praktikum biokimia klinis uji kehamilan

5/28/2018 Praktikum Biokimia Klinis UJI KEHAMILAN

1/25

LAPORAN PRAKTIKUM BIOKIMIA KLINIS

UJI KEHAMILAN (Direct Latex Agglutination)

KELOMPOK 3 BD

Ati Maryanti 1111102000037

Miyadah Samiyah 1111102000034

Happy Rahma Y. 1111102000055

Sonia Ulfah 1111102000116

Sumiati 1111102000124

Rahmi Sertiana 1111102000085

Askandari 1111102000089

Rian Hidayat 1111102000096

Beryl Zahyin A. 1111102000106

Hestiawati 1111102000110

PROGRAM STUDI FARMASIFAKUKTAS KEDOKTERAN DAN ILMU KESEHATAN

UIN SYARIF HIDAYATULLAH JAKARTA

2013


2/25

P r a k t i k u m B i o k i m i a K l i n i s Page 2

BAB I

PENDAHULUAN

1.1 TUJUAN

Memperlihatkan bahwa hanya urin wanita hamil yang mengandung hCG (human chorionic

gonadotropine) dan tidak terdapat pada wanita tidak hamil.

1.2 LANDASAN TEORI

A. Fisiologi Kehamilan

Menurut federasi obstetri dan ginekologi internasional, kehamilan didefinisikan sebagai

fertilisasi atau penyatuan dari spermatozoa dan ovum dan dilanjutkan dengan nidasi atau

implantasi. Bila dihitung dari saat fertilisasi hingga lahirnya bayi, kehamilan normal akan

berlangsung dalam waktu 40 minggu, atau 10 bulan lunar atau 9 bulan menurut kalender

internasional. Kehamilan terbagi dalam 3 trimester, dimana trimester kesatu berlangsung

dalam 12 minggu, trimester kedua adalah 15 minggu (minggu ke 13 hingga ke 27), dan

trimester ketiga adalah 13 minggu (minggu ke 28 hingga ke 40).

Selama siklus ovarium, korpus luteum berdegenerasi dan lapisan dalam uterus yang

sudah dipersiapkan dan bergantung pada lutein akan terlepas jika tidak terjadi pembuahan

dan implantasi. Jika terjadi fertilisasi, blastokista yang tertanam menyelamatkan dirinya dan

tidak tersapu keluar bersama darah haid dengan membuat hCG. Hormon ini, yang secara

fungsional serupa dengan LH, merangsang dan mempertahankan korpus luteum agar tidak

berdegenerasi.

Endokrinologi kehamilan melibatkan perubahan endokrin dan metabolik yang terjadi

pada batas antara ibu dan janin yang dikenal sebagai unit plasenta-janin. Struktur ini adalah

merupakan tempat utama produksi dan sekresi hormon steroid dan protein. Perubahanendokrin dan metabolik yang terjadi selama kehamilan merupakan akibat langsung dari

sinyal hormon yang dihasilkan unit plasenta-janin. Permulaan dan perkembangan kehamilan

tergantung dari interaksi neuronal dan faktor hormonal. Pengaturan neuro endokrin di dalam

plasenta, pada janin dan kompartemen ibu sangat penting dalam mengarahkan pertumbuhan


3/25


janin dan perkembangannya sebagaimana juga dalam mengkoordinasi awal suatu

persalinan.

Protein-protein yang berhubungan dengan kehamilan dapat ditemukan dalam sirkulasi

maternal segera setelah konsepsi. Sebagai contoh, suatu platelet activating (PAF)-like

substance, yang dihasilkan oleh ovum yang dibuahi dapat terdeteksi segera. Setelah ovulasi

dan fertilisasi, embrio masih berada dalam ampula tuba sampai hari ke tiga. Konsepsi yang

sedang berkembang mengarah pada uterus, melalui bagian istmus tuba, selama 10 jam, dan

kemudian memasuki uterus sebagai suatu embrio 2-8 sel. Pada perkembangan selanjutnya,

antara 3-6 hari setelah konsepsi, embrio menjadi blastokist mengambang dalam rongga

endometrium. Sebelum implantasi, blastokist juga mensekresikan substansi spesifik yang

meningkatkan penerimaan endometrium. Implantasi yang berhasil memerlukan sinkronisasi

yang tepat antara perkembangan blastokist dan pematangan endometrium.

Hanya sedikit informasi yang baru bisa didapatkan mengenai pengaturan hormon steroid

dalam fase nidasi. Embrio awal dan sel kumus oophorus menghasilkan estradiol dan

progesteron sebelum implantasi. Pengambilan secara mekanis sel-sel ini menyebakan

terhentinya sekresi hormon steroid, sementara pengembalian sel melalui co-culture

menghasilkan sekresi steroid seperti semula Berdasarkan penemuan ini, produksi steroid

oleh konseptus diduga tidak berarti pada saat mencapai rongga endometrium, yang padaakhirnya sel kumulus akan makin berkurang pada saat melintasi tuba fallopii.

Pada fase implantasi salah satu contoh hormon plasenta, gonadotropin korionik manusia

(human chorionic gonadotropine, hCG) merupakan protein dimer yang strukturnya sangat

berhubungan dengan LH (luteinizing hormone). Hormon ini merupakan salah satu produk

pertama sel trofoblas embrio yang penting dalam menginformasikan kepada ibu bahwa telah

terjadi konsepsi. mRNA -hCG dapat dideteksi saat embrio 8-sel telah terbentuk, walaupun

hCG belum dapat dideteksi dalam aliran darah atau urin ibu sampai 6 hari setelah fertilisasi.Sekresi hCG berhubungan secara kuantitatif terhadap massa sel sitotrofoblas total di dalam

plasenta. Konsentrasinya dalam serum ibu bertambah dua kali lipat setiap 2-3 hari pada awal

kehamilan ini dapat digunakan sebagai skrining untuk membedakan kehamilan normal

dengan abnormal. Kegagalan peningkatan yang sesuai pada konsentrasi hCG merupakan

indikasi adanya implantasi abnormal seperti kehamilan ektopik (tuba) atau kehamilan


4/25


intrauterin yang tidak dapat hidup. Kadar hCG yang lebih tinggi daripada yang diharapkan

terlihat pada kehamilan kembar dan kehamilan mola.

Peran biologis utama hCG adalah untuk menyelamatkan korpus luteum ovarium dari

kematian yang telah diprogram saat 12-14 hari setelah ovulasi. Karena adanya hubungan

struktural yang dekat anatara hCG dan LH, maka hCG dapat berikatan dengan reseptor LH

pada sel luteal. hCG kemudian dapat menggantikan LH, menunjang korpus luteum saat

terjadi kehamilan. Pemeliharaan korpus luteum memungkinkan sekresi progesteron ovarium

yang terus-menerus setelah hari ke-14 pasca ovulasi dan pemeliharaan kehamilan awal.

Pada kehamilan minggu ke-9 (7 minggu sete;ah konsepsi), plasenta telah memiliki massa sel

yang cukup untuk memasok sejumlah besar progesteron yang penting untuk pemeliharaan

kehamilan. Produksi progesteron diambil alih oleh plasenta dan korpus luteum dapat

dihilangkan tanpa efek samping pada pemeliharaan kehamilan. Pada akhir trimester

pertama, hCG juga mentimulasi gonad janin untuk membuat hormon-hormon steroid yang

bertanggung jawab untuk diferensiasi genitalia interna dan eksterna.

Berbagai hormon yang diproduksi oleh plasenta berasal dari sistem dua sel yang

menyerupai interaksi antara neuroendokrin hipotalamus dan kelenjar hipofisis. Misalnya,

GnRH dapat disintesis dan disekresi oleh sel sitotrofoblas plasenta. GnRH dari sitotrofoblas


5/25


menstimulasi produksi hCG oleh sinsitiotrofoblas. Semakin berkembangnya kehamilan dan

setelah plasenta menjadi tempat utama produksi progesteron, peran utama hCG berubah dari

pemeliharaan korpus luteum menjadi pemeliharaan produksi progesteron oleh

sinsitiotrofoblas. Kadar hCG serum menggambarkan perubahan ini dengan meningkat

minggu ke-7 siklus menstruasi dan kemudian menurun drastis sampai kadar yang tetap

selama sisa kehamilan messenger.

B. Sel Desidua dan Hormon Desidua

Desidua adalah endometrium dalam kehamilan. Desidua endometrium adalah tempat

biosintesis hormon steroid dan protein maternal yang berhubungan langsung dengan

kelangsungan dan proteksi kehamilan dari penolakan secara imunologis. Sebagai contoh

jaringan desidua mensekresikan kortisol, dan dengan kombinasi dengan hCG dan

progesteron yang dihasilkan konseptus, kortisol yang dihasilkan desidua bekerja menekan

respon imun maternal membuahkan keadaan imunologis khas yang diperlukan untuk

implantasi konseptus.

Adapun hormon yang dihasilkan sel desidua antara lain prolaktin desidua yang

mempunyai aktivitas biokimia dan biologis identik dengan prolaktin hipofisis. IGF binding

protein-1(IGFBP-1) adalah hormon peptida yang berasal dari sel stroma desidua. Pada wanita

yang tidak hamil, circulating IGFBP-1 tidak berubah selama siklus endometrium. Selama

kehamilan, terjadi peningkatan beberapa kali lipat kadar IGFBP-1 yang dimulai selama

trimester pertama, meningkat pada trimester kedua, dan akhirnya turun sebelum aterm.

IGFBP-1 menghambat ikatan insulin-like growth factor (IGF) pada reseptor di desidua.

Pregnancy protein-14 adalah hormon glikoprotein yang disintesis oleh endometrium sekretori

dan desidua yang terdeteksi sekitar siklus hari ke 24.

C. Kompartemen Plasenta

Fungsi plasenta adalah memastikan komunikasi efektif antara ibu dengan janin yangtengah berkembang sementara tetap memelihara keutuhan imun dan genetik dari kedua

individu. Pada awalnya plasenta berfungsi secara otonom. Namun pada akhir kehamilan,

sistem endokrin janin telah cukup berkembang untuk mempengaruhi fungsi plasenta dan

menyediakan prekursor-prekursor hormon untuk plasenta.


6/25


D. Hormon Polipeptida Plasenta (hCG)

hCG (human chorionic gonadothropin) disebut sebagai hormon kehamilan ini adalah

suatu glikoprotein dengan aktivitas biologis yang sangat mirip dengan LH (luteinizing

hormon), dan keduanya bekerja bersama-sama melalui reseptor LH/hCG membran plasma.

Walaupun diproduksi di plasenta, hCG juga disintesis di ginjal janin dan sejumah jaringan

janin menghasilkan subunit- atau molekul utuh hCG. Berbagai tumor ganas juga

menghasikan hCG, kadang-kadang dalam jumlah yang sangat banyak terutama penyakit

trofoblast ganas. Pada wanita tidak hamil dan pria, hCG diproduksi dalam jumlah sangat

sedikit.

a. Karakteristik Biokimiawi

hCG adalah suatu glikoprotein (BM sekitar 36.700) dengan kandungan

karbohidrat tertinggi (30%) dibandingkan dengan hormon manusia lainnya. Komponen

karbohidrat terutama asam sialat terminal, melindungi molekulnya dari katabolisme.

Waktu paruh plasma hCG utuh (24 jam) jauh lebih lama daripada LH. hCG secara

structural berikatan dengan tiga hormon glikoprotein lain (LH, FSH, dan TSH). Sekuens

asam amino subunit dari keempat glikoprotein ini identik; tetapi subunit FSH dan

TSH, serta subunit hCG dan LH walaupun memiliki banyak kesamaan ditandai oleh

sekuens asam amino berbeda.

b. BiosintesisSintesis rantai dan hCG diatur secara terpisah, sebuah gen pada kromosom 6

di q 12 dan q 21 mengkode subunit dari keempat hormon glikoprotein. Kecepatan

sintesis subunit hCG diperkirakan bersifat membatasi dalam pembentukan molekul

lengkap.

c. Sel Tempat Hormon Berasal

Molekul hCG lengkap terutama disintesis di sinsitiotrofoblast. Namun, telah

dibuktikan bahwa hCG imunoreaktif terdapat di sitotrofoblast sebelum usia kehamilan 6

minggu. Setelah itu, hCG hamper seluruhnya terlokalisasi di sinsitium. Distribusi seluler

serupa untuk hpl imunoreaktif pernah dilaporkan.

d. Pengendalian Biosintesis Subunit hCG

Jumlah mRNA kedua subunit dan di sinsitiotrofoblast pada trimester pertama

lebih besar daripada saat aterm. Hal ini mungkin penting dipertimbangkan dalam


7/25


pengukuran hCG plasma sebagai prosedur penapis untuk mengidentifikasi janin

abnormal.

e. Bentuk Molekul hCG di Plasma dan Urin

Terdapat beragam bentuk hCG di plasma dan urin ibu. Sebagian dari bentuk ini

terjadi akibat penguraian enzimatik, dan sebagian lagi terbentuk akibat modifikasi ketika

terjadi sekuens sintesis atau pemrosesan molekul hCG normal. Berbagai bentuk hCG ini

memiliki bioaktivitas dan imunoreaktivitas yang sangat beragam.

f. Subunit Bebas

Kadar subunit di plasma sangat rendah atau tidak terdeteksi sepanjang

kehamilan manusia, Karena sintesis subunit bersifat membatasi. Meningkatnya ukuran

oligosakarida pada subunit bebas menghambat dimerisasi dengan hCG.

g. Rantai Peptide yang Hilang pada Molekul hCG

Rantai peptida yang hilang tersebut diperkirakan terbentuk akibat kerja enzimatik

pada molekul, yang terjadi di dekat tempat sintesis subunit .

h. Konsentrasi hCG dalam Serum dan Urin

Konsentrasi hCG dalam urin ibu hampir sejajar dengan konsentrasi di dalam

plasma, yaitu sekitar 1UL/ml pada minggu ke-6 setelah hari pertama haid terkahir,

meningkat ke nilai rata-rata sekitar 100 UL/ml pada hari ke-60 sampai 80 setelah haid

terakhir. Kadar hCG dalam plasma wanita hamil dapat mencapai 15 mg/ml. dimulaisekitar minggu ke 10 sampai 12, kadar hCG plasma ibu mulai berkurang. Kadar hCG

dalam plasma dipertahankan pada kadar rendah sepanjang sisa masa kehamilan. Pola

kemunculan hCG dalam darah janin (sebagai fungsi usia gestasi) serupa dengan yang

dijumpai pada ibu, namun seiring dengan perkembangan kehamilan, konsentrasi hCG

dalam cairan amnion menurun sehingga menjelang aterm kadarnya hanya seperlima

daripada kadar di dalam plasma.

Tingkat sekresi hCG meningkat dengan cepat selama kehamilan awal untukmenyelamatkan korpus luteum dari kematian. Sekresi puncak hCG berlangsung sekitar

60 hari setelah periode haid terakhir. Pada minggu kesepuluh kehamilan, pengeluaran

hCG menurun sehingga tingkat sekresinya rendah yang kemudian dipertahankan selama

kehamilan. Turunnya hCG terjadi pada saat korpus luteum tidak lagi diperlukan untuk

menghasilkan hormon-hormon steroid karena plasenta sudah mulai mengeluarkan


8/25


estrogen dan progesterone dalam jumlah bermakna. Korpus luteum kehamilan mengalami

regresi parsial seiring dengan turunnya sekresi hCG.

Pada kehamilan dengan janin lebih dari satu, kadang-kadang dijumpai kadar hCG

plasma yang meningkat secara bermakna, demikian juga pada janin eritroblastik tunggal

yang terjadi akibat isoimunisasi antigen D ibu. Kadar hCG dalam plasma dan urin

mungkin sangat meningkat pada wanita dengan hamil mola dan sindrom Down.

i. Pengendalian Sintesis hCG

GnRH plasma kemungkinan berperan dalam pengendalian sintesis hCG. Inhibin

plasenta juga diperkirakan berperan. In vitro, sejumlah besar senyawa bekerja untuk

meningkatkan sekresi hCG oleh trofoblast, misalnya senyawa turunan AMP siklik,

hyphothalamic like hormons (GnRH, CRH), beberapa sitokin, dan berbagai faktor

pertumbuhan.

j. hCG merupakan mediator utama untuk implantas embrio/janin/mudigah, yang berfungsi

mengenalkan embrio untuk dapat beradaptasi di uterus. hCG juga beperan dalam

beberapa hal antara lain: a. meningkatkan sistem kekebalan pada endometrium, b.

membantu meregulasi sel T (CD 4, CD 25, foxp3+), c. regulator uNK (unit natural

killer), d. membantu menyeimbangkan sistem TH1 dan TH2 , dan peranannya dalam

mempertahnkan mediator sistem kekebalan tubuh lainnya seperti; makrofag, T-komplemen, dan lain-lain.

E. Pemeriksaan Strip Tes untuk Kehamilan

Uji kehamilan didasarkan pada adanya produksi chorionic gonadotropine (hCG) oleh sel-

sel sinsitiotrofoblas pada awal kehamilan. Hormon ini disekresikan ke dalam sirkulasi ibu

hamil dan diekskresikan melalui urin. Human Chorionic Gonadotropine (hCG) dapat

dideteksi pada sekitar 26 hari setelah konsepsi dan peningkatan ekskresinya sebanding

meningkatnya usia kehamilan diantara 30-60 hari. Produksi puncaknya adalah pada usia

kehamilan 60-70 hari dan kemudian menurun secara bertahap dan menetap hingga akhir

kehamilan setelah usia kehamilan 100-130 hari.

Assai darah dan urin memperlihatkan puncak-puncak yang sejajar sekitar 60 hari setelah

konsepsi kemudian menurun ke kadar yang rendah tepat sebelum akhir kehamilan


9/25


(persalinan). Kadarnya dalam serum meningkat dari 50 sampai 100 IU/ml, kemudian

meneurun sampai 10 hingga 20 IU/ml pada akhir kehamilan (persalinan). Nilai hCG dalam

urin memuncak sampai 20.000 hingga 1000.000 IU perhari dan menurun pada kehamilan

lanjut hingga nilainya 4000-11000 IU perhari.

Strategi uji kehamilan tergantung pada seberapa cepat setelah konsepsi diperlukan

diagnosis. Semakin dini konfirmasi itu dilakukan, semakin sensitif dan spesifik uji kehamilan

yang harus digunakan. Tabel 8-7 menunjukkan sensitivitas uji-uji yang tersedia untuk

kehamilan. Ciri penting dari cara RIA baru (beta-subunit hCG) pada kehamilan yang sangat

dini adalah spesifitasnya yang tinggi terhadap sebunit-beta hCG dalam membedakan hCG

dari LH.


10/25


Oleh karena itu, untuk situasi yang umum, jika seorang wanita ingin tahu akan

kemungkinan hamil, uji kehamilan cara imunologis pada urin yang biasa saja sudah cukup.

Apabila diperlukan sensitivitas dan spesifisitas yang lebih tinggi untuk mendiagnosis

kehamilan dini dianjurkan uji RIA.

Untuk mengkonfirmasi kehamilan, spesimen urin pertama pagi hari dianjurkan karena

urin ini konsentrasinya paling tinggi dan ada kemungkinan mengandung kadar hCG yang

tinggi. Darah atau protein dalam urin dan obat-obatan (khususnya metadon dan fenothiazin)

dapat mengganggu uji-uji kehamilan cara imunologis pada urin.

Imunoassay pada urin berbeda dari assay RIA dan RRA dalam hal sensitivitasnya

terhadap hCG, jenis sampel, waktu yang diperlukan untuk pengujian, waktu pengujian yang

memberikan harapan sensitivitasnya terbesar, dan biayanya. Keuntungan dan kerugian

imunoassay cara cepat menggunakan lateks pada lempeng kaca dan imunoassay hCG

menggunakan tabung yang lazim, diperlihatkan dalam tabel 8-8 dan 8-9. Imunoassay pada

urin dapat dikerjakan dengan uji hambatan hemaglutinasi atau aglutinasi lateks.

Uji imunologik untuk kehamilan dapat dilakukan dengan beberapa metode, seperti Rapid

Latex Slide Test, Tube Test Haemaglutinasi (tipe inhibisi) atau Immunochromatographic

assay. Uji-uji tersebut pada dasarnya menggunakan prinsip antigen-antibody yaitu anti-hCG

terhadap kadar hCG (human Chorionic Gonadotropine), hormon yang dihasilkan oleh


11/25


plasenta. Uji yang dilakukan menggunakan serum anti-HCG ini bersifat lebih sensitif, lebih

akurat, lebih murah, dan lebih mudah dilakukan dibandingkan dengan uji kehamilan yang

terdahulu, yaitu yang menggunakan hewan hidup seperti uji Ascheim-Zondek dan Friedman.

Penggunaan strip hCG urin tes merupakan suatu metode imunoassay untuk memastikan

secara kualitatif adanya human chorionic gonadotropine (hCG) didalam urin sebagai deteksi

dini adanya kehamilan. Human chorionic gonadotropine merupakan sebuah hormon

glikopeptida yang dihasilkan oleh plasenta selama kehamilan. Adanya hCG dan peningkatan

konsentrasinya secara cepat didalam urin ibu membuatnya sebagai penanda untuk

memastikan kehamilan.

Sampel yang dapat digunakan dalam tes kehamilan untuk mendeteksi hCG pada

seseorang dapat berupa serum maupun urin. Jika menggunakan serum, tes kehamilan

dilakukan tidak lebih cepat dari 5 hari setelah pertama kali terlambat menstruasi, sedangkan

jika sampel yang digunakan adalah urin bisaanya dapat diuji saat 3 hari setelah dinyatakan

terlambat menstruasi.

Selain menentukan seorang wanita hamil atau tidak, penggunaan uji anti-hCG ini juga

dapat mendeteksi aborsi yang mengancam atau kematian janin. Kadar hCG juga dapat diukur

pada pria untuk penentuan tumor terstikular.

F. Metode Imunokromatografi

Metode tes kehamilan yang dilakukan adalah metode imunokromatografi dengan

menggunakan sampel berupa air seni (urin). Alat yang digunakan untuk pemeriksaan

merupakan alat yang dijual secara bebas dan dapat dipergunakan kapanpun dan oleh

siapapun. Keuntungan strip uji kehamilan adalah bisa dilakukan sendiri di rumah, prosedur

pengujian yang mudah dilakukan, harga strip yang relatif murah, jenis alat tes bervariasi,

akurasi hasil uji yang tinggi (9799%), serta dapat mendeteksi kehamilan lebih dini.

Mekanisme kerja tes kehamilan melalui air seni ini adalah dengan menggunakan prinsip

adanya ikatan antibodi antigen. Sebagai antigennya adalah adanya protein hormon beta hCG

(hormon yang dihasilkan trofoblas/bagian plasenta) dan sebagai antibodi adalah antibodi

yang dihasilkan binatang kuda yang disuntik hormon beta hCG.


12/25


Antibodi yang berupa protein ini dikloning pada bakteri E coli. Kemudian antibodi dalam

jumlah tertentu ini, setelah direaksikan dengan zat tertentu yang akan berubah warna bila

bereaksi dengan antigen, ditempelkan pada alat pemeriksa. Kadar antibodi yang ada akan

menentukan kepekaannya. Karena itu, ada dua macam kepekaan, yaitu 25 mIU dan 50 mIU.

Kepekaan ini yang menentukan pada hari ke berapa alat ini sudah peka untuk mendeteksi

kehamilan. Sebagai contoh, untuk 25 mIU, dapat mendeteksi kehamilan saat hari pertama

mens berikut, sementara 50 mIU perlu sepuluh hari terlambat.

Aschheim dan Zondek telah menggunakan uji kehamilan dengan penanda hCG sejak

tahun 1920. Uji biologis ini menggunakan hewan (katak, tikus, kelinci) yang kemudian

disuntik dengan serum atau urin perempuan yang diduga hamil untuk melihat reaksi yang

terjadi pada ovarium atau testes hewan percobaan tersebut. Prinsip uji biologik penanda 3

hCG selanjutnya dikembangkan dengan cara mengambil antiserum hCG dari hewan yang

telah memproduksi antibodi hasil stimulasi dengan hCG (protein dengan sifat antigenik). Bila

urin diteteskan ke antiserum maka terjadi mediasi aktifitas antiserum untuk beraksi dengan

partikel lateks yang dilapisi dengan hCG (latex particle agglutination inhibition test) atau sel

darah merah yang telah disensitisasi dengan hCG (hemagglutination inhibition test). Pada

perempuan yang hamil, hCG di dalam urinnya akan menetralisir antibodi dalam antiserum

sehingga tidak terjadi reaksi aglutinasi. Pada perempuan yang tidak hamil, tidak terjadi

netralisasi antibodi sehingga terjadi reaksi aglutinasi.Alat uji kehamilan untuk dipakai di rumah (home pregnancy test, HPT) yang bisaa

dikenal dengan test pack merupakan alat praktis yang cukup akurat untuk mendeteksi

kehamilan pada tahap awal. Cara penggunaannya relatif mudah, yaitu mencelupkan ujung

alat ke dalam air seni yang ditampung atau menyentuhkan pada aliran air seni ketika buang

air kecil. Bisaanya dianjurkan penggunaan air seni pertama setelah bangun pagi, karena

konsentrasi hormon hCG yang tinggi pada saat itu. Uji kehamilan yang lebih akurat tentunya

adalah tes kuantitatif hormon hCG dalam darah. Bisaanya yang diukur adalah jumlah subunit

beta hormon hCG (-hCG) . Setiap test-pack mempunyai kadar sensitivitas berbeda, bisaanya

pada kisaran 25 mIU/ml hCG. Test-pack mulai dapat digunakan 14 hari setelah waktu

konsepsi atau sehari setelah periode haid terlambat. Tetapi dianjurkan tujuh hari setelah

berhubungan suami istri.

Tes kehamilan ini juga dapat menjadi hasil yang positif dalan beberapa keadaan seperti:


13/25


1. Hamil kimia

Banyak kasus kehamilan yang tidak diketahui mengalami keguguran yang disangka haid.

Meskipun angkanya cukup tinggi, saat di test akan positif sebelum terlambat haid, ternyata

saat tiba jadwal haid keluar seperti bisaa jumlahnya dan kehamilan juga keluar bersama haid.

2. Waktu pemeriksaan

Tes kehamilan dilakukan di luar standar yang ditemukan oleh pembuat test, misalnya

terlalu lama. Hal ini akan menyebabkan tes menjadi positif

3. Pengaruh obat dan bahan-bahan kimia

Obat obat tertentu dapat membuat tes ini positif, seperti: pemakaian hCG untuk terapi

kesuburan dan diet. Obat diuretik dan obat-obat anti Parkinson juga dapat membuat positif

hasil pemeriksaan, bahan kimia atau sabun yang terkontaminasi oada urin juga bisa membuat

tes positif. Vitamin C dosis tinggi juga dikatakan bisa mempengaruhi hasil tes.

4. Adanya tumor dalam tubuh yang menghasilkan hCG seperti tumor jaringan plasenta

(trofoblastik), tumor indung telur yang menghasilkan hCG, dll.

Pemeriksaan hCG dalam darah akan terdekteksi beberapa hari lebih awal dari hCG dalam

urin. Pemeriksaan hCG dalam darah adalah mengukur nilai secara kuantitatif nilai dengan

angka mIU/ml. Pemeriksaan hCG dalam darah hanya dapat dilkukan di laboratorium atau

atas permintaan dokter. Dokter akan menyarankan pemeriksaan hCG dalam darah bila tidak

cukup data untuk memastikan kehamilan. Jika hasil pengukuran menunjukkan kadar diatas25 mIU/ml, maka hasil positif.

Ada beberapa hal yang harus diperhatikan bila menggunakan tes kehamilan di rumah, yaitu:

1. Nilai sensitivitas dari tes kehamilan

Nilai sensitivitas setiap merek tes kehamilan berbeda, semakin rendah nilai

sensitivitasnya, semakin kehamilan dapat dideteksi. Sensitivitas dinilai dengan mIU/ml,

artinya seberapa rendah jumlah hCG dalam urin yang dapat membuat hasil tes positif.

2. Kadaluarsa tes kehamilan

Pastikan membaca kemasan tes kehamilan sebelum menggunakan, untuk mengetahui

masa berlaku alat tes kehamilan.

3. Tempat penyimpanan

Jika tersedia alat tes kehamilan yang telah disimpan di tempat yang lembab atau panas

(misalnya kamar mandi) sebaiknya tidak digunakan.


14/25


Ada beberapa hal yang memengaruhi hasil positif tes kehamilan dengan urin atau false

negative, beberapa diantaranya:

1. Nilai sensitivitas dari alat yang digunakan

Misalnya level hCG dalam urin saat melakukan pemeriksaan sekitar 25 mIU/ml, dan alat

yang digunakan memiliki nilai sensitivitas 50 mIU/ml, maka hasil akan menunjukkan

negatif.

2. Tes kehamilan dilakukan terlalu dini

Pemilaian tes kehamilan adalah menilai hCG yang dihasilkan oleh plasenta, yang terjadi

setelah embrio berimplantasi atau menempel pada dinding rahim. Waktu implantasi

setiap wanita bervariasi 6-12 hari setelah pembuahan. Bila tes dilakukan terlalu dini,

maka tes akan menghasilkan hasil yang negatif

3. Peningkatan hCG pada level yang berbeda

Pada wanita yang mempunyai peningkatan hCG yang rendah, diperlukan waktu beberapa

hari lebih lama untuk memberi hasil positif pada tes kehamilan.

4. Urin yang digunakan tes sudah tidak terkonsentrasi

Waktu terbaik adalah urin pertama saat bangun tidur karena masih terkonsentrasi. Bila

urin yang sudah terdilutasi akan dapat memengaruhi hasilnya.

5. Penggunaan alat tes dan waktu pembacaan yang tidak tepat


15/25


BAB II

METODOLOGI PRAKTIKUM

1. Judul Praktikum

Uji Kehamilan (Direct Latex Agglutination ) dan Test Pack.

2. Tempat Praktikum

Laboratorium Biokimia dan Patologi Lantai 2 Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta.

3. Hari dan Tanggal Praktikum

Senin, 18 November 2013

4. Alat dan Bahan

Alat

Gelas beker 50 mL 2 buah

Plate lateks 1 buah

Pipet plastik dengan tangkai 3 buah

Bahan

Urine ibu hamil usia kandungan 4 bulan

Urine ibu hamil usia kandungan 8 bulan

Kontrol positif

Kontrol negatif

Lateks polistiren


16/25


5. Cara Kerja

Uji lateks polistiren

Cara kerja Gambar

1. Larutan lateks polistiren

diteteskan pada tiga lingkaran

pada plate lateks (lingkaran A,

lingkaran B, dan lingkaran C)

masing-masing 1 tetes.

2. Lalu dimasukkan pada lingkaran

A larutan kontol negative,

lingkaran B urine 4 bulan, dan

lingkaran C urine 8 bulan.

3. Kemudian aduk hingga homogen.

4. Setelah itu diamati pada masing-

masing lingkaran. Apabila

terbentuk aglutinasi dalam dua

menit artinya uji positif dan

aglutinasinya lebih dari 2 menit

artinya uji negative.

5. Hasilnya kemudian dicatat.

8 bln

K. Ne atif


17/25


Uji menggunakan test pack

Cara Kerja Gambar

1. Urine ditampung ke dalam gelas

beker (gelas beker A untuk urine 4

bulan dan gelas beker B untuk urine

8 bulan).

2. Kemasan aluminium foil test pack

dibuka, kemudian batang steril

diambil dan strip dicelupkan ke

dalam urine 4 bualn dan 8 bulan

selama menit.

Note: stripnya dicelupkan dalam

urine jangan melebihi batas

maksimal yang tertera,

3. Hasil test ditunggu selama 3 menit,

tidak boleh lebih dari 8 menit. Hasil

negative (tidak hamil) hanya muncul

satu garis merah. Hasil positif

(hamil) ditandai dengan munculnya

dua garis merah. Hasil gagal apabila

tidak muncul garis merah sama

sekali.

4 bulan

8 bulan


18/25


2.2 HASIL

4 bulan 8 bulan

Direct Latex Aglutination - +

Test Pack - +

2.3 PEMBAHASAN

Pada praktikum ini akan dilakukan uji kehamilan. Uji kehamilan pada praktikum ini

dilakukan dengan dua cara yaitu direct latex agglutination dan uji menggunakan test pack. Pada

uji ini sampel yang digunakan adalah urin wanita hamil empat bulan dan urin wanita hamil

delapan bulan. Urin yang diambil pada pagi hari pada sekresi urin yang pertama karena pada

waktu tersebut kadar hCG banyak. Pengujian ini dilakukan bertujuan untuk mengetahui ada atau

tidaknya kandungan hCG pada ibu hamil.

Human Chorionic Gonadotropine (hCG) adalah sejenis glikoprotein yang dihasilkan oleh

plasenta dalam kehamilan. Namun selama plasenta belum terbentuk, hormon ini dihasilkan sel-

sel fungsi tropoblas. Setelah umur kehamilan memasuki 12-13 minggu, hormon hCG ini

dihasilkan oleh plasenta. Hormon hCG mempunyai dua rangkaian rantai peptide yaitu yang

mengandung 92 asam amino dan mengandung 145 asam amin. Hormon Chorionic

Gonadotropine (hCG) mempertahankan korpus luteum yang terbentuk ketika sel telur dibuahi

yang dilanjutkan dengan terjadinya ovulasi. Hormon hCG berdampak pada meningkatnya

produksi progesteron oleh indung telur sehingga menekan menstruasi dan menjaga kehamilan.

Produksi hormon hCG akan meningkat hingga hari ke 70 dan akan menurun selama sisa

kehamilan. Hormon ini di ekskresikan melalui urin juga terdapat dalam serum.

Keberadaan hormon protein ini sudah dapat dideteksi dalam darah sejak hari pertama

keterlambatan haid, yang kira-kira merupakah hari keenam sejak pelekatan janin pada dinding

rahim. Kadar hormon ini terus bertambah hingga minggu ke 14-16 kehamilan, terhitung sejak

hari terakhir menstruasi. Sebagian besar ibu hamil mengalami penambahan kadar hormon hCG

sebanyak dua kali lipat setiap 3 hari. Peningkatan kadar hormon ini biasanya ditandai dengan

mual dan pusing yang sering dirasakan para ibu hamil. Setelah itu kadarnya menurun terus

secara perlahan, dan hampir mencapai kadar normal beberapa saat setelah persalinan.


19/25


Pengujian yang pertama dengan direct latex agglutination dimana 3 tetes urin wanita

hamil baik yang empat bulan dan delapan bulan diteteskan pada lempeng objek dan ditambahkan

dengan larutan anti hCG (partikel latex dan zat pengawet). Kemudian diaduk dan didapatkan

hasil pada praktikum ini menunjukkan hasil yang negative (tidak terjadi aglutinasi yang

ditunjukkan dengan butiran-butiran kecil putih) untuk urin wanita hamil empat bulan sedangkan

pada urin wanita hamil delapan bulan didapatkan butiran-butiran kecil putih yang menandakkan

bahwa dalam urin tersebut mengandung hormone hCG (positif).

Prinsip dari pengujian ini adalah proses imunologi dimana terjadi ikatan antara antibodi

dan antigen. Dengan adanya ikatan tersebut maka kondisi menjadi berat sehingga terjadilah

aglutinasi. Menimbang dengan jumlah kadar hCG yang seharusnya meningkat setiap tiga harinya

dan akan terus meningkat beberapa bulan dimulai dengan produksi awal pada hari ke-10 setelah

fertilisasi. Sehingga pada usia kehamilan empat bulan seharusnya kadar hormone hCG ini adalah

yang tinggi dan memungkinkan untuk dapat dideteksi dengan baik. Kemungkinan yang terjadi

yang menyebabkan hasilnya negatif adalah urin yang diperiksa bukan urin wanita hamil. Fungsi

dari hormon ini adalah untuk mempertahankan korpus luteum. Kadar hCG ini akan menurun

pada sisa kehamilan.

Pengujian yang kedua dilakukan dengan test pack. Test pack yang digunakan memiliki

kepekaan hingga 10 mIU/ml urin. Pengujiannya yaitu dengan menampung urin wanita hamil 8

bulan dan 4 bulan ke dalam wadah, celupkan strip sampai tanda batas selama menit. Baca

hasil tes dalam 3 menit. Hasil positif bisa dilihat dengan adanya 2 garis merah pada strip,

sedangkan hasil negatif hanya menghasilkan satu garis merah pada strip. Pengujian pada urin

wanita hamil 8 bulan adalah positif dan pada urin wanita hamil 4 bulan adalah negative.

Antibodi-antibodi yang terdapat pada media tes, yang mempunyai dua strip (garis)

indicator. Hormon hCG yang terdapat pada urine wanita hamil, berperan sebagai antigen.Antibodi yang digunakan pada media tes ini ada tiga tipe antibodi. Sebagian terdapat enzim yang

dapat menampilkan warna saat menangkap antibodi lainnya. Antibodi tipe 1 bertugas menangkap

antigen, antibodi tipe 2 berjaga-jaga di salah satu strip untuk menambatkan antibodi tipe 1

(berikut antigen yang ditangkapnya) di strip A. Sedangkan antibodi tipe 3 menangkap antibodi

tipe 1 yang tak mendapat pasangan, lalu menambatkannya di strip B. Jika hanya strip B yang


20/25


berwarna berarti tidak terdapat hormon hCG (tidak hamil ). Karena antibodi yang tertambat dan

memberi warna strip itu bukan pembawa hCG melainkan antibodi 3 yang menangkap antibodi 1.

Sebaliknya, kalau kedua strip menampilkan warna maka menunjukkan adanya hCG yang

tertawan di strip A (hamil). Alat uji kehamilan test pack mendeteksi hormon hCG dalam urin

yang diproduksi selama masa kehamilan dengan kepekaan hingga 25 mIU/ml urin.

Untuk urin wanita hamil yang 8 bulan dihasilkan 2 garis pada strip yang menandakan

adanya hormon hCG, sedangkan untuk urin hamil yang 4 bulan hanya dihasilkan 1 garis saja, hal

ini menandakan bahwa tidak adanya hCG pada urin tersebut. HCG pada bulan ke-4 harusnya

masih bisa dideteksi karena kadar hormon hCG ini adalah yang tinggi dan memungkinkan untuk

dapat dideteksi dengan baik. Kadar hormon hCG ini akan menurun pada sisa kehamilan.

Kemungkinan hasil ini negatif adalah urin yang diperiksa bukan urin wanita hamil, atau urin

yang dideteksi terlalu encer sehingga hormone hCG tidak terdeteksi.


21/25


BAB III

PENUTUP

3.1 KESIMPULAN

1. Praktikum uji kehamilan ini menggunakan direct latex agglutination dan uji test pack

dengan tujuan mengetahui ada atau tidaknya hormon hCG pada ibu hamil.

2. Prinsip dari pengujian urin wanita hamil ini adalah proses imunologi dimana terjadi

ikatan antara antibodi dan antigen.

3. Hasil uji direct latex agglutination yang didapatkan pada urin wanita hamil 4 bulan

tidak terjadi aglutinasi ( negatif ) dan pada urin wanita hamil 8 bulan terjadi aglutinasi

(positif) ditandai dengan adanya butiran-butiran kecil putih

4. Hasil uji test pack dengan kepekaan 10 ml U/ml urin maka didapatkan hasil negatif

ditandai dengan adanya satu garis merah dalam strip pada urin wanita hamil 4 bulan

dan hasil positif pada urin wanita hamil 8 bulan ditandai dengan adanya dua garis

merah pada strip.

5. Hasil yang didapat dari kedua metoda tidak sesuai dengan literatur yakni pada wanita

hamil 4 bulan dinyatakan kadar hCG tinggi namun pada praktek di lapangan bernilai

negatif. Hal ini diduga bahwa urin tesebut bukanlah urin wanita hamil atau urin yang

akan diuji terlalu encer sehingga hormon hCG tidak terdeteksi.

3.2 SARAN

Sebaiknya, semua praktikan mendapatkan proporsi kerja dalam praktikum agar praktikan

dapat mengerti dengan jelas dan mengamati perubahan yang terjadi sehingga tujuan dari

praktikum ini dapat tercapai.


22/25


DAFTAR PUSTAKA

George Adriaans. Asuhan Antenatal, Jaringan Nasional Pelatihan Klinik Kesehatan Reproduksi,

hal: 1-2, 2008.

Hanifa,W dan Saifuddin, A.B. 2005. Ilmu Kebidanan Edisi 3. Jakarta: Yayasan Bina Pustaka

Sarwono Prawirohardjo.

Anwar, Ruswana.Endokrinologi Kehamilan dan Persalinan. Bandung, Mei 2005, hal: 2-10.

Cunningham, Gary, et. All. Williams Obstetrics, 23ed, Mc-Graw Hill, inc. Health Profession

Division, Toronto, International edition, 2010, 117-120.

Marie Tsampalas, Virginie Gridelet, Sarah Berndt, Jean-Michel Foidart, Vincent Geenen, Sophie

Perrier dHauteriv. Human Chorionic Gonadotropin: A Hormon With Immunological and

Angiogenic Properties, November 2009, no: 6, 3-6.

G. K. Sabine Lijesen, Iris Theeuwen, Willem J. J. Assendelft & Gerrit Van Der Wal. The Effect

Of Human Chorionic Gonadotropin (Hcg) In The Treatment Of Obesity By Means Of The

Simeons Therapy: A Criteria-Based Meta-Analysis, 1995; 40: 237-243.

Cole L. A. Immunoassay of human chorionic gonadotropin, its free subunits, and metabolites.

Clinical Chemical, 1997;43(12):22, 33-43.

Suririnah. 2008.Buku Pintar kehamilan dan persalinan. Jakarta: PT Gramedia.

Sacher, Ronald A. dan Richard A. McPherson. 2002. Tinjauan Klinis Hail Pemeriksaan

Laboratorium. Jakarta : EGC.

Kee, Joyce LeFever. 1995. Buku Saku Pemeriksaan Laboratorium dan Diagnostik dengan

Implikasi Keperawatan. Jakarta: EGC.

Heffner, Linda J. dan Danny J. Schust. At a Glance Sistem Reproduksi Edisi Kedua. Jakarta:

Erlangga Medical Series.

Speicher, Carl E. dan Jack W. Smith. 1994. Pemilihan Uji Laboratorium yang Efektif. Jakarta

EGC.


23/25


A. Jagannadha Rao, S. G. Kotagi, and N. R. Moudgal. Effect Of Human Chorionic

Gonadotropin On Serum Levels Of Progesterone And Estrogens In The Pregnant Bonnet

Monkev (Macaca Radiata), March 1981; Vol. 3: No: 1, 83-88.

Kusmarjadi, D., (2008), Tes Hamil Positif Palsu, http//www.teshamil.com/tes-hami-positif-

palsu/html.dikujungi 29 November 2010.

Anonim. 2010. Pengertian hCG (human chorionic gonadotropine) atau karya ilmiah. UNJA

Jambi.

Kayisli U, Selam B, Guzeloglu-Kayisli O, Demir R, Arici satu (2003). "Manusia gonadotropin

korionik memberikan kepada keibuan immunotolerance dan endometrial apoptosis

dengan mengatur sistem ligan Fas-Fas". J. Immunol. 171 (5): 230513. PMID

12928375.


24/25


LAMPIRAN

Urin wanita hamil 8 bulan Urin wanita hamil 4 bulan testpack

Pengujian dengan testpack Pengujian urin 8 bulan Pengujian urin 4 bulan


25/25


Hasil negative pada urin wanita hamil

4 bulan

Hasil positif pada urin wanita

hamil 8 bulan

Hasil :

Tengah : negatif (-) pada urin 4 bulan

Kanan : positif (+) pada urin 8 bulan

praktikum biokimia klinis uji kehamilan

Documents