plagiat merupakan tindakan tidak terpuji - usd repository · iv halaman persembahan “karena...
TRANSCRIPT
i
UJI ANTIINFLAMASI FRAKSI ETANOL-HEKSAN EKSTRAK
METANOL-AIR DAUN Macaranga tanarius L. PADA MENCIT GALUR
SWISS TERINDUKSI KARAGENIN
SKRIPSI
Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat
Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.)
Program Studi Farmasi
Oleh:
Nurul Kusumawardani
NIM : 128114081
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SANATA DHARMA
YOGYAKARTA
2015
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
ii
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
iv
HALAMAN PERSEMBAHAN
“Karena sesungguhnya sesudah kesulitan itu ada kemudahan”
(QS. Alam Nasyrah : 94:5-6)
“Apabila kamu telah membulatkan tekad, maka bertawakallah kepada Allah. Sesungguhnya
Allah menyukai orang-orang yang bertawakkal kepada-Nya.”
(QS. Al-Imran/3 ayat 159)
Where there is a will,
There is a way,,,,,
Kupersembahkan karya ini untuk :
Allah SWT atas segala karunia yang telah diberikan,
Bapak, Ibu, dan Adik yang senantiasa memberi doa, dukungan semangat dan kasih sayang
Teman-teman yang telah mendukungku, serta Almamaterrku yang ku banggakan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
v
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
vi
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
vii
PRAKATA
Puji syukur penulis panjatkan kepada Tuhan Yang Maha Esa atas berkat
serta rahmat-Nya skripsi dengan judul “Uji Antiinflamasi Fraksi Etanol-Heksan
Ekstrak Metanol-Air Daun Macaranga tanarius L., pada Mencit Galur Swiss
Terinduksi Karagenin” dapat penulis selesaikan dengan baik dan sesuai waktu
yang telah ditetapkan.
Skripsi ini disusun untuk memenuhi salah satu syarat dalam memperoleh
gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.) Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma
Yogyakarta.
Penyelesaian skripsi ini tidak lepas dari dukungan serta bantuan dari
berbagai pihak, baik secara langsung maupun tidak langsung. Oleh karena itu,
penulis mengucapkan terimakasih kepada:
1. Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma
2. Ibu Phebe Hendra, MSi., Ph.D., Apt. selaku Dosen Pembimbing dan Dosen
Penguji pada skripsi ini, atas segala bimbingan, bantuan, dukungan, semangat
dan motivasi selama penelitian dan penyusunan skripsi.
3. Bapak Christianus Heru Setiawan, M.Sc., Apt. selaku Dosen Pembimbing
dan Dosen Penguji pada skripsi ini, atas segala bimbingan, bantuan dan
dukungan selama penelitian dan penyusunan skripsi.
4. Ibu Dita Maria Virginia, M.Sc., Apt. selaku Dosen Penguji pada skripsi ini,
atas segala saran dan bantuan selama penyusunan skripsi.
5. Ibu Damiana Sapta Candrasari, S.Si., M.Sc selaku Dosen Penguji pada skripsi
ini, atas segala saran dan bantuan selama penyusunan skripsi.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
viii
6. Ibu Agustina Setiawati, M.Sc., Apt. selaku Kepala Laboratorium Fakultas
Farmasi yang telah memberikan izin dalam penggunaan semua fasilitas
laboratorium untuk kepentingan skripsi ini.
7. Bapak Yohanes Dwiatmaka, M.Si., yang telah memberikan bantuan dalam
determinasi daun Macaranga tanarius L. pada penelitian ini.
8. Bapak Heru, Bapak Parjiman, Bapak Wagiran selaku Laboran Laboratorium
Fakultas Farmasi atas bantuan dan dukungannya kepada penulis selama
proses pengerjaan skripsi.
9. Keluarga Bapak Setiyono, Ibu Isna Taviyani, S.Pd, Setia Kusumaningrum
dan Eyang putri atas segala nasihat, dukungan, dan doa yang selalu
mengiringi.
10. Rekan-rekan tim Macaranga tanarius L., sekaligus sahabat-sahabat yang
selalu mendampingi : Antonia Vidya Kartika, Silvia Dwi Puspa Susanti, dan
Kristiyani Irawati atas kerjasama, dukungan, saran dan bantuannya penelitian
dan penyusunan skripsi ini.
11. Agriva Devaly Avista, S.Farm., Apt. atas segala bantuan, doa, dukungan,
saran dan motivasinya selama ini.
12. Teman-teman FKK B 20102, FSM B 2012 dan teman-teman Fakultas
Farmasi Universitas Sanata Dharma khususnya angkatan 2012 atas
kebersamaan dan dukungannya.
13. Semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu persatu oleh penulis yang telah
membantu selama proses penyusunan skripsi ini berlangsung.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
ix
Penulis menyadari bahwa setiap manusia tidak ada yang sempurna, dan
penulis menyadari bahwa dalam naskah skripsi ini masih terdapat kekurangan
mengingat keterbatasan pengetahuan dan kemampuan yang dimiliki oleh penulis.
Oleh karena itu, penulis mengharapkan adanya kritik dan saran yang membangun
demi kemajuan di masa yang akan datang. Akhir kata, penulis berharap agar
skripsi ini dapat bermanfaat bagi semua pihak, mahasiswa, lingkungan akademis,
masyarakat serta dapat memberikan sumbangan kecil bagi perkembangan ilmu
pengetahuan khususnya di bidang kefarmasian.
Yogyakarta, 12 Januari 2016
Penulis
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
x
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL ................................................................................................ i
HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ..................................................... ii
HALAMAN PENGESAHAN ................................................................................ iii
HALAMAN PERSEMBAHAN ............................................................................ iv
PERNYATAAN KEASLIAN KARYA ................................................................. v
LEMBAR PERNYATAAN PERSETUJUAN ...................................................... vi
PRAKATA ............................................................................................................ vii
DAFTAR ISI ........................................................................................................... x
DAFTAR TABEL ................................................................................................ xvi
DAFTAR GAMBAR .......................................................................................... xvii
DAFTAR LAMPIRAN ......................................................................................... xx
INTISARI ............................................................................................................ xxii
ABSTRACT ......................................................................................................... xxiii
BAB I. PENGANTAR ............................................................................................ 1
A. Latar Belakang ............................................................................................ 1
1. Rumusan masalah .............................................................................. 6
2. Keaslian penelitian ............................................................................. 6
3. Manfaat penelitian ............................................................................. 8
B. Tujuan Penelitian ........................................................................................ 8
1. Tujuan Umum .................................................................................... 8
2. Tujuan Khusus .................................................................................... 9
BAB II. TINJAUAN PUSTAKA .......................................................................... 10
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xi
A. Macaranga tanarius L .............................................................................. 10
1. Keterangan botani ............................................................................ 10
2. Sinonim ............................................................................................ 11
3. Penyebaran ....................................................................................... 11
4. Morfologi ......................................................................................... 11
5. Kandungan kimia ............................................................................. 12
6. Aktivitas farmakologis ..................................................................... 15
7. Kegunaan lain .................................................................................. 15
B. Inflamasi .................................................................................................... 15
1. Definisi inflamasi ............................................................................. 15
2. Tanda-tanda utama inflamasi ........................................................... 16
3. Jenis inflamasi .................................................................................. 17
4. Mekanisme terjadinya inflamasi ...................................................... 19
C. Karagenin .................................................................................................. 24
D. Obat Antiinflamasi Non Steroid (NSAID) ............................................... 26
E. Diklofenak. ................................................................................................ 28
F. Metode Uji Inflamasi ................................................................................ 30
G. Metode Penyarian...................................................................................... 34
1. Maserasi… ........................................................................................ 37
2. Ekstraksi Bertingkat ......................................................................... 38
H. Metanol .................................................................................................... 39
I. Etanol ........................................................................................................ 40
J. Heksan ........................................................................................................ 41
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xii
K. Landasan teori ........................................................................................... 41
L. Hipotesis .................................................................................................... 44
BAB III. METODE PENELITIAN....................................................................... 45
A. Jenis dan Rancangan Penelitian ................................................................ 45
B. Variabel Penelitian dan Definisi Operasional ........................................... 45
1. Variabel utama ................................................................................. 45
2. Variabel pengacau ............................................................................ 45
3. Definisi operasional ......................................................................... 46
C. Bahan Penelitian........................................................................................ 49
1.Hewan uji .......................................................................................... 49
2.Bahan uji ........................................................................................... 49
D. Alat Penelitian ........................................................................................... 51
1. Alat pembuatan serbuk kering daun Macaranga tanarius L ........... 51
2. Pembuatan fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun daun
Macaranga tanarius L ..................................................................... 51
3. Alat induksi udem telapak kaki belakang ....................................... 51
E. Tata Cara Penelitian .................................................................................. 52
1. Determinasi tanaman daun Macaranga tanarius L ......................... 52
2. Pengumpulan bahan uji .................................................................... 52
3. Pembuatan serbuk daun Macaranga tanarius L .............................. 52
4. Penetapan kadar air serbuk kering daun Macaranga tanarius L ..... 52
5. Pembuatan fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun
Macaranga tanarius L ..................................................................... 54
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xiii
6. Pembuatan suspending agent CMC-Na 1% .................................. 56
7. Pembuatan larutan karagenin 1% sebagai penginduksi udem ......... 56
8. Pembuatan larutan kalium diklofenak sebagai obat antiinflamasi ... 56
9. Penentuan kontrol negatif ................................................................ 56
10.Uji pendahuluan .............................................................................. 57
11.Penetapan konsentrasi pekat fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-
air daun Macaranga tanarius L ....................................................... 59
12.Penetapan dosis fraksi etaol-heksan ekstrak metanol-air daun
Macaranga tanarius L ..................................................................... 59
13. Penyiapan hewan uji ....................................................................... 61
14. Pengelompokan hewan uji ............................................................. 61
F. Tata Cara Analisis Hasil .......................................................................... 64
1. Analisis hasil untuk melihat aktivitas antiinflamasi ......................... 64
2. Menghitung presen penghambatan inflamasi ................................... 64
3. Perhitungan (%) potensi relatif daya antiinflamasi .......................... 65
4. Analisis hasil secara statistika .......................................................... 65
G. Ruang Lingkup Penelitian ....................................................................... 67
H. Uji Fitokimia Fraksi Etanol-Heksan Ekstrak Metanol-Air
Daun Macaranga tanarius L. ................................................................. 68
BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ............................................................. 71
A. Penyiapan Bahan ....................................................................................... 71
1. Hasil determinasi tanaman ............................................................... 72
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xiv
2. Pembuatan serbuk daun Macaranga tanarius L……………..........73
3. Penetapan kadar air serbuk kering daun Macaranga tanarius L….75
3. Fraksi etanol-heksan ekstrak metanol air daun
Macaranga tanarius L. .................................................................... 75
B. Hasil Skrining Fitokimia. .......................................................................... 80
C. Uji Pendahuluan ........................................................................................ 84
D. Hasil Pengujian Efek Antiinflamasi Fraksi Etanol-Heksan Ekstrak
Metanol-Air Daun Macaranga tanarius L.. .............................................. 89
1. Kontrol negatif ...................................................................................... 94
2. Kontrol positif diklofenak (Cataflam Fast®50mg ) dosis
4,48 mg/kgBB ....................................................................................... 98
3. Kelompok perlakuan fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun
Macaranga tanarius L. .......................................................................... 99
E. Potensi Relatif Daya Antiinflamasi Fraksi Etanol-Heksan Ekstrak
Metanol-Air Daun Macaranga tanarius L. ............................................. 105
BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN ............................................................. 114
A. Kesimpulan ............................................................................................. 114
B. Saran ........................................................................................................ 115
DAFTAR PUSTAKA ......................................................................................... 116
LAMPIRAN ........................................................................................................ 123
BIOGRAFI PENULIS ........................................................................................ 158
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xv
DAFTAR TABEL
Tabel I. Keaslian penelitian efek antiinflamasi daun Macaranga
tanarius L............................................................................... 7
Tabel II. Tanda-tanda utama inflamasi…………………....................... 16
Tabel III. Mediator yang berperan dalam reaksi inflamasi..................... 20
Tabel IV. Hasil pengujian fraksi etanol-hexan ektrak metanol air daun
Macaranga tanarius L.............................................................. 81
Tabel V. Kandungan senyawa daun Macaranga tanarius L. yang
diduga memiliki aktivitas antioksidan terhadap
penghambatan inflamasi…………………………................... 82
Tabel VI. Uji normalitas nilai rata-rata AUC (mm.menit) pada orientasi
penetapan dosis kalium diklofenak dan selang waktu
pemberiannya…........................................................................ 86
Tabel VII. Hasil uji LSD AUC total (mm.menit) pada orientasi dosis
efektif diklofenak dan rentang waktu pemberian karagenin
antara kelompok kontrol negatif dan kelompok diklofenak
rentang 15 menit……………………………………………... 86
Tabel VIII. Hasil uji LSD AUC total (mm.menit) pada orientasi dosis
efektif diklofenak dan rentang waktu pemberian karagenin
antara kelompok kelompok diklofenak rentang 15 dan 30
menit……………………………………………..................... 87
Tabel IX. Rata-rata nilai AUC (mm.menit) dan hasil pengujian
normalitas pada kelompok uji antiinflamasi………………….
89
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xvi
Tabel X. Hasil uji Mann-Whitney Test rata-rata nilai AUC (mm.menit)
pada mencit terinduksi karagenin 1%..................................... 92
Tabel XI. Rata-rata persen (%) penghambatan inflamasi pada kelompok
perlakuan uji antiinflamasi…………………………………… 93
Tabel XII. Uji Mann-Withney persen (%) penghambatan inflamasi
kelompok perlakuan uji antiinflamasi……………………….. 94
Tabel XIII.
Rata-rata persen (%) potensi relatif kelompok fraksi etanol-
heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L.
dibandingkan dengan kontrol positif diklofenak pada uji
antiinflamasi………………………………………………...... 106
Tabel XIV. Hasil uji Mann-Withney Test persen (%) potensi
antiinflamasi………………………………………………….. 108
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xvii
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Tumbuhan Macarang tanarius L........................................... 10
Gambar 2. Struktur senyawa kimia yang diisolasi dari daun Macaranga
tanarius L............................................................................ 13
Gambar 3. Struktur senyawa kimia yang diisolasi dari daun
Macaranga tanarius L............................................................ 14
Gambar 4. Manifestasi terjadinya inflamasi akut dan kronik…………… 17
Gambar 5. Metabolit asam arakidonat dan perannya dalam proses
inflamasi serta target dari beberapa obat antiinflamasi……… 23
Gambar 6. Struktur Natrium dan Kalium Diklofenak…………………… 28
Gambar 7. Flowchart langkah pembuatan ekstrak metanol-air daun
Macaranga tanarius L……………………………………..... 54
Gambar 8. Flowchart langkah pembuatan fraksi etanol-heksan dari hasil
ekstrak kental metanol-air daun Macaranga tanarius
(L)……………………………………………………………. 55
Gambar 9. Flowchart pengelompokan hewan uji pada tahap uji
pendahuluan (orientasi)……………………………………… 62
Gambar 10
Gambar 11
Flowchart pengelompokan hewan uji pada tahap perlakuan
uji antiinflamasi…………………………………………........
Flowchart ruang lingkup penelitian………………………….
63
67
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xviii
Gambar 12 Diagram batang rata-rata nilai AUC (mm.menit) pada
orientasi dosis efektif diklofenak dan rentang waktu
pemberian karagenin antara kelompok diklofenak rentang 15
dan 30 menit……………………………………………….....
86
Gambar 13 Diagram batang rata-rata nilai AUC (mm.menit) pada dosis
efektif diklofenak dan rentang waktu pemberian karagenin
antara kelompok diklofenak rentang 15 dan 30
menit………………………………………………................. 87
Gambar 14 Diagram batang rata-rata nilai AUC pada kelompok
perlakuan uji antiinflamasi…………………………………... 92
Gambar 15 Diagram batang persen (%) penghambatan inflamasi pada
masing-masing kelompok perlakuan uji antiinflamasi………. 94
Gambar 16 Grafik Nilai AUC Kontrol Negatif CMC-Na……………....... 96
Gambar 17 Diagram batang persen potensi (%) relatif daya antiinflamasi
pada masing-masing kelompok kontrol positif diklofenak
dan perlakuakan uji antiinflamasi………………………….... 107
Gambar 18 Pelepasan radikal bebas pada proses inflamasi……………… 109
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xix
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Surat pengesahan Medical and Health Research Ethics
Committee(MHREC)…………………………………………....... 124
Lampiran 2. Surat pengesahan determinasi daun Macaranga tanarius L…....... 125
Lampiran 3. Surat pengujian kadar air Serbuk Daun Macaranga tanarius L….. 126
Lampiran 4. Surat kalibrasi jangka sorong digital………………………........... 127
Lampiran 5. Surat legalitas penggunaan SPSS…..…………………………….. 128
Lampiran 6. Pengeringan dan serbuk daun Macaranga tanarius L…................. 129
Lampiran 7. Hasil Fraksi Etanol-heksan dari Ekstrak Metanol-Air daun
Macaranga tanarius L…………………………………................. 129
Lampiran 8. Pembuatan udem dan pengukuran udem kaki mencit……………... 130
Lampiran 9. Perhitungan dosis…………………………………………………... 131
Lampiran 10. Perhitungan persen rendamen fraksi etanol-heksan ekstrak
metanol-air daun Macaranga tanarius L…………………….......... 132
Lampiran 11. Analisis Statistika Data Orientasi Penentuan Dosis dan Selang
Waktu Pemberian Kalium Diklofenak……………………….......... 133
Lampiran 12. Hasil Pengolahan Analisis Statistika Data Perlakuan Uji
Antiinflamasi Fraksi Etanol-Heksan Ekstrak Metanol-Air Daun
Macaranga tanarius L., pada Mencit Galur Swiss Terinduksi
Karagenin…………………………………………………………... 137
Lampiran 13. Hasil uji statistika % penghambatan inflamasi pada perlakuan
fraksi etanol-heksan ektrak metanol-air daun Macaranga tanarius.. 145
Lampiran 14. Hasil pengolahan analisis statistika potensi relatif daya
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xx
antiinflamasi fraksi etanol-hekasan ektrak metanol-air daun
Macaranga tanarius L., pada mencit galur Swiss terinduksi
karagenin…………………………………………………………..
Lampiran 14. Hasil pengujian fitokimai secar kualitatif dengan metode uji
tabung pada fraksi etanol-heksan, ektrak metanol-air daun
Macaranga tanarius L.,…………………………………………... 156
151
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xxi
INTISARI
Macaranga tanarius L. merupakan tanaman yang secara tradisional telah
banyak dilaporkan berkhasiat, salah satunya digunakan untuk pencegahan
peradangan. Tanaman ini diduga memiliki potensi untuk dikembangkan sebagai
alternatif pengobatan inflamasi. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui
pengaruh pemberian sediaan fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun
Macaranga tanarius L. terhadap efek antiinflamasi pada mencit galur Swiss yang
terinduksi karagenin 1% .
Penelitian ini bersifat eksperimental murni dengan rancangan acak
lengkap pola searah. Digunakan tiga puluh ekor mencit jantan galur Swiss, umur
2-3 bulan, dengan berat 20-30 gram yang terbagi secara acak menjadi enam
kelompok. Kelompok I dan II (kontrol negatif aquadest dan CMC-Na 1%),
kelompok III (kontrol positif diklofenak 4,48 mg/kgBB), kelompok IV,V,VI
merupakan kelompok perlakuan dengan pemberian dosis fraksi etanol-heksan
ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L. berturut-turut sebesar 47,95;
95,9; dan 191,8 mg/kgBB. Udem pada telapak kaki mencit diukur menggunakan
jangka sorong digital selama enam jam mulai setelah terinduksi karagenin 1%.
Analisis hasil dilakukan dengan uji statistika non-parametrik test menggunakan
uji Krusskal-Wallis untuk mengetahui keberbedaan pada kelompok uji. Kemudian
dilanjutkan dengan analisis Post-Hoc untuk mengetahui kelompok mana yang
berbeda bermakna dengan uji Mann-Whitney.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa fraksi etanol-heksan ekstrak
metanol-air daun Macaranga tanarius L. memiliki efek antiinflamasi yang
peningkatan penghambatan inflamasinya sebanding dengan peningkatan dosis
fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L. Persen
penghambatan inslamasi pada dosis 47,95; 95,9; dan 191,8 mg/kgBB secara
berturut-turut sebesar 18,62; 24,19; dan 39,57 %, dengan potensi relatif daya
antiinflamasi dibandingkan terhadap diklofenak yang memiliki potensi relatif
daya antiinflamasi sebesar 100%, secara berturut-turut adalah 32,75; 42,55; dan
69,55 %.
Kata kunci: Antiinflamasi, Fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun
Macaranga tanarius L.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xxii
ABSTRACT
Macaranga tanarius L. is traditionally used to treat infllmation. This plant
has potential to be used in alternative inflammation treatment. The aim of the
research were to prove the anti-inflammatory effect of ethanol-hexane fraction
methanolic extract of Macaranga tanarius L., leaves in male Swiss mice induced
carrageenin 1%.
This research was purely experimental research with randomized complete
direct sampling design. The research used thirty male Swiss mice, in range of the
age of 2-3 month, and 20 – 30 gram weight. Group I and II was negative control
by giving aquadest and CMC-Na 1% dosed 191.8 mg/kgBW orally. Group III was
positive control given diclofenac potassium dosed 4.48 mg/kgBW orally. Group
IV-VI were the treatment group for fraction ethanol-hexane extract methanol-
aquadest of Macaranga tanarius L., leaves dosed 47.95; 95.9; and 191.8
mg/kgBW orally. Data were analyzed using non- parametric statistical with
Krusskal-Wallis test to know the difference in the test group. After that, the data
were analyzed using Post-Hoct to determine the differences significant in each
group by Mann-Whitney test.
The result showed there were anti-inflammatory effect fraction ethanol-
hexane extract methanol-aquadest of Macaranga tanarius L., leaves at doses of
47.95; 95.9; and 191.8 mg/kgBW reduced edema of the mice hind paw induced by
carrageenin progressively. Percent (%) inhibition were 18.62; 24.19; and 39.57 %.
The relative potential of anti-inflammatory power compared to potassium
diclofenac which has a relative potency of anti-inflmmatory power of 100%,
respectively were 32.75; 42.55; and 69.55%.
Keywords: Anti-inflammatory, Fraction ethanol-hexane extract methanol-
aquadest of Macaranga tanarius L. leaves
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
1
BAB I
PENGANTAR
A. Latar Belakang
Inflamasi atau peradangan merupakan suatu mekanisme perlindungan
tubuh yang berkaitan dengan adanya kerusakan jaringan. Perlindungan tersebut
dilakukan dengan cara menginaktifkan atau merusak organisme yang menyerang,
menghilangkan iritan, dan perbaikan jaringan. Inflamasi dapat diakibatkan karena
adanya infeksi mikroba, virus, atau akibat dari adanya rangsangan yang
merugikan baik secara kimia maupun mekanis. Tanda-tanda umum terjadinya
inflamasi seperti bengkak, nyeri, kemerahan, panas, dan hilangnya fungsi sel yang
mengakibatkan ketidaknyamanan bagi penderitanya, sehingga diperlukan suatu
penanganan untuk mengatasi terjadinya inflamasi tersebut (Supriyatna, Moelyono,
Iskandar, dan Febriyanti, 2015).
Saat ini telah tersedia obat-obat modern yang dapat mengendalikan reaksi
inflamasi, salah satunya adalah pemberian obat antiinflamasi non steroid (NSAID)
secara per oral (Tjay dan Kirana, 2002). NSAID bekerja pada kedua isoform dari
enzim cyclooxigenase, yaitu cyclooxigenase-1 (COX-1) dan COX-2. COX-1
merupakan suatu isoform konstitutif yang terdapat dalam jaringan normal,
sedangkan COX-2 terinduksi ketika berkembangnya peradangan. Penghambatan
pada jalur metabolisme cyclooxigenase yang memicu timbulnya mediator
inflamasi tersebut akan dapat mengendalikan proses inflamasi, sehingga inflamasi
dapat teratasi dengan pemberian NSAID.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
2
Selain adanya obat-obat modern antiinflamasi, pemanfaatan tumbuhan
obat dengan khasiat antiinflamasi perlu dilakukan sebagai alternatif pengobatan
inflamasi. Penggunaan obat tradisional hingga saat ini masih banyak digunakan
untuk meningkatkan kesehatan masyarakat di Indonesia. Pemanfaatan tanaman
tersebut merupakan upaya untuk mengembalikan dan memperkuat penyembuhan
secara alami, terutama digunakan untuk alternatif pengobatan penyakit ringan.
Menurut Magadula (2014), Genus Macaranga (Euphorbiaceae) yang
terdiri dari 300 spesies banyak ditemukan di daerah tropis, salah satunya di
Indonesia. Salah satu spesies dari genus Macaranga adalah Macaranga tanarius
L., di Thailand rebusan akarnya digunakan sebagai antipiretik dan antitusif,
sedangkan daunnya digunakan untuk menutupi luka sebagai antiinflamasi
(Magadula, 2014). Pemanfaatan tanaman obat tersebut menjadikan daun
Macaranga tanarius L, sebagai salah satu bahan alam yang berpotensi sebagai
alternatif untuk mengatasi inflamasi. Hal ini didasarkan pula pada hasil penelitian
sebelumnya oleh Phomart, Sutthivaiyakit, Chimnoi, Ruchirawat, and
Sutthivaiyakit (2005) melaporkan bahwa salah satu konstituen dari ekstrak n-
heksan dan kloroform dari daun Macaranga tanarius L. berupa flavonoid yaitu
tanarifuranonol, tanariflavanon C, tanariflavanon D yang memperlihatkan adanya
aktivitas antioksidan terhadap DPPH dan nymphaenol B sebagai agen
antiinflamasi pada uji siklooksigenase-2. Senyawa aktif sebagai antioksidan akan
mereduksi DPPH, dengan meyumbangkan elektron atau hindrogen, sehingga
radikal bebas (DPPH) akan menangkap satu elektron dari senyawa antioksidan
tersebut.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
3
Radikal bebas merupakan perantara yang dapat dengan cepat diubah
menjadi substansi tidak membahayakan bagi tubuh, namun apabila radikal bebas
tersebut bertemu dengan asam lemak tak jenuh ganda seperti halnya asam
arakidonat yang terbentuk ketika adanyanya proses inflamasi akan memperparah
terjadinya kerusakan sel. Ketika terjadi kerusakan jaringan, jumlah radikal bebas
akan meningkat seiring dengan peningkatan produksi mediator inflamasi hasil
metabolisme asam arakidonat, dengan begitu antioksidan endogen yang dihasilkan
oleh tubuh untuk menstabilkan radikal bebas tak mampu lagi mengatasinya secara
efektif sehingga dibutuhkan antioksidan dari luar atau eksogen (Wulandari dan
Hendra, 2011).
Penelitian oleh Matsunami, Takamori, Shinzato, Aramoto, Kondo, dan
Otsuka (2006) terhadap daun Macaranga tanarius L., menggunakan metode
penyarian ekstrak metanol melaporkan adanya kandungan senyawa dari daun
Macaranga tanarius L., yaitu glukosida megastigman (megastigmane glucoside),
terdiri dari macarangiosida A-C dan mallophenol B yang memiliki kemampuan
dalam menangkap radikal bebas. Penelitian tersebut dilanjutkan oleh Matsunami,
Otsuka, Kondo, Shizanto, Kawahata, Yamaguchi, dan Takeda (2009) dengan
menggunakan metode penyarian sama, melaporkan bahwa daun Macaranga
tanarius L., mengandung ligan glukosida yaitu (+)-pinoresinol 4-O-[6”-O-
galloyl]-β-D-glucopyranoside dan macarangioside E, kandungan senyawa
tersebut memiliki aktivitas penangkapan radikal bebas terhadap 2,2-diphenyl-1-
picrylhydrazyl (DPPH).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
4
Dalam penyariannya, metanol mampu melarutkan hampir semua
komponen bersifat polar hingga semi-polar (Al-Ash’ary, Supriyanti, dan
Zackiyah, 2010), sehingga tidak hanya senyawa glikosida namun masih banyak
senyawa semipolar lainnya yang dapat tersari dengan menggunakan pelarut
tersebut. Hal tersebut dibuktikan pada penelitian yang telah dilakukan oleh Puteri
dan Kawabata (2010) terhadap daun Macaranga tanarius L. menggunakan
metode penyarian ekstraksi dengan pelarut metanol yang dipartisi dengan air dan
etil asestat, kemudian hasil fraksi tersebut dianalisis dengan kromatografi kolom.
Hasil penelitian tersebut melaporkan adanya kandungan ellagitannins yang
merupakan golongan senyawa tanin. Kandungan tersebut terdiri dari mallotinic
acid, corilagin, macatannin, chebulagic acid, dan macatannin B yang memiliki
aktivitas penghambatan sukrase dan maltase pada pengujian antidiabetes. Selain
itu hasil penelitian Valdés, Figueroa, Carbo, Barragán, Herrera, and Aguilar
(2011) melaporkan bahwa kandungan ellagitannins memiliki kemampuan
penangkapan radikal bebas dan berperan terhadap inflamasi. Adanya aktivitas
antioksidan tersebut diduga dapat menangkap radikal bebas yang berperan
terhadap pembentukan inflamasi, sehingga kandungan senyawa ellagitannins
tersebut berpotensi untuk dikembangkan dan dilakukan penelitian lebih lanjut
mengenai aktivitasnya dalam penghambatan inflamasi.
Pada penelitian ini digunakan metode penyarian fraksi dengan pelarut
yang digunakan berupa etanol-heksan. Pemilihan pelarut tersebut didasarkan pada
prinsip like dissolve like dilihat dari kedekatan nilai log P antara struktur senyawa
yang telah dilaporkan terkandung dalam ekstrak metanol-air daun Macaranga
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
5
tanarius L. dengan nilai log P pelarut yang digunakan, log P tersebut
menggambarkan sifat polaritas masing-masing senyawa. Penggunaan prinsip
penyarian tersebut pada proses fraksinasi diharapkan dapat dilakukan secara
optimal sesuai tingkat kelarutan senyawa dalam pelarut yang digunakan, sehingga
memungkinkan diperolehnya senyawa antioksidan spesifik ellagitannins yang
dilaporkan terkandung pada hasil campuran ekstrak metanol-air.
Proses fraksinasi pada penelitian ini digunakan etanol-heksan, nilai log P
etanol sebesar -0,16 dan heksan sebesar 3,13 dengan log P campuran sebesar 2,97
yang merupakan pelarut semi-polar, tujuannya adalah ingin mendapatkan senyawa
chebullagic acid dengan nilai log P sebesar 2,30 dan macatannin b sebesar 2,57
yang merupakan senyawa semi polar, kedua senyawa tersebut merupakan
kelompok senyawa ellagitannins yang telah dilaporkan oleh Puteri dan Kawabata
(2010). Oleh karena itu pada penelitian ini, akan dilakukan pengujian apakah
senyawa dari golongan tannin tersebut selain memberikan efek antidiabetes dapat
pula menghambat inflamasi dengan kandungan senyawa yang memiliki aktivitas
dalam penangkapan radikal bebas tersebut.
Berdasarkan uraian di atas, maka peneliti tertarik untuk melakukan
pengujian terhadap aktivitas antiinflamasi fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air
daun Macaranga tanarius L. dengan menggunakan metode induksi karagenin 1%
pada telapak kaki belakang mencit yang merupakan model standar percobaan
inflamasi akut (Chakraborty, Devi, Rita, Sharatchandara, and Singh, 2004) dan
penelitian dengan menggunakan metode penyarian fraksi etanol-heksan ekstrak
metanol-air daun Macaranga tanarius L. berdasarkan penelusuran pustaka belum
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
6
pernah dilakukan sebelumnya. Penelitian ini diharapkan dapat memperoleh data
ilmiah yang mendukung dalam penggunaan serta pemanfaatan daun Macaranga
tanarius L. sebagai antiinflamasi.
1. Permasalahan
Berdasarkan uraian yang telah dikemukakan di atas, maka permasalahan
yang akan digunakana sebagai dasar penelitian adalah:
a. Apakah pemberian fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga
tanarius L. memiliki efek antiinflamasi pada mencit galur Swiss ?
b. Seberapa besar presentase fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun
Macaranga tanarius L. dalam memberikan penghambatan inflamasi akibat
injeksi karagenin 1% pada udem kaki belakang mencit ?
c. Berapakah besar potensi relatif daya antiinflamasi fraksi etanol-heksan ekstrak
metanol-air daun Macaranga tanarius L. pada mencit galur Swiss ?
d. Apakah terdapat hubungan kekerabatan antara dosis pemberian fraksi etanol-
heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L., terhadap efek
antiinflamasi pada mencit terinduksi karagenin 1% ?
2. Keaslian Penelitian
Beberapa penelitian terkait Macaranga tanarius L. dan aktivitasnya
sebagai antiinflamasi, sebagai berikut:
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
7
Tabel I. Keaslian Penelitian Efek Antiinflamasi
Macaranga tanarius L.
Judul dan Peneliti Metode Hasil Penelitian
Constituents of the Leaves of
Macaranga tanarius oleh
Phommart et al (2005)
Metode penyarian
menggunakan n-heksan
dan ekstrak kloroform
Macaranga tanarius.
Kandungan nymphaeol dan
tanariflavon dari ekstrak n-heksan
daun Macaranga tanarius L.,
sebagai antioksidan terhadap uji
DPPH serta nymphaeol B
memiliki efek antiinflamasi pada
uji cyclooxigenase-2.
Radical Scavanging Activities of
New Megastigmane Glucosides
from Macaranga tanarius (L.)
Mull-Arg, oleh Matsunami et al.
(2006).
Metode penyarian
ekstrak metanol daun
Macaranga tanarius L.
Kandungan macarangiosida A-C,
dan malofenol B, yang diisolasi
dari ekstrak metanol Macaranga
tanarius L., memperlihatkan
adanya aktivitas penangkapan
radikal terhadap DPPH.
Absolute configuration of (+)-
pinoresinol 4-O-[6” -O-galloyl]-β-
D glucopyranoside,
macarangiosides E, and F isolated
from the leaves of Macaranga
tanarius oleh Matsunami et al.
(2009).
Metode penyarian
ekstrak metanol daun
Macaranga tanarius L.
Kandungan glukosida berupa
senyawa (+)-pinoresinol 4-O-[6”
–O-galloyl]-β-D-glucopyranoside,
dan dua senyawa baru
megastigmane glucosides yaitu
macarangiosides E, and F
memperlihatkan adanya aktivitas
penangkapan radikal terhadap
DPPH.
Novel α-glucosidase inhibitors
from Macaranga tanarius L.
leaves oleh Puteri dan Kawabata
(2010).
Ekstrak etanol daun
Macaranga tanarius L.
dianalisis kromatografi
(HPLC) untuk
mengisolasi senyawa
aktif yang memiliki
aktivitas penghambatan
α-glucosidase yang
penting dalam
pengobatan
hiperglikemia.
Kandungan ellagitannis berupa
senyawa mallotinic acid,
corilagn, macatanni A,
chebulagic acid, dan macatannin
B. Kandungan senyawa tersebut
memiliki kemampuan
penghambatan sukrase dan
matase pada pengujian
antidiabetes.
Efek antiinflamasi daun
Macaranga tanarius L. dengan
pemberian ekstrak metanol-air
secara per oral oleh Kurniawaty
dkk. (2011).
Metode penyarian
ekstraksi metanol-air,
daun Macaranga
tanarius L.
Menunjukkan persen
penghambatan inflamasi pada
dosis 0,71; 2,1; dan 6,4 g/kgBB
secara berurutan adalah 23,3;
35,3; dan 47 %.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
8
Berdasarkan atas penelusuran pustaka mengenai efek antiinflamasi daun
Macaranga tanarius L. tersebut, penelitian tentang efek antiinflamasi fraksi
etanol-heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L., yang diberikan
secara per-oral pada mencit yang terinduksi karangenin 1% secara suplantar
belum pernah dilakukan.
3. Manfaat Penelitian
a. Manfaat teoritis. Hasil penelitian ini diharapkan dapat mengembangkan
ilmu mengenai pengobatan inflamasi secara herbal dan membuktikan efek
antiinflamasi pemberian fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun
Macaranga tanarius L.
b. Manfaat praktis. Penelitian ini diharapkan mampu memberikan informasi
ilmiah terkait manfaat, kemampuan penghambatan respon inflamasi, dan
dosis pemberian sediaan fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun
Macaranga tanarius L. yang dapat diaplikasikan untuk pengobatan
inflamasi secara herbal pada masyarakat.
B. Tujuan Penelitian
1. Tujuan umum
Mengetahui pengaruh pemberian sediaan fraksi etanol-heksan ekstrak
metanol-air daun Macaranga tanarius L. terhadap efek antiinflamasi pada
mencit galur Swiss yang terinduksi karagenin 1% .
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
9
2. Tujuan Khusus
a. Mengetahui besar penghambatan inflamasi dari fraksi etanol-heksan
ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L. terhadap efek
antiinflamasi pada mencit galur Swiss terinduksi karagenin 1%.
b. Mengetahui potensi relatif daya antiinflamasi fraksi etanol-heksan
ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L. pada mencit galur
Swiss terinduksi karagenin 1%.
c. Mengetahui ada tidaknya hubungan kekerabatan antara pemberian dosis
fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L.,
terhadap efek antiinflamasi pada mencit terinduksi karagenin 1%.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
10
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
A. Macaranga tanariuss L.
Gambar 1. Tumbuhan Macaranga tanarius L.
1. Keterangan Botani
Macaranga tanarius L., yang dapat dilihat pada (Gambar 1) dikenal
menjadi beberapa nama daerah antara lain Karahan, Tutup, Tutup ancur, dan
Senu (Jawa), Mapu (Batak) yang termasuk dalam family Euphorbiaceae dan
genus Macaranga (Anonim, 2013).
Taksonomi Macaranga tanarius L., menurut Magadula (2014) adalah
sebagai berikut:
Kingdom : Plantae (Tumbuhan)
Subkingdom : Tracheobionta (Tumbuhan berpembuluh)
Super Divisi : Spermatophyta (Menghasilkan biji)
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
11
Divisi : Maginoliophyta (Tumbuhan berbunga)
Kelas : Maginoliospsida (Berkeping dua/dikotil)
Sub Kelas : Rosidae
Ordo : Euphorbiaceae
Famili : Euphorbiaceae
Sub Famili : Acalyphoides
Bangsa : Acalypheae
Sub Bangsa : Macaranginae
Genus : Macaranga
Spesies : Macaranga tanarius (L.) Benth. Mull. Arg
(Magadula, 2014).
2. Sinonim
Ricinus tanarius L., Macaranga molliuscula Kurz, Macaranga tomentosa
Blume, Mappa tanarius (L.) Blume (Starr, Starr, and Loope, 2003).
3. Penyebaran
Macaranga tanarius L., merupakan tanaman pada daerah tropis seperti
Afrika, Madagaskar, Asia Tenggara, dan Pasifik. Di Malaysia, dilaporkan
terdapat sekitar 40 spesies yang dapat tumbuh (Lim, Lim, dan Yule, 2009).
4. Morfologi
Merupakan perdu atau pohon yang memiliki ukuran kecil sampai sedang
dengan ukuran pohon ± 27 meter. Tumbuhan ini akan mulai reproduktif apabila
telah memiliki tinggi mulai 5 meter. Macaranga tanarius L., memiliki ranting
yang padat, gundul, hingga berambut (rambut tunggal, pendek), cabang agak
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
12
tebal, berwarna hijau dan keabu-abuan. Jenis tanaman ini memiliki batang tegak,
daun berbentuk seperti bagun hati dan bulat (Steenis, Blommbergen, dan Eyma,
1992).
Daun Macaranga tanarius L., berseling, agak membundar, dengan stipula
besar. Daun penumpu bulat telur hingga segitiga, semi-persisten, tegak hingga
menyebar. Tidak melingkari ranting seluruhnya, dengan panjang 10-29 mm,
lebar 4-12 mm. Tangkai daun gundul hingga berambut yang memiliki panjang
hingga 22 cm. Daun berseling, bulat telur, memerisai dengan panjang 12-36 cm,
lebarnya 7-28 cm. Memiliki urat daun yang sekunder 7-10 cm dan akan berakhir
di tepi daun. Permukaan atas daun gundul hingga berambut yang terletak pada
urat-urat daun, permukaan bawah daun gundul hingga berambut rapat (Steenis et
al., 1992).
Jenis tanaman ini akan berbuah dan berbunga sepanjang tahun. Bunga
terletak di ketiak dan ditutupi oleh daun, perbungaan jantan bercabang, bunga-
bunga dalam ikatan di tiap brakteola dan tepi brakteola berjumbai. Perbungaan
betina bercabang, dengan brakteola yang melebar seperti daun (Steenis et al.,
1992).
5. Kandungan Kimia
Phommart et al. (2005) melaporkan adanya tiga kandungan baru dari
ekstrak n-heksan dan kloroform yang menunjukkan adanya aktivitas antioksidan
terhadap DPPH (2,2-difinil-1-pikrilhidrazil) yaitu tanarifuranonol, tanariflavonon
C, tanariflavanon D, beserta dengan tujuh kandungan yang telah diketahui yaitu
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
13
nymphaeol A, nymphaeol B, nymphaeol C, tanariflavanon B, blumenol A
(vomifoliol), blumenol B (7,8-dihydrovomifoliol), dan annuionone E.
Kandungan lain dari daun Macaranga tanarius L., dilaporkan oleh
Matsunami et al. (2006) menggunakan metode ekstrak metanol, yang dihilangkan
lemaknya dengan n-heksan dan dipartisi menggunakan pelarut etil asetat dan
butanol sehingga menghasilkan fraksi terlarut, untuk dianalisis spektroskopi.
Berdasarkan hasil penelitiannya ditemukan empat senyawa baru dari Macaranga
tanarius L., yaitu glukosida megastigman (megastigmane glucoside) yang
dinamakan macarangiosida A-D bersama dengan campuran mallophenol B,
lauriside E, methyl brevifolin carboxylate, hyperin, dan isoquercitrin (Gambar 2).
Gambar 2. Struktur senyawa kimia yang diisolasi dari daun Macaranga
tanarius L. (Matsunami et al., 2006).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
14
Hasil isolasi dan elusidasi struktur dari empat kandungan baru glukosida
megastigman bersama dengan lima senyawa lainnya memperlihatkan adanya
aktivitas penangkapan radikal bebas. Selain itu juga dilaporkan oleh Kawakami,
Harinantenaina, Matsunami, Otsuka, Shinzato, and Takeda (2008) daun
Macaranga tanarius L. mengandung senyawa prenylated flavanones yaitu
macaflavanones A-G, dua senyawa lainnya nymphaea C dan diterpene kolavenol.
Kemudian penemuan senyawa-senyawa tersebut dilanjutkan oleh Matsunami et
al. (2009), yang melaporkan bahwa daun Macaranga tanarius L., juga
mengandung ligan glukosida yaitu (+)-pinoresinol 4-O-[6”-O-galloyl]-β-D-
glucopyranoside, macarangioside E, dan F.
Gambar 3. Struktur senyawa kimia yang diisolasi dari daun
Macaranga tanarius L. (Puteri dan Kawabata, 2009).
Selain itu kandungan lain yang diisolasi dari daun Macaranga tanarius L.,
dilaporkan oleh Puteri dan Kawabata (2010) dengan metode ekstrak metanol,
yang residunya dipartisi menggunakan etil asetat dan air. Hasilnya menunjukkan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
15
adanya kandungan senyawa tannin berupa ellagitannins yang terdiri dari
mallotinic acid (1), corilagin (2), macatannin A (3), chebulagic acid (4), dan
macatannin B (5) dapat dilihat pada (Gambar 3). Kandungan tersebut memiliki
aktivitas penghambatan sukrase dan maltase pada uji antidiabetes.
6. Aktivitas Farmakologis
Secara empirik, Macaranga tanarius L. digunakan untuk mengatasi luka,
bengkak, bisul, dan memar (Magadula, 2014). Malaysia dan Thailand
menggunakan dekoksi akar Macaranga tanarius L. sebagai pengobatan
tradisional yaitu antitusif dan antipiretik. Akar keringnya digunakan sebagai agen
emetik, sedangkan daun segarnya digunakan untuk menutupi luka sebagai
antiinflamasi (Lim et al., 2009).
7. Kegunaan Lain
Secara tradisional, tumbuhan Macaranga tanarius L. digunakan sebagai
fermentasi pada tempe dan pakan hewan. Di China, digunakan sebagai produk
manufaktur seperti minuman sehat, dan ekstraknya digunakan sebagai bahan
pembuatan pasta gigi. Selain itu di Taiwan dan China, rebusan daun Macaranga
tanarius L., digunakan sebagai bahan pembuatan teh herbal (Lim et al., 2009).
B. Inflamasi
1. Definisi
Peradangan atau inflamasi adalah salah satu respon biologis terhadap
trauma fisik, panas, bahan kimia, infeksi karena virus dan bakteri (Wilmana and
Gan, 2007). Ketika proses inflamasi berlangsung, terjadi reaksi vaskular di mana
cairan, elemen-elemen darah, sel darah putih (leukosit), dan mediator kimia
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
16
berkumpul pada tempat jaringan untuk menetralkan dan menghilangkan agen-
agen berbahaya, serta untuk memperbaiki jaringan yang rusak (Kumar, Abbas,
and Aster, 2014).
2. Tanda-tanda utama inflamasi
Tanda-tanda kemerahan (rubor), pembengkakan (tumor), nyeri (dolor),
panas (calor), dan hilangnya fungsi (function laesa) (Supriyatna dkk., 2015),
dapat dilihat pada (Tabel II).
Tabel II. Tanda-tanda utama inflamasi
Tanda-tanda
inflamasi Keterangan
Kemerahan
atau
Rubor
Terjadi pada tahap pertama dari inflamasi. Darah berkumpul
pada daerah cedera akibat pelepasan mediator kimia dari tubuh
(kinin, prostaglandin, dan histamin).
Pembengkakan
atau tumor
Tahap kedua dari inflamasi. Plasma merembes ke dalam
jaringan interstisial pada tempat cedera. Kinin akan mendilatasi
arteriol dan meningkatkan permeabilitas kapiler.
Panas atau
calor
Panas pada tempat inflamasi dapat disebabkan adanya
pertambahan pengumpulan darah yang disalurkan oleh tubuh ke
permukaan yang mengalami radang lebih banyak daripada darah
yang disalurkan ke permukaan yang normal dan dapat terjadi
karena adanya pirogen yang merupakan substansi penyebab
timbulnya demam sehingga akan mengganggu pusat pengatur
panas pada hipotalamus.
Nyeri atau
dolor
Nyeri disebabkan oleh pembengkakan yang terjadi pada proses
inflamasi, kerusakan awal atau yang dihasilkan dari respon
inflamasi dan adanya pelepasan mediator-mediator kimia.
Hilangnya
fungsi atau
function laesa
Disebabkan karena adanya penumpukan cairan pada tempat
cedera jaringan dan rasa nyeri yang ditimbulkan, sehingga akan
mengurangi mobilitas pada daerah yang mengalami inflamasi.
(Punchard, Whelan, and Adcock, 2004).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
17
3. Jenis Inflamasi
Gambar 4. Manifestasi terjadinya inflamasi akut dan kronik
(Kumar et al., 2014).
Inflamasi dapat dibedakan menjadi dua jenis yaitu inflamasi akut dan
kronik. Perbeaan inflamasi akut dan kronik (Gambar 4) dapat dijelaskan sebagai
berikut:
a. Inflamasi akut
Inflamasi akut dapat terjadi selama beberapa menit atau dalam hitungan
hari. Inflamasi akut dapat terjadi karena infeksi bakteri, racun, dan trauma.
Tahapan terjadinya inflamasi terjadi setelah adanya goresan ataupun cedera yang
dapat mengakibatkan inflamasi. Terjadinya inflamasi akut ditandai dengan adanya
kemerahan yang akan menyebar di sekitar area cedera, panas (daerah yang
meradang akan lebih hangat dibandingkan dengan kulit disekitarnya), bengkak
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
18
karena adanya cairan eksudasi protein plasma maupun akumulasi leukosit
neutrofilik yang dominan, dan nyeri (Greene and Harris, 2008).
Karakteristik utama dalam peradangan akut adalah eksudasi cairan dan
protein plasma (udem) serta emigrasi leukosit terutama neutrofil. Berikut tiga
komponen utama terjadinya peradangan akut:
1. Dilatasi pada pembuluh darah dan peningkatan aliran darah sehingga
menyebabkan eritema dan timbulnya rasa hangat
2. Ekstravasasi, pengendapan cairan dan protein plasma yang menyebabkan
terjadinya udem
3. Emigrasi dan adanya akumulasi leukosit terutama neutrofil di tempat cedera.
Neutrofil akan mendominasi infiltrat peradangan selama 6-24 jam pertama
kemudian akan digantikan oleh monosit pada 24-48 jam berikutnya
(Kumar et al., 2014).
Apabila pada keadaan inflamasi akut tidak segera pulih atau kembali ke
fungsi normal dengan pembersihan rangsangan yang merugikan, pembersihan
mediator yang dilepaskan pada tahap inflamasi akut, penggantian sel yang luka
dapat menyebabkan adanya nanah jika terjadi pembentukan abses yang berlebihan
sehingga akan dapat berkembang menjadi fibrosis (hilangnya fungsi ditandai
dengan pergantian jaringan ikat) (Kumar et al., 2014).
b. Inflamasi kronik
Merupakan reaksi inflamasi yang dapat terjadi selama berbulan-bulan atau
bahkan bertahun-tahun yang menandakan masih adanya stimulus pro-inflamasi.
Inflamasi kronik dapat terjadi karena adanya infeksi virus, infeksi persisten (basil
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
19
tubercule, treponemia palidium (sifilis), atau mikroba lainnya), autoimmune
disease (rheumatoid arthritis). Apabila inflamasi yang terjadi berlangsung selama
lebih dari 6 bulan atau berkepanjangan, adanya cedera pada jaringan,
terbentuknya jaringan parut, dan respon imun maka inflamasi tersebut merupakan
inflamasi kronik. Selain dari durasi terjadinya hal yang utama untuk membedakan
inflamasi akut dan kronik adalah keterlibatan leukosit dan terjadinya fibrosis.
Leukosit yang terlibat dalam peradangan kronik adalah makrofag, yang akan
segera menggantikan neutrofil pada tahap awal terjadinya inflamasi akut (Greene
and Harris, 2008).
Inflamasi kronik ditentukan oleh peningkatan limfosit dan makrofag yang
berhubungan dengan proliferasi vaskular dan fibrosis. Kejadian vaskular tersebut
merupakan dilatasi awal dari arteriola-arteriola kecil yang berakibat pada
peningkatan aliran darah, diikuti dengan penurunan kemudian berhentinya
aliran darah dan peningkatan permeabilitas dari venula post kapiler, dengan
eksudasi cairan (Kumar, Abbas, Fausto, dan Mitchell, 2007).
4. Mekanisme terjadinya inflamasi
Inflamasi distimulasi oleh mediator kimiawi seperti histamin, bradikinin,
serotonin, leukotrien, dan prostaglandin yang dilepaskan oleh sel yang berperan
sebagai mediator inflamasi di dalam sistem kekebalan untuk melindungi jaringan
sekitar dari penyebaran infeksi. Sel yang berperan dalam proses terjadinya
inflamasi adalah jaringan makrofag, mast cell, dan endothelial cells, sel tersebut
akan melepaskan mediator inflamasi yang berbeda. Beberapa mediator yang
berperan pada proses inflamasi dapat dilihat pada tabel III.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
20
Tabel III. Mediator yang berperan dalam reaksi inflamasi
Reaksi Inflamsi Mediator
Vasodilatasi Histamin, Prostaglandin
Peningkatan permeabilitas vaskular Histamin, Serotonin, C3a dan C5a
(membebaskan vasoaktif amin dari
sel mast, dan sel lainnya), Leukotrien
C4, D4, E4
Kemotaksis, peningkatan leukosit TNF, IL-1, Kemokin, C3a, C5a,
Leukotrien B4
Panas IL-1, TNF, Prostaglandin
Nyeri Prostaglandin, Bradikinin
Kerusakan jaringan Enzim Lysosomal dari leukosit,
reactive oxygen
(Kumar et al., 2014).
Mediator inflamasi amin (histamine, 5-HT) akan segera muncul dan
dilepas, lipid (prostgladin, leukotrien, dan PAF) yang muncul beberapa menit dan
protein (sitokin seperti interleukin dan TNF) yang membutuhkan lebih dari 30
menit untuk keluar (Supriyatna dkk., 2015). Vasoactive amines, terdiri dari
histamin dan serotonin merupakan molekul yang disimpan dan dihasilkan dari sel
mast. Histamin dan serotonin, mediator pertama yang akan dilepaskan saat
terjadinya inflamasi akut. Pelepasan histamin oleh sel mast salah satunya dapat
terjadi karena adanya rangsangan cedera fisik seperti trauma atau panas. Namun
histamin tidak memberikan efek pada proses terjadinya inflamasi akut. Histamin
akan banyak berperan terhadap reaksi hipersensitivitas, seperti rhinitis alergi dan
urticaria (Rang, Dale, Ritter, Moore, 2003).
Eicosanoid dihasilkan de novo dari fosfolipid. Eicosanoid merupakan
modulator dari reaksi inflamasi. Apabila membran sel mengalami kerusakan
karena adanya rangsangan kimiawi, fisik, maupun mekanis maka enzim
fosfolipase akan diaktifkan untuk mengubah fosfolipid menjadi asam arakidonat
(Rang et al., 2003).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
21
Sumber utama dari eicosanoid adalah asam arakidonat atau arachidonic
acid (5,8,11,14-eicosatetraenoic acid) merupakan 20-karbon asam lemak tak
jenuh yang mengandung empat ikatan ganda (Rang et al., 2003). Produk
metabolime dari asam arakidonat akan mengakibatkan adanya proses biologi
seperti inflamasi dan hemostasis. Metabolit asam arakidonat disebut eicosanoid
yang akan memediasi hampir pada setiap proses terjadinya inflamasi (Kumar et
al., 2007). Peran asam arakidonat dalam proses terjadinya inflamasi yang dapat
dimetabolisme melalui dua jalur yaitu :
1. Jalur cyclooxygenase
Asam lemak cyclooxygenase yang terbagi menjadi dua bentuk yaitu
COX-1 dan COX-2. Enzim tersebut yang akan mengubah asam arakidonat
menjadi prostaglandin dan tromboksan (Rang et al., 2003). Produk yang
dihasilkan melalui jalur cyclooxygenase berupa Prostaglandin E2 (PGE2), PGD2,
PGF2α, PGI2 (prostacyclin), dan tromboksan A2 (TXA2). PGD2 merupakan
metabolit utama yang dihasilkan melalui jalur cyclooxygenase, bersama dengan
PGE2 dan PGF2α di sel mast, adanya metabolit tersebut mengakibatkan
terjadinya vasodilatasi dan mempotensiasi pembentukan udem karena adanya
peningkatan permeabilitas vaskular. Pada saat proses terjadinya inflamasi akut
PGE2 dan PGI2 akan dihasilkan oleh jaringan lokal dan pembuluh darah, selain
itu juga sel mast akan melepaskan PGD2. Pada inflamasi kronis, sel monosit atau
makrofag akan melepaskan PGE2 dan tromboksan A2 (TXA2) (Rang et al.,
2003).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
22
2. Jalur Lipoxygenases
Lipoxygenases yang akan berperan pada sintesis leukotrien, lipoxins, dan
komponen lainnya. 5-Lipoxygenase merupakan enzim metabolit asam arakidonat
yang dominan di neutrofil. Lipooksigenase bekerja pada asam arakidonat untuk
membentuk 5-hydroperoxy derivat dari asam arakidonat, 5-HPETE (5-
hydroperoxyeicosatetraenoic acid) yang kurang stabil dan direduksi menjadi 5-
HETE (5-hydroxyeicosatetraenoic acid) sebagai kemotaksis neutrofil atau diubah
menjadi golongan leukotrien (Rang et al., 2003).
Produk dari 5-HPETE disebut leukotriene A4 (LTA4) membentuk LTB4
atau LTC4 (cysteinyl-leukotrienes). LTB4 diproduksi oleh neutrofil dan makrofag
yang merupakan agen kemotaktik untuk neutrofil. LTC4, LTD4 dan LTE4
diproduksi oleh sel mast yang mengakibatkan vasokonstriksi, bronkopasma, dan
peningkatan permeabilitas vaskular. Lipoxins yang merupakan hasil dari jalur
lipoksigenase akan berperan dalam penghambatan inflamasi. Setelah leukosit
masuk jaringan akan mengubah lipoxygenase turunan dari asam arakidonat
menjadi lipoxin, yang menghambat kemotaksis neutofil dan adhesi endoelium,
sehingga berfungsi sebagai antagonis endogen leukotrien. Selain itu trombosit
juga diaktifkan, namun tidak dapat mensintesis lipoxin A4 dan B4 (LXA4 dan
LXB4), tetapi trombosit dapat membentuk metabolit dari intermediet LTA4 dari
neutrofil, dengan jalur biosintesis transelular. Mekanisme tersebut mengakibatkan
metabolit-metabolit asam arakidonat melewati satu sel ke sel yang lain, yang
terlibat dalam tahap inflamasi (Kumar et al., 2007). Mekanisme terjadinya
inflamasi dapat dilihat pada (Gambar 5).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
23
LTC4 (cysteinyl-leukotrienes) akan mengakibatkan adanya kontraksi pada
otot bronkial, dan terjadinya vasodilatasi pada pembuluh namun jantung akan
mengalami vasokonstriksi. LTB4 dapat ditemukan eksudat inflamasi dan
meruapakan mediator yang terdapat pada beberapa tipe inflamasi, seperti
rheumatoid arthritis, psoriasis (inflamasi kronis yang terjadi pada kulit) dan
ulcerative colitis. LTC4 merupakan mediator penting terjadinya asma (Rang et al.,
2003).
Gambar 5. Metabolit asam arakidonat dan perannya dalam proses inflamasi
serta target dari beberapa obat antiinflamasi (Kumar et al., 2014).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
24
C. Karagenin
Karagenin merupakan hasil ekstraksi spesies tertentu dari rumput laut
merah kelas Rhodophyceae yaitu Chondrus, Gigartina, dan Eucheuma species.
Jenis rumput laut tersebut pada umumnya banyak ditemukan di Samudera
Atlantik, Eropa, dan Amerika Utara (Necas dan Bartosikova, 2013). Secara
struktural karagenin atau sering disebut karagenan merupakan kelompok
polisakarida yang terdiri dari monomer galaktosa (Morris, 2003). Pemeriannya
berupa serbuk berwarna kecoklatan, berbentuk butiran kasar hingga serbuk halus,
tidak berbau, dan tidak berasa (Rowe, Sheskey, and Quinn, 2009).
Karagenin dapat digunakan dalam berbagai aplikasi seperti sebagai
pembentuk gel, stabilizing, thickening, formulasi pada kosmetik, dan aplikasi
industri. Selain itu karagenin memiliki kegunaan khusus sebagai senyawa iritan
yang digunakan untuk pengujian obat antiinflamasi dan merupakan senyawa
penginduksi inflamasi akut pada tikus atau mencit. Selain itu karagenin
merupakan model penginduksi inflamasi yang sederhana dan digunakan untuk
mengevaluasi nyeri di lokasi peradangan tanpa adanya cedera atau kerusakan pada
kaki yang meradang (Necas dan Bartosikova, 2013).
Berdasarkan Posadas, Bucci, Roviezzo, Rossi, Parente, Sautebin, and
Cirino (2004) melaporkan bahwa terdapat sekitar 400 laporan penelitian yang
menggunakan karagenin sebagai penginduksi inflamasi pada kaki tikus ataupun
mencit untuk menguji obat antiinflamasi serta untuk mempelajari mekanisme
yang terlibat dalam peradangan.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
25
Penelitian penggunaan karagenin sebagai model uji inflamasi juga telah
dilakukan oleh Necas dan Bartosikova (2013) pada kaki secara subplantar dengan
konsentrasi 1-3% yang dilarutkan pada larutan garam NaCl fisiologis 0,9% b/v.
Penggunaan konsentrasi yang lebih tinggi digunakan untuk model pengujian pada
kondisi patofisiologi tertentu. Karagenin diberikan secara suplantar dengan
volume sebesar 0,1 mL untuk tikus dan 0,05 mL untuk mencit (Suleyman,
Demircan, Karagoz, dan Ozta, 2004).
Berdasarkan kandungan sulfat dan potensi pembentukan gel, karagenin
dibedakan menjadi tiga yaitu lamda (λ) karagenin, iota (i) karagenin dan kappa (k)
karagenin. Lamda (λ) karagenin merupakan salah satu jenis karagenin yang
diketahui cepat menyebabkan inflamasi dan memiliki bentuk gel yang tidak keras
(Tobacman, Wallace, Zimmerman., 2001), sehingga dalam penelitian ini
digunakan karagenin sigma tipe (λ) sebagai penginduksi inflamasi pada mencit
jantan galur Swiss.
Mekanisme aksi karagenin sebagai senyawa penginduksi inflamasi
sinergis dengan beberapa mediator inflamasi seperti bradikinin, serotonin,
histamin, prostaglandin, leukotrien, dan chemotactic agents (Mariana, Fernandes,
Fingolo, Boylan, 2013). Penginduksian karagenin digambarkan secara bhipasic
yaitu memiliki dua fase untuk menyebabkan inflamasi. Berdasarkan Suleyman et
al. (2004) fase awal akan berakhir 60 menit setelah injeksi dan dihubungkan
dengan pelepasan histamin, serotonin, dan bradikinin. Fase akhir terjadi antara 60
menit setelah injeksi dan berakhir setelah 3 jam, yang dihubungkan dengan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
26
adanya pelepasan prostaglandin dan nutrofil yang menghasilkan radikal bebas
seperti superoksida dan radikal hidroksil.
Histamin, serotonin dan bradikinin adalah mediator yang terdeteksi pada
fase setelah diinduksi karagenin. Prostaglandin (PG) akan terlibat dalam
peningkatan permeabilitas vaskuler dan akan terdeteksi pada tahap akhir dari
peradangan. Terjadinya peradangan lokal atau sistemik dikaitkan dengan
peningkatan sitokin pro-inflamasi TNF-α, IL-1, dan IL-6. Fase kedua terjadi
peningkatan pembengkakan karena adanya produksi prostaglandin yang
meningkat dan adanya induksi cyclooxigenase (COX-2) pada kaki belakang
(Necas dan Bartosikova, 2013).
Zat lain yang dapat digunakan untuk memicu terbentuknya udem antara
lain: mustard oil 5%, dextran 1%, egg white fresh undiluted, serotonin kreatinin
sulfat, suspension of kaolin 5%, dan ovalbumin solution 1% (Vogel, 2002).
D. Obat Antiinflamasi Non Steroid (NSAID)
Non-Steroidal Antiinflamatory Drugs (NSAID) merupakan suatu
kelompok senyawa yang heterogen karena sering tidak berikatan secara kimiawi
atau memiliki struktur kimia berbeda yang sebagian besar merupakan asam
organik, namun memiliki kerja terapeutik dan efek samping tertentu yang sama.
Efek terapeutik utama NSAID adalah kemampuannya mengahambat pembentukan
prostaglandin. Enzim pertama pada jalur sintetik prostaglandin adalah
prostaglandin endoperoksida sintase atau asam lemak cyclooxigenase. Terdapat
dua bentuk cyclooxigenase, yaitu cyclooxigenase-1 (COX-1) dan cyclooxigenase-
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
27
2 (COX-2). COX-1 merupakan suatu isoform konstitutif yang terdapat dalam
kebanyakan sel dan jaringan normal, sedangkan COX-2 terinduksi saat
berkembang peradangan oleh sitokin dan mediator radang (Goodman dan Gilman,
2007).
Prostaglandin dibentuk melalui COX-2 dengan aktivitasnya memediaasi
adanya nyeri, inflamasi, demam, dan menghambat agregasi platelet. NSAID akan
menghambat baik COX-1 dan COX-2 yang disebut NSAID non-selektif,
sedangkan NSAID yang didominasi menghambat COX-2 disebut COX-2 inhibitor
(Day and Graham, 2013)
Kebanyakan NSAID merupakan asam organik yang bekerja sebagai
inhibitor aktivitas cyclooxigenase yang reversibel dan kompetitif. Sebagai asam
organik, senyawa tersebut akan diabsorpsi dengan baik secara oral, banyak yang
berikatan dengan protein plasma, dan diekskresi melalui filtrasi glomerulus atau
melalui sekresi tubulus. Kalium diklofenak, salah satu dari NSAID yang
merupakan asam organik akan menumpuk pada tempat radang, sehingga memiliki
efek sebagai antiradang (Goodman dan Gilman, 2007).
NSAID secara garis besar dibagi menjadi dua kelompok, yaitu NSAID
yang mempunyai waktu paruh pendek (≤ 6 jam) dan yang mempunyai waktu
paruh lama (>10 jam). NSAID long-acting seperti Naproxen, diformulasikan
untuk pengobatan dengan kondisi kronis, yang hanya membutuhkan dosis hanya
sekali atau dua kali sehari. NSAID short-acting memiliki onset yang relatif lebih
cepat dan akan lebih cocok untuk pengobatan yang termasuk dalam kategori akut.
Namun, paparan terus-menerus NSAID akan menimbulkan efek pada
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
28
gastrointestinal yang dapat merugikan (Masso, Patrignani, Tacconelli, Garcia,
2010).
E. Diklofenak
Diklofenak termasuk golongan NSAID (nonsteroidal anti-inflammatory
drug inhibitor COX nonselektif), bekerja dengan menghambat cyclooxygenase
(COX) yaitu isoform COX-1 dan COX-2 yang memiliki aktivitas sebagai
antiinflamasi, analgesik (nyeri ringan hingga sedang), dan antipiretik. NSAID
diklofenak terdapat dua basis yaitu kalium dan natrium diklofenak. Diklofenak
memiliki rumus kimia 2-[(2,6 dichlorophenyl)amino)] benzene acetic acid
monopotassium atau monosodium salt] yang tergantung pada basis garamnya
(Cole, 2011). Struktur kalium dan natrium diklofenak dapat dilihat pada (Gambar
6).
Gambar 6. Struktur Natrium dan Kalium Diklofenak
(Altman et al., 2015).
Kalium diklofenak, ion sodium dari sodium diklofenak diganti dengan ion
kalium. Zat aktif yang terkandung pada kalium diklofenak sama dengan zat aktif
sodium diklofenak, perbedaan hanya terdapat pada jenis garamnya. Pada
penelitian ini digunakan Diclofenac Potassium Powder, karena akan lebih mudah
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
29
larut dalam air dan memberikan pelepasan dan penyerapan yang lebih cepat dari
natrium diklofenak (Altman, Bosch, Brune, Patrignani, dan Young, 2015).
Kalium diklofenak berupa serbuk, ketika tertelan akan lebih cepat
mencapai sirkulasi sistemik. Konsentrasi plasma puncak akan dicapai dalam
waktu 10-15 menit setelah pemberian dosis (Altman et al., 2015). Bioavaibilitas
sistemiknya hanya antara 30-70% karena melewati first pass metabolism
(Katzung, 2001). Diklofenak akan diakumulasi di cairan sinovilia yang
menjelaskan efek terapi di sendi jauh lebih panjang dari waktu paruh (t1/2) obat
tersebut di dalam plasma yang singkat yaitu 2 jam. Dua jam setelah diklofenak
mencapai konsentrasi maksimal di dalam plasma, konsentrasi diklofenak akan
lebih tinggi di cairan sinovial, dengan waktu paruh eliminasi dari cairan sinovial
sekitar 3-6 jam. Efek samping yang lazim ialah mual, gastritis, eritemia kulit dan
sakit kepala. Kontraindikasi obat ini adalah penderita hipersensitivitas terhadap
diklofenak atau penderita asma, urtikria atau alergi pada pemberian NSAID, serta
penderita tukak lambung. Dosis yang digunakan untuk orang dewasa 100-150
mg/hari terbagi dua atau tiga dosis (Altman et al,, 2015).
Mekanisme diklofenak menghambat enzim COX-1 dan COX-2.
Pengikatan COX isozim untuk menghambat sintesis prostaglandin [PG]-E2. [PG]-
E2 merupakan prostanoid dominan yang diproduksi dalam peradangan dan akan
dihambat oleh obat golongan NSAID yang diyakini menjadi mekanisme utama
untuk memberikan efek analgsik dan anti-inflamasi yang kuat. Diklofenak
memiliki selektivitas tinggi untuk mengahmbat COX-2 dibandingkan COX-1
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
30
isoenzim. COX-2 diinduksi oleh rangsangan proinflamasi seperti TNF α, IL-2,
IFNγ dan mediator inflamasi yang lainnya (Altman et al., 2015).
Metabolit utama dari diklofenak adalah 4-hydroxydiclofenac, setelah
biotransformasi menjadi glukuronida dan konjugat sulfat dari metabolitnya,
diekskeresikan dalam urin dan empedu. Sekitar 65% dari dosis diklofenak
diekskresikan dalam urin dan 35% empedu sebagai konjugat diklofenak (Altman
et al, 2015).
Penggunaan diklofenak serbuk yang dikemas dalam bentuk powder
packets secara umum dilakukan dengan cara melarutkan 1 packets ke dalam 30-60
mL air atau tidak melebihi 240 mL air. Kalium diklofenak serbuk akan larut
sempurna dengan air (Uppoor, 2007).
F. Metode Uji Inflamasi
a. Model Inflamasi Akut
1. Induksi Karagenin
Pengujian inflamasi akut untuk menentukan aktivitas antiinflamasi secara
non-imunologi dapat digunakan penginduksi berupa suspensi karagenin yang
disuntikan secara subplantar pada kaki belakang tikus. Pengukuran aktivitas
penghambatan inflamasi dapat digunakan plethysmometer method, sehingga dapat
diketahui volume kaki tikus yang telah terinduksi oleh senyawa inflamasi (Gupta,
2013). Aktivitas antiinflamasi obat ditunjukkan oleh kemampuannya mengurangi
udem yang diinduksi pada kaki tikus jantan atau betina (Vogel, 2002).
Respon inflamasi akut ditandai dengan peningkatan permeabilitas
pembuluh darah dan infiltrasi seluler yang meyebabkan pembentukan udem
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
31
sehingga terjadi ekstravasasi cairan dan protein serta akumulasi leukosit di lokasi
inflamasi.
Metode carageenan-induced paw edema merupakan metode yang telah
banyak digunakan sebagai metode pengujian aktivitas antiinflamasi dengan
menggunakan hewan uji (Necas, 2013). Metode tersebut telah dijelaskan pula oleh
Chakraborty et al (2004), merupakan standar metode yang digunakan untuk
penelitian inflamasi akut. Selain itu, penggunaan metode tersebut dengan induksi
karagenin pada kaki tikus telah banyak digunakan untuk menguji obat
antiinflamasi baru serta digunakan untuk mempelajari mekanisme yang terlibat
dalam peradangan. Sekitar 400 penelitian telah menggunakan metode udem kaki
tikus.
Karagenin merupakan salah satu senyawa iritan yang digunakan sebagai
agen patologi penyebab inflamasi (Chakraborty et al, 2004). Karagenin yang
diinduksi pada telapak kaki tikus merupakan pengujian yang telah banyak
digunakan untuk menentukan aktivitas antiinflamasi (Posadas et al., 2004).
Berdasarkan penelitian terdahulu yang dilakukan oleh Nantel, Denis, Gordon,
Northey, Cirino, dan Metters (1999) menunjukkan bahwa COX-2 yang
merupakan mediator yang diinduksi ketika adanya peradangan akan mencapai
maksimal setelah 1 jam penginjeksian karagenin. Berdasarkan analisis literatur
yang telah dilakukan Posadas et al. (2004) menunjukkan bahwa injeksi karagenin
1% pada kaki mencit menyebabkan udem selama waktu pengamatan yaitu 6 jam
pengamatan.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
32
Pengukuran besarnya udem pada telapak kaki mencit sebagai tanda adanya
respon inflamasi pada penelitian ini digunakan jangka sorong digital yang telah
dilakukan kalibrasi (Lampiran 4). Jangka sorong memiliki kelibihan dibandingkan
dengan metode pengukuran dengan potong kaki, berdasarkan hasil penelitian yang
dilakukan oleh Juma’a, Ahmed, Nurman, and Hussain (2009) menunjukkan hasil
bahwa dengan menggunakan metode potong kaki hasil pengukuran pada setiap
tikus berbeda tergantung pada tempat pemotongan kakinya, sedangkan apabila
pengukuran dengan menggunakan jangka sorong menunjukkan hasil pengukuran
yang tidak bervariasi atau sama pada setiap pengukuran pada telapak kaki tikus
yang mengalami udem. Selain itu jangka sorong memiliki beberapa kelebihan
dalam penggunaannya, antara lain yaitu mudah dalam pengaplikasiannya,
memiliki angka yang cukup akurat, dan tidak diperlukannya pengorbanan hewan
uji seperti pada metode potong kaki.
Kelebihan dari metode uji carageenan-induced paw edema pada penelitian
ini adalah sederhana dan sering digunakan untuk mengevaluasi potensi senyawa
yang belum diketahui (sebagai skrining awal), cepat, pengukuran udema dapat
dilakukan lebih akurat dengan mengukur pada bagian telapak kaki yang
mengalami udem secara langsung, dan mudah diamati pembentukan udemnya
(Vogel, 2002). Kekurangan dari metode uji ini adalah pada teknik penyuntikan
induksi udem pada telapak kaki hewan uji dengan menggunakan karagenin secara
suplantar yang tidak menjamin pembentukan volume udem yang seragam
sehingga dapat mempengaruhi nilai simpangan pada masing-masing kelompok
jewan uji yang cukup besar. Oleh karena itu, pengatasannya adalah pada saat
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
33
penyuntikan udem dilakukan oleh orang yang telah terlatih dan terbiasa dalam
melakukan penyuntikan secara suplantar, sehingga hasil volume udem pada setiap
kaki mencit akan sama dan dapat mengurangi variansi yang dihasilkan pada
masing-masing kelompok hewan uji.
2. Induksi Formalin
Formalin merupakan larutan formaldehid yang sekitar 37% larut dalam air,
kandungan unsur aldehid yang terdapat dalam formalin akan mudah bereaksi
dengan protein sehingga mengakibatkan kematian sel. Formalin akan
menghasilkan inflamasi lokal dan nyeri. Pada penelitian yang dilakukan oleh
Nathania (2011), formalin yang digunakan memiliki konsentrasi 0,5% dan
diberikan sebanyak 0,025 mL dengan cara diinjeksikan pada mencit secara
subplantar. Pengukuran tebal kaki mencit dilakukan pada menit ke 0, 15, 30, 45,
60, 90, 120, 150, 180, 210, 240, 270, 300, 330, 360 selama 6 jam, dengan
menggunakan jangka sorong yang telah dikalibrasi.
b. Model Inflamasi Sub-akut
Modifikasi metode udem buatan dengan granuloma pounch,
penginduksian udem dilakukan dengan cara mencukur bulu pada bagian
punggung mencit terlebih dahulu dengan diameter ± 3 cm hingga bulu benar-
benar hilang. Pada bagian punggung yang telah dicukur disuntikkan 5 mL udara
secara subkutan hingga terbentuk kantong udara. Setelah 24 jam kantong udara
yang terbentuk dihisap udaranya hingga kempes. Ditambahkan larutan karagenin
2% sebanyak 0,2 mL pada tempat yang terdapat kantong udara (Verawati, Aria,
dan Novicaresa, 2011).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
34
Sediaan uji yang digunakan adalah hidrokortinson asetat diberikan secara
topikal segera setelah pemberian karagenin 2%, adapun pemberian obat dilakukan
selama 4 hari. Pengukuran volume radang dilakukan pada hari ke lima, eksudat
(cairan yang tertimbun dalam jaringan atau ruangan yang diakibatkan adanya
peningkatan permeabilitas pembluh darah) yang terbentuk diambil dengan
menggunakan jarum suntuk dan diukur volumenya. Selain itu juga, pada eksudat
tersebut dilakukan pengamatan menggunakan mikroskop untuk melihat jumlah sel
neutrofil, eusinofil, limfosit, dan sel monosit (Verawati dkk. (2011).
c. Model Inflamasi Kronik
Metode Induksi Arthritis, merupakan metode yang digunakan untuk
induksi arthritis rheumatoid yang merupakan inflamasi kronik. Motede induksi ini
bertujuan untuk menghasilkan reaksi imun yang menyebabkan inflamasi. Induksi
dapat dilakukan dengan menginjeksikan sejumlah antigen ke hewan uji. Pada
penelitian yang dilakukan Gupta, Bharadwaj, Lata, Sharma, Kacker, and Sharma
(2013) digunakan formaldehid sebagai penginduksi arthritis. Formaldehid 2%
(v/v) diinjeksikan secara subplantar sebanyak 0,1 mL pada telapak kaki tikus pada
hari pertama hingga ketiga selama percobaan. Agen antiartritis diberikan secara
berturut-turut selama 10 hari. Perubahan volume telapak kaki berupa udem diukur
dengan menggunakan plethysmometer.
G. Metode Penyarian
Ekstraksi merupakan proses pemisahan bahan dari campuran dengan
menggunakan pelarut. Ekstrak secara terminologi umum terdiri dari ekstrak air,
ekstrak kental, dan ekstrak kering. Ekstrak adalah sediaan yang diperoleh dengan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
35
cara ekstraksi tanaman obat dengan ukuran partikel tertentu dan menggunakan
medium pengekstraksi (menstruum) yang tertentu pula. Ekstrak yang diperoleh
setelah pemisahan cairan dari residu tanaman obat dinamakan “micella” (Agoes,
2009).
Cairan penyari dalam proses ekstraksi menggunakan pelarut yang sesuai
dengan kandungan senyawa atau optimal untuk kandungan senyawa yang
berkhasiat sehingga dalam ekstrak dapat mengandung senyawa yang diinginkan
dan dapat terpisah dari senyawa-senyawa lain (Depkes RI, 2000). Pemilihan
pelarut untuk ekstraksi sangat penting supaya ekstraksi senyawa aktif dapat
efisien dan mengeliminasi komponen yang tidak diinginkan serta pemilihan
pelarut tersebut tidak mengubah aktivitas farmakologinya (Supriyatna dkk.,
2014).
Ekstrak air, merupakan ekstrak menggunakan pelarut air sebagai cairan
pengekstraksi. Hasil ekstraksi dalam bentuk ekstrak ini dapat digunakan
langsung atau digunakan setelah waktu tertentu. Pembuatan ekstrak air dapat
dilakukan dengan cara decoctum (dekok) yaitu penyari menggunakan simplisia
dengan perbandingan dan derajat kehalusan tertentu. Cairan penyari air
digunakan pada suhu 900-95
0C selama 30 menit. Infusum (infus) seperti halnya
dekok hanya saja waktu penyarian selama 15 menit (Agoes, 2009).
Pada umumnya, penyari infusum dalam bentuk infus zat larut air dari
simplisia tanaman. Penyarian dapat dilakukan dengan penambahan bahan
tertentu untuk optimasi proses penyarian. Coque (Penggodokan) penyarian
dengan cara menggodok tanaman obat atau jamu menggunakan api langsung.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
36
Hasil godokan setelah mendidih dimanfaatkan sebagai obat secara keseluruhan.
Cara ini sering digunakan dalam konsumsi jamu tradisional. Seduhan, metode
ini menggunakan air mendidih, simplisia direndam dalam air panas selama
waktu tertentu (5-10 menit) seperti halnya membuat teh seduhan. Cara ini masih
sering digunakan untuk konsumsi jamu seduh dan kelompok teh. Maserasi
merupakan penyarian simplisia menggunakan bermacam pelarut pada suhu
kamar selama beberapa waktu. Sedangkan, perkolasi merupakan penyarian
dengan menggunakan pelarut yang selalu baru sampai semua bahan aktif
terekstraksi secara keseluruhan (Agoes, 2009).
Ekstrak kental, pada suhu kamar apabila hangat tidak berbentuk cair.
Ekstrak yang diperoleh dari ekstrak cair yang diuapkan larutan penyarinya
secara hati-hati. Ekstrak kental merupakan massa kental yang mengandung
bermacam konsentrasi dan kekuatan bahan berkhasiat serta dapat disesuaikan
(sesuai ketentuan) dengan penambahan bahan aktif alam atau dengan
penambahan sejumlah bahan inert, seperti dekstrin, laktosa, dan sebagainya.
Ekstrak kental memiliki stabilitas yang rendah dan mudah ditumbuhi
mikroorganisme, pemakaian ekstrak kental secara luas telah digantikan oleh
ekstrak kering (Agoes, 2009).
Ekstrak kering (extr sicca), merupakan ekstrak tanaman yang diperoleh
dengan cara pemekatan dan pegeringan ekstrak cair di bawah kondisi lemah
(suhu dan tekanan rendah). Konsentrasi bahan aktif dalam sediaan akhir dapat
disesuaikan dengan penambahan bahan inert (Agoes, 2009).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
37
Metode penyarian yang digunakan dalam penelitian ini adalah fraksinasi
dari hasil ekstraksi padat-cair dengan maserasi yang maseratnya diuapkan pada
rotary evaporator hingga menghasilkan ekstrak kental untuk proses selanjutnya
yaitu fraksinasi menggunakan pelarut etanol-heksan. Penentuan penggunaan
pelarut berdasarkan tingkat kelarutan senyawa pada pelarut yang digunakan
sehingga suatu senyawa akan mudah larut dalam pelarut yang memiliki polaritas
sama (Dharmawan, Darmaji, dan Harmayani, 1999). Berikut penjelasan proses
ekstraksi yang dilakukan pada penelitian ini:
1. Maserasi
Maserasi adalah proses ekstraksi yang dilakukan pada suhu kamar,
maserasi memungkinkan untuk pelarut menembus struktur seluler pada
tumbuhan dan melarutkan senyawa aktif di dalamnya (Supriyatna, Moelyono,
Iskandar, Febriyanti, 2014). Cara penyarian simplisia secara maserasi dengan
menggunakan cairan penyari dan pengojokan beberapa kali pada suhu ruangan
akan mengakibatkan cairan penyari menembus dinding sel dan masuk ke rongga
sel. Perbedaan konsentrasi antara larutan di dalam dan di luar sel membuat
larutan terpekat yang mengandung zat aktif akan terdesak ke luar dan larut pada
pelarut yang telah digunakan dan sesuai dengan kandungan zat aktif yang
terkandung dalam tumbuhan. Peristiwa ini terjadi secara berulang sehingga
terjadi kesetimbangan konsentrasi di dalam dan di luar sel. Jika telah terjadi
kesetimbangan maka penyarian akan berhenti, sehingga perlu dilakukannya
remaserasi. Remaserasi adalah pengulangan penambahan pelarut yang sama
dengan pelarut sebelumnya digunakan untuk maserasi. Penambahan pelarut
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
38
dilakukan setelah penyarian maserasi yang pertama dan seterusnya (Depkes RI,
1986).
Keuntungan penyarian maserasi yaitu, peralatan yang digunakan
sederhana dengan pengerjaan yang mudah. Kerugian dari metode tersebut adalah
waktu yang dibutuhkan lama dan penyarian yang kurang sempurna (Depkes RI,
1986).
2. Ekstraksi Bertingkat
Menurut Damayanti dan Suparjana (cit Prasetyo, 2013), telah
dikembangkan metode baru yaitu ekstraksi bertingkat dimana ekstraksi
menggunakan sederet pelarut dengan kepolaran yang berbeda, mulai dari pelarut
non polar lalu pelarut yang lebih polar. Penyarian menggunakan metode ekstraksi
bertingkat yang dilakukan dengan maserasi menggunakan beberapa cairan
penyari disebut sebagai fraksinasi karena cairan penyari yang digunakan berbeda
kepolarannya sehingga senyawa dalam fraksi yang didapat telah mengalami
pemisahan bersadarkan kepolarannya. Pada penelitian ini digunakan pelarut
heksan dan etanol, heksan memiliki nilai log P = 3,13 bersifat semi-polar
sedangkan etanol memiliki nilai log P = - 0,16 bersifat polar. Kriteria
penggolongan kepolaran senyawa didasarkan pada nilai Log P, apabila nilai log
P < 2 tergolong polar, log P 2 < log P < 4 (semi-polar) dan log P > 4 (non-
polar) (Holmberg, 2003).
Kandungan yang didapatkan dari ekstrak metanol-air masih tergolong
kompleks karena dapat menyari senyawa seperti anthocyanine, terpenoid,
saponin, tanin, flavonoid, pholyphenols, lactones, lectin (Tiwari, Kumar, Kaur,
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
39
Kaur, dan Kaur, 2011). Sedangkan pada penelitian ini akan mengambil senyawa
megastigmane glycosides dan kelompok senyawa ellagitannins, sehingga
digunakan pelarut etanol-heksan yang memiliki kepolaran berbeda dan telah
disesuaikan dengan tingkat kelarutan senyawa terhadap pelarut yang digunakan.
Hal ini dapat dilihat dari kedekatan nilai log P senyawa dengan log P campuran
pelarut yang digunakan untuk menarik senyawa tersebut.
Keuntungan metode ekstraksi bertingkat ini adalah semua senyawa yang
berbeda polaritasnya dapat diekstraksi berdasarkan kepolaran terhadap pelarut
tertentu. Keuntungan penggunaan metode fraksi dibandingkan dengan dekok dan
infusa yang dibuat dengan air adalah pada dekok dan infusa konsentrasi
termaserasi umumnya lebih rendah dan dibutuhkan penambahan pengawet. Selain
itu, fraksi mengandung bahan aktif hasil penguraian dengan tahapan yang lebih
banyak dan kandungan alkohol sehingga tidak diperlukan pengawet
(Agoes,2009).
H. Metanol
Pelarut yang cocok digunakan untuk campuran dengan air (panas atau
dingin) adalah metanol, etanol, aseton, dan etil asetat. Metanol dan etanol telah
banyak digunakan untuk mengekstrak antioksidan (Sultana, Anwar, dan Ashraf,
2009).
Metanol atau methyl alcohol memiliki rumus molekul CH4O, merupakan
cairan yang tidak berwarna dan mudah menguap dengan bau yang menyengat
seperti etil alkohol, selain itu metanol dapat bercampur sempurna dengan air.
Metanol memiliki titik didih 650C dan nilai log P sebesar -0,76 yang tergolong
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
40
polar, pada umumnya digunakan sebagai pelarut dalam sintesis kimia, pengawet,
pembuatan bahan kimia, pelarut pada pembuatan cat dan plastik (National Center
for Biotechnology Information, 2015).
Metanol banyak digunakan sebagai larutan penyari pada metode ekstraksi
maserasi, hal ini dikarenakan metanol diduga mampu melarutkan hampir semua
komponen baik yang bersifat polar, semi polar, maupun non-polar sehingga
metanol disebut sebagai pelarut universal (Al-Ash’ary dkk., 2010). Efek metanol
pada kesehatan manusia bergantung pada banyaknya metanol yang terpejankan.
Metanol jika terhirup atau tertelan dapat menyebabkan gangguan penglihatan,
seperti kabur. Dalam jumlah kecil metanol akan berefek pada sistem saraf
manusia dan apabila kontak dengan dengan metanol dapat menghasilkan
dermatitis ringan pada manusia (United States Environmental Protection Agency,
2013).
I. Etanol
Etanol atau ethyl alcohol dengan rumus molekul C2H6O memiliki titik
didih sebesar 78,20C dan nilai log P -0,16 yang tergolong polar merupakan cairan
jernih tidak berwarna dapat dengan cepat diserap oleh saluran pencernaan dan
didistribusikan ke seluruh tubuh. Etanol memiliki aktivitas bakterisida dan sering
digunakan sebagai desinfektan topikal, selain itu juga banyak digunakan sebagai
pelarut dan pengawet dalam sediaan farmasi, dan bahan utama minuman
beralkohol (National Center for Biotechnology Information, 2015).
Etanol di dalam tubuh akan mengalami oksidasi oleh suatu enzim hati
yaitu alcohol dehydrogenase. Hasil dari oksidasi etanol adalah asetaldehid dan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
41
asam asetat. Namun, hasil oksidasi tersebut kurang toksik dibandingkan dengan
metanol yang menghasilkan toksik seperti formaldehid dan asam formiat atau
formic acid (Stoker, 2010).
J. Heksan
Heksan atau n-Hexane memiliki rumus molekul C6H14 dengan titik didih
68,70C dan nilai log P sebesar 3,13 menunjukkan bahwa heksan bersifat semi
polar merupakan cairan jernih tidak berwarna dengan bau seperti minyak. Heksan
tidak dapat larut air dan banyak digunakan sebagai pelarut, thinner, reaksi kimia
dan sebagai agen pembersih (National Center for Biotechnology Information,
2015).
Toksisitas heksan, paparan dalam waktu jangka pendek melalui inhalasi
dapat mempengaruhi sistem saraf pusat ringan (CNS) seperti pusing, mual, dan
sakit kepala. Paparan jangka panjang dapat berakibat pada efek poluneuropati
seperti penglihatan kabur, otot lemah dan sakit kepala. Efek neurotoksik juga telah
dilaporkan dari hasil pengamatan pada tikus dengan paparan jangka panjang
(United States Environmental Protection Agency, 2013).
K. Landasan teori
Proses inflamasi menandakan adanya mekanisme perlindungan di dalam
tubuh terhadap berbagai rangsangan seperti infeksi dan cedera jaringan dengan
membasmi agen-agen yang berbahaya untuk memperbaiki jaringan. Inflamasi
merupakan respon terhadap kerusakan jaringan akibat adanya rangsangan yang
merugikan baik rangsangan kimia maupun mekanis, infeksi dari benda asing
seperti bakteri dan virus. Pada proses inflamasi akan terjadi reaksi vaskular,
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
42
sehingga cairan, elemen-elemen darah, sel darah putih (leukosit), dan mediator
kimia berkumpul pada tempat cedera untuk menetralkan dan menghilangkan
agen-agen berbahaya serta memperbaiki jaringan yang rusak. Adanya kerusakan
jaringan tersebut akan memicu terjadinya pembebasan asam arakidonat yang
berubah menjadi prostaglandin suatu mediator inflamasi yang diperantarai oleh
enzim siklooksigenase (COX). Radikal bebas akan terbentuk ketika asam
arakidonat dikonversi menjadi endoperoksida melalui jalur siklooksigenase dan
hidroperoksida melalui jalur lipooksigenase sehingga terjadi pelepasan mediator
inflamasi. Radikal bebas merupakan elektron tidak berpasagan yang akan bersifat
reaktif mendapatkan pasangan elektron, apabila reaksi tersebut berlebih dan tidak
terkendali akan dapat mengakibatkan kerusakan pada fungsi sel manusia.
Karagenin, merupakan senyawa yang memiliki kegunaan khusus sebagai
senyawa iritan, dimana dalam penelitian sering digunakan untuk pengujian
antiinflamasi dan merupakan senyawa penginduksi inflamasi akut pada tikus atau
mencit. Selain itu karagenin merupakan model penginduksi inflamasi yang
sederhana dan digunakan untuk mengevaluasi adanya peradangan tanpa adanya
cedera atau kerusakan pada kaki yang meradang. Apabila terjadinya inflamasi
tersebut dibiarkan dan terjadi secara berlebihan akan dapat memberikan efek
merugikan bagi tubuh sehingga diperlukan agen antiinflamasi untuk
mengendalikan reaksi inflamasi tersebut.
Kandungan baru yang ditemukan dalam penelitian Puteri dan Kawabata
(2010) dari daun Macaranga tanarius L. yaitu senyawa ellagitannins dinamakan
mallotinic acid, corilagin, macatannin A, chebulagic acid, dan macatannin B
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
43
dimana pada penelitian ini senyawa yang dituju adalah chebulagic acid (nilai Log
P = 2,30), dan macatannin B (nilai Log P = 2,57) yang memiliki nilai kepolaran
sama dengan pelarut etanol-heksan (nilai Log P = 2,97) dengan sifat semipolar
pada metode pembuatan fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun
Macaranga tanarius L. Isolasi senyawa pada tanaman tersebut akan bergantung
pada polaritas senyawa terhadap pelarut yang digunakan untuk mengisolasi
senyawa tersebut. Senyawa-senyawa yang telah dilaporkan dari hasil penelitian
Puteri dan Kawabata (2010), memperlihatkan adanya aktivitas penangkapan
radikal bebas. Valdés, Figueroa, Carbo, Barragán, Herrera, and Aguilar (2011)
melaporkan bahwa kandungan ellagitannis memiliki kemampuan penangkapan
radikal bebas dan berperan terhadap inflamasi. Kemampuan tersebut menjadikan
daun Macaranga tanarius L, dengan kandungan senyawa ellagitannins sebagai
salah satu bahan alam yang berpotensi sebagai alternatif untuk mengatasi
inflamasi.
Melalui penelitian ini akan diketahui apakah dengan pemberian fraksi
heksan-etanol ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L., dengan senyawa
yang dituju adalah chebullagic acid dan macatannin B dapat menurunkan
inflamasi pada telapak kaki belakang mencit, mengetahui berapa persen
penghambatan inflamasi, besar potensi relatif daya antiinflamasi, dan mengetahui
adanya hubungan kekerabatan antara dosis pemberian fraksi heksan-etanol ekstrak
metanol-air daun Macaranga tanarius L., terhadap efek antiinflamasi pada mencit
terinduksi karagenin 1%.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
44
Pengujian efek antiinflamasi pada penelitian ini menggunakan metode
induksi udem pada telapak kaki mencit, dengan senyawa penginduksi berupa
karagenin 1%. Penurunan udem pada telapak kaki belakang mencit dapat
diketahui dengan pengukuran menggunakan jangka sorong digital pada setiap
menit ke-0, 15, 30, 45, 60, 90, 120, 150, 180, 210, 240, 270, 300, 330, 360 selama
6 jam yang kemudian dihitung dengan metode trapezoid untuk melihat tebal udem
yang dihasilkan pada tiap satuan waktu (menit).
L. Hipotesis
Fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L.
yang diberikan secara oral dapat memberikan efek antiinflamasi pada mencit
terinduksi karagenin 1 %.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
45
BAB III
METODE PENELITIAN
A. Jenis dan Rancangan Penelitian
Penelitian ini termasuk jenis penelitian eksperimental murni karena
dilakukan dengan adanya perlakuan, secara rendomisasi, dan tanpa ada penelitian
sebelumnya. Selain itu pada penelitian ini menggunakan rancangan acak lengkap
pola searah. Rancangan acak lengkap pola searah digunakan karena faktor yang
dilakukan pengujian hanya ada satu yaitu pengaruh pemberian dosis fraksi etanol-
heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L., terhadap udem pada
telapak kaki mencit jantan galur Swiss yang diinduksi karagennin 1% secara
subplantar dengan pengukuran menggunakan jangka sorong digital.
B. Variabel Penelitian dan Definisi Operasional
Variabel yang digunakan dalam penelitian ini adalah:
1. Variabel utama
a. Variabel bebas. Dosis sediaan fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun
Macaranga tanarius L.
b. Variabel tergantung. Besarnya udem telapak kaki belakang pada mencit
galur Swiss yang terinduksi karagenin 1% .
2. Variabel pengacau
a. Variabel pengacau terkendali. Variabel pengacau terkendali dalam penelitian
ini adalah subyek uji berupa mencit dengan galur Swiss berjenis kelamin
jantan, dengan berat badan 20-30 gram, umur 2-3 bulan. Bahan uji yang
digunakan berupa daun Macaranga tanrius L., yang berasal dari Paingan,
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
46
Maguwoharjo, Sleman, Yogyakarta.
b. Variabel pengacau tak terkendali. Variabel pengacau tak terkendali dalam
penelitian ini adalah keadaan patofisiologis dari hewan uji yang digunakan,
kemampuan tubuh hewan uji untuk mengabsorpsi fraksi etanol-heksan
ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L., serta kemampuan hewan
uji untuk menerima induksi udem pada telapak kaki mencit sebagai bentuk
terjadinya proses peradangan atau inflamasi.
3. Definisi operasional
a. Daun Macaranga tanarius L. yang digunakan adalah daun yang berwarna
hijau segar, tidak berlubang, serta tidak terdapat kotoran binatang kecil.
Pengambilan daun dilakukan pada pagi hari, pukul 07.00 – 10.00 WIB di
daerah Paingan, Maguwoharjo, Sleman, Yogyakarta.
b. Ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L. adalah proses pemisahan
bahan dari campuran menggunakan pelarut yang sesuai dengan sifat
kepolaran senyawa yang dituju. Proses pembuatan ekstrak pada penelitian
ini menggunakan metode ekstraksi padat-cair dengan cara mengekstraksi
serbuk daun Macaranga tanarius L., yang dilarutkan dalam metanol dan air
dan dilakukan maserasi selama 72 jam.
c. Fraksi etanol-heksan daun Macaranga tanarius L. merupakan metode
ekstraksi bertingkat dilakukan dengan maserasi menggunakan beberapa
cairan penyari yang berbeda kepolarannya. Proses fraksinasi pada
penelitian ini dilakukan dengan cara hasil dari proses ekstraksi metanol-air
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
47
berupa ekstrak kental diekstraksi kembali menggunakan pelarut etanol-
heksan, dengan proses maserasi.
d. Dosis pemberian fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga
tanariius L. merupakan jumlah fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air
daun Macarangan tanarius L. yang didapatkan dari penetapan konsentrasi
terpekat fraksi sebesar 0,6 gram/25 mL atau 2,4 % dan hasil konversi
penggunaan pada tikus dengan dosis tertinggi sebesar 137 mg/kgBB.
e. Pemberian fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air secara peroral
merupakan pemberian tingkatan dosis fraksi etanol-heksan ekstrak
metanol-air daun Macaranga tanarius L. sebesar 47,95; 95,9; dan 191,8
mg/kgBB dengan cara menginjeksikan menggunakan spuit injeksi oral.
Pemberian peroral fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air Macaranga
tanarius L. dilakukan setelah kaki mencit diinjeksikan dengan karagenin
1% secara subplantar, dengan selang waktu yang didapatkan dari optimasi
selang waktu pemberian 15 dan 30 menit.
f. Inflamasi adalah respon tubuh terhadap adanya benda asing yang ditandai
dengan munculnya kemerahan, rasa nyeri, bengkak, panas, dan perubahan
fungsi. Dalam penelitian ini dilakukan pengamatan pada besarnya udem
telapak kaki mencit sebagai respon adanya inflamasi.
g. Injeksi subplantar adalah injeksi di bawah kulit telapak kaki mencit.
h. Pembuatan inflamasi dilakukan dengan cara penginduksian pada Kaki kiri
mencit dengan senyawa iritan berupa karagenin 1% secara subplantar,
dimana adanya respon inflamasi ditandai dengan terbentuknya udem.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
48
Sedangkan kaki mencit sebelah kanan hanya disuntik secara subplantar
tanpa karagenin.
i. Tebal udem, adalah tebal telapak kaki mencit yang diinduksi oleh larutan
karagenin 1% yang diinjeksikan secara subplantar dan diukur dengan
jangka sorong dalam satuan millimeter selama 6 jam. Pengukuran terletak
pada ketebalan telapak kaki mencit, dengan posisi jangka sorong vertikal.
j. Uji antiiflamasi merupakan pengujian antiinflamasi dengan menggunakan
mencit jantan galur Swiss sebagai hewan uji yang diradangkan pada telapak
kaki kirinya menggunakan karagenin 1% secara subplantar, dan diukur
tebal udemnya menggunakan jangka sorong digital selama 6 jam.
Kemudian dibandingkan antar kelompok perlakuan fraksi etanol-heksan
ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L., dengan kelompok kontrol
positif diklofenak 4,48 mg/kgBB dan kelompok kontrol negatif CMC-Na,
yang diberikan secara peroral.
k. AUC (Area Under Curve) yaitu luas daerah di bawah kurva antara rata-rata
tebal udem terhadap waktu pengamatan. Nilai AUC menggambarkan tebal
udem tiap satuan waktu (mm.menit) yang diukur menggunakan jangka
sorong digital. Perhitungan nilai AUC didapatkan dengan menggunakan
metode trapezoid di mana merupakan selisih udem antara kaki kiri (dengan
karagenin 1%) dan kanan (tanpa karagenin) dikalikan selisih waktu
pengukuran yang dilakukan dari menit ke 0 hingga menit 360 selama 6 jam
pengamatan.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
49
l. Efek antiinflamasi adalah kemampuan suatu zat atau sediaan pada dosis
tertentu terhadap penurunan udem telapak kaki belakang pada mencit galur
Swiss yang terinduksi karagenin 1% sebagai penginduksi inflamasi.
m. Persen penghambatan inflamasi adalah besarnya kemampuan
penghambatan inflamasi setelah diberikannya senyawa uji yang
digambarkan dalam persentase, semakin besar prosentase yang dihasilkan
maka semakin besar pula aktivitas penghambatan inflamasi pada telapak
kaki mencit.
n. Persen potensi relatif daya antiinflamasi adalah potensi pemberian fraksi
etanol-heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L. terhadap
diklofenak sebagai obat antiinflamasi dalam menghambat inflamasi pada
telapak kaki mencit.
C. Bahan Penelitian
1. Hewan uji
Mencit jantan galur Swiss dengan umur 2-3 bulan dan bobot badan 20-30 g
dalam keadaan sehat yang diperoleh dari Laboraturium Imono Fakultas Farmasi
Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.
2. Bahan uji
Bahan uji utama yang digunakan adalah daun Macaranga tanarius L.,
diperoleh dari Paingan, Maguwoharjo, Sleman, Yogyakarta.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
50
Bahan-bahan kimia untuk pengujian farmakologi yang digunakan dalam
penelitian ini yaitu:
a. Zat inflamatogen berupa Karagenin tipe I (Sigma Chemical Co.) yang
diperoleh dari Laboratorium Farmakologi dan Toksikologi Fakultas Farmasi
Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.
b. NaCl fisiologis 0,9% (Ossuka) sebagai pelarut karagenin 1% yang diperoleh
dari Apotek Kimia Farma UNY Jalan Colombo No.1 Depok, Sleman,
Yogyakarta.
c. Cataflam Fast®50mg (Novartis Indonesia) berupa serbuk yang mengandung
kalium diklofenak 50 mg sebagai kontrol positif antiinflamasi yang diperoleh
dari Apotek Kimia Farma UNY Jalan Colombo No.1 Depok, Sleman,
Yogyakarta.
d. Aquadest sebagai pelarut Cataflam Fast®50mg yang berupa serbuk larut air
diperoleh dari Brataco Chemika Jalan Letjen Suprapto 70 Ngampilan,
Yogyakarta.
e. Carboxymethylcellulose-Natrium atau CMC-Na sebagai pelarut fraksi yang
diperoleh dari Laboratorium Farmakologi dan Toksikologi Fakultas Farmasi
Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.
f. Metanol teknis sebagai pelarut yang digunakan bersama dengan air dalam
proses ekstraksi daun Macaranga tanarius L. diperoleh dari Brataco Chemika
Jalan Letjen Suprapto 70 Ngampilan, Yogyakarta.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
51
g. Alkohol 95% (etanol) dan heksan teknis sebagai pelarut yang digunakan
dalam proses fraksi daun Macaranga tanarius L. diperoleh dari Brataco
Chemika Jalan Letjen Suprapto 70 Ngampilan, Yogyakarta.
h. Alkohol 70% digunakan untuk pencucian alat yang akan digunakan selama
penelitian diperoleh dari Brataco Chemika Jalan Letjen Suprapto 70
Ngampilan, Yogyakarta.
i. Ketamin digunakan untuk mematikan hewan uji yang telah digunakan selama
penelitian, didapatkan dari Laboraturium Imono Fakultas Farmasi Universitas
Sanata Dharma Yogyakarta.
D. Alat Penelitian
1. Alat pembuatan serbuk kering daun Macaranga tanarius L.
Alat-alat yang digunakan antara lain adalah oven, mesin penyerbuk, dan
ayakan nomor 40.
2. Pembuatan fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun M. tanarius L.
Seperangkat alat gelas berupa gelas beker, erlenmeyer, gelas ukur 25 mL,
labu ukur 25 mL, cawan porselen, pipet tetes, batang pengaduk (Pyrek Iwaki
Glass®), shaker, water bath, vacuum filtration, dan oven.
3. Alat induksi udem telapak kaki belakang mencit
Seperangkat alat gelas berupa beaker glass, gelas ukur, labu ukur 10 mL,
pipet tetes, batang pengaduk (Pyrex Iwaki Glass®
), timbangan analitik, stopwatch,
spuit per oral, spuit subplantar, dan syringe 1 mL, serta jangka sorong digital
Caliper “Wipro”.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
52
E. Tata Cara Penelitian
1. Determinasi serbuk daun Macaranga tanarius L.
Determinasi tanaman dilakukan dengan mencocokkan ciri-ciri yang
terdapat pada tanaman Macaranga tanarius L., dengan herbarium Macaranga
tanarius L. yang telah tersedia di Laboratorium Botani Farmasi Fakultas Farmasi
Universitas Sanata Dharma Yogyakarta, yang telah berdasarkan buku acuan
(Steenis, Hoed, Blommbergen, dan Eyma, 1992).
2. Pengumpulan bahan uji
Bahan uji yang digunakan adalah daun Macaranga tanarius L. yang masih
segar berwarna hijau, tidak berlubang, tidak ditemukan penyakit pada tumbuhan.
Pemanenan dilakukan pada pagi hari pukul 07.00-10.00 WIB, pengumpulan
bahan uji dimulai pada bulan April 2015.
3. Pembuatan serbuk daun Macaranga tanarius L.
Pembuatan serbuk daun Macaranga tanarius L. dilakukan di Laboratorium
Pengujian “LPPT-UGM”, menggunakan daun yang telah dikeringkan kemudian
dilakukan pencucian dan pengeringan untuk selanjutnya dipotong untuk
memudahkan penyerbukan. Pengeringan daun dilakukan dalam oven dengan suhu
450C selama 20 jam. Penyerbukan menggunakan mesin penyerbuk dengan
diameter lubang saringan 1 mm.
4. Penetapan kadar air pada serbuk kering daun Macaranga tanarius L.
Penetapan kadar air pada serbuk kering daun Macaranga tanarius L.,
dilakukan di Laboratorium Pengujian LPPT-UGM menggunakan metode
gravimetri, dengan prosedur yang sesuai. Berdasarkan prosedur, dilakukan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
53
penimbangan krus kosong terlebih dahulu sebagai bobot (A) dalam gram.
Kemudian dilanjutkan dengan menimbang sampel hingga homogen dengan
memasukkan serbuk kering ± 5 gram, bobot serbuk kering daun tersebut
ditetapkan sebagai bobot sebelum pemanasan bobot (B), lalu dilakukan
pemanasan pada suhu 105°C selama 3 jam hingga berat konstan, artinya selama
waktu 3 jam dengan pemanasan pada suhu oven 1050C diharapkan seluruh
kandungan air telah menguap, sehingga diperoleh serbuk dengan kadar air yang
tetap dibawah 10%.
Serbuk kering Macaranga tanarius L., yang telah dipanaskan kemudian
ditimbang kembali dan dihitung sebagai bobot setelah pemanasan (bobot C).
Kemudian dilakukan perhitungan terhadap selisih bobot (A+B) terhadap bobot
C yang merupakan kadar air serbuk daun Macaranga tanarius L. Proses
penetapan kadar air dilakukan oleh Laboratorium Penelitian dan Pengujian
Terpadu Unversitas Gadjah Mada. Rumus perhitungan untuk mendapatkan kadar
air sebagai berikut ini:
Kadar air = 𝐴+𝐵 − 𝐶
𝐵 x 100%
Keterangan:
A = berat krus kosong (gram)
B = bobot serbuk kering sebelum pemanasan (gram)
C = bobot setelah pemanasan (gram)
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
54
5. Pembuatan fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air Macaranga tanarius
a. Pembuatan ekstrak kental daun Macaranga tanarius L.
Gambar 7. Flowchart langkah pembuatan ekstrak metanol-air daun
Macaranga tanarius L.
40 gram serbuk M.tanarius
Maserasi (140 rpm) selama 72 jam, 40
gram serbuk dalam 100 mL metanol dan
100 mL aquadest
100 mL metanol 70% dan 100 mL
aquadest
Maserat
Remaserasi 2x
Saring dengan corong buchner
Dipekatkan dengan Rotary evaporator
(3 rpm) pada suhu 650C.
Ekstrak cair
Uapkan pada water bath untuk
menghilangkan aquadest
Ekstrak
Kental
Didapatkan
bobot tetap
ekstrak kental
daun
M.tanarius
Oven suhu
400C ± 24 jam
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
55
b. Fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L.
Gambar 8. Flowchart langkah pembuatan fraksi etanol-heksan dari
hasil ekstrak kental metanol-air daun Macaranga tanarius L.
Saring dengan corong Buchner.
Dipekatkan dengan rotary evaporator
(3 rpm) pada suhu didih campuran
etanol – heksan 58,60 ≈ 600C
(Agoes,2009).
Ekstrak kental M.tanarius
Maserasi (140 rpm) selama 24 jam sebanyak 1 gram
ekstrak kental dalam 5 ml pelarut etanol-heksan
(2,5 mL etanol dan 2,5 mL heksan).
Alkohol 95% atau etanol
dan heksan (ml)
Filtrat
Remaserasi 1x
Fraksi kental daun
M.tanarius
Hingga didapatkan bobot
tetap fraksi kental daun
M.tanarius
Oven pada
suhu 400C
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
56
6. Pembuatan suspending agent CMC-Na 1%
Suspending agent CMC-Na 1% dibuat dengan cara mendispersikan 1,0
gram CMC-Na yang telah ditimbang seksama, kemudian dilarutkan menggunakan
aquadest hangat hingga volume 100,0 mL dan aduk hingga didapatkan larutan
yang homogen. Larutan CMC-Na digunakan sebagai pelarut fraksi etanol-heksan
ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L.
7. Pembuatan larutan karagenin 1% sebagai penginduksi udem
Larutan karagenin yang digunakan sebagai zat peradang dibuat dengan
cara 100 mg karagenin dilarutkan dalam larutan NaCl fisiologis 0,9% hingga
volume 10 mL, akan diperoleh konsentrasi karagenin 1 % (b/v) yang setara
dengan dosis 25 mg/kgBB. Perhitungan karagenin adalah sebagai berikut:Dosis
Karagenin =
1
2𝑉𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒 𝑚𝑎𝑘𝑠𝑖𝑚𝑎𝑙 𝑢𝑛𝑡𝑢𝑘 𝑚𝑒𝑛𝑐𝑖𝑡 𝑥 𝐾𝑜𝑛𝑠𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑠𝑖 𝐾𝑎𝑟𝑎𝑔𝑒𝑛𝑖𝑛
𝐵𝑜𝑏𝑜 𝑡 𝑡𝑒𝑟𝑘𝑒𝑐𝑖𝑙 𝑚𝑒𝑛𝑐𝑖𝑡
= 0,05 𝑚𝐿 𝑥 1
𝑔𝑟𝑎𝑚
100𝑚𝐿
0,02 𝑘𝑔 = 25 mg/kgBB
8. Pembuatan larutan kalium diklofenak sebagai obat antiinflamasi
Cataflam Fast®50mg (Novartis Indonesia) berupa serbuk, ditimbang
sebanyak 0,05 gram, kemudian dilarutkan ke dalam aquadest hingga volume 100
mL sehingga diperoleh konsentrasi 0,5 mg/mL.
9. Penentuan kontrol negatif
Kontrol negatif adalah zat yang tidak memiliki efek antiinflamasi sehingga
dapat digunakan sebagai pembanding terhadap zat diuji. Pada penelitian ini
digunakan CMC-Na sebagai kontrol negatif yang merupakan pelarut dalam
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
57
pembuatan fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air Macaranga tanarius L. serta
digunakan kontrol negatif aquadest sebagai pelarut kontrol positif diklofenak.
10. Uji Pendahuluan
a. Penetapan dosis kalium diklofenak
Penggunaan dosis kalium diklofenak ditentukan berdasarkan orientasi
dengan dosis berdasarkan atas penelitian yang pernah dilakukan sebelumnya oleh
(Djunarko, Donatus, dan Noni, 2003) dengan dosis pemberian sebesar 4,48
mg/kgBB, dan dosis 9,1 mg/kgBB yang digunakan oleh (Sagala, 2013) dan
(Manurung, 2013) untuk penelitian antiinflamasi.
Menurut (Djunarko, Donatus, dan Noni, 2003), dosis diklofenak untuk
tikus dengan bobot badan 250 gram adalah 40 mg/kgBB. Sehingga dosis
diklofenak untuk tikus dengan bobot badan 200 gram sebesar:
Dosis Kalium Diklofenak = 200 𝑔𝑟𝑎𝑚 𝑥 40 𝑚𝑔 /𝑘𝑔𝐵𝐵
250 𝑔𝑟𝑎𝑚 = 32 mg/kgBB
Bila akan diaplikasikan untuk mencit degan bobot badan 20 gram maka perlu
dilakukan konversi untuk mengubah dosis penggunaan dari tikus 200 gram ke
mencit dengan bobot 20 gram, maka dosis kalium diklofenak menjadi:
Dosis Kalium Diklofenak = Hasil Konversi Tikus ke Mencit x Dosis Diklofenak
= 0,14 x 32 mg/kgBB
= 4,48 mg/kgBB
Kemudian, digunakan satu dosis lain yang diperoleh dari penelitian yang
telah dilakukan oleh (Sagala, 2013) dan (Manurung, 2013) berdasarkan dosis
lazim pemakaian diklofenak pada manusia dengan bobot 50 kg adalah 50 mg.
Sehingga dosis kalium diklofenak untuk manusia dengan bobot 70 kg sebesar:
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
58
Dosis Kalium Diklofenak untuk Manusia = 70 𝑘𝑔 𝑥 50 𝑚𝑔
50 𝑘𝑔 = 70 mg
Bila akan diaplikasikan untuk mencit degan bobot badan 20 gram maka perlu
dilakukan konversi untuk mengubah dosis penggunaan dari manusia dengan BB
70 kg ke mencit dengan bobot 20 gram, maka dosis kalium diklofenak menjadi:
Dosis Kalium Diklofenak = Hasil Konversi Manusia ke Mencit x Dosis
Diklofenak untuk Manusia
= 0,0026 x 70 mg
= 0,182 mg/20 gramBB mencit
= 9,1 mg/kgBB mencit
b. Penetapan selang waktu pemberian dosis efektif kalium diklofenak
sebelum diinduksi karagenin 1 % b/v secara subplantar
Pada penentuan selang waktu pemberian karagenin ini digunakan dosis
diklofenak (mg/kgBB) yang memberikan penurunan udem pada telapak kaki
mencit dengan selang waktu yang diujikan adalah 15 dan 30 menit. Dalam
penetapan ini digunakan 15 ekor mencit yang terbagi menjadi 5 kelompok.
Kelompok kontrol negatif aquadest diberikan secara p.o dengan selang waktu
pemberian 15 menit (I), kontrol positif diklofenak diberikan p.o pada dosis 4,48
mg/kgBB selang waktu pemberian 15 menit (II), kontrol positif diklofenak 4,48
mg/kgBB selang waktu pemberian 30 menit (III), kelompok kontrol positif
diklofenak 9,1 mg/kgBB selang waktu pemberian 15 menit (IV), dan kontrol
positif diklofenak 9,1 mg/kgBB selang waktu pemberian 30 menit (V) sebelum
diinjeksikan karagenin 1% secara subplantar.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
59
Pengukuran udem dilakukan pada menit ke-0, 15, 30, 45, 60, 90, 120, 150,
180, 210, 240, 270, 300, 330, dan 360 setalah diinjeksikan karagenin 1% secara
subplantar. Selanjutnya dihitung rata-rata penurunan udem pada berbagai selang
waktu tersebut. Kedua selang waktu pemberian yang berbeda tersebut akan dipilih
berdasarkan rentang waktu pada waktu antara saat dan setelah pemberian senyawa
uji hingga injeksi karagenin yang mampu menurunkan udem secara berarti.
11. Penetapan konsentrasi pekat fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air
daun Macaranga tanarius L.
Konsentrasi yang digunakan adalah konsentrasi terpekat yang dapat dibuat
dan dapat dimasukkan serta dikeluarkan dari sepuit oral 1 mL. Konsentrasi
terpekat didapatkan dengan cara melarutkan sebanyak 0,6 gram fraksi larut ke
dalam CMC-Na 1% pada labu ukur 25 mL, sehingga didapatkan konsentrasi
fraksi etanol-heksan ekstrak metanol air sebesar 0,6 gram/25 mL atau sebesar
2,4%.
12. Penetapan dosis fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun
Macaranga tanarius L.
Dalam penelitian ini, fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun
Macaranga tanarius L. dibuat dalam tiga peringkat dosis. Penetapan dosis
berdasarkan konsentrasi terpekat fraksi dan penggunaan dosis fraksi etanol-heksan
ekstrak metanol-air pada tikus dengan dosis tertinggi sebesar 137 mg/kgBB.
Berikut perhitungan dosis fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun
Macaranga tanarius L. pada tikus:
Dosis x BB Tikus (gram) = Konsentrasi fraksi terpekat x Volume pemberian
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
60
Dosis x 350 gramBB = 0,6 gram/25 mL x 2 mL (2
5 volume maksimal tikus)
Dosis x 0,350 kgBB = 600 mg/25 mL x 2 mL
Dosis pemberian fraksi = 137,1 mg/kgBB = 137 mg/kgBB
Telah diketahui dosis pemberian fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air
daun Macaranga tanarius L. untuk tikus sebesar = 137 mg/kgBB, bila akan
diberikan pada tikus dengan BB = 200 mg, sebagai berikut:
D X BB = C X V
Keterangan:
D = dosis (mg/kgBB)
BB = berat badan hewan uji (gram)
C = konsentrasi (gram/mL)
V = volume (mL)
D = 137 mg/kgBB
D = 0,137 mg/gram x 200 gram BB tikus
D = 27,4 mg/200 gram BB tikus
Penetapan dosis tertinggi fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun
Macaranga tanarius L. untuk mencit dilakukan konversi dari tikus degan BB =
200 gram ke mencit dengan BB = 20 gram, konversinya sebesar 0,14, maka dosis
tertinggi dapat ditentukan sebagai berikut:
D = 27,4 mg/200 gram x 0,14 (hasil konversi tikus mencit)
D = 3,836 mg/20 gram BB mencit
= 191,8 mg/kgBB (dosis III)
Sehingga, peringkat dosis untuk penentuan dosis rendah dan dosis tengah
didapatkan dengan menurunkan dua kelipatan dari dosis tertinggi sehingga
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
61
diperoleh dosis tengah sebesar 95,9 mg/kgBB (dosis II) dan dosis terendah sebesar
47,95 mg/kgBB (dosis I).
13. Penyiapan hewan uji
Hewan uji yang dibutuhkan untuk uji perlakuan adalah tiga puluh ekor
mencit jantan galur Swiss, umur 2-3 bulan dengan bobot badan 20-30 gram.
Selain itu, pada tahap uji pendahuluan digunakan lima belas ekor mencit yang
masing-masing kelompok terdapat tiga mencit digunakan untuk orientasi dan tiga
puluh ekor mencit digunakan untuk perlakuan dengan masing-masing kelompok
terdapat lima ekor mencit. Sebelum digunakan hewan uji dipuasakan selama 18-
24 jam.
14. Pengelompokan hewan uji
Pada penelitian ini mencit yang digunakan untuk uji pendahuluan
sebanyak lima belas ekor mencit digunakan sebagai orientasi dimana terbagi
menjadi lima kelompok yaitu kontrol negatif aquadest, kontrol positif diklofenak
dosis 4,48 mg/kgBB selang waktu pemberian 15 dan 30 menit, kontrol positif
diklofenak dosis 9,1 mg/kgBB dengan selang waktu 15 dan 30 menit, lima
kelompok tersebut untuk orientasi penentuan dosis dan selang waktu yang efektif
dalam menurunkan udem. Tiga puluh ekor mencit lainnya digunakan dalam
kelompok perlakuan yang terbagi menjadi enam kelompok yaitu (kontrol negatif
berupa CMC-Na dan aquadest, kontrol positif diklofenak, dan kelompok
perlakuan pemberiaan fraksi). Berikut rincian pengelompokan hewan uji dan
perlakuan yang diberikan dalam penelitian, yang dapat dilihat pada (Gambar 9
dan 10).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
62
a. Pengelompokan hewan uji pada orientasi (uji pendahuluan)
Gambar 9. Flowchart pengelompokan hewan uji pada tahap uji pendahuluan
(orientasi)
Keterangan:
Kelompok I kontrol negatif, kelompok II, III, IV dan V adalah kelompok kontrol
positif diklofenak dengan dosis dan selang waktu pemberian karagnein yang
berbeda yaitu 15 dan 30 menit.
Udem diukur menggunakan jangka sorong selama 6 jam dan pengukuran dilakukan
pada menit ke-0, 15, 30, 45, 60, 90, 120, 150, 210, 240, 270, 300, 330 dan 360.
Dihitung selisih udem kaki-kiri yang telah terinduksi karagenin 1% dengan kaki kanan
yang hanya dilakukan penyuntikan secara subplantar tanpa karagenin (mm), hasil
selisih tebal udem dilanjutkan dengan perhitungan AUC (mm.menit).
15 ekor mencit diberi senyawa
secara per-oral sesuai dengan
kelompok berikut
Kel. I
Kel. II
Kel. III
Kel. IV
Kel. V
Aquadest
p
Kalium
Diklofenak
4,48
mg/kgBB
selang
waktu 10
menit p
Kalium
Diklofenak
4,48
mg/kgBB
selang
waktu 10
menit p
Kalium
Diklofenak
9,1
mg/kgBB
selang
waktu 10
menit p
Kalium
Diklofenak
9,1
mg/kgBB
selang
waktu 10
menit p
Masing-masing kaki kiri diinjeksikan karagenin 1% secara subplantar dan kaki kanan
disuntik dengan spuit tanpa larutan karagenin
Selang waktu
15 menit
Selang waktu
30 menit
Selang waktu
15 menit
Selang waktu
30 menit
Selang waktu
15 menit
Masing-masing kaki kiri dan kaki kanan yang akan dilakukan pengukuran diberikan
tanda berupa titik menggunakan tinta hitam pada telapak kaki yang mengalami udem
sebagai penanda bagian yang akan diukur ketebalan udem pada telapak kaki belakang
mencit.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
63
b. Pengelompokan hewan uji pada perlakuan
Gambar 10. Flowchart pengelompokan hewan uji pada tahap perlakuan uji
antiiflamasi
Keterangan:
Kelompok I dan II kontrol negatif, III kontrol positif diklofenak, IV, V, dan VI
adalah kelompok perlakuan fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun
Macaranga tanarius L.
Selang waktu 15 menit kemudian
Dihitung selisih udem kaki-kiri yang telah terinduksi karagenin 1% dengan kaki kanan
yang hanya dilakukan penyuntikan secara subplantar tanpa karagenin (mm), hasil
selisih tebal udem dilanjutkan dengan perhitungan AUC (mm.menit).
30 ekor mencit diberi senyawa secara per-oral sesuai
dengan kelompok berikut
Masing-masing kaki kiri diinjeksikan karagenin 1% secara subplantar dan kaki kanan
disuntik dengan spuit tanpa larutan karagenin
Udem diukur menggunakan jangka sorong selama 6
jam dan pengukuran dilakukan pada menit ke-0, 15,
30, 45, 60, 90, 120, 150, 210, 240, 270, 300, 330
dan 360
Masing-masing kaki kiri dan kaki kanan yang akan dilakukan pengukuran diberikan
tanda berupa titik menggunakan tinta hitam pada telapak kaki yang mengalami udem
sebagai penanda bagian yang akan diukur ketebalan udem pada telapak kaki belakang
mencit.
Kel. I
Kel. II
Kel. III
Kel. IV
Kel. V
Aquadest
Fraksi
M.tanarius
dosis
47,95mg/kg
BB
Kel. VI
CMC-Na
1%
Kalium
Diklofenak
4,48
mg/kgBB
Fraksi
M.tanarius
dosis 95,9
mg/kgBB
Fraksi
M.tanarius
dosis 191,8
mg/kgBB
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
64
F. Tata Cara Analisis Hasil
1. Analisis hasil untuk melihat aktivitas antiinflamasi
Pengukuran aktivitas antiinflamasi dilakukan dengan mengukur
ketebalan udem telapak kaki mencit menggunakan jangka sorong digital. Nilai
selisih udem pada setiap rentang waktu pengukuran, diukur dan dihitung nilai
AUC total (Area Under Curve) dari ketebalan udem telapak kaki mencit
terinduksi karagenin pada masing-masing perlakuan untuk melihat penurunan
udem dengan menggunakan metode trapezoid. Rumus perhitungan sebagai
berikut:
AUC0-x = ( C1−C0
2 x t1-t0 ) + (
C2−C1
2 x t2-t0 ) + …. + (
Cn−Cn−1
2 x tn-tn-1 )
Keterangan :
AUC0-x = Area Under Curve dari ketebalan (udem) telapak kaki mencit dari
menit ke-0 sampai menit ke-360
Cn – Cn-1 = Besarnya tebal udem dari menit ke-0 sampai menit ke-360
tn – tn-1 = Lamanya waktu pengukuran mulai dari menit ke-0 sampai menit ke-
360 (Ikawati, Suparjan, dan Asmara, 2007).
2. Menghitung presentase penghambatan inflamasi
Metode penentuan persen (%) penghambatan inflamasi yang digunakan
dalam penelitian ini adalah dengan cara menghitung luas area di bawah kurva
(AUC-Area Under Curve) untuk setiap mencit pada masing-masing rentang
waktu pengukuran dari menit ke-0, 15, 30, 45, 60, 90, 120, 150, 180, 210, 240,
270, 300, 330, dan 360 sehingga akan dapat digunakan untuk menentukan %
penghambatan inflamasi pada tiap-tiap kelompok perlakuan yang dilakukan dalam
penelitian. Persen (%) penghambatan inflamasinya dapat dihitung berdasarkan
rumus di bawah ini:
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
65
% penghambatan inflamasi = 𝐴𝑈𝐶(0−𝑋 )0 −𝐴𝑈𝐶(0−𝑋 )𝑛
𝐴𝑈𝐶(0−𝑋 )0 x 100
Keterangan :
𝐴𝑈𝐶(0−𝑋)0 = Nilai rata-rata AUC kelompok kontrol negatif (mm.menit)
𝐴𝑈𝐶(0−𝑋)𝑛= Nilai rata-rata AUC kelompok perlakuan yang diberikan senyawa uji
dengan besar dosis n
(Ikawati, Suparjan, dan Asmara, 2007).
3. Perhitungan (%) potensi relatif daya antiinflamasi
Tujuannya adalah untuk mengetahui % potensi relatif daya antiinflamasi
fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L., terhadap
diklofenak sebagai kontrol positif, digunakan rumus sebagai berikut:
Potensi relatif daya antiinflmasi (%) = 𝐷𝐴𝑝
𝐷𝐴𝑑 x 100%
Keterangan:
DAp = % penghambatan inflamasi kelompok perlakuan fraksi etanol-heksan
ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L.
DAp = % penghambatan inflamasi kelompok kontrol positif larutan kalium
diklofenak
4. Analisis hasil secara statistika
Penelitian pengujian antiinflamasi fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air
daun Macaranga tanarius L., merupakan deskriptif numerik, sehingga untuk
mengetahui sebaran data yang telah diperoleh, dianalisis dengan metode analitik
yaitu Shapiro-Wilk karena jumlah subjek ≤50. Shapiro-Wilk digunakan untuk
melihat distribusi data, bila nilai (p) > 0,05 maka dapat disimpulkan bahwa data
terdistribusi normal. Keunggulan penggunaan metode analitis sebagai metode
untuk menguji normalitas data karena lebih objektif. Jika hasil data hanya
disajikan dalam bentuk plot atau histogram, mungkin saja interpretasi penulis
dengan pembaca berbeda sehingga akan mempegaruhi kesimpulan yang berbeda,
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
66
sehingga motede tersebut dapat mengurangi unsur subjektivitas pengamatan
terhadap histogram maupun plot (Dahlan, 2008).
Hasil analisis data secara statistika pada uji pendahuluan penelitian ini
menunjukkan data terdistribusi normal dan homogen, maka untuk menguji
hipotesis pada penelitian ini dengan jenis data komparatif, numerik dan tidak
berpasangan lebih dari dua kelompok maka analisis dapat dilanjutkan dengan
menggunakan uji parametik yaitu One-way ANOVA dengan taraf kepercayaan
95% untuk mengetahui perbedaan masing-masing kelompok data tidak
berpasangan lebih dari dua kelompok. Kemudian dilanjutkan dengan uji post hoc
LSD untuk melihat perbedaan masing-masing antar kelompok bermakna (p) <
0,05 atau tidak bermakna (p) > 0,05, pemilihan alternatif manapun pada uji post
hoc menunjukkan hasil yang relatif sama (Dahlan, 2008).
Sedangkan pengujian hasil analisis data pada kelompok perlakuan
penelitian ini, menunjukkan hasil data yang tidak terdistribusi normal (p) < 0,05
maka gunakan uji non-parametrik yaitu Kruskal-Wallis dengan post hoc Mann-
Whitney. Apabila pada uji Kruskal-wallis menghasilkan nilai (p) < 0,05 artinya
menunjukkan “paling tidak terdapat dua kelompok yang mempunyai rerata yang
berbeda bermakna”. Selanjutnya untuk mengetahui kelompok manakah yang
mempunyai perbedaan, dapat dilanjutkan dengan analisis post-hoc. Post-hoc pada
uji Kruskal-Wallis adalah uji Mann-Whitnney. Pada uji Mann-Whitnney jika nilai
(p) < 0,05 artinya terdapat perbedaan bermakna antar dua kelompok yang
dibandingkan tersebut, sebaliknya jika nilai (p) > 0,05 maka menunjukkan bahwa
dua kelompok tersebut berbeda tidak bermakna (Dahlan, 2008).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
67
G. Ruang Lingkup Penelitian
Gambar 11. Flowchart ruang lingkup penelitian
Keterangan :
= Peneliti fokus pada pengujian efek antiinflamasi fraksi etanol-heksan
ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L. yang diberikan secara
peroral pada mencit terinduksi karagenin 1%
Penelitian ini merupakan penelitian payung, yang dilakukan berkelompok
untuk mengetahui efek hepatoprotektif, antiinflamasi, dan analgesik pemberian
fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L. Peneliti
hanya fokus pada pengaruh pemberian fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air
daun Macaranga tanarius L. secara peroral terhadap aktivitasnya dalam
penghambatan inflamasi pada mencit terinduksi karagenin 1% sebagai senyawa
iritan (Gambar 11), dengan dosis pemberian fraksi sebesar 47,95; 95,9; dan 191,8
mg/kgBB.
Dosis Fraksi Etanol-Heksan Ekstrak
Metanol-Air
daun Macaranga tanarius L. dosis
137 mg/kgBB
Hepatoprotektif
pada tikus terinduksi karbon tetraklorida
Antiinflamasi pada mencit terinduksi
karagenin 1%
Analgesik pada mencit terinduksi asam
asetat 1%
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
68
H. Uji Fitokimia Fraksi Etanol-Heksan Ekstrak Metanol-Air Daun
Macaranga tanarius L.
Pendekatan skrining fitokimia digunakan untuk mengetahui kandungan
metabolit sekunder, seperti alkaloid, antrakinon, flavonoid, kumarin, saponin
(steroid dan triterpenoid), tannin (polifenolat), minyak atsiri (terpenoid), dan
sebagainya. Skrining fitokimia secara kualititatif merupakan tahap pendahuluan
dalam suatu penelitian fitokimia yang bertujuan untuk mengetahui gambaran
tentang golongan senyawa yang terkandung pada tanaman yang sedang diteliti.
Metode skrining fitokimia dilakukan dengan melihat perubahan warna pada
reaksi pengujian dengan menggunakan suatu pereaksi warna (Kristianti, Aminah,
Tanjung, dan Kurniadi, 2008). Berikut skrining fitokimia yang dilakukan pada
penelitian ini:
1. Uji Alkaloid
Sebanyak 3 mL larutan fraksi ditambahkan dengan 1 mL HCl 2 N dan 6
mL aquadest. Kemudian dipanaskan di atas penangas air selama 2 menit,
didinginkan dan disaring. Sebanyak 3 tetes filtrat dipindahkan pada kaca arloji,
hasilnya diperiksa adanya senyawa alkaloid dengan menambahkan pereaksi
Mayer dan Dragendroff, masing-masing sebanyak 2 tetes. Adanya alkaloid
ditandai dengan terbentuknya endapan putih dengan pereaksi Mayer dan
endapan merah dengan pereaksi Dragendorff (DepKes RI, 2000).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
69
2. Uji Flavonoid
Larutan fraksi diambil sebanyak 2 mL ditambah dengan sedikit serbuk
seng atau magnesium dan 2 mL HCl 2 N. Senyawa flavonoid akan menimbulkan
warna jingga sampai merah (Depkes RI, 2000).
3. Uji Saponin
Larutan ekstrak sebanyak 1 mL ditambahkan 10 mL aquadest dan dikocok
kuat selama 10 menit. Hasil dinyatakan positif apabila buih yang terbentuk
stabil selama tidak kurang dari 10 menit, setinggi 1 cm sampai 10 cm.
Pada penambahan 1 tetes HCl 2 N, buih tidak hilang (DepKes RI, 2000).
4. Uji Triterpenoid/Steroid
Sebanyak 1 mL larutan ekstrak kental diuapkan sampai kering,
kemudian ditambah dengan pereaksi Lieberman-Burchad. Jika warna berubah
menjadi biru atau ungu, menandakan adanya senyawa steroid. Jika warna
berubah menjadi merah, menunjukkan adanya senyawa terpenoid (Harborne,
1987).
5. Uji Fenolik
Sebanyak 2 mL ekstrak ditambahkan dengan 10 mL aquadest lalu
dididihkan selama 10 menit dalam tangas air mendidih. Larutan kemudian
disaring dan filtratnya ditambahkan dengan 3 tetes FeCl3 1%. Terjadinya
warna hijau-biru menunjukkan adanya fenolik (Harborne, 1987).
6. Uji Glikosida
Sebanyak 0,1 mL fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun
Macaranga tanarius L. dimasukkan ke dalam tabung reaksi lalu ditambahkan 2
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
70
mL aquadest, 5 tetes Molisch, dan 2 mL H2SO4 pekat secara hati-hati melalui
dinding tabung reaksi. Hasil positif ditunjukkan dengan adanya cincin ungu pada
batas cairan (Azizah, Suarsini, dan Prabaningtyas, 2014).
7. Uji Tanin
Fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L.
sebanyak 1 mL dan dipindahkan ke atas plat tetes lalu ditambah beberapa tetes
FeCl3. Hasil positif dibuktikan dengan perubahan warna larutan menjadi hijau
sampai biru kehitaman (Azizah, Suarsini, dan Prabaningtyas, 2014).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
71
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui khasiat fraksi etanol-heksan
ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L., sebagai antiinflamasi pada
mencit galur Swiss yang terinduksi karagenin 1%, tujuan tersebut dicapai dengan
membedakan pengujian terhadap penurunan udem yang diamati pada menit ke 0-
360 dengan menggunakan jangka sorong digital. Selain itu dalam penelitian ini
dilakukan skrining fitokimia secara kualitatif, sebagai skrining awal untuk
mengetahui metabolit sekunder yang terkandung dalam fraksi etanol-heksan
ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L, menggunakan metode uji tabung
terhadap alkaloid, flavonoid, saponin, terpenoid/steroid, polifenolik, glikosida, dan
tannin.
A. Penyiapan Bahan
Bahan utama yang digunakan dalam penelitian uji antiinflamasi ini adalah
daun Macaranga tanarius L. Penggunaan daun pada penelitian ini didasarkan pada
penelitian yang telah dilakukan oleh Kumazawa, Murase, Momose, and Fukumoto
(2014) terhadap kandungan prenylflavonoids di bagian daun, tangkai daun, batang,
bunga, dan buah menggunakan metode ekstraksi dengan pelarut metanol. Aktivitas
penangkapan radikal bebas terdapat di seluruh bagian tumbuhan tersebut, dengan
aktivitas sebagai antioksidan sebesar > 30%, sehingga Macaranga tanarius L.
dapat dikembangkan sebagai tanaman yang fungsional.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
72
Bagian tanaman Macaranga tanarius L., yang dapat diperoleh dengan
mudah adalah bagian daun dan dapat dikembangkan menjadi tanaman berkahasiat
dengan kemampuannya menangkap radikal bebas terhadap DPPH. Oleh karena itu,
pada penelitian ini dipilih menggunakan daun sebagai bahan utama selain mudah
dalam memperolehnya juga telah terbukti memiliki aktivitas antioksidan yang
dapat berperan sebagai antiinflamasi.
1. Hasil determinasi tanaman
Determinasi tanaman pada penelitian ini dilakukan untuk memastikan
bahwa tanaman yang digunakan sebagai antiinflamasi adalah benar daun
Macaranga tanarius L., sehingga tidak menyebabkan adanya kesalahan dalam
penyiapan penggunaan bahan. Bahan dalam penelitian ini berupa serbuk dari daun
Macaranga tanarius L., yang diperoleh dari lingkungan Paingan, Maguwoharjo,
Sleman, Yogyakarta.
Determinasi dilakukan di Laboratorium Botani Farmasi Fakultas Farmasi
Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. Determinasi dilakukan dengan
membandingkan bagian dari tanaman seperti daun, batang, bunga, dan buah
menggunakan herbarium Macaranga tanarius L. (Gilda, 2014). Selain itu untuk
membuktikan kebenarannya juga dilakukan determinasi bagian tumbuhan
menggunakan buku acuan (Steenis et al., 1992) hingga tingkat spesies.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
73
Berdasarkan hasil determinasi dan telah sesuai dengan herbarium
Macaranga tanarius L., yang ada di Botani Farmasi Fakultas Farmasi Universitas
Sanata Dharma Yogyakarta, maka terbukti bahwa daun yang digunakan dalam
penelitian ini adalah benar merupakan daun Macaranga tanarius L. (Lampiran 2).
2. Pembuatan serbuk daun Macaranga tanarius L.
Proses penyerbukan dilakukan oleh Laboratorium Penelitian dan Pengujian
Terpadu Universitas Gadjah Mada (LPPT UGM) Yogyakarta. Sebelum dilakukan
proses penyerbukan, penyiapan daun Macaranga tanarius L. dilakukan oleh
peneliti dimulai dari pengambilan, penyortiran, pencucian hingga pengeringan
daun Macaranga tanarius L.
Pengambilan daun Macaranga tanarius L. dilakukan pada pagi hari pukul
07.00-10.00 WIB. Menurut Santoso (2008), waktu panen sebaiknya dilakukan pada
pagi hari pukul 07.00-10.00 atau sore hari. Waktu panen pada pagi hari merupakan
waktu yang paling baik, yaitu saat embun mulai menghilang dan cahaya matahari
belum terlalu terik. Jika panen dilakukan pada siang hari, faktor cuaca panas dan
penguapan membuat hasil panen rusak. Jika keterbatasan waktu yang tidak dapat
melakukan panen pada pagi hari, panen dapat dilakukan pada sore hari (Rahayu
dan Soeleman, 2013).
Pencucian daun Macaranga tanarius L. dilakukan dengan menggunakan air
mengalir, bertujuan agar daun yang diperoleh bebas kotoran dan debu. Selain itu,
dilakukan penyortiran untuk memilih daun yang sesuai dengan kriteria dalam
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
74
penelitian yaitu berwarna hijau, tidak berlubang, tidak berpenyakit dan busuk.
Proses pengeringan dilakukan ± 3 hari dengan cara ditutup kain hitam, hingga
didapatkan daun yang layu untuk selanjutnya dilakukan proses penyerbukan.
Proses penyerbukan dilakukan sesuai prosedur yang tersedia di LPPT
UGM. Daun Macaranga tanarius L. yang telah layu dipotong-potong untuk
memudahkan proses penyerbukan, kemudian dilakukan proses pengeringan
kembali dalam almari pengering pada suhu 45ºC selama 20 jam, hingga
menghasilkan potongan daun yang benar-benar kering (dapat diremas).
Pengeringan tersebut bertujuan untuk mengurangi kadar air, mencegah timbulnya
jamur sehingga dapat disimpan lebih lama tanpa bahan pengawet dan tidak mudah
rusak sehingga komposisi kimianya tidak mengalami perubahan. Setelah itu
potongan daun tersebut diserbuk menggunakan mesin penyerbuk dengan diameter
lubang saringan 1 mm, hasil penyerbukan ditimbang dan dikemas. Serbuk dengan
penghalusan yang tinggi memungkinkan sel-sel yang rusak semakin besar,
sehingga memudahkan pengambilan kandungan senyawa langsung oleh pelarut
yang digunakan.
Serbuk yang digunakan untuk proses ekstraksi mekanik (maserasi), disaring
lagi menggunakan pengayak dengan nomor mess 40, hal ini dikarenakan ukuran
serbuk yang masih terlalu besar. Pengayakan dilakukan dengan tujuan agar
didapatkan ukuran serbuk yang kecil dengan luas permukaan besar, sehingga
interaksi zat cairan (pelarut) dengan serbuk akan semakin besar dan proses
ekstraksi akan semakin efektif. Selain itu waktu yang diperlukan juga lebih singkat
dan mempermudah proses penyarian karena semakin luas permukaan serbuk maka
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
75
perpindahan massa pada proses ekstraksi akan berlangsung cepat (Susiana dkk.,
2012).
Daun kering Macaranga tanarius L. yang digunakan dalam penelitian ini
sebayak 2,7 kg dan setelah dilakukan penyerbukan pada LPPT UGM didapatkan
bobot serbuk daun Macaranga tanarius L. seberat 1200 gram serbuk halus yang
akan digunakan untuk proses pembuatan fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air
daun Macaranga tanarius L.
3. Penetapan kadar air serbuk daun Macaranga tanarius L.
Penetapan kadar air pada serbuk kering daun Macaranga tanarius L.
dilakukan di Laboratorium Pengujian “LPPT-UGM” menggunakan metode
gravimetri dengan prosedur yang telah tersedia. Tujuan dari penetapan kadar air
dari serbuk kering daun Macaranga tanarius L. yaitu untuk mengetahui serbuk
yang digunakan telah memenuhi persyaratan serbuk yang baik, yaitu kurang dari
10% (Direktorat Jendral Pengawasan Obat dan Makanan, 1995).
Hasil perhitungan kadar air dari serbuk daun Macaranga tanarius L.
sebesar 6,66%b/b (lampiran 3). Berdasarkan hasil pengujian tersebut menunjukkan
bahwa kadar air serbuk daun Macaranga tanarius L., telah memenuhi persyaratan
kadar air yang telah ditetapkan.
4. Fraksi etanol-heksan ekstrak metanol air daun Macaranga tanarius L.
Metode fraksinasi daun Macaranga tanarius L., pada penelitian ini
menggunakan pelarut metanol 70% dan air untuk proses ekstraksi hingga
didapatkan ekstrak kental, yang selanjutnya di fraksinasi menggunakan dua pelaut
dengan nilai polaritas yang berbeda yaitu heksan dan etanol 95%. Perbedaan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
76
kepolaran ini diharapkan dapat selektif menyari komponen yang telah tersari pada
hasil ekstrak kental metanol-air sehingga didapatkan senyawa yang terlarut sesuai
dengan kepolaran senyawa yang terkandung di dalamnya.
a. Proses ekstraksi metanol-air daun Macaranga tanarius L.
Proses ekstraksi metanol-air dilakukan melalui proses maserasi yaitu
penggojokan menggunakan shaker, dengan kecepatan penggojokan yang konstan
(140 rpm). Tujuan maserasi ini adalah agar seluruh serbuk dapat kontak dengan
pelarut dan senyawa yang dituju dapat terekstrak. Selain itu penggojokan
menggunakan shaker membantu mempercepat ekstraksi sehingga waktu yang
dibutuhkan lebih singkat dibandingkan dengan metode penyarian dengan cara
merendam serbuk dengan sesekali penggojokan. Ekstraksi yang dilakukan dengan
metode ini disebut ekstraksi mekanik. Pemilihan metode maserasi pada tahap
ekstraksi disebabkan karena metode penyarian ini lebih sederhana, tidak
menggunakan alat yang spesifik, pengerjaannya relatif mudah untuk dilakukan dan
lebih efisien, selain itu metode maserasi dapat digunakan untuk jenis senyawa yang
tahan terhadap panas maupun tidak tahan terhadap panas sehingga pada penelitian
ini digunakan metode maserasi, karena kandungan senyawa daun Macaranga
tanarius tidak diketahui merpakan jenis senyawa yang tahan terhadap panas atau
tidak.
Seberat 40 gram serbuk kering daun Macaranga tanarius L., dimasukkan
ke dalam erlenmeyer dan direndam dalam 200 mL pelarut metanol dan air (100 mL
metanol dan 100 mL air), kemudian diaduk dengan kecepatan konstan
menggunakan shaker, selama 72 jam (Puteri dan Kawabata, 2010). Semakin lama
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
77
waktu maserasi maka kesempatan untuk bersentuhan antara serbuk dengan pelarut
akan semakin besar, sehingga proses ekstraksi akan lebih sempurna.
Penggunaan metanol 70% pada proses maserasi ekstrak metanol-air karena
mayoritas senyawa antioksidan konstituen akan berhasil diekstrak dalam ekstraksi
pertama dengan pelarut metanol (Lim et al., 2009). Selain itu, konsentrasi tinggi
metanol dapat menghambat aktivitas dari oksidase, yang menghancurkan senyawa
polifenol dalam daun, karena cedera atau kerusakan daun (Pinelo, Rubilar, Sineire,
and Nunez, 2004). Sedangkan air merupakan perlarut yang aman dan mampu
manyari komponen senyawa glikosida dan tanin sesuai dengan kandungan yang
telah dilaporkan pada penelitian terhadap daun Macaranga tanarius L.
Oleh karena itu pada penelitian ini dipilih menggunakan pelarut metanol-
air. Pemilihan pelarut ini berdasarkan kesesuaian kepolaran antara senyawa aktif
dengan larutan penyari yang digunakan, sehingga diharapkan dapat melarutkan
komponen senyawa yang larut dan bercampur dengan cairan penyari.
Hasil maserat yang didapatkan dari gabungan proses maserasi dan
remaserasi yang telah disaring, dipekatkan menggunakan vaccum rotary
evaporator. Suhu yang digunakan pada proses evaporasi metanol-air ini adalah
650C yang merupkan titik didih metanol. Proses pemekatan dilakukan ± 3 jam,
penghentian proses pemekatan ini dilihat pada tetesan pelarut yang telah berhenti
menetes di bagian pembuangan labu alas bulat yang terpasang pada alat vaccum
rotary evaporator, yang menunjukkan bahwa sebagian besar pelarut telah menguap
dan hanya meninggalkan senyawa aktif yang dituju. Evaporasi dengan
menggunakan bantuan pompa vakum akan menurunkan tekanan uap pelarut
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
78
sehingga pelarut akan menguap di bawah titik didih normalnya. Tekanan yang
diberikan dari pompa vakum tersebut mengakibatkan pelarut menguap dari
campuran kemudian akan terkondensasi masuk ke dalam labu penampung.
Setelah proses pemekatan masih tersisa filtrat yang cukup banyak, dengan
kandungan pelarut air maka filtrat tersebut ditempatkan pada cawan porselin untuk
selanjutnya dilakukan proses pemekatan dibantu dengan waterbath, tujuannya
adalah menghilangkan pelarut air yang belum menguap saat proses evaporator.
Hasil yang didapatkan berupa ekstrak kental yang kemudian disimpan dalam oven
pada suhu ± 400C selama 24 jam untuk mendapatkan bobot tetap. Ekstrak kental
yang berada dalam cawan ditimbang setiap waktu tertentu selama 24 jam atau
hingga mendapatkan bobot konstan. Hasil yang diperoleh pada pembuatan ekstrak
kental metanol-air daun Macaranga tanarius L., sebanyak 126,24 gram yang
selanjutnya digunakan untuk fraksinasi dengan etanol-heksan.
b. Proses fraksi etanol-heksan daun Macaranga tanarius L.
Setelah didapatkan ekstrak kental dengan bobot tetap, maka proses
selanjutnya adalah fraksinasi menggunakan pelarut heksan dan etanol. Penggunaan
pelarut tersebut disesuaikan pada tingkat kelarutan senyawa aktif pada pelarut yang
digunakan. Hal ini dikarenakan pemilihan cairan penyari yang tepat tergantung
pada sifat fisika kimia zat aktif dalam simplisia dengan prinsip like dissolve like.
Pemilihan penggunaan etanol dikarenakan etanol merupakan pelarut pilihan
untuk memperoleh ekstrak secara klasik seperti ekstrak kering, kental, dan cair.
Perbandingan penggunaan pelarut etanol-heksan sebesar 1:1, karena dengan
perbandingan tersebut dapat dicegah terjadinya ekstraksi klorofil atau zat yang
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
79
bersifat resin dan polimer yang pada umumnya bukan merupakan bagian penting
untuk aktivitas ekstrak (Agoes, 2009). Oleh karena itu, pada proses fraksinasi ini
digunakan pelarut etanol-heksan dari eksrak kental metanol-air daun Macaranga
tanarius L. Penggunaan kedua campuran pelarut tersebut diharapkan dapat selektif
menarik senyawa yang lebih spesifik berdasarkan kedekatan nilai log P yang
menggambarkan nilai kepolaran antara senyawa yang dituju dengan pelarut yang
digunakan.
Proses fraksinasi, menggunakan ekstrak kental yang telah didapatkan dari
penyarian sebelumnya menggunakan metanol-air, kemudian dimaserasi
menggunakan etanol-heksan dengan kecepatan konstran 140 rpm selama 24 jam
dan dilakukan remaserasi. Hasil filtrat disaring menggunakan kertas saring dan
corong Buchner digabungkan untuk selanjutnya dipekatkan menggunakan vaccum
rotary evaporator pada suhu campuran heksan dan etanol yaitu 58,70C ≈ 60
0C
(Agoes, 2009). Setelah tidak terdapat tetesan pada labu alas bulat yang terpasang
pada evaporator maka filtrat yang berwarna coklat pekat tersebut ditempatkan pada
cawan porselin untuk selanjutnya disimpan dalam oven pada suhu 40-500C untuk
mendapatkan bobot fraksi yang tetap.
Penetapan bobot pada fraksi didapatkan dari pengeringan tetap dengan
penyusutan sebesar 0% pada pemanasan 400C. Tujuannya penetapan bobot tersebut
adalah untuk menentukan batasan seberapa banyak senyawa yang hilang selama
proses pengeringan, karena dapat mempengaruhi bobot fraksi yang didapatkan.
Bobot tersebut akan mempengaruhi konsentrasi dan dosis fraksi yang akan
diberikan ke hewan uji untuk melihat aktivitas penghambatan inflamasi. Hasil dari
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
80
proses pengeringan didapatkan tidak ada perubahan pada bobot frakasi sehingga
didapatkan bobot pengeringan tetap. Pengeringan fraksi untuk setiap cawannya,
dilakukan dengan cara penimbangan pada masing-masing cawan untuk
mendapatkan bobot fraksi yang tetap.
Pembuatan fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga
tanarius L. dalam bentuk kental dengan bobot tetap (penyusutan 0%) dibutuhkan
1200 gram serbuk kering, menghasilkan 126,24 gram ekstrak kental metanol-air
hingga didapatkan fraksi kental sebanyak 30,5806 gram. Dari hasil penimbangan
bobot fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L.,
didapatkan rendemen sebesar 2,55%. Rendemen didapatkan dari penimbangan
bobot total fraksi kental yang diperoleh dibandingkan bobotnya dengan serbuk
simplisia awal yang digunakan (dinyatakan dalam persen (%)). Rendemen
merupakan presentase bagian bahan baku yang dapat digunakan atau dimanfaatkan
dengan total bahan baku. Rendemen yang didapatkan sangatlah kecil sehingga
untuk menghasilkan fraksi etanol-heksan memerlukan sampel yang banyak.
B. Hasil Skrining Fitokimia
Skrining fitokimia dalam penelitian ini bertujuan untuk mengetahui
golongan senyawa yang terkandung pada fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air
daun Macaranga tanarius L. Skirining fitokimia merupakan metode yang
sederhana, mudah untuk dilakukan, dan dapat digunakan untuk mengidentifikasi
golongan senyawa serta mengetahui keberadaan senyawa-senyawa aktif biologis
yang terdistribusi dalam jaringan tanaman. Pada penelitian ini dilakukan pengujian
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
81
terhadap adanya kandungan alkaloid, flavonoid, saponin, polifenolik, glikosida,
tannin, dan steroid/triterpenoid untuk kemudian disesuaikan dengan senyawa yang
telah dilaporkan memiliki kemampuan dalam menghambat peradangan atau
inflamasi. Hasil dari skrining fitokimia secara kualitatif menggunakan uji tabung
dapat dilihat pada tabel IV dibawah ini dan terlampir pada (Lampiran 14).
Tabel IV. Hasil pengujian fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun
Macaranga tanarius L.
No Pengujian Fitokimia Tanda Positif Hasil Pengujian Sediaan
1 Alkaloid
Reagen Dragendroff Endapan merah Endapan merah +
Reagen Mayer Endapan putih Endapan putih +
2 Flavonoid Kuning-Jingga Jingga +++
3 Terpenoid/Steroid Merah Coklat -
4 Fenolik Hijau-Biru Hijau-biru ++
5 Saponin Busa > 1 cm
bertahan selama
30 menit
Busa ≤ 1 cm -
6 Tanin Biru Kehitaman Biru Kehitaman +++
7 Glikosida Cincin warna
biru-ungu pada
batas cairan
Terdapat cincin wana
ungu tua pada batas
cairan
++
Keterangan: (+++) intensitas kuat, (++) intensitas sedang, (+) intensitas rendah,
(-) tidak terdeteksi
Berikut perkiraan senyawa yang dapat tersari pada fraksi etanol-heksan
ekstrak metanol-air, berdasarkan kedekatan nilai log P yang menggambarkan
polaritas antara senyawa yang dituju yaitu ellagitannis yang dapat tersari melalui
penyarian ekstraksi metanol-air dengan pelarut yang digunakan pada proses
fraksinasi yaitu etanol-heksan yang cenderung bersifat semi polar.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
82
Tabel V. Kandungan senyawa daun Macaranga tanarius L. yang dituju dan
diduga memiliki aktivitas antioksidan terhadap penghambatan inflamasi
Golongan
Senyawa
Kandungan
Senyawa
Nilai
Log P
senyawa
Nilai Log P
pelarut
(etanol+
heksan)
Hasil Pengujian
Skrining Fitokimia
Ellagitannis 1. Chebullagic Acid
2. Macatannin B
1. 2,30
2. 2,57
2,97
(semi polar)
Positif (+++), hasil uji
tabung menunjukkan
adanya perubahan warna
menjadi biru kehitaman
Flavonoid - - Positif (+++), hasil uji
tabung menunjukkan
terbentuknya warna jingga
Glikosida - - Positif (++), hasil uji tabung
menunjukkan cincin
berwarna ungu tua pada
batas cairan fraksi.
Alkaloid - - Positif (+), hasil uji tabung
menunjukkan terbentuknya
endapan merah dan endapan
putih.
Keterangan:
Kriteria penggolongan kepolaran bila log P 2 < log P < 4 (semi-polar) (Holmberg,
2003).
Hasil skrining fitokimia (Tabel IV) menunjukkan bahwa fraksi etanol-
heksan ekstrak metanol air mengandung flavonoid, flavonoid merupakan salah satu
kelompok produk alami tanaman yang terbesar terutama sebagai fenol baik dalam
kondisi bebas maupun sebagai glikosida yang berikatan. Hasil uji flavonoid pada
fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L. memberikan
hasil positif berupa terbentuknya warna jingga dengan intensitas kuat. Namun pada
penelitian ini tidak diketahui jenis senyawa spesifik dari flavonoid yang mungkin
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
83
dapat tersari melalui fraksi etanol-heksan dari ekstrak metanol-air daun Macaranga
tanarius L. (Tabel V).
Hasil pengujian skrining fitokimia uji tabung pada fraksi etanol-heksan
ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L. menunjukkan adanya kandungan
glikosida ditandai dengan adanya cincin berwarna ungu tua pada batas cairan fraksi
etanol-heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L. selain itu hasil
skrining fitokimia menunjukkan pula adanya kandungan alkaloid (Tabel IV),
ditunjukkan dengan terbentuknya endapan merah dan endapan putih yang memiliki
intensitas lemah. Namun pada penelitian ini tidak diketahui jenis senyawa spesifik
dari glikosida dengan intensitas sedang dan alkaloid dengan intensitas lemah yang
mungkin dapat tersari melalui fraksi etanol-heksan dari ekstrak metanol-air daun
Macaranga tanarius L. (Tabel V).
Selain itu, pada penelitian ini senyawa yang diduga memberikan aktivtas
antiinflamasi adalah chebullagic acid dan macatannin B yang merupakan
kelompok senyawa tanin. Perkiraan senyawa tersebut berdasarkan kedekatan nilai
log P senyawa dengan nilai log P campuran fraksi etanol-heksan, etanol sebesar -
0,16 dan heksan sebesar 3,13 dengan log P campuran sebesar 2,97. Hasil uji tabung
menunjukkan adanya kandungan tanin ditandai dengan adanya perubahan warna
menjadi biru kehitaman (Tabel V). Ellagitannins merupakan golongan tanin yang
terhidrolisis. Tanin merupakan kelompok utama lainnya dari polifenol yang terdiri
dari dua kelompok yaitu tanin terhidrolisis dan tanin terkondensasi. Tanin
terhidrolisis merupakan senyawa yang mengandung inti pusat dari glukosa atau
polyol lain yang teresterifikasi dengan gallic acid, biasa disebut dengan gallotanins
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
84
atau teresterifikasi dengan hexahydroxydiphenic acid yang biasa disebut dengan
ellagitanin (Dai dan Mumper, 2010). Sehingga hasil skrining fitokimia dengan uji
tabung menunjukkan adanya kandung senyawa tanin dengan intensitas kuat dan
fenolik dengan intensitas sedang.
Pengujian kandungan fenolik dilakukan untuk membuktikan adanya gugus
OH dari fenol pada fraksi daun Macaranga tanarius L. Adanya gugus fenolik akan
memberikan warna hijau hingga biru (Tabel IV). Hasil pengujian menunjukkan
warna hijau, hal ini membuktikan bahwa fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air
daun Macaranga tanarius L. mengandung senyawa fenolik. Pada pengujian
kandungan senyawa tannin menunjukkan hasil positif, ditandai dengan
terbentuknya warna biru kehitaman. Pada pengujian skrining fitokimia secara
kualitatif dengan menggunakan uji tabung menunjukkan hasil yang negatif pada
pengujian terpenoid dan saponin.
C. Uji Pendahuluan
Sebelum dilakukannya perlakuan terhadap uji antiinflamasi fraksi etanol-
heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L., perlu dilakukannya
serangkaian uji pendahuluan untuk menetapkan dosis dan selang waktu pemberian
senyawa aktif yang akan digunakan pada perlakuan yang sebenarnya. Uji
pendahuluan yang dilakukan yaitu penetapan dosis kalium diklofenak (Cataflam
Fast®50mg) dan selang waktu pemberian kalium diklofenak sebelum
penginduksian karagenin 1% secara subplantar. Tujuan orientasi ini adalah untuk
menetapkan dosis dan rentang waktu pemberian kalium diklofenak sebagai kontrol
positif antiinflamasi yang efektif dalam mengurangi udem pada kaki mencit.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
85
Penetapan dosis dan rentang waktu pemberian kalium diklofenak dapat
dilihat berdasarkan nilai AUC untuk masing-masing kelompok perlakuan pada
tabel VI berikut ini.
Tabel VI. Uji normalitas nilai rata-rata AUC (mm.menit) pada
orientasi penetapan dosis kalium diklofenak dan selang waktu pemberian
15 dan 30 menit
Kelompok
Rata-rata AUC
total (mm.menit)
(X ± SE)
Nilai p
Kontrol negatif aquadest selang waktu
pemberian 15 menit 711,20 ± 6,41 0,390
(N)
Diklofenak dosis 4,48 mg/kgBB selang
waktu pemberian 15 menit 181,63 ± 15,92 0,726
(N)
Diklofenak dosis 4,48 mg/kgBB selang
waktu pemberian 30 menit 267,15 ± 16,26 0,772
(N)
Diklofenak dosis 9,1 mg/kgBB selang
waktu pemberian 15 menit 280,35 ± 25,81 0,605
(N)
Diklofenak dosis 9,1 mg/kgBB selang
waktu pemberian 30 menit 246,50 ± 11,15 0,790
(N)
Keterangan :
X = Mean (Rata-rata)
SE = Standard Error (SD/√𝑛)
N = Distribusi data normal (p > 0,05)
Hasil tersebut (Tabel VI) menunjukkan bahwa data terdistribusi normal
ditandai dengan nilai p pada seluruh kelompok data (p > 0,05), dan memiliki nilai
homogenitas (p > 0,05) yang menunjukkan bahwa hasil data yang diperoleh
homogen sehingga analisis data pada penentuan dosis efektif kalium diklofenak
dan rentang waktu pemberiannya dilakukan menggunakan uji non-parametrik yaitu
one way ANOVA dengan taraf kepercayaan 95%.
Uji one way ANOVA dengan taraf kepercayaan 95% pada penelitian ini
digunakan untuk mengetahui apakah terdapat perbedaan antar kelompok yaitu
pada kelompok perlakuan kalium diklofenak dengan pemberian dosis dan rentang
waktu yang berbeda, serta kontrol negatif aquadest yang digunakan. Dari hasil
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
86
analisis variansi satu arah, diketahui nilai probabilitasnya 0,000 (p < 0,05) yang
berarti menunjukkan “paling tidak terdapat dua kelompok yang mempunyai rerata
nilai AUC (mm.menit) yang berbeda bermakna”. Oleh karena itu, untuk
mengetahui antara kelompok manakah yang berbeda atau memiliki perbedaan
dilakukan analisis post hoc berupa uji LSD. Hasil analisisnya dapat dilihat pada
tabel VII dan VIII berikut ini.
Tabel VII. Hasil uji LSD AUC total (mm.menit) pada orientasi dosis
efektif diklofenak dan rentang waktu pemberian karagenin antara
kelompok kontrol negatif dan kelompok diklofenak rentang 15 menit
Kelompok Nilai p
Diklofenak dosis 4,48
mg/kgBB waktu
pemberian 15 menit
Kontrol negatif aquadest waktu
pemberian 15 menit 0,000(BB)
Diklofenak dosis 9,1 mg/kgBB
waktu pemberian 15 menit 0,008(BB)
Diklofenak dosis 9,1
mg/kgBB waktu
pemberian 15 menit
Kontrol negatif aquadest waktu
pemberian 15 menit 0,000(BB)
Diklofenak dosis 4,48
mg/kgBB waktu pemberian 15
menit 0,008
(BB)
Keterangan :
BTB = Berbeda tidak bermakna (p > 0,05)
BB = Berbeda bermakna (p < 0,05)
Tabel VIII. Hasil uji LSD AUC total (mm.menit) pada orientasi dosis
efektif diklofenak dan rentang waktu pemberian karagenin antara
711,20 ± 6,41 181,63 ± 15,92 280,35 ± 25,81
Gambar 12. Diagram batang rata-rata nilai AUC (mm.menit) pada orientasi
dosis efektif diklofenak dan rentang waktu pemberian karagenin antara
kelompok kontrol negatif dan kelompok diklofenak rentang 15 menit
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
87
Tabel VIII. Hasil uji LSD AUC total (mm.menit) pada orientasi dosis
efektif diklofenak kelompok diklofenak rentang 15 dan 30 menit
Kelompok Perlakuan Diklofenak Nilai p
Dosis 4,48 mg/kgBB
waktu pemberian 15 menit
Dosis 9,1 mg/kgBB waktu
pemberian 15 menit 0,005(BB)
Dosis 4,48 mg/kgBB waktu
pemberian 30 menit 0,010(BB)
Dosis 9,1 mg/kgBB waktu
pemberian 30 menit 0,035(BB)
Dosis 9,1 mg/kgBB waktu
pemberian 15 menit
Dosis 4,48 mg/kgBB waktu
pemberian 30 menit 0,620(BTB)
Dosis 9,1 mg/kgBB waktu
pemberian 30 menit 0,222(BTB)
Dosis 4,48 mg/kgBB
waktu pemberian 30 menit
Dosis 9,1 mg/kgBB waktu
pemberian 30 menit 0,443(BTB)
Keterangan :
BTB = Berbeda tidak bermakna (p > 0,05)
BB = Berbeda bermakna (p < 0,05)
Gambar 13. Diagram batang rata-rata nilai AUC (mm.menit) pada dosis
efektif diklofenak dan rentang waktu pemberian karagenin antara kelompok
diklofenak diklofenak rentang 15 dan 30 menit
Berdasarkan hasil uji post hoc LSD (Tabel VII) kontrol negatif aquadest
yang merupakan pelarut kalium diklofenak menunjukkan hasil statistika nilai AUC
yang berbeda secara signifikan terhadap pemberian kalium diklofenak dosis 4,48
dan 9,1 mg/kgBB dengan selang waktu pemberian 15 menit sebelum injeksi
181,63 ± 15,92 280,35 ± 25,81 267,15 ± 16,26 246,50 ± 11,15
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
88
karagenin 1% secara subplantar. Dilihat dari tabel rata-rata nilai AUC (mm.menit),
nilai AUC aquadest = 711,20 ± 6,41 yang menunjukkan pada kelompok aquadest
masih memberikan udem yang paling besar dibandingkan kontrol positif
diklofenak (Tabel VI) dan (Gambar 12). Berdasarkan hasil tersebut dapat diketahui
bahwa pemberian aquadest tidak memberikan penurunan udem yang berarti
dibandingkan dengan kelompok perlakuan dengan pemberian kalium diklofenak
pada dosis 4,48 dan 9,1 mg/kgBB selang waktu pemberian 15 menit.
Dosis pemberian kalium diklofenak dosis 4,48 mg/kgBB dengan selang
waktu pemberian 15 menit berbeda bermakna (Tabel VIII) dan (Gambar 13)
terhadap dosis 4,48 mg/kgBB dengan selang waktu pemberian 30 menit, dosis 9,1
mg/kgBB dengan selang waktu pemberian 15 menit, dan dosis 9,1 mg/kgBB
dengan selang waktu pemberian 30 menit sebelum penginjeksian karagenin 1%
secara subplantar. Berdasarkan tabel rata-rata nilai AUC (mm.menit) dosis 4,48
mg/kgBB selang waktu pemberian 15 menit memberikan nilai AUC yang paling
rendah dibandingkan kelompok perlakuan yang lainnya yaitu sebesar 181,63 ±
15,92. Hal tersebut menunjukkan bahwa pemberian kalium diklofenak pada dosis
4,48 mg/kgBB secara peroral dengan selang waktu pemberian 15 menit telah
memberikan penurunan udem yang paling rendah, artinya diklofenak telah dapat
menimbulkan efek antiinflamasi yang maksimal pada dosis dan rentang waktu
tersebut. Oleh karena itu pada penelitian ini dipilih pemberian kalium diklofenak
dosis 4,48 mg/kgBB dengan selang waktu pemberian 15 menit.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
89
D. Hasil Pengujian Efek Antiinflamasi Fraksi Etanol-Heksan Ekstrak
Metanol-Air Daun Macaranga tanarius L.
Parameter utama yang digunakan untuk mengevaluasi efek antiinflamasi
fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L. yaitu adanya
penurunan nilai AUC (mm.menit) yang menggambarkan penurunan tebal udem
pada telapak kaki mencit terinduksi karagenin 1% tiap satuan waktu (menit).
Pengujian efek antiinflamasi fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun
Macaranga tanarius L. dilakukan sesuai dengan hasil uji pendahuluan (orientasi).
Penghambatan inflamasi dapat ditunjukkan dengan penurunan besar udem
telapak kaki mencit terinduksi karagenin 1% pada kelompok perlakuan fraksi
etanol-heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L. beserta kelompok
kontrol negatif dan kelompok kontrol positif. Data purata nilai AUC yang
menunjukkan nilai besar udem tiap satuan menit dan hasil uji normalitas pada
kelompok perlakuaan fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga
tanarius L, beserta kelompok kontrol negatif (aquadest dan CMC-Na), dan
kelompok kontrol positif disajikan dalam bentuk purta ± SE dapat dilihat pada
tabel IX.
Tabel IX. Rata-rata nilai AUC (mm.menit) dan hasil pengujian normalitas
pada kelompok uji antiinflamasi (n = 5)
Kelompok 𝑿 ± SE AUC
(mm.menit)
Nilai p
Kelompok kontrol negatif aquadest
25mg/kgBB 696,99 ± 9,39 0,423
(N)
Kelompok kontrol negatif CMC-Na
3,836mg/20gramBB 724,19 ± 8,07 0,006
(TN)
Kelompok perlakuan Kalium Diklofenak
4,48mg/kgBB mencit 312,39 ± 5,72 0,102
(N)
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
90
Keterangan :
X = Mean (rata-rata)
SE = Standard error
N = Distribusi data normal (p>0,05)
TN = Distribusi data tidak normal (p<0,05)
Hasil nilai rata-rata AUC (mm.menit) dari masing-masing kelompok
perlakuan (kontrol negatif, kontrol positif, dan kelompok perlakuan fraksi etanol-
heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L dengan tiga peringkat
dosis), menunjukkan hasil bahwa sebaran data tidak terdistribusi normal (Tabel
IX) sehingga digunakan pengujian non-parametrik test yaitu Kruskal-Wallis Test,
hasilnya menunjukkan nilai probabilitas (p) < 0,05 artinya “paling tidak” terdapat
dua kelompok yang berbeda. Maka dilanjutkan analisis post hoc berupa Mann-
Whitney untuk mengetahui antara kelompok manakah yang berbeda atau memiliki
perbedaan. Hasil analisis Mann-Whitney dapat dilihat pada tabel X.
Berdasarkan hasil analisis secara statistika menggunakan Mann-Whitney
Test (Tabel X) dan diagram batang (Gambar 14) dapat diketahui perbedaan antar
kelompok perlakuan. Kontrol negatif aquadest dan CMC-Na dosis pemberian
191,8 mg/kgBB, menunjukkan nilai probabilitas (p > 0,05) yang artinya nilai
AUC (tebal udem (mm.menit)) antara kelompok pemberian aquadest dan CMC-
Na berbeda tidak bermakna pada pengujian efek antiinflamasi. Penggunaan CMC-
Na dan aquadest sebagai kontrol negatif memiliki hasil yang sama, maka untuk
analisis selanjutnya dapat digunakan salah satu kontrol negatif untuk melihat
Kelompok perlakuan fraksi etanol-heksan
ekstrak metanol air dosis 47,95 mg/kgBB 589,34 ± 4,78 0,189
(N)
Kelompok perlakuan fraksi etanol-heksan
ekstrak metanol air dosis 95,9 mg/kgBB 548,97 ± 5,62 0,074
(N)
Kelompok perlakuan fraksi etanol-heksan
ekstrak metanol air dosis 191,8 mg/kgBB 438,53 ± 1,41 0,387
(N)
Tabel IX. Lanjutan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
91
perbedaannya dalam memberikan penghambatan inflamasi dengan kelompok
kontrol negatif dan kelompok perlakuan fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air
daun Macaranga tanarius L.
Tabel X. Hasil uji Mann-Whitney Test rata-rata nilai AUC (mm.menit) pada
mencit terinduksi karagenin 1%
Kelompok Nilai p
Kontrol negatif
aquadest
Kontrol negatif CMC-Na 0,076 (BTB)
Kontrol positif diklofenak 4,48 mg/kgBB 0,009 (BB)
Fraksi etanol-heksan ekstrak metanol air daun
Macaranga tanarius L. dosis 47,95 mg/kgBB 0,009 (BB)
Fraksi etanol-heksan ekstrak metanol air daun
Macaranga tanarius L. dosis 95,9 mg/kgBB 0,009 (BB)
Fraksi etanol-heksan ekstrak metanol air daun
Macaranga tanarius L. dosis 191,8 mg/kgBB 0,009 (BB)
Kontrol negatif
CMC-Na
Kontrol positif diklofenak 4,48 mg/kgBB 0,009 (BB)
Fraksi etanol-heksan ekstrak metanol air daun
Macaranga tanarius L. dosis 47,95 mg/kgBB 0,009 (BB)
Fraksi etanol-heksan ekstrak metanol air daun
Macaranga tanarius L. dosis 95,9 mg/kgBB 0,009 (BB)
Fraksi etanol-heksan ekstrak metanol air daun
Macaranga tanarius L. dosis 191,8 mg/kgBB 0,009 (BB)
Kontrol positif
diklofenak 4,48
mg/kgBB
Fraksi etanol-heksan ekstrak metanol air daun
Macaranga tanarius L. dosis 47,95 mg/kgBB 0,009 (BB)
Fraksi etanol-heksan ekstrak metanol air daun
Macaranga tanarius L. dosis 95,9 mg/kgBB 0,009 (BB)
Fraksi etanol-heksan ekstrak metanol air daun
Macaranga tanarius L. dosis 191,8 mg/kgBB 0,009 (BB)
Fraksi etanol-
heksan ekstrak
metanol air daun
Macaranga
tanarius L. dosis
47,95 mg/kgBB
Fraksi etanol-heksan ekstrak metanol air daun
Macaranga tanarius L. dosis 95,9 mg/kgBB 0,009 (BB)
Fraksi etanol-heksan ekstrak metanol air daun
Macaranga tanarius L. dosis 191,8 mg/kgBB 0,009 (BB)
Fraksi etanol-
heksan ekstrak
metanol air daun
Macaranga
tanarius L. dosis
95,9 mg/kgBB
Fraksi etanol-heksan ekstrak metanol air daun
Macaranga tanarius L. dosis 191,8 mg/kgBB 0,009 (BB)
Keterangan :
BB = Berbeda Bermakna (p < 0,05) BTB = Berbeda Tidak Bermakna (p > 0,05)
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
92
Gambar 14. Diagram batang rata-rata nilai AUC pada kelompok perlakuan
uji antiinflamasi
Keterangan:
I = Kelompok kontrol negatif aquadest
II = Kelompok kontrol negatif CMC-Na 3,836mg/20gramBB mencit
III = Kelompok perlakuan Kalium Diklofenak 4,48mg/kgBB mencit
IV = Kelompok perlakuan fraksi etanol-heksan ekstrak metanol air daun
Macaranga tanarius L. dosis 47,95 mg/kgBB
V = Kelompok perlakuan fraksi etanol-heksan ekstrak metanol air daun
Macaranga tanarius L. dosis 95,9 mg/kgBB
VI = Kelompok perlakuan fraksi etanol-heksan ekstrak metanol air daun
Macaranga tanarius L. dosis 191,8 mg/kgBB
Tabel XI. Rata-rata persen (%) penghambatan inflamasi pada kelompok
perlakuan uji antiinflamasi
Kelompok Perlakuan 𝒙 ± SE (%) Nilai p
Kelompok kontrol negatif CMC-Na
191,8 mg/kgBB mencit 0,00 ± 1,11 0,006
(TN) Kelompok perlakuan Kalium Diklofenak
4,48mg/kgBB mencit 56,86 ± 0,79 0,102
(N)
Kelompok perlakuan fraksi etanol-heksan
ekstrak metanol air dosis 47,95 mg/kgBB 18,62 ± 0,66 0,189
(N)
Kelompok perlakuan fraksi etanol-heksan
ekstrak metanol air dosis 95,9 mg/kgBB 24,19 ± 0,77 0,032(TN)
Kelompok perlakuan fraksi etanol-heksan
ekstrak metanol air dosis 191,8 mg/kgBB 39,57 ± 0,15 0,599
(N)
Keterangan :
X = Mean (Rata-rata)
SE = Standard Error (SD/√𝑛)
N = Distribusi data normal (p > 0,05)
696,99 ± 9,39 724,19 ± 8,07 312,39 ± 5,72 589,34 ± 4,78 548,97 ± 5,62 438,53 ± 1,41
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
93
Hasil purata persen penghambatan inflamasi antar kelompok perlakuan
(Tabel XI) kontrol negatif, kontrol positif beserta kelompok perlakuan fraksi
etanol-heksan ekstrak metanol air pada tiga peringkat dosis menunjukkan bahwa
data tidak terdistribusi normal sehingga digunakan pengujian non-parametrik test
yaitu Kruskal-Wallis Test, hasilnya menunjukkan nilai probabilitas (p) < 0,05
artinya “paling tidak” terdapat dua kelompok yang berbeda. Kemudian dilanjutkan
analisis menggunakan Mann-Whitney test untuk mengetahui kelompok mana yang
memiliki perbedaan bermakna terhadap kemampuannya untuk memberikan efek
antiinflamasi, hasil analisis Mann-Whitney test dapat dilihat pada (Tabel XII) dan
grafik yang menunjukkan keberbedaan antar kelompok kontrol dan perlakuan
(Gambar 15).
Tabel XII. Uji Mann-Withney persen (%) penghambatan inflamasi kelompok
perlakuan uji antiinflamasi
Kelompok Nilai p
Kontrol negatif
CMC-Na
Kontrol positif diklofenak 4,48 mg/kgBB 0,009 (BB)
Fraksi etanol-heksan ekstrak metanol air daun
Macaranga tanarius L. dosis 47,95 mg/kgBB 0,009 (BB)
Fraksi etanol-heksan ekstrak metanol air daun
Macaranga tanarius L. dosis 95,9 mg/kgBB 0,009 (BB)
Fraksi etanol-heksan ekstrak metanol air daun
Macaranga tanarius L. dosis 191,8 mg/kgBB 0,009 (BB)
Kontrol positif
diklofenak 4,48
mg/kgBB
Fraksi etanol-heksan ekstrak metanol air daun
Macaranga tanarius L. dosis 47,95 mg/kgBB 0,009 (BB)
Fraksi etanol-heksan ekstrak metanol air daun
Macaranga tanarius L. dosis 95,9 mg/kgBB 0,009 (BB)
Fraksi etanol-heksan ekstrak metanol air daun
Macaranga tanarius L. dosis 191,8 mg/kgBB 0,009 (BB)
Fraksi etanol-
heksan ekstrak
metanol air daun
Macaranga
tanarius L. dosis
47,95 mg/kgBB
Fraksi etanol-heksan ekstrak metanol air daun
Macaranga tanarius L. dosis 95,9 mg/kgBB 0,009 (BB)
Fraksi etanol-heksan ekstrak metanol air daun
Macaranga tanarius L. dosis 191,8 mg/kgBB 0,009 (BB)
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
94
Fraksi etanol-
heksan ekstrak
metanol air daun
Macaranga
tanarius L. dosis
95,9 mg/kgBB
Fraksi etanol-heksan ekstrak metanol air daun
Macaranga tanarius L. dosis 191,8 mg/kgBB 0,009
(BB)
Keterangan:
BB = Berbeda Bermakna (p < 0,05) BTB = Berbeda Tidak Bermakna (p > 0,05)
Gambar 15. Diagram batang persen (%) penghambatan inflamasi pada
masing-masing kelompok perlakuan uji antiinflamasi
Keterangan:
I = Kelompok kontrol negatif CMC-Na 191,8 mg/kgBB
II = Kelompok perlakuan Kalium Diklofenak 4,48mg/kgBB mencit
III = Kelompok perlakuan fraksi etanol-heksan ekstrak metanol air daun
Macaranga tanarius L. dosis 47,95 mg/kgBB
IV = Kelompok perlakuan fraksi etanol-heksan ekstrak metanol air daun
Macaranga tanarius L. dosis 95,9 mg/kgBB
V = Kelompok perlakuan fraksi etanol-heksan ekstrak metanol air daun
Macaranga tanarius L. dosis 191,8 mg/kgBB
1. Kontrol negatif
Pada penelitian ini digunakan kontrol negatif bertujuan untuk memastikan
bahwa pemberian aquadest sebagai pelarut kalium diklofenak dan CMC-Na
sebagai pelarut fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius
0,00 ± 1,11 56,86 ± 0,79 18,62 ± 0,66 24,19 ± 0,77 39,57 ± 0,15
Tabel XII. Lanjutan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
95
L., tidak memberikan pengaruh terhadap efek antiinflamasi kalium diklofenak
sebagai obat antiinflmasi dan pemberian sediaan fraksi yang diduga berpotensi
memiliki aktifitas penghambatan inflamasi pada mencit terinduksi karagenin 1%.
Hasil pengukuran tebal udem selama 6 jam akan didapatkan nilai tebal
udem (mm) tiap satuan menit yang selanjutnya dapat dilakukan perhitungan nilai
AUC yang menggambarkan tebal udem telapak kaki mencit terinduksi karagenin
1% dalam mm.menit (millimeter.menit). Tujuannya adalah untuk melihat
pengaruh pemberian senyawa uji yang telah dihitung menggunakan metode
trapezoid (Tabel IX) pada kelompok kontrol negatif aquadest dan CMC-Na
menghasilkan purata tebal udem yang paling besar diantara kelompok perlakuan
lainnya. Nilai AUC kontrol negatif aquadest sebesar 696,99 ± 9,39 mm.menit dan
kontrol negatif CMC-Na sebesar 724,19 ± 8,07 mm.menit, dengan hasil uji
statistika menunjukkan adanya perbedaan yang tidak bermakna antar keduanya
(Tabel X).
Pada penelitian ini kontrol negatif yang digunakan untuk membandingkan
dengan kelompok perlakuan pemberian fraksi heksan-etanol ekstrak metanol-air
daun Macaranga tanarius L., adalah CMC-Na yang merupakan pelarut sediaan
fraksi tersebut. Berikut ini (Gambar 15) hasil tebal udem yang dihasilkan selama 6
jam, kelompok kontrol negatif CMC-Na pada mencit terinduksi karagenin 1%.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
96
27.66 28.43 29.28 30.50
63.09 62.61 60.54 59.04 58.17 57.45 56.79 55.77 54.42 53.25
0.00
10.00
20.00
30.00
40.00
50.00
60.00
70.00
Mea
n N
ila
i A
UC
(m
m.m
enit
)
Waktu (menit)
Gambar 16. Grafik nilai AUC kontrol negatif CMC-Na
Berdasarkan (Gambar 16) udem akan mulai meningkat pada menit ke 15
yang merupakan fase awal yang terjadi pada inflamasi akut puncaknya pada menit
ke 60. Adanya peningkatan udem tersebut dikarenakan induksi senyawa iritan dari
karagenin secara suplantar pada telapak kaki mencit yang menyebabkan adanya
kerusakan jaringan. Inflamasi merupakan respon tubuh terhadap kerusakan jaringan
akibat adanya rangsangan merugikan seperti rangsangan kimia. Kerusakan jaringan
tersebut akan memicu pelepasan mediator yang mengawali proses inflamasi seperti
histamin, serotonin, kinin dan prostaglandin sehingga dapat menimbulkan udem
yang mampu bertahan selama 6 jam (Hidayati, Listyawati, dan Setyawan, 2005).
Pemberian karagenin tanpa adanya senyawa yang bertindak sebagai
antiinflamasi akan mengakibatkan adanya peningkatan tebal udem kaki yang
ditandai dengan bertambah besarnya pada telapak kaki mencit mendakan terjadinya
inflamasi. Beberapa penurunan tebal udem pada telapak kaki mencit terjadi pada
menit-menit terakhir dapat disebabkan oleh respon dari tubuh yang berupaya untuk
Kontrol Negatif CMC-Na
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
97
mempertahankan dan memulihkan tubuhnya dari peradangan yang terjadi, namun
respon tubuh tersebut tidak dapat mengatasi udem dengan baik dibandingkan
kelompok uji lainnya
Karagenin yang digunakan pada penelitian ini adalah karagenin tipe λ
sebagai penginduksi udem. Penginduksian karagenin digambarkan secara bhipasic
yaitu memiliki dua fase untuk menyebabkan inflamasi. Berdasarkan Suleyman et
al. (2004) fase awal ditandai dengan pelepasan histamin, serotonin, dan bradikinin
yang akan berakhir hingga menit ke- 60 dan fase kedua berhubungan dengan
pelepasan mediator inflamasi lainnya seperti prostaglandin yang mengakibatkan
terjadinya peningkatan COX (enzim siklooksigenase) dan pelepasan radikal bebas
terjadi antara menit ke- 60 menit setelah injeksi dan berakhir setelah menit ke 180.
Setelah pelepasan mediator inflamasi maka udem akan bertahan selama 6 jam dan
berangsur-angsur akan berkurang dalam waktu 24 jam sehingga pada grafik di atas
terlihat terjadi penurunan tebal udem yang tidak terlalu signifikan.
Hasil penelitian uji antiinflamasi ekstrak metanol-air Macaranga tanarius
L. pada mencit yang terinduksi karagenin 1% oleh Kurniawaty dkk. (2010),
penggunaan kontrol negatif CMC-Na sebagai pelarut ekstrak dan aquadest sebagai
pelarut kalium diklofenak didapatkan hasil rata-rata bobot udem berbeda tidak
bermakna dengan kelompok kontrol karagenin 1% yang menunjukkan tidak
adanya penurunan udem yang berarti, sehingga hal tersebut menunjukkan tidak
adanya kemampuan sebagai antiinflamasi pada kedua kontrol negatif tersebut.
Dengan demikian, hasil pengukuran penggunaan kontrol negatif aquadest
dan CMC-Na terhadap aktivitas antiinflamasi pada mencit yang terinduksi
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
98
karagenin 1% menunjukkan adanya peningkatan udem pada telapak kaki hewan uji
dengan persen pura penghambatan 0,00 ± 1,11, sehingga dapat disimpulkan bahwa
pemberian CMC-Na dan aquadest tidak memberikan efek antiinflamasi.
2. Kontrol positif diklofenak (Cataflam Fast®50mg ) dosis 4,48 mg/kgBB
Pada penelitian uji antiinflamasi fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air
daun Macaranga tanarius L., pada mencit terinduksi karagenin, digunakan kontrol
positif berupa kalium diklofenak yang merupakan obat antiinflamasi. Tujuan
adanya kontrol positif adalah untuk membandingkan efek antiinflamasi dengan
senyawa uji pada penelitian ini yaitu fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun
Macaranga tanarius L., pada tiga peringkat dosis 47,95; 95,9; dan 191,8 mg/kgBB
apakah memiliki efek antiinflamasi yang lebih baik dibandingkan kontrol positif
diklofenak yang merupakan obat antiinflamasi.
Aktivitas kalium diklofenak sebagai obat antiinflamasi menunjukkan hasil
penurunan udem yang paling besar dengan nilai rata-rata tebal udem tiap satuan
waktu (AUC) 312,392 ± 5,72 mm.menit dan persen penghambatan inflamasi
sebesar 56,86% yang lebih besar dibandingkan kelompok lainnya (Tabel XI).
Persen penghambatan inflamasi kontrol positif diklofenak berdasarkan analisis
non-parametrik dengan uji Mann-Whitney menunjukkan nilai probabilitas (p <
0,05) yang artinya kemampuan penghambatan inflamasi ditunjukkan dengan
penurunan tebal udem pada pemberian diklofenak berbeda bermakna dengan
kelompok perlakuan lainnya (kontrol negatif CMC-Na, tiga peringkat dosis fraksi
etanol-heksan ekstrak metanol-air) daun Macaranga tanarius L (Tabel XII) dan
(Gambar 15).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
99
Kontrol positif diklofenak dibandingkan dengan kontrol negatif CMC-Na
berdasarkan hasil analisis Mann-Whitney nilai probabilitas (p < 0,05) menunjukkan
bahwa adanya perbedaan bermakna antara kontrol positif diklofenak dosis 4,48
mg/kgBB dengan nilai purata AUC 312,39 ± 5,72 dan persen penghambatan
inflamasi 56,86 % dibandingkan dengan dengan kontrol negatif CMC-Na dosis
yang memiliki nilai purata AUC 724,19 ± 8,07 dan persen penghambatan 0,00 %.
Hal ini menunjukkan bahwa, kalium diklofenak dengan dosis pemberian 4,48
mg/kgBB memiliki penghambatan inflamasi yang lebih besar dibandingkan kontrol
negatif yang menunjukkan tidak adanya potensi penghambatan inflamasi.
3. Kelompok perlakuan fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun
Macaranga tanarius L.
Adanya penurunan udem pada telapak kaki mencit akibat perlakuan fraksi
etanol-heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L. yang dapat dilihat
dari penurunan nilai AUC (mm.menit). Penurunan tersebut merupakan parameter
utama untuk mengevaluasi efek antiinflamasi fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-
air daun Macaranga tanarius L. terhadap mencit jantan galur Swiss terinduksi
karagenin 1%.
a. Kelompok perlakuan fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun
Macaranga tanarius L., dosis terendah (47,95 mg/kgBB).
Kelompok perlakuan fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun
Macaranga tanarius L. dosis 47,95 mg/kgBB memiliki nilai purata AUC sebesar
589,34 ± 4,78 mm.menit dengan persen penghambatan inflamasi 18,62%. Nilai
AUC tersebut dibandingkan dengan kontrol negatif CMC-Na sebagai pelarut fraksi
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
100
yang memiliki nilai purata AUC sebesar 724,19 ± 8,07 mm.menit dan persen
penghambatan inflamasi 0%, kemudian hasilnya dianalisis dengan Mann-Whitney
test didapatkan nilai probabilitas (p < 0,05) menunjukkan adanya perbedaan
bermakna antar kedua kelompok tersebut. Hasil analisis tersebut menunjukkan
bahwa fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L. dosis
47,95 mg/kgBB memiliki efek penghambatan inflamasi.
Apabila dibandingkan dengan kontrol positif diklofenak yang memiliki
nilai purata AUC sebesar 312,39 ± 5,72 mm.menit dan persen penghambatan
inflamasi 56,86 %, kemudian dianalisis dengan Mann-Whitney test didapatkan nilai
probabilitas (p < 0,05) menunjukkan adanya perbedaan bermakna antar kelompok
kontrol positif dengan kelompok perlakuan dosis 47,95 mg/kgBB. Hasil analisis
tersebut menunjukkan bahwa fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun
Macaranga tanarius L. dosis 47,95 mg/kgBB tersebut memiliki potensi
penghambatan inflamasi lebih rendah dibandingkan dengan kelompok perlakuan
kalium diklofenak sebagai obat antiinflamasi (NSAID) dengan dosis pemberian
4,48 mg/kgBB.
b. Kelompok perlakuan fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun
Macaranga tanarius L., dosis tengah (95,9 mg/kgBB).
Kelompok perlakuan fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun
Macaranga tanarius L. dosis 95,9 mg/kgBB memiliki nilai purata AUC sebesar
548,97 ± 5,62 mm.menit dan persen penghambatan inflamasi 24,19%. Nilai AUC
dosis tengah tersebut bila dibandingkan dengan kontrol negatif CMC-Na sebagai
pelarut fraksi yang memiliki nilai purata AUC sebesar 724,19 ± 8,07 mm.menit dan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
101
persen penghambatan inflamasi 0%, kemudian dianalisis dengan Mann-Whitney
test didapatkan nilai probabilitas (p < 0,05) menunjukkan adanya perbedaan
bermakna antar kedua kelompok. Hasil analisis tersebut menunjukkan bahwa fraksi
etanol-heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L.dosis 95,9
mg/kgBB memiliki efek penghambatan inflamasi.
Apabila dibandingkan dengan kontrol positif diklofenak yang memiliki
nilai purata AUC sebesar 312,39 ± 5,72 mm.menit dan persen penghambatan
inflamasi 56,86 %, yang kemudian dianalisis dengan Mann-Whitney Test
didapatkan nilai probabilitas (p < 0,05) menunjukkan adanya perbedaan bermakna
antar kedua kelompok. Hasil analisis tersebut menunjukkan bahwa fraksi etanol-
heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L.dosis 95,9 mg/kgBB
memiliki potensi penghambatan inflamasi lebih rendah dibandingkan dengan
kelompok perlakuan kalium diklofenak sebagai obat antiinflamasi (NSAID).
c. Kelompok perlakuan fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun
Macaranga tanarius L., dosis tertinggi (191,8 mg/kgBB).
Kelompok perlakuan fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun
Macaranga tanarius L. dosis 191,8 mg/kgBB memiliki nilai purata AUC sebesar
438,53 ± 1,41 mm.menit dan persen penghambatan inflamasi 39,57 %. Nilai AUC
tersebut bila dibandingkan dengan kontrol negatif CMC-Na sebagai pelarut fraksi
yang memiliki nilai purata AUC sebesar 724,19 ± 8,07 mm.menit dan persen
penghambatan inflamasi 0% yang dianalisis dengan Mann-Whitney test didapatkan
nilai probabilitas (p < 0,05), hal ini menunjukkan adanya perbedaan bermakna
antar kedua kelompok. Hasil analisis tersebut menunjukkan bahwa fraksi etanol-
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
102
heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L. dosis 191,8 mg/kgBB
memiliki efek penghambatan inflamasi.
Apabila dibandingkan dengan kontrol positif diklofenak yang memiliki
nilai purata AUC sebesar 312,39 ± 5,72 mm.menit dan persen penghambatan
inflamasi 56,86 %, yang kemudian dianalisis dengan Mann-Whitney test
didapatkan nilai probabilitas (p < 0,05) menunjukkan adanya perbedaan bermakna
antar kedua kelompok. Hasil analisis tersebut menunjukkan bahwa fraksi etanol-
heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L. dosis 191,8 mg/kgBB
memiliki potensi penghambatan inflamasi lebih rendah dibandingkan dengan
kelompok perlakuan kalium diklofenak sebagai obat antiinflamasi (NSAID).
d. Perbandingan efek antiinflamasi antar kelompok perlakuan fraksi etanol-
heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L.
Kelompok perlakuan fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun
Macaranga tanarius L. dosis 47,95 mg/kgBB menghasilkan nilai purata AUC
sebesar 589,34 ± 4,78 mm.menit dan persen penghambatan inflamasi 18,62 %.
Apabila dibandingkan dengan kelompok perlakuan fraksi etanol-heksan ekstrak
metanol-air daun Macaranga tanarius L. dosis 95,9 mg/kgBB dengan nilai purata
AUC sebesar 548,97 ± 5,62 mm.menit dan persen penghambatan 24,19 %,
kemuadin dianalisis dengan menggunakan Mann-Whitney test, hasil analisis
statistika tersebut didapatkan nilai probabilitas (p < 0,05) yang menunjukkan
adanya perbedaan bermakna antar kelompok perlakuan fraksi etanol-heksan
ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L. pada dosis 47,95 mg/kgBB
dengan dosis pemberian 95,9 mg/kgBB. Berdasarkan persen penghambatan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
103
inflamasi dan hasil analisis secara statistika, efek antiinflamasi fraksi etanol-heksan
ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L. dosis 47,95 mg/kgBB memiliki
potensi penghambatan inflamasi lebih rendah dibandingkan dengan kelompok
perlakuan fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L.
pada dosis 95,9 mg/kgBB.
Kelompok perlakuan fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun
Macaranga tanarius L. dosis 95,9 mg/kgBB dengan nilai purata AUC sebesar
548,97 ± 5,62 mm.menit dan persen penghambatan inflamasi 24,19 %
dibandingkan dengan kelompok perlakuan fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air
daun Macaranga tanarius L. dosis 191,8 mg/kgBB yang memiliki nilai purata
AUC 438,53 ± 1,41 mm.menit dan persen penghambatan inflamasi sebesar
39,57%, kemudian hasilnya dianalisis dengan Mann-Whitney test. Hasil analisis
statistika didapatkan nilai probabilitas (p < 0,05) menunjukkan adanya perbedaan
bermakna antar kedua kelompok perlakuan tersebut. Berdasarkan persen
penghambatan inflamasi dan hasil analisis secara statistika menunjukkan bahwa
fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L. dosis 95,9
mg/kgBB memiliki efek penghambatan inflamasi lebih rendah dibandingkan
dengan kelompok perlakuan fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun
Macaranga tanarius L. pada dosis 191,8 mg/kgBB.
Pada kelompok perlakuan pemberian fraksi heksan-etanol ekstrak metanol-
air daun Macaranga tanarius L. dosis 47,95 mg/kgBB yang merupakan dosis
terendah memiliki nilai purata AUC 589,34 ± 4,78 mm.menit dan persen
penghambatan inflamasi 18,62 %. Kelompok perlakuan pemberian fraksi heksan-
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
104
etanol ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L. dosis 47,95 mg/kgBB,
dibandingkan dengan pemberian dosis 191,8 mg/kgBB yang merupakan dosis
tertinggi dengan nilai purata AUC sebesar 438,53 ± 1,41 mm.menit dan persen
penghambatan infalamasi sebesar 39,57%, dianalisis statistika dengan Mann-
Whitney test, didapatkan nilai probabilitas (p < 0,05) menunjukkan adanya
perbedaan bermakna antar kedua kelompok perlakuan tersebut. Berdasarkan persen
penghambatan inflamasi dan hasil analisis secara statistika menunjukkan bahwa
fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L. dosis 47,95
mg/kgBB memiliki potensi penghambatan inflamasi lebih rendah dibandingkan
dengan kelompok perlakuan fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun
Macaranga tanarius L. pada dosis tertinggi 191,8 mg/kgBB.
Dengan demikian, dari hasil tersebut dapat diketahui bahwa pemberian
fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L. dosis 191,8
mg/kgBB memiliki potensi penghambatan inflamasi paling besar dibandingkan
dengan kelompok perlakuan fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun
Macaranga tanarius L. pada dosis 47,95 dan 95,9 mg/kgBB.
Berdasarkan hasil penurunan tebal udem yang dapat dilihat dari nilai AUC
(mm.menit) pada (Tabel IX) dan persen penghambatan inflamasi pada (Tabel XI),
menunjukkan bahwa kemampuan penghambatan inflamasi akan mengalami
peningkatan seiring dengan kenaikan pemberian dosis fraksi etanol-heksan
ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L. Hal tersebut dapat dilihat dari
semakin meningkatnya dosis fraksi yang diberikan 47,95; 95,9; dan 191,8
mg/kgBB, semakin meningkat pula efek antiinflamasi yang diberikan yaitu sebesar
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
105
18,62; 24,19; dan 39,57%. Berdasarkan hasil tersebut, dapat disimpulkan bahwa
terdapat hubungan kekerabatan antara dosis dengan efek antiinflamasi fraksi
heksan-etanol ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L.
E. Potensi Relatif Daya Antiinflamasi Fraksi Etanol-Heksan
Ekstrak Metanol-Air Daun Macaranga tanarius L.
Efek antiinflamasi dari ketiga peringkat dosis fraksi etanol-heksan ekstrak
metanol-air daun Macaranga tanarius L. yaitu 47,95; 95,9; dan 191,8 mg/kgBB
memiliki kemampuan penghambatan inflamasi, namun kemampuan
penghambatannya lebih rendah dibandingkan kalium diklofenak sebagai obat
antiinflamasi. Adanya kemampuan fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun
Macaranga tanarius L. dalam memberikan efek antiinflamasi, maka kelompok
perlakuan tersebut dapat dibandingkan potesi relatif daya antiinflamasinya dengan
obat antiinflamasi yaitu diklofenak. Rata-rata persen (%) potensi relatif daya
antiinflamasi dari kelompok perlakuan fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air
daun Macaranga tanarius L. dapat dilihat pada tabel XIII.
Tabel XIII. Rata-rata persen (%) potensi relatif kelompok fraksi etanol-
heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L. dibandingkan
dengan kontrol positif diklofenak pada uji antiinflamasi (n=5)
Kelompok Uji
Potensi Relatif
Daya Antiinflamasi
𝒙 ± SE AUC (%)
Nilai p
Kontrol positif diklofenak
dosis 4,48 mg/kgBB
100,00 ± 1,39 0,101(N)
Fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air
daun Macaranga tanarius L. dosis
47,95 mg/kgBB
32,75 ± 1,16 0,191(N)
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
106
Fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air
daun Macaranga tanarius L. dosis
95,9 mg/kgBB
42,54 ± 1,37 0,033(TN)
Fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air
daun Macaranga tanarius L. dosis
191,8 mg/kgBB
69,59 ± 0,33 0,428(N)
Keterangan :
X = Mean (Rata-rata)
SE = Standard Error (SD/√𝑛) dan N = Distribusi data normal (p > 0,05)
Potensi relatif daya antiinflamasi di dapatkan dari hasil perbandingan antara
persen penghambatan inflamasi kelompok perlakuan dengan persen penghambatan
inflamasi kelompok kontrol positif diklofenak. Purata potensi relatif daya
antiinflamasi kelompok kontrol positif diklofenak dan fraksi etanol-heksan ekstrak
metanol-air daun Macaranga tanarius L. dianalisis secara statistika untuk melihat
distribusi data, hasil analisis menunjukkan nilai probabilitas p = 0,00 (p < 0,05)
yang artinya data persen potensi relatif daya antiinflamasi pada kelompok
perlakuan tidak terdistribusi normal (Tabel XIII), sehingga analisis dilanjutkan
dengan uji non-parametrik Kruskal-Wallis Test, dilanjutkan dengan uji Mann-
Whitney. Pada uji Mann-Whitney didapatkan hasil nilai probabilitas untuk semua
kelompok perlakuan baik kelompok kontrol positif diklofenak dan ketiga peringkat
dosis fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L.,
sebesar p = 0,008 (p < 0,05), yang artinya bahwa pada tiap-tiap kelompok berbeda
bermakna terhadap potensi relatif daya antiinflamasinya. Hasil analisis tersebut
dapat dilihat pada (Tabel XIV) dan yang memperlihatkan hasil analisis statistika
non-parametrik Mann-Whitney Test dan diagram batang (Gambar 17)
memperlihatkan keberbedaan persen potensi relatif daya antiinflamasi terhadap
kontrol positif diklofenak.
Tabel XIII. Lanjutan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
107
Tabel XIV. Hasil uji Mann-Whitney test persen (%) potensi relatif daya
antiinflamasi pada masing-masing kelompok uji antiinflamasi
Kelompok Nilai p
Kontrol positif
diklofenak 4,48
mg/kgBB
Fraksi etanol-heksan ekstrak metanol air daun
Macaranga tanarius L. dosis 47,95 mg/kgBB 0,009 (BB)
Fraksi etanol-heksan ekstrak metanol air daun
Macaranga tanarius L. dosis 95,9 mg/kgBB 0,009 (BB)
Fraksi etanol-heksan ekstrak metanol air daun
Macaranga tanarius L. dosis 191,8 mg/kgBB 0,009 (BB)
Fraksi etanol-
heksan ekstrak
metanol air daun
Macaranga
tanarius L. dosis
47,95 mg/kgBB
Fraksi etanol-heksan ekstrak metanol air daun
Macaranga tanarius L. dosis 95,9 mg/kgBB 0,009 (BB)
Fraksi etanol-heksan ekstrak metanol air daun
Macaranga tanarius L. dosis 191,8 mg/kgBB 0,009 (BB)
Fraksi etanol-
heksan ekstrak
metanol air daun
Macaranga
tanarius L. dosis
191,8 mg/kgBB
Fraksi etanol-heksan ekstrak metanol air daun
Macaranga tanarius L. dosis 191,8 mg/kgBB 0,009 (BB)
Keterangan:
BB = Berbeda Bermakna (p < 0,05); BTB = Berbeda Tidak Bermakna (p > 0,05)
Gambar 17. Diagram batang persen (%) potensi relatif daya antiinflamasi
pada kelompok kontrol positif diklofenak dan perlakuan uji antiinflamasi
39,57 ± 0,15 32,75 ± 1,16 42,54 ± 1,37 62,59 ± 0,33
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
108
Potensi relatif daya antiinflamasi kelompok perlakuan fraksi etanol-heksan
ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L., dapat dilihat pada tabel XIII
menunjukkan bahwa pada ketiga dosis fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air
memiliki nilai purata potensi relatif daya antiinflamasinya < 100%, sehingga dapat
dikatakan bahwa ketiga kelompok perlakuan fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-
air daun Macaranga tanarius L. tersebut memiliki potensi yang lebih kecil
dibandingkan diklofenak dalam menghambat inflamasi pada telapak kaki mencit
yang terinduksi karagenin 1% yang menggambarkan terjadinya inflamasi akut.
Hasil pengujian antiinflamasi pada ketiga peringkat dosis 47,95; 95,9; dan
191,8 mg/kgBB, setelah dilakukan analisis secara statistika menunjukkan adanya
potensi dalam memberiakan efek antiinflamasi, kemampuan tersebut dapat
dikaitkan dengan kandungan senyawa metabolit sekunder yang terdapat dalam
fraksi etanol-heksan ekstrak daun Macaranga tanarius L. Senyawa-senyawa
metabolit sekunder pada daun Macaranga tanarius L. yang diduga dapat berperan
dalam penghambatan inflamasi adalah chebulagic acid dan macatannin B,
merupakan senyawa golongan ellagitanin dengan kemampuannya menangkap
radikal bebas penyebab inflamasi. Radikal bebas diartikan sebagai molekul yang
mempunyai satu atau lebih elektron yang tidak berpasangan di orbit luarnya
sehingga relatif tidak stabil, untuk mendapatkan kestabilannya molekul yang
bersifat reaktif tersebut akan mencari pasangan elektronnya, sehingga disebut
reactive oxygen species (ROS). Radikal bebas dapat terbentuk selain secara
alamiah melalui sistem biologis tubuh, juga dapat berasal dari lingkungan, salah
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
109
satunya pada reaksi inflamasi yang akan menghasilkan oksidan sebagai radikal
bebas (Raymond, 2011).
Menurut Tjay & Rahardja (cit., Wulandari dan Hendra, 2011), terdapat
hubungan antara penangkapan radikal bebas dengan penghambatan mediator-
mediator nyeri dan peradangan. Berikut merupakan proses pelepasan mediator
kimia dan radikal bebas yang memperantarai terjadinya proses inflamasi akut
(Gambar 18).
Ketika terjadi kerusakan jaringan, jumlah radikal bebas akan meningkat.
Gambar 18. Pelepasan radikal bebas pada proses inflamasi
Peningkatan tersebut seiring dengan peningkatan produksi peroksida,
sedangkan di dalam tubuh akan memproduksi antioksidan endogen yang terbatas
seperti superoksida dismutase (SOD) yang kerjanya dalam menstabilkan radikal.
Sumber utama radikal bebas pada mamalia di antaranya pada proses sintesis
prostaglandin. Dalam proses nyeri dan peradangan, radikal bebas terbentuk ketika
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
110
asam arakidonat dikonversi menjadi endoperoksida melalui jalur siklooksigenase
dan hidroperoksida melalui jalur lipooksigenase sehingga terjadi pelepasan
mediator nyeri dan inflamasi (Wulandari dan Hendra, 2011). Bila jumlah radikal
bebas semakin meningkat dengan adanya kerusakan jaringan maka antioksidan
endogen yang diproduksi oleh tubuh tidak mampu lagi mengatasinya secara
efekstif, sehingga dibutuhkan antioksidan eksogen. Senyawa ellagitanin berupa
chebulagic acid dan macatannin B merupakan antioksidan eksogen dan senyawa
yang dituju pada penelitian ini, senyawa tersebut merupakan golongan senyawa
ellagitannins kelompok senyawa fenolik. Senyawa yang termasuk kelompok
fenolik memiliki satu atau lebih gugus hidroksil yang terikat pada satu atau lebih
cincin aromatik benzen, sehingga senyawa ini dapat teroksidasi. Kemampuannya
membentuk radikal fenoksi yang stabil, menyebabkan senyawa ini banyak
digunakan sebagai antioksidan. Proses penangkapan radikal bebas oleh chebulagic
acid dan macatannin B melalui mekanisme pengambilan atom hydrogen dari
senyawa antioksidan oleh radikal bebas sehingga radikal bebas akan menangkap
satu elektron dari antioksidan (Matheos, Runtuwene, dan Sudewi, 2014).
Berdasarkan hasil skrining fitokimia menunjukkan adanya senyawa lain
yaitu glikosida dan flavonoid yang terdapat pada fraksi etanol-heksan ekstrak
metanol air daun Macaranga tanarius L. namun pada penelitian ini tidak diketahui
senyawa spesifik dari kedua golongan tersebut. Kedua senyawa tersebut diduga
memiliki peran dalam penghambatan inflamasi, berdasarkan hasil penelitian oleh
Wulandari dan Hendra (2011) dilihat dari pendekatan strukturnya senyawa
glikosida dapat memiliki aktivitas penangkapan radikal bebas karena adanya
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
111
senyawa karbonil (C=O) dengan ikatan rangkap terkonjugasi dan memiliki ikatan
α-𝛽 tidak jenuh, yang dapat menyebabkan adanya perpindahan elektron. Atom C
yang terdapat pada posis β akan bermuatan positif. Hal ini dikarenakan adanya
lompatan elektron pada ikatan phi. Kemungkinan besar, atom C pada posisi β
inilah yang akan menangkap radikal bebas.
Selain itu senyawa flavonoid juga memiliki peran dalam penghambatan
inflamasi, berdasarkan Hidayati dkk (2005) mekanisme antiinflamasi yang
dilakukan oleh flavonoid dapat melalui beberapa jalur seperti penghambatan
aktivitas enzim COX dan atau lipooksigenase yang dapat menyebabkan
penghambatan biosintesis eikosanoid sehingga hasil metabolismenya berupa
pelepasan mediator inflamasi seperti prostaglandin dapat dihambat, penghambatan
degranulasi netrofil, dan penstabil ROS (Reactive Oxygen Spesies) sehingga radikal
menjadi inaktif.
Proses penangkapan radikal bebas oleh chebulagic acid dan macatannin B,
dan beberapa senyawa yang belum diketahui secara spesifik yang merupakan
golongan flavonid dan glikosida tersebut dengan mekanisme penangkapan radikal
bebas dan penghambatan mediator inflamasi tersebut, maka proses terjadinya
peradangan juga dapat terhambat. Hal tersebut dibuktikan dengan adanya
penurunan udem setelah pemberian fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun
Macaranga tanarius L secara oral pada ketiga peringkat dosis 47,95; 95,9; dan
191,8 mg/kgBB.
Penelitian ini merupakan penelitian skrining awal yang menunjukkan
bahwa fraksi etanol-heksan ekstrak metanol air daun Macaranga tanarius L.,
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
112
memiliki efek antiinflamasi yang diberikan secara oral, sehingga membuktikan
bahwa daun Macaranga tanarius L, berpotensi untuk dijadikan sebagai salah satu
tanaman alternatif pengobatan antiinflamasi. Selain itu, perlu dilakukannya uji efek
antiinflamasi fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius
L., pada mencit jantan galur Swiss terinduksi karagenin 1% menggunakan senyawa
iritan yang berbeda seperti 1-3 mL dextran 1%, 0,05 mL egg white fresh undiluted,
serotonin kreatinin sulfat, 0,1 mL suspension of kaolin 5%, dan 0,1 mL ovalbumin
solution 1% (Vogel, 2002), dengan metode uji inflamasi akut untuk mempertegas
kemampuan fraksi heksan-etanol ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L.
dalam menghambat inflamasi. Tujuannya adalah untuk melihat apakah sediaan
fraksi heksan-etanol ekstrak metanol-air daun Macarana tanarius L. pada metode
uji inflamasi akut dengan induksi senyawa yang berbeda akan memiliki
kemampuan yang sama dalam menghambat inflamasi pada telapak kaki belakang
mencit yang diinduksi karagenin. Selain itu, dapat pula dilakukan penelitian lebih
lanjut mengenai uji antiinflamasi dengan menggunakan formulasi sediaan fraksi
etanol-heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L., untuk digunakan
secara topikal sebagai alternatif pengobatan inflamasi.
Hasil penelitian uji antiinflamasi fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air
daun Macaranga tanarius L. ini perlu dilakukan penelitian lebih lanjut untuk
memastikan senyawa aktif yang bertanggung jawab dalam memberikan efek
antiinflamasi pada fraksi etanol-heksan ekstrak metanol air daun Macaranga
tanarius L. Pemastian kandungan senyawa metabolit sekunder dapat dilakukan
dengan menggunakan metode kuantitatif untuk menentukan banyaknya senyawa
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
113
yang terkandung dalam campuran, dan mengidentifikasi senyawa yang berperan
terhadap efek antiinflamasi dapat digunakan KLT. Selain itu berdasarkan Talamona
(2005) dapat pula digunakan metode kuantitatif menggunakan kromatografi kolom
(flash chromatography column), dengan menggunakan metode tersebut akan dapat
diketahui senyawa aktif apa saja yang berperan dalam efek antiinflamasi pada
fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L. dan
pengujian tersebut merupakan sebagai langkah lanjutan untuk penegasan dari hasil
skrining fitokimia secara kualitatif dengan uji tabung yang telah dilakukan pada
penelitian ini.
Apabila kandungan senyawa aktif dari fraksi etanol-heksan ekstrak metanol
air daun Macaranga tanarius L. telah diketahui sepenuhnya dan melalui pengujian
secara klinis memenuhi kriteria sebagai pengobatan inflamasi, maka bahan aktif
dari fraksi tersebut dapat berguna untuk dijadikan dalam produk oral untuk
pengobatan inflamasi, seperti yang telah dilaporkan oleh Lim et al. (2009) produk
oral dari daun Macaranga tanarius dapat digunakan dalam pengobatan karies gigi,
gingivitis dan peradangan gusi.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
114
BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
A. Kesimpulan
Berdasarkan hasil yang telah diperoleh dan analisis statistik yang telah
dilakukan, maka dapat disimpulkan:
1. Pemberian fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius
L., memiliki efek antiinflamasi pada mencit terinduksi karagenin 1%.
2. Efek antiinflamasi fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga
tanarius L., pada dosis 47,95; 95,9; dan 191,8 mg/kgBB yang dinyatakan oleh
persen penghambatan inflamasi berturut-turut sebesar 18,62; 24,19; dan 39,57
%.
3. Potensi relatif daya antiinflamasi fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun
Macaranga tanarius L., pada dosis 47,95; 95,9; dan 191,8 mg/kgBB yang
dinyatakan oleh persen potensi relatif daya antiinflamasi berturut-turut sebesar
32,75; 42,54; dan 69,59 %.
4. Adanya hubungan kekerabatan antara dosis dengan efek antiinflamasi fraksi
etanol-heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
115
B. Saran
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan, perlu dilakukan penelitian
lebih lanjut tentang:
1. Perlu dilakukannya uji efek antiinflamasi fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-
air daun Macaranga tanarius L., pada mencit jantan galur Swiss terinduksi
karagenin 1% menggunakan senyawa penginduksi yang berbeda dengan
metode uji inflamasi akut untuk mempertegas kemampuan fraksi heksan-etanol
ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L. dalam menghambat inflamasi.
2. Penelitian lebih lanjut mengenai antiinflamasi dengan formulasi sediaan fraksi
etanol-heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L., secara topikal
sebagai alternatif pengobatan inflamasi.
3. Penelitian lebih lanjut menggunakan metode kromatografi untuk mengetahui
senyawa aktif apa saja yang berperan sebagai antiinflamasi pada fraksi etanol-
heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L., dan sebagai
penegasan dari skrining fitokimia secara kualitatif dengan uji tabung yang telah
dilakukan pada penelitian ini.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
116
Daftar Pustaka
Agoes, G., 2009, Teknologi Bahan Alam (Serial Farmasi Industri-2), Edisi revisi
dan perluasan, Penerbit ITB, Bandung, pp. 31-40, 174.
Al-Ash’ary, M.N., Supriyanti, T.E.M., Zackiyah, 2010, Penentuan Pelarut Terbaik
dalam Mengekstraksi Senyawa Bioaktif dari Kulit Batang Artocarpus
heterophyllus, Universitas Pendidikan Indonesia Al Wasel, A.H., and
Bashandy, S.A., 2011, Carbon Tetrachloride-induced Hepatotoxicty and
Nephrotoxicity in Rats: Protective Role Vitamin C, Journal of
Pharmacology and Toxicology, 6(3), 283-292.
Altman, R., Bosch, B., Brune, K., Patrignani, P., Young, C., 2015, Advances in
NSAID Devlopment: Evolution of Diclofenac Product Using
Pharmaceutical Technology, Drugs, 75, 859-877.
Anonim, 2013, Organisme-IPB Biodiversity Informatics-Bogor Agricultural
University,
http://apps.cs.ipb.ac.id/ipbiotics/user/organism/detail/detail_organisme_oba
t.php?id=749, diakses tanggal 21 April 2015.
Azizah, N., Suarsini, E., dan Prabaningtyas, S., 2014, Analisis Kandungan Kimia
Infusa Tanaman Saringkaet (Basilicum polystachyon (L.) Moench) dan Uji
Efektivitas Antifungal Infusa Tanaman Sangket Terhadap Penghambatan
Pertumbuhan Candida albicans secara In Vitro, Skripsi, Universitas Negeri
Malang.
Chakraborty, A., R.K.B., Devi, S., Rita,Kh., Sharatchandara, and Th. I. Singh,
2004, Preliminary Studies on Antiinflammatory and Analgesic Activities of
Spilanthes Acmella in Experimental animal models, Indian Journal
Pharmacology, 36 (3), 148-150.
Cole, B.E.M.D., 2011, Treating Mild to Moderate Acute Pain With Oral
Diclofenac Potassium Liquid-Filled Capsules: Rapid Absorption With
ProSorb Dispersion Technology, Pain Medicine News, 2.
Dahlan, M.S., 2008, Statistik untuk Kedokteran dan Kesehatan, Edisi III, Salemba
Medika, Jakarta, pp. 55-58, 85-105.
Dai, J., and Mumper, R., 2010, Plant Phenolics: Extraction, Analysis and Their
Antioxidant and Anticancer Properties, Molecules, 15, 7313-7352.
Day, R.O., and Graham, G.G., 2013, Non-steroidal anti-inflammatory drugs
(NSAIDs), BMJ, 346, 3195.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
117
Departemen Kesehatan RI, 2000, Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan
Obat, Departemen Republik Indonesia, Jakarta, pp. 5, 9-12.
Dharmawan, N., Darmaji, P., Harmayani E., 1999, Kemampuan Ekstrak Fraksi-
Fraksi Buah Pace (Morinda citrifolia) sebagai Antibakteri, Seminar
Nasional Pangan, Universitas Pangan dan Gzi UGM, Yogyakarta.
Direktorat Jendral Pengawasan Obat dan Makanan, 1995, Farmakope Indonesia,
Edisi IV, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, p. 46.
Djunarko, I., Donatus, I.A., dan Noni, 2003, Pengaruh Perasan Buah Mengkudu
(Morinda citrifolia L.) terhadap Daya Antiradang Diklofenak pada Mencit
Jantan, Jurnal Farmasi Sains dan Komunitas, 1, 10-17.
Gilda, T., 2014, Efek Antiinflamasi Topikal Ekstrak Metanol-Air Daun Senu
(Macaranga tanarius L. Mull. Arg) pada Mencit betina terinduksi
karagenin, Skripsi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.
Goodman and Gilman, 2007, Dasar Farmakologi Terapi, Edisi 10, Volume 1,
EGC, Jakarta, pp. 666-673.
Greene, R.J., and Harris, N.D., 2008, Pathology and Therapeutics for Pharmacist;
A Basis for Clinical Pharmacy Practice, 3th
ed, Pharmaceutical Press, USA,
pp. 46-63.
Gupta, A.K., Bharadwaj, V., Lata, S., Sharma, R., Kacker, S., and Sharma, A.K.,
2013, To Evaluate The Activity of Glycyrrhiza Glabra Linn and Vanda
Roxburghi in Animal Model of Arthritis, Medical Science, 2277, 405-406.
Harborne, J. B., 1987, Metode Fitokimia: Penuntun Cara Modern Menganalisis
Tumbuhan, Penerbit ITB. Bandung.
Holmberg, K., 2003, Novel Surfactants, second edition vol.144, revised and
expanded, Marcel Dekker, Inc., United States of America, pp.101.
Ikawati, Z., Suparjan, A.M., dan Asmara, L.S., 2007, Pengaruh Senyawa
Heksagamavunon-1 (HGV-1) terhadap Inflamasi Akut Akibat Reaksi
Anafilaksis Kutaneus Aktif pada Tikus Wistar Jantan Terinduksi
Ovalbumin, Kemajuan Terkini Riset Universitas Gadjah Mada, 36-46.
Jocher, A., Kessler, S., Hornstein, S., Schulte, M., Schempp, C.M., 2005, The UV
Erythema Test as a Model to Investigate the Anti-Inflammatory Potency of
Topical Preparations – Reevaluation and Optimization of the Method, Skin
Pharmacol Appl Skin Physiol, 18, 234-240.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
118
Juma’a, K.M., Ahmed, Z.A., Nurman, I.T., and Hussain, R., 2009, Dose-dependent
anti-inflammatory effect of silymarin in experimental animal model of
chronic inflammation, African Journal of Pharmacy and Pharmacology, 3
(5), pp. 242-247.
Katzung, B.G., 2001, Basic and Clinical Pharmacology, diterjemahkan oleh bagian
Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Airlangga, edisi 8, Penerbit
Salemba Medika, Jakarta, pp.449-462, 637.
Kawakami, S., Harinantenaina, L., Matssunami, K., Otsuka, H., Shinzato, T., and
Takeda, Y., 2008, Macaflavanones A-G, Prenylated Flavanones from the
Leaves of Macaranga tanarius, J. Nat. Prod, 71, pp. 1872–1876.
Kristianti, A. N, N. S., Aminah, M. Tanjung, dan B. Kurniadi., 2008, Buku Ajar
Fitokimia Jurusan Kimia Laboratorium Kimia Organik FMIPA,
Universitas Airlangga, Surabaya, pp. 47-48.
Kumar, V., Abbas, A.K., Fausto, N., dan Mitchell, R.N., 2007, Robbins Basic
Pathology, 8th
edition, Philadelpia, Saunders Elsevier, pp. 29, 37-41, 43-50,
53-54.
Kumar, V., Abbas, A.K., Aster, J.C., 2014, Pathologic Basis of Disease, 9th
edition,
Philadelphia, Elsavier Health Sciences, pp. 69-72, 84, 90, 91.
Kumazawa, S., Murase, M., Momose, N., and Fukumoto, S., 2014, Analysis of
antioxidant prenylflavonoids in different parts of Macaranga tanarius, the
plant origin of Okinawan propolis, Asian Pacific Journal of Tropical
Medicine, pp. 16-20.
Kurniawaty, A.Y., Adrianto, E.E., dan Hendra, P., 2011, Uji Praklinik Ekstrak
Metanol-Air Macaranga tanarius L. Kajian : Aktivitas Antiinflamasi dan
Hepatoprotektif, Kongres Ilmiah IAI XIX dan Rapat Kerja Nasional IAI,
Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.
Lim, T.Y., Lim, Y.Y., Yule, C.M., 2009, Evaluation of antioxidant, antibacterial
and anti-tyrosinase activities of four Macaranga species, Food Chemistry,
114, pp. 594-599.
Magadula, J.J., 2014, Phytochemistry and Pharmacology of The Genus Macaranga;
A Review, Journal of Medical Plant Research, 8 (2), 489-503.
Matheos, H., Runtuwenw, M.R.J., dan Sudewi, S., 2014, Aktivitas antioksidan dari
ekstrak daun kayu bulan (Psinonia alba), Pharmacon Jurnal Ilmiah
Farmasi, 3 (3), p. 236.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
119
Manurung, D.Y.S., 2013, Efek Antiinflamasi Infusa Bunga Telang (Clitoria
ternatea L.) pada Udem Telapak Kaki Mencit Betina Terinduksi Karagenin
dengan Pengukuran Jangka Sorong, Skripsi, Fakultas Farmasi Universitas
Sanata Dharma, p. 25.
Mariana, M.G., Fernandes, P.D., Fernandes, S.B.O., Fingolo, C.E., Boylan, F.,
2013, Anti-inflammatory activity of ethanol extract and fractions from
Couroupita guianensis Aublet leaves, Journal of Ethnopharmacology, 146,
pp. 324-330.
Massó, G.E.L, Patrignani, P., Tacconelli, S., García, R.L.A., 2010, Variability
among nonsteroidal antiinflammatory drugs in risk of upper gastrointestinal
bleeding, Arthritis Rheum, 62(6), p. 601.
Matsunami, K., Takamori, I., Shinzato, T., Aramoto, M., Kondo, K., Otsuka, H.,
2006, Radical Scavanging Activities of New Megastigmane Glucosides
from Macaranga tanarius (L.) MULL.-ARG., Chem. Pharm. Bull., 54 (10),
pp. 1403-1407.
Matsunami, K., Otsuka, H., Kondo, K., Shinzato, T., Kawahata, M., Yamaguchi,
K., Takeda, Y., 2009, Absolute configuration of (+)-pinoresinol 4-O-[6
00-O-galloyl]-b-D-glucopyranoside macarangiosides E, and F isolated from
the leaves of Macaranga tanarius, Phytochemistry, 70, pp. 127-1285.
Morris, J.C., 2003, Carrageenan-Induced Paw Edema in the Rat and Mouse,
Methods in Molecular Biology, 225, p. 115. Nantel, F., Denis, D., Gordon, R., Northey, A., Cirino, M., Metters, K.M., Chan,
Ch.Ch., 1999, Distribution And Regulation Of Cyclooxygenase-2 In
Carrageenan-Induced Inflammation, British Journal of Pharmacology, 28,
pp. 853–859.
Nathania, D., 2011, Efek Antiinflamasi Asetil Eugenol secara Topikal Terhadap
Edema Kaki yang Diinduksi Formalin 0,5% pada Mencit Jantan Galur
Swiss, Skripsi Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma, p. 18.
National Center for Biotechnology Information, 2015, Ethanol,
http://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/ethanol, diakses pada tanggal
12 Agustus 2015.
National Center for Biotechnology Information, 2015, Hexane,
http://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/hexane, diakses pada tanggal
12 Agustus 2015.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
120
National Center for Biotechnology Information, 2015, Methanol,
www. http://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/methanol, diakses pada
tanggal 12 Agustus 2015.
Necas, J., dan Bartosikova., 2013, Carragenan : a review, Veterinarni Medicina 58,
pp. 187-205.
Phommart, S., Sutthivaiyakit, P., Chinmnoi, N., Ruchirawat, S., and Sutthivaiyakit,
S., 2005, Constituents of the leaves of Macaranga tanarius, J.Nat.Prod., 68,
pp. 927-930.
Pinelo, M., Rubilar, M., Sineire, J., and Nunez, M. J., 2004, Extraction of
antioxidants phenolics from almond hulls (Prunus amygdalus) and pine
sawdust (Pinus pinaster), Food Chemistry, 85, pp. 267–273.
Posadas, I., Bucci, M., Roviezzo, F., Rossi, A., Parente, L., Sautebin, L., and
Cirino, G., 2004, Carrageenan-induced mouse paw oedema is biphasic, age-
weight dependent and displays differential nitric oxide cyclooxygenase-2
expression, British Journal of Pharmacology, 142 (2), pp. 331–338.
Prasetyo, H.D., 2013, Aktivitas Antimikroba Fraksi Petroleum Eter, Kloroform,
Etanol Bunga Pulu (Chartamus tinctorius L.) Terhadap Staphylococcus
aureus, Escherichia coli, dan Candida albicans, Skripsi, Universitas Sanata
Dharma, p.18.
Punchard, N.A., Whelan, C.J., and Adcock, 2004, Journal of Inflammation,
BioMed Central, 1 (1), pp. 1-4.
Puteri, M. D. P. T. G., dan Kawabata, J., 2010, Novel α- glucosidase inhibitors
from Macaranga tanarius leaves, Food Chemistry, 123, pp. 384-389.
Rahayu, D., dan Soeleman, S., 2013, Halaman Organik, Agromedia Pustaka,
Jakarta, p. 122.
Rang, H.P., Dale, M.M., Ritter, J.M., Moore, P.K., 2003, Pharmacology, 4th
edition, Elsevier Science, Phiadelphia, pp. 222, 229, 231-239.
Raymond, C.R., and Paul, S., 2003, Handbook of Pharmaceutical Excipient, 4th
edition, Pharmaceutical Press, USA.
Raymond, T.R., 2011, Anti Aging, Medicinus Scientific Journal of Pharmaceutical
Development and Medical Application, 24 (1), p. 5.
Rowe, R.C., Sheskey, P.J., and Quinn, M.E., 2009, Handbook Pharmaceutical
Excipients, 6th
ed, Pharmaceutical Press, London, pp.122-125.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
121
Sagala, N., 2013, Efek Antiinflamasi Kombinasi Infusa Daun Ilee (Coleus
atropurpureus L. Benth) Dosis 140 mg/kgBB dengan Bunga Telang (Clitoria
ternatea L.) Dosis 328; 655; 1310 mg/kgBB pada Udem Telapak Kaki
Mencit Betina Terinduksi Karagenin dengan Pengukuran Jangka Sorong,
Skripsi, Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma, pp. 35-36.
Santoso, H.B., 2008, Ragam dan Khasiat Tanaman Obat, Agromedia Pustaka,
Jakarta, p. 134.
Schror, K., and Meyer, K.J., 2000, Cyclooxygenase-2 Inhibition and Side effects of
Non-steroidal Antiinflammatory Drugs in the Gasteointestinal Tract,
Curr.Med.Chem, 7, pp. 1121-1129.
Starr, F., Starr, K., and Loope, L., 2003, Biological Resources Division Ppeakala
Field Station, Maui, Hawai’I, United States Geological Survey, 1.
Steenis, C.G.G.J.van., Hoed, D., Blommbergen, S., dan Eyma, P.J., 1992, Flora:
Untuk Sekolah di Indonesia, cetakan keenam, diterjemahkan oleh Moeso,
S., dkk., PT Pradnya Paramita, Jakarta, pp. 35, 36, 37, 49-50.
Stoker, S.H., 2010, General Organik and Biological Chemistry, 5th
edition,
Cengage Learning, Inc., USA, pp. 404-405.
Suleyman, H., Demircan, B., Karagoz, Y., dan Ozta, N., 2004, Antiinflamattory
Effect of Selective COX-2 Inhibitors, J.Pharmacol., 56 (6), pp. 775-780.
Sultana, B., Anwar, F., Ashraf, M., 2009, Effect of Extraction Solvent/Technique
on the Antioxidant Activity of Selected Medicinal Plant Extracts, Molecules,
14, p. 2168.
Supriyatna, M.W. Moelyono, Iskandar, Y., Febriyanti, M., 2014, Ed. 1, Cet. 1.,
Prinsip Obat Herbal: Sebuah Pengantar untuk Fitoterapi, CV Budi Utama,
Yogyakarta, p.49.
Supriyatna, Febriyanti, R., Dewanto, Wijaya, I., dan Ferdiansyah, F., 2015,
Fitoterapi Sistem Organ: Pandangan Dunia Barat terhadap Obat Herbal
Global, Ed. 2, Cet. 2, CV Budi Utama, Yogayakarta, pp. 223-224.
Talamona, A., 2005, Laboratory Chromatography Guide, Buchi Labortech nik AG,
Switzerland, p. 12.
Tiwari, P., Kumar, B., Kaur, M., Kaur, G.,Kaur, H., 2011, Phytochemical screening
and Extraction: A Review, International Pharmaceutica Sciencia, 1 (1), pp.
98-106.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
122
Tjay, T.H., dan Kirana R., 2002, Obat-Obat Penting: Khasiat Penggunaan dan
Efek-Efek Sampingnya, Edisi Lima, PT. Elexmedia Komputindo Gramedia,
Jakarta, p. 313.
Tjay, T.H., dan Rahardja, K., 2007, Obat-Obat Penting:Khasiat Penggunaan dan
Efek Sampingnya, Edisi ke Vi, Cetakan ke-1, Departemen Kesehatan
Republik Indonesia, Jakarta, p.312.
Tobacman, J.K., Wallace, R.B, Zimmerman, M.B., 2001, Consumption of
carrageenan and other water-soluble polymers used as food additives and
incidence of mammary carcinoma, Medical Hypotheses, 58, pp. 589-598.
United States Environmental Protection Agency, 2013, Hexane,
http://www.epa.gov/ttnatw01/hlthef/hexane.html, diakses pada tanggal 12
Agustus 2015.
United States Environmental Protection Agency, 2013, Methanol,
http://www.epa.gov/ttn/atw/hlthef/methanol.html, diakses pada tanggal 12
Agustus 2015.
Uppoor, R.S., 2007, Clinical Pharmacology and Biopharmaceutics Review(s),
Center for Drug Evaluation and Research, pp. 2,3,12,13,20.
Verawati, Aria, W., Novicaresa, M., 2011, Aktifitas Anti Inflamasi Ekstrak Etanol
Daun Kembang Bulan (Tithonia Diversifolia. A. Gray) Terhadap Mencit
Putih Betina, Scientia Jurnal Farmasi dan Kesehatan, 1 (1), pp. 47-51.
Valdés, J.A.A., Figueroa, J.J.B., Carbo, A.A., Barragán, A.P., Herrera, R.R., and
Aguilar, C.N., 2011, Ellagitannins: Biosynthesis, biodegradation and
biological properties, Journal of Medicinal Plants Research, 5 (19), pp.
4696-4703.
Vogel, H.G., 2002, Drug Discovery & Evaluation: Pharmacological Assays, 2nd
edition, Sringer, New York, pp. 669-691, 725, 751-761.
Wilmana, P. F. & Gan, S., 2007, Farmakologi dan Terapi, Ed. 5, Bagian
Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia, Jakarta, pp. 230,
231, 233.
Wulandari, D., dan Hendra, P., 2011, Efek Analgesik Infusa Duan Macaranga
tanarius L. pada Mencit Betina Galur Swiss, Bionatura-Jurnal Ilmu-ilmu
Hayati dan Fisik, 13 (2), pp. 108-116.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
123
LAMPIRAN
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
124
Lampiran 1. Surat Pengesahan Medical and Health Research Ethics
Committee (MHREC)
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
125
Lampiran 2. Surat Pengesahan Determinasi Daun Macaranga tanarius L.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
126
Lampiran 3. Surat Pengujian Kadar Air Serbuk Daun Macaranga tanarius
L.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
127
Lampiran 4. Surat Kalibrasi Jangka Sorong Digital
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
128
Lampiran 5. Surat Legalitas Penggunaan SPSS
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
129
Lampiran 6. Pengeringan dan Serbuk Daun Macaranga tanarius L.
Lampiran 7. Hasil Fraksi Etanol-heksan dari Ekstrak Metanol-Air daun
Macaranga tanarius L.
Gambar 1. Tumbuhan
(Daun dan Buah)
Macaranga tanarius L.
Gambar 2. Tanaman
dan Serbuk Macaranga
tanarius L.
Gambar 3. Hasil
Ekstrak Metanol-Air
Daun Macaranga
tanarius L.
Gambar 4. Hasil Fraksi
Etanol-Heksan dari Ekstrak
Metanol-Air Daun
Macaranga tanarius L.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
130
Lampiran 8. Pembuatan udem dan pengukuran udem kaki mencit
Gambar 5. Sediaan Fraksi
Etanol-Heksan dari Ekstrak
Metanol-Air Daun
Macaranga tanarius L.
Gambar 6. Pembuatan Udem Telapak Kaki
Belakang Mencit Terinduksi Karagenin 1%
Gambar 7. Pengukuran Udem Telapak Kaki Mencit
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
131
Lampiran 9. Perhitungan dosis
a. Dosis Aquadest
Berikut Perhitungan dosis untuk aquadest:
= 0,5 𝑚𝑙
20 𝑔𝑟𝑎𝑚 𝐵𝐵 𝑚𝑒𝑛𝑐𝑖𝑡
b. Dosis Karagenin
Dosis karagenin ditetapkan berdasarkan penelitian yang telah dilakukan
oleh Williamson et al (1996) yaitu karagenin yang digunakan dengan
konsentrasi 1% dilarutkan ke dalam NaCl fisiologis 0,9%. Karagenin
diberikan secara subplantar pada telapak kaki mencit dengan volume
pemberian 0,05 mL, maka dosis yang dapat diberikan dalam penelitian ini
sebesar:
Dosis karagenin 1% = 0,05 𝑚𝑙 𝑥
1𝑔𝑟𝑎𝑚
100 𝑚𝑙
0,020 𝑘𝑔 𝐵𝐵 𝑚𝑒𝑛𝑐𝑖𝑡
= 0,0025 gram/kgBBmencit = 25 mg/kgBBmencit
c. Dosis Kalium Diklofenak
Didapatkan dari hasil orientasi, dimana didapatkan dosis 4,48 mg/kgBB
dengan selang waktu pemberian yang efektif memberikan penurunan udem
pada menit ke-15. Pada dosis 4,48 mg/kgBB juga telah dapat memberikan
penurunan udem pada telapak kaki mencit yang telah terinduksi karagenin
1%. Berikut perhitungan dosis kalium diklofenak yang mengacu pada
penelitian yang telah dilakukan oleh (Djunarko, Donatus, dan Noni, 2003) :
Dosis Kalium Diklofenak pada tikus dengan BB= 250 gram sebesar 40
mg/kgBB tikus. Bila akan digunakan untuk tikus dengan BB 200 gram
maka dapat dikonversikan sebagai berikut:
Dosis Kalium Diklofenak = 200 𝑔𝑟𝑎𝑚 𝑥 40 𝑚𝑔/𝑘𝑔𝐵𝐵
250 𝑔𝑟𝑎𝑚 = 32 mg/kgBB tikus
Apabila akan digunakan untuk penelitian antiinflamasi pada mencit
dengan dosis 32mg/kgBB tikus untuk BB 200 kg, maka perhitungan
dosis kalium diklofenak dapat dikonversikan sebagai berikut:
Dosis Kalium Diklofenak = 0,14 (tabel konversi tikus 200 gram
mencit 20 gram) x 32 mg/kgBB = 4,48 mg/kgBB menciit
d. Dosis Sediaan Fraksi Macaranga tanarius L.
Penetapan peringkat dosis didasarkan pada penggunaan fraksi etanol-
heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L., pada tikus galur
Swiss dengan dosis tertinggi sebesar 137 mg/kgBB.
Konsentrasi fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga
tanarius L, yang dapat dimasukkan dan dikeluarkan memalui spuit oral
yaitu 0,6 gram/ 25 mL. Bila penetapan peringkat dosis fraksi etanol-
heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L pada penelitian
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
132
ini akan digunakan mencit jantan galur Swiss dengan BB = 20 gram,
maka konversi dari tikus dengan BB 200 gram = 0,14, sehingga
perhitungan dosis fraksi untuk mencit menjadi:
Dosis tertinggi dari penelitian efek hepatoprotektif fraksi etanol-heksan
ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L. = 137 mg/kgBB, maka
untuk tikus dengan BB = 200 mg adalah:
= 137 mg/kgBB
= 0,137 mg/gram x 200 gram BB tikus
= 27,4 mg/200 gram BB tikus
Penentuan Dosis Tertinggi
Konversi dari tikus 200 gram mencit 20 gram = 0,14, maka dosis
tertinggi dapat ditentukan sebagai berikut:
= 27,4 mg/200 gram x 0,14
= 3,836 mg/20 gram BB mencit
Dosis rendah dan dosis tengah ditentukan dengan menurunkan dua
kelipatan dari dosis tertinggi sehingga diperoleh dosis sebagai berikut:
Dosis tengah = 1,918 mg/20 gramBB
Dosis terendah = 0, 959 mg/20 gram BB
Penentuan dosis untuk manusia dengan perhitungan konversi dari mencit
20 gram ke manusia 70 kg = 387,90
Dosis tertinggi untuk mencit
= 3,836 mg / 20 gram BB
= 0,003836 gram / 20 gram BB mencit
Dosis tertinggi untuk manusia 70 kg
= 387,90 x 0,003836 gram
= 1,487 gram / 70 kgBB manusia
= 0,0212 gram/kgBB
= 21,24 mg/kgBB
Lampiran 10. Perhitungan persen rendemen fraksi etanol-heksan ekstrak
metanol-air daun Macaranga tanarius L.
Fraksi kental yang diperoleh kemudian ditimbang dan dibandingkan bobotnya
dengan srbuk simplisia awal yang digunakan. Perbandingan tersebut dinyatakan
dalam persen (%).
% Rendemen = 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙 𝑓𝑟𝑎𝑘𝑠𝑖
𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙 𝑠𝑒𝑟𝑏𝑢𝑘 x 100%
= 30,5806 𝑔𝑟𝑎𝑚
1.200 𝑔𝑟𝑎𝑚 x 100% = 2,55 %
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
133
Lampiran 11. Analisis Statistika Data Orientasi Penentuan Dosis dan Selang
Waktu Pemberian Kalium Diklofenak
Nilai AUC Data Orientasi Penentuan Dosis dan Selang Waktu Pemberian
Kalium Diklofenak dan Kontrol negatif selang waktu 15 menit
1. Pengujian Normalitas
Tests of Normality
Dosis_Selang_Waktu
Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk
Statistic df Sig. Statistic df Sig.
AUC Kontrol negatif
aquadest selang waktu
15 menit
.308 3 . .901 3 .390
Kontrol positif
diklofenak 4,48
mg/kgBB selang waktu
15 menit
.232 3 . .980 3 .726
Kontrol positif
diklofenak 9,1
mg/kgBB selang waktu
15 menit
.221 3 . .986 3 .772
a. Lilliefors Significance Correction
2. Pengujian Homogenitas
Test of Homogeneity of Variances
AUC
Levene Statistic df1 df2 Sig.
1.761 2 6 .250
Hasil pengujian statistika mengenai uji normalitas menunjukkan bahwa data
terdistribusi normal karena nilai p untuk masing-masing kelompok data adalahp > 0,05,
sehingga analisis data dilanjutkan menggunakan ANOVA Test.
3. ANOVA
ANOVA
AUC
Sum of Squares df Mean Square F Sig.
Between Groups 475838.740 2 237919.370 247.518 .000
Within Groups 5767.325 6 961.221
Total 481606.065 8
Hasil pengujian statistika mengenai uji homogenitas menunjukkan bahwa data
homogen karena nilai p > 0,05, dan hasil uji ANOVA menunjukkan p = 0,000 (p < 0,05)
menunjukkan paling tidak terdapat dua kelompok yang memiliki perbedaan rerata AUC
yang berbeda bermakna, maka untuk mengetahui kelompok manakah yang berbeda
bermakna dilakukan analisis menggunakan post hoc ANOVA Test (LSD).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
134
4. Post Hoc LSD
Multiple Comparisons
AUC
LSD
(I) Dosis_Selang_Waktu
(J)
Dosis_Selang_Wa
ktu
Mean Difference
(I-J) Std. Error Sig.
95% Confidence Interval
Lower
Bound Upper Bound
Kontrol negatif aquadest
selang waktu 15 menit
Kontrol positif
diklofenak 4,48
mg/kgBB selang
waktu 15 menit
529.58000* 25.31430 .000 467.6381 591.5219
Kontrol positif
diklofenak 9,1
mg/kgBB selang
waktu 15 menit
430.85667* 25.31430 .000 368.9148 492.7985
Kontrol positif diklofenak
4,48 mg/kgBB selang waktu
15 menit
Kontrol negatif
aquadest selang
waktu 15 menit
-529.58000* 25.31430 .000 -591.5219 -467.6381
Kontrol positif
diklofenak 9,1
mg/kgBB selang
waktu 15 menit
-98.72333* 25.31430 .008 -160.6652 -36.7815
Kontrol positif diklofenak 9,1
mg/kgBB selang waktu 15
menit
Kontrol negatif
aquadest selang
waktu 15 menit
-430.85667* 25.31430 .000 -492.7985 -368.9148
Kontrol positif
diklofenak 4,48
mg/kgBB selang
waktu 15 menit
98.72333* 25.31430 .008 36.7815 160.6652
*. The mean difference is significant at the 0.05 level.
Gambar 8. Diagram batang rata-rata nilai AUC (mm.menit) pada orientasi dosis
efektif diklofenak dan rentang waktu pemberian karagenin antara kelompok
kontrol negatif dan kelompok diklofenak rentang 15 menit
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
135
Pengujian Normalitas Nilai AUC Data Orientasi Penentuan Dosis dan Selang
Waktu Pemberian Kalium Diklofenak selang waktu 15 dan 30 menit
1. Pengujian Normalitas
Tests of Normality
Dosis_Selang_Waktu
Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk
Statistic df Sig. Statistic df Sig.
AUC Kontrol Positif Diklofenak
4,48 Selang Waktu
Pemberian 15 menit
.232 3 . .980 3 .726
Kontrol Positif Diklofenak 9,1
Selang Waktu 15 menit .221 3 . .986 3 .772
Kontrol Positif Diklofenak
4,48 Selang Waktu 30 menit .260 3 . .958 3 .605
Kontrol Positif Diklofenak 9,1
Selang Waktu 30 menit .217 3 . .988 3 .790
a. Lilliefors Significance Correction
2. Pengujian Homogenitas Test of Homogeneity of Variances
AUC
Levene Statistic df1 df2 Sig.
.730 3 8 .562
3. Hasil ANOVA
ANOVA
AUC
Sum of Squares df Mean Square F Sig.
Between Groups 17260.433 3 5753.478 5.861 .020
Within Groups 7853.147 8 981.643
Total 25113.580 11
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
136
4. Post Hoc LSD
Multiple Comparisons
AUC
LSD
(I) Dosis_Selang_Waktu (J) Dosis_Selang_Waktu
Mean
Difference (I-
J) Std. Error Sig.
95% Confidence
Interval
Lower
Bound
Upper
Bound
Kontrol Positif Diklofenak 4,48
Selang Waktu Pemberian 15
menit
Kontrol Positif Diklofenak 9,1
Selang Waktu 15 menit -98.72000
* 25.58181 .005 -157.7118 -39.7282
Kontrol Positif Diklofenak 4,48
Selang Waktu 30 menit -85.52000
* 25.58181 .010 -144.5118 -26.5282
Kontrol Positif Diklofenak 9,1
Selang Waktu 30 menit -64.87000
* 25.58181 .035 -123.8618 -5.8782
Kontrol Positif Diklofenak 9,1
Selang Waktu 15 menit
Kontrol Positif Diklofenak 4,48
Selang Waktu Pemberian 15
menit
98.72000* 25.58181 .005 39.7282 157.7118
Kontrol Positif Diklofenak 4,48
Selang Waktu 30 menit 13.20000 25.58181 .620 -45.7918 72.1918
Kontrol Positif Diklofenak 9,1
Selang Waktu 30 menit 33.85000 25.58181 .222 -25.1418 92.8418
Kontrol Positif Diklofenak 4,48
Selang Waktu 30 menit
Kontrol Positif Diklofenak 4,48
Selang Waktu Pemberian 15
menit
85.52000* 25.58181 .010 26.5282 144.5118
Kontrol Positif Diklofenak 9,1
Selang Waktu 15 menit -13.20000 25.58181 .620 -72.1918 45.7918
Kontrol Positif Diklofenak 9,1
Selang Waktu 30 menit 20.65000 25.58181 .443 -38.3418 79.6418
Kontrol Positif Diklofenak 9,1
Selang Waktu 30 menit
Kontrol Positif Diklofenak 4,48
Selang Waktu Pemberian 15
menit
64.87000* 25.58181 .035 5.8782 123.8618
Kontrol Positif Diklofenak 9,1
Selang Waktu 15 menit -33.85000 25.58181 .222 -92.8418 25.1418
Kontrol Positif Diklofenak 4,48
Selang Waktu 30 menit -20.65000 25.58181 .443 -79.6418 38.3418
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
137
Gambar 9. Diagram batang rata-rata nilai AUC (mm.menit) pada dosis efektif
diklofenak dan rentang waktu pemberian karagenin antara kelompok diklofenak
diklofenak rentang 15 dan 30 menit
Lampiran 12. Hasil Pengolahan Analisis Statistika Nilai AUC Data Perlakuan Uji
Antiinflamasi Fraksi Etanol-Heksan Ekstrak Metanol-Air Daun
Macaranga tanarius L., pada Mencit Galur Swiss Terinduksi
Karagenin
1. Uji Normalitas
Tests of Normality
Kelompok
Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk
Statistic Df Sig. Statistic df Sig.
AUC Kontrol Negatif Aquadest .236 5 .200* .902 5 .423
Kontrol Negatif CMC-Na
Dosis 191,8 mg/kgBB .377 5 .019 .679 5 .006
Kontrol positif diklofenak
Dosis 4,48 mg/kgBB .325 5 .091 .813 5 .102
Perlakuan Fraksi Macaranga
Dosis 47,95 mg/kgBB .226 5 .200
* .848 5 .189
Perlakuan Fraksi Macaranga
Dosis 95,9 mg/kgBB .333 5 .074 .795 5 .074
Perlakuan Fraksi Macaranga
Dosis 191,8 mg/kgBB .223 5 .200
* .896 5 .387
a. Lilliefors Significance Correction
*. This is a lower bound of the true significance.
Hasil pengujian statistika mengenai uji normalitas menunjukkan bahwa data tidak
terdistribusi normal karena nilai p < 0,05 (0,006) sehingga analisis data dilanjutkan
menggunakan Kruskal-Wallis Test
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
138
2. Nilai SE pada kelompok kontrol negatif, positif, dan perlakuan
Descriptives
Dosis Statistic Std. Error
AUC Kontrol Negatif Aquadest Mean 6.9699E2 9.38527
95% Confidence Interval for Mean Lower Bound 6.7094E2
Upper Bound 7.2305E2
5% Trimmed Mean 6.9673E2
Median 7.0268E2
Variance 440.417
Std. Deviation 2.09861E1
Minimum 674.93
Maximum 723.75
Range 48.82
Interquartile Range 39.78
Skewness .043 .913
Kurtosis -1.941 2.000
Kontrol Negatif CMC-Na 191,8
mg/kgBB
Mean 7.2419E2 8.06902
95% Confidence Interval for
Mean
Lower Bound 7.0178E2
Upper Bound 7.4659E2
5% Trimmed Mean 7.2299E2
Median 7.1640E2
Variance 325.545
Std. Deviation 1.80429E1
Minimum 713.78
Maximum 756.08
Range 42.30
Interquartile Range 24.49
Skewness 2.109 .913
Kurtosis 4.512 2.000
Kontrol positif diklofenak 4,48
mg/kgBB
Mean 3.1239E2 5.71943
95% Confidence Interval for
Mean
Lower Bound 2.9651E2
Upper Bound 3.2827E2
5% Trimmed Mean 3.1303E2
Median 3.1575E2
Variance 163.559
Std. Deviation 1.27890E1
Minimum 290.48
Maximum 322.80
Range 32.32
Interquartile Range 19.42
Skewness -1.785 .913
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
139
Kurtosis 3.462 2.000
Kelompok Perlakuan Fraksi
Dosis Terendah 47,95 mg/kgBB
Mean 5.8934E2 4.77994
95% Confidence Interval for
Mean
Lower Bound 5.7607E2
Upper Bound 6.0261E2
5% Trimmed Mean 5.8945E2
Median 5.9145E2
Variance 114.239
Std. Deviation 1.06883E1
Minimum 577.13
Maximum 599.48
Range 22.35
Interquartile Range 21.19
Skewness -.266 .913
Kurtosis -2.930 2.000
Kelompok Perlakuan Fraksi
Dosis Tengah 95,9 mg/kgBB
Mean 5.4897E2 5.62489
95% Confidence Interval for
Mean
Lower Bound 5.3335E2
Upper Bound 5.6459E2
5% Trimmed Mean 5.4963E2
Median 5.5260E2
Variance 158.197
Std. Deviation 1.25776E1
Minimum 527.03
Maximum 559.05
Range 32.02
Interquartile Range 17.17
Skewness -1.952 .913
Kurtosis 4.144 2.000
Kelompok Perlakuan Fraksi
Dosis Tertinggi 191,8 mg/kgBB
Mean 4.3853E2 1.41093
95% Confidence Interval for
Mean
Lower Bound 4.3461E2
Upper Bound 4.4244E2
5% Trimmed Mean 4.3850E2
Median 4.3845E2
Variance 9.954
Std. Deviation 3.15494
Minimum 435.23
Maximum 442.20
Range 6.97
Interquartile Range 6.26
Skewness .090 .913
Kurtosis -2.689 2.000
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
140
3. Uji Keberbedaan Dalam Kelompok Perlakuan
Uji Kruskal-Wallis
Apabila hasil analisis test statistics menghasilkan p < 0,05 atau pada kolom test statistics
“Asymp. Sig. = < 0,05”, maka menunjukkan “paling tidak terdapat perbedaan antara
dua kelompok”.
Ranks
Kelompok N Mean Rank
AUC Kontrol Negatif Aquadest 5 23.80
Kontrol Negatif CMC-Na Dosis
191,8 mg/kgBB 5 27.20
Kontrol positif diklofenak Dosis
4,48 mg/kgBB 5 3.00
Perlakuan Fraksi Macaranga
Dosis 47,95 mg/kgBB 5 18.00
Perlakuan Fraksi Macaranga
Dosis 95,9 mg/kgBB 5 13.00
Perlakuan Fraksi Macaranga
Dosis 191,8 mg/kgBB 5 8.00
Total 30
Test Statisticsa,b
AUC
Chi-Square 27.792
Df 5
Asymp. Sig. .000
a. Kruskal Wallis Test
b. Grouping Variable:
Kelompok
4. Uji Keberbedaan Antar Kelompok Perlakuan
Uji Mann-Whitney
Apabila hasil analisis test statistics menghasilkan p < 0,05 atau pada kolom test statistics
“Asymp. Sig. (2-tailed) = < 0,05”, maka menunjukkan perbedaan yang bermakna pada
kelompok terhadap efek yang diberikan.
Pengujian Perbedaan Kelompok Kontrol Negatif Aquadest (Pelarut Kalium Diklofenak)
dan Kontrol Negatif CMC-Na (Pelarut Fraksi Macaranga)
Ranks
Kelompok N Mean Rank Sum of Ranks
AUC Kontrol Negatif Aquadest 5 3.80 19.00
Kontrol Negatif CMC-Na
Dosis191,8 mg/kgBB 5 7.20 36.00
Total 10
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
141
Test Statisticsb
AUC
Mann-Whitney U 4.000
Wilcoxon W 19.000
Z -1.776
Asymp. Sig. (2-tailed) .076
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .095a
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable: Kelompok
Pengujian Perbedaan Kelompok Kontrol Negatif Aquadest
(Pelarut Kalium Diklofenak) dan Kontrol positif diklofenak
Ranks
Kelompok N Mean Rank Sum of Ranks
AUC Kontrol Negatif Aquadest 5 8.00 40.00
Kontrol positif diklofenak Dosis
4,48 mg/kgBB 5 3.00 15.00
Total 10
Test Statisticsb
AUC
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 15.000
Z -2.611
Asymp. Sig. (2-tailed) .009
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable: Kelompok
Pengujian Perbedaan Kelompok CMC-Na (Pelarut Frkasi) dan Kompok Perlakuan
Fraksi Etanol-Heksan Eksrak Metanol-Air M.tanarius L., dosis 47,95 mg/kgBB
Ranks
Kelompok N Mean Rank Sum of Ranks
AUC Kontrol Negatif CMC-Na Dosis
191,8 mg/kgBB 5 8.00 40.00
Perlakuan Fraksi Macaranga
Dosis 47,95 mg/kgBB 5 3.00 15.00
Total 10
Test Statisticsb
AUC
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 15.000
Z -2.611
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
142
Asymp. Sig. (2-tailed) .009
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable: Kelompok
*Hasil uji statistika dengan Mann Whitney menunjukkan nilai p yang sama yaitu (0,009)
untuk pengujian kontrol negatif dengan seluruh peringkat dosis pemberian fraksi etanol-
heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L. (Membuktikan bahwa
pemberian CMC-Na berbeda bermakna dengan seluruh kelompok perlakuan fraksi)
dalam memberikan penurunan nilai AUC (mm.menit).
Pengujian Perbedaan Kelompok Kompok Perlakuan Fraksi Etanol-Heksan Eksrak
Metanol-Air M.tanarius L. Dosis 47,95 mg/kgBB dan Kelompok Kontrol positif
diklofenak 4,48 mg/kgBB
Ranks
Kelompok N Mean Rank Sum of Ranks
AUC Kontrol positif diklofenak
Dosis 4,18 mg/kgBB 5 3.00 15.00
Perlakuan Fraksi Macaranga
Dosis 47,95 mg/kgBB 5 8.00 40.00
Total 10
Test Statisticsb
AUC
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 15.000
Z -2.611
Asymp. Sig. (2-tailed) .009
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable: Kelompok
*Hasil uji statistika dengan Mann Whitney menunjukkan nilai p yang sama yaitu (0,009)
untuk pengujian kontrol positif diklofenak dengan seluruh peringkat dosis pemberian
fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L. (Membuktikan
bahwa pemberian diklofenak berbeda bermakna dengan seluruh kelompok perlakuan
fraksi) dalam memberikan penurunan nilai AUC (mm.menit).
Pengujian Perbedaan Kelompok Kompok Perlakuan Fraksi Etanol-Heksan Eksrak
Metanol-Air M.tanarius L. Dosis 47,95 mg/kgBB dan 95,9 mg/kgBB
Ranks
Kelompok N Mean Rank Sum of Ranks
AUC Perlakuan Fraksi Macaranga
Dosis 47,95 mg/kgBB 5 8.00 40.00
Perlakuan Fraksi Macaranga
Dosis 95,9 mg/kgBB 5 3.00 15.00
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
143
Ranks
Kelompok N Mean Rank Sum of Ranks
AUC Perlakuan Fraksi Macaranga
Dosis 47,95 mg/kgBB 5 8.00 40.00
Perlakuan Fraksi Macaranga
Dosis 95,9 mg/kgBB 5 3.00 15.00
Total 10
Test Statisticsb
AUC
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 15.000
Z -2.611
Asymp. Sig. (2-tailed) .009
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable: Kelompok
Pengujian Perbedaan Kelompok Kompok Perlakuan Fraksi Etanol-Heksan Eksrak
Metanol-Air M.tanarius L. Dosis 47,95 mg/kgBB dan 191,8 mg/kgBB
Ranks
Kelompok N Mean Rank Sum of Ranks
AUC Perlakuan Fraksi Macaranga
Dosis 47,95 mg/kgBB 5 8.00 40.00
Perlakuan Fraksi Macaranga
Dosis 191,8 mg/kgBB 5 3.00 15.00
Total 10
Test Statisticsb
AUC
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 15.000
Z -2.611
Asymp. Sig. (2-tailed) .009
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable: Kelompok
Pengujian Perbedaan Kelompok Kompok Perlakuan Fraksi Etanol-Heksan Eksrak
Metanol-Air M.tanarius L. Dosis 95,9 mg/kgBB dan 191,8 mg/kgBB
Ranks
Kelompok N Mean Rank Sum of Ranks
AUC Perlakuan Fraksi Macaranga
Dosis 95,9 mg/kgBB 5 8.00 40.00
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
144
Perlakuan Fraksi Macaranga
Dosis 191,8 mg/kgBB 5 3.00 15.00
Total 10
Test Statisticsb
AUC
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 15.000
Z -2.611
Asymp. Sig. (2-tailed) .009
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable: Kelompok
*Hasil uji statistika dengan Mann Whitney menunjukkan nilai p yang sama yaitu (0,009)
untuk pengujian pada tiap kelompok perlakuan (pemberian ketiga peringkat dosis fraksi
etanol-heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L. Membuktikan bahwa
pemberian fraksi dengan dosis 47,95; 95,9; 191,8 mg/kgBB memiliki hasil yang berbeda
bermakna antar kelompoknya dalam memberikan penurunan udem telapak kaki mencit
yang digambarkan melalui nilai AUC (mm.menit).
Gambar 10. Diagram batang rata-rata nilai AUC pada kelompok perlakuan
uji antiinflamasi
Keterangan:
I = Kelompok kontrol negatif aquadest
II = Kelompok kontrol negatif CMC-Na 3,836mg/20gramBB mencit
III = Kelompok perlakuan Kalium Diklofenak 4,48mg/kgBB mencit
IV = Kelompok perlakuan fraksi etanol-heksan ekstrak metanol air daun Macaranga
tanarius L. dosis 47,95 mg/kgBB
V = Kelompok perlakuan fraksi etanol-heksan ekstrak metanol air daun Macaranga
tanarius L. dosis 95,9 mg/kgBB
VI = Kelompok perlakuan fraksi etanol-heksan ekstrak metanol air daun Macaranga
tanarius L. dosis 191,8 mg/kgBB
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
145
Lampiran 13. Hasil uji statistika % penghambatan inflamasi pada perlakuan fraksi
etanol-heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L.
Descriptives
Kelompok Statistic
Std.
Error
Persen_Penghambata
n_Inflamasi
Kontrol Negatif CMC-
Na Dosis 191,8
mg/kgBB
Mean .0004 1.11435
95% Confidence Interval for
Mean
Lower
Bound -3.0935
Upper
Bound 3.0943
5% Trimmed Mean .1652
Median 1.0760
Variance 6.209
Std. Deviation 2.49177
Minimum -4.40
Maximum 1.44
Range 5.84
Interquartile Range 3.38
Skewness -2.109 .913
Kurtosis 4.512 2.000
Kontrol Positif Kalium
Diklofenak Dosis
4,48mg/kgBB
Mean 56.8634 .78976
95% Confidence Interval for
Mean
Lower
Bound 54.6707
Upper
Bound 59.0561
5% Trimmed Mean 56.7752
Median 56.4000
Variance 3.119
Std. Deviation 1.76596
Minimum 55.43
Maximum 59.89
Range 4.46
Interquartile Range 2.68
Skewness 1.784 .913
Kurtosis 3.460 2.000
Kelompok Perlakuan
Fraksi Etanol-Heksan
Ekstrak Metanol-Air
47,95 mg/kgBB
Mean 18.6210 .66005
95% Confidence Interval for
Mean
Lower
Bound 16.7884
Upper
Bound 20.4536
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
146
5% Trimmed Mean 18.6051
Median 18.3290
Variance 2.178
Std. Deviation 1.47591
Minimum 17.22
Maximum 20.31
Range 3.09
Interquartile Range 2.93
Skewness .267 .913
Kurtosis -2.930 2.000
Kelompok Perlakuan
Fraksi Etanol-Heksan
Ekstrak Metanol-Air
95,9 mg/kgBB
Mean 24.1950 .77677
95% Confidence Interval for
Mean
Lower
Bound 22.0383
Upper
Bound 26.3517
5% Trimmed Mean 24.1040
Median 23.6940
Variance 3.017
Std. Deviation 1.73691
Minimum 22.80
Maximum 27.22
Range 4.42
Interquartile Range 2.37
Skewness 1.951 .913
Kurtosis 4.143 2.000
Kelompok Perlakuan
Fraksi Etanol-Heksan
Ekstrak Metanol-Air
191,8 mg/kgBB
Mean 39.5676 .14793
95% Confidence Interval for
Mean
Lower
Bound 39.1569
Upper
Bound 39.9783
5% Trimmed Mean 39.5759
Median 39.5470
Variance .109
Std. Deviation .33078
Minimum 39.08
Maximum 39.90
Range .82
Interquartile Range .61
Skewness -.632 .913
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
147
Kurtosis -.319 2.000
Tests of Normality
Kelompok
Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk
Statistic df Sig. Statistic df Sig.
Persen_Penghambatan
_Inflamasi
Kontrol Negatif CMC-Na
Dosis 191,8 mg/kgBB .377 5 .019 .679 5 .006
Kontrol Positif Kalium
Diklofenak Dosis
4,48mg/kgBB
.325 5 .091 .813 5 .102
Kelompok Perlakuan
Fraksi Etanol-Heksan
Ekstrak Metanol-Air 47,95
mg/kgBB
.226 5 .200* .848 5 .189
Kelompok Perlakuan
Fraksi Etanol-Heksan
Ekstrak Metanol-Air 95,9
mg/kgBB
.393 5 .011 .754 5 .032
Kelompok Perlakuan
Fraksi Etanol-Heksan
Ekstrak Metanol-Air 191,8
mg/kgBB
.203 5 .200* .930 5 .599
a. Lilliefors Significance Correction
*. This is a lower bound of the true significance.
Kruskal-Wallis Test
Ranks
Kelompok N Mean Rank
Persen_Penghambatan_Infla
masi
Kontrol Negatif CMC-Na Dosis
3,836mg/20gramBB 5 3.00
Kontrol Positif Kalium Diklofenak Dosis
4,48mg/kgBB 5 23.00
Kelompok Perlakuan Fraksi Etanol-Heksan
Ekstrak Metanol-Air 0,959mg/20gramBB 5 8.00
Kelompok Perlakuan Fraksi Etanol-Heksan
Ekstrak Metanol-Air 1,918mg/20gramBB 5 13.00
Kelompok Perlakuan Fraksi Etanol-Heksan
Ekstrak Metanol-Air 3,836mg/20gramBB 5 18.00
Total 25
Test Statisticsa,b
Persen_Penghambatan_Inflamasi
Chi-Square 23.077
df 4
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
148
Asymp. Sig. .000
NPar Tests
Mann-Whitney Test
Ranks
Kelompok N Mean Rank
Sum of
Ranks
Persen_Penghambatan_
Inflamasi
Kontrol Negatif CMC-Na Dosis
191,8 mg/kgBB 5 3.00 15.00
Kontrol Positif Kalium
Diklofenak Dosis 4,48mg/kgBB 5 8.00 40.00
Total 10
Test Statisticsb
Persen_Penghamb
atan_Inflamasi
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 15.000
Z -2.611
Asymp. Sig. (2-tailed) .009
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable: Kelompok
Ranks
Kelompok N
Mean
Rank
Sum of
Ranks
Persen_Penghambatan_Inflama
si
Kontrol Negatif CMC-Na
Dosis 191,8 mg/kgBB 5 3.00 15.00
Kelompok Perlakuan Fraksi
Etanol-Heksan Ekstrak
Metanol-Air 47,95 mg/kgBB
5 8.00 40.00
Total 10
Test Statisticsb
Persen_Penghamb
atan_Inflamasi
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 15.000
Z -2.611
Asymp. Sig. (2-tailed) .009
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a
a. Not corrected for ties.
c. Grouping Variable: Kelompok
*Hasil uji statistika dengan Mann Whitney menunjukkan nilai p yang sama yaitu (0,009)
untuk pengujian kontrol negatif dengan seluruh peringkat dosis pemberian fraksi etanol-
heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L. (Membuktikan bahwa
pemberian CMC-Na berbeda bermakna dengan seluruh kelompok perlakuan fraksi) pada
% penghambatan inflamasi.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
149
Ranks
Kelompok N Mean Rank Sum of Ranks
Persen_Penghambatan_Inflama
si
Kontrol Positif Kalium
Diklofenak Dosis
4,48mg/kgBB
5 8.00 40.00
Kelompok Perlakuan
Fraksi Etanol-Heksan
Ekstrak Metanol-Air
47,95 mg/kgBB
5 3.00 15.00
Total 10
Test Statisticsb
Persen_Penghamb
atan_Inflamasi
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 15.000
Z -2.611
Asymp. Sig. (2-tailed) .009
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a
*Hasil uji statistika dengan Mann Whitney menunjukkan nilai p yang sama yaitu (0,009)
untuk pengujian kontrol positif diklofenak dengan seluruh peringkat dosis pemberian
fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L. (Membuktikan
bahwa pemberian kontrol positif diklofenak berbeda bermakna dengan seluruh kelompok
perlakuan fraksi) pada % penghambatan inflamasi.
Ranks
Kelompok N Mean Rank Sum of Ranks
Persen_Penghambatan_Infla
masi
Kelompok Perlakuan
Fraksi Etanol-Heksan
Ekstrak Metanol-Air
47,95 mg/kgBB
5 3.00 15.00
Kelompok Perlakuan
Fraksi Etanol-Heksan
Ekstrak Metanol-Air
95,9 mg/kgBB
5 8.00 40.00
Total 10
Test Statisticsb
Persen_Pengham
batan_Inflamasi
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 15.000
Z -2.611
Asymp. Sig. (2-tailed) .009
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable: Kelompok
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
150
Ranks
Kelompok N Mean Rank Sum of Ranks
Persen_Penghambatan_Infla
masi
Kelompok Perlakuan
Fraksi Etanol-Heksan
Ekstrak Metanol-Air
47,95 mg/kgBB
5 3.00 15.00
Kelompok Perlakuan
Fraksi Etanol-Heksan
Ekstrak Metanol-Air
191,8 mg/kgBB
5 8.00 40.00
Total 10
Test Statisticsb
Persen_Penghamb
atan_Inflamasi
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 15.000
Z -2.611
Asymp. Sig. (2-tailed) .009
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable: Kelompok
Ranks
Kelompok N Mean Rank Sum of Ranks
Persen_Penghambatan_Inflamasi Kelompok
Perlakuan Fraksi
Etanol-Heksan
Ekstrak Metanol-
Air 95,9 mg/kgBB
5 3.00 15.00
Kelompok
Perlakuan Fraksi
Etanol-Heksan
Ekstrak Metanol-
Air 191,8 mg/kgBB
5 8.00 40.00
Total 10
Test Statisticsb
Persen_Pengham
batan_Inflamasi
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 15.000
Z -2.611
Asymp. Sig. (2-tailed) .009
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable: Kelompok
*Hasil uji statistika dengan Mann Whitney
menunjukkan nilai p yang sama yaitu (0,009)
untuk pengujian pada tiap kelompok
perlakuan (pemberian ketiga peringkat dosis
fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun
Macaranga tanarius L. Membuktikan bahwa
pemberian fraksi dengan dosis 47,95; 95,9;
191,8 mg/kgBB memiliki hasil yang berbeda
bermakna antar kelompoknya dengan seluruh
kelompok perlakuan fraksi pada %
penghambatan inflamasi.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
151
Gambar 11. Diagram batang persen (%) penghambatan inflamasi pada
masing-masing kelompok perlakuan uji antiinflamasi
Keterangan:
I = Kelompok kontrol negatif CMC-Na 191,8 mg/kgBB
II = Kelompok perlakuan Kalium Diklofenak 4,48mg/kgBB mencit
III = Kelompok perlakuan fraksi etanol-heksan ekstrak metanol air daun Macaranga
tanarius L. dosis 47,95 mg/kgBB
IV = Kelompok perlakuan fraksi etanol-heksan ekstrak metanol air daun Macaranga
tanarius L. dosis 95,9 mg/kgBB
V = Kelompok perlakuan fraksi etanol-heksan ekstrak metanol air daun Macaranga
tanarius L. dosis 191,8 mg/kgBB
Lampiran 14. Hasil Pengolahan Analisis Statistika Potensi Relatif Daya
Antiinflamasi Fraksi Etanol-Heksan Ekstrak Metanol-Air
Daun Macaranga tanarius L., pada Mencit Galur Swiss
Terinduksi Karagenin Descriptives
Kelompok_Perlakuan Statistic Std. Error
Persen_PotensiRelatif
DayaAntiinflamasi
Kontrol Positif
Diklofenak
4,48mg/kgBB
Mean 1.0001E2 1.38840
95% Confidence Interval for
Mean
Lower
Bound 96.1552
Upper
Bound 1.0386E2
5% Trimmed Mean 99.8544
Median 99.2000
Variance 9.638
Std. Deviation 3.10455
Minimum 97.49
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
152
Maximum 105.33
Range 7.84
Interquartile Range 4.72
Skewness 1.786 .913
Kurtosis 3.465 2.000
Fraksi Etanol-
Heksan Ekstrak
Metanol-Air daun
M.tanarius Dosis
47,95 mg/kgBB
Mean 32.7500 1.16276
95% Confidence Interval for
Mean
Lower
Bound 29.5216
Upper
Bound 35.9784
5% Trimmed Mean 32.7222
Median 32.2400
Variance 6.760
Std. Deviation 2.60002
Minimum 30.28
Maximum 35.72
Range 5.44
Interquartile Range 5.15
Skewness .265 .913
Kurtosis -2.928 2.000
Fraksi Etanol-
Heksan Ekstrak
Metanol-Air Daun
M.tanarius Dosis
95,9 mg/kgBB
Mean 42.5520 1.36844
95% Confidence Interval for
Mean
Lower
Bound 38.7526
Upper
Bound 46.3514
5% Trimmed Mean 42.3917
Median 41.6600
Variance 9.363
Std. Deviation 3.05993
Minimum 40.10
Maximum 47.89
Range 7.79
Interquartile Range 4.18
Skewness 1.951 .913
Kurtosis 4.143 2.000
Fraksi Etanol-
Heksan Ekstrak
Metanol-Air Daun
M.tanarius Dosis
191,8 mg/kgBB
Mean 69.5950 .33567
95% Confidence Interval for
Mean
Lower
Bound 68.5267
Upper
Bound 70.6633
5% Trimmed Mean 69.6111
Median 69.7400
Variance .451
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
153
Std. Deviation .67134
Minimum 68.73
Maximum 70.17
Range 1.44
Interquartile Range 1.25
Skewness -.772 1.014
Kurtosis -1.588 2.619
Kruskal-Wallis Test
Ranks
Kelompok_Perlakuan N Mean Rank
Persen_PotensiRelatifDayaAntii
nflamasi
Kontrol Positif Diklofenak 4,48mg/kgBB 5 18.00
Fraksi Etanol-Heksan Ekstrak Metanol-Air daun
M.tanarius Dosis 47,95 mg/kgBB 5 3.00
Fraksi Etanol-Heksan Ekstrak Metanol-Air Daun
M.tanarius Dosis 95,9 mg/kgBB 5 8.00
Fraksi Etanol-Heksan Ekstrak Metanol-Air Daun
M.tanarius Dosis 191,8 mg/kgBB 5 13.00
Total 20
Test Statisticsa,b
Persen_PotensiRel
atifDayaAntiinfla
masi
Chi-Square 17.857
df 3
Asymp. Sig. .000
a. Kruskal Wallis Test
b. Grouping Variable:
Kelompok_Perlakuan
Tests of Normality
Kelompok_Perlakuan
Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk
Statistic df Sig. Statistic df Sig.
Persen_Potens
i Relatif
Daya
Antiinflamasi
Kontrol Positif Diklofenak 4,48mg/kgBB .326 5 .089 .812 5 .101
Fraksi Etanol-Heksan Ekstrak Metanol-
Air daun M.tanarius Dosis 47,95
mg/kgBB
.226 5 .200* .849 5 .191
Fraksi Etanol-Heksan Ekstrak Metanol-
Air Daun M.tanarius Dosis 95,9
mg/kgBB
.392 5 .012 .754 5 .033
Fraksi Etanol-Heksan Ekstrak Metanol-
Air Daun M.tanarius Dosis 191, 8
mg/kgBB
.265 4 . .899 4 .428
a. Lilliefors Significance Correction
*. This is a lower bound of the true significance.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
154
Mann-Whitney Test
Ranks
Kelompok_Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
Persen_PotensiRelatifDayaAntii
nflamasi
Kontrol Positif Diklofenak
4,48mg/kgBB 5 8.00 40.00
Fraksi Etanol-Heksan Ekstrak
Metanol-Air daun M.tanarius
Dosis 47,95 mg/kgBB
5 3.00 15.00
Total 10
Test Statisticsb
Persen_PotensiRel
atifDayaAntiinfla
masi
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 15.000
Z -2.611
Asymp. Sig. (2-tailed) .009
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable: Kelompok_Perlakuan
Ranks
Kelompok_Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
Persen_PotensiRelatifDayaAntii
nflamasi
Fraksi Etanol-Heksan Ekstrak
Metanol-Air daun M.tanarius
Dosis 47,95 mg/kgBB
5 3.00 15.00
Fraksi Etanol-Heksan Ekstrak
Metanol-Air Daun M.tanarius
Dosis 95,9 mg/kgBB
5 8.00 40.00
Total 10
Test Statisticsb
Persen_PotensiRel
atifDayaAntiinfla
masi
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 15.000
Z -2.611
Asymp. Sig. (2-tailed) .009
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable: Kelompok_Perlakuan
Ranks
Kelompok_Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
155
Persen_PotensiRelatifDayaAntii
nflamasi
Fraksi Etanol-Heksan Ekstrak
Metanol-Air Daun M.tanarius
Dosis 95,9 mg/kgBB
5 3.00 15.00
Fraksi Etanol-Heksan Ekstrak
Metanol-Air Daun M.tanarius
Dosis 191,8 mg/kgBB
5 8.00 40.00
Total 10
Test Statisticsb
Persen_PotensiRel
atifDayaAntiinfla
masi
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 15.000
Z -2.611
Asymp. Sig. (2-tailed) .009
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable: Kelompok_Perlakuan
*Hasil uji statistika dengan Mann Whitney
menunjukkan nilai p yang sama yaitu (0,009)
untuk pengujian pada tiap kelompok
perlakuan (pemberian ketiga peringkat dosis
fraksi etanol-heksan ekstrak metanol-air daun
Macaranga tanarius L. Membuktikan bahwa
pemberian fraksi dengan dosis 47,95; 95,9;
191,8 mg/kgBB memiliki hasil yang berbeda
bermakna antar kelompoknya dengan seluruh
kelompok perlakuan fraksi pada % potensi
relatif daya antiinflamasi
Gambar 12. Diagram batang persen (%) potensi relatif daya antiinflamasi pada
masing-masing kelompok perlakuan uji antiinflamasi
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
156
Lampiran 15. Hasil Pengujian Fitokimia secara Kualitatif dengan Metode
Uji Tabung pada Fraksi Etanol-Heksan, Ekstrak Metanol-Air
Daun Macaranga tanarius L.
Gambar 13. Hasil Pengujian Kandungan Alkaloid (Kiri) Reagen Dragendroff
(Endapan Merah) dan (Kanan) Reagen Mayer (Endapan Putih)
Gambar 14. Hasil Pengujian
Kandungan Flavonoid Berwarna Jingga
Gambar 15. Hasil Pengujian
Kandungan Terpenoid/Steroid
Menghasilkan Warna Coklat
Gambar 16. Hasil Pengujian Kandungan
Fenolik Menghasilkan Hijau kebiruan
Gambar 17. Hasil Pengujian Kandungan
Saponin Menghasilkan Busa < 1 cm
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
157
Gambar 18. Hasil Pengujian Kandungan
Tanin Menghasilkan Warna Biru
Kehitaman
Gambar 19. Hasil Pengujian Kandungan
Glikosida Menghasilkan Cincin Berwarna
Ungu pada Batas Cairan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
158
BIOGRAFI PENULIS
Penulis Skripsi berjudul “Uji Antiinflamasi
Fraksi Etanol-Heksan Ekstrak Metanol-Air
Daun Macaranga Tanarius L. pada Mencit Galur
Swiss Terinduksi Karagenin” memiliki nama
lengkap Nurul Kusumawardani, merupakan anak
pertama dari dua bersaudara pasangan dari Bapak
Setiyono dan Ibu Isna Taviyani S.Pd. Penulis
dilahirkan di Salatiga pada tanggal 2 Januari 1994
silam. Pendidikan formal yang telah ditempuh
penulis yaitu TK Islam Sultan Fatah (1999-2000),
tingkat Sekolah Dasar di SDN 06 Salatiga (2000-2006), tingkat Sekolah
Menengah Pertama di SMP Negeri 09 Salatiga (2006-2009), dan tingkat Sekolah
Menengah Atas di SMA Negeri 01 Salatiga (2009-2012). Pada tahun 2012,
penulis melanjutkan pendidikan sarjana di Fakultas Farmasi Universitas Sanata
Dharma Yogyakarta. Semasa studinya, penulis aktif dalam kegiatan kepanitiaan
seperti Desa Mitra (2013) sebagai sekretaris, CBIA (Cara Belajar Ibu Aktif)
(2014) sebagai sekretaris, dan Pelayanan Kesehatan Dies Natalis ke 59 Universitas
Sanata Dharma Yogyakarta (2014) sebagai sekretaris. Penulis juga pernah terlibat
dalam Program Kreativitas Mahasiiswa dalam bidang PKM-M “MANG TOGA”
yang dibiayai oleh Dinas Pendidikan Tinggi (2015). Penulis juga aktif berperan
sebagai asisten dosen di Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta
yaitu menjadi asisten praktikum Bentuk Sediaan Farmasi (2014), asisten
praktikum Komunikasi Farmasi (2015), dan asisten praktikum Farmakologi-
Toksikologi (2015).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI