pengaruh daun ketapang

7/18/2019 PENGARUH DAUN KETAPANG

http://slidepdf.com/reader/full/pengaruh-daun-ketapang 1/28

1

BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Hepar merupakan organ terbesar pada tubuh yang berfungsi sebagai

pembentukan empedu, pembentukan faktor koagulasi dan pusat

metabolisme karbohidrat, protein, lemak, hormon dan zat kimia (Guyton

and Hall, 2007). Sebagai pusat metabolisme di tubuh, hepar rentan sekali

untuk terpapar zat kimia yang bersifat toksik sehingga menimbulkan

kerusakan hepar. at kimia dapat berupa senya!a " senya!a obat yang luas

digunakan di masyarakat. Salah satu #ontoh obat yang dapat menimbulkan

kerusakan hepar adalah parasetamol.

$arasetamol bersifat tidak toksik %ika digunakan dalam dosis terapi,

tetapi dalam dosis yang berlebihan dan %angka pan%ang akan menimbulkan

nekrosis hati. &etabolisme parasetamol di hati menghasilkan metabolit

reaktif N-asetil-p-benzokuinonimina (' $ *) yang menimbulkan

kerusakan sel hati. +elainan yang ter%adi pada hati dapat dilihat dari

meningkatnya kadar serum glutamate piruvat transaminase (SG$ ) dan

serum glutamate oksaloasetat transaminase (SG- ). 'ekrosis hati ter%adi

karena interaksi radikal bebas hasil metabolisme obat dan metabolisme

tubuh dengan biomolekul penyusun membran sel hati. *nteraksi radikal

bebas ini menyebabkan perubahan dan merusak membrane sel

( nonim,20 2). +erusakan sel hati menyebabkan meningkatnya lipid



2

peroksida darah karena lipid peroksida tubuh tidak dapat lagi didetoksifikasi

dalam hati.

*ndonesia merupakan negara tropis yang penuh dengan

keanekaragaman hayati, antaralain berbagai %enis tumbuhan yang disebut

sebagai tanaman obat tradisional. /alaupun industri obat modern tumbuh

dengan pesat, namun konsumen obat tradisional tetap terus meningkat.

&enanggapi ke#enderungan masyarakat tersebut, perlu dilakukan penelitian

tentang manfaat dari setiap tanaman obat tradisional sehingga

penggunaannya tetap dapat dipertanggung%a!abkan se#ara medik.

anaman obat tradisional merupakan salah satu modal dasar

pembangunan kesehatan nasional. i *ndonesia disamping pelayanan

kesehatan formal, pengobatan dengan #ara tradisional dan pemakaian obat

tradisional masih banyak dilakukan oleh masyarakat se#ara luas, baik di

daerah pedesaan maupun daerah perkotaan (Hargono, 1 3).

i *ndonesia, penelitian mengenai tanaman obat yang sering

digunakan oleh masyarakat sebagai obat untuk gangguan hepar telah banyak

dilakukan. &isalnya, penelitian yang dilakukan oleh Hardian (200 )

terhadap ekstrak sapogenin akar kuning ( Arcangelisia flava ) dapat

men#egah kerusakan hati men#it yang diinduksi parasetamol. $enelitian

malia (200 ) membuktikan daun #eplukan ( Physalis angulata 4.)

memiliki akti5itas hepatoprotektor terhadap hati men#it %antan yang

terinduksi parasetamol. 6atubara (200 ) dan d%i (2008) berhasil

membuktikan akti5itas ekstrak saponin akar kuning sebagai hepatoprotektor.

1



3

$an%aitan (200 ) mengu%i akti5itas hepatoprotektor ekstrak akar pasak bumi.

Sulistiyani et al (2008) membuktikan akti5itas hepatoproteksi ekstrak buah

mahkota de!a terhadap kerusakan hati tikus yang diinduksi parasetamol.

6eberapa zat aktif yang telah berhasil diisolasi dan terbukti memiliki

akti5itas hepatoprotektor adalah kurkumin dari rimpang temula!ak

(Curcuma xanthorrhizol ) dan kunyit ( Curcuma domestica ). Selain itu,

filantin dari herba meniran ( Phylanthus spp ), silymarin dari bi%i !iduran

(Silybum marianum ), aukobosida dari herba daun sendok ( Plantago mayor ),

minyak atsiri dari ba!ang putih ( Allium sativum ), gingerol dari rimpang

%ahe ( Zingiber officinalis ), !edelolakton dari herba urang9aring ( clipta

alba ), serta andrografolid dari herba sambiloto ( Andrographis paniculata )

%uga telah berhasil diisolasi ( alimartha, 200:). ilihat dari strukturnya,

senya!a yang bersifat hepatoprotektor meliputi senya!a golongan fenil

propanoid, kumarin, lignan, minyak atsiri, terpenoid, saponin, fla5onoid,

alkaloid, dan ;antin ($atri#k, 111).

$enelitian ini bertu%uan mengka%i khasiat hepatoprotektor ekstrak

daun ketapang pada tikus putih !istar yang dirusak fungsi hatinya

menggunakan parasetamol. nalisis dilakukan pada nilai SG- dan SG$

sebagai parameter untuk menge5aluasi fungsi hati.

1.2 Rumusan Permasalahan



5

1.1 T#njauan Tentang Keta(ang1.1.1 Klas#"#kas# Keta(ang

+etapang adalah nama se%enis pohon tepi pantai yang rindang.

4ekas tumbuh dan membentuk tan%uk indah bertingkat9tingkat,

ketapang kerap di%adikan pohon peneduh di taman9taman dan tepi

%alan. alam bahasa inggris tumbuhan ini dikenal dengan nama9

nama 6engal almond, *ndian almond, ropi#al almond, dan lain9lain

+lasifikasi+ingdom

Subkingdo

m

i5isio

Sub

i5isio

>lassis

Sub

>lassis

-rdo

?amilia

Genus

Spe#ies

< $lantae ( umbuhan)

< ra#heobionta ( umbuhan berpembuluh)

< Spermatophyta (&enghasilkan bi%i)

< &agnoliophyta ( umbuhan berbunga)

< &agnoliopsida (6erkeping dua@dikotil)

< Aosidae

< &yrtales

< >ombreta#eae

< "erminalia

< "erminalia catappa #$

6



6

Gambar. 2. . aun +etapang

aun ketapang %uga sering digunakan oleh peternak ikan hias

dalam pembiakan ikan, karena mempunyai khasiat sebagai

antibakteri. eh dari daun ketapang diper#aya berkhasiat sebagai

obat kolestrol, diabetes, dan hipertensi. aun ketapang yang telah

%atuh digunakan untuk mengobati penyakit li5er. i Suriname, teh

yang dibuat dari daun ketapang digunakan untuk mengobati disentri

dan diare (Hargono, 1 3).

1.1.2 Kan)ungan k#m#a

aun ketapang mengandung alkaloid, fla5onoid seperti

&uercetin dan kemferol, steroid@triterpenoid, terpenoid, tannin

katekat, tanin galat, asam palmitat, asam linolenat, dan asam stearat,

fitol, 9nonadekena, asam ursolat, asam asiatat, kuinolin, saponin,

dan asam tanat ($erti!i, 20 ).

i ai!an, penggunaan komponen tanaman ketapang

digunakan sebagai ramuan untuk mengobati penyakit hati. aun

ketapang %uga disinyalir mempunyai zat antikarsiogenik. Selain itu



7

%uga berkhasiat sebagai anti#lastogeni# (seperti antioksidan dalam

men#egah proses pe#ahnya kromosom) (Bka!ati, 200 ).

1.2 T#njauan Tentang Hat#1.2.1 Anat*m# Hat#

Salah satu organ yang sering menderita karena adanya zat9zat

toksik adalah hati. Hati merupakan organ tubuh yang besar,

kompleks dan terdapat di dalam rongga perut kanan atas, tepat

diba!ah diafragma kanan dan dilindungi tulang iga kanan ba!ah

serta diselubungi oleh peritoneum. -rgan ini ber!arna #oklat tua dan

berbobot antara .2009 .300 gram atau 2.:C dari bobot total orang

de!asa. Hati terbagi men%adi dua bagian dan bagian kanan besarnya

enam kali bagian kirinya (Ganong, 200 ).

hepatika dan saluran empedu akan bergabung dalam satu

daerah 5ena porta (segitiga +iernaan). Bmpedu akan disalurkan dari

hati ke duodenum melalui saluran empedu intrahepatik dan

ekstrahepatik. i dalam hati %uga ditemukan banyak sel9sel ABS

(Aeti#ulo Bndothelial System), yakni sel9sel +upffer yang terdapat

dalam dinding9dinding kapiler dan sinusoid sinusoid hati, berfungsi

untuk membersihkan benda9benda asing dari darah (fagositik)

(Ganong, 200 )

.2.2 +#s#*l*g#?ungsi hati adalah mendetoksifikasi produk buangan

metabolisme, merusak sel darah merah tua, sintesis dan sekresi



8

lipoprotein plasma serta mempunyai fungsi metabolisme (sintesis

glikogen, glukoneogenesis, menyimpan glikogen, beberapa 5itamin

dan lipid) (6urkitt et al. 11:).

Hati %uga mempunyai fungsi dalam mengatur kadar glukosa

dalam darah. &akanan berupa glukosa akan diabsorbsi di usus,

kemudian diteruskan ke hati melalui 5ena portal. Sebagian dari

glikogen yang disimpan akan dipe#ah dalam hati men%adi glukosa.

alam keadaan normal kadar glikogen dalam hati #ukup untuk

mempertahankan kadar glukosa darah. Dika ter%adi gangguan hati,

dapat menyebabkan ter%adinya hiperglikemia atau hipoglikemia

(Ganis!ara, 11:).

liran darah masuk ke hati melalui dua sumber. 6agian

terbesar darah masuk melalui 5ena porta sedangkan aliran darah

yang lain melalui arteri hepatika arah balik seluruhnya dialirkan

keluar hati melalui 5ena hepatika yang masuk ke dalam 5ena #a5a

#audalis. +eistime!aan hati ialah karena sirkulasinya berlainan dari

alat tubuh lain. arah yang mengalir didalamnya terdiri dari 2@

darah balik dan @ darah nadi (Aessang, 1 8). Eena porta dan

arteri hepatika merupakan pembuluh darah dari usus yang memba!a

nutrisi dan zat9zat lain yang diserap oleh usus. 'utrisi yang sampai

di hati melalui aliran darah portal diolah dan keluar sebagai bahan

baru dalam aliran darah (Hartono, 112).



9

Selain nutrisi, turut masuk berbagai bakteri, darah merah yang

sudah tua dan toksin yang harus diolah, dihan#urkan atau mungkin

%uga disimpan. Sebanyak 7:9 0C darah pada organ hati berasal dari

5ena porta sedangkan dari arteri hepatika mengalir sekitar 2092:C

darah yang kaya oksigen (4u, 11:).

1.3 T#njauan Tentang Parasetam*l1.3.1 Rumus K#m#a Parasetam*l

Salah satu obat yang bersifat hepatotoksik adalah parasetamol.

Senya!a ini merupakan turunan fenasetin. $arasetamol mempunyai

beberapa nama generik antara lain N-hidroksi asetanilida' N-asetil-

p-aminofenol dan asetaminofen . $arasetamol digunakan sebagai obat

analgesik dan antipiretik di seluruh dunia (Sumioka et al. 2008).

$arasetamol berbentuk serbuk kristal ber!arna putih, tidak

berbau, rasanya sedikit pahit, peka terhadap udara dan #ahaya serta

mempunyai pH :, 93,:, karena toksisitas dan daya antiinflamasinya

yang lemah men%adikan parasetamol sebagai alternatif aspirin.

$arasetamol relatif aman pada dosis terapi, !alaupun demikian

o5erdosis akut parasetamol dapat menyebabkan hepatotoksik,

kerusakan (nekrosis) sentrilobular hati yang fatal ( nonimus, 2003).

$enggunaan parasetamol didasarkan pada dugaan bah!a

fenasetin dalam tubuh akan dioksidasi men%adi senya!a

paraaminofenol. +emampuan parasetamol sebagai antipiretik

terdapat pada struktur aminobenzena senya!a ini. &enurut



10

Goodman et al.( 1 0), parasetamol adalah obat yang memiliki daya

analgesik dan antipiretik melalui mekanisme penghambatan

prostaglandin dalam tubuh (Susana, 1 7).

1.3.2 +armak*k#net#k Parasetam*l

$arasetamol dimetabolisme terutama oleh enzim9enzim

mikrosomal sel hati. i dalam saluran pen#ernaan, asetaminofen

dengan #epat diserap dan dalam !aktu 0 menit akan men#apai

konsentrasi pun#ak dalam plasma. $ada dosis yang menyebabkan

toksisitas akut, ikatan parasetamol terhadap protein plasma

ber5ariasi dari 209:0C. $ada dosis normal, 109 00C dari senya!a

obat ini mungkin akan dikeluarkan melalui urin. $engeluaran

senya!a obat ini ter%adi setelah mele!ati fase kon%ugasi dengan

asam glukoronat (sekitar 30C), asam sulfat ( :C) dan sistein ( C)

serta se%umlah ke#il metabolit dalam bentuk terhidroksilasi dan

terdeasetilasi ( nonimus, 2003).

6erdasarkan hasil penelitian /ilson dan Gilfod dalam Susana

1 7 menun%ukkan bah!a di dalam hati, parasetamol akan

mengalami biotransformasi melalui reaksi kon%ugasi dengan asam

glukoronat atau glutation dan hasilnya diekskresi melalui urin. Sisa

parasetamol mengalami biotransformasi dengan sistem sitokrom $9

8:0. Sitokrom $98:0, suatu sistem enzim di retikulum endoplasma

segera melakukan biotransformasi oksidatif pada :9 0C parasetamol

yang masuk ke dalam tubuh. $arasetamol yang teroksidasi berubah



11

men%adi '9asetil p9benzokuinon imin (' $ *), suatu senya!a yang

toksik dan reaktif (Susana, 1 7). Senya!a radikal ini dapat bereaksi

dengan molekul penyusun membran sel hati #ontohnya fosfolipid.

-ksidasi senya!a ini akan menghasilkan suatu radikal bebas yang

dapat mengoksidasi molekul fosfolipid lainnya sehingga ter%adi

reaksi oksidasi berantai. Aeaksi ini dapat menyebabkan berubahnya

komposisi membran sel hati. &enurut &anson, perubahan membran

sel menyebabkan kerusakan sel hati dan kemudian dapat

menimbulkan nekrosis hati (Susana, 1 7).

1.3.3 He(at*t*ks#k Parasetam*l terha)a( Hat#

Hepatotoksin adalah senya!a yang dapat menyebabkan

6erdasarkan mekanismenya terhadap perusakan hati,

hepatotoksin dibagi men%adi dua ma#am, yaitu hepatotoksin intrinsik

dan ekstrinsik. Hepatotoksin intrinsik merupakan hepatotoksin yang

dapat diprediksi, tergantung pada dosis dan melibatkan mayoritas

indi5idu yang menggunakan obat dalam %umlah tertentu. Aentang

!aktu antara mulainya dan timbulnya kerusakan hati sangat

ber5ariasi, dari beberapa %am sampai beberapa minggu. Salah satu

#ontohnya adalah parasetamol yang menyebabkan nekrosis hati yang

dapat diprediksi pada pemberian o5er dosis. Hepatotoksin ekstrinsik

atau idiosinkratik merupakan hepatotoksim yang tidak dapat



12

diprediksi. Hepatotoksin ini terkait dengan hipersensiti5itas atau

kelainan metabolisme (Gibson, 11 ).

$arasetamol atau N-asetil-p-aminofenol merupakan obat yang

berkhasiat analgetik antipiretik turunan para aminofenol.

$arasetamol bersifat aman %ika dikonsumsi pada dosis terapi,

sedangkan pada dosis tinggi dapat menyebabkan nekrosis pada hati

tikus, men#it, dan manusia. $arasetamol #epat diserap se#ara

sempurna oleh saluran pen#ernaan dan tersebar ke seluruh #airan

tubuh. 6iotransformasi parasetamol akan ter%adi di dalam hati.

Sebagian besar akan terkon%ugasi dengan asam glukoronat dan asam

sulfat, sedangkan sisanya akan dioksidasi oleh sistem $98:0

mikrosomal sehingga terbentuk metabolit N-asetil-p-benzokuinon

(' $+*). Senya!a ini merupakan bentuk peralihan yang bersifat

reaktif dan toksik, serta mudah bereaksi dengan membran sel protein

dan asam nukleat sehingga dapat merusak sel. $arasetamol

merupakan salah satu obat yang sering dikonsumsi oleh masyarakat,

dapat menyebabkan kerusakan hati %ika dikonsumsi 7.: " 0 gram

sekaligus, dan pada pemakaian : gram sekaligus akan

menyebabkan nekrosis atau kematian sel hati. osis parasetamol

untuk merusak hati tikus galur (istar adalah 7:0 mg@kg 66

(&urugesh et al$ 200:).

1. T#njauan Tentang T#kus Uj# ,*-a

1. .1 Karakter#st#k Umum T#kus Put#h Rattus s(./



13

ikus digolongkan ke dalam ordo Aodentia (he!an pengerat),

famili &uridae dari kelompok mamalia (he!an menyusui). -rdo

Aodentia merupakan ordo dari kelas mamalia yang terbesar yaitu

80C dari :000 spesies mamalia. ikus memiliki kemampuan

menyesuaikan diri yang baik dengan lingkungannya, baik saat #ua#a

dingin maupun panas. +lasifikasi tikus putih ( )attus norvegicus*

menurut &yers dan rmitage (2008) adalah sebagai berikut<

+ingdom < nimalia

$hylum < >hordata

+elas < &amalia

-rdo < Aodentia

Subordo < S#iurognathi

?amili < &uridae

Subfamili < &urinae

Genus < )attus

Spesies < )attus norvegicus

iga galur atau 5arietas tikus yang biasa digunakan sebagai

he!an per#obaan yaitu galur Sprague-+a(ley yang memiliki kepala

ke#il, ber!arna albino putih dan ekornya lebih pan%ang dari

badannya. Galur !istar memiliki telinga yang pan%ang, kepala yang

lebar, dan ekor yang tidak sama pan%ang seperti tubuhnya. Galur

#ong vans yang lebih ke#il dari tikus putih dan memiliki !arna

hitam pada kepala dan tubuh bagian depan (&alole dan $ramono



14

1 1). &enurut *nglis ( 1 0), galur yang sering digunakan untuk

penelitian yaitu Spra&ue-+a(ley' !istar' dan #ong- vans . Galur

Spra&ue-+a(ley berasal dari SpraFue9 aley, &adison, /is#onsin.

Galur !istar berasal dari *nstitut /istar di $ennysyl5ania. Galur

#ong- vans berukuran lebih ke#il dibandingkan galur Spra&ue-

+a(ley dan !istar .

esofagus bermuara ke dalam lambung dan tikus tidak

mempunyai kantung empedu. &enurut 6allenger (2002) !arna

umum dari )attus norvegicus yaitu abu9abu kehitaman atau #okelat,

dapat %uga ber!arna abu9abu pu#at atau abu9abu putih, namun tikus

yang digunakan sebagai he!an per#obaan merupakan starin albino

dari )attus norvegicus .

1. .2 Data B#*l*g#s T#kus (ut#h

4ama hidup < 29 tahun, dapat sampai 8 tahun

4ama produksi ekonomis < tahun

4ama bunting < 20922 hari

mur disapih < 2 hari

mur de!asa < 80930 hari

mur dika!inkan < 0 minggu (%antan dan betina)

Siklus estrus < 89: hari

4ama estrus < 1920 %am

$erka!inan < $ada !aktu estrus

6erat lahir < :93 gram



15

Dumlah anak < Aata9rata 1, dan dapat 20

Sumber< Smith dan &angkoe!id%o%o ( 1 7)



16

BAB III

KERAN0KA K N'EP DAN HIP TE'I' PENELITIAN

3.1 Kerangka K*nse(

Gambar . +erangka +onsep

Hati berperan dalam banyak proses tubuh, diantaranya

memproduksi berbagai protein penting, memproses dan menyimpan nutrisi,

menghan#urkan ra#un. +arena berfungsi sebagai pena!ar ra#un hati sangat

mudah men%adi sasaran utama ketoksikan. 6eberapa faktor dapat

Paracetamol Dosis

Ekstrak daunketapang

!la"onoid#

$adikal %e&as ↑↓%ioakti"asi 'itokrom

()P*+ ↑↓ ,ipid Pero-idase

'tress .ksidati/

lutation ↑Deplesi lutat ione

+katan ko"alendengan

makromolekulnukleo lik#

erusakan

17



17

menyebabkan ter%adinya kerusakan hati antara lain 5irus, parasit, bakteri,

toksisitas dari obat9obatan atau bahan kimia. Salah satu obat9obatan yang

dapat merusak sel dan fungsi hati adalah parasetamol.

$arasetamol bersifat tidak toksik %ika digunakan dalam dosis terapi,

tetapi dalam dosis yang berlebihan dan %angka pan%ang akan menimbulkan

nekrosis hati. 6iotransformasi parasetamol akan ter%adi di dalam hati.

Sebagian besar akan terkon%ugasi dengan asam glukoronat dan asam sulfat,

sedangkan sisanya akan dioksidasi oleh sistem $98:0 mikrosomal sehingga

terbentuk metabolit N-asetil-p-benzokuinon (' $+*). Senya!a ini

merupakan bentuk peralihan yang bersifat reaktif dan toksik, &etabolit

reaktif N-asetil-p-benzokuinonimina (' $ *) ini yang mema#u deplesi

glutathione dan radikal bebas. eplesi glutathione kemudian mema#u ikatan

ko5alen dengan makromolekul berakibat kerusakan makromolekul dan

ter%adi nekrosis hati. 'ekrosis hati %uga ter%adi karena interaksi radikal bebas

hasil metabolisme obat dan metabolisme tubuh dengan biomolekul

penyusun membran sel hati. *nteraksi radikal bebas ini menyebabkan

perubahan dan merusak membrane sel ( nonim, 20 2). +erusakan sel hati

menyebabkan meningkatnya lipid peroksida darah karena lipid peroksida

tubuh tidak dapat lagi didetoksifikasi dalam hati, mema#u stress oksidatif

berakibat nekrosis sel hepatosit. +elainan yang ter%adi pada hati dapat

dilihat dari meningkatnya kadar serum glutamate piruvat transaminase

(SG$ ) dan serum glutamate oksaloasetat transaminase (SG- ).



18

aun ketapang memiliki kandungan fla5onoid yang berfungsi

sebagai antioksidan yang bisa mengikat radikal bebas dan meningkatkan

glutathine sehingga bisa di%adikan sebagai hepatoprotektor untuk men#egah

ter%adinya kerusakan hepar.

3.2 H#(*tes#s Penel#t#an

Hipotesis $enelitian ini adalah

. $emberian ekstrak daun ketapang mempengaruhi kadar SG- dan

SG$ tikus yang diinduksi para#etamol dosis toksik

BAB I

!ET DE PENELITIAN



19

.1 Ran angan Penel#t#am

$enelitian ini bersifat eksperimental laboratorik dengan metode

)andomized Post ,nly Control roup +esign . Se#ara sistematis dapat

digambarkan sebagai berikut <

Gambar 8. Aan#angan penelitian

+eterangan <

A < Aandomisasi+ < +elompok kontrol hanya diberi pelet dan aFuadest+ ( ) < +elompok kontrol positif ( ) diberi ekstrak + (9) < +elompok kontrol negatif (9) diberi parasetamol$ < +elompok perlakuan diberi parasetamol ekstrak $2 < +elompok perlakuan 2 diberi parasetamol ekstrak $ < +elompok perlakuan diberi parasetamol ekstrak - < +adar SG- dan SG$ kelompok +-2 < +adar SG- dan SG$ kelompok +( )- < +adar SG- dan SG$ kelompok +(9)-8 < +adar SG- dan SG$ kelompok $-: < +adar SG- dan SG$ kelompok $2-3 < +adar SG- dan SG$ kelompok $

.2 P*(ulas# )an 'am(el

$opulasi < ikus putih ( )attus norvegicus*

6erusia 29 bulan dengan berat badan I 200 gram ber%enis kelamin %antan,

-

- 2

-

- 8

- :

- 3

+

+ ( )

+ (9)

$

$2

$

nit eksperimenA

2



20

Sampel < Dumlah sampel yang digunakan berdasarkan rumus federer' yaitu<

(k9 )(n9 ) J :

(39 )(n9 ) J :

:n9: J :

:n J 20

n J 8

+eterangan <

k < %umlah kelompok

n < %umlah sampel dalam tiap kelompok

$ada penelitian ini, %umlah sampel untuk tiap kelompok ditentukan

sebanyak : ekor tikus putih ber%enis kelamin %antan (n K 8), dan %umlah

kelompok tikus putih ada 3 sehingga penelitian ini membutuhkan 0 ekor

tikus putih dari populasi yang ada.

.3 L*kas# )an 4aktu Penel#t#an

. ar#a-el Penel#t#an

. Eariabel bebas

osis ekstrak daun ketapang.

2. Eariabel terikat

+adar SG- dan SG$

. Eariabel luar

a. Eariabel luar yang dapat dikendalikan

Denis makanan, 5ariasi genetik, %enis kelamin, berat badan dan umur.

b. Eariabel luar yang tidak dapat dikendalikan



21

+ondisi psikologis, reaksi hipersensitifitas dan keadaan a!al Hepar

tikus putih.

.5 De"#n#s# (eras#*nal ar#a-el Penel#t#an. Bkstrak daun ketapang

Bkstrak daun ketapang merupakan daun ketapang yang dipetik di

pinggir %alan pu#ang adi surabaya yang kemudian diekstraksi dengan

#ara dikeringanginkan beberapa hari kemudian serbuk dimaserasi

menggunakan etanol 70C selama 28 %am, setelah itu disaring dan

filtratnya akan diuapkan menggunakan alat penguap berputar. osis

yang digunakan merupakan dosis yang efektif sebagai hepatoprotektor

pada tikus. osis yang digunakan untuk tikus !istal ,:gr@kg66,

gr@kg66, 8,:gr@kg66 (6atubara, 200 ). Bkstrak daun ketapang

diberikan pada tikus menggunakan sonde dengan melalui oral yang

dapat digunakan efekti5itasnya sebagai hepatoprotektor karena

mengandung fla5onoid yang dapat digunakan sebagai perlindungan hati

dari parasetamol dosis toksik.2. SG-

SG- singkatan dari Serum lutamic ,xaloacetic "ransaminase'

sebuah enzim yang se#ara normal berada di sel hati dan organ lain.

4e5el SG- darah kemudian dihubungkan dengan kerusakan sel hati.

$ada tikus per#obaan darah diambil intra #ardial menggunakan spet

ukuran : ml kemudian diukur kadar SG- dianalisa dengan reagen

dyalisis Harga normal < /anita < L @4

$ria < L : @4

. SG$



22

SG$ adalah singkatan dari Serum lutamic Piruvic "ransaminase'

enzim ini banyak terdapat di hati $Hati dapat dikatakan rusak bila %umlah

enzim tersebut dalam plasma lebih besar dari kadar normalnya. $ada

tikus per#obaan darah diambil intra #ardial menggunakan spet ukuran :

ml kemudian diukur kadar SG$ dianalisa dengan reagen dyalisisHarga normal < /anita < L @4

$ria < L 8 @48. $ara#etamol

$ara#etamol yang digunakan berbentuk serbuk yang kemudian dibuat

dosis toksik berdasarkan berat badan tikus, kemudian serbuk

para#etamol yang sudah ditimbang anak dilarutkan dengan >&> C,

yang kemudian akan disonde peroral pada tikus menggunakan spet

ukuran :ml.

.6 Alat )an Bahan

.6.1Alat

. B5aporator

2. empat minum dan makanan tikus putih

. imbangan analitik

8. Darum oral@ sonde

:. 4abu erlenmeyer

3. >orong

7. >entrifuge

. $ipet

1. 6eaker Gelas

0. abung pemisah serum@ 5a#utainer

. +andang he!an



23

.6.2 Bahan

. aun ketapang

2. Btanol

. Fuadest

8. $elet

:. ikus putih

.7 Pr*se)ur Penel#t#an.7.1 Uj# kan)ungan +la8*n*#) Ekstrak Daun Keta(ang met*)e

KLT

Skrining fla5onoid metode +romatografi 4apis ipis (+4 ).

Bkstrak daun ketapang ditotolkan pada fase diam lempeng +4

sili#a gel ?2:8, dengan fase gerak kloroform < etanol < air

(1,7<0,2<0, ). $enampak noda yang digunakan #erium sulfat. %i

fla5onoid kertas ber!arna ungu dengan penampak noda ber!arna

#oklat hasil ekstrak daun ketapang positif mengandung fla5onoid.

.7.2 Pem-uatan ekstrak )aun keta(ang

.7.3 Pem-uatan sus(ens# )an (eneta(an )*s#s (arasetam*l

.7. Pengel*m(*kan )an (erlakuan he$an uj#

$enelitian ini merupakan penelitian eksperimental laboratoris,

menggunakan 0 ekor tikus putih !istar %antan berusia 29 bulan

dengan bobot badan 09280 gram yang dibagi 3 kelompok

perlakuan masing " masing terdiri dari : ekor tikus yang sudah

diadaptasikan dari hari 9 7. +emudian dihari ke 9 8, +elompok

pertama diberikan aFuadest dan pakan normal sebagai kelompok



24

kontrol, kelompok kedua diberikan #urli5 plus 0mg@kg66 dan

para#etamol 7:0mg@kg66 sebagai kelompok positif, kelompok

ketiga diberikan para#etamol 7:0 mg@kg66 sebagai kontrol

negatif, kelompok keempat diberikan ekstrak daun ketapang

,:gr@kg66 dan parasetamol 7:0mg@kg66 sebagai kelompok

perlakuan , kelompok kelima diberikan ekstrak daun ketapang

0gr@kg66 dan parasetamol 7:0mg@kg66 sebagai kelompok

perlakuan 2, dan kelompok keenam diberikan ekstrak daun

ketapang 8,:gr@kg66 dan parasetamol 7:0mg@kg66 sebagai

kelompok perlakuan . +emudian pada hari ke : dilakuakan

pengambilan darah kemudian diperiksa kadar SG- dan SG$

tikus.



'ampel 30 ekor tikus

elompok kontrol elompok positi/ elompok negati/ Perlakuan 1 Perlakuan 2 Perlakuan3

)daptasi di&eri pelet dan a uadest dari ari ke 1 7

) uadest pakanari ke 8 14

urli" plu s 80mg:kg%% a uadestari ke8 14

Ekstrak 4;5gr:kg%% Pct 75ari 8 14#

Ekstrak 3g r:kg%% Pct 750mg:kg%%ari 8 14#

Ekstrak 1;5 gr:kg%% Pct 750mg:kg%%ari 8 14#

Pctari ke8 14

$andomisasi

Pengam&ilan dara dan pengukuran kadar ' .T dan ' PT ari ke 15#

)nalisis data

25

0am-ar .2 Pengel*m(*kan )an (erlakuan he$an uj#



26

.7.5 Pemer#ksaan Ka)ar '0 T )an '0PT

Gambar 8. iagram alir analisa kadar SG- serum dengan reagen dyalisis

$ipet ml reagen SG-

0, ml serum

>ampur, hingga rata

4angsung diba#a absorbansi dengan spektofometer ( λ 80nm dan

suhu 7M >)+eterangan <

a) 4 N O.. @4 b) Harga normal < /anita < L @4

$ria < L : @4

Pr#ns#( Kerja 9

ASAT

l9 sparate 29-;oglutara P 4Glutamate -;aloasetat

!DH

-;aoasetat ' H H P 9&alate '

K*m(*nen )an K*nsentras# reagen

R1 9 A*S pH 7,3: 0 mmol@4

49 spartate 20 mmol@4

&SH L 00 @4

4 H L 200 @4

R29 29-;oglutarat : mmol@4

' H mmol@4

P%r#)*:al;5;Ph*s(hat +'

GoodQs buffer pH 1,3 00 mmol@4

$yrido;al9:9$hosphat mmol@4



27

Gambar 8.8 iagram analisa kadar SG$ serum dengan reagen dyalisis

$ipet ml reagen SG$

0, ml serum

>ampur, hingga rata

4angsung diba#a absorbansi dengan spektofometer ( λ 80nm dan

suhu 7M >)+eterangan <

a) 4 N O.. @4

b) Harga normal < /anita < L @4

$ria < L 8 @4

Pr#ns#( Kerja 9

ASAT

49 lanin 29-;oglutara P 49Glutarat pyru5at

LDH

$yru5at ' H H P 94a#tase '

K*m(*nen )an K*nsentras# reagen

R1 9 A*S pH 7, : 80 mmol@4

49 lanin 7000 mmol@4

4 H L 2 00 @4

R29 29-;oglutarat : mmol@4

' H mmol@4

P%r#)*:al;5;Ph*s(hat +'

GoodQs buffer pH 1,3 00 mmol@4

$yrido;al9:9$hosphat mmol@4



28

.< Anal#sa Data

ari hasil penelitian akan diperoleh data tentang aktifitas enzim

SG- dan SG$ analisa data dilakukan dengan se#ara analisa interfersial

yang dilakukan untuk mengetahui ada tidaknya perbedaan dari pengaruh

pemberian ekstrak daun ketapang terhadap akti5itas enzim SG$ dan

SG- pada tikus dengan menggunakan u%i '-E. %i selan%utnya

dengan u%i #east Significance +ifference %#S+'* u%i ini dilakukan bila

terdapat perbedaan yang nyata diantara keduanya dan melihat perbedaan

antara kelompok kontrol dengan masing masing perlakuan.

pengaruh daun ketapang

Documents