DSC

Differential Scanning Calorimetry(DSC) merupakan suatu teknik analisis termal dimana perbedaan pada aliran panas atau daya panas pada sampel dan standar (referensi) dipantau terhadap waktu atau temperatur,sedangkan pada sampel dengan atmosfer telah diprogram

Prinsip Kerja

Prinsip kerjanya sangat sederhana dimana satu pan diisi dengan sampeluji, sedangkan panyang lain diisi dengan material referensi Kedua  pan berada diatasheater . Kemudian dengan memberikan perintah melaluikomputer,heater akan dinyalakan dan sekaligus menentukanspecific heat  yang diinginkan. Melalui pemograman komputer, kecepatan panas akan dikendalikan yang tentu saja panas yang ada dideteksi dengan sensor temperatur yang kemudian sinyalnya diterima oleh komputer dan komputer akan memberi perintah pada heater  untuk mempertahankan specific heat nya.

Teknik ini banyak digunakan di berbagai aplikasi, baik sebagai ujikualitas rutin dan sebagai alat penelitian. Peralatan ini mudah untuk dikalibrasidengan menggunakan indium leleh rendah pada 156.5985°C, dan merupakanmetode yang cepat dan dapat diandalkan dalam analisis termal.

PolimerDSC digunakan secara luas untuk menguji polimer guna memeriksakomposisinya. Titik leleh dan temperatur transisi kaca untuk banyak polimertersedia dari kompilasi standar, dan metode yang dapat menunjukkandegradasi polimer dimungkinkan oleh penurunan titik leleh (Tm). Tm

tergantung pada berat molekul polimer, sehingga nilai yang lebih rendah akanmemiliki titik lebur yang lebih rendah dari yang diharapkan. Persentasekristalinitas dari polimer dapat ditemukan dari puncak kristalisasi pada grafikDSC dimana fusi panas dapat dihitung dari daerah di bawah puncakpenyerapan. DSC juga dapat digunakan untuk mempelajari degradasi termalpolimer. Impuritis dalam polimer dapat ditentukan dengan memeriksatermogram untuk puncak anomali, dan plasticizer dapat dideteksi pada titiktitikkarakteristik ketika mendidih.

Stabilitas oksidasiMenggunakan DSC untuk mempelajari stabilitas oksidasi sampelumumnya membutuhkan ruang sampel kedap udara. Biasanya, uji tersebut

dilakukan secara isotermal (pada temperatur konstan) dengan mengubahatmosfer sampel. Pertama, sampel dibawa ke temperatur uji yang diinginkandi bawah atmosfer inert, biasanya berupa nitrogen. Kemudian, oksigenditambahkan ke dalam sistem. Setiap oksidasi yang terjadi diamati sebagaipenyimpangan (deviasi) dalam baseline. Analisis tersebut dapat digunakanuntuk menentukan stabilitas dan kondisi penyimpanan yang optimal untukbahan atau senyawa.

Analisis ObatDSC banyak digunakan dalam industri farmasi dan polimer. Untuk ahlikimia polimer, DSC adalah alat yang berguna untuk mempelajari prosescuring, yang memungkinkan fine tuning sifat polimer. Molekul polimer crosslinkingyang terjadi dalam proses curing bersifat eksotermis, menghasilkanpuncak positif dalam kurva DSC yang biasanya muncul setelah transisi gelas.Dalam industri farmasi perlu memiliki senyawa obat yang baik, dimana untukmenentukan parameter proses. Misalnya, jika perlu untuk memberikan obatdalam bentuk amorf, maka dilakukan memproses obat pada dibawahtemperatur dimana kristalisasi dapat terjadi.

Setiap senyawa memiliki melting poin, titik didih dan jika polimer memiliki glass trnsition temperatur yang berbeda-beda dan spesifik. Makanya dengan puncak dari termogran dsc bisa diliat spesifiknya. Termogramnya mirip sama ir tapi sb xnya heat flow dan sumbu ynya temperatur.

Dalam manufaktur farmasi terkadang sediaan yang dibuat membutuhkan bentuk amorf dari suatu zat aktif. Karena itu suhu transisi butuh untuk diketahui agar proses produksi senyawa amorf tersebut dapat dilakukan dengan tepat. Pengujian yang bisasanya dilakukan adalah dengan DSC ini. Makanya dsc pentig buat farmasi manufaktur

Untuk Qc misalnya ketika ingin mengetahui tahan atau tidaknya suatu obat atau zat aktif pada pemansan. Dsc dapat digunakan dengan melihat puncak termogram. Baik atau buruknya zat juga dapat dicek dengan Dsc. Karena jika senyawa atau zat aktif sudah mengalami perubahan otomatis sifat fisika dan kimianya juga dapat berubah , yang diukur pada dsc adalah temperatur2nya seperti melting poin boiling poin dsb. Ini bisa juga dijadikan parameter kualitatif zat untuk membedakan obat asli dengan obat palsu.

Neoplasma

Pengobatan kanker saat ini masih belum ada yang optimal dan aman dalam penggunaannya.

Pencarian serta penelitian senyawa baru yang memiliki aktivitas sebagai antitumor/antikanker.

Senyawa yang telah diteliti memiliki potensi sebagai antitumor ialah A cridine/ A cridone , namun, penggunaannya masih terbatas karena efek samping yang dihasilkan masih belum aman, sehingga dicari derivat-derivat dari acridine/acridone ini baik secara sintesis maupun yang terdapat di alam.

Beberapa analog acridine/acridone yang telah disintesis di antaranya : asulacrine [15], 1’-carbamate [16], acridine-carboxamides [17], nitroacridines [18], nitropyrazolo-acridine [19], bis(acridines) [20], dan amsacrine [21].

Selain itu ada juga analog acridine/acridone alami yaitu alkaloid acridone yang diisolasi dari tumbuh-tumbuhan dan alkaloid pyridoacridine yang diekstraksi dari berbagai organisme laut.

Baik acridine/acridone sintesis maupun alami keduanya memiliki kemampuan menginhibisi enzim topoisomerase dan telomerase.

Yg berfungsi gugus aromatic coplanar-kyanya mah yg cicn2 benzen. Dia bakal berikatan dengan DNA-ktanya..baru ngehambat enzimnya kali.ga ngerti mekanismenya.

Transdermal Produk Obat Transdermal ditujukan untuk menghantarkan obat secara sistemik

untuk penanganan atau pencegahan kerusakan dalam jarak lokasi dari tempat penggunaan secara topikal.

Patch (plester) lekat dan sistem pembawa obat transdermal (TDS) desesuaikan bentuk dan ukuran yang dipasarkan untuk aksi sistemik dan ditunjukan untuk penanganan atau pencegahan penyakit sistemik.

Obat yang dilepaskan dari TDS diabsorbsi melalui stratum korneum, epidermis dan dermis kedalam sirkulasi darah dan diangkut menuju jaringan target untuk memperoleh efek terapi.

Keuntungan Menghindari first pass efect di hati Mempertahankan tingkat darah konstan untuk jangka waktu yang lama. Meningkatkan bioavalabilitas Penurunan dosis yang akan diberikan Penurunan efek samping yang tidak diinginkan Mengurangi efek samping gastrointestinal Mudah untuk dihentikan jika terjadi efek toksik Meningkatkan kepatuhan pasien

Kerugian Harga yang mahal TDDS tidak dapat memberikan obat ionik TDDS tidak dapat mencapai tingkat obat dalam darah tinggi / plasma Tidak dapat mengembangkan TDDS untuk obat ukuran molekul besar TDDS tidak dapat memberikan obat secara berdenyut Tidak dapat mengembangkan TDDS, jika obat atau formulasi menyebabkan iritasi

pada kulitRute Penetrasi Obat Melalui Kulit Manusia

1. melalui folikel rambut yang terhubung dengan kelenjar keringat 2. melalui saluran keringat 3. melewati lapisan-lapisan stratum korneum 4. Percutaneous penyerapan didefinisikan sebagai penetrasi zat ke dalam berbagai

lapisan kulit dan permeasi di kulit ke sirkulasi sistemik. Penyerapan perkutan adalah proses langkah-bijaksana dan dapat dibagi menjadi tiga bagian:

1. Penetrasi adalah masuknya zat ke dalam layer tertentu.2. Permeasi adalah penetrasi dari satu lapisan ke yang lain, dan berbeda baik secara fungsional dan struktural dari lapisan pertama.3. Penyerapan adalah penyerapan suatu zat ke dalam sirkulasi sistemik

Syarat. Partisi co-efisien: Obat yang memiliki air dan kelarutan lipid baik diserap melalui kulit.ii. pH kondisi: pengaruh pH terutama pada tingkat penyerapan obat asam dan basa, bentuk tidak berubah obat memiliki kapasitas penetrasi yang lebih baik. iii. Obat konsentrasi: permeabilitas Transdermal di kulit mamalia adalah proses difusi pasif dan ini tergantung pada konsentrasi molekul penetran pada lapisan permukaan kulit.

Afinitas kendaraan untuk molekul obat: Hal ini dapat mempengaruhi pelepasan molekul obat dari kendaraan. Kelarutan di dalam kendaraan akan menentukan laju pelepasan obat. Mekanisme pelepasan obat tergantung pada apakah obat ini terlarut atau tersuspensi dalam

sistem pengiriman dan pada partisi antarmuka co-efisien obat dari sistem pengiriman ke jaringan kulit.b. Komposisi sistem pengiriman obat: Komposisi sistem pengiriman obat dapat mempengaruhi tidak hanya kecepatan pelepasan obat tetapi juga permeabilitas stratum corneum dengan cara hidrasi.

Lc-MsMetoprolol (MP) adalah sejenis reseptor selektif β1-adrenergik bloker yang telah banyak digunakan untuk mengobati hipertensi, angina pektoris, aritmia, infark miokard dan penyakit kardiovaskular lainnya

Konsentrasi plasma dari MP reseptor β1 dan aktivitas antagonis menunjukkan korelasi yang baik. Perilaku farmakokinetik MP dalam bentuk sediaan yang berbeda merupakan hal yang sangat penting sebagai referensi untuk penggunaan klinis dan penelitian bidang formulasi selanjutnya.

Baru-baru ini metode LC-MS/MS telah diterapkan di beberapa penelitian untuk mengukur konsentrasi MP dalam plasma karena waktu analisis singkat dan selektivitas tinggi.2.1. Analisis LC/MS-MS

• Waktu retensi dari MP dan IS sekitar 2,06 menit dan 2,17 menit secara terpisah. Metode LC-MS/MS untuk sampel masing-masing selesai dalam waktu 3.0 menit.

• Fragmentasi senyawa MP (m/z 115,6)

Persiapan Sampel Plasma

Untuk mengukur MP dalam sampel plasma, sampel disiapkan dengan metode presipitasi protein sederhana dengan metanol. Dengan metode ini, proses persiapan plasma menjadi lebih sederhana dan hanya menggunakan jumlah plasma yang sedikit. Selain itu, protein diendapkan dengan menggunakan empat kali volume metanol sehingga memberikan perlindungan yang baik untuk kolom.2.3 Validasi Metode

• Selektivitas • Linieritas dan LLOQ (Lower Limit of Quantification) • Presisi dan Akurasi • Recovery dan Efek Matriks • Stabilitas • 2.4 Studi Farmakokinetik dari Tablet MP Tartrat pada Anjing Beagle

• Metode kromatografi LC-MS/MS telah berhasil diterapkan di studi farmakokinetik dari tablet MP tartrat pada anjing beagle. Kurva hubungan antara konsentrasi dan waktu dari plasma setelah pemberian doses oral tunggal digambarkan pada gambar berikut

3.1 Obat dan reagen

Tablet metoprolol tartrat (25mg/tablet); standar baku Metoprolol (MP) tartrat; Hydroxypioglitazone (baku primer) Metanol untuk kromatografi.3.2 Hewan

Anjing beagle (jantan, beratnya 10 ± 2 kg) MP tartrat

dilarutkan dalam metanol àstok standar 75,7 ug / mL (dihitung sebagai MP).

Larutan stok diencerkan lebih lanjut àlarutan standar

(4,163.5, 2,271.0, 1,135.5, 605,6, 227,1, 113,6, 30,3 ng/mL) larutan kontrol kualitas (QC)

(60,56, 1,816.8 3,633.6 dan ng/mL) Hydroxypioglitazone

dilarutkan dalam kloroform diencerkan lebih lanjut dengan metanol àlarutan 864 ng/mL.

Semua larutan disimpan pada suhu 40C.setiap sampel plasma (200 uL)

+Larutan IS (20 uL) +metanol (20 uL) vortex selama 10 detik, +760 uL metanol vortex selama 30 detik. disentrifugasi pada 13.000 rpm selama 10” àSupernatan (200 uL)

àSupernatan (200 uL) Ditimbang +larutan asam formiat 0,25% (50 uL), disuntikkan ke dalam sistem LC-MS/MS

Stabilitas MP dalam plasma dinilai dengan menganalisis 3 ulangan sampel QC, pada konsentrasi rendah, menengah dan tinggi, pada waktu yang berbeda dan temperatur yang berbeda, termasuk penyimpanan jangka waktu lama pada -800C untuk 2 bulan, penyimpanan jangka pendek pada temperatur ruang untuk 24 jam, dan 3 siklus beku. Stabilitas post-preparative MP dievaluasi dengan sampel QC disimpan pada

150C dalam autosampler untuk 24 jam. Konsentrasi diukur dari sampel diatas dibandingkan dengan nilai nominal sampel QC. Sampel disimpulkan stabil dan berlaku untuk analisis rutin jika deviasi konsentrasi sampel kurang dari + 15% dari nilai nominal

Studi Farmakokinetik Tablet tartrat MP pada Anjing Beagle • Setiap hewan diberikan dua tablet tartrat MP (25 mg / tablet). • Sampel darah (2 mL) dikumpulkan dari vena tungkai depan ke tabung

heparinized sebelum pemberian (0 menit), dan pada 5, 10, 15, 30, 45, 60, 90, 120, 180, 240, 360, 480 dan 600 menit setelah pemberian.

• Sampel darah disentrifugasi pada 4.000 rpm selama 10 menit dan plasma dipindahkan dan disimpan pada suhu -80 ° C.

Di analisis, di buat grafiknya kemudidan di hitung AUC nyaMetode LC-MS/MS yang cepat, sensitive, memiliki selektivitas, presisi, recovery dan akurasi yang tinggi digunakan untuk mengukur konsentrasi MP pada plasma anjing beagle dan telah tervalidasi secara penuh

Komputasi

Studi komputasi atau sering disebut dengan studi in silico merupakan teknik simulasi komputasi berdasarkan teori kimia dan data percobaan, yang digunakan untuk membuat dan menganalisis molekul dan sistem molekulnya, serta memanipulasi, menghitung, dan

memprediksi sifat-sifat kimia dan biokimia molekul tersebut. DOCKING Merupakan skema komputasi untuk menentukan kecocokan optimum antara dua molekul yaitu sebuah ligan dan reseptor berdasarkan evaluasi faktor-faktor sterik dan elektrostatik yang berperan dalam interaksi ligan-reseptor.

TUJUAN DOCKING

Visualisasi interkasi tingkat molekuler yang terjadi antara suatu ligan (senyawa) dan reseptor target

Prediksi aktivitas suatu senyawa berdasarkan nilai parameter hasil docking [Konstanta inhibisi (Ki) dan Energi ikatan (kcal/mol)]

PARAMETER HASIL DOCKING

•

• mengurangi biaya penelitian

• mengurangi penggunaan hewan percobaan

• dan dapat memperkirakan farmakofor sehingga dapat dirancang obat baru yang lebih potensial dengan efek samping yang lebih ringan dibandingkan obat awal.

• Screening of medicinal plant compounds against NS5B polymerase of hepatitis C virus (HCV) using molecular docking studies, yang dilakukan oleh Srinivasan et al (2011).

• Studi docking dilakukan terhadap senyawa alami (ligan) yang berasal dari tanaman yang berbeda dengan polimerase NS5B (Protein nonstruktural HCV 5B) virus hepatitis C menggunakan perangkat lunak Glide 5.5 dalam paket Schrodinger.

•

• Dari tabel tersebut glycyrrhizin dan isoliquiritin menunjukkan hasil docking yang terbaik terhadap NS5B polimerase dengan nilai glide (-9.664349, -8.225484) dan energi glide (- 60.574044, -50.978047) terkecil.

• Nilai energi ikatan menunjukkan kemudahan senyawa untuk berinteraksi dengan reseptornya. Semakin kecil energi, maka semakin mudah suatu senyawa untuk berinteraksi dengan reseptornya.

Interaksi protein-ligan memiliki peran penting dalam perancangan obat berdasarkan srtuktur. Pendekatan yang dilakukan dalam penelitian ini telah berhasil dalam penemuan senyawa antihepatitis baru dari tanaman. Dari hasil docking, disimpulkan bahwa glycyrrhizin dan isoliquiritin bisa menjadi inhibitor polimerase NS5B. Namun, penelitian biologi tambahan akan membantu dalam menentukan senyawa terhadap hepatitis untuk mengkonfirmasi kesimpulan.