KARBOHIDRAT1. Reaksi Molisch

1 ml larutan 0,1 M larutan yang ingin diperiksa + 1-2 tetes pereaksi

Molisch,dikocok, kemudian tabung dimiringkan dan dialirkan perlahan-lahan 1

ml H2SO4 pekat melalui dinding tabung. Reaksi (+) bila terjadi cincin berwarna

ungu pada perbatasan ke-2 cairan tersebut.

Larutan yang dipakai adalah glukosa, sukrosa, maltosa,arabinosa dan larutan

amilum l%.

2. Pembentukan osazon

Tabung reaksi diisi 0,2 gram Fenilhidrazin HCl, 0,3 gram

Natrium asetat dan 5 ml larutan yang ingin diperiksa., dimasukkan ke

dalam penangas air yang mendidih (dicatat waktunya). Tabung ditutup

dengan gabus/kertas dan bila perlu kocok sampai homogen (air dalam

penangas air mendidih perlahan-lahan). Catatlah waktu dari mulai

memasukkan setiap jenis gula sampai mulai terbentuk endapan.

Perhatikan bentuk kristal yang terbentuk dibawah mikroskop dan buat

gambar dari bentuk-bentuk kristal yang terlihat.

Larutan yang ingin diperiksa adalah 0,1 M glukosa, fruktosa, sukrosa, laktosa dan

maltosa.

3. Percobaan Trommer

Percobaan ini terdiri dari 2 bagian :

Reaksi Trommer 1

2 ml glukosa 2% + 2 tetes CuS04 5% dan 4 tetes larutan NaOH 10%.

Apa yang dapat dilihat ? Ulangi percobaan dengan gliserol!

Reaksi Trommer 2

Ke-2 tabung tersebut dipanaskan, akan terjadi endapan berwarna

jinggga/merah bata.

4. Test Benedict

2,5 ml larutan Benedict + 4 tetes larutan 0,1 M zat yang ingin diperiksa.

Campur dan didihkan selama 2 menit dibawah api atau masukkan ke dalam

penangas air yang mendidih selama 5 menit. Dinginkan perlahan-lahan.

Perhatikan apakah terjadi endapan dan warna dari endapan tersebut.

Endapan berwarna hijau, kuning atau merah menandakan reaksi positif.

Larutan yang ingin diperiksa adalah glukosa, fruktosa, galaktosa, arabinosa,

sukrosa, laktosa, maltosa dan larutan kanji 1 %.

5. Modifikasi test Barfoed

1 ml reagens Barfoed + 1 ml larutan yang ingin diperiksa. Kemudian

dipanaskan dalam penangas air yang mendidih selama 3 menit.

Dinginkan dengan air dingin selama 2 menit, kemudian (+) 1 ml

pereaksi

fosfomolibdat.

Warna biru tua menunjukkan adanya monosakharida atau adanya

disakharida yang sangat berlebihan.

Larutan yang ingin diperiksa adalah 0,01 M maltosa, laktosa, sukrosa,

glukosa

dan air sebagai blanko.

6. Reaksi Seliwanoff

0,5 ml larutan 0,1 M zat yang ingin diperiksa + 5 ml pereaksi Seliwanoff,

campur dan didihkan selama 30 detik tepat atau panaskan dalam penangas air

mendidih selama 60 detik.

Perhatikan warna yang terjadi. Bila terjadi endapan saring dan larutkan

dalam

alkohol. Larutan alkohol ini berwarna merah.

Larutan yang akan diperiksa adalah glukosa, fruktosa dan sukrosa.

7. Reaksi Tollens

2 ml pereaksi Tollens + 5 tetes gummi arabicum 5% dipanaskan dalam

penangas air yang mendidih. Reaksi (+) bila timbul warna merah anggur.

Ulangi percobaan dengan glukosa 2 %

8. Test Jodium

Pada lubang-lubang test plate porselin ditaruh masing-masing sedikit

pati, dekstrin, gum arab, inulin dan agar-agar,kemudian teteskan masing-

masing 1 tetes yodium 0,5 %. Perhatikan warna biru yang terjadi.

9. Hidrolisa pati (demonstrasi)

Campurkanl gram pati dengan 10 ml air sampai

homogen,

tuangkan perlahan-lahan ke dalam 90 ml air yang

mendidih sambil terus diaduk-aduk. Didihkan dan aduk terus sampai

cairan menjadi opalesent.

a. 10 ml larutan dimasukkan ke dalam tabung reaksi, tambahkan 6 tetes

HCI pekat dan panaskan dalam penangas air. Setiap 3 menit diambil 1

tetes larutan dan test dengan yodium pada suatu test plate. Volume

semula dipertahankan dan bila perlu tambahkan air. Teruskan

pemanasan sampai tidak terjadi warna dengan yodium. Dinginkan dan

dinetralkan dengan NaOH 4N sampai larutan bereaksi asam terhadap

lakmus dan bereaksi dan bereaksi basa terhadap merah congo. Test

sebagian larutan dengan test Seliwanoff, Benedict dan Osazon. Osazon

apa yang terbentuk ? Tuliskan persamaan reaksi untuk hidrolisa pati.

b. Sediakan 2 tabung yang masing-masing berisi 5 ml larutan pati.

Tambahkan beberapa tetes yodium ke setiap tabung. Hangatkan tabung

ke-1 perlahan-lahan dan perhatikan hilangnya warna, kemudian

dinginkan dan perhatikan warnanya. Tabung ke-2 + Natrium thiosulfat

1% tetes demi tetes sehingga warna biru hilang. Terangkan apa yang

terjadi!

L I P I D1. Daya larut

Periksa daya larut gajih dalam :

1) air

2) alkohol dingin dan

3) chloroform.

2 Hidrolisa sabun

Sepotong kecil sabun dalam tabung reaksi + 2-3 ml aquadest. Panaskan sampai

diperoleh suatu larutan pekat, dinginkan dibawah air kran.

Beri 2 tetes larutan fenolftalein dalam alkohol.

Cairan harus tetap tidak berwarna (agak kekuningan).

Bila diencerkan dengan air akan terjadi reaksi hidrolisa sehingga larutan

menjadi berwarna merah.

3. Daya mengemulsi dari sabun

5 ml air sabun + beberapa tetes minyak kelapa, campur dikocok dan dibiarkan

beberapa waktu.

5 ml air + beberapa tetes minyak kelapa, campur dan dikocok dan dibiarkan

beberapa waktu.

Apa yang terlihat pada tabung-tabung tersebut ?

4. Percobaan untuk menyatakan ikatan tidak jenuh

Sediakan 3 tabung :

1. Sedikit minyak kelapa + chloroform dalam jumlah yang sama

2. Sedikit margarin + " " "

3. Sedikit gajih + " " " .....................•

Ke dalam tiap tabung teteskan larutan Hubl tetes demi tetes.

Ulangi percobaan dengan KMnC>4 yang dibasakan dengan natrium karbonat.

5. Percobaan-percobaan dengan cholesterol.

Reaksi Salkowski

1 ml cholesterol 0,05% dalam chloroform + 1 ml H2SO4 pekat (tuang

perlahan-lahan dengan tabung dimiringkan). Jangan dikocok. Setelah ke-2

lapisan cairan terpisah, akan timbul berturut-turut warna merah, biru, hijau

dalam lapisan chloroform dan dalam lapisan cairan asam tampak fluoresensi

kuning.

b. Reaksi Liebermann-Burchard

2 ml larutan cholesterol 0,05 % dalam chloroform + 10 tetes asam asetat

anhidrida. Kedalam campuran ini ditambahkan 2-3 tetes H2SO4 pekat.

Kocoklah dan perhatikan warna yang timbul.

Percobaan terhadap asam-asam amino dalam protein

1. Reaksi biuret

Campurkan 2 ml larutan albumin 2% dengan 2 ml NaOH 10% dan tambahkan

1 tetes larutan CuSO4 7%.

Bila belum terbentuk warna merah jambu atau lembayung, tambahkan 1 tetes

CuSO4 (maksimal 10 tetes).

Ulangi percobaan dengan kasein 2% dan pepton 2%.

2. Reaksi ninhidrin

2 ml larutan albumin 2% ditambahkan 3 tetes larutan ninhidrin 1%.

Taruh dalam penangas air yang mendidih selama 10 menit.

Reaksi (+) bila terjadi warna biru.

Ulangi percobaan dengan (NH4)2SO4 jenuh, larutan kasein 0,2% dan pepton

0,2%.

3. Reaksi ksantoprotein (xanthoprotein)

Campurkan 2 ml larutan albumin 2% dengan 1 ml HNO3 pekat, akan terjadi

endapan berwarna putih.

Panaskan hati-hati, larutan tersebut akan berubah menjadi kuning.

Dinginkan dibawah keran dan dengan hati-hati.

Tambahkan tetes demi tetes larutan NaOH/NH4OH.

Perhatikan apa yang terjadi ?

Ulangi percobaan dengan gelatin 2%, larutan kasein 2% dan larutan fenol 2%.

4. Reaksi Millon

Tambahkan 2-3 tetes pereaksi Millon pada 2 ml larutan albumin 2%,

campurkan.

Terjadi endapan berwarna putih.

Panaskan dengan hati-hati.

Reaksi (+) bila terjadi warna merah daging.

Ulangi percobaan dengan gelatin, kasein 2% dan fenol 2% !

5. Reaksi Hopkins-Cole.

Sebanyak 2 ml larutan albumin 2% dicampur dengan 2 ml pereaksi

Hopkins-Cole dalam tabung reaksi.

Ditambahkan 3 ml H2SO4 pekat melalui dinding tabung sehingga membentuk

lapisan dari cairan.

Di diamkan, setelah beberapa detik akan terbentuk cincin violet (ungu) pada

pertemuan kedua lapisan cairan, bila positif mengandung triptofan.

Uji dilakukan terhadap larutan gelatin 2%, kasein 2%, dan pepton 2%.

6. Reaksi Hopkins-Cole

Campurkan 2 ml larutan albumin 2% + 2 ml pereaksi Hopkins-Cole.

Tambahkan dengan hati-hati melalui pinggir tabung asam sulfat pekat

sehingga terjadi 2 lapisan cairan.

Diamkan sebentar.

Perhatikan terjadinya cincin berwarna ungu pada perbatasan ke-2 cairan

tesebut.

Jangan dikocok.

Ulangi percobaan dengan kasein 2% dan gelatin 2%.

Presipitasi Protein (Denaturasi Protein)

1. Pengaruh asam anorganik kuat

5 ml larutan albumin 2% yang telah disaring ditambahkan beberapa tetes

HCl

pekat.

Campur dan perhatikan apakah terjadi presipitat?

Tambahkan HCl tetes demi tetes.

Perhatikan apakah presipitat yang telah terbentuk dapat larut kembali dengan

kelebihan asam?

Ulangi percobaan dengan H2SO4 pekat dan HNO3 pekat !

2. Pengaruh logam berat

5 ml larutan albumin 2% ditambahkan CuSO4 2% tetes demi tetes dan

perhatikan pengaruh tiap tetesan.

Apakah presipitat yang terjadi dapat larut kembali ?

Ulangi percobaan dengan Pb asetat dan FeCl3.

3. Presipitasi oleh berbagai pereaksi

5 ml larutan albumin 2% ditambahkan larutan asam pikrat jenuh tetes demi

tetes.

Perhatikan pengaruh tiap tetesan!

Apakah presipitat yang telah terbentuk dapat larut kembali dengan kelebihan

pereaksi atau pemanasan ?

Ulangi percobaan dengan asam trichloroasetat, asam sulfosalisilat, asam

fosfomolibdat dan asam tannat !

4. Salting out protein

1ml larutan putih telur dicampur dengan 4 ml larutan NaCl 1%, disaring dan

cairan filtrat dibagi pada 2 tabung :

Tabung 1 : Tambahkan (NH4)2SO4 jenuh (volume = putih telur).

Perhatikan apakah terjadi presipitat?

Encerkan dengan sedikit air.

Apakah presipitat ini reversible?

Tabung 2 : Tambahkan (NH4)2SO4 padat hingga jenuh.

Perhatikan apakah terjadi presipitat yang reversible?

Cairan disaring.

Pada filtratnya dilakukan test biuret dan pada endapannya dilakukan test

Millon.

Apa kesimpulan dari percobaan ini ?

5. Pengaruh alkohol terhadap protein

1 ml larutan albumin 2% dicampurkan dengan alkohol 95%.

Apakah terjadi presipitat ?

Apakah presipitat tersebut larut dalam air ?

Ulangi percobaan dengan gelatin 2% dan pepton 2%.