

http://www.library.upnvj.ac.id/pdf/4s1kedokteran/207311012/BAB%202.pdf

http://repository.usu.ac.id/bitstream/123456789/26573/4/Chapter%20II.pdf

http://zehablogapa.blogspot.com/2012/11/simplisia.html

http://mikrobia.files.wordpress.com/2008/05/tri-asih-pramasanti-078114019.pdf

http://eprints.uns.ac.id/8951/1/73130807200904261.pdf

http://old.fk.ub.ac.id/artikel/id/filedownload/gigi/MAJALAH%20hendra.pdf

http://classes.midlandstech.edu/carterp/courses/bio225/chap06/lecture5.htm
http://www.library.upnvj.ac.id/pdf/4s1kedokteran/207311012/BAB%202.pdfhttp://www.library.upnvj.ac.id/pdf/4s1kedokteran/207311012/BAB%202.pdfhttp://repository.usu.ac.id/bitstream/123456789/26573/4/Chapter%20II.pdfhttp://repository.usu.ac.id/bitstream/123456789/26573/4/Chapter%20II.pdfhttp://zehablogapa.blogspot.com/2012/11/simplisia.htmlhttp://zehablogapa.blogspot.com/2012/11/simplisia.htmlhttp://mikrobia.files.wordpress.com/2008/05/tri-asih-pramasanti-078114019.pdfhttp://mikrobia.files.wordpress.com/2008/05/tri-asih-pramasanti-078114019.pdfhttp://eprints.uns.ac.id/8951/1/73130807200904261.pdfhttp://eprints.uns.ac.id/8951/1/73130807200904261.pdfhttp://old.fk.ub.ac.id/artikel/id/filedownload/gigi/MAJALAH%20hendra.pdfhttp://old.fk.ub.ac.id/artikel/id/filedownload/gigi/MAJALAH%20hendra.pdfhttp://classes.midlandstech.edu/carterp/courses/bio225/chap06/lecture5.htmhttp://classes.midlandstech.edu/carterp/courses/bio225/chap06/lecture5.htmhttp://classes.midlandstech.edu/carterp/courses/bio225/chap06/lecture5.htmhttp://old.fk.ub.ac.id/artikel/id/filedownload/gigi/MAJALAH%20hendra.pdfhttp://eprints.uns.ac.id/8951/1/73130807200904261.pdfhttp://mikrobia.files.wordpress.com/2008/05/tri-asih-pramasanti-078114019.pdfhttp://zehablogapa.blogspot.com/2012/11/simplisia.htmlhttp://repository.usu.ac.id/bitstream/123456789/26573/4/Chapter%20II.pdfhttp://www.library.upnvj.ac.id/pdf/4s1kedokteran/207311012/BAB%202.pdf

uji efektifitas dan metode pengujian ekstrak teh hijau sebagai obat alami pnyembuh jerawat1

Documents