BAB IPENDAHULUANPemanis adalah aditif makanan fungsional yang memberi rasa manis dalam makanan . Pemanis dapat dibagi menjadi dua kategori, alami dan sintetis pemanis. Pemanis sintetis tidak dapat dimetabolisme dalam tubuh manusia dan tidak memberikan atau sedikit kalori; Oleh karena itu, mereka juga diberi namanpemanis nonnutritive. Karena melekat kalori rendah, pemanis nonnutritive yang bermanfaat untuk obesitas, hipertensi, diabetes, dan karies gigi kontrol. Pengidap diabetes juga bisa menggunakan jenis pemanis ini karena bisa memaniskan makanan tanpa menaikkan kadar gula darah. Tapi, bukan berarti Anda bisa mengonsumsi makanan sesuka hati. Beberapa produk yang mengandung pemanis buatan, seperti yogurt bebas gula, masih bisa mempengaruhi kadar gula karena kandungan karbohidrat dan protein di dalamnyaPermintaan lowcalorie makanan selain minuman ringan menyebabkan peningkatan penggunaan pemanis nonnutritive; sebagai hasilnya, pemanis nonnutritive banyak terkandung dalam makanan. Peningkatan konsumsi pemanis nonnutritive dalam beberapa tahun terakhir telah menjadi kecenderungan global . Kadang-kadang, pemanis yang sangat tinggi dalam makanan bisa terjadi. Karena berlebihan pemanis sintetis bisa berbahaya bagi kesehatan, peraturan pemantauan isi pemanis intens dalam makanan diperlukan untuk melindungi konsumen.Untuk karakterisasi risiko pemanis nonnutritive, Bersama Organisasi Pangan dan Pertanian / Kesehatan Dunia Organisasi Komite Pakar Food Additives (JECFA) telah membentuk acceptable daily intake (ADI) dari 15 mg / kg berat untuk acesulfame potassium (ACS-K), 40 mg / kg berat untuk ASP, 11 mg / kg berat badan untuk natrium CYC, 5 mg / Berat badan kg untuk sakarin (SAC), 2 mg / kg berat badan untuk neotame (NEO), 4 mg / kg berat badan untuk steviol glikosida, dan 15 mg / kg berat badan untuk sucralose (SCL). JECFA telah memberikan Dulcin (Dul) ADI dari "tidak digunakan," yang berarti bahwa harus tidak ada digunakan dalam makanan.Dulsin adalah pemanis sintetik yang memiliki ras manis kira-kira 250 kali dari sukrosa atau gula tebu, yang tidak ditemukan pada produk-produk pemanis alami lainnya dan memiliki rasa yang sangat manis yang cukup bahkan setelah pengenceran 3000 kali lipat..

BAB IIISIA. Pengertian DulcinDulsin adalah pemanis sintetik yang memiliki ras manis kira-kira 250 kali dari sukrosa atau gula tebu, yang tidak ditemukan pada produk-produk pemanis alami lainnya. Dulsin telah diusulkan untuk digunakan sebagai pemanis tiruan. Dulsin ditarik total dari peredaran pada tahun 1954 setelah dilakukan pengetesan dulsin pada hewan dan menampakkan sifat karsinogenik yang dapat memicu munculnya kanker.B. Uraian Bahan (2)Nama Resmi : 4-ETHOXYPHENYLUREASinonim : Dulcin Sucrol; ValzinNama kimia : 4-EthoxyphenylureaRumus Molekul : C9H12O2N2Rumus struktur :

Berat molekul : 180,21Deskripsi : Berwarna atau kristal putih, ataububuk kristal putih, yang tidak berbau dan memiliki rasa yang sangat manis yang cukup bahkan setelah pengenceran 3000 kali lipat.C. Aspek biokimia (2)Percobaan awal menunjukkan p-aminofenol sebagai metabolit dalam urine manusia setelah intake oral 1 g 4-ethoxyphenylurea (Rost &Braun, 1926). Studi terbaru lebih pada kelinci dan tikus, yang diberikan oral atau intragastrik: 4-ethoxyphenylurea sebesar 500 mg / kg berat badan menunjukkan penyerapan cepat ke dalam darah dalam waktu 3 jam dan lambat hilangnya dari tubuh. Tiga persen. diekskresikan dalam urin dalam 48 jam, tidak ada muncul dalam kotoran, sisanya yang dimetabolisme secara perlahan. Kebanyakan jaringan kecuali lemak mengandung ethoxyphenylurea yang menghilang perlahan-lahan (Akagi & Aoki, 1962;. Akagi et al, 1965). Dua puluh tiga persen. 4-ethoxyphenylurea diserap dari perut tikus dalam waktu 1 jam akhir lebih dari 80 persen. diserap dari usus halus tikus dalam waktu 2 jam, mungkin dengan difusi sederhana (Kojima et al., 1966)/Toksisitas akutHewanRute PemberianLD 50 (mg/kg BB)Referensi

Tikus Oral700-1000Tanaka, 1964

Rat MudaOral4900Bekemeier et al., 1958

Rat DewasaOral3200

AnjingOral1000

Dosis 0,4-0,6 g / hari menyebabkan ataksia, muntah dan penurunan berat badan di anjing tapi 0,1 g / hari selama 30 hari tidak ada efek samping. Efek yang sama terlihat pada monyet, kucing, dan kelinci-babi (Rost & Braun, 1926).Studi teratogenikMouse. Kelompok 3 atau 4 tikus betina dikawinkan dan diberi 50 mg / kg berat badan 4-ethoxyphenylurea intragastrik pada hari 8-10 dan 6-7 pasca-konsepsi, 30 mg / kg berat badan pada hari 6-7 pasca-konsepsi dan 10 mg / kg berat badan pada hari 4-5 pasca-konsepsi. Foetuses yang diperiksa pada hari kedelapan belas kehamilan. 50 mg / kg tidak ada efek merugikan pada perkembangan atau kelangsungan hidup janin pada hari 8-10, tetapi pengembangan terbelakang dan kematian janin disebabkan pada hari 6-7. Efek yang terjadi dengan 30 mg / kg dan 10 mg / kg, termasuk di bawah normal, seperti baik pembangunan sebagai terbelakang di hampir semua janin (Tanaka, 1964).Studi jangka panjangTikus. Kelompok 7-10 laki-laki dan 7-9 tikus betina diberi makan 0, 0,01,0,1, 0,25, 0,5 dan 1,0 persen. 4-ethoxyphenylurea dalam diet mereka untuk hingga 2 tahun. Kelangsungan hidup dan pertumbuhan tingkat yang buruk dan secara signifikan mempengaruhi dalam 0,5 dan 1,0 persen. kelompok. Itu bobot hati, ginjal dan limpa yang secara signifikan meningkatkan di 0,5 dan 1,0 persen. tingkat. Histopatologi menunjukkan tumor hati, beberapa jinak beberapa ganas, pada 0,1 persen. dan tingkat yang lebih tinggi.Pembesaran limpa juga terjadi pada 0,1 persen. Hiperplasia dan haemosiderosis. Pigmentasi ginjal proksimal berbelit-belit tubulus dan anemia yang dicatat pada tingkat 0,5 dan 1,0 persen. (Fitzhugh et al., 1951). Dalam eksperimen lain, kelompok 15 tikus muda dan dewasa diberi 0,2 g 4-ethoxyphenylurea per hewan setiap hari selama 22 bulan. Tidak ada tumor ganas yang dicatat (Lettre & wrba, 1955). Dalam eksperimen lain, 20 jantan dan 30 betina tikus diberi 0,2 g 4-ethoxyphenylurea / kg berat badan intragastrik setiap hari selama 13 bulan tanpa efek samping yang dicatat pada berat organ atau insiden tumor; tapi 60 persen. Dari hewan mati selama ini. Tidak ada efek merusak yang tercatat pada kesuburan, litter size dan pengembangan anak anjing. (Bekemeier et al., 1958). Dalam lain kelompok eksperimen 30 tikus diberi makan 0 atau 1,0 persen. 4-ethoxyphenylurea dalam diet selama 21-24 bulan. Lebih dari 75 persen. Dari hewan uji yang dikembangkan tumor (1/3 ganas) dari saluran kemih, 66 persen. juga telah batu dari pelvis ginjal dan kandung kemih. Splenomegali dan haemosiderosis limpa juga mencatat (Griepentrog, 1959).

PengamatanHingga 0,6 g sehari dalam 4 laki-laki dan 7 relawan perempuan dan 0,1 g setiap hari selama 14 hari di 30 relawan tidak menghasilkan efek samping dan tidak ada bukti p-aminofenol dalam urin (Rost & Braun, 1926). Dua kematian, disertai dengan sakit perut, muntah, koma dan cocok, memiliki dilaporkan pada anak-anak setelah asupan 8-10 g. Dosis 20-35 g diambil oleh orang dewasa yang diproduksi pusing, mual, methaemoglobinuria dengan sianosis, hipotensi, dyspnoea, parestesia, dan koroner Gangguan dalam satu kasus (Buhr, 1948).Lima relawan menerima sekitar 0,11 9 4-ethoxyphenylurea setiap hari selama 41 minggu tanpa efek sakit jelas; 1,5 g / hari selama 3 minggu tidak berbahaya bagi manusia, terlepas dari suhu sedikit menurunkan. Penderita diabetes telah menerima 4-ethoxyphenylurea selama 1 tahun tanpa efek merusak (Roest & Braun, 1926).D. Cara Analisis1. Analisis Kualitatifa. Dengan ReagenPreparasi: 100 ml sampel dibuat alkali dengan Larutan NaOH 10%. Dalam kedua kasus, larutan diekstraksi dengan 3 x 50 ml dengan dietil eter dan kemudian dibagi rata ke tiga piring porselen. Pelarut dibiarkan menguap pada suhu kamar dan residu dikeringkan.Analisis DulsinDeniges-Tourrou Test : Lembabkan residu kering pertama dengan asam nitrat dan tambahkan 1 tetes air. Adanya dulsin ditandai dengan terbentuknya endapan berwarna orange merah.Laporola-Mariani Test : Lembabkan residu kering kedua dengan HCl lalu uapkan untuk 5 menit dan tambahkan 1 tetes anisaldehid. Adanya dulsin ditandai dengan terbentuknya endapan orange merah hingga merah darah.Metode Dimethylamino benzaldehid. Residu ketiga ditambahkan 1 tetes dimetil aminobenzaldehid (1 gram dalam 100 ml HCl dan buat 100 ml). Warna merah bata menandakan adanya dulsin.(Ref : A.O.A.C.I 17 th.200 Official Method 95711 Dulcin in food)b. TLC (Thin Layer Cromatography)Prinsip : Sampel diekstraksi dengan etil asetat, the concentrated extract subjected to TLC on silics gel and the spots visualized. Saacharin, Siklamat dan Dulcin dapat dideteksi.Alat : TLC, Lampu UV 254 nm.Reagen : Pelarut n butanol alcohol NH4OH H2O (40 : 4 : 1 : 9) oleh volume. Agen Cromogenik : Bromine dalam CCl4 5%, 0,25% fluoresin dalam dimetil formaldehid-alcohol 1:1, 2%N-I-Napthyl-etylendiamin-2 HCl dalam alcohol.Larutan Standar : 4 mg dulsin dilarutkan dalam 10 ml adilute alcohol (1+1) 5 ul = 2 ug dulsin. Panaskan larutan untuk melarutkan dulsin bila perlu. Silica gelAnalisis : Tandai TLC piring pada bagian pinggir saja, 2,5 cm dari bawah untuk menunjuk garis bercak. Tandai garis bertitik 10 cm di atas garis bercak. Total Spot dari 5 l dari campuran standar dan bagian tes (level 1). Encerkan bagian tes untuk 5 ml dengan amonia-air-alkohol (5: 5: 10) dan spot 5 l (level 2). Tempatkan spot pada 2 cm dan 2 cm dari tepi. Spot 1 l pada satu waktu dan menggunakan blower udara hangat ke tempat yang kering antara aplikasi untuk membatasi diameter spot. Gunakan teknik yang sama untuk melihat bagian pengujian dan standar. Tempatkan piring di dalam tangki dan mengembangkan 10 jalur cm (sekitar saya macet). Keringkan piring di lemari asap sampai lapisan tidak lagi tembus sekitar 10 menit. Lihat di bawah gelombang pendek UV 254 nm. Semprotkan chromogenik piring 3 pda Hingga Latar berwarna merah muda higga kuning Cerah. Rf Dulcin adalah 0,7 dan spot berwarna coklat-merah muda atau biru.2. Analisis Kuantitatifa. Spektrofotometri UVPrinsip : Dulsi diekstraksi dari sampel dalam kondisi basa dengan dietileter. Setelah residu dipisahkan dari air, ditambahakan etil asetat.Absorbansi dibaca pada panjang gelombang 294 nm.Reagen : Dietyl eter, Etyl acetat, NaOH 10%Analisis : Pindahkan 50 g sampel kedalam 250 ml separatory funnel dan buat dalam kondisi alkaline dengan NaOH 10 %. Ekstraksi dengan 100 ml dietil eter lalu kocok beberapa menit. Cuci campuran dengan 10 ml air dan buang lapisan air. Uapkan pelarut dan keringkan pada suhu 1100c selama 30 menit. Larutkan residu dalam 50 ml etyl asetat dan pindahkan kedalam labu tentu ukur 100 ml dan cukupkan volumenya. Buat pengenceran bila perlu. Baca absorbansi pda Panjang geombang 294 nm terhadap diredistilasi etyl asetat. Siapkan grafik standar dulcin dalam etyl asetat dan hitung jumlah dulcin dalam sampel.(Ref : A.O.A.C 17 TH EDN.2000. Official Method 957.11 Dulcin in Food Quantitative Method / Manual Methods of analysis for adulterant and contaminants in Foods I.C.M.R 1990 page 51).b. HPLCPersiapan larutan standarLarutan saham GA dibuat dengan melarutkan 0,05 g dari pemanis murni dalam 40 ml air deionisasi pada 800 C dan encerkan dengan 50 mL air deionisasi. Dilakukan pengenceran dengan berbagai konsentrasi 0.05-10 g / mL menggunakan air deionisasi. Larutan disimpan pada 40C dan dibawa ke suhu kamar sebelum digunakan.Persiapan sampelUntuk sampel minuman, 5-g sampel dilarutkan dalam 30 ml air deionisasi dan hilangkan gasnya dalam bath ultrasonik selama 10 menit. Setelah pendinginan ke suhu kamar, air deionisasi ditambahkan volumetrically 50 mL. Sampel larutan disaring melalui 0,22 mm jarum suntik penyaring sebelum disuntikkan ke HPLC. Untuk sampel makanan padat, sampel homogen 5-g dilarutkan dalam 30 ml air deionisasi dan ultrasonicated dalam bath ultrasonik selama 10 menit, dan diikuti dengan sentrifugasi pada 2100 g selama 10 menit. Supernatan dipindahkan ke dalam labu volumetrik 50 ml. Endapan dicuci dengan 10 ml air deionisasi dan ekstraksi berulang. Supernatan dikumpulkan ke dalam labu ukur 50-mL sama, dan dicukupkan volume hingga 50 ml dengan air deionisasi. Sampel Larutan disaring melalui 0,22 mm saringan jarum suntik sebelum menjadi disuntikkan ke HPLC.Kromatografi dan analisis spektrometri massaMobile fase terdiri dari air deionisasi yang mengandung 10 mM amonium asetat dalam saluran A, dan metanol yang mengandung 10 mM amonium asetat dalam saluran B. Suhu kolom ditetapkan pada 350C. Laju aliran fase gerak adalah ditetapkan pada 1,0 mL / menit dan volume injeksi adalah 30 mL.Massa Analisis dilakukan dengan menggunakan metode ESI dengan polaritas beralih pada QTRAP AB SCIEX 4000 tiga tandem quadrupole spektrometer massa. Operasi missal parameter yang ditetapkan sebagai berikut: gas tirai (CUR), 10 psi; gas tabrakan (CAD), tinggi; ionspray tegangan (IS), 4500 V; Suhu (TEM), 5000C; gas nebulizer (GS1), 50 psi; turbo gas 2 (GS2), 50 psi; waktu tinggal, 50 milidetik; jenis scan, Mode MRM.DAFTAR PUSTAKA1. Shiang Chang, Chui.2013. Detection of 10 sweeteners in various foods by liquid chromatography/tandem mass spectrometry. Public Health Bureau, Pingtung County Government, Pingtung, Taiwan, ROC.2. Anonim.http://www.inchem.org/documents/jecfa/jecmono/v44aje37.htmDiakses pada tanggal 24 Maret 2015.3. Manual of Methods Of Analysis Of Foods: Food Additives. 2012. Food Safety and Standard Authority of India Ministry Of Health an Family Welfare Government of India. New Delhi.4. A.O.A.C 17 TH EDN.2000. Official Method 957.11 Dulcin in Food Quantitative Method / Manual Methods of analysis for adulterant and contaminants in Foods I.C.M.R

Tugas Individu

ANALISIS PEMANIS DULCIN DALAM MAKANAN DAN MINUMAN

Disusun oleh :

NAMA : NUR ISLAMIA ZUBAIDAHNIM: N111 12 357KELAS: RABU SIANG

PROGRAM STUDI S1FAKULTAS FARMASIUNIVERSITAS HASANUDDINMAKASSAR 2015