LAPORAN PRAKTIKUM FARMAKOLOGI II

PEMILIHAN ANTIBIOTIKA

TANGGAL PRAKTIKUM : Kamis, 28 Februari 2013

SHIFT/KELOMPOK : D/6

FITRIAH PATTIIAH (10060307025)

ARFIAH TUANKOTTA (10060310134)

ANNISHA IMANIA (10060310135)

NIDA MAHDA ANIDA (10060310137)

ASISTEN : DINA ROSDIANA SARI, S.Farm

LABORATORIUM FARMASI TERPADU UNIT D

PROGRAM STUDI FARMASI

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

UNIVERSITAS ISLAM BANDUNG

2012

PEMILIHAN ANTIBIOTIKA

I. Tujuan1. Mengenal metode pemilihan antibiotika berdasarkan

kepekaan mikroba2. Mampu menerapkan metode pemilihan antibiotika untuk

penyakit infeksi oleh metode patogen

II. Teori DasarBahan kimia, berbagai jenis bahan kimia dapat menghambat

pertumbuhan kuman, misalnya kadar gula yang tinggi, zat warna, desinfektan, antibiotika. Bahan kimia ini dapat menghambat pertumbuhan kuman, disebut efek bakteriostatik, atau dapat membunuh kuman, disebut efek bakterisid. Disinfektan adalah bahan kimia yang digunakan untuk sanitasi, disinfeksi, antisepsis, dan membunuh kuman.

Antibiotik adalah zat-zat kimia yang dihasilkan oleh fungi dan bakteri yang memiliki khasiat mematikan atau menghambat pertumbuhan kuman-kuman sedangkan toksisitasnya bagi manusia relatif kecil. Para peneliti diseluruh dunia memperoleh banyak zat lain dengan khasiat antibiotik namun berhubung dengan adanya sifat toksis bagi manusia, hanya sebagian kecil saja yang dapat digunakan sebagai obat diantaranya adalah streptomycin vial injeksi, Tetrasiklin kapsul, Kanamicin kapsul, Erytromicin kapsul, Colistin  tablet, Cefadroxil tablet dan Rifampisin kapsul (Djide, 2003).

Antibiotik digunakan untuk membasmi mikroba penyebab terjadinya infeksi. Gejala infeksi terjadi akibat gangguan langsung oleh mikroba dan berbagai zat toksik yang dihasilkan mikroba. Pada dasarnya suatu infeksi dapat ditangani oleh sistem pertahanan tubuh, namun adakalanya sistem ini perlu ditunjang oleh penggunaan antibiotik. Antibiotik yang digunakan untuk membasni mikroba penyebab infeksi pada manusia, harus memiliki sifat toksisitas selektif. Artinya antibiotik harus bersifat toksik untuk mikroba, tetapi relatif tidak toksik untuk hospes. Toksisitas selektif tergantung kepada struktur yang dimiliki sel bakteri dan manusia misalnya dinding sel bakteri yang tidak dimiliki oleh sel manusia, sehingga antibiotik dengan mekanisme kegiatan pada dinding sel bakteri mempunyai toksisitas selektif relatif tinggi (Ganiswarna, 1995).

Sensitivitas bakteri terhadap antibiotik tergantung kapada kemampuan antibiotik tersebut untuk menembus dinding sel

bakteri. Antibiotik lebih banyak yang efektif bekerja terhadap bakteri Gram positif karena permeabilitas dinding selnya lebih tinggi dibandingkan bakteri Gram negatif. Jadi suatu antibiotik dikatakan mempunyai spektrum sempit apabila mampu menghambat pertumbuhan bakteri Gram positif, sedangkan antibiotik berspektrum luas jika pertumbuhan bakteri Gram positif dan bakteri Gram negatif dapat dihambat oleh antibiotik tersebut (Sumadio, dkk. 1994).

Berdasarkan sasaran tindakan antibiotik terhadap mikroba maka antibiotik dapat dikelompokkan menjadi lima golongan yaitu antibiotik penghambat sintesis dinding sel mikroba, antibiotik yang termasuk kelompok ini ialah penisilin, sefalosporin, basitrasin, dan vankomisin. Yang kedua yaitu antibiotik penghambat sintesis protein sel mikroba, antibiotik yang termasuk kelompok ini ialah golongan aminoglikosida, makrolida, kloramfenikol, linkomisin dan tetrasilin. Yang ketiga yaitu antibiotik penghambat sintesis asam nukleat sel mikroba, antibiotik yang termasuk kelompok ini ialah rifampisin dan golongan kuinolon. Keempat yaitu antibiotik pengganggu fungsi membran sel mikroba, antibiotik yang termasuk kelompok ini ialah golongan polien. Dan yang kelima yaitu antibiotik penghambat metabolisme mikroba, antibiotik yang termasuk kelompok ini ialah sulfonamida, trimetoprin dan asam p-amino salisilat (Ganiswarna, 1995).

Zona Hambat merupakan tempat dimana bakteri terhamabat pertumbuhannya akibat antibakteri atau antimikroba. Zona hambat adalah daerah untuk menghambat pertumbuhan mikroorrganisme pada media agar oleh antibiotik. Contohnya: tetracycline, erytromycin, dan streptomycin. Tetracycline merupakan antibiotik yang memiliki spektrum yang luas sehingga dapat menghambat pertumbuhan bakteri secara luas (Pelczar, 1986).

Faktor-faktor yang dapat  mempengaruhi luas daerah hambatan dengan cara difusi ini adalah sebagai berikut : Ingredient medium pertumbuhan Pemilihan medium pertumbuhan Pengaruh pH Ukuran inokulum Stabilitas mikroorganisme Aktivitas antibiotic Waktu inkubasi Teknik dan keterampilan analis

E. coli merupakan bakteri berbentuk batang dengan panjang sekitar 2 micrometer dan diamater 0.5 micrometer. Volume sel E. coli berkisar 0.6-0.7 micrometer kubik. Bakteri ini termasuk umumnya hidup pada rentang 20-40 derajat C, optimum pada 37 derajat.

S. aureus merupakan bakteri berbentuk bulat (coccus), yang bila diamati di bawah mikroskop tampak berpasangan, membentuk rantai pendek, atau membentuk kelompok yang tampak seperti tandan buah anggur. Organisme ini Gram-positif. Beberapa strain dapat menghasilkan racun protein yang sangat tahan panas, yang dapat menyebabkan penyakit pada manusia. Dosis infektif—toxin/racun sebanyak kurang dari 1.0 mikrogram dalam makanan yang terkontaminasi dapat menimbuknan gejala keracunan staphylococcal. Tingkat racun ini dicapai apabila populasi S. aureus lebih dari 100.000 per gram.

III. Alat dan BahanMikroba uji : Staphylococcus aureus, Escherichia coliMedium : Agar kaldu, air kaldu, air sulingAntibiotik : Ampisilin Na, Tetrasiklin HCl, KloramfenikolBahan lain : cakram kertas, kapas berlemak, aluminium foil Alat : spektrofotometer, pinset, vortex, autoklaf, inkubator, pipet Eppendorf, jarum ose, cawan petri, tabung reaksi, labu Erlenmeyer, batang pengaduk

IV. Prosedur Pembuatan lempeng agar

- Medium agar kaldu dicairkan diatas tangas air sampai mencair, ditunggu sampai suhu mencapai 450C sambil digoyang.

- Disiapkan 2 cawan petri yang telah diisi oleh suspensi bakteri 0,1 ml

- Ditambahkan medium agar cair dalam masing-masing cawan petri, campur, biarkan memadat.

- Ditambahkan empat cakram kertas steril diletakan pada tiap lempeng agar dalam cawan petri. Setiap cakram

ditetesi dengan 10 µl larutan antibiotik yang berbeda. Larutan antibiotik dibuat dengan konsentrasi 1µg/ml, 10µg/ml, 50µg/ml, 100µg/ml, 200µg/ml, 1000µg/ml.

- Dibiarkan 1 jam. Lalu inkubasi selama 18-24 jam.- Amati dan ukur diameter hambatan pertumbuhan bakteri.-

V. Pengamatan

Aktivitas Antibiotik terhadap Staphylococcus aureus

AntibiotikKel.

cawan

Diameter Hambatan (mm)0,01

µg/cakram

0,1 µg/cakra

m

0,5 µg/cakr

am

1 µg/cakra

m

2 µg/cakra

m

10 µg/cakra

m

AmpisilinI/A - 10,1 22,9I/B 0,6 10,2 11,8

TetrasiklinII/A - 1,01 22,9II/B 0,6 10,2 11,8

Kloramfenikol

III/A 8 15 30III/B 13 20 25

0 2 4 6 8 10 120

5

10

15

20

25

30

35

Kurva Hubungan Antara Konsentrasi dengan Diameter Hambatan terhadap

Staphylococcus aureus

ampisilintetrasiklinkloramfenikol

konsentrasi (µg/cakram)

diam

eter

ham

bata

n (m

m)

Aktivitas Antibiotik terhadap Escherichia coli

Antibiotik Kel. Diameter Hambatan (mm)

0,01 µg/cakra

m

0,1 µg/cakra

m

0,5 µg/cakr

am

1 µg/cakra

m

2 µg/cakra

m

10 µg/cakra

m

AmpisilinIV/A 19,1 36,7 45,6IV/B 35,1 37,8 40,6

TetrasiklinV/A 18,2 32,8 38,9V/B 32,1 35,4 36,3

Kloramfenikol

VI/A - - -VI/B - - -

0 2 4 6 8 10 1205

101520253035404550

Kurva Hubungan antara Konsentrasi dengan Diameter Hambatan

terhadap Escherichia coli

ampisilintetrasiklinkloramfenikol

konsentrasi (µg/cakram)

diam

eter

ham

bata

n (m

m)

VI. PembahasanPada praktikum pemilihan antibiotika yang bertujuan untuk

mengetahui kemampuan suatu antibiotika dalam menghambat pertumbuhan mikroba patogen. Antibiotik yang digunakan adalah ampisilin, tetrasiklin dan kloramfenikol. Dengan menggunakan metode cakram kertas. Bakteri yang digunakan adalah Staphylococcus aureus dan Escherichia coli.

Hasil pengamatan yang telah dilakuakan menunjukkan bahwa aktivitas antibiotik ampisilin terhadap Escherichia coli memiliki diameter hambat yang lebih baik dibandingkan dengan akivitas antibiotik ampisilin terhadap Staphylococcus aureus. Dengan adanya diameter hambat pada konsentrasi 0,01µg/cakram untuk bakteri Escherichia coli sedangkan untuk bakteri Staphylococcus aureus pada konsentrasi yang sama menunjukkan tidak adanya diameter hambat. Hal ini terjadi dikarenakan ampisilin

merupakan senyawa turunan pertama 6-aminopenisilanat atau disebut juga penisilin spektrum luas yang bekerja terhadap sejumlah bakteri gram negatif seperti E.coli. (Ernst Mutschler, 1991)

Aktivitas antibiotik tetrasiklin memiliki diameter hambat yang lebih baik pada bakteri Escherichia coli dibandingkan dengan bakteri Staphylococcus aureus. Ditunjukkan dengan adanya diameter hambat pada konsentrasi 0,01µg/cakram untuk bakteri Escherichia coli sedangkan untuk bakteri Staphylococcus aureus pada konsentrasi yang sama menunjukkan tidak adanya diameter hambat. Hal ini terjadi dikarenakan antibiotik tetrasiklin merupakan antibiotik yang bekerja pada semua mikroba yang peka terhadap penisilin, berbagai bakteri gram negatif, mikoplasma, spirokhacta dan leptospira, riketsia, chlamydia serta dalam dosis tinggi terhadap amuba. Tetrasiklin bekerja baik pada mikroba ekstrasel maupun intrasel. Dengan tipe kerjanya yaitu bakteriostatik, menghambat pada sintesis protein ribosom yaitu dengan menghambat pemasukan aminoasil-t-RNA pada fase pemanjangan yang termasuk fase translasi, sehingga dapat menyebabkan blokade perpanjangan rantai peptida.

Hal ini menunjukkan bahwa ampisilin dan tetrasiklin dapat beraktifitas dengan baik pada bakteri Escherichia coli. Tetapi menurut hasil dari pengamatan ampisilin lebih baik terhadap aktivitas bakteri Escherichia coli karena pada konsentrasi 0,01 diameter hambat antibiotik ampisilin lebih besar yaitu 19,1 mm dibandingkan dengan antibiotik tetrasiklin yaitu 18,2 mm. Hal ini terjadi dikarenakan ampisilin bekerja dengan cepat terhadap Escherichia coli yang merupakan gram negatif sedangkan antibiotik tetrasiklin bekerja pada penyakit infeksi yang meningkatnya resistensi. Dan waktu paruh ampisilin lebih cepat yaitu 1 jam sedangkan tetrasiklin memiliki waktu paruh 5 jam. (Ernst Mutschler, 1991)

VII. Kesimpulan Aktivitas kerja ampisilin lebih baik untuk menghambat

pertumbuhan bakteri Escherichia coliVIII. Daftar Pustaka

Djide, M.N, 2003. Mikrobiologi Farmasi, Jurusan Farmasi Unhas, Makassar.Ganiswarna, S.G, 1995. Farmakologi dan Terapi Edisi 4. Bagian Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia, Jakarta.Mutschler, Ernst. 1991. Dinamika Obat: Farmakologi dan Toksikologi. ITB: Bandung

Pelczar, Michael J, 1986, Dasar-Dasar Mikrobiologi, UI-Press, Jakarta.Sumadio, H., dan Harahap, 1994, Biokimia dan Farmakologi Antibiotika, USU Press, Medan.