laporan penelitian identifikasi serotipe bakteri ... · laporan penelitian identifikasi serotipe...

1

LAPORAN PENELITIAN

IDENTIFIKASI SEROTIPE BAKTERI Escherichia coli O157

DENGAN MEDIA SORBITOL MacCONKEY AGAR (SMAC) PADA

MINUMAN ES TEH DARI PEDAGANG MINUMAN DI SEKOLAH

dr.Made Agus Hendrayana,M.Ked

PROGRAM STUDI PENDIDIKAN DOKTER

FAKULTAS KEDOKTERAN

UNIVERSITAS UDAYANA

2

DAFTAR ISI

Hal.

Cover.................................................................................................... 1

Daftar isi......................................................................................................... 2

Abstract .................................................................................................... 3

BAB 1. PENDAHULUAN ......................................................................... 5

1.1 Latar Belakang................................................................................... 5

1.2 Rumusan Masalah.............................................................................. 6

BAB 2. TUJUAN DAN MANFAAT PENELITIAN................................. 7

BAB 3. METODE PENELITIAN.............................................................. 8

BAB 4. HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN ………………… 12

BAB 5. KESIMPULAN.................................................................................. 22

DAFTAR PUSTAKA........................................................................................ 23

LAMPIRAN………………………………………………………………….. 25

3

IDENTIFIKASI SEROTIPE BAKTERI Escherichia coli O157

DENGAN MEDIA SORBITOL MacCONKEY AGAR (SMAC) PADA

MINUMAN ES TEH DARI PEDAGANG MINUMAN DI SEKOLAH

Abstrak

Escherichia coli (E. coli) merupakan bakteri yang hidup dalam berbagai air

limbah organik maupun anorganik dan dapat mempengaruhi kualitas air. E.coli adalah

bakteri yang dapat menyebabkan penyakit saluran cerna pada manusia. Salah satu

strain Escherichia coli patogen adalah serotype O157 Escherichia coli O157

menghasilkan toksin yang identik dengan toksin dari Shigella dysentriae tipe 1

sehingga dikenal sebagai Shiga-like toxin (Stx). Penularan bakteri E.coli sampai masuk

ke dalam tubuh manusia salah satunya melalui mekanisme fecal-oral yaitu dari

makanan atau minuman yang tertelan masuk ke dalam saluran pencernaan. Makanan

dan minuman yang dijual oleh para pedangang belum tentu terjamin hiegenisnya.

Pengolahan dan penyajian yang kurang baik dapat memungkinkan adanya bakteri

patogen mengkontaminasi minuman yang dijual seperti adanya bakteri E.coli.

Penelitian ini bertujuan untuk mendeteksi adanya kontaminasi bakteri E.coli patogen

dan mengidentifikasi serotipe O157 pada minuman es teh yang dijual di sekitar

lingkungan sekolah-sekolah khususnya di area Kota Denpasar. Besar sampel

ditentukan sebanyak 10 buah dari 10 pedagang minuman es teh di lingkungan sekitar

sekolah-sekolah di Kota Denpasar. Sampel yang kami ambil kami sebar berdasarkan

kecamatan yang ada di wilayah Kota Denpasar. Hasil penelitian ini kami dapatkan

jumlah minuman es teh dari pedagang minuman di sekitar sekolah di Kota Denpasar

yang terkontaminasi oleh bakteri E.coli adalah sebanyak 8 dari 10 (80%) sampel

semua bakteri E.coli yang ditemukan merupakan serotype O157.

Kata kunci : es teh, sekolah, Escherichia coli O157

4

IDENTIFICATION OF THE Escherichia coli serotype O157

BACTERIA BY SORBITOL MacCONKEY AGAR (SMAC) MEDIA

IN ICE TEA FROM BEVERAGE MERCHANTS AROUND

SCHOOLS

Abstract

Escherichia coli (E. coli) is a bacteria that lives in organic and inorganic waste

water and can affect to the water quality. E. coli is bacteria that can cause gastrointestinal

diseases in humans. One of the pathogenic strain is serotype O157. Escherichia coli O157

produces a toxin that is identical to the toxin with Shigella dysentriae type 1 which is

known as Shiga-like toxin (Stx). The Transmission of E.coli bacteria to enter the human

body could be through fecal-oral mechanism that is food or beverages are ingested into the

human digestive tract. Food and beverages that sold by the trader is not guaranteed the

hiegenity. A poor higyne beverage processing and serving can allow pathogenic bacteria

to contaminate beverages that could present E.coli bacteria. The aim of this study is to

detect the presence of E.coli bacteria contamination and identify the pathogenic serotypes

of E. coli on ice tea that sold around neighborhood schools, especially in the area of

Denpasar city. The sample size is set at 10 samples from10 ice tea merchants that sold

around neighborhood schools around Denpasar city. The area of sample collections is

spread based on Denpasar districts. The result of this study that we found the number of

iced tea which contaminated by E. coli bacteria are 8 from 10 (80%) samples from ice tea

merchants around school in Denpasar and all of the E.coli that found is serotype O157.

Keyword : ice tea, school, Escherichia coli O157

5

BAB 1

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Escherichia coli (E. coli) merupakan bakteri yang hidup dalam berbagai air

limbah organik maupun anorganik dan dapat mempengaruhi kualitas air. Sumber

utama masuknya mikroorganisme pathogen ke dalam suatu ekosistem berasal dari

kotoran manusia dan hewan yang dibuang melalui limbah rumah tangga dan

peternakan. Mikroorganisme pathogen tersebut meliputi bakteri, protozoa, virus dan

nematode yang dapat menyebabkan kehilangan cairan tubuh. Salah satu strain

Escherichia coli patogen adalah serotype O157 (Beutin et al.,1993). Escherichia coli

O157 memiliki fimbrie yang berperan dalam menginvasi inang (tidak menyerang

mukosa sel seperti Shigella). Escherichia coli O157 menghasilkan toksin yang identik

dengan toksin dari Shigella dysentriae tipe 1 sehingga dikenal sebagai Shiga-like toxin

(Stx) (Heuvelink et.al.,1999 dan Acheson, 2000).

Infeksi Escherichia coli O157 dapat menunjukkan gejala klinis pada manusia

yaitu kram perut, mual, muntah, diare berdarah, colitis hemorrhagic dan hemolytic

uremic syndrome (HUS). Bakteri ini berpotensi menular dan dapat menjadi wabah.

Penularan bakteri E.coli sampai masuk ke dalam tubuh manusiasalah satunya melalui

mekanisme fecal-oral yaitu dapat dari makanan atau minuman yang tertelan masuk ke

dalam saluran pencernaan.

Air dan makanan yang terkontaminasi dan tidak higienis termasuk minuman

dan es batu merupakan jalur transmisi utama dari E.coli. Sebagian besar penularan

terjadi memalui rute berasal dari feses yang mengkontaminasi air atau makanan yang

nantinya dikonsumsi manusia. Bakteri pada kondisi yang tidak menguntungkan

misalnya pada saat suhu turun pada pembuatan es akan masuk ke fase

dorman/hibernasi, saat bakteri kembali ke dalam kondisi lingkungan yang optimal

maka bakteri akan kembali aktif.

Es batu merupakan salah satu bahan yang dipergunakan sebagai pendingin

dalam minuman. Hampir sebagian besar warung makan baik restoran maupun kaki

lima menyediakan minuman yang menggunakan es batu. Es batu masing-masing

dibuat dengan prosedur yang berbeda. Dalam prosesnya baik pada saat pembuatan

6

maupun proses pemakaian, ada kemungkinan air maupun es yang telah jadi

terkontaminasi oleh bakteri yang dapat menyebabkan diare salah satunya E. coli.

Makanan dan minuman yang dijual oleh para pedangang belum tentu terjamin

hiegenisnya. Pengolahan dan penyajian yang kurang baik dapat menyebarkan

berbagai penyakit. Ada oknum pedagang makanan dan minuman kurang

memperhatikan unsur kesehatan demi mendapatkan keuntungan dalam menjual

dagangannya termasuk pedagang minuman yang menggunakan bahan dari air mentah

untuk digunakan pada minuman yang dijualnya. Pengolahan minuman pun dapat saja

kurang higenis seperti terkontaminasi oleh lalat maupun bahan tercemar lainnya

sehinga memungkinkan adanya bakteri patogen mengkontaminasi minuman yang

dijual seperti adanya bakteri E.coli.

Tempat pedagang minuman kaki lima yang menggunakan gerobak banyak

terdapat di depan sekolah-sekolah dimana yang menjadi langganannya adalah anak-

anak sekolah yang membeli minuman saat jan istirahat atau pulang sekolah. Anak-

anak sekolah menjadi rentan terhadap infeksi oleh bakteri E.coli patogen yang

mencemari minuman yang mereka beli.

Berdasarkan uraian diatas maka dirasa perlu untuk mendeteksi adanya

kontaminasi bakteri E.coli patogen dan serotipenya pada minuman yang dijual di

sekitar lingkungan sekolah-sekolah khususnya di area Denpasar.

1.2 Perumusan Masalah

Berdasarkan latar belakang di atas beberapa permasalahan yang akan dijawab dalam

penelitian ini adalah :

1. Berapa banyak minuman es teh dari sampel pedagang minuman di sekitar sekolah

di Kota Denpasar yang terkontaminasi oleh bakteri E.coli ?

2. Berapa banyak bakteri E.coli yang mengkontaminasi sampel minuman es teh dari

sampel pedagang minuman di sekitar sekolah di Kota Denpasar merupakan E. coli

serotype O157?

7

BAB 2

TUJUAN DAN MANFAAT PENELITIAN

2.1 Tujuan umum :

Untuk mengidentifikasi serotipe O157 bakteri E.coli yang mengkontaminasi minuman

es teh dari sampel pedagang minuman di sekitar sekolah di Kota Denpasar

2.2 Tujuan Khusus :

1. Untuk mengetahui berapa banyak minuman es teh dari sampel pedagang minuman

di sekitar sekolah di Kota Denpasar yang terkontaminasi oleh bakteri E.coli ?

2. Untuk mengetahui berapa banyak bakteri E.coli yang mengkontaminasi sampel

minuman es teh dari sampel pedagang minuman di sekitar sekolah di Kota

Denpasar merupakan E. coli serotype O157?

2.3 Manfaat Penelitian

1. Memberikan informasi tentang persentase kontaminasi dan serotipe bakteri E. coli

pada es teh dari pedagang minuman di sekitar sekolah di Kota Denpasar

2. Memberikan pengetahuan dan ketrampilan kepada peneliti tentang tehnik isolasi

dan identifikasi serotipe E.coli dari aspek mikrobiologi

3. Memberikan informasi awal kepada intansi terkait seperti Dinas Kesehatan Kota

Denpasar, BPOM, pihak sekolah dan pihak terkait lain serta peneliti lain dalam

upaya penanggulangan pencemaran minuman dan peningkatan mutu pada

termasuk penanggulangan penyakit yang ditimbulkan akibat infeksi bakteri E. coli

di masyarakat.

8

BAB 3

METODE PENELITIAN

3.1 Jenis dan Rancangan Penelitian

Jenis penelitian ini adalah penelitian observational deskripif dengan rancangan studi

eksploratif.

3.2 Populasi Peneltitian

Populasi adalah pedagang yang menjual minuman es teh di lingkungan sekitar

sekolah-sekolah di Kota Denpasar.

3.3 Sampel Penelitian

Minuman es teh di lingkungan sekitar sekolah-sekolah di Kota Denpasar.

3.4 Besar Sampel

Besar sampel ditentukan dengan cara estimasi dengan jumlah total sampel 10 buah

dari 10 pedagang minuman es teh di lingkungan sekitar sekolah-sekolah di Kota

Denpasar. Sampel yang kami ambil kami sebar berdasarkan kecamatan yang ada di

wilayah Kota Denpasar, yaitu : 2 sampel dari Kecamatan Denpasar Timur, 2 sampel

di pusat kota Denpasar, 2 sampel dari Kecamatan Denpasar Selatan, 2 sampel dari

Kecamatan Denpasar Barat, dan 2 sampel dari Kecamatan Denpasar Utara

3.5 Teknik Pengambilan Sampel

Teknik pengambilan sampel yang digukan merupakan salah satu teknik nonrandom

sampling yaitu quota sampling. Pengambilan sampel akan dihentikan jika telah

mencapai paling sedikit 10 sampel dari daerah kecamatan di Kota Denpasar yang

telah ditentukan .

3.6 Variabel Penelitian

Variabel pada penelitian ini adalah minuman es teh, koloni E.coli sSerotipe O157.

9

3.7 Definisi Operasional Variabel

1 Minuman es teh adalah minuman jenis teh yang menggunakan pendingin es batu

dan dijual oleh pedagang minuman yang menggunakan gerobak dorong yang

menjual dagangannya di sekitar lingkungan sekolah-sekolah di wilayah Kota

Denpasar

2 Koloni bakteri E.coli serotipe O157 adalah koloni Escherichia coli yang tumbuh

dengan menunjukkan gambaran tidak berwarna pada media Sorbitol Mac Conkey

Agar (SMAC) yang diinkubasi pada suhu 37°C selama 18-24 jam.

3.8 Lokasi dan Waktu Penelitian:

Lokasi Penelitian

Penganbilan sampel es teh dari pedagang minuman di sekitar sekolah-sekolah

bertempat di lima wilayah Kota Denpasar, Bali. Sedangkan pemeriksaaan secara

mikrobiologis dilaksanakan di Laboratorium Mikrobiologi Fakultas Kedokteran

Universitas Udayana.

Waktu Penelitian

Waktu penelitian adalah dilaksanakan sejak usulan penelitian ini diterima dan

direncanakan berakhir enam bulan setelahnya.

3.9 Prosedur penelitian

Pengambilan sampel

Es teh yang didapat dari pedagang minuman di sekitar sekolah diminta atau

dibeli tanpa mencampur dengan minuman lain kemudian dimasukkan ke dalam

kantong plastik steril berlabel dengan mempergunakan teknik aseptik. Jumlah

sampel yang diperoleh pada masing-masing jenis dan tempat pengambilan haruslah

minimal + 50cc.

Isolasi Escherichia coli

Media Nutrient broth tersebut diambil satu ose untuk dilakukan

penanaman pada media Eosin Methylen Blue Agar (EMBA). Selanjutnya.

diinkubasi pada suhu 35-37° C selama 24 jam dengan meletakan cawan pada posisi

terbalik.

Pada Media Eosin Methylen Blue Agar (EMBA) diamati adanya koloni

berwarna hijau metalik. Kemudian dilakukan pengecatan Gram dengan

10

menunjukkan hasil batang berwarna merah (batang Gram negatif). Selanjutnya

koloni bening ditanam pada media uji biokimia (IMViC) dan diinkubasi pada suhu

35-37° C selama 24 jam.

Identifikasi Escherichia coli

Identifikasi Escherichia coli menggunakan media uji biokimia (IMViC)

yang (Fardiaz, 1993), meliputi: pemanfaatan berbagai jenis karbohidrat

(fermentasi), pembentukan indol, motilitas, pemanfaatan sitrat, penurunan pH

akibat asam yang dikeluarkan oleh Escherichia coli.

Uji dengan menggunakan 5ml TSI agar (Tripel Sugar Iron)berbentuk agar

miring bertujuan untuk mengetahui kemampuan bakteri dalam memanfaatkan 3

macam gula (glukosa, laktosa dan sukrosa) dan adanya pembesan gas. Isolat

bakteri dinokulasikan pada media TSI agar dengan cara menggoreskan pada bagian

permukaan media dan menusukan pada bagian bawah tabung dengan

menggunakan jarum ent (ose lurus). Diinkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam.

Warna merah menunjukan reaksi basa diberi kode K sedangkan warna kuning

menunjukan reaksi asam diberi kode A. Pada bagian bawah terdapat rongga

sampai pecahnya media menunjukan reaksi adanya gas. Warna kemerahan (K)

pada lereng dan warna merah (A) pada bagian dasar tabung diberi kode A/K yang

menunjukan bahwa hanya glukosa yang terfermentasi. Sedangkan warna kuning

(A) pada lereng dan dasar tabung diberi A/A yang menunjukan bahwa ketiga gula

(glikosa, laktosa dan sukrosa) terfermentasi.

Uji dengan menggunakan 5ml media SIM (Sulphite Indol Motility)

bertujuan untuk mengetahui pembentukan H2S (uji sulfida), pembentukan indol

(uji indol) dan pergerakan bakteri (motilitas). Isolat dinokulasikan pada media SIM

berbentuk agar tegak dengan cara menusukan dari bagian atas media sampai dasar

tabung dengan menggunakan jarum ent (ose lurus). Diinkubasi pada suhu 37°C

selama 24 jam. Terbentuknya H2S ditandai dengan adanya warna hitam pada

media. Reaksi indol positif ditandai dengan terbentuknya cincin warna merah

muda pada permukaan media setelah ditetesi 2-3 tetes reagen erlich. Sifat motilitas

positif dapat dilihat dari pertumbuhan tempat penusukan sampai menyebar pada

permukaan media yang berwarna putih.

Uji menggunakan 5ml media simon’s citrate agar berbentuk agar miring

bertujuan untuk mengetahui kemampuan bakteri dalam memanfaatkan sitrat

11

sebagai sumber karbon yang terdapat dalam media tersebut. Isolat diinokulasikan

pada media simon’s citrate agar dengan cara menggoreskan pada permukaan

media dan menusukan pada bagian bawah tabung dengan menggunakan jarum ent

(ose lurus). Diinkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam. Reaksi positif menunjukan

warna biru sedangkan reaksi negatif tidak terjadi perubahan warna.

Uji menggunakan 10ml media methyl red - voges proskauer berbentuk cair.

Media voges proskauer bertujuan untuk mengetahui apakah Escherichia coli

mampu membentuk asetil metal karbonal yang oleh udara akan teroksidasi

sehingga menjadi diasetil. Reaksi positif ditandai dengan terbentuknya warna

merah pada permukaan media setelah ditetesi 3-2 tetes reagen Kova’c ( λ-naphthol

0.5% dalam ethyl alcohol absolute dan 2ml larutan KOH 40%). Sedangkan reaksi

negative tidak terjadi perubahan warna. Media methyl red bertujuan untuk

mengetahui apakah asam yang dikeluarkan oleh Escherichia coli dapat

menurunkan pH media. Reaksi positif berwarna merah setelah ditetesi 2-3 tetes

reagen methyl red sedangkan reaksi negatif tidak terjadi perubahan warna. Isolat

diinokulasikan ke dalam media methyl red - voges proskauer dengan cara

mengaduknya menggunakan jarum ent. Diinkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam.

Identifikasi E.coli O157

Selanjutnya dilakukan penanaman pada media Sorbitol Mac Conkey Agar

(SMAC) yang diinkubasi pada suhu 35-37° C selama 24 jam dengan meletakan

cawan pada posisi terbalik. Kemudian dilamati, adanya koloni yang bening

(colourless).Koloni yang bening ini merupakan koloni E.coli O157

Analisis Hasil

Analisis hasil sampling dan eksperimental dievaluasi dan disajikan dalam

bentuk table, gambar dan narasi.

12

BAB 4

HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN

4.1 Hasil Penelitian

Sampel penelitian ditentukan dengan metode Quota sampling dimana ditetapkan

oleh peneliti dengan mengambil sebanyak 10 sampel dari 10 pedagang minuman es the

berbeda di seputar Kota Denpasar. Daftar tabel lokasi pengambilan sampel dapat dilihat

pada tabel 1 di bawah.

Tabel 4.1 Lokasi pengambilan sampel

No. No.

Sampel

Jenis minuman Lokasi pengambilan sampel

1. ET1 Es teh Warung depan sekolah, Denpasar Utara

2. ET2 Es teh Penjual minuman, Denpasar Utara

3. ET3 Es teh Penjual es teh, Denpasar Barat

4. ET4 Es teh Penjual minuman, Denpasar Barat

5. ET5 Es teh Penjual minuman, Pusat Kota Denpasar

6. ET6 Es teh Warung depan sekolah, Pusat Kota Denpasar

7. ET7 Es teh Penjual es teh, Denpasar Timur

8. ET8 Es teh Penjual es teh, Denpasar Timur

9. ET9 Es teh Penjual minuman, Denpasar Selatan

10. ET10 Es teh Penjual es teh, Denpasar Selatan

13

Gambar 4.1 Sampel es teh yang didapat dari pedagang minuman

Sampel es teh yang didapat dari pedagang minuman lalu kemudian diinkubasi di

dalam larutan Nutrient broth (TSB) pada suhu 37°C selama 24 jam suhu 37o C. Dari hasil

pengamatan pada media Nutrient broth didapatkan hasil sebagai berikut :

Tabel 4.2 Hasil penanaman sampel pada media Nutrient TSB

No. No. Sampel Jenis minuman Hasil pada media Nutrient

1. ET1 Es teh Keruh (+)










14

Dari tabel 4.2 tampak semua yaitu 10 dari 10 (100%) larutan Nutrient yang telah

diinkubasi menjadi keruh dengan tingkat kekeruhan yang bervariasi dan mengeluarkan

aroma yang menyengat dimana ini menandakan adanya koloni bakteri yang berkembang

dimana kemungkinan ada larutan yang mengandung bakteri E.coli. Seperti yang tampak

pada gambar di bawah.

A.

B.

Gambar 4.2 A dan B larutan Nutrient dari sampel yang telah diinkubasi pada

suhu 37⁰C selama 24 jam berubahn menjadi keruh dengan tingkat kekeruhan yang

bervariasi

Semua sampel yang menunjukkan kekeruhan pada larutan Nutrient TSB dilakukan

penanaman pada media Mc.Conkey yang diinkubasi pada suhu 35-37° C selama 24 jam

kemudian diamati adanya koloni berwarna merah seperti yang terlihat seperti gambar

berikut.

15

Gambar 4.3. Hasil inkubasi sampel pada media Mc.Conkey suhu 35-37° C selama 24 jam

kemudian diamati adanya koloni berwarna merah.

Tabel 4.3 Hasil inkubasi pada media Mc.Conkey dan koloni merah jambu yang timbul

Kode sampel Tumbuhnya koloni

berwarna merah jambu

ET1 Ada (+)

ET2 Ada (+)

ET3 Ada (+)

ET4 Ada (+)

ET5 Ada (+)

ET6 Ada (+)

ET7 Ada (+)

ET8 Ada (+)

ET9 Ada (+)

ET10 Ada (+)

16

Dari tabel 5.3 tampak semua sampel yaitu 10 dari 10 (100%) larutan yang keruh

setelah ditanam pada media Mc.Conkey dan diinkubasi tampak adanya koloni barwarna

merah jambu yang timbul. Adanya koloni bakteri yang tumbuh berwarna merah jambu

menunjukkan kemungkinan koloni tersebut adalah koloni bakteri E.coli

Uji konfirmasi untuk lebih meyakinkan bahwa koloni positif dari media SMAC

merupakan koloni bakteri E.coli dilakukan dengan uji IMVIC dengan hasil yang tampak

pada gambar di bawah dan disajikan seperti pada tabel 4.4 dibawah.

.

17

Gambar 4.4 Hasil uji biokimia dengan media IMViC pada sampel no.1,2,3,4,6,7,8,9

yang memperlihatkan perubahan pada media yang menunjukkan hasil positif fecal coli.

Tabel 4.4 Hasil isolasi Escherichia coli berasal dari es teh setelah

dilakukan uji konfirmasi dengan uji biokimia IMVIC

Kode sampel Escherichia coli (+) pada uji IMVIC

ET1 POSITIF (+) E.coli








18

Pada Tabel 4.4 di atas terlihat bahwa sebanyak 8 dari 10 (80.0%) sampel dari Hasil

uji biokimia dengan media IMViC menunjukkan es teh positif mengandung bakteri

Escherichia coli dari pedagang minuman yang tersebar di wilayah Denpasar

Identifikasi E.coli O157

Hasil positif pada media Mc.Conkey selanjutnya ditanam pada media selektif

SMAC yang diinkubasi pada suhu 35-37° C selama 24 jam untuk diidentifikasi timbulny

koloni yang bening, tidak berwarna (colourless) dimana koloni tersebut diidentifikasi

sebagai E.coli O157 seperti yang ditunjukkan pada gambar di bawah dan disajikan dalam

bentuk tabel berikut.

Gambar 4.5. Hasil inkubasi sampel pada media SMAC suhu 35-37° C selama 24

jam kemudian diamati adanya koloni jernih/tidak berwarna (colourless)

19

Gambar 4.6 Salah satu sampel (no.4) ditanam pada media selektif SMAC yang

diinkubasi pada suhu 35-37° C selama 24 jam dan timbul koloni yang bening, tidak

berwarna (colourless) dimana koloni tersebut diidentifikasi sebagai E.coli O157(dalam

lingkaran dan anak panah hitam).

Tabel 4.5 Hasil isolasi Escherichia coli berasal dari es teh setelah

dilakukan uji konfirmasi pada media SMAC

Kode sampel Escherichia coli O157(+)

pada media SMAC

ET1 POSITIF (+) E.coli O157





ET6 NEGATIF (-) E.coli O157




ET10 NEGATIF (-) E.coli O157

20

Dari tabel 4.5 Dapat dilihat yaitu sebanyak 8 dari 10 (80%) sampel setelah

ditanam pada media SMAC dan diinkubasi tampak adanya koloni barwarna bening/tidak

berwarna (colourless) dimana koloni tersebut diidentifikasi sebagai E.coli O157.

4.2 Pembahasan

Penyakit yang disebabkan oleh adanya infeksi E. coli dapat ditularkan dari

reservoir (sumber) baik dari manusia, karier, hewan maupun dari lingkungan yang sudah

terkontaminasi bakteri E.coli. Bakteri ini dapat menginfeksi manusia secara insidental

melalui produk makanan dan atau minuman yang terkontaminasi tinja manusia. Makanan

dan minuman dapat menjadi sumber kontaminasi termasuk dan air minum maupun produk

olahannya seperti minuman dengan rasa-rasa tertentu maupun dari es batu yang dipakai

mencampur minuman. Minuman dapat terkontaminasi dari bahan baku yang dipakai atau

dapat terjadi selama proses penyiapan, penyajian maupun penyimpanannnya baik

kontaminasi langsung dengan air atau tangan penyaji yang terkontaminasi E. coli.

Para pedagang minuman di warung maupun di pinggir jalan tempat pengambilan

sampel terlihat kurang memperhatikan aspek sanitasi dan hygiene. Tampak dari

pengamatan peneliti , air yang dipakai sebagai bahan baku kadang dipakai berulang dan

dibiarkan dalam suhu ruang (tidak pada suhu dingin). Pertumbuhan mikroorganisme

dalam air juga dipengaruhi oleh faktor lingkungan khususnya temperatur. E.coli sebagai

mikroorganisme mesophilik akan tumbuh secara optimal pada suhu 20oC – 40

oC

8Bila

dibiarkan didalam kontainer atau wadah terbuka maka dapat mempermudah kontaminasi

dari udara luar maupun dari lalat dan binatang serangga lain yang dapat sebagai vektor

pembawa bakteri E.coli.

Penyebab lain adanya faktor kontaminasi bakteri E.coli pada minuman

berhubungan juga kebersihan diri atau higienitas orang yang menyajikan minuman.

21

Apabila tangan penyaji makanan terkontaminasi bakteri E.coli tentu saja ada kemungkinan

minuman yang disajikan terkontaminasi bakteri yang ada di tangan apabila penyaji

tersebut tidak menggunakan sarung tangan sebagai pencegah penularan atau tidak

melakukan cuci tangan yang baik sebelum menyajikan minuman.

Salah satu strain E.coli yang bersifat patogen adalah serotipe O157. Suatu studi

epidemiologis menunjukkan bahwa E.coli pada lingkungan yang kotor sering membawa

Shiga like toxin11

. Manusia merupakan reservoir utama E. coli O157: H7. Air dan

makanan yang tercemar oleh kotoran hewan atau manusia yang mengandung E. coli O157

berfungsi sebagai sumber infeksi11,18

Cukup tingginya persentase kehadiran cemaran E.coli khususnya E.coli O157

pada minuman yang dijual bebas di pinggir jalan mengindikasikan bahwa bahan minuman

perlu diwaspadai sebagai sumber penularan bakteri E.coli khususnya E.coli O157.

22

BAB 5

KESIMPULAN

1. Jumlah minuman es teh dari pedagang minuman di sekitar sekolah di Kota

Denpasar yang terkontaminasi oleh bakteri E.coli adalah sebanyak 8 dari 10 (80%)

sampel.

2. Jumlah minuman es teh dari pedagang minuman di sekitar sekolah di Kota

Denpasar yang terkontaminasi oleh bakteri E.coli serotype O157 adalah sebanyak

8 dari 10 (80%) sampel.

23

DAFTAR PUSTAKA

Acheson, D.W.K., 2000. How does Escherichia coli O157:H7 Testing in Meat Compare

with What We are Seening Clinically. J. Food Production. 63(6): 819-821.

Anonim. Ice Plant. GEA GRADE Grasso Adearest. http://www.grasso-adearest.com/en-

us/Markets/Ice-Plants/Pages/default.aspx. (Akses: 18 Januari 2011)

Bell BP, Goldoft M, Griffin PM, et al. A multistate outbreak of Escherichia coli

O157:H7-associated bloody diarrhea and hemolytic uremic syndrome from

hamburgers: the Washington experience. JAMA 1994; 272: 1349–53

Beutin, L., D. Geier, H. Steinruck, S. Zimmermann, and F. Scheutz, 1993. Prevalence and

Some Properties of Verotoxin (Shiga like toxin)-producing Eschericia coli in Seven

Diffenrent Species of Healthy Domectic Animals. J.Clin. Microbial.31(9) : 2483-

2488.

Brotman, N., R. A. Giannella, P. F. Alm, H. Bauman, A. R. Bennett, R. E. Black, C. N.

Bruhn, M. B. Cohen, S. L. Gorbach, J. B. Kaper, M. R. Robert, J. L. Staneck, S.

Taylor, H. S. Troutt, B. P. Bell, R.L. Buchanan, K. Durham, P. Feng, C. Tukcer

Foreman, R. G. Galler, R. B. Gravani, R. H. Hall, D. D. Hancock, and J.

Hollingsworth. 1995. Consensus Conference Statement. Escherichia coli O157: H7

infection-an emerging national health crisis, July 11-13, 1994. Gastroenterology

108: 1923-1934.

Chabra, Fratamico, P. M., Schultz, F. J., and Cooke. 1999. Factors influencing attachment

of Escherichia coli O157:H7 to beef tissues and removal using selected sanitizing

rinses. J. Protect. 59: 453-459.

Fardiaz, S., 1990. Analisis Mikrobiologi Pangan. Departemen Pendidikan dan

Kebudayaan. Direktorat Jenderal Pendidikan Tinggi PAU Pangan dan Gizi. Institut

Pertanian Bogor.

Heuvelink, A.E., J.T.M. Zwartkruis Nahuis, R.R.Beurner and E.D.Boer. 1999. Occurrence

and Survival of Verocytotoxin Producing Escherichia coli O157 in Meats Obtained

from Retail Outlets in The Netherlands, J. Food Production. 62 (10) : 1115-1121

Jawetz, Melnick, Adelberg's.2007. Enteric Gram-Negative Rods (Enterobacteriaceae) in

Medical Microbiology, 24th Edition, Lange -The McGraw-Hill Companies,USA

Karmali MA, Steele BT, Petric M, Lim C. Sporadic cases of haemolytic-uraemic

syndrome associated with faecal cytotoxin and cytotoxin-producing

Escherichia coli in stools. Lancet 1983; 1: 619–20.

Nishikawa K, Matsuoka K, Kita E, Okabe N, Mizuguchi M, Hino K, Miyazawa S,

Yamasaki C, Aoki J, Takashima S, Yamakawa Y, Nishijima M, Terunuma D,

Kuzuhara H, and Natori Y. 2002. A therapeutic agent with oriented

http://www.grasso-adearest.com/en-us/Markets/Ice-Plants/Pages/default.aspx

http://www.grasso-adearest.com/en-us/Markets/Ice-Plants/Pages/default.aspx

24

carbohydrates for treatment of infections by Shiga toxin-producing

Escherichia coli O157:H7.Department of Clinical Pharmacology, Research

Institute, International Medical Center of Japan, 1-21-1 Toyama, Shinjuku-

ku, Tokyo 162-8655, Japan; www.pnas.org_cgi_doi_10.1073_pnas.

112058999 PNAS _ May 28, 2002 _ vol. 99 _ no. 11 _ 7669–7674

Potter ME, Motarjemi Y, Kaferstein FK. Emerging foodborne disease. World

health, 1997, 1:16—17.

Suryawirya, U., 1996. Mikrobiologi Air dan Dasar-dasar Pengolahan Buangan Secara

Biologi. Alumni Bandung.

Suthisarnsuntorn U : Bacteria Causing Diarrheal Diseases & Food Poisoning, DTM&H

Course 2002, Faculty of Tropical Medicine, Mahidol University, Bangkok,

Thailand.

Sutrisno, C.T dan E. Suciastuti., 1987. Teknologi Penyediaan Air Bersih. Penerbit: P.T.

Bina Aksara, Jakarta.

Todar, K., 1997. Bactheriology 330 Lecture Topics : Patogenic E. coli. University of

Wisconsin Departement of Bacteriology. http//www.bact.wisc.edu/Bact

330/Lecturecoli.

http://www.pnas.org_cgi_doi_10.1073_pnas/

25

LAMPIRAN

BIOGRAFI / DAFTAR RIWAYAT HIDUP

KETUA PENELITI

1. Nama lengkap dan gelar : dr. Made Agus Hendrayana,M.Ked

2. Tempat / tanggal lahir : Denpasar, 17 Juli 1978

3. NIP : 197807172006041004

4. Pangkat/Gol. : Penata / III c

5. Bagian : Mikrobiologi

6. Alamat Rumah : Jl.Soka gg.VI no:50 B – Denpasar

7. HP / email : 08123921590 / [email protected]

8. Pendidikan (dari sarjana muda / yang sederajat ke atas )

UNIVERSITAS / INSTITUT

DAN LOKASI

GELAR

TAHUN

BIDANG STUDI

1. Fakultas Kedokteran UNUD

2. Fakultas Kedokteran UNAIR

Dokter

M.Ked

2003

2010

Dokter Umum

Ilmu Kedokt. Tropis

Pendidikan non-gelar

1). Short couse and workshop Tropical infectious diseases, Unsyah, Banda Aceh, 2008

2). Summer school on Molecular Biology and Tropical Infectious Disease, University of

Goettingen, German, 2009

9. Pengalaman kerja dalam penelitian dan pengalaman professional serta kedudukan saat

ini. (disusun secara kronologis ).

26

INSTITUSI

JABATAN

PERIODE KERJA

I. Pengalaman Kerja :

1. Dosen FK UNUD

2. Anngota SMF. Mikrobiologi

Klinik, FK UNUD/RS.Sanglah

3. Peneliti Tropical Disease Center

UNAIR.

Asisten Ahli

Anggota

Anggota peneliti

2004 s/d sekarang

2005 s/d sekarang

2008 s/d sekarang

10. Penelitian yang pernah dilakukan

Judul Penelitian Kedudukan Sumber dana Tahun

Identifikasi bakteri patogen sebagai penyebab

wabah diare dari sumber mata air dan hapusan

dubur penderita di Kecamatan Selat,

Karangasem, Bali

Ketua

Peneliti

Pengmas FK-

UNUD

2008

Pola distribusi genotipe VHB dan Subtipe

VHC di Puskesmas Mengwi I

Ketua

Peneliti

DP2M Dikti 2009

Analisis genotipe, subgenotipe dan subtipe

VHB di Mengwi, Badung

Ketua

Peneliti

BPPS Dikti 2009

Identifikasi Gen ctx-A dengan Metode PCR

dari Bakteri Vibrio Cholera serotype O1 pada

Es Batu dan Air Es Pendingin Tempat

Penyimpanan Hasil Laut

Ketua

Peneliti

Litbang

FK UNUD

2010

Identifikasi Gen Shiga-like toxin SLT II atau

VT2 dari Bakteri Escherichia coli O157 Pada

Daging Babi di Kota Denpasar

Anggota

Peneliti

Litbang

FK UNUD

2010

27

Identifikasi Gen ctx-A dari DNA Bakteri Vibrio

Cholera serotype O1 dengan Metode PCR

pada Air Laut di Pantai Wisata Seluruh Bali

Anggota

Peneliti

Litbang

FK UNUD

2011

Analisis genotipe dan subgenotipe virus

hepatitis B pada DNA gen regio s (surface)

dari ibu hamil dengan HBsAg positif di

wilayah Batubulan, Gianyar, Bali

Ketua

Peneliti

Litbang

FK UNUD

2011

( dr. Made Agus Hendrayana, M.Ked )

28

LAMPIRAN

DOKUMENTASI PENELITIAN

laporan penelitian identifikasi serotipe bakteri ... · laporan penelitian identifikasi serotipe...

Documents