antidepresan non psikotropik kombinasi ekstrak air …eprints.ums.ac.id/48956/10/naskah...

ANTIDEPRESAN NON-PSIKOTROPIK KOMBINASI EKSTRAK

AIR RIMPANG KUNYIT (Curcuma longa L.) DAN EKSTRAK

ASETON KULIT PISANG (Musa paradisiaca L.) SEBAGAI

MOODBOOSTER PADA MENCIT STRES KRONIS RINGAN

PUBLIKASI ILMIAH

Disusun sebagai salah satu syarat menyelesaikan Program Studi Strata I pada Fakultas Farmasi

Oleh:

WINDA KAMARATIH DWIPRASETYA

K 100 130 070

PROGRAM STUDI FARMASI

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA

2016

1

ANTIDEPRESAN NON-PSIKOTROPIK KOMBINASI EKSTRAK AIR RIMPANG

KUNYIT (Curcuma longa L.) DAN EKSTRAK ASETON KULIT PISANG (Musa paradisiaca

L.) SEBAGAI MOODBOOSTER PADA MENCIT STRES KRONIS RINGAN

Abstrak

Ekstrak air rimpang kunyit tunggal dan ekstrak aseton kulit pisang tunggal memiliki

aktivitas antidepresan yang telah diuji secara invivo. Penelitian ini bertujuan untuk

mengkombinasikan ekstrak air rimpang kunyit dan ekstrak aseton kulit untuk

meningkatkan aktivitas antidepresan. Induksi stres kronik ringan (CMS) dilakukan

selama 5 minggu dengan variasi stressor yaitu mempuasakan mencit 12 jam, memberi

suara predator, inversi siklus gelap/ terang, mengotorkan kandang, membasahi serbuk

gergaji, mengurangi serbuk gergaji dan mengguncangkan kandang 15 menit. Subjek

penelitian menggunakan 5 kelompok mencit yaitu CMC-Na 0,5%, Sertralin 6,5 mg/

kgBB, ekstrak kunyit 560 mg/ kgBB, ekstrak kulit pisang 200 mg/ kgBB, dan kombinasi

ekstrak kunyit 560 mg/ kgBB-kulit pisang 200 mg/ kgBB yang diberikan selama 7 hari.

Untuk efek antidepresan diukur dengan durasi immobility time (TST dan FST), climbing

(FST), rearing, grooming, dan durasi aktivitas melewati central square (OFT) dianalisis

mengunakan uji Multivariate-ANOVA dan Least Significant Difference dengan taraf

kepercayaan 95%. Kombinasi ekstrak air rimpang kunyit-ekstrak aseton kulit pisang

signifikan mereduksi lama immobility time mencit (p<0,05) pada uji TST dan FST

masing-masing sebesar 35,66% dan 78,95% dan lebih poten dibandingkan ekstrak

tunggalnya sebagai moodbooster, namun tidak signifikan mereduksi lama climbing dan

tidak signifikan meningkatkan lama gerakan rearing, grooming, dan melewati central

square (lokomotor).

Kata Kunci: aktivitas antidepresan, immobility time, kombinasi ektrak kunyit dan kulit

pisang, moodbooster

Abstract

Turmeric rhizome water extracts alone and banana peels acetone extracts alone has

antidepressant activity which have been tested in vivo. This study aimed to combined the

Turmeric rhizome water extracts and banana peel acetone extracts to increased the

activity of antidepressants. Induction chronic mild stress (CMS) 5 weeks with variety

stressors: deprivation mice 12 hours, gave voice predator, cycle inversion dark / light,

discolour cage, wet sawdust, reduced sawdust and shaked the cage 15 minutes. Subjects

were used 5 groups that given CMC-Na 0,5%, Sertraline 6.5 mg / kg, turmeric extract

560 mg / kg, banana peel extract 200 mg / kg, and combination extract turmeric 560 mg/

kgBB-banana peels 200 mg/ kgBB during 7 days. Antidepressant effect was measured by

the duration of immobility time (TST and FST), climbing (FST), rearing, grooming, and

activity passed central square (OFT) which analyzed using Multivariate-ANOVA and

LSD at 95% confidenced level. The combination extract turmeric-banana peels

significantly reduced immobility time (p <0.05) in TST (35.66%) and FST (78.95%) and

was more potent than single extracts as moodbooster, but didn’t significantly reduce

duration climbing and didn’t significantly increase duration rearing, grooming, and pass

central square (locomotor).

Keywords: antidepressant activity, immobility time, a combination of extracts of

turmeric and banana peels, moodbooster

2

1. PENDAHULUAN

Depresi yaitu penyakit kejiwaan akibat stresor psikososial dan kurangnya kadar serotonin dan

norepinefrin di otak. Depresi atipikal dan bipolar masing-masing dialami oleh 33% dan 1% populasi

penduduk dunia (Parker et al., 2002; Grande et al., 2016) . Kurkumin yang terdapat didalam ekstrak

air rimpang kunyit 560 mg/kgBB diduga menjadi zat yang berperan secara signifikan menghambat

monoamine oxidize (MAO) tipe A (46,8%) dan B (37,3%) sehingga kadar neurotransmiter otak

meningkat selama 2 minggu terapi, sehingga dapat mereduksi lama immobility time mencit pada uji

Tail Suspension Test (TST) sebesar 57,62% dan Forced Swimming Test (FST) sebesar 67,76%

,namun tidak signifikan meningkatkan aktivitas lokomotor pada uji OFT (Yu et al., 2002).

Ekstrak aseton kulit pisang ambon muda beraksi sebagai antidepresan dengan cara memasok

senyawa triptofan dan serotonin ke otak (Ittiyavirah and Anurenj, 2014). Ekstrak tersebut signifikan

meningkatkan kadar triptofan di otak tikus sebanyak 30,59 µg/g setelah 5 minggu pemberian dengan

dosis 200 mg/kgBB, sehingga dapat meningkatkan durasi rearing yang signifikan pada uji open field

test (OFT) sebesar 37,69%, mereduksi lama immobility time pada uji FST dan TST masing-masing

sebesar 17,36% dan 24,11% pada mencit stres kronis.

Pengujian kombinasi ekstrak air rimpang kunyit dan ekstrak aseton kulit pisang perlu dilakukan

untuk mengetahui peningkatan efek antidepresan melebihi ekstrak tunggalnya karena dapat

meningkatkan kadar neurotransmiter (serotonin, norepinefrin dan dopamin) melalui penghambatan

MAO dan peningkatan kadar serotonin diotak dari pasokan triptofan. Mekanisme peningkatan

antidepresan kombinasi ekstrak tersebut diharapkan peningkatan kadar serotonin beserta

neurotransmiter lain dapat tersebar melalui aliran darah ke bagian dorsal, amigdala, korteks, dan

hippocampus otak sehingga kemampuan kognitif, peningkatan mood (moodbooster) untuk

beraktivitas menjadi lebih baik dan optimal.

2. METODE PENELITIAN

Kategori penelitian ini kuantitatif eksperimental dengan desain pretest-posttest with control.

2.1 Variabel Penelitian

Variabel bebas : Mencit diberi perlakuan dengan pemberian kontrol negatif (CMC Na

0,5%), kontrol positif (Sertralin 6,5 mg/ kgBB), ekstrak air rimpang

kunyit 560 mg/ kgBB, ekstrak aseton kulit pisang (200 mg/ kgBB) dan

kombinasi ekstrak air rimpang kunyit-aseton kulit pisang muda.

Variabel terikat : Durasi immobility time dan durasi climbing serta durasi aktivitas

lokomotor (rearing, grooming, dan aktivitas central square).

3

Variabel terkontrol : 1. Sampel : pisang ambon usia ±3 bulan dan rimpang kunyit usia tua

±10 bulan

2. Hewan uji : mencit putih jantan galur Swiss ± 3 bulan

3. Induksi stres kronis ringan (CMS) selama 5 minggu:

mengguncangkan kadang, mengotorkan kandang, mengurangi serbuk

gergaji, membasahi serbuk gergaji, inversi siklus gelap/terang,

mempuasakan mencit 12 jam, dan memberi suara predator,

2.2 Alat

Lampu UV (Vilber Lourmat) 254 dan 366 nm (alat uji spot warna KLT), Alat uji depresi:

Seperangkat alat uji FST (akuarium 44 x 20,5 x 23 cm beserta jaring panjat), seperangkat alat uji

OFT (kotak tanpa tutup 40 x 40 x 40 cm dan isolasi hitam sebagai penanda central square) dan

seperangkat alat uji TST (tiang penjepit ekor hewan uji), handphone Xperia Sony (berisi Voice

recorder suara anjing dan kucing), alat-alat gelas Pyrex (bekker glass, gelas ukur, pipet tetes, pipet

volum), spuit injeksi oral (Terumo), alat sentrifugasi (TOHO), alat freeze- dryer untuk liofilisasi

(Alpha 1-2 LO plus) dan alat pemekatan ekstrak (rotary evaporator (Stuart).

2.3 Bahan

Rimpang kunyit 2 kg (±10 bulan) dan kulit pisang muda berumur ±3 bulansebanyak 600 g (bahan uji

ekstrak), mencit jantan galur Swiss (berumur 3 bulan), aquadest, CMC Na 0,5%, obat Sertraline 50

mg, bahan-bahan fase gerak uji KLT (aquadest (teknis), metanol p.a, butanol p.a, asam asetat glasial

p.a, etil asetat p.a, ammonia 28% p.a, natrium hipoklorit, metanol p.a), aseton 70% (teknis), serbuk

magnesium p.a dan NaCl p.a (seperangkat bahan kimia untuk uji flavonoid), reagen Wagner dan

reagen Hager (seperangkat bahan kimia untuk uji alkaloid).

2.4 Determinasi Sampel

Determinasi tanaman kunyit dan pisang dilakukan di Fakultas Biologi UMS.

2.5 Ekstraksi Rimpang Kunyit

Ekstraksi rimpang kunyit dengan cara merebus 1 kg rimpang kunyit kering menggunakan 8 L air

panas (penjagaan suhu 85oC - 95

oC) sambil diaduk 2 jam, lalu ekstrak air dipisahkan dari ampasnya.

Cara ekstraksi metode dekokta ini diulang dua kali (diperoleh ekstrak air ke-1 dan ke-2). Hasil

ekstrak pertama dan kedua digabungkan, lalu diserbukkan menggunakan alat Freeze-dryer (Yu et al.,

2002). Prinsip kerja alat Freeze-dryer (liofilisasi) yaitu menghilangkan pelarut air dari produk yang

telah dibekukan dan ditempatkan dibawah vakum. melalui proses sublimasi air pada suhu dan

tekanan dibawah triple point seperti 4,579 mmHg dan 0,0099oC (Nireesha et al., 2013).

2.6 Ekstraksi Kulit Pisang Ambon Muda

4

Ekstraksi kulit pisang ambon muda menggunakan metode maserasi. Kulit pisang ambon ditimbang

600 g lalu dirajang, kemudian dipanaskan 2 menit dengan air mendidih yang dijaga pada suhu 80oC.

Kulit pisang diambil dan diblender 2x dengan aseton 70% q.s. Hasil kulit pisang yang telah diblender

disentrifugasi 6000 rpm selama 10 menit. Maserat pada lapisan atas diambil lalu dipekatkan dengan

rotatory evaporator pada suhu 50oC hingga diperoleh ekstrak pekat (Tee and Hassan, 2011).

2.7 Uji Kualitatif Ekstrak Air Rimpang Kunyit (Flavonoid) dan Ekstrak Aseton Kulit Pisang

(Asam Amino/ Alkaloid Indol)

Tabel 1. Uji kualitatif pada sampel ekstrak air rimpang kunyit dan ekstrak aseton kulit pisang

Sampel

Uji

metabolit

sekunder

Metode

uji Cara kerja

Perubahan warna yang

diamati

Ekstrak air

rimpang

kunyit

Flavonoid

Shinoda

2 mL larutan sampel

dimasukkan serbuk

magnesium dan diteteskan

HCl secara perlahan.

Merah tua

(Mukherjee, 2002)

Alkali 2 mL larutan sampel

ditambah NaCl

Kuning

(Mukherjee, 2002)

Ekstrak

aseton kulit

pisang

Asam

amino/

alkaloid

indol

Hager 1 mL ekstrak diteteskan

reagen Hager

Endapan kuning

(Sawant and Godghate,

2013)

Wagner 1 mL ekstrak diteteskan

reagen Wagner

Endapan merah

kecoklatan

(Sawant and Godghate,

2013)

2.8 Induksi Stres Kronis Ringan (CMS)

Masing-masing kelompok hewan uji dipapar stres selama 5 minggu. Hewan uji diberikan 2-3 jenis

stresor yang berbeda setiap harinya dalam 1 minggu yang disajikan pada tabel 1 (Sun et al., 2013).

Tabel 2. Jadwal paparan stres

Jenis Stressor Hari ke-

1 2 3 4 5 6 7

Puasa 12 jam

Suara Predator

Guncangan kandang 15 menit

Mengotorkan kandang

Menggunakan serbuk gergaji basah

Pergantian siklus gelap-terang secara mendadak

Mengurangi serbuk gergaji

2.9 Pengujian Ekstrak Kombinasi dan Ekstrak Tunggal Kunyit dan Kulit Pisang sebagai

Antidepresan

Uji metode stressor (CMS) digunakan 5 ekor mencit. Uji perlakuan ekstrak, menggunakan 25 ekor

mencit yang sudah stres dibagi kedalam 5 kelompok, yaitu:

5

Kontrol negatif : CMC Na 0,5%.

Kontrol positif : obat Sertraline dengan dosis 6,5 mg/ kgBB mencit p.o.

Ekstrak air rimpang kunyit : ekstrak air rimpang kunyit dengan dosis 560 mg/kgBB p.o.

Ekstrak aseton kulit pisang : ekstrak aseton kulit pisang dengan dosis 200 mg/kgBB p.o.

Ekstrak kombinasi air rimpang

kunyit-aseton kulit pisang :

ekstrak kombinasi ekstrak air rimpang kunyit-aseton kulit

pisang.

2.10 Metode Uji Depresi/ Antidepresan

A. Tail Suspension Test (TST)

Batang panjang (50 cm) diletakkan secara horizontal diatas meja. Ekor mencit digantung

menggunakan alat perekat antar ekor dan ujung kayu (jarak 1 cm). Pengamatan uji TST selama 5

menit baik pretest maupun posttest dengan pengukuran durasi immobility time mencit (Buccafusco,

2009).

B. Open Field Test (OFT)

Mencit dimasukan ke dalam kotak tanpa tutup dan diamati selama 5 menit sebelum diberi perlakuan

(pretest) dan setelah diberi perlakuan (posttest). Pengukuran depresi/ antidepresan melalui durasi

aktivitas central square, rearing, dan grooming (Anas et al., 2013).

C. Forced Swimming Test (FST)

Mencit direnangkan pada air di akuarium dan dipantau durasi immobility time (keadaan mencit

menggerakan kepalanya agar tetap diatas air) dan mobility mencit berupa renang dan memanjat

Pengukuran durasi ini dapat disimpulkan meningkat/ menurun melalui uji pre-test dan posttest

(Buccafusco, 2009).

2.11 Analisis Data

Uji T-paired pada data pretest-posttest (basal sebelum induksi CMS dan basal setelah induksi CMS)

untk menguji hasil model stressor CMS 5 minggu. Hasil data post-tes pengukuran depresi/

antidepresan berupa durasi immobility time (IT) pada uji TST dan FST, climbing (FST), serta

peningkatan rearing, grooming, dan melewati central square (CS) pada uji OFT kombinasi ekstrak

kunyit-kulit pisang pada posttest hari ke-7 dibandingkan dengan posttest hari ke-7 ekstrak

tunggalnya. Pengambilan kesimpulan untuk melihat perbedaan hasil antar kelompok mencit pada

setiap pengukuran antidepresan diolah menggunakan MANOVA-LSD dengan taraf kepercayaan

95%.

3. HASIL DAN PEMBAHASAN

3.1 Hasil Determinasi Tanaman Sampel

Rimpang kunyit merupakan spesies Curcuma domestica Val. (sinonim Curcuma longa L.) dan kulit

pisang ambon muda merupakan spesies Musa paradisiaca L. (sinonim Musa sapientum L.).

6

3.2 Hasil Rendemen Ekstrak

Ekstrak air rimpang kunyit menghasilkan serbuk ekstrak sebanyak 3,75 g (rendemen sebesar 112 %

b/b), hal ini menandakan bahwa pengadukan dan pemanasan pada proses ekstraksi dengan metode

dekokta menyebabkan pelarut dapat mengekstraksi seluruh komponen pada sampel. Maserasi

singkat dalam mengekstraksi kulit pisang yang menggunakan sentrifugasi diduga agar senyawa asam

amino triptofan keluar dari sel dan ikut tersari (Bacher and Ellington, 2007). Ekstrak kental yang

diperoleh sebesar 7,315 g (rendemen sebesar 1,22% b/b). Kecilnya hasil rendemen diduga akibat

waktu kontak pelarut dengan sampel terlalu singkat akibat kekuatan sentrifugasi 6000 rpm yang

termasuk kategori sedang sehingga pelarut tidak maksimal mengekstraksi seluruh senyawa metabolit

sekunder.

3.3 Hasil Uji Kualitatif Ekstrak

Ekstrak aseton kulit pisang positif mengandung senyawa asam amino dan alkaloid akibat reaksi asam

pikrat jenuh yang mengandung gugus H+ disumbangkan ke gugus NH pada struktur asam amino

sehingga menghasilkan endapan berwarna kuning pada uji Hager, selain itu kalium iodida

menyumbangkan gugus K+

ke struktur asam amino sehingga terjadi endapan alkaloid dan

menghasilkan reaksi peruraian KI yaitu I3-

yang berwarna coklat sehingga terbentuk endapan coklat

kemerahan pada uji Wagner (Mamonto et al., 2008; El-shenawy et al., 2015). Hasil ini sejalan

dengan penelitian Ittiyavirah and Anurenj (2014) serta Akula et al.(2011) yang menyatakan bahwa

kulit pisang ambon mengandung senyawa asam amino triptofan dan alkaloid indol, serotonin.

Tabel 3. Hasil identifikasi senyawa flavonoid dan alkaloid

Senyawa Metode Uji Hasil Rujukan Identifikasi

Alkaloid/

asam amino

Hager Endapan berwarna

kuning

Endapan berwarna kuning (Sawant and

Godghate, 2013) Alkaloid/

asam amino Wagner

Endapan berwarna

merah kecoklatan

Endapan berwarna merah kecoklatan

(Sawant and Godghate, 2013)

Flavonoid Shinoda Merah tua Merah tua (Mukherjee, 2002)

Flavonoid

Alkali Kuning Kuning/ merah (Mukherjee, 2002)

7

3.4 Hasil Pengamatan Subjektif 5 Kelompok Perlakuan Stressor Minggu ke-5

Tabel 3. Pengaruh pemberian ekstrak dan obat pada 5 kelompok perlakuan terhadap hasil

pengamatan subjektif

Kelompok

Perlakuan Pengamatan Subjektif

Basal

sebelum

paparan

stres

Basal

setelah

paparan

stres

Pemberian Ekstrak dan Obat pada

paparan stres minggu ke-5

Hari ke 1 Hari ke 3 Hari ke 7

Persentase mencit (%)

Kontrol negatif (CMC

Na 0,5%) n=5

Perilaku

Normal 100 0 40 40 20

Agresif 0 20 0 0 0

Pasif 0 80 60 60 80

BAB Normal 100 40 20 40 0

Sulit 0 60 80 60 100

Nafsu makan Bertambah 100 20 40 60 0

Berkurang 0 80 60 40 100

Kontrol positif

(Sertralin 6,5 mg/

kgBB)

n=5

Perilaku

Normal 100 0 60 0 60

Agresif 0 0 20 40 40

Pasif 0 100 20 60 0

BAB Normal 100 20 40 60 80

Sulit 0 80 60 40 20


Berkurang 0 80 60 40 20

EK (560 mg/ kgBB)

n=5

Perilaku

Normal 100 20 40 0 80

Agresif 0 0 0 40 20

Pasif 0 80 60 60 0

BAB Normal 100 0 60 40 100

Sulit 0 100 40 60 0

EKP (200 mg/ kgBB)

n=5

Perilaku

Normal 100 20 40 20 80

Agresif 0 0 0 0 0

Pasif 0 80 60 80 20

BAB Normal 100 40 40 60 80

Sulit 0 60 60 40 20


Berkurang 0 60 60 40 0

EKKP

n=5

Perilaku

Normal 100 40 60 60 60

Agresif 0 0 20 40 40

Pasif 0 60 20 0 0

BAB Normal 100 20 60 60 100

Sulit 0 80 40 40 0


Berkurang 0 60 40 40 20

Pemberian CMC Na 0,5% selama 7 hari mengakibatkan 100% mencit sulit BAB, nafsu makan

berkurang dan berperilaku pasif (tabel 3). Pemberian obat Sertralin selama 1 hari mulai berefek

menormalkan perilaku dan BAB serta meningkatkan nafsu makan pada 60% mencit dan setelah 7

8

hari pemberian 80% mencit nafsu makannya bertambah dan BAB normal (tabel 3). Pemberian EK

selama 1 minggu efektif meningkatkan nafsu makan dan menormalkan BAB sebesar 100% serta

menormalkan perilaku 80% mencit. Pemberian EKP selama 1 hari mulai efektif menormalkan 40%

mencit dan setelah 1 minggu pemberian, mencit yang normal sebesar 60%, 80% mencit BABnya

normal, dan 100% mencit nafsu makan bertambah. Pemberian EKKP selama 1 minggu stabil

menormalkan perilaku (60%) dan BAB (80%) serta meningkatkan nafsu makan pada 100% mencit

(tabel 3). Pemberian EK dengan dosis 560 mg/ kgBB selama 1 minggu lebih efektif menormalkan

perilaku, BAB, dan meningkatkan nafsu dibandingkan kelompok perlakuan lain. Kelompok EKKP

diduga memiliki tingkat stres yang tinggi sehingga kombinasi EKKP kurang efektif dibandingkan

pemberian EK.

3.5 Hasil Pengukuran Antidepresan Pada 5 Kelompok Perlakuan

Tabel 4. Durasi immobility time 5 kelompok perlakuan pada uji TST

Kelompok

perlakuan

Durasi immobility time (IT)

Basal sebelum

induksi CMS

Basal setelah

Induksi CMS

Pengamatan minggu ke 5 induksi CMS


x ±SD (detik)

Kontrol (-) CMC Na 0,5% 84,2±9,7 123,9±28,2 121,8±35,8 120,3±13,2 155,5±32,1

Kontrol (+) Sertralin 6,5 mg/ kgBB 72,4±7,3 118,1±45,2 84,7±27,9a 49,9±29,5 31,6±14,6

a

EK 560 mg/ kgBB 86,4±23,2 133,1±51 142±14,9ab

127,7±14,5 b

67,7±42,5 ab

EKP 200 mg/ kgBB 103,9±6,8 162,5±41,4 133±49,7b 105,3±50,3 87±48,8

a

EKKP 57,5±10,4 91,3±5,5 91±35,9ac

70,3±37,2bd

37±16,7acd

Keterangan. a, P<0,05 yang dibandingkan dengan kontrol (-).

b, P<0,05 yang dibandingkan dengan

kontrol (+). c, P<0,05 yang dibandingkan dengan EK.

d p<0,05 yang dibandingkan dengan EKP

Tabel 5. Durasi climbing 5 kelompok perlakuan pada uji FST

Kelompok

perlakuan

Durasi climbing

Basal sebelum

induksi CMS

Basal setelah

Induksi CMS



x ±SD (detik)

Kontrol (-) CMC Na 0,5% 86,8±6,1 123,8±12,4 146,3±16,6 157,1±7,8 172,9±3,6

Kontrol (+) Sertralin 6,5

mg/ kgBB 106,4±9,4 113,5±42,4 161,3±16,2 166,2±4,8 149,2±9,7

EK 560 mg/ kgBB 116,2±11,7 130,4±57,8 156,8±20,8 140,4±18,9 136,8±34,5

EKP 200 mg/ kgBB 108,9±17,7 122,2±12,8 158,5±25,7 159,6±12,7 165,1±12,1

EKKP 96,7±35,7 130,4±57,8 160±8 130±42,2 bd

117±51,3ad




d p<0,05 yang dibandingkan dengan EKP.

9

Tabel 6. Durasi immobility time 5 kelompok perlakuan pada uji FST

Kelompok

perlakuan

Durasi immobility time (IT)

Basal sebelum

induksi CMS

Basal setelah

Induksi CMS



x ±SD (detik)

Kontrol (-) CMC Na 0,5% 12±14,7 11,5±13,7 58,4±29,3 73,8±47,3 b

51,3±15,8

Kontrol (+) Sertralin 6,5 mg/

kgBB 53,7±51,4 67,2±42,4 72,4±39 145±83,3 149,2±9,7

a

EK 560 mg/ kgBB 42,7±29,8 56,6±30,7 8,6±8,1 ab

24,6±5,9 b

11,8±3,7 a

EKP 200 mg/ kgBB 30,9±14,7 42,3±22,8 36,8±47,8 13,8±7,7 b

3,7±1,2 a

EKKP 17,6±21 22,5±25,1 0,8±0,4ab

58,6±46,5b 3,7±2,6

a





Tabel 7. Durasi grooming 5 kelompok perlakuan pada uji OFT

Kelompok

perlakuan

Durasi grooming

Basal sebelum

induksi CMS

Basal setelah

Induksi CMS



x ±SD (detik)

Kontrol (-) CMC Na 0,5% 28,6±7,4 7±6,8 16,4±14,5 46,6±39 66,1±39,6

Kontrol (+) Sertralin 6,5 mg/ kgBB 53,2±5,7 32,6±4,2 30,1±8,9 34,4±26 41,1±9

EK 560 mg/ kgBB 36,8±6,7 33,4±6,8 43,1±44,1 38,1±6,4 43,1±344,1

EKP 200 mg/ kgBB 57,1±18 23,6±11,9 8,8±0,7a 53,2±40 90,6±46,7

bc

EKKP 38,3±24,2 10,1±12,1 135,7±17,2abcd 10,1±12,1

d 60,5±6,7





Tabel 8. Durasi rearing 5 kelompok perlakuan pada uji OFT

Kelompok

perlakuan

Durasi rearing

Basal sebelum

induksi CMS

Basal setelah

Induksi CMS



x ±SD (detik)

Kontrol (-) CMC Na 0,5% 48,5±23,8 7,3±7,4 14,8±16 45,2±36,1 25,8±17,4

Kontrol (+) Sertralin 6,5 mg/ kgBB 50,8±11,6 17,3±6,7 29,3±14,4 22,9±32,4 45,1±20,6

EK 560 mg/ kgBB 32,1±11,7 11,8±9,6 4,8±1,6b 35,7±36,7 64,4±6,6

a

EKP 200 mg/ kgBB 36,3±14 13,1±3,9 14,7±2b 22,8±4,7 29,5±20,5

d

EKKP 51,9±15,9 11,8±9,6 16,5±10,5 7,6±1,4a 35,7±36,9





10

Tabel 9. Durasi melintasi central square 5 kelompok perlakuan pada uji OFT

Kelompok

perlakuan

Durasi melintasi central square (CS)

Basal sebelum

induksi CMS

Basal setelah

Induksi CMS



x ±SD (detik)

Kontrol (-) CMC Na 0,5% 16,2±6,5 0,7±0,5 0,8±0,4 9,1±4,7 10,5±5,6

Kontrol (+) Sertralin 6,5 mg/ kgBB 10±5,8 3,8±3,7 10±6,4a 10,7±8,4 8,2±6,4

EK 560 mg/ kgBB 19,5±4,3 1,8±0,6 2,3±0,5b 15,4±2,5

a 13,9±2,9

EKP 200 mg/ kgBB 15,7±11,2 12,4±10,3 4,9±2,6 7,8±2,6c 9,3±9,3

EKKP 18,2±5,9 1,8±0,6 6,4±6,8 2,2±2,2abc

9,5±6,9





Induksi CMS selama 4 minggu pada seluruh kelompok mencit signifikan (p<0,05) membuat mencit

stres dan depresi (tabel 4-9) yang ditinjau dari penurunan durasi IT (TST dan FST), climbing (FST),

rearing, grooming, dan durasi melintasi CS. Pemberian CMC Na 0,5% (tabel 4-5) selama 7 hari

tidak memiliki efek yang signifikan (p>0,05) untuk menurunkan durasi IT (TST dan FST) serta

climbing (FST). Pemberian CMC Na 0,5% (tabel 7-9) selama 3 hari signifikan meningkatkan durasi

grooming 541,7% (p=0,026) dan meningkatkan rearing 519,2% secara signifikan (p=0,14), dan

meningkatkan durasi mencit melintasi CS 1.037,5% signifikan (p=0,006) hingga pemberian hari ke-

7. Hal ini diduga mencit kontrol negatif memiliki tingkat stres yang rendah saat ditempatkan pada

kotak OFT.

Pemberian Sertralin (tabel 4-6) dapat meningkatkan kadar serotonin yang terlihat dari penurunan

signifikan (p=0,043) durasi IT (TST) sebesar 57,73% selama 3 hari dan semakin menurun hingga

pemberian hari ke-7. Pemberian Sertralin selama 7 hari tidak signifikan (p<0,05) menurunkan durasi

IT dan climbing (FST). Hasil ini sejalan dengan teoritis Bilge and Erol (2012) bahwa Sertralin

memiliki efek melawan ESO berupa ekstrapiramidal sehingga dapat meningkatkan durasi climbing

dan IT pada pemberian berulang. Pemberian Sertralin dari hari ke-1 hingga ke-7 tidak signifikan

(p>0,05) meningkatkan durasi rearing, grooming, dan aktivitas CS pada uji OFT (tabel 7-9) yang

diduga kurang efektif menstabilkan kadar serotonin di bagian dorsal, amigdala dan hippocampus

otak sehingga tidak mempengaruhi uji OFT .

Pemberian EK dapat meningkatkan kadar neurotransmiter otak melalui penghambatan MAO-A dan

B yang terlihat dari penurunan IT (FST) sebesar 84,79% yang signifikan (p=0,001) sejak pemberian

hari pertama dan terus berlanjut hingga 7 hari pemberian serta signifikan (p=0,023) menurunkan

durasi IT (TST) 73,24%, dan signifikan meningkatkan durasi rearing 446,33% (p=0,000) setelah 7

hari pemberian (tabel 4,6,8). Namun tidak efektif (p>0,05) menurunkan durasi climbing (FST) dan

11

tidak signifikan meningkatkan durasi grooming dan aktivitas CS (tabel 5,7,9). Hal tersebut diduga,

penghambatan MAO oleh kurkumin dari EK masih kurang efektif meningkatkan kadar serotonin dan

dopamin hingga ke seluruh saraf otak.

Pemberian EKP selama 7 hari dapat memasok triptofan ke otak mencit yang ditinjau dari penurunan

IT pada uji TST (35,18%, p=0,016) dan FST (91,30%, p=0,023) yang signifikan dan peningkatan

durasi rearing sebesar 125,6% (p=0,035) (tabel 4,6,8). Namun untuk menurunkan durasi climbing

serta meningkatkan lama grooming dan aktivitas CS tidak signifikan (tabel 5,7,9). Hasil pemberian

EKP selama 7 hari sesuai dengan penelitian Ittiyavirah and Anurenj (2014) yang menyatakan bahwa

ekstrak aseton kulit pisang dapat menurunkan depresi yang ditinjau dari penurunan IT (TST dan

FST) serta meningkatkan rearing (OFT) secara signifikan.

Pemberian kombinasi EKKP diduga dapat meningkatkan kadar neurotransmiter otak melalui

penghambatan MAO dan meningkatkan serotonin dari pasokan triptofan sehingga menurunkan

depresi yang terlihat pada penurunan lama IT (FST) sebesar 96,35% selama 3 hari pemberian dan

terus menurun hinngga hari ke-7 (tabel 6) serta signifikan (0,003) menurunkan IT (TST) 59,44%

selama 7 hari pemberian (tabel 4) serta lebih unggul daripada ekstrak tunggalnya dan Sertralin, hal

ini menunjukkan bahwa kombinasi EKKP berkhasiat sebagai moodbooster pada mencit stres kronis

ringan. Namun penurunan durasi climbing 10,28% (tabel 5) pada uji FST tidak signifikan (p<0,05).

Pemberian kombinasi EKKP selama 1 minggu tidak signifikan (p>0,05) efektif menaikkan durasi

grooming, rearing, dan melewati CS (tabel 7-9).

3.6 Pengaruh Pemberian 5 Perlakuan Terhadap Berat Badan 5 Kelompok Mencit

Gambar 1. Profil berat badan mencit pada basal sebelum dan selama masa induksi CMS serta efek

setelah diberi 5 perlakuan pada minggu ke-5

Pada gambar 1 menunjukkan induksi CMS selama 4 minggu menurunkan berat badan mencit pada 5

kelompok perlakuan secara signifikan (p=0,018). Pemberian 5 perlakuan (CMC Na 0,5%, Sertralin,

12

EK, EKP, dan EKKP) signifikan (p<0,05) meningkatkan berat badan mencit pada minggu ke-5. Efek

peningkatan berat badan mencit yang diberi EK selama 1 minggu memiliki efek yang sama pada

mencit yang diberi Sertralin. Mekanisme kombinasi EKKP yang diduga menghambat MAO dan

memasok triptofan sehingga kadar serotonin di celah sinaps tinggi menyebabkan reseptor

postsinaptik menjadi jenuh sehingga efek peningkatan berat badan yang diberi EKKP setara dengan

mencit yang diberi EKP. Peningkatan berat badan akibat pemberian CMC Na 0,5% selama 1 minggu

tetap lebih rendah dibandingkan mencit yang diberi ekstrak dan obat.

3.7 Hasil Peningkatan Kombinasi Ekstrak Kunyit-Kulit Pisang (EKKP) yang dibandingkan

dengan Ekstrak Tunggalnya

Tabel 10. Hasil respon uji antidepresan kombinasi EKKP yang dibandingkan dengan ekstrak

tunggalnya pada pemberian hari ke-7

Uji antidepresan Ekstrak

tunggal

Respon

(detik)

x ±SD

Respon

EKKP

(detik)

x ±SD

Keterangan

TST-Immobility time

(IT)

EK 67,7±42,5

37±16,7

EKKP menurunkan IT 2x lipat dibandingkan EK

EKP 87±48,8

EKKP menurunkan IT 2x lipat dibandingkan EKP

FST-Climbing

EK 136,8±34,5

117±51,

EKKP menurunkan lama climbing 1,2x lipat

dibandingkan EK

EKP 165,1±12,1 EKKP menurunkan lama climbing 1,4x lipat

dibandingkan EKP

FST-Immobility time

(IT)

EK 11,8±3,7

3,7±2,6 EKKP menurunkan lama IT 3x lipat dibandingkan EK

EKP 3,7±1,2 EKKP menurunkan lama IT sama dengan EKP

OFT-Grooming

EK 43,1±344,1

60,5±6,7

EKKP menaikkan lama grooming 1,4x lipat

dibandingkan EK

EKP 90,6±46,7 EKKP menaikkan lama grooming lebih rendah 1,5x

lipat dibandingkan EKP

OFT-Rearing

EK 64,4±6,6

35,7±36,9

EKKP menaikkan lama rearing lebih rendah 2x lipat

dibandingkan EK

EKP 29,5±20,5 EKKP menaikkan lama rearing lebih tinggi 1,2x lipat

dibandingkan EKP

OFT-Central square

EK 13,9±2,9

9,5±6,9

EKKP menaikkan aktivitas central square lebih

rendah 1,5x lipat dibandingkan EK

EKP 9,3±9,3 EKKP menaikkan aktivitas central square lebih tinggi

0,9x dibandingkan EKP

Pemberian kombinasi EKKP selama 7 hari dapat meningkatkan aktivitas antidepresan dalam

menurunkan IT (TST) yang 2x lebih efektif dibandingkan ekstrak tunggalnya, menurunkan durasi

climbing (FST) 1,2x lebih efektif dari pemberian EK dan 1,4x dibandingkan EKP serta menurunkan

IT (FST) 3x lebih efektif dibandingkan pemberian EK. Pemberian EKKP selama 1 minggu tidak

memiliki pengaruh yang signifikan terhadap peningkatan rearing, grooming, dan aktivitas central

square (tabel 10).

13

4. PENUTUP

Kombinasi ekstrak kunyit 560 mg/ kgBB-kulit pisang 200 mg/ kgBB meningkatkan efektifitas

antidepresan terhadap mencit stres kronis ringan pada penurunan lama IT (TST) yang signifikan 2x

lebih unggul dibandingkan ekstrak tunggal kunyit dan ekstrak tunggal kulit pisang serta penurunan

lama IT (FST) yang signifikan 3x lebih unggul sebagai moodbooster dibandingkan ekstrak tunggal

kulit pisang. Penurunan lama IT (TST) yang diterapi EKKP pada posttest hari ke-7 setara dengan

kontrol positif, namun tidak signifikan meningkatkan aktivitas lokomotor (rearing, grooming, dan

melewati CS) pada uji OFT dan tidak signifikan menurunkan lama climbing (FST). Saran bagi

penelitian ini yaitu perlu penelitian lebih lanjut mengenai pengujian kadar serotonin, triptofan, dan

kurkumin pada otak mencit dan didalam kombinasi ekstrak, pengkombinasian dengan ekstrak yang

meningkatkan kadar norepinefrin di otak hewan uji serta pemberian sediaan pada jangka waktu

kronis (2-3 minggu).

DAFTAR PUSTAKA

Akula R., Giridhar P. and Ravishankar G.A., 2011, Phytoserotonin, Plant Signaling & Behavior, 6

(6), 800–809.

Anas Y., Puspitasari N. and Nuria M.C., Syzygium aromaticum ( L ) Merr. & Perry . Pada Mencit

Jantan Galur Swiss, pp. 13–22.

Bacher J.M. and Ellington A.D., 2007, Global Incorporation of Unnatural Amino Acids in, Methods

in Molecular Biology, 352 (2), 23–34.

Bilge U. and Erol K., 2012, Effects of Sertraline on Experimental Mouse Models of Psychosis.,

Neurosciences (Riyadh, Saudi Arabia), 17 (1), 32–38.

Bliss D.Z., Savik K., Jung H.J.G., Whitebird R., Lowry A. and Sheng X., 2014, Dietary Fiber

Supplementation for Fecal Incontinence: a Randomized Clinical Trial., Research in Nursing &

Health, 37 (5), 67–78.

Buccafusco, 2009, Methods of Behavior Analysis in Neuroscience Second Edition, Taylor and

Francis Group, London.

El-shenawy A.I., Atta A.H. and Refat M.S., 2015, Studies of Physical and Chemical Compounds

Charge Transfer Between Amino Acids and Iodine and its Applications in the Industry of

Unconventional Organic Connectors, 4 (4), 1281–1287.

Grande I., Berk M., Birmaher B. and Vieta E., 2016, Bipolar Disorder, The Lancet, 387 (10027),

1561–1572.

.Ittiyavirah S. and Anurenj D., 2014, Adaptogenic Studies of Acetone Extract of Musa paradisiaca

L. fruit peels in Albino Wistar rats, International Journal of Nutrition, Pharmacology,

Neurological Diseases, 4 (2), 88.

Mamonto S., Wenny J.A. and Mardjan P., 2008, Isolasi dan Karakterisasi Senyawa Alkaloid dari

Ekstrak Daun Keji Beling, Geoacta, 43–47.

Mukherjee, P.K., 2002, Quality control of Herbal Drugs, Business Horizons, New Delhi, pp. 186-

191.

14

Nireesha G.R., Divya L., Sowmya C., Venkateshan N., Babu M.N. and Lavakumar V., 2013,

Lyophilization / Freeze Drying - An Review, 3 (4), 87–98.

Parker G., Roy K., Mitchell P., Wilhelm K. and Hadzi-pavlovic D, 2002, Reviews and Overviews

Atypical Depression : A Reappraisal, pp. 1470–1479.

Sawant R.S. and Godghate G., 2013, Qualitative Phytochemical Screening of Rhizomes of,

International Journal of Science, Environment and Technology, 2 (4), 634–641.

Sun X., Li S., Shi Z., Li T., Pan R., Chang Q., Qin C. and Liu X., 2013, Antidepressant-like Effects

and Memory Enhancement of a Herbal Formula in Mice Exposed to Chronic Mild Stress, 29

(6), 737–744.

Tee T.P. and Hassan H., 2011, Antidepressant-Like Activity of Banana Peel Extract in Mice,

Department of Health Sciences, Faculty of Health and Life Sciences, Management and Science

University, 2 (2), 59–64.

Yu Z.F., Kong L.D. and Chen Y., 2002, Antidepressant Activity of Aqueous Extracts of Curcuma

longa in Mice, 83, 161–165.

antidepresan non psikotropik kombinasi ekstrak air …eprints.ums.ac.id/48956/10/naskah...

Documents