UJI EFEK KOMBINASI EKSTRAK DAUN SALAM (Syzygium polyanthum) dan E KSTRAK DAUN SIRSAK (Annona muricata) TERHADAP KADAR KOLESTEROL TOTAL PADA MENCIT (Mus musculus)

Oleh :

A. Nurfadilawati. SPO.713251111001

KEMENTRIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA POLITEKNIK KESEHATAN MAKASSARJURUSAN FARMASI 2014UJI EFEK KOMBINASI EKSTRAK DAUN SALAM (Syzygium polyanthum) dan EKSTRAK DAUN SIRSAK (Annona muricata) TERHADAP KADAR KOLESTEROL TOTAL PADA MENCIT (Mus musculus)

Oleh :

A. Nurfadilawati. SPO.713251111001

KEMENTRIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA POLITEKNIK KESEHATAN MAKASSARJURUSAN FARMASI 2014ii

UJI EFEK KOMBINASI EKSTRAK DAUN SALAM (Syzygium polyanthum) dan EKSTRAK DAUN SIRSAK (Annona muricata) TERHADAP KADAR KOLESTEROL TOTAL PADA MENCIT (Mus musculus)

Karya Tulis Ilmiah Diajukan Untuk Memenuhi Syarat Dalam Menyelesaikan Tugas Akhir Program Pendidikan Ahli Madya Farmasi

Oleh:

A. Nurfadilawati. SPO.713251111001

KEMENTRIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA POLITEKNIK KESEHATAN MAKASSARJURUSAN FARMASI 2014

iii

LEMBAR PENGESAHAN KARYA TULIS ILMIAHUJI EFEK KOMBINASI EKSTRAK DAUN SALAM (Syzygium polyanthum) dan EKSTRAK DAUN SIRSAK (Annona muricata) TERHADAP KADAR KOLESTEROL TOTAL PADA MENCIT (Mus musculus)

Oleh:

A. Nurfadilawati. SPO.713251111001

Menyetujui,

Pembimbing I, Pembimbing II,

Muhammad Saud, SH, S.Farm, M.KesDrs. Jumain, M.Kes, AptNip. 196709301989031001Nip. 196311161993031001Mengetahui,

Ketua Jurusan FarmasiPoliteknik Kesehatan MakassarKementrian Kesehatan Republik Indonesia,

Drs. Rusli, Sp.FRS, AptNip. 196705061997031002iv

LEMBAR PENGESAHAN TIM PENGUJIKarya Tulis Ilmiah ini dipertahankan dihadapan tim penguji Karya Tulis Ilmiah Jurusan Farmasi Politeknik Kesehatan Makassar Kementrian Kesehatan Republik Indonesia pada tanggal 10 juni 2014

TIM PENGUJI1 Muhammad Saud, SH, S.Farm, M. Kes (.)2 Sesilia Rantae Pakadang,S.Si, Apt, M.Si(.)3 Ratnasari Dewi, S.Si, M. Kes(.)

Mengetahui, Ketua Jurusan FarmasiPoliteknik Kesehatan MakassarKementrian Kesehatan Republik Indonesia,

Drs. Rusli, Sp.FRS, AptNip. 196705061997031002

v

ABSTRAK

A. Nurfadilawati. S, Uji Efek Kombinasi Ekstrak Daun Salam (Syzygium polyanthum) dan Ekstrak Daun Sirsak (Annona muricata) terhadap Kadar Kolesterol Total pada Mencit. ( Dibimbing oleh Muhammad Saud, SH, S.Farm, M.Kes dan Drs. Jumain, M.Kes, Apt.)

Kenaikan kolesterol merupakan salah satu kelainan fraksi lipid. Ekstrak daun Salam dan ekstrak daun Sirsak merupakan tanaman yang sering digunakan sebagai obat tradisional.. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh kombinasi ekstrak daun salam dan ekstrak daun sirsak dalam menurunkan kolesterol total dalam darah mencit Pada penelitian ini dibagi dalam 3 kelompok perlakuan, kelompok 1 diberikan Na.CMC sebagai kontrol, kelompok 2 diberikan suspensi kombinasi ekstrak daun salam dan ekstrak daun sirsak dan kelompok 3 diberikan suspensi simvastatin sebagai pembanding. Setiap kelompok terdiri dari 3 hewan uji mencit. Hasil penelitian menunjukkan bahwa dengan konsentarsi 0,5% : 0,8% (250 mg/Kg BB : 400 mg/Kg BB) dapat menurunkan kadar kolesterol total. Rata rata penurunan kadar kolesterol total setelah pemberian suspensi kombinasi ekstrak daun salam dan ekstrak daun sirsak dalam menurunkan kolesterol total dalam darah mencit adalah 98 mg/dl. Hasil statistik Kruskal Wallis dengan uji lanjutan Mann-Whitney dengan nilai significantnya < 0,050 menunjukkan terdapat perbedaan bermakna antara kelompok kontrol dengan kelompok perlakuan untuk penurunan kadar kolesterol namun antara kelompok perlakuan dan kelompok pembanding tidak menunjukkan perbedaan yang bermakna untuk penurunan kadar kolesterol.

Kata kunci: Kadar kolesterol, Kombinasi Ekstrak daun salam dan daun sirsak, mencit

vi

PERNYATAAN KEASLIAN KARYA TULIS ILMIAHYang bertanda tangan di bawah ini :Nama: A. Nurfadilawati. SNIM: PO.71.3.251.11.1.001Menyatakan dengan sebenarnya bahwa karya tulis ilmiah yang saya tulis ini benar-benar merupakan hasil karya saya sendiri, bukan merupakan pengambilalihan tulisan atau pemikiran orang lain. Apabila dikemudian hari terbukti atau dapat dibuktikan bahwa sebagian keseluruhan karya tulis ilmiah ini merupakan hasil karya orang lain, maka saya bersedia mempertanggungjawabkan sekaligus bersedia menerima sanksi yang seberat-beratnya atas perbuatan tidak terpuji tersebut.Demikian pernyataan ini saya buat dalam keadaan sadar dan tanpa ada paksaan sama sekali.

Makassar, 06 Juni 2014Yang membuat pernyataan,

A. Nurfadilawati. S

vii

KATA PENGANTARDengan memanjatkan puji syukur kehadirat Tuhan Yang Maha Kuasa atas segala rahmat dan karuniaNya sehingga penelitian dengan judul Uji Efek Kombinasi Ekstrak daun Salam (Syzygium Polyanthum) dan ekstrak daun Sirsak (Annona Muricata) terhadap Kadar Kolesterol Total pada mencit (Mus Musculus) yang merupakan salah satu syarat akademik dalam menyelesaikan tugas akhir pada Jurusan Farmasi Politeknik Kesehatan Makassar dapat terselesaikan.Ucapan terima kasih dan penghargaan yang setinggi-tingginya penulis sampaikan kepada yang terhormat Bapak Muhammad Saud, SH, S.Farm, M.Kes, selaku pembimbing I dan Bapak Drs. Jumain, M.Kes, Apt, selaku pembimbing II atas segala perhatian dan bimbingan yang telah diberikan selama proses penyelesaian tugas akhir lain.Pada kesempatan ini pula, peneliti sampaikan rasa terima kasih yang setulus-tulusnya kepada:1. Bapak Drs. H. Ashari Rasyid, SKM, MS selaku Direktur Politeknik Kesehatan Makassar yang telah memberikan kesempatan kepada saya mengikuti pendidikan di Politeknik Kesehatan Makassar.2. Bapak Drs. Rusli, Sp.FRS, Apt selaku Ketua Jurusan Farmasi Politeknik Kesehatan Makassar atas kesempatan yang diberikan kepada saya menjadi mahasiswa Jurusan Farmasi Politeknik Kesehatan Kemenkes Makassar.3. Ibu Hasnah Ibrahim, Bapak Drs. Jumain, M.Kes, Apt, Bapak Rusdiaman, Ibu Harbiah, dan Ibu Sesilia Pakadang selaku penguji yang telah memberikan masukan dan saran dalam penyempurnaan karya tulis ilmiah ini. viii

4. Bapak Raimundus Chalik, S.Si, M.Sc, Apt dan bapak Ronny Horax, S.Si, M. Sc, Ph.D selaku ketua prodi D3 Jurusan Farmasi Politeknik Kesehatan Kementrian Kesehatan RI Makassar ix

5. Bapak Muhammad Saud, SH, S.Farm, M.Kes selaku pembimbing akademik selama mengikuti perkuliahan di Politeknik Kesehatan Kemenkes Makassar atas bimbingannya selama 3 tahun6. Bapak Hendra Stevani S.Si, M.Si, Apt, selaku pengawas laboratorium yang telah membantu dan memberikan arahan selama penelitian.7. Bapak dan ibu dosen serta staf tata usaha Jurusan Farmasi Politeknik Kesehatan Makassar yang telah membantu memberikan motivasi selama mengikuti pendidikan.8. Kedua orang tua, Ayahanda A. Sodil P. SE dan Ibunda Dra. St. Suryawati Apt atas segala cinta, kasih sayang dan doa yang tiada henti-hentinya dalam mendidik, membimbing serta memberikan semangat baik moril dan materil yang tidak ternilai selama menjalani pendidikan, juga kepada adik saya, A. Nurfardyanti, A. Nurfardhia Gitayani dan A. Muh. Fadhil Wahyudi , terima kasih untuk dukungan yang diberikan kepada saya.9. Sahabat-sahabatku (Ernata, Azima, Winda, Indah, Uchi, Lia, Hajar) dan rekan seperjuanganku, Indication 2011 yang selalu memberi motivasi dan terima kasih atas kerjasamanya selama 3 tahun bersama10. Teman-teman organisasiku (Puthe, Rizal, Agung, Aso) beserta keluarga besar BEM Poltekkes Makassar terima kasih untuk dukungan yang diberikan kepada saya.Semoga Tuhan Yang Maha Kuasa senantiasa berkenan membalas segala kebaikan yang telah diberikan. Namun disadari bahwa penyusunan dan penulisan karya tulis ilmiah ini masih jauh dari kesempurnaan, olehnya kritik dan saran dari pembaca sangat diharapkan untuk perbaikan dan kesempurnaan tugas akhir ini. Akhirnya harapan saya semoga tugas akhir ini dapat memberikan manfaat bagi yang membutuhkan, Amiin.x

Makassar, 06 juni 2014

A. Nurfadilawati. S

DAFTAR ISISAMPUL DEPANiSAMPUL DALAMiiLEMBAR PRASYARATiiiLEMBAR PENGESAHANivLEMBAR PENGESAHAN TIM PENGUJIv ABSTRAK ..... viLEMBAR KEASLIAN viiKATA PENGANTAR . viiDAFTAR ISIxiDAFTAR TABELxiiiDAFTAR LAMPIRANxivDAFTAR GAMBARxvBAB I PENDAHULUANA. Latar Belakang1B. Rumusan Masalah2C. Tujuan Penelitian3D. Manfaat Penelitian3BAB II TINJAUAN PUSTAKAA. Uraian Tumbuhan4B. Kolesterol8C. Golongan Statin11D. Ekstraksi dengan metode Maserasi12xi

E. Kerangka berpikir13xii

F. Hipotesis13BAB III METODE PENELITIANA. Jenis Penelitian14B. Tempat dan Waktu Penelitian14C. Sampel 14D. Instrumen Penelitian14E. Prosedur Kerja 15F. Penentuan Kadar Kolesterol Total18G. Teknik Pengumpulan Data18H. Teknik Analisi Data18BAB IV HASIL DAN PEMBAHASANA. Hasil Penelitian19B. Pembahasan22BAB V PENUTUPA. Kesimpulan26B. Saran26 DAFTAR PUSTAKA27LAMPIRAN .. 29

DAFTAR TABELTabel 1.Data Hasil Pengamatan Kadar Kolesterol Darah pada Mencit .. 19Tabel 2.Uji Normalitas Data Hasil Penurunan Kadar Kolesterol Darah pada Mencit ...20Tabel 3.Data Hasil Transform Data Bentuk Logaritma 34Tabel 4.Data Hasil Transform Data Bentuk Ln 34Tabel 5.Uji Kruskal-Wallis Data Hasil Penurunan Kadar Kolesterol Darah pada Mencit 21Tabel 6.Uji Post Hoc Mann Whitney Penurunan Kadar Kolesterol Darah pada Mencit ... 21

xiii

DAFTAR LAMPIRANLampiran 1.Skema Kerja 29Lampiran 2.Perhitungan .. 30Lampiran 3.Alat dan Bahan yang digunakan .. 35

xiv

DAFTAR GAMBARGambar 1.Tanaman Daun Salam 4Gambar 2.Tanaman Daun Sirsak ...6Gambar 3.Histogram Rata rata Kenaikan dan Penurunan Kadar Kolesterol Total pada Mencit .. 34

xv

BAB IPENDAHULUAN1. Latar BelakangPenyakit kardiovaskular merupakan salah satu penyebab kematian terbesar di dunia. Berdasarkan data World Health Organization (WHO) tahun 2008, sekitar 48% penduduk di seluruh dunia yang meninggal diantaranya akibat penyakit kardiovaskular (WHO 2011). Penyakit kardiovaskular berkembang dari penyakitpenyakit metabolik yang kerap ditimbulkan oleh perubahan pola hidup masyarakat. Salah satu penyakit metabolik adalah dislipidemia yang mana displidemia ini ditandai dengan peningkatan dan penurunan lipid dalam plasma darah. Kelainan lipid adalah kenaikan kadar kolesterol total, kolesterol LDL, dan trigliserida serta penurunan kadar kolesterol HDL (Almatsier, 2007).Pengobatan yang banyak dilakukan untuk menurunkan kadar kolesterol adalah pemberian secara oral, seperti simvastatin. Pemberian secara oral banyak memakan biaya bagi masyrakat dan juga dapat memberikan efek samping yang serius penggunaan jangka panjang simvastatin akan menurunkan fungsi dari hati sehingga bila tidak dikontrol dengan baik pada akhirnya akan menimbulkan kerusakan hingga kegagalan fungsi hati, sehingga pencarian sumber pengobatan yang relatif murah dan aman untuk dikonsumsi.Di Indonesia, banyak tumbuh tanaman yang bisa digunakan sebagai obat. Pemanfaatan tanaman sebagai tanaman obat sudah banyak digunakan oleh masyarakat dan semakin meningkat namun peningkatan penggunaan obat tradisional tersebut di masyarakat tidak didukung dengan adanya bukti ilmiah. Salah satu tumbuhan yang biasa digunakan masyarakat sebagai obat kolesterol yaitu daun salam (Syzygium polyanthum) dan daun sirsak (Annona muricata) yang banyak tumbuh di seluruh daerah di negara ini. 1

Berdasarkan penelitian Hardani, 2008 menunjukkan bahwa dengan pemberian ekstrak daun salam pada mencit putih galur wistar hiperlipidemia pada dosis 0.72 g/ekor selama 15 hari, dapat menurunkan kadar trigliserida serum mencit sebesar 63.471.59 mg/dL. Berdasarkan penelitian Jonly, 2011 menunjukkan bahwa pemberian infusan daun sirsak dengan dosis 5 lembar daun sirsak dapat menurunkan kolesterol total pada hewan uji .2

Beberapa daerah di kota Makassar, masyarakatnya meyakini bahwa tanaman sirsak dan salam jika dikombinasi akan berkhasiat menurunkan kolesterol namun saat ini belum ada bukti ilmiah yang membuktikan bahwan kedua tanaman tersebut jika dikombinasikan akan berkhasiat sebagai penurun kolesterolBerdasarkan hal tersebut maka akan dilakukan penelitian tentang pengaruh pemberian kombinasi ekstrak daun salam (Syzygium polyanthum) dan daun sirsak (Annona muricata) terhadap kadar kolesterol total darah dengan mengamati kadar kolesterol total darah mencit sebelum dan sesudah pemberian ekstrak daun salam (Syzygium polyanthum) dan daun sirsak (Annona muricata).1. Rumusan Masalah Berdasarkan latar belakang maka dapat ditarik rumusan masalah bagaimana efek dari kombinasi ekstrak daun salam dan daun sirsak dalam menurunkan konsentrasi total darah mencit. 3

1. Tujuan penelitianUntuk mengetahui pengaruh kombinasi ekstrak daun salam (Syzygium polyanthum) dan daun sirsak (Annona muricata) dalam menurunkan atau kadar kolesterol total dalam darah mencit.1. Manfaat Penelitian Memberikan informasi kepada masyarakat mengenai efek yang diberikan oleh kombinasi daun salam Syzygium polyanthum) dan daun sirsak (Annona muricata) terhadap penurunan kadar kolesterol total.

BAB IITINJAUAN PUSTAKA1. Uraian Tumbuhan1. Daun Salam (Syzygium polyanthum)

Gambar 1. Tanaman Daun Salam1. Klasifikasi Tumbuhan Regnum: PlantaeDivisi:SpermatophytaSubdivisi:angiospermae Kelas:dikotildoneSubkelas:DialypetalaeOrdo:MyrtalesFamili:MyrtaceaeGenus:SyzygiumSpecies:Syzygium polyanthum

4

1. Morfologi tumbuhan5

Tinggi pohon dapat mencapai 25 m, batang bulat, permukaan licin, bertajuk rimbun, dan berakar tunggang. Daun tunggal, letak berhadapan, panjang rangkai daun 0,5 1 cm. Helaian daun berbentuk lonjong sampai elips atau bundar telur sungsang, ujung meruncing, pangkal runcing, tepi rata, pertulangan menyirip, permukaan atas licin berwarna hijau tua, permukaan bawah berwarna hijau muda, panjang 5-15 cm, lebar 3-8 cm, jika diremas berbau harum. Bunga majemuk tersusun dalam bentuk malai yang keluar dari ujung ranting, berwarna putih, baunya harum. Buahnya dinamakan buah uni yang berbentuk bulat dengan diameter 8-9 mm. Buah muda berwarna hijau muda, setelah masak menjadi merah gelap, rasanya agak sepat. Bijinya berbentuk bulat dan berwarna coklat (Wijayakusuma, 1999). 1. Lokasi tumbuh Tanaman ini tumbuh di wilayah iklim tropis dan subtropis, termasuk di Asia Tenggara mulai dari Myanmar, Thailand, semenanjung Malaysia, Sumatera, Kalimantan, dan Jawa. Pohon ini tumbuh di pegunungan, tetapi juga ada yang ditanam pada pekarangan untuk digunakan sebagai bumbu masakan. Pohon ini ditemukan tumbuh liar di kawasan hutan primer dan hutan sekunder, mulai dari tepi pantai hingga ketinggian 1.000 m (Jawa), 1.200 m (Sabah), dan 1.300 m (Thailand). Selain itu Salam ditanam di kebun-kebun pekarangan dan lahan-lahan wanatani yang lain, terutama untuk diambil daunnya. Daun Salam liar hampir tidak pernah digunakan dalam masakan, selain karena baunya sedikit berbeda dan kurang harum, Salam liar juga menimbulkan rasa agak pahit (Dalimartha, 1999).1. Kandungan daun salam 6

Daun Salam mengandung saponin, triterpen, alkaloid, serta minyak atsiri 0,05% yang terdiri dari sitral, eugenol, tannin, flavonoida, seskuiterpen, lakton, dan fenol (Dalimartha, 1999; Soedarsono dkk., 2002). Menurut Ong (2008) kandungan penting dalam daun Salam adalah etanol dan metil kavikol.1. Khasiat daun salam Daun salam digunakan sebagai obat untuk berbagai penyakit, seperti kolesterol tinggi, kencing manis, hipertensi, maag (gastritis), dan diare (Dalimartha 2000). 1. Daun Sirsak (Annona muricata)

Gambar 2. Tanaman Daun Sirsak

1. Klasifikasi Tumbuhan 7

Regnum: PlantaeDivisi: AngiospermaeSub Divisio : Spermatophyta Ordo : PolycarpicaeClassis : DicotyldonaeSub kelas: DialypetalaeFamilia : Annonaceae Genus : Annona Species : Annona muricata Linn. 1. Morfologi Pohon, perdu atau liana. Daundaun berseling, tunggal tanpa daun penumpu. Bunga beraturan, kerapkali berkelamin 2. Kelopak daun 3, kadang kadang 4, lepas atau melekat. Daun mahkota 6, dalam 2 lingkaran masing masing 3, jarang kurang, lepas atau melekat. Benang sari 3 atau banyak, pendek. Ruang sari 2, bentuk garis. Penghubung ruang sari kerapkali diatas ruangnya diperpanjang dan melebar . bakal buah 1 sampai banyak. Tangkai putik lepas, kerapkali pendek, kadangkadang tidak ada. Buah duduk atau bertangkai , kadangkadang satu dengan yang lain bersatu, serupa buah buni atau kering dan berkatup 2. Banyak buah yang duduk, satu dengan yang lain melekat, terkumpul rapat pada tangkai buah utama, kadangkadang kemudian sedikit atau banyak melepaskan diri terhadap yang lain. Ujung penghubung ruang sari yang diperpanjang terpancung atau sangat tumpul (Soerjowinoto,1997)1. Kandungan kimia daun sirsak8

Dalam famili Annonaceae adalah alkaloid, minyak atsiri, glikosida antrakuinon, polifenol, lilin, saponin, flavonid, dan tanin.1. Khasiat daun sirsakDaun sirsak dapat digunakan sebagai obat penurun kadar kolesterol (jonly dkk,2013)1. KolesterolKoleterol (yunani Chole = empedu, stereos = padat) adalah zat alamiah dengan sifat fisik serupa lemak tetapi berumus steroid (OOP). Hiperkolesterolemia adalah suatu keadaan tingginya konsentrasi kolesterol dalam darah. Menurut Grundy (1991), ada tiga tingkatan kolesterol dalam serum manusia, yaitu kolesterol serum normal dengan kolesterol total < 200 mg/dL, kolesterol borderline (BHC) dengan kolesterol total 200-239 mg/dL dan kolesterol serum tinggi. Kolesterol serum tinggi pada manusia dapat menyebabkan kondisi hiperkolesterolemia sedang (240-289 mg/dL) dan hiperkolesterolemia berat (>290 mg/dL). Pramono (1989) melaporkan bahwa konsentrasi kolesterol normal mencit berkisar antara 40-130 mg/dL. Hiperkolesterolemia dapat terjadi akibat penurunan laju katabolisme LDL dan pengayaan LDL dengan ester kolesterol. Konsentrasi kolesterol manusia akan tetap tinggi walaupun tanpa konsumsi makanan dari luar, hal ini disebabkan adanya kelainan yang terjadi pada spesies manusia (species defect) (Grundy 1991). Penyebabnya adalah hanya sekitar 30-40% kolesterol yang diubah menjadi asam empedu sehingga konsentrasi kolesterol darah tetap tinggi.9

Faktor lain yang menyebabkan hiperkolesterolemia adalah konsumsi makanan tinggi kolesterol dan asam lemak jenuh serta kondisi menopause pada wanita. Tingginya konsentrasi kolesterol disebabkan juga oleh kondisi hiperlipidemia, yaitu suatu keadaan meningkatnya konsentrasi lipid darah yang ditandai dengan meningkatnya konsentrasi triasilgliserol darah, konsentrasi LDL serta konsentrasi kolesterol. Lipoprotein adalah alat transport serum untuk lipid dan trigliserid. Ada enam kelompok lipoprotein, yang berbeda dalam hal kandungan lipid dan protein. Fungsi transport dan mekanisme penghantaran lemak. Lipoprotein ini dinamakan menurut ukuran dan berat jenisnya, kilomikron dan sisa kilomikron membawa lipid yang diabsorpsi melalui usu (jalur eksogen). Empat lipoprotein lain membentuk jalur transport endogen yang menghantarkan kolesterol dan trigliserid yang disekresikan oleh hati. 1. Jenis jenis KolesterolJenis kolesterol dibedakan menjadi Low Density Lipoprotein (LDL), trigliserida dan High Density Lipoprotein (HDL). LDL sering disebut sebagai kolesterol jahat karena tingginya kadar LDL akan berpotensi menumpuk atau menempel pada dinding pembuluh nadi koroner yang dapat menyebabkan penyempitan dan penyumbatan aliran darah (aterosclerosis). Akibatnya jantung kesulitan untuk memompa darah dan akhirnya berlanjut ke gejala serangan jantung mendadak. Bila penyumbatan itu terjadi di otak, maka akan menyebabkan stroke dan kelumpuhan (Ryan,2008). 1. Metabolisme Kolesterol10

Kolesterol diserap dari usus dan menjadi satu dengan kilomikron yang dibentuk dalam mukosa. Setelah kilomikron melepaskan trigliserida dalam jaringan adiposa, sisa kilomikron akan membawa kolesterol ke hati. Hati juga membentuk kolesterol. sebagian kolesterol hati diekskresikan dalam empedu, baik dalam bentuk bebas maupun sebagai asam empedu. Sisa kolesterol akan menjadi satu dengan VLDL. Kolesterol mengadakan umpan balik untuk menghambat pembentukannya sendiri, yaitu denganmenghambat enzim yang mengkonversi-hidroksi-metilglutaril-KoA menjadi asam mevalonat. Jadi bila asupan kolesterol dalam makanan tinggi,maka sintesis kolesterol dalam makanan menjadi tinggi, dan sintesis kolesterol hati menurun dan sebaliknya. Akan tetapi, pengaruh umpan balik ini tidaklah tetap, dan diet rendah kolesterol akan sedikit menurunkan kolesterol darah (Muhaimin,2008).Kebanyakan sel dalam tubuh dapat mensintesis kolesterol, walaupun sebagian besar kolesterol disintesis dalam hati. VLDL yang mengandung kolesterol yang dibentuk dalam hati dimetabolisme menjadi HDL dan LDL. LDL kemudian masuk ke dalam sel jaringan ekstrahepatik dengan cara endositosis dan menyediakan kolesterol bagi sel-sel ini yang penting agar berfungsi normal. Sebagian LDL juga masuk scavengercell. Molekul-molekul LDL berikatan dengan reseptor-reseptor pada membran sel, interaksi ini memicu endositosis LDL. Vesikel-vesikel yang mengandung LDL bergabung dengan lisosom, dan enzim-enzim lisosom menghidrolisis ester-ester kolesterol yang terdapat pada inti LDL. Kolesterol bebas yang terbentuk masuk ke sitoplasma, di mana sebagian dirubah menjadi ester-ester kolesterol dalam badan Golgi, dan berdifusi ke dalam membran sel. Dari membran sel diambil oleh HDL, dalam plasma kolesterol tersebut diubah menjadi ester- ester kolesterol dan bergerak ke inti HDL, meninggalkan permukaan lipoprotein bebas untuk menerima lebih banyak kolesterol. HDL mentransport kolesterol kembali ke hati. Sebagian kolesterol ini bersiklus kembali ke dalam VLDL, tetapi sebagian besar masuk kedalm empedu dan dieksresi dalam feses (Muhaimin,2008).11

1. Pengobatan KolesterolBerdasarkan mekanisme kerjanya, obat penurun kolesterol dibedakan menjadi beberapa golongan, yaitu:2. Golongan Statin. 2. Golongan Fibrat. 2. Golongan Penangkap Asam Empedu.2. Golongan Asam Nikotinat.1. Golongan Statin Statin merupakan senyawa yang paling efektif dan paling baik toleransinya untuk mengobati displidemia. Obat ini merupakan inhibitor kompetitif 3-hidroksi-3-metilglutaril koenzimA (HMG-CoA) reductase, yang mengkatalisis tahap awal pembatas laju pada biosentesis kolesterol.1. Mekanisme Kerja Statin12

Statin memberikan efek utamanya penurunan kadar LDL melalui gugus mirip asam mevalonat yang menghambat HMG-CoA reductase secara kompetitif melalui penghambatan produk (Alberts et al., 1980).Statin memperngaruhi kadar kolesterol darah dengan mengahmbat pembentukan kolesterol di dalam hati, yang menyebabkan peningkatan ekspresi gen reseptor LDL. Sebagi respon terhadap berkurangnya kandungan kolesterol bebas dalam heparosit, SREBP yang terikat pada membrane dipecah oleh suatu protease dan dipindahkan ke nukleus. Faktor transkripsi tersebut diikat oleh unsur gen resptor LDL yang responsive terhadap sterol, meningkatkan transkripsi dan akhirnya mningkatkan sintesis reseptor LDL.D. Ekstraksi dengan metode Maserasi Metode ekstraksi yang digunakan dalam penelitian ini adalah maserasi karena dilihat dari sifat daun sirsak dan daun salam yang sedikit polar dan mudah larut dalam pelarut organik pada umunya sehingga pada awalnya diekstraksi etanol untuk mendapatkan senyawa organik sebanyak banyaknya dari daun sirsak dan daun salam. Ekstraksi komponen kimia daun salam dan daun sirsak dengan cara daun salam dan sirsak yang telah dipotong-potong kecil dimasukkan dalam wadah maserasi kemudian serbuk daun Salam sebanyak 300 g dimasukkan ke dalam wadah maserasi, lalu ditambahkan etanol 70 % sebanyak 200 ml untuk melembabkannya lalu ditambah lagi liter untuk merendamnya. Rendaman disimpan di tempat yang tidak terkena sinar matahari langsung dan dibiarkan selama 5 hari sambil sekali-kali diaduk, setelah 5 hari disaring kemudian ampasnya dimaserasi kembali dengan pelarut alkohol 70 % yang baru sebanyak 800 ml. Hal ini dilakukan sebanyak 3 kali dengan pelarut yang sama. Ekstrak etanol yang diperoleh kemudian dikumpulkan lalu dipekatkan dengan rotavapor hingga diperoleh ekstrak cair. Ekstrak cair kemudian diuapkan hingga kental diatas penangas air, Dengan cara yang sama dibuat ekstrak daun sirsak.13

1. Kerangka berpikir / alur penelitianesktraksiButanol-air

Kolesterol total

Variabel yang tidak ditelitiDaun salam polifenolkolesterolantiokasidanVariabel yang ditelitiDaun sirsak LDL HDL VLDL

1. HipotesisTidak adanya perbedaan bermakna antara efek yang diberikan oleh ekstrak daun salam dan ekstrak daun sirsak dan efek yang diberikan simvastatin terhadap penurunan kolesterol total dalam darah mencit

BAB IIIMETODE PENELITIAN1. Jenis PenelitianPenelitian ini merupakan Experimental laboratorium Pre and Post Randomized Controlled Group yang dilakukan dengan cara menguji kombinasi ekstrak daun salam (Syzygium polyanthum) dan daun sirsak (Annona muricata) dalam menurunkan kolesterol total dengan menggunakan mencit sebagai hewan uji.1. Waktu dan Tempat PenelitianPenelitian dilaksanakan di Laboratorium Farmakologi dan Farmakognosi jurusan Farmasi Poltekkes Makassar dan waktu pelaksanaanya dari bulan Desember bulan April 2014.1. Sampel Sampel dalam penelitian ini adalah kombinasi ekstrak daun salam dan daun sirsak. Bahan yang digunakan berupa daun, yang dipetik dari tanaman daun salam (Syzygium polyanthum) dan daun sirsak (Annona muricata). 1. Instrumen Penelitian Alat dan bahan Alat yang digunakan adalah erlenmeyer, gelas ukur, gelas kimia, labu ukur 100 ml, spoit oral, timbangan analitik, timbangan hewan, alat ukur kolesterol, rotavapor, sendok tanduk, batang penganduk, lumping dan alu.Bahan yang digunakan adalah air suling, ekstrak daun Salam, ekstrak daun Sirsak, Natrium CMC, simvastatin, Polythyluracil, pakan ternak tinggi lemak, Etanol 70%.14

1. Prosedur Kerja15

1. Pengambilan dan Pengolahan Sampel1. Pengambilan sampelDaun salam (Syzygium polyanthum) dan daun sirsak (Annona muricata) yang diambil pada jam 9-10 pagi dari kota Makassar, Sulawesi Selatan, kemudian dicuci bersih lalu dipotong-potong dengan derajat halus 4 / 18 atau 0,1 0,6 cm.1. Pengolahan sampel Daun salam dan daun sirsak dicuci bersih lalu dipotong-potong dengan derajat halus 4 / 18 atau 0,1 0,6 cm kemudian dimaserasi.1. Pembuatan Bahan Penelitian1. Pembuatan ekstrak Daun SalamSerbuk daun Salam sebanyak 100 g dimasukkan ke dalam wadah maserasi, lalu ditambahkan etanol 70 % sebanyak 200 untuk melembabkannya lalu ditambah lagi 1 liter untuk merendamnya. Rendaman disimpan di tempat yang tidak terkena sinar matahari langsung dan dibiarkan selama 5 hari sambil sekali-kali diaduk, setelah 5 hari disaring kemudian ampasnya dimaserasi kembali dengan pelarut alkohol 70 % yang baru sebanyak 800 ml. Hal ini dilakukan sebanyak 3 kali dengan jumlah pelarut yang sama.Ekstrak etanol yang diperoleh kemudian dikumpulkan lalu dipekatkan dengan rotavapor hingga diperoleh ekstrak cair. Ekstrak cair kemudian diuapkan hingga kental diatas penangas air, Dengan cara yang sama dibuat ekstrak daun sirsak.1. Pembuatan suspensi Natrium CMC 1 % b/v16

Suspensi Natrium CMC dibuat dengan cara memanaskan air suling sebanyak 50 ml hingga suhu 70C lalu dimasukkan Natrium CMC sebanyak 1 g dan diaduk dengan menggunakan pengaduk elektrik hingga terbentuk mucilago. Volumenya dicukupkan dengan air panas hingga 100 ml.1. Pembuatan Suspensi Propyltyouracil 0,02 %Sebanyak 2 tablet PTU ditimbang kemudian dihitung bobot ratarata tiap tablet. Ditimbang tablet PTU (setara dengan 100 mg PTU) kemudian dimasukkan ke dalam lumpang dan ditambahkan dengan larutan koloid Na.CMC 1% b/v sedikit demi sedikit sambil digerus hingga terbentu Propyltyouracyl (PTU) yang homogen lalu dicukupkan volume hingga 50 ml. d. Pembuatan Suspensi Ekstrak Etanol Daun Salam dan daun sirsak Ekstrak etanol daun salam dan ekstrak daun sirsak dibuat suspensi dengan perbandingan konsentrasi yakni 0,5% b/v : 0,8% b/v. Cara pembuatan suspensi 0,5% b/v : 0,8% b/v yaitu ekstrak etanol daun salam (Syzygium polyanthum) ditimbang sebanyak 0,5 gram dan ekstrak etanol daun sirsak (Annona muricata) ditimbang sebanyak 0,8 gram. Ekstrak daun salam dan ekstrak daun sirsak yang telah ditimbang digerus dalam lumpang sambil ditambahkan sedikit demi sedikit Natrium CMC 1%. Setelah terbentuk suspensi yang homogen volumenya dicukupkan dengan Natrium CMC 1% hingga 100 ml. 1. Pembuatan suspensi Simvastatin 0,0026 % b/v17

Sebanyak 2 tablet simvastatin ditimbang kemudian dihitung bobot rata-rata tiap tablet. Ditimbang tablet simvastatin (setara dengan 10 mg simvastatin) kemudian dimasukkan kedalam lumpang dan ditambahkan dengan larutan koloid Na-CMC 1% b sedikit demi sedikit sambil digerus hingga terbentuk suspensi simvastatin yang homogen lalu dicukupkan volume hingga 100 ml.1. Perlakuan Terhadap Hewan UjiHewan uji dibagi menjadi 3 kelompok dan dipelihara selama 7 hari. Hewan uji diberikan suspensi polythyluracil dengan dosis 3 kali dalam sehari serta pemberian pakan standar tinggi lemak selama 2-3 hari, kemudian diukur kadar kolesterolnya. Jika kadar kolesterolnya sudah melebihi kadar normalnya (112-140) pemberian obat PTU dan pakan standar tinggi lemak di hentikan namun pakan standar tinggi lemak digantikan dengan pemberian pakan standar. Pada hewan perlakuan diberikan kombinasi ekstrak daun salam dan ekstrak daun sirsak dengan konsentrasi 0,5% : 0,8% sedangkan pada hewan uji kelompok kontrol positif diberikan suspensi simvastatin dengan konstentrasi 0,26 % serta pada hewan uji kelompok kontrol negatif diberikan suspensi Na.CMC 1 %.

1. Penentuan kadar kolesterol total 18

Untuk penentuan kadar kolesterol pada hewan uji, terlebih dahulu kolesterol tester diaktifkan kemudian strip dimasukkan ke dalam alat ukur kolesterol. Darah hewan uji diambil melalui pembuluh vena yang terdapat pada ujung ekor kemudian pada strip kolesterol. Tetesan darah yang mengandung lipid akan bereaksi dengan zat tertentu yang terkandung dalamn strip (lipid oksidase) kemudian secara otomatis dalam waktu 145 detik kadar kolesterol darah akan terukur dan hasilnya dapat dibaca di monitor kolesterol tester.1. Teknik Pengumpulan DataData yang dikumpulkan adalah data dari penurunan kadar koleterol total darah mencit pada setiap tahap perlakuan.1. Teknik Analisis DataData yang diperoleh kemudian dianalisis secara statistik SPSS .Selanjutnya dibahas dan diambil kesimpulan.

BAB IVHASIL DAN PEMBAHASAN 3. HasilDari hasil penelitian diperoleh penurunan kadar kolesterol total pada hewan uji yang telah pemberian Na.CMC 1 % (kontrol negatif), simvastatin (kontrol positif) dan kombinasi ekstrak daun salam dan ekstrak daun sirsak 0,5:0,8 (Perlakuan) dapat diperlihatkan pada tabel di bawah ini :Tabel 1 : Data Hasil pengamatan kadar kolesterol Darah MencitPerlakuanMencitBerat(gr)Kadar Kolesterol Darah MencitSelisih

AwalKenaikan Pada hari ke-15Penurunan pada hari ke-18

Kontrol Negatif(Na. CMC 1%I2811227517563

II2911227517563

III3011227717765

Jumlah87336827527191

Rata-rata29112275,6175,663,6

Kombinasi Ekstrak daun salam dan Ekstrak daun sirsak (0,5% : 0,8%I28112312162150

II29112324139185

II31112312134178

Jumlah88336948435513

Rata - rata29,3112316145171

Kontrol Positif(Simvastatin 0,0026%)I27112222121101

II29112222119103

III3111221211993

Jumlah87336656359297

Rata - rata29112218,7119,799

Sumber : Data primer (2014)Berdasarkan data diatas, jumlah rata rata penurunan kadar kolesterol darah pada perlakuan control negatif (Na.CMC 1%) sebesar 63,6 ,kontrol positif (Simvastatin 0,0026 %) sebesar 99, dan kombinasi ekstrak daun salam dan sirsak (0,5% : 0,8%) sebesar 171.19

Hasil data penelitian yang diperoleh kemudian dianalisis menggunakan program SPSS Anova (Analisis Of Varians) dimana data harus memenuhi 2 persyaratan yaitu 1. Data harus homogen (Keseragaman Varians data) dan 2. Data harus terdistribusi normal (Normality).20

Tabel 2. Uji Normalitas data hasil penurunan kadar kolesterol pada hewan uji Pada tabel 2 yang menunjukkan Test of Normality (Shapiro-Wilk), terlihat bahwa pada perlakuan yang diberikan Na.CMC menunjukkan bahwa nilai significant berada 0,05 maka diambil kesimpulan bahwa distribusi data dari tiga variable tersebut tidak memenuhi syarat untuk dilakukan Analisi of Varians (ANOVA). Maka dilakukan transform data, yang mana data awalnya diubah menjadi model data logaritma dan ln. pada tabel 3 data telah diubah menjadi model logaritma dan tabel 4 telah diubah menjadi model ln yang juga menunjukkan pada perlakuan yang diberikan Na.CMC menunjukkan bahwa nilai significant berada < 0,05.Dari data tersebut menunjukkan bahwa data tidak dapat dianalisis dengan menggunakan uji ANOVA sehingga dialihkan dengan menggunakan Non parametric Test dengan uji Kruskal-Wallis.

Tabel 5. Uji Kruskal-Wallis data hasil penurunan kadar kolesterol pada hewan uji21

Test Statisticsa,b

Nilai

Chi-Square7.261

Df2

Asymp. Sig..027

a. Kruskal Wallis Test

b. Grouping Variable: perlakuan

Hasil dari uji Kruskal Wallis diperoleh nilai p = 0,027, oleh karena nilai p < 0,05, dapat diambil kesimpulan bahwa paling tidak terdapat perbedaan yang bermakna diantara penurunan kolesterol terhadap ketiga kelompok uji.Tabel 6. Uji Post Hoc Mann Whitney data hasil penurunan kadar kolesterol pada hewan ujiPerlakuanNilai Asymp. Sig(Mann Whitney)

Na. CMC dan Kombinasi Ekstrak Daun Salam dan Daun Sirsak0.046

Kombinasi Ekstrak Daun Salam dan Daun sirsak dan suspensi simvastatin0,050

Na. CMC dan suspensi simvastatin0,046

Hasil dari uji Mann-Whitney U diperoleh nilai p=0,046, oleh karena nilai p