uji aktivitas imunomodulator ekstrak etanol daun …eprints.unwahas.ac.id/1561/1/cover.pdf · 6....

i

UJI AKTIVITAS IMUNOMODULATOR EKSTRAK ETANOL DAUN

KEDONDONG ( Spondias pinnata (L.F) Kurz ) TERHADAP ANTIBODI

IMUNOGLOBULIN G PADA MENCIT BALB/C YANG DIINDUKSI

VAKSIN HEPATITIS B

SKRIPSI

Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat dalam

mencapai derajat Sarjana Farmasi

Program Studi Ilmu Farmasi Fakultas Farmasi

Universitas Wahid Hasyim

Semarang

Oleh:

Rita Febrianti Lidya Putra

135011097

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS WAHID HASYIM

SEMARANG

2018

iii

SURAT PERNYATAAN

Yang bertanda tangan di bawah ini saya :

Nama : Rita Febrianti Lidya Putra

NIM : 135011097

Judul Skripsi : Uji Aktivitas Imunomodulator Ekstrak Etanol Daun Kedondong

( Spondias pinnata (L.F) Kurz ) Terhadap Antibodi

Imunoglobulin G Pada Mencit Balb/C Yang Diinduksi Vaksin

Hepatitis B

Menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat karya yang pernah diajukan

untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu perguruan tinggi dan sepanjang

pengetahuan saya, juga tidak terdapat karya atau pendapat yang pernah ditulis

atau diterbitkan orang lain, kecuali yang secara tertulis diacu dalam naskah ini dan

disebutkan dalam daftar pustaka.

Demikian surat pernyataan ini saya buat untuk dapat digunakan sebagaimana

mestinya.

Semarang, 10 September 2018

Rita Febrianti Lidya Putra

iv

MOTTO

Setiap kesulitan dan setiap kegagalan membawa manfaat yang sepadan (atau

bahkan lebih besar) dari rasa sulit yang harus kita tanggung.

Kesulitan adalah kesempatan untuk meraih hal-hal yang lebih baik dan suatu

batu loncatan untuk sebuah pengalaman yang lebih hebat.

“sesungguhnya sesudah kesulitan ada kemudahan, maka apabila kamu telah

selesai (dari suatu urusan), kerjakanlah dengan sungguh-sungguh dan hanya

kepada Tuhanmulah kamu berharap”

(Q.S. Al – Insyirah: 6-8)

Kupersembahkan untuk :

Almamaterku sebagai wujud terimakasihku

Keluargaku sebagai wujud hormatku

v

KATA PENGANTAR

Assalamu’alaikum Wr. Wb.

Puji syukur senantiasa penulis panjatkan kehadirat Allah SWT yang telah

melimpahkan rahmat dan hidayah-Nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan

penelitian serta penyusunan skripsi yang berjudul “Uji Aktivitas Imunomodulator

Ekstrak Etanol Daun Kedondong (Spondias pinnata (L.F) Kurz) Terhadap

Antibodi Imunoglobulin G Pada Mencit Balb/C Yang Diinduksi Vaksin Hepatitis

B” sebagai syarat dalam mencapai gelar Sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi

Universitas Wahid Hasyim Semarang.

Penulis menyadari bahwa skripsi ini tidak dapat terwujud tanpa bantuan,

bimbingan, dukungan dan dorongan semangat oleh semua pihak, oleh karena itu

dengan segala kerendahan hati penulis mengucapkan banyak terima kasih kepada:

1. Aqnes Budiarti, S.F. M.Sc., Apt., selaku dekan Fakultas Farmasi Universitas

Wahid Hasyim Semarang.

2. Maria Ulfah, S.Farm., M.Sc., Apt., selaku dosen pembimbing pendamping

terimakasih atas segala bimbingan dan perhatian selama penelitian dan

penulisan skripsi ini.

3. Drs. H. Ibrahim Arifin, M.Sc., Apt dan Ririn Lispita W, S.Farm., M.Si. Med.,

Apt selaku dosen penguji atas segala masukan dan koreksinya.

4. Seluruh Dosen Fakultas Farmasi Universitas Wahid Hasyim Semarang atas

ilmu yang diberikan kepada penulis.

5. Laboran Fakultas Farmasi Universitas Wahid Hasyim Semarang.

vi

6. Pimpinan dan staf Laboratorium Parasitologi, Fakultas Kedokteran

Universitas Gadjah Mada Yogyakarta yang telah membantu pelaksanaan uji

aktivitas imunomodulator terhadap antibodi imunoglobulin G.

7. Teman-teman seperjuangan baik dalam praktek maupun dalam penyusunan

skripsi : Penni Dwi Royani, Dempo Awang dan Muhammad Saiful Mu’min

terimakasih atas dukungan dan kerjasamanya selama ini.

8. Teman-teman angkatan 2013 Fakultas Farmasi Universitas Wahid Hasyim

Semarang, terima kasih atas canda tawa dan solidaritas yang luar biasa

sehingga membuat hari-hari semasa kuliah lebih berarti. Semoga sukses untuk

kalian semua.

9. Teman-teman : Ulfa Madu, Lina Sharfina, Erika Indah, Indira Kinasih, Vitri

Sari, Nilam Fauziah, Kartikaningsih dan Dwi Ratna terimakasih atas bantuan

dan kepedulian yang luar biasa.

10. Semua pihak yang telah membantu penyelesaian skripsi ini yang tidak dapat

penulis sebutkan satu-persatu.

Penulis menyadari bahwa skripsi ini masih jauh dari kesempurnaan. Untuk

ini segala kritik dan saran yang membangun sangat penulis harapkan demi

perbaikan di masa mendatang. Semoga karya ini dapat bermanfaat begi semua

pihak.

Wassalamu’alaikum Wr. Wb.

Semarang, 10 September 2018

Penulis

vii

DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN JUDUL ........................................................................................ i

SURAT PERNYATAAN ................................................................................. iii

KATA PENGANTAR ...................................................................................... v

DAFTAR ISI ..................................................................................................... vii

DAFTAR TABEL ............................................................................................. xi

DAFTAR GAMBAR ........................................................................................ xii

DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................... xiv

INTISARI .......................................................................................................... xv

ABSTRACT ....................................................................................................... xvi

BAB I. PENDAHULUAN ................................................................................ 1

A. Latar Belakang Masalah ................................................................. 1

B. Perumusan Masalah ......................................................................... 2

C. Tujuan Penelitian ............................................................................. 3

D. Manfaat Penelitian ........................................................................... 3

E. Tinjauan Pustaka .............................................................................. 3

viii

1. Kedondong (Spondias pinnata (L.F) Kurz) ................................. 3

a. Klasifikasi ................................................................................ 4

b. Morfologi ................................................................................. 4

c. Kandungan Kimia .................................................................... 5

d. Khasiat Tanaman ..................................................................... 6

2. Sistem Imun ................................................................................. 6

a. Sistem Imun Non Spesifik ....................................................... 6

b. Sistem Imun Spesifik ............................................................... 7

3. Antibodi ........................................................................................ 7

4. Imunoglobulin G .......................................................................... 8

5. Imunomodulator ........................................................................... 9

6. ELISA (Enzym Linked Immunosorbent Assay) ............................ 10

7. Uji Kandungan Kimia .................................................................. 11

8. Levamisol ..................................................................................... 11

9. Vaksin Hepatitis B ....................................................................... 12

F. Landasan Teori ................................................................................. 13

G. Hipotesis .......................................................................................... 13

ix

BAB II. METODE PENELITIAN .................................................................. 14

A. Desain Penelitian .............................................................................. 14

B. Variabel Penelitian ........................................................................... 14

C. Bahan dan Alat Penelitian ................................................................ 14

1. Bahan Penelitian ........................................................................... 14

2. Alat Penelitian .............................................................................. 15

D. Jalannya Penelitian .......................................................................... 16

1. Ethical Clearence ......................................................................... 16

2. Determinasi Tanaman .................................................................. 16

3. Pengumulan Bahan ....................................................................... 16

4. Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Kedondong .............................. 17

5. Pengelompokan Hewan Uji .......................................................... 18

6. Kriteria Inklusi dan Ekslusi .......................................................... 19

7. Perlakuan Hewan Uji ................................................................... 20

8. Uji Aktivitas Imunomodulator ..................................................... 22

a. Pembuatan Larutan Uji ............................................................ 22

b. Persiapan Hewan Uji dan Pengambilan Serum Uji ................. 23

x

c. Uji Aktivitas Imunoglobulin G dengan Metode ELISA .......... 23

9. Uji Kandungan Kimia .................................................................. 26

E. Analisis Hasil ................................................................................... 26

BAB III. HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN ............................. 28

A. Determinasi Tanaman ................................................................... 28

B. Pembuatan Serbuk Daun Kedondong ........................................... 28

C. Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Kedondong ............................... 29

D. Persiapan Hewan Uji dan Pengambilan Serum ............................ 30

E. Uji Aktivitas Imunoglobulin G ...................................................... 32

F. Uji Kandungan Kimia ................................................................... 42

BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN ......................................................... 46

A. Kesimpulan ................................................................................... 46

B. Saran ............................................................................................. 46

DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................ 47

LAMPIRAN ....................................................................................................... 52

xi

DAFTAR TABEL

Halaman

Tabel I. Nilai Signifikansi dari Analisa Mann Whitney Hari ke-14 ................. 35

Tabel II. Nilai Signifikansi dari Analisa Mann Whitney Hari ke-35 ................. 37

Tabel III. Nilai Signifikansi dari Analisa Mann Whitney Hari ke-46 ................ 39

Tabel IV. Hasil Uji Kandungan Kimia .............................................................. 42

xii

DAFTAR GAMBAR

Halaman

Gambar 1. Daun Kedondong .............................................................................. 5

Gambar 2. Skema Proses Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Kedondong ........... 18

Gambar 3. Skema Proses Uji Aktivitas Imunoglobulin G dengan Metode

ELISA .............................................................................................. 24

Gambar 4. Serbuk Simplisia Daun Kedondong ................................................. 29

Gambar 5. Ekstrak Etanol Daun Kedondong ..................................................... 30

Gambar 6. Reaksi TMB dengan Metode ELISA ............................................... 33

Gambar 7. Grafik Nilai OD Berbagai Seri Konsentrasi Pada Waktu

Pengambilan Serum Hari ke-14 ....................................................... 34





Gambar 10. Grafik Perbandingan Nilai OD Hasil dari ELISA Reader Pada

Panjang Gelombang 450nm Terhadap Antibodi IgG

xiii

Berdasarkan Waktu Pengambilan Serum ...................................... 41

Gambar 11. Hasil Uji Polifenol .......................................................................... 42

Gambar 12. Reaksi Polifenol dengan FeCl3 ....................................................... 43

Gambar 13. Hasil Uji Alkaloid dengan Pereaksi Dragendroff .......................... 43

Gambar 14. Reaksi Alkaloid dengan Pereaksi Dragendroff .............................. 44

Gambar 15. Hasil Uji Alkaloid dengan Pereaksi Mayer .................................... 44

Gambar 16. Hasil Uji Flavonoid ........................................................................ 45

Gambar 17. Reaksi Flavonoid dengan HCl dan Logam Mg .............................. 45

xiv

DAFTAR LAMPIRAN

Halaman

Lampiran 1. Surat Keterangan Determinasi Tanaman Kedondong ................... 52

Lampiran 2. Surat Keterangan Ethical Clearence ............................................. 54

Lampiran 3. Surat Keterangan Telah Melakukan Penelitian di Laboratorium

Jurusan Biologi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan

Alam Universitas Negeri Semarang .............................................. 55


Biologi Farmasi Fakultas Universitas Wahid Hasyim Semarang . 56


Parasitologi Fakultas Kedokteran Universitas Gadjah Mada

Yogyakarta .................................................................................... 57

Lampiran 6. Data Perhitungan Sampel Uji ........................................................ 58

Lampiran 7. Hasil Analisa SPSS 16 for windows ............................................. 59

xv

INTISARI

Antibodi berperan dalam perlawanan melawan mikroorganisme yang

masuk ke dalam tubuh. Saat tubuh mengalami ketidakseimbangan, tubuh

memerlukan suatu senyawa yang dapat meningkatkan antibodi. Senyawa

flavonoid, polifenol dan alkaloid dapat meningkatkan antibodi. Tujuan penelitian

ini adalah mengetahui aktivitas imunomodulator ekstrak etanol dalam antibodi

IgG pada mencit balb/c yang diinduksi vaksin hepatitis B.

Ekstrak etanol daun kedondong dimaserasi dengan pelarut etanol 96%.

Dosis konsentrasi ekstrak etanol daun kedondong yang digunakan 5, 10 dan 20%

secara p.o selama 46 hari dan vaksinasi dilakukan pada hari ke-7, 28 dan 43.

Kontrol positif yang digunakan levamisol dengan dosis 0,45mg/20gBB secara p.o.

Analisis Optical Density (OD) IgG pada hari ke 14, 35 dan 46 menggunakan uji

statistik Friedman dan Mann Whitney.

Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun kedondong

memiliki aktivitas meningkatkan antibodi IgG pada konsentrasi 5, 10 dan 20%

hari ke 14, 35 dan 46 serta mengandung flavonoid, alkaloid dan polifenol.

Kata kunci : IgG, Optical Density ( OD ), Flavonoid, Alkaloid, Polifenol

xvi

ABSTRACT

Antibodies play a role in resistance against microorganisms that enter the

body. When the body experiences an imbalance, the body needs a compound that

can increase antibodies. Flavonoids, polyphenols and alkaloids can increase

antibodies. The purpose of this study was to determine the immunomodulatory

activity of ethanol extract in IgG antibodies in balb / c mice induced by hepatitis B

vaccine.

Ethanol extract of kedondong leaves was macerated with 96% ethanol.

The doses of the concentration of ethanol extract of kedondong leaves used were

5, 10 and 20% p.o for 46 days and vaccination was carried out on days 7, 28 and

43. Positive control was used by levamisol at dose of 0.45mg / 20gBB by p.o.

Analysis of Optical Density (OD) IgG on days 14, 35 and 46 using Friedman and

Mann Whitney statistical tests.

The results showed that the ethanol extract of kedondong leaves had an

activity of increasing IgG antibodies at concentrations of 5, 10 and 20% on days

14, 35 and 46 and contained flavonoids, alkaloids and polyphenols.

Keywords: IgG, Optical Density (OD), Flavonoids, Alkaloids, Polyphenols

uji aktivitas imunomodulator ekstrak etanol daun …eprints.unwahas.ac.id/1561/1/cover.pdf · 6....

Documents