Pengaruh suplementasi diet bioflok pada kinerja pertumbuhan danaktivitas enzim pencernaan di Penaeus monodon

a b s t r a c t

A 60 - hari percobaan pertumbuhan dalam ruangan dilakukan untuk mempelajari pengaruh suplementasi diet bioflok pada kinerja pertumbuhan dan aktivitas enzim pencernaan di Penaeus monodon remaja . Bioflok dikembangkan di dalam ruangan fiberglass diperkuat plastik ( FRP ) tangki (1000 L ) digunakan sebagai suplemen makanan untuk P. monodon ( 2,90 ± 0,10 g )dipelihara dalam 1000 L FRP tank . Tingkat Dinilai bioflok kering termasuk dalam udang diet basal , 0 ( B0 , kontrol) , 4 ( B4 ) , 8 ( B8 ) dan 12 % ( B12 ) . The bioflok kering terkandung 24.30 ± 0,28 % protein . Profil asam lemak dari bioflok mengungkapkan asam palmitat ( 46,54 % ) , asam cis - Vaccenic ( 15,37 % ) , asam linoleat ( 10,67 % ) dan asam oleat ( 9,19 % ) sebagai asam lemak utama . Therewere 16,9 dan 13,9 % secara signifikan lebih tinggi ( 0,01 pb ) bodyweights akhir dalam B8 dan B4 masing-masing dibandingkan dengan kontrol , B0 . Demikian pula , secara signifikan lebih baik ( pb 0,05 ) rasio konversi pakan ( FCR ) , 1,84 ± 0,09 dan rasio efisiensi protein ( PER ) , 3,48 ± 0,17 itu melihat di B4 dibandingkan dengan kontrol ( FCR 2,29 ± 0,11 dan 2,80 ± 0,13 PER ) . Pada akhir percobaan makan , B4 tercatat 57,6 , 45,5 , 61 dan 78,6 % peningkatan yang signifikan( pb 0,01 ) di hepatopancreas aktivitas enzim pencernaan untuk amilase , selulase , lipase dan protease masing-masing dibandingkan dengan kontrol . Namun, pengobatan dengan tingkat 12 % dari bioflok inklusi ( B12 ) tidak berbeda secara signifikan ( p 0,05 N ) untuk sebagian besar parameter kinerja pertumbuhan dan aktivitas enzim pencernaan dibandingkan dengan kontrol .Penelitian ini memaparkan kesesuaian bioflok sebagai suplemen diet di level 4 % dalam pakan udang untuk meningkatkan pertumbuhan dan aktivitas enzim pencernaan udang windu remaja .1 . pengantarUdang penaeid sangat dihargai komoditas makanan laut di pasar domestik dan internasional . Ekonomi budidaya udang sangat tergantung pada pakan yang merupakan biaya operasional 40-60 % ( Tan et al . , 2005). Suplemen diet yang banyak digunakan dalam budidaya udang untuk meningkatkan pertumbuhan , respon imun dan aktivitas enzim pencernaan . Umumnya digunakan suplemen diet udang penaeid adalah produk mikroalga ( Boonyaratpalin et al , 2001; . Ju et al , 2009; . . Supamattaya et al, 2005 ) , makroalga , probiotik ( Wang , 2007 ( Yeh et al , 2006. ) ; Yang et al , 2010; . . . Ziaei - Nejad et al , 2006) , prebiotik ( Zhang et al , 2012) dan perifiton ( Anand et al , 2013b ) . .

Baru-baru ini , manipulasi rasio karbon nitrogen ( C : N ratio ) untuk pengembangan bioflok telah menjanjikan dalam akuakultur ( Anand et al , 2013a ; Avnimelech , 1999 . ) . C : N ratio yang dimanipulasi oleh suplementasi sumber karbon eksternal atau tingkat karbon tinggi dalam pakan ( Ballester et al , 2010; Crab et al , 2012; McIntosh , 2000. . ) . ditinggi C : N ratio , bakteri heterotrofik melumpuhkan ion amonium untuk produksi protein mikroba dan mempertahankan tingkat nitrogen anorganik dalam batas ( Avnimelech , 1999) . Bioflok meningkatkan kinerja pertumbuhan Penaeus monodon ( Anand et al , 2013a ; . Arnold et al , 2009 ; . . Hari et al , 2006 ) , Litopenaeus vannamei ( Wasielesky et al , 2006; . Xu dan Pan , 2012 ) , Farfantepenaeuspaulensis ( Ballester et al . , 2010) dan Marsupenaeus japonicus ( Zhao et al . , 2012) . Selain sebagai sumber protein kualitas , bioflocs adalah sumber yang kaya promotor pertumbuhan dan senyawa bioaktif ( Ju et al . , 2008a ) yang meningkatkan enzim pencernaan ( Xu dan Pan , 2012) dan status kesehatan udang budidaya ( Singh et al . , 2005).

Secara umum, sebagian besar penelitian yang menggunakan in situ dikembangkan mikroba flok untuk kinerja pertumbuhan udang ( Hari et al , 2006; . Xu dan Pan , 2012) . Namun, teknik ini in situ berdasarkan membutuhkan kebutuhan oksigen tambahan untuk respirasi mikroba , di samping kebutuhan oksigen udang ( Burford et al , 2003; . . Tacon et al , 2002) . Kebutuhan oksigen tambahan ini memerlukan aerator tambahan , yang meningkatkan biaya aerasi di tambak udang dibandingkan dengan sistem budidaya udang konvensional ( Tacon et al . , 2002) . Selain itu , peningkatan produksi partikel flok mikroba juga soal tantangan jika produksi melebihi konsumsi udang .

Baru-baru ini , telah menunjukkan bahwa inklusi diet bioflok meningkatkan kinerja pertumbuhan L. vannamei ( Bauer et al , 2012; . . Ju et al , 2008b ; Kuhn et al , 2010. ) . Namun, ada kelangkaan informasi untuk mendukung peran diet bioflok terhadap pertumbuhan dan aktivitas enzim pencernaan di P. monodon . Oleh karena itu , untuk menyelidiki kesesuaianbioflok sebagai suplemen diet , bioflok diproduksi di dalam ruangan tank FRP termasuk dalam diet udang di tingkat yang berbeda dan diumpankan ke P. monodon . Dalam konteks ini , penelitian ini bertujuan untuk mengevaluasi pengaruh suplementasi diet bioflok pada kinerja pertumbuhan dan aktivitas enzim pencernaan di P. monodon remaja

2 . bahan andmethods2.1 . desain eksperimentalBioflok diproduksi dalam tangki ruangan digunakan sebagai suplemen makanan dalam pakan udang , selama percobaan pertumbuhan dalam ruangan 60 - hari . Diet kontrol tanpa bioflok dibandingkan terhadap tiga diet eksperimental dengan tingkat gradasi dari bioflok inklusi . Penelitian dilakukan di Kakdwip Research Centre , Central Institute of Payau Budidaya , Kakdwip( 21 ° 51'N dan 88 ° 11 ' E ) , Bengal Barat , India .

2.2 . Produksi bioflokProduksi bioflok dilakukan dalam tiga fiberglass ruangan diperkuat plastik ( FRP ) tangki (1000 L , daerah bawah 2 m2 ) di sevenbatches pada interval 5 - hari selama Maret-Mei 2011 . Tank yang filledwith air dari sumber air payau di dekatnya. The bag filter kedap baik digunakan untuk mencegah masuknya bahan-bahan yang tidak diinginkan dan partikel tersuspensi ke dalam tangki . Dua pipa aerasi dengan batu udara dan regulator dengan 7,5 m3 air tangki - 1 min - 1 kapasitas difusi yang disediakan di setiap tangki untuk memenuhi kebutuhan oksigen dan pencampuran yang tepat dari flok . Sebagai inokulum , 10 L air dengan flok bakteri dikembangkan dalam tangki terpisah ditambahkan ke masing-masing tangki . C : N ratio dipertahankandi 10 : 1 menggunakan amonium sulfat sebagai nitrogen dan tepung terigu sebagai sumber karbon . Sumber nitrogen anorganik diterapkan sampai hari ke-3 ( 72 jam ), sedangkan penambahan karbohidrat dilanjutkan sampai hari ke-4 . Thiswas dilakukan untuk maximumutilization kiri atas nitrogen anorganik dan untuk mengurangi kemungkinan terjadinya nitrogen anorganik berupa nitrogen total amonia dalam bioflok dikumpulkan .

Pada hari ke-5 , bioflok diizinkan untuk menetap dengan menutup aerasi dan selanjutnya dipanen dengan melewatkan air dalam bag filter nilon dengan 10 pM ukuran pori . Flok yang dikumpulkan disentrifugasi pada 2000 rpm dan dibuang air supernatant . Untuk menghapus jejak tingkat amonia nitrogen , bioflocs dicuci dua kali dengan disaring air payau salinitas yang sama . Flocs dikeringkan di bawah naungan pada selembar plastik diikuti dengan pengeringan dalam oven udara panas pada suhu 45 ° C. Gumpalan dikeringkan tanah untuk bubuk halus ( kurang dari 200 m ) dan disimpan dalam wadah kedap udara dalam lemari es sampai diet eksperimental dibuat .

2.3 . Estimasi komunitas mikroba bioflokJumlah bakteri total heterotrofik , Vibrio , Bacillus , Lactobacillus dan countwere jamur dilakukan pada hari-hari awal dan akhir dari bioflok siklus produksi . Untuk memisahkan mikroba flocculated , sampel disonikasi selama 1 menit menggunakan penyelidikan sonikator ( PCI Analytics , India ) dengan 20 KHz amplitudo . Selanjutnya , 0,1 ml pengenceran yang tepat yang berlapis di duplikat pada trypton soya agar dengan 1,0 % b / v NaCl total jumlah bakteri heterotrofik , thiosulfate citrate sukrosa garam empedu agar ( TCBS ) untuk Vibrio , Bacillus cereus agar ( HIMEDIA , India ) untuk Bacillus , Lactobacillus MRS agar ( HIMEDIA , India ) untuk Lactobacillus dan Sabouraud dextrose agar untuk menghitung jamur . Pelat diinkubasi pada suhu 28 ° C selama 7 hari untuk menghitung jamur dan 48 jam untuk mikroba lainnya . Koloni di kisaran30 sampai 300 dihitung dan dinyatakan sebagai koloni forming unit ( cfu ) .2.4. Diet eksperimental Komposisi pakan percobaan disajikan pada Tabel 1. Empat diet eksperimental isonitronenik dan isoenergetic dirumuskan yaitu, B0, B4, B8 dan B12. Diet kontrol (B0), tanpa bioflok dibandingkan terhadap tiga diet eksperimental diformulasikan dengan tingkat bergradasi bioflok pada 4 (B4), 8 (B8) dan 12% (B12) dengan memanipulasi makan kacang kedelai dan gandum tingkat tepung. Semua bahan kecuali bubuk bioflok, kolesterol, terbutilasi hydroxytoluene (BHT), minyak dan vitamin-mineralmixture dicampur dengan air untuk membuat adonan. Adonan itu uap dimasak selama 20 menit di pressure cooker pada 15 psi. Bioflocs dan aditif lainnya dicampur setelah pendinginan dan adonan ditekan melalui pelet dengan 2 mm mati dan kemudian dikeringkan pada 60 ° C sampai tingkat kelembaban yang diinginkan (b10%) tercapai. Pakan yang disimpan pada suhu 4 ° C sampai digunakan.

2.5. Sistem eksperimental dan makan Remaja yang sehat P. monodon diuji negatif syndromevirus tempat forwhite diperoleh dari tambak udang (South 24 Parganas, Bengal Barat, India). Shrimpswere diaklimatisasi selama 14 hari dan fedwith diet komersial (40% protein kasar) tiga kali sehari sebelum awal percobaan. The experimentwas dilakukan dalam rangkap tiga di tangki FRP (1000 L; bawah area 2 m2) diisi dengan klorin bebas payau. Dua ratus Fifty Two P. remaja monodon (2,9 ± 0,10 g) secara acak didistribusikan dalam empat kelompok eksperimental di 21 nos. -tank 1 mengikuti rancangan acak lengkap (RAL).

The pakan harian dilakukan pada 6,5% dari berat badan pada awal percobaan dan menurun secara bertahap menjadi 4,5% dari berat badan pada akhir percobaan. Ransum harian dibagi dalam dua bagian, 40% pakan diberikan dalam

themorning dan 60% di malam hari. Jumlah yang sama pakan diumpankan ke udang di semua tank eksperimental, dua kali sehari pukul 10.00 dan 18.00 jam untuk 60 hari. Tersisa pakan dan kotoran telah dihapus setiap hari dan 25% air yang dipertukarkan setiap 3 hari.

2.6. Komposisi proksimat bioflok dan diet eksperimental Komposisi proksimat dari bioflok dan diet eksperimental ditentukan mengikuti metode standar AOAC (1995). Themoisture contentwas ditentukan dengan pengeringan pada 105 ° C sampai berat konstan, dan perbedaan berat sampel menunjukkan kadar air. Proteinwas mentah diperkirakan dengan metode Kjeldahl (Kelplus, peralatan Pelican, India). Lemak kasar ditentukan dengan metode ekstraksi pelarut dengan sistem Soxtec (sistem Soxtec, SCS-6, peralatan Pelican, India) menggunakan dietil eter (titik didih, 40-60 ° C) sebagai pelarut. Kadar abu ditentukan dengan membakar sampel dalam tungku meredam pada 600 ° C selama 6 jam. Serat kasar ditentukan berdasarkan berat badan pada pengapian dari oven kering residu yang tersisa setelah pencernaan berurutan dari sampel dengan H2SO4 dan NaOH solusi menggunakan Fibretec (Foss Tecator 2022, Swedia). Energi bruto ditentukan sesuai N.R.C. (1993). Jumlah nitrogen bebas ekstrak (NFE) ditentukan sesuai formula yang dijelaskan di Hastings dan Dupree (1969). NFE% ð Þ ¼ 100 - protein mentah þ ð Ether ekstrak þ þ Ash Fiber þMoistureÞ Gross energi Kcal 100-1 g ? ? ¼ Protein ð% Þ? 05:06 þ Lipid ð% Þ? 09:44 þ Serat kasar ð% Þ? 04:01 þ NFE ð% Þ? 04:01

2.7. Profil asam lemak dari bioflok Jumlah lipid diekstraksi dari sampel bioflok menurut Folch et al. (1957). Fatty metil ester asam disusun berdasarkan prosedur yang diberikan dalam AOAC (1995). Secara singkat, ekstrak lipid direbus dalam kondensor dengan 2 mL metanol NaOH untuk 5 menit pertama diikuti oleh 2ml BF3-metanol untuk 2 menit berikutnya. Untuk memulihkan metil ester asam lemak (FAME) dalam fase organik, 5 mL heptana ditambahkan dan dipanaskan selama 8 menit, dan dicuci dengan larutan NaCl jenuh menjadi corong pisah. The layerwas FAME atas disimpan dalam botol kaca pada 0 ° C untuk analisis lebih lanjut dalam GC-MS.

Asam lemak alkohol dipisahkan dengan menggunakan GC-MS (QP2010, Shimadzu, USA) yang dilengkapi dengan DB Wax (30 m × 0.25mm diameter × 0,25 pM ketebalan film) kolom kapiler (Cromlab SA, Spanyol). Helium digunakan sebagai gas pembawa. Injector dan detektor suhu yang diatur pada 250 ° C. Injeksi dilakukan dalam mode split (1:15) dengan volume injeksi 1 ml FAME. Temperatur kolom awal wasmaintained pada suhu 50 ° C selama 2 menit. Suhu ini akan meningkat pada tingkat 10 ° C per menit sampai suhu akhir mencapai 230 ° C dan disimpan untuk 35 min. Fatty metil ester asam dipisahkan pada tekanan konstan dari 82,5 KPa. Peakswere diidentifikasi dengan membandingkan spektrum massa dengan massa spektral data base.

2.8. Penentuan parameter kualitas air Thewater parameter kualitas seperti salinitas, suhu dan pHwere diukur dengan menggunakan refraktometer ATAGO tangan, termometer dan pH meter masing-masing. Alkalinitas total, kekeruhan, oksigen terlarut, amoniak total-N (TAN), nitrit-N (NO2N) dan nitrat-N (NO3N) dianalisis segera setelah pengumpulan sampel mengikuti prosedur yang dijelaskan dalam APHA (1998). Volume bioflok dalam tangki produksi ditentukan dengan sampling 1.000 mL air menjadi serangkaian Imhoff kerucut. Volume plug flok menumpuk di bagian bawah kerucut ditentukan (Avnimelech dan Kochba 2009).

2.9. Kinerja pertumbuhan Pertumbuhan kinerja dinilai dalam hal persentase kenaikan berat badan, laju pertumbuhan spesifik (SGR), rasio konversi pakan (FCR), rasio efisiensi protein (PER) dan kelangsungan hidup dengan menggunakan rumus berikut; Berat badan ð% Þ ¼ ðFinal berat berat awal = Initial weightÞ? SGR ð% Þ ¼ ðLoge akhir berat awal bobot 100-Loge = Experimental daysÞ ? 100 FCR ¼ Pakan diterapkan = berat badan Tubuh PER ¼ berat badan bersih = Protein dalam pakan yang diterapkan Kesintasan ¼ ðTotal udang selamat = Total jumlah udang stockedÞ? 100

2.10. Analisis enzim pencernaan Setelah selesai makan percobaan, 18 inter-meranggas udang dari masing-masing kelompok perlakuan (6 dari masing-masing ulangan) dikorbankan untuk analisis enzim pencernaan. Tahap meranggas ditentukan oleh perkembangan setal dari uropod menggunakan stereo (Dall et al., 1990). Sampel dikumpulkan 1 jam setelah makan terakhir untuk

menjamin aktivitas maksimum enzim pencernaan. Hepatopankreas dan usus udang yang dibedah keluar, ditimbang dan homogen dengan 0,25 M sukrosa dingin secara basah (pH 7, 1:10 w / v) dalam Homogenizer kaca genggam es didinginkan kondisi. The homogenatewas disentrifugasi pada 6000 rpm (2400 × g) selama 20 menit pada suhu 4 ° C (Centrifuge 5417R, Eppendorf, Jerman). Setelah sentrifugasi, lapisan lipid atas mengambang dihapus dan larutan supernatan dibagi sebagai aliquot dalam 1,5 mL tabung Eppendorf. Sampel disimpan pada -40 ° C sampai analisis.

Jumlah protein larut homogenat diukur dengan menggunakan Folin-fenol reagen (Lowry et al., 1951). Aktivitas amilase diukur dengan asam 3,5-dinitrosalisilat (DNS) metode (Rick dan Stegbauer, 1974). Campuran reaksi terdiri 0,1 mL 1% (b / v) larutan kanji sebagai substrat, 1,8 mL dapar fosfat (0,1 M, pH 7) dan 0,1 mL jaringan homogenat. Campuran diinkubasi pada suhu 37 ° C selama 30 menit. Reaksi dihentikan dengan menambahkan 2 mL reagen DNS, dan disimpan dalam bak air mendidih selama 5 menit. Campuran reaksi diencerkan dengan air suling dan dicatat absorbansi pada 540 nm. Aktifitas ditentukan dari kurva standar maltosa dan dinyatakan sebagai mol maltosa dilepaskan dari pati mg-1 protein min-1 pada 37 ° C.

Aktivitas selulase ditentukan berdasarkan Miller (1959). Campuran reaksi terdiri 0,5 mL dari 1% karboksimetil selulosa (CMC) sebagai substrat dalam 1 mL dapar fosfat (0,1 M, pH 6,8) dengan 0,5 mL jaringan homogenat. Campuran reaksi diinkubasi pada suhu 37 ° C selama 1 jam. Reaksi dihentikan dengan menambahkan 3 ml reagen DNS dan campuran disimpan dalam bak air mendidih selama 10 menit. Campuran reaksi diencerkan dengan air suling dan absorbansi tercatat sebesar 574 nm. Satu unit aktivitas selulase didefinisikan sebagai jumlah molekul glukosa dilepaskan dari selulosa mg-1 protein min-1 pada 37 ° C. Aktivitas protease ditentukan dengan metode pencernaan kasein dari Drapeau (1976). Campuran reaksi terdiri dari 2,5 mL 1% (b / v) kasein disiapkan dalam 0,01 N NaOH, 0,05 M dapar tris fosfat (pH 7,8) dan 0,1 mLtissue homogenat. The mixturewas reaksi diinkubasi pada suhu 37 ° C selama 15 menit. Reaksi dihentikan dengan menambahkan 2.5ml, 10% asam trikloroasetat (TCA) dan seluruh isi yang disaring. Reagen wasmade kosong dengan menambahkan homogenat jaringan sebelum menghentikan reaksi andwithout inkubasi. The absorbancewas direkam pada 280 nm. Aktivitas protease ditentukan dari kurva standar tirosin dan dinyatakan sebagai micromole tirosin dirilis mg-1 protein min-1 pada 37 ° C. Aktivitas lipase ditentukan berdasarkan Cherry dan Crandall (1932). Reactionmixture terdiri dari distilledwater, homogenat jaringan, penyangga fosfat (0,1 M, pH 7) dan emulsi minyak zaitun sebagai substrat dan diinkubasi pada 27 ° C selama 24 jam. Kemudian 95% alkohol dan dua tetes indikator fenolftalein ditambahkan, dan dititrasi terhadap 0,05 N NaOH sampai munculnya warna pink permanen. Sebuah kontrol dengan sumber enzim tidak aktif dengan menjaga selama 15 menit dalam air mendidih mandi sebelum penambahan penyangga dan emulsi minyak zaitun. The Miliekuivalen alkali yang dikonsumsi diambil sebagai aktivitas lipase.

2.11. Analisis statistik Data dianalisis secara statistik dengan paket statistik SPSS versi 17.0 (SPSS Inc, Chicago, IL, USA). Sebelum semua analisis data dianalisis normalitas dengan plot probabilitas dan homogenitas varians dengan uji Levene. Salah satu cara ANOVA digunakan untuk menentukan signifikansi dari masing-masing parameter antara perlakuan yang berbeda. Jika efek utama adalah signifikan, ANOVA diikuti dengan uji Tukey. Tingkat signifikansi dibuat pada tingkat probabilitas 99 dan 95%.

3 . hasil3.1 . Komposisi mikroba bioflokJumlah heterotrofik , Vibrio , Bacillus , Lactobacillus dan jumlah jamur ( cfu mL - 1 ) selama siklus produksi bioflok diberikan dalam Tabel 2 . Jumlah total heterotrofik meningkat dari 0,23 ± ,06-245,67 ± 61.32 × 108 cfu mL - 1 selama siklus produksi bioflok . Genera mikroba utama melihat di bioflok dipanen adalah Vibrio , Lactobacillus , Bacillus dan jamur . Bioflok yang dipanen mengandung 240,83 ± 47,00 × 104 cfu mL - 1 Vibrio , 345.00 ± 37.75 × 104 cfu mL - 1 Bacillus dan 6,67 ± 1,67 × 101 cfu mL - 1 Lactobacillus . Pada rata-rata , 526,67 ± 44.10 × 102 cfu mL - 1 jamur yang melihat di bioflok dipanen .

3.2 . Komposisi proksimat bioflok dan diet eksperimentalJumlah hasil bioflok per siklus produksi adalah 178 g dan , tepung 4,03 ± 0,36 kg gandum digunakan untuk memproduksi 1 kg bioflocs . Komposisi proksimat ( % ) bioflok dan diet eksperimental disajikan dalam Tabel 3 dan 4 . Thedriedbiofloc terkandung 24.30 ± 0,28 % protein kasar , 3,53 ± 0,35 % lemak kasar dan 29,24 ± 0,64 % nitrogen free extract ( NFE ) . Mean kadar abu dan kadar abu tidak larut asam adalah 31,98 ± 1,01 dan 10,75 ± 1,06 % dari bioflok kering masing-masing. Diet eksperimen tidak menunjukkan perbedaan yang signifikan ( p 0,05 N ) dalam protein kasar , lemak , serat kasar dan ekstrak bebas nitrogen . Namun, kadar abu total adalah secara signifikan lebih tinggi ( 0,01 pb ) dalam diet eksperimental B8 dan B12 dibandingkan dengan kontrol ( B0 ) dan B4 . Kandungan protein kasar berkisar antara 37,77 ± 0,14-38,05 ± 0,29 % dalam diet eksperimental .

3.3 . Profil asam lemak dari bioflokProfil asam lemak dari bioflok dengan analisis GC - MS diberikan dalam Tabel 5 . Dari dua puluh asam lemak diidentifikasi dalam bioflok ini , asam palmitat ( 46,54 % ) , asam cis - Vaccenic ( 15,37 % ) , asam linoleat ( 10,67 % ) dan asam oleat ( 9,19 % ) adalah asam lemak berlimpah . Yang paling asam lemak poli -tak jenuh ( PUFA ) adalah asam linoleat ( 10,67 % ) dan α - linolenic acid ( 0,1 % ) . Namun, omega 3 asam lemak tak jenuh poli , asam eicosapentaenoic ( EPA ) dan docosahexaenoic acid ( DHA ) yang tidak terdeteksi dalam bioflok .

3.4 . parameter fisikaParameter kualitas air selama siklus produksi bioflok disajikan pada Tabel 6 . Tingkat oksigen terlarut berkurang dari 9,33 ppm pada awal menjadi 5,25 ppm pada hari ke-5 . Selama siklus produksi , amoniak total - N ( TAN ) penurunan tingkat 5,16-0,68 mg L - 1 pada hari bioflok panen . Tingkat penurunan TAN adalah 13,78 % per jam . Mean kekeruhan dan volume bioflok meningkat from9.00 ke 530.00 NTU dan 0,25-6,93 mL L-1 masing-masing, dari dana awal untuk hari ke-5 siklus produksi . Tidak ada perbedaan yang signifikan ( p N 0,05 ) antar perlakuan diamati pada parameter kualitas air selama periode percobaan ( Tabel 7 ) .

3.5 . kinerja pertumbuhanKinerja pertumbuhan P. monodon remaja selama periode waktu disajikan pada Tabel 8 . Berat badan akhir antara perlakuan berbeda secara signifikan dengan 16,9 dan 13,9 % secara signifikan lebih tinggi ( 0,01 pb ) berat badan akhir perhatikan di B8 dan B4 masing-masing , dibandingkan dengan kontrol . Namun, berat badan dari kelompok , B12 ( 5.65 ± 0.22 g ) tidak berbeda secara signifikan dengan kontrol , B0 ( 5,80 ± 0,12 g ) . Konversi pakan ( FCR ) , rasio efisiensi protein ( PER ) dan kelangsungan hidup menunjukkan perbedaan yang sangat signifikan antara perlakuan ( pb 0,01 ) . A FCR lebih baik , 1,84 ± 0,09 diamati pada B4 yang secara signifikan lebih rendah dari kontrol ( 2,81 ± 0,19 ) dan B12 ( 3,58 ± 0,14 ) . Demikian pula , PER secara signifikan lebih tinggi , 3,48 ± 0,17 terdaftar di B4 dibandingkan dengan 2,80 ± 0,13 dan 2,78 ± 0,18 di kontrol dan B12 masing-masing. Namun, tidak ada perbedaan yang signifikan dalam FCR dan PER diamati antara B4 dan B8 .

3.6 . enzim pencernaanAktivitas spesifik amilase di hepatopancreaswas 57,6 % secara signifikan lebih tinggi ( 0,01 pb ) inB4 control comparedwith (Gambar 1 ) sementara tidak ada perbedaan yang signifikan antara melihat B8 , B12 dan kontrol , B0 . Namun, aktivitas amilase usus tidak berbeda secara signifikan ( p N 0,05 ) antar perlakuan . Aktivitas selulase dalam hepatopancreas berbeda secara signifikan ( pb 0,01 ) dengan aktivitas spesifik tertinggi di B4 yang 45,5 dan 112,5 % secara signifikan lebih tinggi dibandingkan dengan B0 dan B12 masing-masing (Gambar 2 ) . Adapun usus , selulase tertinggi ( 0,05 pb ) aktivitas tercatat dalam B8 ( 0,05 ± 0,01 mg U - 1 protein ) dan aktivitas terendah dalam kontrol ( 0,02 ± 0,001 U mg - 1 protein ) . Gut aktivitas protease (Gambar 3 ) berbeda secara signifikan ( pb 0,05 ) dengan 141,6 , 78,6 , dan 54,9 % peningkatan B8 , B4 dan B12 masing-masing dibandingkan dengan B0 . Adapun hepatopancreas , 82,6 dan meningkat 54,4 % pada activitywas protease diamati dalam kontrol masing-masing comparedwith B4 dan B8 . Demikian pula , hepatopancreas aktivitas lipase menunjukkan 61,0 dan 28,1 % kenaikan B4 dan B8 masing-masing dibandingkan dengan kontrol (Gambar 4 ) .

4 . diskusiPeran menguntungkan in situ berbasis sistem bioflok dalam budidaya udang penaeid didokumentasikan dengan baik ( Hari et al , 2006; . Xu dan Pan , 2012) . Baru-baru ini , telah dilaporkan bahwa penggunaan bioflok sebagai bahan makanan dalam diet udang meningkatkan laju pertumbuhan L. vannamei ( Kuhn et al . , 2009, 2010 ) . Penelitian ini menggambarkan peran bioflok sebagai suplemen makanan pada kinerja pertumbuhan dan aktivitas enzim pencernaan di P. monodon .

Dalam penelitian ini , C : N ratio dipertahankan pada 10:1 untuk efisien mengkonversi nitrogen anorganik menjadi protein mikroba ( Avnimelech , 1999 ) . Tepung terigu digunakan sebagai sumber karbohidrat untuk ketersediaan dan produksi kualitas flok yang baik yang mudah ( Azim dan Little , 2008; Ballester et al , 2010. ) . Dalam percobaan ini , tepung 4,03 ± 0,36 kg gandum digunakan untuk memproduksi 1 kg flocs mikroba . Sebelumnya, Kuhn et al . (2009) melaporkan produksi 1 flocs kgmicrobial dari 1,5 kg sukrosa dalam bioreaktor . Thismay karena menjadi disakarida , sukrosa sudah tersedia untuk pemanfaatan mikroba , sedangkan tepung terigu memiliki kompleks polisakarida rantai panjang . Meskipun , bioreaktor memiliki efisiensi konversi yang lebih baik , sistem produksi saat ini adalah sederhana dan menguntungkan karena digunakan murah dan tersedia amonium sulfat sebagai sumber nitrogen dan tepung terigu sebagai sumber karbon .

Jumlah komunitas mikroba dalam sistem produksi bioflok mencapai kepadatan 108 cfu mL - 1 dan sesuai dengan temuan sebelumnya ( Burford et al . , 2003 ) . Komunitas mikroba utama yang dikembangkan dalam bioflok milik Vibrionaceae , Bacillus sp . , Dan Lactobacillus sp . dengan mayoritas bakteri gram negatif . Agregat dari bahan organik partikulat , komunitas zooplankton seperti ciliates , rotifera dan sejumlah kecil mikroalga autotrophic juga melihat . Demikian pula , Ballester et al . ( 2010 ) melaporkan bahwa bioflok terdiri dari melekat bakteri heterotrofik , cyanobacteria berserabut , dinoflagellates , ciliates , flagelata dan rotifera . Berbagai faktor seperti salinitas , cahaya dan jenis budaya systemaffects komposisi themicrobial flok . Sebagai contoh, Ju et al . ( 2008a ) melaporkan dominasi komunitas alga atas biomassa bakteri dalam flocs dikumpulkan dari luar unit budidaya udang . Dominasi lebih rendah dari masyarakat autotrophic melihat dalam penelitian ini mungkin karena kurangnya sinar matahari langsung di fasilitas produksi dalam ruangan bioflok . Kehadiran beragam kelompok bakteri terutama , Bacillus sp . dan Lactobacillus sp . menunjukkan bahwa bioflok dapat dianggap sebagai sumber probiotik potensial.

Analisis proksimat dari bioflok dalam penelitian ini adalah sesuai dengan temuan Ballester et al . ( 2010 ) yang melaporkan 30,4 % protein kasar ( CP ) dengan tepung terigu dan molasses sebagai sumber karbohidrat . Komposisi nutrisi bioflok bervariasi dengan jenis sumber karbohidrat , struktur komunitas mikroba , kondisi budaya dll Misalnya , kepiting et al . ( 2010 ) mengamati bahwa bioflok dikembangkan fromglycerol diinokulasi dengan Bacillus mengandung protein lebih tinggi ( 58 % CP ) dari bioflok dikembangkan fromglycerol , asetat ( 42-43 % CP ) dan glukosa ( 28 % CP ) . Tingkat yang lebih rendah protein kasar melihat dalam bioflok dipanen dibandingkan dengan temuan sebelumnya ( Crab et al , 2010 ; . . Ekasari et al , 2010 ) mungkin karena perbedaan dalam bakteri mengambil bagian dalam pembentukan flok ( Rittmann dan McCarty , 2001 ) . Misalnya, substrat seperti asetat dan gliserol yang digunakan dalam penelitian sebelumnya ( kepiting et al . , 2010) mungkin telah dipromosikan bakteri yang terlibat dalam pertumbuhan sel dan meningkatkan kandungan protein dalam bioflok sedangkan tepung terigu mungkin telah dipromosikan bakteri yang menghasilkan sejumlah besar exopolysaccharides . Ju et al . ( 2008a ) melaporkan bahwa klorofil yang didominasi bioflok terdapat kandungan protein kasar yang lebih tinggi ( 42 % ) dibandingkan flocs didominasi oleh diatom ( 26-34 % ) dan bakteri ( 38 % ) . Hal ini semakin menunjukkan bahwa mikrobiota yang merupakan bioflok cenderung mempengaruhi kandungan protein dari bioflocs .

Dalam jaring makanan mikroba , mikroalga dan zooplankton merupakan sumber kaya lipid dibandingkan dengan bakteri ( Zhukova dan Kharlamenko , 1999 ) . Dari 20 asam lemak terdeteksi dalam bioflok , asam palmitat , asam cis - vaccenic , asam linoleat dan asam oleat merupakan asam lemak yang dominan , dan asam lemak omega 3 yang terdeteksi di tingkat jejak . Hal ini consonancewith temuan kepiting et al . ( 2010 ) yang melaporkan bahwa bioflok mengandung asam palmitat , asam palmitoleat dan asam linoleat dalam tertinggi dan omega 3 asam lemak dalam tingkat jejak . Tingkat yang lebih rendah dari PUFA di bioflok mungkin karena dominasi bakteri heterotrofik dibandingkan dengan PUFA komunitas mikroalga kaya ( Meyers dan Latscha , 1997) .

Pencantuman bioflok sebagai bahan makanan dalam diet udang ditemukan untuk meningkatkan kinerja pertumbuhan L. vannamei ( Ju et al , 2008b ; . . Kuhn et al , 2009, 2010 ) . Dalam penelitian ini , suplementasi diet bioflok pada 4 dan 8 % tingkat signifikan meningkatkan pertumbuhan , PER dan mengurangi FCR di udang windu . Telah didokumentasikan bahwa bioflocs adalah sumber yang kaya banyak senyawa bioaktif seperti karotenoid , klorofil , pitosterol , bromophenols , gula amino ( Ju et al . , 2008a ) dan senyawa anti - bakteri ( kepiting et al . , 2010). Hal ini menunjukkan bahwa komponen mikroba , faktor pertumbuhan yang tidak dikenal atau mikroorganisme probiotik seperti Bacillus , Lactobacillus hadir dalam bioflok mungkin telah mengakibatkan tingkat pertumbuhan secara signifikan lebih tinggi dan lebih baik FCR udang makan dengan bioflok dimasukkan diet .

Komposisi biokimia dari diet memainkan peran penting dalam profil enzim pencernaan udang ( Gamboa - Delgado et al . , 2003). Dalam penelitian ini , suplementasi diet bioflok meningkat secara signifikan ( 0,05 pb ) aktivitas spesifik enzim pencernaan seperti amilase , selulase , protease dan lipase pada kelompok perlakuan dibandingkan dengan kontrol . Peningkatan aktivitas enzim pencernaan di B4 dan B8 mungkin telah meningkatkan pencernaan dan penyerapan nutrisi yang mungkin telah berkontribusi secara signifikan lebih tinggi ( 0,05 pb ) tingkat pertumbuhan kelompok perlakuan tersebut . Sebuah studi sebelumnya oleh Xu dan Pan ( 2012) dalam sistem bioflok berbasis , melaporkan aktivitas enzim pencernaan secara signifikan lebih tinggi dan kinerja pertumbuhan yang lebih baik di L. vannamei . Demikian pula , peningkatan tingkat enzim pencernaan aktivitas telah dilaporkan pada ikan dan udang yang diberi pakan dengan probiotik , mikroalga dan perifiton diet ditambah ( Anand et al , 2013b ; . . Lara - Flores et al , 2003; . Ziaei - Nejad et al , 2006) .

Kehadiran komponen mikroba dalam bioflok diet suplemen mungkin telah merangsang produksi enzim endogen oleh hepatopancreas udang dibandingkan dengan kontrol . Dalam penelitian ini , suplementasi bioflok pada tingkat 12 %

( B12 ) tidak menghasilkan peningkatan proporsional dalam tingkat pertumbuhan atau perbaikan FCR control comparedwith . Selanjutnya , kegiatan enzim pencernaan di B12 tidak signifikan lebih tinggi daripada kelompok perlakuan lainnya . Sebelumnya, Kuhn et al . ( 2010 ) menggantikan tepung ikan oleh bioflok di L. vannamei diet dan mencatat tingkat pertumbuhan secara signifikan lebih tinggi pada 10 dan 15 % , dan perbedaan yang tidak signifikan pada 21 dan 30 % tingkat inklusi diet bioflok . Temuan ini setuju secara umum dengan orang-orang dari Wang ( 2007) dan ( 2013b ) yang melaporkan bahwa peningkatan suplementasi diet ganggang probiotik atau perifiton di shrimpdiet tidak penaikan hasil enzymeactivities pencernaan dan pertumbuhan shrimp.Moreover , pengurangan Anand et al . dalam tingkat pertumbuhan ikan tercatat pada tingkat yang lebih tinggi dari suplementasi mikroba ( Ajiboye et al , 2012; . Kiessling dan Askbrandit , 1993) sebagai produk mikroba pada tingkat yang lebih tinggi cenderung mengurangi palatabilitas pakan dan daya cerna ( Kiessling dan Askbrandit , 1993) . Semakin tinggi tingkat abu dicatat dalam diet B12 dibandingkan dengan semua kelompok lain juga mungkin mempengaruhi kinerja kecernaan dan pertumbuhan udang . Namun, kinerja pertumbuhan B12was sebanding dengan mengontrol menunjukkan bahwa suplementasi diet tingkat yang lebih tinggi dari bioflok tidak memiliki efek retardasi pertumbuhan juvenil udang . Melihat efektivitas biaya , dimasukkannya bioflok pada level 4 % yang bermanfaat dalam meningkatkan kinerja pertumbuhan dan aktivitas enzim pencernaan udang .

5. kesimpulanStudi ini menunjukkan bahwa suplementasi diet bioflok pada tingkat 4-8% memiliki efek menguntungkan pada kinerja pertumbuhan dan aktivitas enzim pencernaan di P. monodon. Metode saat ini produksi bioflok menggunakan ammoniumsulphate tepung andwheat nitrogen sebagai sumber karbon lebih murah dan lebih mudah dibandingkan dengan bioreaktor. Temuan ini dapat mendorong feedmanufacturers untuk mempertimbangkan bioflok sebagai suplemen makanan alternatif. Penelitian selanjutnya diperlukan untuk menentukan amino

Teknologi bioflok adalah teknologi yang memanfaatkan hasil metabolisme ikan atau udang yang mengandung nitrogen untuk diubah menjadi protein yang dapat dimanfaatkan oleh ikan atau udang, sehingga ikan atau udang tersebut memperoleh protein tambahan dari bioflok disamping pakan yang diberikan. Akumulasi dari limbah nitrogen (NH4, NO2) akan dicegah oleh bioflok dengan cara menjaga C/N Rasio tetap tinggi dan mendorong penyerapan ammonium oleh mikroba. Hasil dari proses tersebut maka akan membentuk suatu komunitas mikro (bakteri, protozoa, detritus (dead body cell), jamur dan zooplankton) juga partikel serat organik yang kaya akan selulosa, partikel anorganik berupa kristal garam kalsium karbonat hidrat, biopolymer dan PHA.Sistem kerja dari bioflok adalah mengubah senyawa organik dan anorganik yang mengandung senyawa kabon (C), hidrogen (H), Oksigen (O), Nitrogen (N) dan sedikit unsur fosfor (P) menjadi gumpalan berupa bioflok dengan menggunakan bakteri pembentuk flok yang mensintesis biopolimer poli hidroksi alkanoat sebagai ikatan bioflok. Bakteri pembentuk flok dipilih dari genera bakteri yang non pathogen, memiliki kemampuan mensintesis Polihidroksi alkanoat (PHA), memproduksi enzim ekstraselular, memproduksi bakteriosin terhadap bakteri pathogen, mengeluarkan metabolit sekunder yang menekan pertumbuhan dan menetralkan toksin dari plankton merugikan dan mudah dibiakkan di lapangan.Manfaat penggunaan teknologi bioflok apabila diaplikasikan dengan tepat adalah minimnya pergantian air atau bahkan tidak ada pergantian air dalam sistem budidaya sehingga teknologi ini ramah lingkungan. Pakan yang digunakan pun menjadi lebih sedikit ketimbang sistem konvensional lain.Telah dicoba uktuk ikan nila yang dipelihara dalam sistem bioflok akan tumbuh optimum pada tingkat pemberian pakan 1,5% dengan pakan yang mengandung 35% protein.