pewarnaan gram dan bta - ibnu
TRANSCRIPT
PEWARNAAN GRAM DAN TAHAN ASAM
IBNU KHARISMANG0010095
Mengapa perlu mewarnai bakteri?
• Tanpa pewarnaan, bakteri terlalu transparan sehingga sukar dilihat secara langsung pada mikroskop.
• Untuk membantu pengamatan morfologi dan sifat-sifat bakteri.
• Membantu identifikasi bakteri.
Pewarnaan Bakteri
• Jenis-jenis pewarnaan bakteri yang dikenal adalah:
1. Pewarnaan sederhana, ex:- Carbol fuchsin- Gentian violet- Methylen blue
2. Pewarnaan diferensial, ex:- Pewarnaan Gram - Perwarnaan tahan asam
PEWARNAAN GRAM
Pewarnaan Gram• Pewarnaan Gram menggunakan dua macam
zat warna Pewarna I (crystal violet)
Decolorizer (alcohol 90%)
BAKTERI
BAKTERI GRAM (-)
BAKTERI GRAM (+)
Pewarna II (safranin)
Pewarna II (safranin)
CV- ; CV+ Mordant (kalium iodida)
• Bakteri yang tahan terhadap peluntur akan mempertahankan pewarna pertama Berwarna ungu-> Gram positif
• Bakteri yang tidak tahan terhadap peluntur akan menyerap pewarna kedua Berwarna merah-> Gram negatif
Prinsip Pewarnaan Gram
• Pewarna Pertama:Crystal violet
• Mordant: Kalium Iodida
• Peluntur: Alkohol 90%
• Pewarna Kedua:Safranin
Dinding Sel Bakteri Gram (+) dan (-)
Bakteri Gram positif: • Dinding selnya terdiri dari lapisan
peptidoglikan yang lebih tebal (90%)Bakteri Gram negatif: • Dinding selnya terdiri dari lapisan
peptidoglikan yang tipis (90%). Bakteri Gram (+) memiliki lipid < bakteri Gram (-)
• Reaksi Gram positif maupun Gram negatif disebabkan oleh perbedaan struktur dinding sel bakteri
• Contoh bakteri gram positif-Bentuk coccus: Streptococcus, Staphylococcus, Pneumococcus, Peptococcus-Bentuk batang: Corynobacterium, Bacillus, Clostridia
• Contoh bakteri gram negatif-Bentuk coccus: Neisseria, Veilonella-Bentuk batang: E. coli, Shigella, Salmonella,
Klebsiella, Hemophillus, Pasteurella, Fusobacterium, Brucella
Bakteri Gram (+) yang sering terwarnai sebagai Gram (-)???
Hasil Pewarnaan Gram
N. gonorrhoeaeStaphylococcus sp.
PEWARNAAN TAHAN ASAM
Dinding Sel Bakteri Tahan Asam
Dinding sel kuman tahan asam terdiri dari peptidoglikan, arabinogalaktan, dan lipid (lapisan lilin). 50% dari lapisan lilin ini adalah asam mikolat
Pewarnaan Tahan Asam
• Kandungan lilin yang tinggi->sukar diwarnai• Supaya dapat mewarnai bakteri tahan asam
perlu menghilangkan lapisan lilin pada dinding sel: pemanasan (Ziehl Neelsen)
• Metode Ziehl Neelsen:Zat warna pertama (carbol fuchsin) + pemanasan-> peluntur (HCl dan Alcohol)-> zat warna kedua (methylen blue)
• Setelah terwarnai Bakteri tahan asam akan mempertahankan pewarna pertama (merah) dengan sangat kuat dan tahan terhadap asam dan alkohol
• Bakteri tidak tahan asam akan melepaskan pewarna pertama dan mengikat pewarna kedua (biru)
• Sehingga bakteri terbagi menjadi:Bakteri tahan asam->MerahBakteri tidak tahan asam->Biru
Prosedur Pewarnaan Tahan AsamZIEHL NIELSEN
• Pewarna pertama: Fuchsin basis
• Menghilangkan lipid : pemanasan
• Peluntur: Alcohol & HCl
• Pewarna kedua : Methylen Blue
• Contoh bakteri tahan asam:Mycobacterium tuberculosisMycobacterium lepraeNocardia spActinomyces sp
Hasil Pewarnaan Bakteri Tahan Asam Metode Ziehl Neelsen
TERIMA KASIH