JENIS DAN PENANGANAN SAMPEL SEDIAAN

PATOLOGI ANATOMI

dr. Udadi Sadhana, MKes, SpPA

Bagian Patologi Anatomi FK UNDIP Semarang

CME FK UNDIP

PENDAHULUAN• Diagnosis histopatologi dan sitopatologi

mrp hasil interpretasi pemeriksaan histopatologi dan sitopatologi, sampai saat ini msh mrp “baku emas” bagi diagnosis sebagian besar penyakit.

• Ketepatan diagnosis bergantung kpd :1. Penanganan dan pengolahan bahan

pemeriksaan yg baik sehingga dpt diinterpretasikan serta dapat

dikembangkan lebih lanjut utk pemeriksaan molekuler dan genetik.2. Kompetensi Dokter Spesialis PA.

• Penanganan bahan pemeriksaan yg baik dan benar mrp tugas bersama antara RS, klinisi dan Sentra Diagnosis PA.

• Mutu hasil proses jaringan sangat erat hubungannya dengan penanganan bahan pemeriksaan yg benar sejak awal jaringan/sel dan cairan dipisahkan dari tubuh.

Fase penanganan bahan pemeriksaan PA

FASE PRA-ANALITIK• Dilakukan di kamar tindakan atau klinik.• Kegiatan utamanya melakukan pencatatan

data pasien dan preservasi jaringan/sel pasca operasi/biopsi.

FASE ANALITIK• Dilakukan setelah jaringan/sel tiba di

Sentra Diagnostik PA (t.a. pencatatan data bahan pemeriksaan dan pasien pengolahan bahan pemeriksaan.

HAKEKAT PENGOLAHANBAHAN PEMERIKSAAN

• Penilaian thd gambar yg terdpt pd preparat histopatologi dan sitopatologi.

• Tujuan: agar gambar yg terjadi pd preparat benar-benar mencerminkan apa yg seharusnya tergambar pd bahan pemeriksaan.

• Tidak mengubah atau menghilangkan apa yg seharusnya ada pd bahan pemeriksaan.

• Bahan pemeriksaan berasal dari tubuh pasien yg msh hidup ada kemungkinan terjadi perubahan diupayakan agar perubahan terjadi sekecil mungkin shg tdk mempengaruhi penilaian.

FASE PRE-ANALITIKA. KELENGKAPAN IDENTITAS PASIEN DAN

KETERANGAN KLINIK YG RELEVAN1. Administrasi

– Identitas pasien : nama, umur, jenis kelamin, alamat, suku, agama, pekerjaan.

– Keterangan klinik : lokasi dan ukuran lesi, durasi, keluhan lain yg berhub, keterangan penyakit/pemeriksaan PA terdahulu, dan penyakit yg mudah menular atau perlu penanganan khusus spt AIDS, riwayat OBSGIN.

– Hasil pemeriksaan : Data laboratorium klinik, radiologi yg berkaitan.

– Status ekonomi : asuransi, kelas rawat, dll

2. Cara mendapatkan bahan– Operasi, insisi, eksisi, kerokan, sikatan, bilasan,

apusan, pungsi biopsi aspirasi jarum halus (FNAB), nekropsi.

3. Lokasi bahan/organ– Jenis jaringan tertentu– Pemeriksaan radikalitas operasi– Batas sayatan dan tanda khusus

(mis. memberi benang atau gambar jaringan dengan keterangannya)

4. Kondisi lesi– Bentuk, benjolan, ukuran, konsistensi, terfiksir

atau tidak, warna dan tampilan jaringan saat operasi.

B. PENANGANAN JARINGAN dan CAIRAN/APUSAN PASCA BIOPSI/OPERASI

I. PENANGANAN JARINGAN1. Persiapkan wadah sesuai dgn jaringan yg disimpan.2. Isi wadah dgn formalin 10% bufer dengan volume

minimal 5 kali volume jaringan.3. Masukan sesegera mungkin jaringan segar ke dalam wadah formalin (< 30 menit)4. Jika jaringan berukuran besar (mis mastektomi)

lakukan irisan sejajar berjarak ± 1 cm agar seluruh bagian jaringan terpapar formalin.

5. Beri label identitas pasien dan jenis jaringan yg diambil, agar tidak tertukar dan segera kirim ke Sentra Diagnostik PA disertai formulir pengantar

yg telah diisi lengkap.

6. FiksasiMrp langkah yg sangat penting dan dilakukan dgn sempurna menggunakan zat fiksator yg baik krn sangat mempengaruhi langkah selanjutnya dlm pengolahan jaringan.Tujuan :a. Mencegah terjadinya autolysis dan

pengaruh bakteri.b. Mempertahankan bentuk dan isi jaringan

mendekati keadaan sebelum difiksasi.c. Memungkinkan proses pengolahan

jaringan selanjutnya berjalan dgn baik.d. Mempertahankan komponen-komponen

jaringan atau sel.

• Volume zat fiksasi : – 1 : 5 – 10 utk jaringan.

• Cara pembuatan zat fiksasi dgn formalin berdasar fosfat :– Larutan formaldehide 40% 100cc– Aquadest 900 cc– Sodium dihidrogen fosfat monohidrat 4.0 g– Disodium hidrogen fosfat anhidrat 6.5 g

II. PENANGANAN CAIRAN/APUSAN

1. Bahan apusan diapuskan pada gelas obyek dan segera dimasukkan

dalam cairan fiksasi alkohol 96% minimal selama 30 menit dikeringkan dan dikirim ke Sentra Diagnostik PA.2. Bahan cairan dpt segera dikirim ke

Sentra Diagnostik PA tanpa fiksasi atau dimasukkan dalam cairan

fiksasi alkohol 50% (volume 1 : 1)

3. Bahan apusan sitologi aspirasi dpt dibiarkan kering dalam

suhu kamar (utk pulasan Giemsa) dikirim ke Sentra Diagnostik PA (dgn keterangan jelas).

4. Bahan sputum segera dikirim di dalam wadah tertutup tanpa fiksasi.

FASE ANALITIKA. Tahap penerimaan spesimen

– Kelengkapan administrasi (identitas pasien)

– Teknisi kamar potong– Fiksasi yg benar

B. Tahap pemotongan dan pencatatan makroskopik– Mengambil bagian jaringan

yg representatif.

Pemotongan makroskopik

Fiksasi buffer formalin

Metode prosesing jaringan1. Penyempurnaan fiksasi : formalin 10% 0-3

jam

2. Dehidrasi : Alkohol 70% ½ jam

Alkohol 95% ½ jamAlkohol 100% ½ jamAlkohol 100% 1 jamAlkohol 100% 1 jamAlkohol 100% 1 jamAlkohol 100%/xylol ½ jam

3. Cleaning : Xylol 1 jamXylol 2 jam

4. Impregnasi : Parafin 2 ½ jam

Parafin 4 jam

Pemrosesan jaringan

C. Pembuatan blok parafin– Orientasi jaringan dgn benar

shg akan diperoleh potongan sediaan yg representatif.

– Cara peletakan jaringan permukaan/mukosa.

– Embedding :• Seluruh keping jaringan berada di

permukaan, shg muncul scr utuh dlm pemotongan dgn mikrotom.

• Jangan lupa memeriksa apakah nomor pd blok parafin masih jelas sblm dipotong.

Embedding

Pemotongan dengan mikrotom

Pita potongan tipis blok paraffin di floating bath

Rehidrasi diperlukan karena pewarnaan yg dipakai adalah

berbasis air

Ringkasan langkah pewarnaan

METODE PROSESING MANUAL/JALAN TANGAN

1. FORMALIN 20 menit 2. ALKOHOL I 20 menit 3. ALKOHOL II 20 menit 4. ALKOHOL III 20 menit 5. ALKOHOL IV 20 menit 6. XYLOL I 20 menit 7. XYLOL II 20 menit 8. XYLOL III 20 menit 9. PARAFIN 30 menit10. PARAFIN 30 menit

Dengan pemanasan 45oC, lama tiap tahap cukup 5’. (Bancroft)

REAGEN YG DIPAKAI

• Formalin 37%• Alkohol 96%• Xylol• Lilin histoplast

Referensi

Pedoman penanganan bahan pemeriksaan untuk histopatologi (IAPI)

Terima kasih