UJI AKTIVITAS SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL DAUN

KELADI TIKUS (Typonium flagelliforme L .), KEMANGI

(Ocimum sanctum L.), DAN PEPAYA (Carica papaya

L.)TERHADAP SEL MCF-7

SKRIPSI

Oleh :

PUTRI KHILDA AMALIA

K100130189

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS MUHAMADIYAH SURAKARTA

SURAKARTA

2016

ii

UJI AKTIVITAS SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL DAUN

KELADI TIKUS (Typonium flagelliforme L .), KEMANGI

(Ocimum sanctum L.), DAN PEPAYA (Carica papaya

L.)TERHADAP SEL MCF-7

SKRIPSI

Diajukan Untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Mencapai Derajad Farmasi

(S.Farm) pada Fakultas Farmasi Universitas Muhammdiyah Surakarta

di Surakarta

Oleh :

PUTRI KHILDA AMALIA

K100130189

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS MUHAMADIYAH SURAKARTA

SURAKARTA

2016

v

KATA PENGANTAR

Assalamu’alaikum Warohmatullahi Wabarokatuh

Puji syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT karena berkat Rahmat dan

Karunia-Nya penulis dapat menyelesaikan penyusunan skripsi ini yang berjudul

“Uji Aktivitas Sitotoksik Ekstrak Etanol Daun Keladi Tikus (Typonium

flagelliforme L .), Kemangi (Ocimum sanctum L.), dan Pepaya (Carica papaya L.)

Terhadap Sel MCF-7” dapat selesai.

Penulisan skripsi ini diajukan dalam rangka memenuhi salah satu syarat

untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi di Universitas Muhammadiyah

Surakarta.

Penulis menyadari bahwa bahwa dalam menyajikan data dan penilihan

kata-kata dalam skripsi ini jauh dari kesempurnaan. Oleh karenanya, penulis

mengharapkan saran dari semua pihak sebagai perbaikan bagi penulis di waktu

mendatang.

Pada kesempatan ini penulis menyampaikan terimakasih kepada :

1. Bapak Azis Saifudin, Ph.D., Apt selaku Dekan Fakultas Farmasi

Universitas Muhamadiyah Surakarta dan penguji I

2. Bapak Haryoto, M,.Sc selaku pembimbing utama dan penguji III, yang

telah bersedia meluangkan waktu untuk membimbing, memberi saran, dan

semangat kepada penulis hingga penulisan skripsi ini dapat selesai tepat

waktu.

3. Ibu Maryati, Ph.D., Apt. Selaku penguji II

4. Kedua orang tua dan adik tercinta yang telah memberikan doa, semangat,

kasih sayang, kepercayaan, inspirasi, dukungan yang tak terhingga serta

pendampingan selama proses penulisan skripsi ini.

5. Keluarga besar Tjiptarno dan Maskar yang telah memberikan

dukungan,semangat dan arahan bagi penulis untuk menyelesaikan skripsi

ini.

vi

6. Seluruh teman-teman seperjuangan farmasi angkatan 2013, terutama

kepada kelompok skripsi yaitu Dhinar Asti, Atikah Hapsari, Rizki Awalia,

Selviana, dan Alivia Putri yang telah memberikan dukungan, semangat,

inspirasi serta suasana kerja sama yang baik sehingga penulisan skripsi ini

dapat selesai.

7. Semua pihak yang telah memberikan semangat selama proses penulisan

skripsi ini, yang tidak dapat penulis sebutkan satu per satu.

Hanya doa yang dapat penulis panjatkan kepada Allah SWT semoga

membalas kebaikan Bapak, Ibu, Saudara, dan teman-teman. Akhir kata, semoga

penelitian ini dapat bermanfaat bagi kita semua.

Wasalamu’alaikum Warohmatullahi Wabarokatuh

Surakarta, 28 November 2016

Penulis

vii

DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN JUDUL ............................................................................................... ii

PENGESAHAN SKRIPSI ..................................................................................... iii

DEKLARASI ......................................................................................................... iv

KATA PENGANTAR ............................................................................................ v

DAFTAR ISI ......................................................................................................... vii

DAFTAR GAMBAR ............................................................................................. ix

DAFTAR TABEL ................................................................................................... x

DAFTAR LAMPIRAN .......................................................................................... xi

DAFTAR SINGKATAN ...................................................................................... xii

ABSTRAK ........................................................................................................... xiii

BAB I. PENDAHULUAN ...................................................................................... 1

A. Latar Belakang Masalah ...................................................................................... 1

B. Rumusan Masalah ............................................................................................... 3

C. Tujuan Penelitian ................................................................................................. 3

D. Tinjauan Pustaka ................................................................................................. 4

1. Tanaman Keladi Tikus ( Typonium flagelliforme L.) ...................................... 4

2. Tanaman Kemangi (Ocimum santum L.) ......................................................... 5

3. Tanaman Pepaya (Carica papaya L.) .............................................................. 6

4. Kanker Payudara .............................................................................................. 7

5. Sel Michigan Cancer Foundation (MCF-7) ..................................................... 8

6. Kromatografi Lapis Tipis................................................................................. 9

7. Metode Uji Sitotoksik dengan MTT ................................................................ 9

E. Landasan Teori .................................................................................................. 10

F. Hipotesis ............................................................................................................ 11

BAB II. METODE PENELITIAN ........................................................................ 12

A. Kategori dan rancangan penelitian .................................................................... 12

B. Variabel penelitian dan definisi operasionalnya................................................ 12

C. Alat dan bahan ................................................................................................... 13

viii

1. Alat................................................................................................................. 13

2. Bahan ............................................................................................................. 13

D. Tempat penelitian .............................................................................................. 13

E. Jalannya penelitian ............................................................................................ 13

1. Determinasi .................................................................................................... 13

2. Penyiapan Bahan............................................................................................ 13

3. Ekstraksi......................................................................................................... 14

4. Optimasi Fase Gerak ...................................................................................... 14

5. Penentuan Kandungan Senyawa dengan Kromatografi Lapis Tipis ............. 14

6. Pembuatan Media Kultur ............................................................................... 15

7. Panen sel MCF-7 ........................................................................................... 15

8. Penanaman atau Platting ............................................................................... 15

9. Pembuatan Larutan Uji .................................................................................. 15

10. Uji Sitotoksisitas dengan Metode MTT ......................................................... 15

F. Analisis data ...................................................................................................... 17

BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN.............................................................. 17

BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN ............................................................. 29

A. Kesimpulan ........................................................................................................ 29

B. Saran .................................................................................................................. 29

DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 30

ix

DAFTAR GAMBAR

Gambar 1. Struktur 6-glucosyl apigenin (isovitexin) .............................................. 4

Gambar 2. Struktur Asam Ursolat ........................................................................... 6

Gambar 3. Struktur Carpain .................................................................................... 7

Gambar 4. Struktur Lycopene ................................................................................. 7

Gambar 5. Bagan Uji aktivitas sitotoksik dengan metode MTT ........................... 16

Gambar 6. Hasil KLT ekstrak daun pepaya .......................................................... 19

Gambar 7. Hasil KLT ekstrak daun kemangi........................................................ 19

Gambar 8. Hasil KLT ekstrak daun keladi tikus ................................................... 20

Gambar 9. Reaksi pembentukan kristal formazan ................................................ 22

Gambar 10. Morfologi sel MCF-7 setelah diberi perlakuan ekstrak kemangi ...... 22

Gambar 11. Grafik konsentrasi ekstrak daun kemangi vs % sel hidup ................ 24

Gambar 12. Morfologi sel MCF-7 setelah diberi perlakuan ekstrak pepaya ........ 24

Gambar 13. Grafik konsentrasi ekstrak daun pepaya vs % sel hidup ................... 25

Gambar 14. Morfologi sel MCF-7 setelah diberi perlakuan keladi tikus .............. 26

Gambar 15. Grafik konsentrasi ekstrak daun keladi tikus vs % sel hidup ............ 27

x

DAFTAR TABEL

Tabel 1. Klasifikasi sel kanker payudara ................................................................ 8

Tabel 2. Variabel dan Definisi Operasional .......................................................... 12

Tabel 3. Reagendeteksisenyawa............................................................................ 14

Tabel 4. Data hasil rendemen ekstrak etanol ........................................................ 17

Tabel 5. Hasil Deteksi Kandungan Senyawa ....................................................... 21

Tabel 6. Data hasil IC50 uji sitotoksik ................................................................... 23

Tabel 7. Data hasil Perlakuan Ekstrak Pepaya terhadap Sel MCF 7 .................... 24

Tabel 8. Data hasil Perlakuan Ekstrak Kemangi terhadap Sel MCF 7 ................. 25

Tabel 9. Data hasil Perlakuan Ekstrak Keladi Tikus terhadap Sel MCF 7 ........... 27

xi

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Determinasi Tanaman ....................................................................... 34

Lampiran 2.Ekstraksi Sampel ............................................................................... 37

Lampiran 3. Hasil Optimasi .................................................................................. 38

Lampiran 4. Hitung sel pada saat penanaman (platting)....................................... 40

Lampiran 5. Treatmen uji sitotoksik .................................................................... 41

Lampiran 6. Perhitungan % sel hidup ................................................................... 42

Lampiran 7. Perhitungan IC 50.............................................................................. 46

xii

DAFTAR SINGKATAN

CCL4 : Karbon Tetra Klorida

COX-2 : Cyclooxigenase-2

DMSO : Dimetil Sulfoksida

ELISA : Enzim-lingked Immunosorbent Assay

GF254 : Gel Flouresensi 254

IC50 : Inhibitory Concentration 50

IL-4 : Interleukin-4

KLT : Kromatografi Lapis Tipis

LAF : Laminar Air Flow

MTT : 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolium bromid

Nf-KB : Nucelar Factor Kappa B

NMR : Nuclear Magnetic Resonance

P.A : Pro Analysis

PBS : Phosphate buffer salin

Rf : Retardation Factor

SDS : Sodium Dodecyl Sulfat

Th-1 : T-helper 1

TNF : Tumor Necrosis Factor

UV254 : Ultraviolet 254

UV366 : Ultraviolet 366

xiii

ABSTRAK

Kanker payudara pada wanita, merupakan salah satu kanker dengan

angka kematian yang tinggi di dunia, termasuk Indonesia. Bahan alam seperti

keladi tikus, kemangi, dan pepaya merupakan contoh tanaman yang dapat

digunakan sebagai alternatif pengobatan kanker. Penelitian ini bertujuan untuk

mengetahui aktivitas sitotoksik ekstrak etanol daun keladi tikus, kemangi, dan

pepayaterhadap sel MCF-7 dan mengetahui kandungan golongan senyawa

masing-masing tanaman secara kualitatif.

Serbuk masing-masing sampel dimaserasi dengan etanol 96% selama 72

jam. Maserat disaring dan selanjutnya diuapkan dengan rotary evaporator,

kemudian diletakan diatas waterbath hingga diperoleh ekstrak kental. Identifikasi

kandungan senyawa dengan KLT, menggunakan fase gerak n-heksan-aseton

(7,5:2,5). Hasil KLT divisualisasi menggunakan reagen semprot dragendorf,

anisaldehid, FeCl3, dan sitroborat yang diamati dibawah UV366 serta sinar

tampak.Ekstrak dibuat seri konsentrasi 500;250 : 125;62,5;31,25 µg/mL dan diuji

aktivitas sitotoksiknya dengan MTT assay.

Ekstrak pepaya, kemangi, dan keladi tikus positif mengandung golongan

alkaloid, fenolik, terpenoid, saponin, dan flavonoid. Hasil uji sitotoksik

menunjukan ekstrak pepaya, kemangi, dan keladi tikus mempunyai efek

sitotoksik terhadap sel MCF-7 dengan IC50 secara berurutan 17,40 ; 6,95 ; 9,73

µg/mL. Ketiga ekstrak merupakan sumber yang potensial menjadi agen

antikanker.

Kata kunci : Typonium flagelliforme, Ocimum santum, Carica papaya,Sitotoksik, MCF-7

xiv

ABSTRACTS

Breast cancer in women is the one of cancers that causes high mortality

around the world, including Indonesia. Natural medicine such as keladi tikus,

kemangi, and pepaya can be used as alternative medicine against cancer. The aim

of this study was to evaluate the cytotoxic activity of keladi tikus, kemangi, and

pepaya etanol extract against MCF-7 cells and determine of qualitative

phytochemical constituent from the extracts.

Samples powder are macerated with etanol 96 % for 72 hours. Samples

were filtered, then filtrates are evaporated with rotary evaporator and put on

waterbath to obtain crude extracts. Identification of pythochemical constituent

with TLC using mobile phase n-heksan-aceton (7,5;2,5). Visualization is using

annisaldeid-H2SO4, sitroborat, dragendorf, and FeCl3 spray reagent, then viewed

under UV366 and daylight. Extract were diluted to obtain serial concentration of

500 ; 250 ; 125 ; 62,5 ; 31,25 µg/mL and tested the cytotoxic activity using MTT

assay.

Extract of keladi tikus, kemangi, and pepaya are positive contain

alkaloid, phenolic, terpenoid, saponin, and flavonoid. The result of cytotoxic test

show that extract of keladi tikus, kemangi, and pepaya have cytotoxic effect

against MCF-7 cells with IC50 respectively, 17,40 ; 6,95 ; 9,73 µg/mL. it means

that the leaf extracts are a potential source to be a anticancer agent.

Keywords : Typonium flagelliforme, Ocimum santum, Carica papaya, Cytotoxic,

MCF-7