Teknis AseptisBy. Isma Kurniatanty, M.Si

Teknik Aseptis

Tujuan steril dan mencegah kontaminasi

Kontaminasi? Kontaminan ? Kultur murni?

Sterilisasi

suatu usaha untuk membebaskan bahan-bahan dan alat-alat dari semua bentuk kehidupan mikrobia

Cara sterilisasi: mekanik, fisik, kimia,

Sterilisasi secara mekanik Dengan filtrasi Digunakan untuk bahan-bahan

yang tidak tahan panas Misalnya : serum darah,

antibiotika, gula sederhana Berkefeld filter Seitz filter

Sterilisasi Fisik

Alat dan bahan tahan panas Insenerasi : > 5000C Perebusan : 1000C Autoclave : 1210C, tekanan 1 atm,

15 menit Pemanasan kering Pasteurisasi (batch method & flash

method)

Prinsip Kerja Autoclave

Autoclave

ManualDigital

Sterilisasi secara kimia

Bahan kimia yang berupa gas: etilen oksida dan formaldehid, senyawa kimia yang bersifat cair: glutaraldehid

Teknik sterilisasi secara kimia dapat dilakuakan dengan bahan yang mempunyai daya oksidasi seperti ozon dan hidrogen peroksida.

Media Pertumbuhan

Nutrisi isolasi, pengujian sifat-sifat fisiologi

dan perhitungan jumlah mikrobia dalam suatu bahan

Media untuk bakteri ≠ media untuk jamur

Syarat Media

mengandung zat makanan yang mudah digunakan oleh mikrobia

tidak mengandung zat penghambat pertumbuhan

mempunyai tekanan osmose dan tegangan permukaan

pH sesuai dengan kondisi mikrobia dalam keadaan steril.

Macam Media

Berdasarkan kandungan kimianya: Anorganik medium organik medium sintetik medium non sintetikBerdasarkan konsistensinya: Padat Semi padat Cair

Media Pertumbuhan

Teknik Isolasi

Isolasi ? memindahkan mikrobia tersebut

dari lingkungannya di alam dan menumbuhkan sebagai biakan murni dalam medium buatan.

Bagaimana caranya?

Cara-cara Isolasi

Teknik Goresan (streak plate method)

Teknik taburan (pour plate method)

Teknik Sebaran ( spread method)

Teknik Goresan (streak plate method)

Menghasilkan koloni terpisah Media agar digores dg ose yg

berisi koloni bakteri/ jamur

Teknik taburan (pour plate method) Pengenceran bertingkat Inokulum diteteskan di petridis

dituang media Koloni terpisah

Pengenceran Bertingkat

Teknik Sebaran ( spread method) Pengenceran Kultur disebarkan pada media agar

plate steril penyebaran dengan alat penyebar yang telah disterilkan dengan alkohol dan dibakar