SKRIPSI

NURUL AMALIA AZHARI

UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI FRAKSI ETIL

ASETAT UMBI Eleutherinepalmifolia L

TERHADAP BAKTERI Salmonella typhi

DENGAN METODE DIFUSI CAKRAM

PROGRAM STUDI FARMASI

FAKULTAS ILMU KESEHATAN

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG

2019

x

KATA PENGANTAR

Puji syukur penulis panjatkan kehadirat Allah subhanahu wa ta’ala karena

berkat rahmat dan hidayah-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi

dengan tepat waktu, yang berjudul “Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi Etil Asetat

Umbi Eleutherine palmifolia L. Terhadap Bakteri Salmonella typhi Dengan

Metode Difusi Cakram” untuk mencapai gelar Sarjana Farmasi pada Program

Studi Farmasi Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Muhammadiyah Malang.

Didalam pengerjaan skripsi ini tentunya telah melibatkan banyak pihak

yang sangat membantu dalam banyak hal. Oleh sebab itu, penulis ingin

menyampaikan rasa terima kasih yang sedalam-dalamnya kepada :

1) Allah SWT yang telah memberikan rahmat-Nya berupa kesehatan,

kesempatan dan kemudahan dalam penyusunan dan penyelesaian skripsi ini.

2) Ibu Siti Rofida, S.Si., M.Farm., Apt selaku dosen pembimbing I yang

dengan penuh kesabaran memberikan pengertian, bimbingan, dukungan

serta tidak pernah berhenti untuk mengingatkan ketika penulis mulai

menjauh dari penyelesain skripsi ini.

3) Bapak Ahmad Shobrun Jamil, S.Si., M.P. Selaku dosen pembimbing II yang

telah memberikan arahan, dukungan serta bimbingan kepada penulis agar

dapat menyelesaikan skripsi ini dengan tepat waktu.

4) Ibu Enggrid Juni Astuti, S.Farm., M.Farm., Apt. dan Ibu Amaliyah Dina

Anggraeni, M.Farm.,Apt selaku tim penguji yang telah memberikan saran

untuk meyempurnakan skripsi ini.

5) Bapak Faqih Ruhyanudin, M.Kep., Sp.Kep MB. selaku Dekan Fakultas

Ilmu Kesehatan yang telah memberikan kesempatan penulis menyelesaikan

skripsi ini.

6) Ibu Dian Ermawati, M.Farm., Apt. selaku Ketua Program Studi Farmasi

yang telah membantu dalam kelancaran pengerjaan skripsi penulis.

7) Ibu Raditya Weka Nugraheni, S.Farm, Apt selaku ketua Laboratorium

Farmasi yang telah memberikan fasilitas kepada penulis sehingga penulis

dapat menyelesaikan penelitian di Laboratorium Farmasi.

8) Mbak Susi, Mbak Evi, Mas Dani, Mas Ferdi dan Mbak serta Pak Joko

selaku laboran yang telah membantu penulis dalam melakukan penelitian

selama ini.

9) dr. Anung Putri Mahika, M.Si selaku Kepala Laboratorium Biomedik PPD

UMM yangtelah mengijinkan penulis melakukan penelitian di Laboratium

tersebut.

10) Seluruh dosen Farmasi dan dosen Fakultas Kedokteran UMM yang telah

membimbing dan memberikan ilmu pengetahuan kepada penulis

11) Kedua orang tua tercinta, kedua adik tersayang penulis dan seluruh keluarga

besar yang telah memberikan dukungan, semangat dan doa yang tiada henti

untuk memudahkan penyelesaian dan pencapaian selama ini.

xi

12) Kiki Ayu Apsari yang selama ini telah menemani penulis dalam keadaan

apapun yang tetap sabar menghadapi segala tingkah laku penulis dan selalu

memberikan semangat dan nasehat yang luar biasa.

13) Abdul Haris R. Pangulu terima kasih atas segala dukungan, nasehat, saran

dan perhatian yang selama ini diberikan kepada penulis dan juga terima

kasih atas kesabarannya untuk menjadi pendengar yang baik selama penulis

menyelesaikan skripsi ini.

14) Hening Ancasa Galih dan Firdha Julianty Sukma terima kasih sudah

menjadi adik-adik terbaik penulis selama ini, tetap menjadi yang terbaik dan

selalu berusaha jangan mudah menyerah.

15) Maghfira Varra Raudya I. dan Indah Tartila Wulandari sebagai teman

berjuang selama menyelesaikan skripsi ini terima kasih atas segala bantuan

dan dukungannya.

16) Fauz Aulia El Maghfiroh dan Fitri’ Anni Hidayah teman seperjuangan

selama awal di bem hingga sekarang, terima kasih sudah sering menjadi

pendengar yang baik untuk penulis.

17) Bu Wulan, Bu Lusi dan Bu Nanik sebagai Tim Poliklinik yang beberapa

saat kebelakang sebagai keluarga baru penulis terima kasih atas ilmu dan

perhatiannya selama ini.

18) Semua teman-teman skripsi bawang dayak yang sering penulis merepotkan

mereka, terima kasih untuk kerja samanya dan dukungan satu sama lain

selama ini.

19) Semua personil PharmacyAwesome yang tidak bisa disebutkan satu per satu

terima kasih sudah menemani penulis dan memberikan warna selama

menimba ilmu di kota ini.

20) Semua anggota Bem bonsai 2015, BEM FIKES periode 2016/2017 hingga

2017/2018, Timapkes periode 2016/2017 hingga 2017/2018 serta teman-

teman Forisma terima kasih atas kesempatan yang telah diberikan selama ini

atas segala pembelajaran dan pengorbanan yang sudah penulis dapatkan

disana.

21) Semua pihak yang tidak dapat penulis sebutkan satu per satu yang telah

memberikan dukungan secara langsung maupun tidak langsung

Dalam penulisan skripsi ini penulis menyadari bahwa skripsi ini jauh dari

kesempurnaan. Maka, penulis akan menerima segala bentuk kritik dan saran yang

membangun. Semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi semua pihak, khususnya

bagi penulis dan para pembaca pada bidang kefarmasian.

Malang, Juli 2019

Penulis

Nurul Amalia Azhari

xii

DAFTAR ISI

Halaman

Lembar Pengesahan ................................................................................................ ii

Lembar Pengujian .................................................................................................. iii

KATA PENGANTAR ........................................................................................... iv

RINGKASAN ........................................................................................................ vi

ABSTRACT ......................................................................................................... viii

ABSTRAK ............................................................................................................. ix

DAFTAR ISI ........................................................................................................... x

DAFTAR GAMBAR ........................................................................................... xiii

DAFTAR LAMPIRAN ........................................................................................ xiv

DAFTAR SINGKATAN ...................................................................................... xv

BAB IPENDAHULUAN ........................................................................................ 1

1.1 Latar Belakang .............................................................................................. 1

1.2 Rumusan Masalah ......................................................................................... 3

1.3Tujuan Penelitian ............................................................................................ 4

1.4Manfaat ........................................................................................................... 4

BAB IITINJAUAN PUSTAKA .............................................................................. 5

2.1 Deskripsi Tumbuhan Eleutherine palmifolia ................................................ 5

2.1.1 Klasifikasi Umbi Eleutherine palmifolia L. ............................................... 5

2.1.2 Morfologi Tumbuhan ................................................................................. 5

2.1.3 Kandungan Kimia ....................................................................................... 6

2.1.4 Manfaat Tanaman ....................................................................................... 6

2.2 Deskripsi Bakteri Salmonella typhi ............................................................... 7

2.2.1 Klasifikasi dan Morfologi .......................................................................... 7

2.2.2 Morfologi Bakteri Salmonella typhi ........................................................... 8

2.2.3 Patogenitas .................................................................................................. 8

2.2.4 Tinjauan Identifikasi Pewarnaan Gram pada Bakteri S.typhi ..................... 9

2.3 Tinjauan Infeksi Bakteri Salmonella typhi .................................................... 9

2.3.1 Terapi Demam Tifoid ............................................................................... 10

2.4 Mekanisme Kerja Antibakteri ..................................................................... 10

2.5 Mekanisme Kerja Kloramfenikol ................................................................ 11

xiii

2.6 Tinjauan Kandungan Senyawa Antibakteri Tanaman ................................. 12

2.6.1 Steroid ...................................................................................................... 12

2.6.2 Alkaloida .................................................................................................. 13

2.6.3 Flavonoid .................................................................................................. 13

2.6.4 Fenol ......................................................................................................... 14

2.6.5 Tanin ......................................................................................................... 14

2.7 Tinjauan Uji Kepekaan Terhadap Aktivitas Antimikroba Secara In Vitro . 14

2.7.1 Metode Difusi Cakram ............................................................................. 15

2.7.2 Metode Dilusi ........................................................................................... 15

2.8 Kategori Diameter Zona Hambat ................................................................ 16

2.9 Tinjauan Ekstraksi ....................................................................................... 17

2.9.1Tinjauan Macam-Macam Ekstraksi ........................................................... 17

2.10 Tinjauan Tentang Pelarut .......................................................................... 19

2.11 Tinjauan Kromatigrafi Lapis Tipis (KLT) ................................................ 20

2.12Skrinning Fitokimia .................................................................................... 21

2.12.1Uji Alkaloida ........................................................................................... 21

2.12.2Uji Tanin dan Polifenol ........................................................................... 22

2.12.3 Uji Saponin ............................................................................................. 22

2.12.4Uji Flavonoid ........................................................................................... 23

BAB IIIKERANGKA KONSEPTUAL ................................................................ 23

3.2 Kerangka Konseptual .................................................................................. 24

BAB IVMETODE PENELITIAN ........................................................................ 26

4.1 Jenis Penelitian ............................................................................................ 26

4.2 Lokasi Penelitian ......................................................................................... 26

4.3 Bahan Penelitian .......................................................................................... 26

4.4 Instrumen Penelitian .................................................................................... 26

4.5 Variabel Penelitian ...................................................................................... 27

4.5.1 Variabel Bebas ......................................................................................... 27

4.5.2 Variabel Terikat ........................................................................................ 27

4.6 Metode Penelitian ........................................................................................ 27

4.6.1 Rancangan Penelitian ............................................................................... 28

4.6.2 Kerangka Operasional .............................................................................. 28

4.7 Prosedur Kerja ............................................................................................. 29

4.7.1 Penyiapan Sterilisasi Alat ......................................................................... 29

xiv

4.7.2 Preparasi Sampel Simplisia ...................................................................... 29

4.7.3 Proses Ekstraksi Bahan Uji dengan Pelarut Etil Asetat............................ 30

4.7.4 Identifikasi Golongan Senyawa dengan Teknik KLT .............................. 33

4.7.5 Pembuatan Larutan Uji ............................................................................. 34

4.7.6 Pembuatan Media ..................................................................................... 35

4.7.7 Preparasi Bakteri ...................................................................................... 36

4.7.8 Pewarnaan Bakteri Uji .............................................................................. 36

4.8 Tahap Pengujian .......................................................................................... 37

4.8.1 Pengujian Penghambat Pertumbuhan Bakteri dengan Metode Difusi

Cakram .............................................................................................................. 37

4.8.2 Bagan Alir Pengujian Penghambat Pertumbuhan Bakteri dengan Metode

Difusi Cakram................................................................................................... 39

4.8.3Analisis Data ............................................................................................. 39

BAB VHASIL PENELITIAN .............................................................................. 40

5.1 Determinasi Umbi Eleutherine palmifolia .................................................. 40

5.2 Pengujian Uji Distribusi Serbuk Simplisia Umbi Eleutherine palmifolia .. 40

5.3 Pengukuran Kandungan Lengas (MC) Serbuk Umbi E.palmifola .............. 41

5.4 Ekstrak Kental Fraksi Etil Asetat Umbi Eleutherine palmifolia ................. 42

5.5 Uji KLT Kandungan Senyawa Fraksi Etil Asetat Umbi Eleutherine

palmifolia ........................................................................................................... 42

5.5.1 Identifikasi Senyawa Golongan Terpenoid ............................................. 43

5.5.3 Identifikasi Senyawa Golongan Polifenol ............................................... 45

5.5.4 Identifikasi Senyawa Golongan Antrakuinon .......................................... 45

5.5.5 Identifikasi Senyawa Golongan Flavonoid .............................................. 46

5.6 Pewarnaan Bakteri Salmonella typhi ........................................................... 47

5.7 Pengujian Aktivitas Antibakteri .................................................................. 47

BAB VIPEMBAHASAN ...................................................................................... 50

BAB VIIKESIMPULAN DAN SARAN .............................................................. 55

7.1 Kesimpulan .................................................................................................. 55

7.2 Saran ............................................................................................................ 55

DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 56

xv

DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

Gambar 2.1 Umbi E.palmifolia L. ........................................................................ 6

Gambar 2.2Bakteri Salmonella typhi. ................................................................... 7

Gambar 2.5 Struktur Kimia Kloramfenikol .......................................................... 11

Gambar 2.9Struktur Kimia Etil Asetat .................................................................. 18

Gambar 3.1Bagan AlirKerangkaKonseptual ........................................................ 23

Gambar 4.6 Bagan AlirKerangkaOperasional ...................................................... 28

Gambar 4.7 Bagan AlirPembuatan Fraksi Etil Asetat Tahap Pertama ................. 31

Gambar 4.7 Bagan AlirPembuatan Fraksi Etil Asetat Tahap Kedua .................... 33

Gambar 4.8 Bagan Alir Pengujian Antibakteri ..................................................... 39

Gambar 5.1Umbi E.palmifolia dan Serbuk Simplisia Umbi E.palmifolia ............ 41

Gambar 5.2 Fraksi Etil Asetat Umbi E.palmifolia ................................................ 42

Gambar 5.3Optimasi Pelarut ................................................................................. 43

Gambar 5.4 Optimasi Pelarut ................................................................................ 44

Gambar 5.5Hasil Identifikasi Senyawa Terpenoid ............................................... 45

Gambar 5.6 Hasil Identifikasi Senyawa Alkaloida ............................................... 45

Gambar 5.7 Hasil Identifikasi Senyawa Polifenol ................................................ 46

Gambar 5.8 Hasil Identifikasi Senyawa Antrakuinon........................................... 47

Gambar 5.9Hasil Identifikasi Senyawa Flavonoid ............................................... 47

Gambar 5.10 Pewarnaan Peremajaan Bakteri S.typhi ........................................... 48

Gambar 5.11 Pewarnaan Peremajaan Bakteri S.typhiSetelah Pengujian .............. 49

Gambar 5.12Hasil Pengujian Difusi Cakram ........................................................ 49

Gambar 5.13Diagram Rata-rata Diameter Zona Hambat ..................................... 51

xvi

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

Lampiran 1 Daftar Riwayat Hidup.................................................................... 59

Lampiran 2 Surat Pernyataan Tugas Akhir. ...................................................... 60

Lampiran3 Determinasi Tanaman Eleutherine palmifolia L. .......................... 61

Lampiran4 Surat Keterangan Penelitian. ......................................................... 62

Lampiran 5 Laporan Hasil Uji Bakteri ............................................................. 63

Lampiran6 Perhitungan .................................................................................... 63

Lampiran7 Prosedur Penelitian ........................................................................ 6

56

DAFTAR PUSTAKA

Budifaka, M. J. (2014). Profil Fitokimia Aktivitas Antibakteri Tanaman Obat di

Sulawesi Tenggara terhadap Bakteri Salmonella typhi YCTC. Kendari:

Universitas Halu Oleo.

Cita, Y. P. (2011). Bakteri Salmonella typhidan Demam Tifoid.Jurnal Kesehatan

Masyarakat, Vol. 6 No. (1), 42.

Crump, J. A., Luby, S. P., Mintz, E. D. (2004). The global burden of typhoid

fever.Bull WHO, 82: 346-53.

Darsana, I.G.O., Nengah, K.B., Hapsari, M. (2012). Potensi daun Binahong

(Anredera cordifolia (Tenore) Steenis) dalam Menghambat Pertumbuhan

Bakteri Escherichia coli secara In Vitro. Indonesia Medicus Veterinus

Vol, (3): 337-351.

Dharmajono.(2001). Limabelas Penyakit Menular dari Binatang ke Manusia.

Jakarta: Milenia Populer.

Delost, M. D. (2015).Introduction to Diagnostic Microbiology for The

Laboratory Sciences. Burlington: Jones and Bartlett Learning pg: 54.

212-213

Endarini, L. H. (2016). Farmakognosi dan Fitokimia. Jakarta: Kementerian

Kesehatan Republik Indonesia.

Galingging, R. Y. (2009). Bawang Dayak (Eleutherine palmifolia) sebagai

Tanaman Obat Multifungsi.Diakses pada tanggal 12 Februari

2019.http://kalteng.litbang.deptan.go.id.

Gunawan, G. S. (2007). Farmakologi dan Terapi edisi 5. Jakarta: Departemen

Farmakologi dan Terapi Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia.

Hafsan, Sukmawaty, E. Dan Masri, M. (2015). Penuntun Praktikum Mikrobiologi.

Makassar: Universitas Islam Negeri Alauddin.

Hagerman , A. E. (2002). Condensed Tannin Structural Chemistry.Departement

of Chemistry and Biochemistry, Miami University: Oxford.

Hendayana, S. (2006).Kimia Pemisahan Metode Kromatografi dan

Elektroforesis Modern. Bandung: PT Remaja Rosakarya.

Irianto, K. (2014). Epidemiologi Penyakit Menular dan Tidak Menular

Panduan Klinis. Bandung: Alfabeta.

Judith, A., Aberg, M. (2016).Drug Information Handbook. Ohio: Lexi-Comp,

Inc.

Lalitha, M.K. (2004). Manual on Antimicrobial Susceptibility Testing.

Departement of Microbiology: Vellore,Tamil Nadu.

Mangan, Y. (2005). Cara Bijak Menaklukan Kanker. Jakarta: Agromedia

Pustaka.

57

Marliana, S. D., Venty, S., and Suyono. (2005). Skrinning Fitokimia dan Analisis

Kromatografi Lapis Tipis Komponen Kimia Buah Labu Siam (Sechium

edule Jacq Swartz) dalam Ekstrak Etanol, Biofarmasi 3, p. 26-31.

Mercy, N., Jemmy, A., Vanda, S. (2013). Pengaruh antibakteri Ekstrak Kulit

Batang Matoa (Pometia pinnata) terhadap Bakteri Staphylococcus aureus

secara In Vitro. Manado: Jurusan Kimia FMIPA Unsrat.

Mukhriani., Paturusi, A, A., Nashir, A. (2015). Fraksinasi Senyawa Antimikroba

Daun Anak Dara (Croton oblongus Burm f.) Jurnal Farmasi Fakultas

Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Vol.3 No.4. Universitas Islam Negeri

Alauddin Makassar.

Mulhollan, A. (2005). Bacterial Infection- A Major Cause of Death Among

Children in Africa. Jurnal Medication: New England.

Munazah, H. (2010). Pengaruh Air Rebusan Mengkudu terhadap Hambat

Pertumbuhan Salmonella paratyphi A secara InVitro. Politeknik

Kesehatan Banjarmasin.

Ochiai, R. L., Acosta, C. J., Danavaro, H. M.C. (2008). A Study of Thypoid Fever

in Five Asian Countries Disease Burden and Implications for Control. Bull

WHO. p.86: 260-8.

Pramono, E. (2002). The Commercial Use of Traditional Knowledge and

Medicinal Plants in Indonesia. Submitted for Multi-Stakeholder

dialoque on Trade. Intellectual Property and Biological Resources in

Asia.

Raymond, C. R., Paul J. And Marian, E. Q. (2009). Handbook of

Pharmaceutical Excipient Sixth ed. London: Pharmaceutical Press.

Supardi, I., Sukamto. (1999). Mikrobiologi dalam Pengolahan dan Keamanan

Pangan. Bandung

Supardi, S. Nurhardiyanto, F. (2003). Penggunaan Obat Tradisional Buatan Pabrik

dalam Pengobatan Sendiri di Indonesia. Jurnal Bahan Alam Indonesia

(4): 136-41.

Sweetman, S. C. (2009). Martindale: the Complete Drug Reference 36 edition.

London: Pharmaceutical Press.

Taufiq, S., Umi, Y., Siti, H. (2015). Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Biji

Buah Pepaya (Carica papaya L.) terhadap Eschericia coli dan Salmonella

typhi. Prosiding Penelitian Spesia Unisba

Tim Agromedia. (2008). Buku Pintar Tanaman Obat. Jakarta: Agromedia

Pustaka.

Widayat, W. , Naspiah, N., Rijai, L. (2016). Aktivitas Ekstrak Bawang Tiwai

(Eleutherine americana) Terhadap Bakteri Salmonella typhosa. Prosiding

Seminar Nasional Tumbuhan Obat di Indonesia ke-50. p.70-77

58

Wulandari, L. (2011). Kromatografi Lapis Tipis. Jember: PT Taman Kampus

Presindo.

Yuniasih, M. M. (2018). Pengaruh Daya Hambat Antimikroba Isolat Alkaloid

Umbi Bawang Dayak (Eleutherine palmifolia) Terhadap Pertumbuhan

Escherichia coli, Staphylococcus epidermidis dan Candida albicans

ATCC 10231 Secara In Vitro. Yogyakarta: Program Studi Pendidikan

Biologi Universitas Sanata Dharma