lap. bakteri upi

7/21/2019 Lap. Bakteri Upi

1/28


2/28

Bakteri atau mikroba lainya dapat di lihat dengan mikroskop biasa tanpa yaitu

dengan cara-cara khusus, misalnya dengan cara tetesan bergantung,menggunakan

kondensor medan gelap dan lain-lain.)etapi pengamatan dari pewarnaan ini lebih sukar

dan tidak di pakai untuk melihat bagian-bagian sel dengan teliti, karena sel bakteri dan

mikroba lainya transparan. Melihat dan mengamati bakteri dalam keadaan hidup sangat

sulit, karena selain bakteri itu tidak berwarna uga transparan dan sangat kecil untuk

mengatasi hal tersebut maka di kembangkan suatu teknik pewarnaan bakteri ,sehingga sel

dapat terlihat elas dan mudah di amati. &leh karena itu teknik pewarnaan sel bakteri ini

merupakan salah satu cara yang paling utama dalam penelitian-penelitian mikrobiologi

(Dwioseputro, *++$.

Macam macam pewarnaan

. /ewarnaan negatif

/ada pewarnaan ini merupakan pewarnaan tidak langsung karena yang di warnai adalah

latar belakangnya, sedangkan bakerinya sendiri tidak mengalami pewarnaan. 0at warna yang di

gunakan adalah nigrosin.

B. /ewarnaan sederhana

/ewarnaan sederhana adalah pewrnaan yang menggunakan at warna yang tunggal

bertuuan untuk mengindentifikasi morfologi sel bakteri. /ada pewarnaan ini at warna yang

kami gunakan adalah gentiana 'iolet.

1. /ewarnaan gram/ewarnaan gram atau metode gram adalah salah satu teknik pewarnaan yang paling

penting dan luas di gunakan untuk mengidentifikasi bakteri. Dalam proses ini, olesan bakteri

yang sudah terfiksasi di kenai larutan-larutan berikut at pewaraan 2ristal 'iolet, larutan yodium,

larutan akohol(bahan pemucat$ dan at pewarnaan tandinganya berupa at warna safranin atau

air fucshin. Metode ini di beri nama berdasarkan penemunya, ilmuwan Denmark Hans 1hristian

3ram (!#4-!"4#$ yang mengembangkan teknik ini pada tahun !##5 untuk membedakan antara

pneumokokus dan bakteriKlebsiela, pneumonia.Bakteri yang telah diwarnai dengan metode ini

dibagi menadi dua kelompok yaitu, bakteri gram positf dan bakteri gram negatif. Bakteri garam

positif akan memprtahankan at pewarna kristal 'iolet dan karenanya akan tampak berwarna

ungu tua di bawah mikroskop. dapun bakteri gram negatif akan kehilangan at pewarna 2ristal

'iolet setelah dicuci dengan alkohol dan sewaktu diberi at pewarna tandingnya yaitu dengan at


3/28

pewarn air fucshin atau safranin akan tampak berwarna merah. /erbedaan warna ini di sebabkan

oleh perbedaan dalam struktur kimiawi dinding selnya (/elcar, *++6$. Bakteri gram positif adalah bakeri yang mempertahankan at warna metal ungu sewaktu

proses pewarnaan gram. Bakteri enis ini akan berwarna biru atau ungu di bawah mikroskop

sedangkan bakteri gram negatif akan berwarna merah atau merah muda. /erbedaan klasifikasi

antara kedua enis bakteri ini terutama berdasarkan pada perbedaan struktur dinding sel

bakteri .Bakteri gram negatif adalah bakteri yang tidak mempertahankan at metal ungu pada

metode pewarnaan gram. Bakteri gram-positif akan mempertaahankan warna ungu gelap setelah

di cuci dengan alkohol.Sementara bakteri gram-negatif tidak. /ada ui pewarnaan gram suatu pewarnaan

penimbal (conterstain$di tambahkan setelah metil ungu, yang membuat semua bakteri gram-

negatif menadi berwarna merah atau merah muda. /enguian ini berguna untuk

mengklasifikasikan kedua tipe bakteri ini perbedaan struktur dinding selnya. Banyak spesies

organisme inang, sifat pathogen ini umumnya berkaitan dengan komponen tertentu pada dinding

sel gram-negatif terutama lapisan lipopolisakarida (/elcar, *++6$.

D. /ewaranaan spora7 flagelSpora bakteri adalah bentuk bakteri yang sedang dalam usaha mengamankan diri

terhadap pengaruh buruk dari luar.spora bakteri mempunyai fungsi yang sama sepertti kristal

amoeba, sebab bakteri dalam bentuk spora dan amoeba dalam bentuk 2ristal merupakan suatu

fase di mana kedua mikroorganisme itu berubah bentuk untuk melindungi diri terhadap faktor

luar yang tidak menguntungnkan. 8ndospora hanya terdapat pada bakteri merupakan tubuh

dinding yang tebal yang sangat refraktif, dan sangat resisten. Dihasilkan oleh semua spesies

basillus, clostidum, dan sporosarcina. Bakteri yang mampu membentuk endospora dapat tumbuh

dan bereproduksi selama banyak generasi sehingga sel 'egetatif. 9amun pada beberapa tahapan

di dalam pertumbuhanya, teradi sintesis protoplasma baru dalam sitoplasma 'egetatifnya yang

di maksudkan untuk menadi spora (/elcar, *++6$.

Bentuk spora ada yang bulat, ada pula yang bulat panang. Hal ini tergantung oleh

spesisesnya endospora ada yang lebih kecil ada pula yang lebih besar dari pada diameter sel

induk. :etak sel di dalam sel serta ukurannya dalam pembentukanya tidaklah sama bagai semua

spesies. Sebagai contoh beberapa spora adalah sental yang dibentuk ditengah-tengah sel, yang

kedua adalah terminal yang dibentuk diuung, ketiga yaitu subterminal yang dibentuk di dekat

uung. /ada umumnya sporulasi itu mudah teradi ika keadaan medium memburuk dan at-at

yang timbul sebagai at-at pertukaran at bertimbun-timbun dan faktor-faktor luar lainya


4/28

merugikan tetapi pada beberapa spesies mampu membentuk spora meskipun tidak terganggu

oleh faktor luar. Sporulasi dapat di cegah, ika selalu diadakan pemindahan piaraan ke medium

yang baru, beberapa spesies bakteri dapat kehilangan kemampuanya untuk membentuk spora-

spora dapat tumbuh lagi menadi bakteri apabila keadaan di luar menguntungkan. Mula-mula air

meresap ke dalam spora, kemudian spora mengembang dan kulit spora menadi retak karenanya

keretakan ini dapat teradi pada salah satu uung. )etapi uga dapat teradi di tengah-tengah

spora. Hal ini merupakan cirri khas bagi beberapa spesies bacillus, ika kulit spora pecah di

tengah-tengah maka masing-masing pecahan akan merupakan suatu tutup pada kedua uung

bakteri (/elcar, *++!$.

dapun faktor-faktor yang mempengaruhi pewarnaan bakteri sebagai berikut;

!.


5/28

0at warna lawan adalah suatu at warna basa yang berbeda warnanya dengan at warna

mula-mula yang digunakan. 3unanya adalah untuk memberikan warna pada sel-sel yang berbeda

warnanya dengan at warna mula-mula. 0at warna penutup diberikan pada akhir pewarnaan

dengan tuuan untuk memberikan kontras pada sel-sel yang tidak menyerap at warna utama

(Sutedo, !""!$.

BAB III

ET!DE KE"JA

#.1 $aktu %an te&'at

/raktikum mikrobiologi mengenai pewarnaan di laksanakan pada hari ?abu +@ pril *+!!

pukul !+.++-!*.++ A>). Bertempat di laboratorium Mikrobiologi dan Bioteknologi lmu /engetahuan lam %ni'ersitas Mulawarman Samarinda .

#.2 Alat %an ba(an

#.2.1Alat)alat

- :ampu bunsen

- /ipel

- &bek glass (kaca presparat dan penutup$- )abung reaksi

- arum oase

- Mikroskop- 2ipas angin

- 2aca tipis

- Spatula- 3unting

- Spritus

- 2ertas saring

- /inset- 1o'er glass

- /ensil

- 2ertas

#.2.2 Ba(an) ba(an

- Cuades

- lkohol " = 6+ - Biakan murni satu enis bakteri

- 0at warna 2ristal 'iolet

- 9igrosin

- :arutan logolEs


6/28

- Malachite green

- )issue

- 1rystal 'iolet- Safranin

- Methylen

- Media 9a- 9igrap

- )inta cina

#.# *ara kerja

#.#.1 Pe+arnaan ,e%er(ana

!. Disterilkan kaca preparat dengan alkohol 6+*. Dikeringkan (dilap$ dengan tissue

4. Difiksasi diatas lampu bunsen

5. Ditetesi akuades. Difiksasi sampai tetesan akuades menyerap dan berbekas diatas kaca preparat

@. Diambil secara aseptis suatu koloni dengan menggunakan arum ose6. Difiksasi diatas lampu bunsen, setelah kering, ditetesi larutan crystal 'iolet, biarkan !-* menit

#. 1uci dengan air mengalir sampai at warnanya hilang". 2eringkan kaca preparat

!+. mati dengan mikroskop, dan catat hasilnya

#.#.2 Pe+arnaan negat-

!. Disterilkan kaca preparat dengan alkohol 6+

*. Dikeringkan (dilap$ dengan tissue4. Difiksasi diatas lampu bunsen

5. Ditetesi akuades

. Difiksasi sampai tetesan akuades menyerap dan berbekas diatas kaca preparat@. Diambil secara aseptis suatu koloni dengan menggunakan arum ose6. Diambil larutan nigrosin (tinta cina$

#. 2eringkan (anginkan$ kaca preparat

". mati dibawah mikroskop dan catat hasilnya

#.#.# Pe+arnaan gra&

!. Disterilkan kaca preparat dengan alkohol 6+*. Dikeringkan (dilap$ dengan tissue

4. Difiksasi diatas lampu bunsen

5. Ditetesi akuades

. Difiksasi sampai tetesan akuades menyerap dan berbekas diatas kaca preparat@. Diambil secara aseptis suatu koloni dengan menggunakan arum ose

6. 2eringkan dan fiksasi diatas lampu bunsen

#. Setelah kering, teteskan at warna crystal 'iolet sebanyak *-4 tetes dan diamkan selama ! menit". 1uci dengan air mengalir dan keringkan

!+. )eteskan lagi dengan larutan lugol, dan biarkan selama ! menit, lalu cuci dengan air mengalir,

dan keringkan.


7/28

!!. 1uci lagi dengan alkohol 6+ selam 4+ detik

!*. 1uci dan keringkan

!4. Berikan larutan basil fuchsin atau safrina selama * menit!5. 1uci dengan air mengalir dan keringkan

!. mati dengan mikroskop dan catat hasilnya

#.#./ Pe+arnaan ,'ora

!. Disterilkan kaca preparat dengan alkohol 6+

*. Dikeringkan (dilap$ dengan tissue4. Difiksasi diatas lampu bunsen

5. Ditetesi akuades

. Difiksasi sampai tetesan akuades menyerap dan berbekas diatas kaca preparat

@. Diambil secara aseptis suatu koloni dengan menggunakan arum ose6. )utup koloni tersebut dengan menggunakan kertas saring

#. )eteskan *-4 tetes malachite green

". Difiksasi diatas lampu bunsen

!+.

Diamkan selama ! menit, setelah itu lepas kertas saring!!. Bilas dengan akuades selama 4+ detik

!*. )eteskan safranin selama 4+ detik!4. 2eringkan

!5. mati dengan mikroskop dan catat hasil

BAB I0

HASIL DAN PEBAHASAN

/.1 Ha,-l 'enga&atan

)abel hasil pengamatan pewarnaan dan cara-cara pewarnaan

9

o

/ewarnaan 2eterangan

!.

/ewarnaan sederhana /erbesaran 5+ F !+ Bentuk sel seperti batang yang biasa

disebut basil Berwarna ungu


8/28

*. /ewarnaan negati'e

/erbesaran 5+ F !+

Bentuk sel seperti batang atau sering

disebut basil. Berwarna ungu kemerah-merahan.

4. /ewarnaan gram

/erbesaran 5+ F !+ Bentuknya batang yang sering du sebut

dengan basil. Berwarna merah dan sekitarnya

berwarna orange.

5. /ewarnaan spora

/erbesaran 5+ F !+ Bentuk bakteri basil Sporanya berwarna hiau Mikrobannya berwarna orange

/.2 Pe&ba(a,an

Macam-macam pewarnaan yang di lakukan dalam praktikum tentang cara-cara

pewarnaan antara lain ;

a. /ewarnaan sederhana

)uuan dari pewarnaan sederhana adalah mengidentifikasi morfologi sel bakteri dengan

menggunakan at warna tunggal. /rinsipnya yaitu pewarnaan ini hanya menggunakan satu


9/28

macam at warna saa. Sebelum at warna difiksasi terlebih dahulu pewarnaan ini dipakai untuk

melihat bentuk-bentuk bakteri. 0at warna yang di gunakan adalah Methylen blue, 1rystal 'iolet,

basic fuchin atau safranin.


10/28

1rystal 'iolet yang berfungsi membentuk ikatan mg-?ibonucleid acid pada

membran7dinding sel bakteri sehingga membentuk kompleks mg-?ibonucleid acid- crystal

'iolet. 2ompleks ini merupakan senyawa yang tidak luntur dengan alkohol.

:ugolEs ladin yang berfungsi sebagai penguat ikatan pada kompleks mg-?ibonuclead acid.

lkohol " berfungsi mencuci lemak pada dinding sel bakteri.

Safranin berfungsi sebagai ar warna tandingan (lawan$ luruh nya kompleks mg-

?ibonucleid acid- crystal 'iolet dari dinding sel bakteri gram negatif (/elcar, *++6$.

d. /ewarnaan Spora

)uuan dari pewarnaan spora yaitu mengenal dasar-dasar kimiawi pada pewarnaan spora

dan kinera dari prosedur untuk membedakan spora bakteri dan bentuk 'egetatif. /rinsip pada

pewarnaan ini pemanasan akan mengembangkan lapisan luar spora sehingga brwarna hiau.

Melalui pendinginan utama akan terperangkap didalam spora dengan pencucian at warna utama

yang da pada sel 'egetatif akan terlepas, sehingga pada pewarnaan yang kedua(safranin$ sel

'egetatif akan berwarna merah.


11/28

sel tebal berupa peptidoglikan yang terletak di antara membran dalam dan luarnya, bakteri ini

uga bersifat patogen yang berarti mereka berbahaya bagi organisme inang. Sifat patogen ini

umumnya berkaitan dengan komponen tertentu pada dinding gram negatif terutama lapisan

lipopolisakarida (dikenal uga dengan lapis atau endotoksin$. Disisi lain, bakteri gram positif

akan berwarna ungu perbedaan keduanya didasarkan pada perbedaan struktur dinding sel yang

berbeda dan dapat dinyatakan oleh prosedur pewarnaan gram. Bakteri gram negatif seperti

Staphylococcus aureus (bakteri pathogen yang umumnya pada manusia$ hanya memiliki

membrane plasma tunggal yang dikelilingi membrane plasma tebal berupa peptidoglika sekitar

"+ dari dinding sel tersebut tersusun atas peptidoglika sedangkan sisanya berupa molekul lain

bernama asam teikoat (/elcar, *++6$.


12/28

a. Bakteri gram positif yaitu bakteri yang mengikat at warna utama dengan kuat sehingga tidak

dapat dilunturkan oleh peluntur dan tidak dapat diwarnai lagi oleh at warna lawan. (pada

pengamatan kali ini bakteri bewarna 'iolet$.

b. Bakteri gram negati'e yaitu bakteri yang bersifat kebalikan dari gram positif (yang pada kali ini

bakteri tampak berwarna merah$.

- 0at warna yang digunakan dalam pewarnaan kali ini adalah; crystal 'iolet, safranin, lugolEs

lodin, dan malachite green.

.2 Saran

Sebaiknya pada praktikum selanutnaya praktikum lebih berhati-hati dan teliti pada saat

pengeraan agar hasil yang diperoleh lebih 'alid. Selain itu kerasama antar praktikum dan

asisten uga lebih di tingkatkan lagi agar praktikum beralan dengan lancer.

DATA" PUSTAKA

Dwidoseputro, D. *++.Dasar-Dasar Mikrobiologi.akarta ; Dambatan.

/elcar, M..*++6.Dasar-Dasar Mikrobiologi. akarta ; %> /ress.

Sutedo, M.!""!.Mikrobiologi anah. akarta ; ?hineka 1ipta.


13/28

BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Mikroorganisme adalah mahluk hidup kosmopolitan, terdapat dimana-mana. Bisa terdapat

di dalam air dan tanah, makanan, hewan dan tumbuhan, serta manusia. 2eberadaan dan besarnya

populasi mikroorganisme sangat penting untuk diketahui dan dipelaari karena memiliki

karakteristik dan peran yang sangat erat interaksinya baik dengan lingkungan abiotik maupun

lingkungan abiotiknya. Besarnya populasi mikroorganisme dapat menentukan kualitas suatu

produk, menentukan tata guna sumber daya, menentukan tingkat kesuburan suatu lahan dan lain-

lain.

1.2 Tujuan Prakt-ku&

!$ Membuat media 297!utrient "gar*$ Melakukan sterilisasi alat dan bahan yang digunakan dalam praktikum

4$ Menghitung umlah bakteri pada setiap milliliter sampel

5$ Membuat sediaan mikroskopik

$ Melaksanakan tahapan-tahapaan pewarnaan gram@$ Menentukan karakteristik bakteri berdasarkan hasil dari pewarnaan gram

BAB II

LANDASAN TE!"I

2.1 e%-a Pertu&bu(an -kroorgan-,&e


14/28

Media berfungsi untuk menumbuhkan mikroba, isolasi, memperbanyak umlah, mengui

sifat-sifat fisiologi dan perhitungan umlah mikroba, dimana dalam proses pembuatannya harus

disterilisasi dan menerapkan metode aseptis untuk menghindari kontaminasi pada media. Berikut

ini beberapa media yang sering digunakan secara umum dalam mikrobiologi.

9utrient gar

9utrien agar adalah medium umum untuk ui air dan produk dairy. 9 uga digunakan

untuk pertumbuhan mayoritas dari mikroorganisme yang tidak selektif, dalam artian

mikroorganisme heterotrof. Media ini merupakan media sederhana yang dibuat dari ekstrak beef,

pepton, dan agar. 9a merupakan salah satu media yang umum digunakan dalam prosedur

bakteriologi seperti ui biasa dari air, sewage, produk pangan, untuk membawa stok kultur, untuk

pertumbuhan sampel pada ui bakteri, dan untuk mengisolasi organisme dalam kultur murni.

%ntuk komposisi nutrien adar adalah eksrak beef !+ g, pepton !+ g, 9a1l g, air desitilat !.+++

ml dan ! g agar7:. gar dilarutkan dengan komposisi lain dan disterilisasi dengan autoklaf pada

!*!1 selama ! menit. 2emudian siapkan wadah sesuai yang dibutuhkan.

2.2 Ster-l-,a,- %an De,-nek,-

Sterilisasi dapat diartikan sebagai membunuh semua mikroorganisme termasuk

spora bakteri pada benda yang telah didekontaminasi dengan tepat. )uuan Sterilisasi adalah

memusnahkan semua bentuk kehidupan mikroorganisme patogen termasuk spora, yang mungkin

telah ada pada peralatan kedokteran dan perawatan yang dipakai. Sterilisasi dapat dilakukandengan cara;

!. Sterilisasi dengan pemanasan kering

a. /emiaran7flambir

1ara ini dipakai langsung dan sederhana selain itu, cepat dan dapat menamin

sterilisasinya,hanya penggunaannya terbatas pada beberapa alat saa, misalnya;

- Benda-benda dari logam (instrument$

- Benda-benda dari kaca.

- Benda-benda dari porselen.

b. Dengan cara udara panas kering

1ara ini pada dasarnya adalah merupakan suatu proses oksidasi, cara ini memerlukan suhu

yang lebih tinggi bila dibandingkan dengan sterilisasi pemanasan basah.


15/28

*. Sterilisasi dengan penambahan at-at kimia

1ara ini tidak begitu efektif bila dibandingkan dengan cara pemanasan kering. 1ara ini

dipergunakan pada bahan-bahan yang tidak tahan pemanasan atau cara lain tidak bisa

dilaksanakan karena keadaan.

1ontoh at kimia ;


16/28

:arutan stabil

Mudah digunakan dan ekonomis

)uuan dari sterilisasi dan desinfeksi adalah;

Mencegah teradinya infeksi

Mencegah makanan menadi rusak

Mencegah kontaminasi mikroorganisme dalam industri

Mencegah kontaminasi terhadap bahan- bahan yg dipakai dalam melakukan biakan

murni.

2.# Pe+arnaan -kroorgan-,&e

Melihat dan mengamati bakteri dalam keadaan hidup sangat sulit, kerena selain bakteri itu

tidak berwarna uga transparan dan sangat kecil. %ntuk mengatasi hal tersebut maka

dikembangkan suatu teknik pewarnaan sel bekteri, sehingga sel dapat terlihat elas dan mudah

diamati. &lek karena itu teknik pewarnaan sel bakteri ini merupakan salahsatu cara yang paling

utama dalam penelitian-penelitian mikrobiologi (?iki, *++#$.

Macam-macam pewarnaan (Gulneriwanti, *++#$ ;

!. /ewarnaan negatif

- Bakteri tidak diwarnai, tapi mewarnai latar belakang

- Dituukan untuk bakteri yang sulit diwarnai, seperti spirochaeta

*. /ewarnaan sedehana

- Menggunakan satu macam at warna (biru metilen7air fukhsin$

- )uuan hanya untuk melihat bentuk sel

4. /ewarnaan diferensial

- menggunakan lebih dari satu macam at warna- )uuan untuk membedakan antar bakteri

- 1ontoh; /w. 3ram, /w. Bakteri )ahan sam

5. /ewarnaan khusus

- %ntuk mewarnai struktur khusus7tertentu dari bakteriI kapsul, spora, flagel dll


17/28

1ara pewarnaan negatif

/ewarnaan 3ram atau metode 3ram adalah suatu metode empiris untuk membedakan

spesies bakteri menadi dua kelompok besar, yakni gram-positif dan gram-negatif, berdasarkan

sifat kimia dan fisik dinding sel mereka. Metode ini diberi nama berdasarkan penemunya,

ilmuwan Denmark Hans 1hristian 3ram (!#4!"4#$ yang mengembangkan teknik ini pada

tahun !##5 untuk membedakan antara pneumokokus dan bakteri 2lebsiella pneumoniae

(filahany, *++#$. Bakteri 3ram-negatif adalah bakteri yang tidak mempertahankan at warna

metil ungu pada metode pewarnaan 3ram. Bakteri gram-positif akan mempertahankan at warna

metil ungu gelap setelah dicuci dengan alkohol, sementara bakteri gram-negatif tidak. /ada ui

pewarnaan 3ram, suatu pewarna penimbal (counterstain$ ditambahkan setelah metil ungu, yang

membuat semua bakteri gram-negatif menadi berwarna merah atau merah muda hal ini

dikarenakan bakteri gram negatif smemiliki 4 lapisan dinding sel. :apisan terluar yaitu

lipoposakarida (lipid$ kemungkinan tercuci oleh alkohol, sehingga pada saat diwarnai dengan

safranin akan berwarna merah sedangkan pada bakteri gram positif memiliki selapis dinding sel

berupa peptidoglikan yang tebal. Sehingga setelah pewarnaan dengan kristal 'iolet, pori-pori

dinding sel menyempit akibat dekolorisasi oleh alkohol dan akhirnya dinding sel tetap menahan

warna biru. /enguian ini berguna untuk mengklasifikasikan kedua tipe bakteri ini berdasarkan

perbedaan struktur dinding sel mereka (filahany, *++#$.

2./ orolog-

/ada bakteri umumnya dikenal 4 macam bentuk yaitu kokus, basil, dan spiral.

a. 2okus

2okus berasal dari kata coccus yang berarti bola, adi kokus adalah bakteri yang

bentuknya serupa bola-bola kecil. Beberapa kokus secara khas ada yang hidupnya sendiri-

sendiri, ada yang berpasangan, atau rantai panang bergantung. 1aranya membelah diri dan

kemudian melekat satu sama lain setelah pembelahan. 3olongan kokus tidak sebanyak golongan

basil. 2okus ada yang berdiameter +, Jm adapula yang diameternya sampai *, Jm. /ada

bentuk kokus ada beberapa tipe morfologi diantaranya adalah;

!. Streptococcus

2okus yang bergandeng-gandeng panang serupa tali leher. Streptococcus dicirikan dengan sel-


18/28

sel yang membelah menadi dua kokus, yang pada pembelahan berikutnya tidak memisahkan

diri, biasanya dengan meninggalkan dua kokkus yang melekat satu sama lain. 2okus yang

senantiasa membelah dalam satu bidang namun tidak memisahkan diri membentuk rantai

kokkus. Berdiameter +, !,* mikron

*. Sarcina

2okus yang mengelompok serupa kubus,yaitu kokus membelah ke dalam tiga bidang yang tegak

lurus satu sama lain membentuk paket kubus Berdiameter 5,+ 5, mikron.

4. Staphylococcus

2okus yang mengelompok merupakan suatu untaian yaitu kokus yang membelah dalam dua

bidang yang membentuk dua gugusan yang tidak teratur bagaikan buah anggur. Berdimeter +,#

!,+ mikron

5. Diplococcus

2okus yang bergandengan dua-dua.

. )etracoccus

2okus yang mengelompokkan berempat

b. Basil

Basil berasal dari kata bacillus yang artinya tongkat pendek atau batang kecil silindris.

Bakteri yang berbentuk basil adalah bakteri yang bentuknya menyerupai tongkat pendek atau

batang kecil silindris. Basil mempunyai bentuk dan ukuran yang beraneka ragam. %ung

beberapa basillus di antaranya ada yang berupa batang rokok dan ada yang berbentuk seperti

cerutu. Basil uga sama seperti kokkus ada yang bergandeng-gandengan panang yang disebut

Streptobasil, ada yang bergandengan dua-dua yang disebut diplobasildan ada yang terlepas satu

sama lain. %ung-uung basil yang terlepasa satu sama lain itu tumpul, sedang uung-uung yang

masih bergandengan itu taam. kan tetapi bila ditinau dari segi pembelahan basil membelah

hanya dalam satu bidang sehingga disebut sebagai sel tunggal. Beberapa basil ada yang

bentuknya hampir sama dengan kokkus yaitu lebar dan panangnya sama serta bentuknya

lonong sehingga disebut koko basil. Basil ada yang lebarnya antara +,* sampai *,+ J, sedang

panangnya ada yang satu sampai ! J.

c. Spiral


19/28

Spiral adalah bakteri yang bengkok atau tidak lurus atau berbentuk silinder. Bakteri yang

berbentuk spiral itu tidak banyak terdapat. Spiral terbagi menadi tiga bentuk diantaranya ;

!. Kibrio atau bakteri koma

Batang melengkung seperti koma dan kadang membelit seperti huruf S. Mempunyai spiral yang

pendek.

*. Spiril

Bentuknya seperti spiral atau seperti lilitan. >ndi'idu-indi'idu sel yang tidak saling melekat

4. Spirocheta

Bentuknya seperti spiral tetapi pergerakannya sangat aktif yang dimungkinkan karena adanya

flagela yang membelit diketahui bentuk aslinya.

BAB III


20/28

ET!DE P"AKTIKU

#.1 $aktu %an Te&'at Prakt-ku&

/raktikum !

Aaktu; 2amis, ** Desember *+!!,

/ukul; !+.++ A>B s7d !*.++ A>B

/raktikum *

Aaktu; umEat, *4 Desember *+!!

/ukul; +6.4+ A>B s7d !!.++ A>B

/raktikum 4

Aaktu; Sabtu, *5 Desember *+!!

!+.++ A>B s7d !*.++ A>B

)empat /raktikum; :aboratorium Mikrobiologi /

#.2 Alat %an Ba(an

#.2.1 Pe&buatan e%-a Agar %an Ster-l-,a,-

lat ;

Beaker glass

Batang pengaduk

)abung reaksi

pH indikator

2ertas saring

2apas

/embakar

Bahan ;

Daging tanpa lemak

Cuades

Bacto pepton

gar-agar


21/28

9a1l

#.2.2 eto%e Pengenceran *a+an Tuang 3Plate count agar)

lat ;

)abung reaksi

/ipet 'olume ! ml steril

1awan petri steril

Spidol

:ampu bunsen

/enangas air

Bahan ;

Cuadest air

2aldu nutrisi agar

Sampel (apel, minuman botol$

#.2.# Pe+arnaan 4ra&

lat ;

Mikroskop

:ampu spirtus

arum7lup inokulasi

Botol semprot

Staining ar

&bek glas

Bahan ;

Biakan bakteri umur *5 am

2ristal 'iolet


22/28

:arutan iodium

Safranin

lkohol "@


23/28

#.# Pro,e%ur kerja

#.#.1 Pe&buatan e%-a Agar %an Ster-l-,a,-

Buatlah ekstrak daging (daging +,* kg direbus dalam ++ ml hingga 'olume menadi

setengahnya atau direbus selama !-* am $

Saring ekstrak daging dengan kertas saring, kemudian tambahkan akuades hingga 'olume

menadi ++ ml.

Masukkan pepton ,+ g 9a1l *, g dan agar-agar 6, g kemudian panaskan suspensi tersebut

hingga mendidih selama ! menit dengan menggunakan magnetic stirer with hot plate.

%kur pH, usahakan pH menadi @,@-6,4.

Buatlah agar diri dengan menggunakan tabung reaksi. %ntuk agar diri ke dalam tiap tabung

isikan !*-! suspensi agar dan. %ntukplate count agar(/1$ isi tiap tabung dengan " ml

medium.

)utup semua tabung reaksi dengan kapas sebaik mungkin, sterilkan semua tabung dan cawan

petri dengan menggunakan autoklaf selama !-*+ menit pada suhu !*!o1

Setelah disterilkan, untuk agar diri biarkan dalam keadaan tegak.

#.#.2 eto%e Pengenceran *a+an Tuang 3Plate count agar5

Sediakan @ tabung reaksi masing-masing berisi " ml aCuadest steril, letakkan berurutan dan

beri tanda ! s7d @

Buatlah pengenceran dari sempel yang akan diperiksa mulai dari pengenceran !+-!, !+-*,L

sampai dengan pengenceran !+-, dengan cara memasukkan ! ml sampel kedalam tabung

reaksi pertama kemudian kocok maka konsentrasi menadi !+ -!. 2emudian pipet ! ml larutan

dari tabung pertama masukkan ke tabung kedua dan kocok sampai homogen, konsentrasi

larutan menadi !+-*demikian seterusnya sampai tabung keenam.

Sediakan tiga cawan petri steril , letakkan berurutan dan beri tanda !+ -4 , !+-5, !+- dengan

spidol atau label

mbil larutan dari tabung ke 5, ke , dan ke @ masing-masing ! ml dengan menggunakan

pipet steril dan memasukkan ke dalam cawan petri steril yang sudah diberi tanda.

Siapkan medium kaldu nutrisi agar cair dengan suhu 5+-5o1 sebanyak 4 tabung masing-

masing berisi " ml kaldu nutrisi agar.


24/28

Masukkan kaldu nutrisi agar ke dalam cawan petri yang berisi larutan sampel, satu tabung

29 untuk satu petri, goyangkan hingga homogen dengan cara memutar searah arum am

dan berlawanan arah arum am diatas mea, biarkan hingga dingin dan mengeras.

>nkubasikan pada suhu **-46

o

1 selama *5-5# am di dalam inkubator.

Hitung umlah koloni menggunakan colony counter.

%ntuk menentukan umlah bakteri coli per ml sampel, umlah koloni dikalikan dengan

pengenceran. Misalnya pada pengenceran !+- didapatkan koloni sebanyak !++, adi umlah

bakteri per ml sampel adalah !++ F !+.

#.#.# Pe+arnaan 4ra&

Siapkan kaca preparat yang sudah di tetesi air

)aruh biakan yang akan diwarnai


25/28

/.1 Tabel Ha,-l Penga&atan 3eng(-tung Bakter-5

Sampel ; makanan

)anggal ; *5 Desember *+!!

/engenceran umlah 2oloniumlah bakteri 7

ml sampel2arakteristik bakteri

!+-4 !! !! F !+41


26/28

Bentuk sel ; Batang

?angkaian sel ; memanang

Aarna sel ; ungu

3aram ; (=$ positif

3ambar ; bakteri pada makanan

BAB 0

KESIPULAN

Dari hasil pengamatan yang kami peroleh dari bakteri makanan dan minuman yang

diambil dari buah apel dan teh madu, ditemukan bakteri pada makanan (buah apel$ bentuk

selnya batang, rangkaian selnya memanang, bewarna ungu, gram (=$, enis

mikroorganismenya Streptobasil. Sedangkan dalam minuman (the madu$, ditemukan bakteri


27/28

yang bentuk selnya bulat, rangkaian selnya berkumpul, bewarna ungu, gram (=$, enis

mikroorganismenya Staphylococcus.

Hasil pengamatan yang kami peroleh umlah bakteri makanan pada pengenceran !+-

terdapat !+ koloni bakteri, umlah bakteri 7 ml sampel !+ F !+ 1ni lewat 8mail Blog)his Berbagi ke )witter Berbagi ke


28/28

lap. bakteri upi

Documents