jurnal peralatan dan sterilisasi

Jurnal Praktikum Mikrobiologi Dasar

Perkenalan Alat dan Sterilisasi

Erna Pali, Aditya Setiawan, Alimaturrosyidah, Nurlilayanti, Nurdiah, Nur Aini, Oktafanie Mega S. K.

Kelompok 2A Praktikum Mikrobiologi DasarFakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam

Abstrak

Sterilisasi adalah suatu bentuk usaha untuk membebaskan alat-alat atau bahan-bahan darisegala bentuk kehidupan terutama mikroba. Praktikum ini bertujuan untuk mengetahui cara-carasterilisasi, jenis-jenis peralatan-peralatan yang digunakan dalam praktikum serta kegunaannya.Praktikum ini dilaksanakan pada hari Selasa, 06 Oktober 2015 pada pukul 09.10-11.50 WITA yangbertempat di Laboratorium Mikrobiologi dan Genetika Molekuler, Fakultas Matematika dan IlmuPengetahuan Alam, Universitas Mulawarman, Samarinda. Pada saat perkenalan alat dilaboraturiumada macam-macam peralatan seperti autoklave, vortex, tabung reaksi dan lain-lain. Padapraktikum ini alat yang disterilkan adalah cawan petri. Untuk mensterilkan alat digunakanmetode uap bertekanan dan metode uap bertekanan menggunakan autoklave. Kesimpulan yang didapatpada praktikum ini ialah ada berbagai macam peralatan yang ada di laboraturium yang terdiri dariperalatan gelas seperti tabung reaksi dan gelas ukur serta peralatan dari kayu atau logam sepertispatula, oven dan inkubator, dari semua alat yang disebutkan diatas memiliki fungsi dankegunaan masing-masing.

Kata Kunci: Peralatan, Sterilisasi, MikrobaTanggal Praktikum: 6 Oktober 2015; Diserahkan Tanggal 11 Oktober 2015.

Pendahuluan Mikrobiologi mempelajari mengenai

organisme hidup yang berukuran mikroskopis.Dunia mikroorganisme terdiri dari limakelompok organisme: bakteri, protozoa, virus,serta algae dan cendawan mikroskopis.Sterilisasi adalah suatu usaha untukmembebaskan alat-alat atau bahan dari segalabentuk kontaminasi dari mikroba. Prosessterilisasi alat dan medium dalam kegiatanpraktikum atau penanganan sampel mikrobasangat dibutuhkan sterilisasi. Apabila tekniksterilisasi tidak diterapkan maka hasil yangdicapai tidak maksimal dan menimbulkanberbagai kontaminasi baik dari alat maupunmedia tumbuh mikroba [1].

Pengenalan alat-alat laboratorium pentingdilakukan untuk keselamatan kerja saatmelakukan penelitian. Sterilisasi adalah usahauntuk membebaskan alat-alat dari mikroba yangtidak diinginkan. Asisten Pendamping: 1. Cep Hikmat 2. Ersaliany Nurul, 3. Nur

Maulida 4. Yusnaini Penanggung-jawab: Koordiantor mata Kuliah Mikrobiologi Dasar: Dr.rer. nat. Bodhi Dharma M.Si dan Eko Kusumawati S. Si, M. P SertaKepala Laboratorium Mikrobiologi dan Genetika Molekuler Dr. rer.nat. Bodhi Dharma M.Si, FMIPA Unmul

Sebelum melakukan praktikum mengenaiperalatan yang ingin kita gunakan harusdisterilkan dahulu. Sterilisasi yaitu prosesmembunuh segala bentuk kehidupan mikroorganismeyang ada dalam sampel/contoh, alat-alat ataulingkungan tertentu Dalam bidang bakteriologikata sterilisasi sering dipakai untukmenggambarkan langkah yang diambil agar mencapaitujuan meniadakan atau membunuh semua bentukkehidupan mikroorganisme [ 3 ].

Bahan atau peralatan yang dipergunakan dalambidang mikrobiologi harus dalam keadaan steril.Steril artinya tidak didapatkan mikroba yangtidak diharapkan kehadirannya, baik yangmenggangu kehidupan dan proses yangdikerjakan [ 4 ].

Selama sterilisasi alat, media dan bahan perludisterilkan. Media adalah susunan bahan baik bahanalami (seperti tauge, kentang, daging, telur,wortel dan sebagainya) ataupun bahan buatan(berbentuk senyawa kimia, organik ataupunanorganik) yang dipergunakan untukpertumbuhan dan perkembangbiakan mikroba[ 2 ].

Praktikum ini bertujuan untuk sterilisasiterhadap peralatan yang akan digunakan dalampraktikum. Manfaat dari praktikum ini adalah

© Laboratorium Mikrobiologi dan Bioteknologi, Biologi, FMIPA Unmul


agar praktikan mengetahui bagaimana caramensterilisasikan peralatan yang akandigunakan sebelum dipakai untuk melakukanpembuatan medium dan lai-lain.

Metode Praktikum

Waktu dan TempatPraktikum ini dilaksanakan pada hari Selasa, 06

Oktober 2015 pada pukul 09.10-11.50 WITA yangbertempat di Laboratorium Mikrobiologi danGenetika Molekuler, FMIPA, UniversitasMulawarman, Samarinda.

Bahan-bahanBahan yang digunakan yaitu karet gelang,

kertas, air, kapas, alumunium foil, aquades, sarungtangan, tissue, hand sanitizer, masker, kertas labeldan alat tulis lengkap.

Metodologi PercobaanSterilisasi dengan menggunakan autoklaf,

menggunakan air kemudian dipanaskan dalamtempat tertutup. Pada proses pemanasanmenghasilkan uap jenuh bertekanan dengantemperatur diatas 100 derajat celcius. Sebagian besarmikroorganisme tergolong bakteri, terbunuh dalamautoclave selama pemanasan selama 20 menit, suhu120 derajat celsius dengan tekanan tertentu.

Hasil dan PembahasanBerdasarkan hasil praktikum yang telah

dilakukan, didapatkan hasil sebagai berikut:Tabel 1.1 Perkenalan Alat dan Fungsi

No Nama Alat Fungsi

1 Autoclave Untuk mensterilkanalat dan mrdia

2 Micro Pipet Untuk mengambilmedia yang cairdengan ukurantertentu

3 Blue Tip danYellow Tip

Blue Tip (0,1) untukmengambil biakanmikroba dari mediacair, Yellow Tip(0,5) untukmengambil biakanmikroba dari media

cair.

4 Magnetik Stirer Menghomogenkanlarutan

5 BatangMagnetic

Untuk mengambilmagnetic stirer

6 Vortex Untukmenghomogenkanlarutan ataucampuran

7 Inkubator Untukmenginkubasibakteri

8 Pinset Untuk menjepitobjek glass dancover glass.Mengambil objek.

9 Objek Glass Tempat meletakkanobjek atau spesimen

10 Cover Glass Untuk menutupobjek glass

11 Beaker Glass Sebagai tempatuntuk menaruhlarutan

12 Hot Plate Untukmemanaskan,mereaksikan

13 LabuErlenmeyer

Sebagai wadah

14 Jarum Ose Untukmenginokulasikanbakteri, fungsi danyeast.

15 Hockey Stick Untuk meratakansuspensi padamedia padat

16 Cawan Petri Wadah untukmeletakkan media

17 Rak tabungreaksi

Sebagai tempattabung reaksi



18 Pipet volume Untuk mengambillarutan

19 Spatula Untuk mengambilmedia

20 Lampu Bunsen Sebagai tempatuntuk menyalakanapi

21 Cuvet Untuk tempatmensentrivuge

22 Gelas ukur Untuk mengukurbahan

23 Shakker Untukmenghomogenkandan menumbuhkanbakteri

24 Refrigator Untuk menyimpanmedia agar tidakmempercepatpertumbuhanmikroba

25 Laminar airflow cabinet

Untuk mengisolasidan mentransfermikroba

Pada tabel tersebut dapat kita lihat berbagaimacam alat yang digunakan dalam praktikumstrerilisasi. Masing-masing alat memiliki fungsi dankegunaan tersendiri. Setiap alat-alat tersebut harusdisterilkan terlebih dahulu sebelum digunakan.Dengan mengetahui fungsi dan kegunaan dari setiapalat diharapkan mampu menggunakan alat tersebutdengan baik.

Pada praktikum perlu dilakukan sterilisasisebelum menggunakan alat dan bahan untukmenghilangkan mikroba yang terdapat dalamalat dan bahan tersebut.. Sterilisasi adalah suatu proses untuk membunuh segala bentukkehidupan mikroorganisme yang ada di dalam sampelatau contoh, alat-alat atau lingkungan tertentu.Dalam bidang bakteriologi kata sterilisasi seringdipakai untuk menggambarkan langkah yang diambilagar mencapai tujuan meniadakan atau membunuhsemua bentuk kehidupan mikroorganisme. Carasterilisasi yang tepat tergantung pada jenis dansifat bahan yang disterilkan.

Pada praktikum ini digunakan sterilisasi uapbertekanan, sterilisasi uap bertekananmenggunakan autoklaf. Autoklaf adalah sterilisasiuntuk alat dan medium kultur jaringan. Alat-alatyang berupa glass ukur maupun cawanpetri sebelum digunakan harus disterilkandahulu. Demikian juga medium yang sudahdimasukkan ke dalam botol medium harusdisterilkan juga. Dengan pemanasan di dalamautoklaf maka bakteri dan mikrobia dapat matiakibat suhu yang tinggi (120˚C) dan tekananuap air yang besar (1,5 kg/cm) selama 1 menit. Autoklaf mempunyai cara kerja yang hampir sama dengan alatmasak pressure cooker , sebab alat ini merupakansebuah bejana yang diisi air dan ditutup rapat-rapat.Autoklaf ada yang model listrik tetapi ada pulayang harus diletakkan diatas kompor gas. Jikaalat ini dipanaskan, maka akan terjadi uap air yangtidak dapat keluar karena bejana tertutup rapat,sehingga tekanan di dalam autoklaf naik sampaimelebihi tekanan normal [5].

Bila objek yang disterilisasi banyak, transferpanas pada bagian dalam autoclave akan lambat,sehingga terjadi perpanjangan waktu pemanasantotal untuk memastikan bahwa semua objek bersuhu121 derajat celsius untuk waktu 10-15 menit.Medium yang disterilkan ditempatkan di dalamautoclave selama 15-20 menit. Medium yang akandisterilkan ditempatkan dalam wadah yang agakkecil. Setelah pintu autoclave ditutup rapat, barulahkran pada pipa uap dibuka dan temperatur akanterus-menerus naik sampai 121 derajat Celsius.

Kenaikan tekanan uap ini akanmenyebabkan air mendidih di atas 100 derajatcelsius. Apabila tekanan uap tidak diatur, makaakan sampai bertambah tinggi. Cara pengaturantekanan uap dalam alat ini adalah denganmengatur katub yang terdapat pada tutupautoklaf. Karena suhu akan naik sesuai dengantekanan uap yang dikehendaki katup akanmembuka karena desakan uap. Dengan demikantekanan akan dapat dipertahankan sebab sebagianuap keluar. Untuk memantau tekanan uap dansuhu, autoklaf dilengkapi denan manometer danthermometer [5].

Tabel 1.2 Sterilisasi alat yang digunakanNo Alat Cara Kerja



1. Cawan petri Membungkusnya dengankertas, sisi kanan dan kiridilipat membentuksegitiga, lalu lipat kebawah membentuk kotak.

Dari tabel diatas dapat dilihat berbagai jenisperalatan yang terdapat pada laboratorium setiap alatmemiliki atau mempunyai fungsi dan kegunaan.Dengan mengetahui berbagai alat dan kegunaannyadiharapkan dapat menggunakan berbagai alat yangterdapat pada labiratorium, dapat digunakan denganbaik dan sesuai dengan kegunaannya masing-masing.

Faktor kesalahan yang sering terjadi adalahtidak mensterilkan tangan, salah dalam pembuatanpenutup Erlenmeyer.

KesimpulanKesimpulan yang didapat pada praktikum ini

ialah ada berbagai macam peralatan yang ada dilaboraturium yang terdiri dari peralatan gelasseperti tabung reaksi dan gelas ukur sertaperalatan dari kayu atau logam seperti spatula,oven dan incubator, dari semua alat yangdisebutkan diatas memiliki fungsi dan kegunaanmasing-masing. Alat-alat yang telah digunakandisterilisasi dengan autoclave pada suhu 120 derajatcelsius dan ditunggu, waktu yang diperlukanautoclave untuk sterilisasi sekitar 15-30 menittergantung banyaknya alat yang disterilisasi.

Daftar Pustaka

[1] Dwidjoseputro, D. DasardasarMikrobiologi, Jakarta: Djambatan: 1998,pp. 55- 56

[2] Gabriel, J. F. Fisika Kedokteran Jakarta:EGC: 1996, pp. 32-37

[3] Hidayat, N, M. C. Padaga dan S. Suhartini.Mikrobiologi Industri Yogyakarta: AndiOffset: 1996, pp. 21-23

[4] Waluyo, L. Teknik Metode Dasar Mikrobiologi. Malang: UMM-Press: 2008,pp. 10-13

[5] Hendrayono, D.P dan Wijayani, A. Teknik Kultur Jaringan Yogjakarta: Kanisius 2012, pp. 55

.


jurnal peralatan dan sterilisasi

Documents