i
EFEK HEPATOPROTEKTIF EKSTRAK METANOL:AIR (50:50) DAUN
Macaranga tanarius L. TERHADAP KADAR ALT-AST SERUM
PADA TIKUS TERINDUKSI KARBON TETRAKLORIDA
SKRIPSI
Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat
Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.)
Program Studi Farmasi
Oleh :
Theresia Garri Windrawati
NIM : 098114085
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SANATA DHARMA
YOGYAKARTA
2013
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
ii
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
iii
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
iv
HALAMAN PERSEMBAHAN
Bersukacitalah dalam pengharapan,
sabarlah dalam kesesakan, dan
bertekunlah dalam doa
(Roma 12:12)
Hanya pada Allah saja kiranya aku tenang,
sebab dari pada-Nyalah harapanku (Mazmur 62 : 6)
“Setiap kamu punya mimpi atau keinginan atau cita-cita, kamu taruh di sini,
di depan kening kamu… jangan menempel. Biarkan “dia” menggantung… mengambang…
5 centimeter di depan kening kamu. Jadi “dia” nggak akan pernah lepas dari mata kamu.”
(Donny Dhirgantoro dalam novel 5 cm.).
Ku persembahkan karya kecil ku ini untuk..
Yesus Kristus yang senantiasa melindungi ku,
sumber kekuatan dan harapan ku
Bapak, Ibu, dan Mbak Putri tercinta atas segala kasih sayang,
doa, nasihat, dan motivasi
Sahabat-sahabatku tersayang
Almamaterku
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
v
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
vi
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
vii
PRAKATA
Puii syukur kepada Tuhan Yang Maha Kasih atas berkat yang tiada henti,
sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi berjudul “EFEK
HEPATOPROTEKTIF EKSTRAK METANOL:AIR (50:50) DAUN
Macaranga tanarius L. TERHADAP KADAR ALT-AST SERUM PADA
TIKUS TERINDUKSI KARBON TETRAKLORIDA” dengan baik.
Skripsi ini disusun untuk memenuhi salah satu syarat memperoleh gelar
Sarjana Farmasi (S.Farm) program studi Farmasi Universitas Sanata Dharma.
Penulis menyadari bahwa dalam pelaksanaan dan penyusunan skripsi ini
tentunya tidak lepas dari bantuan dan campur tangan dari berbagai pihak. Oleh
karena itu, pada kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih kepada :
1. Ibu Phebe Hendra, M.Si., Ph.D., Apt. selaku Dosen Pembimbing skripsi atas
segala kesabaran dalam membimbing, memberi masukan dan motivasi
kepada penulis selama penelitian dan penyusunan skripsi ini.
2. Bapak Ipang Djunarko, M.Sc., Apt. selaku Dosen Penguji skripsi atas
bantuan dan masukkan demi kemajuan skripsi ini.
3. Bapak Prof. Dr. C. J. Soegihardjo, Apt. selaku Dosen Penguji skripsi atas
bantuan dan masukkan demi kemajuan skripsi ini.
4. Ibu Rini Dwiastuti, M.Si., Apt. selaku Kepala Penanggungjawab
Laboratorium Fakultas Farmasi yang telah memberikan ijin dalam
penggunaan semua fasilitas laboratorium untuk kepentingan penelitian ini.
5. Bapak Yohanes Dwiatmaka, M.Si., yang telah memberikan bantuan dalam
determinasi tanaman M. tanarius L.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
viii
6. Ibu drh. Ari selaku dokter hewan di laboratorium Imono yang telah
membantu dengan sabar dalam menyediakan hewan uji untuk penelitian ini.
7. Pak Heru, Pak Parjiman, dan Pak Kayat selaku laboran bagian Farmakologi
dan Toksikologi, Pak Wagiran selaku laboran Farmakognosi Fitokimia, Pak
Otok selaku pengelola gudang kefarmasian, Ibu Hartini, dan Pak Asran atas
segala bantuan selama pelaksanaan skripsi ini.
8. Teman-teman “Tim Macaranga 3” Nanda Chris Nurcahyanti, M.R. Biri Koni
Tiala, Fransisca Devita Risti W, Christine Herdyana F, Bernadetta Amilia R,
A.M. Inggrid Sili, dan Luluk Rahendra Martha atas kerja sama, bantuan, suka
duka, dan perjuangan dalam menyelesaikan skripsi sampai akhir.
9. Kawan-kawan “Rempong” Veronika Dita Ayuningtyas, Novia Sarwoning
Tyas, dan Niken Ambar Sayekti atas kebersamaan, semangat, keceriaan,
perhatian, dan motivasi dalam suka maupun duka selama ini.
10. Teman-teman FSM B 2009, FKK B 2009 dan seluruh angkatan 2009 atas
kebersamaan kita.
11. Semua pihak yang penulis tidak dapat sebutkan satu per satu yang turut
membantu selama penyusunan skripsi ini berlangsung.
Penulis menyadari bahwa setiap manusia tidak ada yang sempurna. Oleh
karena itu, penulis mengharapkan adanya kritik dan saran yang membangun demi
kemajuan di masa yang akan datang.
Akhir kata, penulis berharap bahwa skripsi ini dapat bermanfaat bagi
semua pihak, bagi mahasiswa, lingkungan akademis, masyarakat serta
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
ix
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
x
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL .................................................................................... i
HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ............................................. ii
HALAMAN PENGESAHAN ....................................................................... iii
HALAMAN PERSEMBAHAN .................................................................... iv
PERNYATAAN KEASLIAN KARYA ........................................................ v
LEMBAR PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI KARYA
ILMIAH UNTUK KEPENTINGAN AKADEMIS ........................................ vi
PRAKATA ................................................................................................... vii
DAFTAR ISI ................................................................................................ x
DAFTAR TABEL ........................................................................................ xv
DAFTAR GAMBAR .................................................................................... xvii
DAFTAR LAMPIRAN ................................................................................. xix
INTISARI ..................................................................................................... xxi
ABSTRACT ................................................................................................... xxii
BAB I. PENGANTAR .................................................................................. 1
A. Latar Belakang ..................................................................................... 1
1. Perumusan masalah .................................................................... 3
2. Keaslian penelitian ..................................................................... 4
3. Manfaat penelitian ...................................................................... 5
B. Tujuan Penelitian ................................................................................. 5
BAB II. PENELAAHAN PUSTAKA ........................................................... 6
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xi
A. Macaranga tanarius L. ........................................................................ 6
1. Taksonomi .................................................................................. 6
2. Sinonim ...................................................................................... 6
3. Nama daerah ............................................................................... 6
4. Morfologi ................................................................................... 7
5. Kandungan kimia ........................................................................ 7
6. Khasiat dan kegunaan ................................................................. 9
B. Anatomi dan Fisiologi Hati .................................................................. 9
C. Kerusakan Hati .................................................................................... 12
1. Perlemakan hati (Steatosis) ......................................................... 12
2. Kematian sel (Necrosis) .............................................................. 13
3. Kolestasis ................................................................................... 14
4. Sirosis ......................................................................................... 14
D. Hepatotoksin ........................................................................................ 15
1. Hepatotoksin teramalkan (tipe A) ............................................... 15
2. Hepatotoksin tak teramalkan (tipe B) .......................................... 15
E. Karbon tetraklorida .............................................................................. 16
F. Metode Uji Hepatotoksisitas ................................................................ 19
1. Tes enzim serum ......................................................................... 20
2. Tes ekskretori hepatik ................................................................. 20
3. Analisis histologi kerusakan hati ................................................. 20
G. ALT dan AST ...................................................................................... 21
H. Ekstraksi .............................................................................................. 21
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xii
I. Landasan Teori .................................................................................... 22
J. Hipotesis .............................................................................................. 23
BAB III. METODE PENELITIAN ............................................................... 24
A. Jenis dan Rancangan Penelitian............................................................ 24
B. Variabel dan Definisi Operasional........................................................ 24
1. Variabel utama ........................................................................... 24
2. Variabel pengacau ...................................................................... 24
3. Definisi operasional .................................................................... 25
C. Bahan Penelitian .................................................................................. 26
1. Bahan utama ............................................................................... 25
2. Bahan kimia................................................................................ 25
D. Alat dan Instrumen Penelitian .............................................................. 27
1. Alat ekstraksi .............................................................................. 27
2. Alat uji hepatoprotektif ............................................................... 28
E. Tata Cara Penelitian ............................................................................. 28
1. Determinasi tanaman M. tanarius ............................................... 28
2. Pengumpulan bahan .................................................................... 28
3. Pembuatan serbuk ....................................................................... 28
4. Penetapan kadar air serbuk daun M. tanarius .............................. 29
5. Pembuatan ekstrak metanol-air daun M. tanarius ........................ 29
6. Penetapan konsentrasi pekat ekstrak ........................................... 30
7. Penetapan dosis ekstrak metanol-air daun M. tanarius ................ 31
8. Pembuatan larutan karbon tetraklorida ........................................ 31
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xiii
9. Pembuatan suspending agent CMC-Na 1% ................................. 32
10. Uji pendahuluan.......................................................................... 32
11. Pengelompokkan dan perlakuan hewan uji .................................. 33
12. Pembuatan serum ........................................................................ 34
13. Penetapan aktivitas serum kontrol, serum ALT, dan serum AST . 34
F. Tata Cara Analisis Hasil ...................................................................... 35
BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ...................................................... 36
A. Penyiapan Bahan ................................................................................. 36
1. Hasil determinasi tanaman .......................................................... 36
2. Penetapan kadar air serbuk daun M. tanarius .............................. 36
3. Hasil penimbangan bobot ekstrak metanol-air daun M. tanarius . 37
B. Uji Pendahuluan .................................................................................. 38
1. Penentuan dosis hepatotoksik karbon tetraklorida ....................... 38
2. Penentuan waktu pencuplikan darah ........................................... 39
3. Penetapan lama pemejanan ekstrak metanol-air daun
M. tanarius ................................................................................. 42
4. Penetapan dosis ekstrak metanol-air daun M. tanarius ................ 42
C. Hasil Uji Efek Hepatoprotektif Ekstrak Metanol-air Daun M. tanarius . 43
1. Kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB ......... 48
2. Kontrol negatif olive oil dosis 2 ml/kgBB ................................... 49
3. Kontrol ekstrak metanol-air daun M. tanarius dosis
3,840 g/kgBB ............................................................................. 51
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xiv
1. Kelompok perlakuan ekstrak metanol-air daun M. tanarius
dosis 0,426 g/kgBB, 1,280 g/kgBB, dan 3,840 g/kgBB pada
tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida dosis
2 ml/kgBB .................................................................................. 52
D. Rangkuman Pembahasan ..................................................................... 59
BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN ........................................................ 62
A. Kesimpulan.......................................................................................... 62
B. Saran ................................................................................................... 62
DAFTAR PUSTAKA ................................................................................... 63
LAMPIRAN ................................................................................................. 67
BIOGRAFI PENULIS .................................................................................. 99
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xv
DAFTAR TABEL
Tabel I. Peningkatan aktivitas enzim serum akibat induksi
senyawa toksik…………………………………………
19
Tabel II. Komposisi dan konsentrasi reagen serum ALT 27
Tabel III. Komposisi dan konsentrasi reagen serum AST 27
Tabel IV. Rata-rata aktivitas serum ALT tikus setelah pemberian
karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB pada selang waktu
0, 24, dan 48 jam………………………………..
39
Tabel V. Hasil uji Scheffe aktivitas serum ALT tikus setelah
pemberian karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB pada
selang waktu 0, 24, dan 48 jam…..…………………...
40
Tabel VI. Rata-rata aktivitas serum AST tikus setelah pemberian
karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB pada selang
waktu 0, 24, dan 48 jam…………………………........
41
Tabel VII. Hasil uji Mann Whitney aktivitas serum AST tikus
setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2
ml/kgBB pada selang waktu 0, 24, dan 48 jam……….
41
Tabel VIII. Purata ± SE aktivitas serum ALT tikus praperlakuan
ekstrak metanol-air daun M. tanarius terinduksi
karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB…………………
44
Tabel IX. Hasil uji Scheffe aktivitas serum ALT tikus setelah
pemberian karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB pada
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xvi
kelompok perlakuan…………...……………………... 45
Tabel X. Purata ± SE aktivitas serum AST tikus praperlakuan
ekstrak metanol-air daun M. tanarius terinduksi
karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB…………………
46
Tabel XI. Hasil uji Tamhane’s-T2 aktivitas serum AST tikus
setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2
ml/kgBB pada kelompok perlakuan…………………..
47
Tabel XII. Rata-rata aktivitas serum ALT dan serum AST tikus
setelah pemberian olive oil dosis 2 ml/kgBB pada
selang waktu 0 dan 24 jam……………………………
50
Tabel XIII. Hasil uji Mann Whitney aktivitas serum ALT dan
serum AST tikus setelah pemberian olive oil dosis 2
ml/kgBB pada selang waktu 0 dan 24 jam……………
51
Tabel XIV. Efektif Dosis Tengah (ED50) Hepatoprotektif ekstrak
metanol-air daun M. tanarius…………………………
56
Tabel XV. Dosis, log dosis, % efek hepatoprotektif dan ED50
pada masing-masing kelompok perlakuan……………
95
Tabel XVI. Hasil penetapan kadar air serbuk daun M. tanarius…… 96
Tabel XVII. Hasil rendemen ekstrak metanol-air daun M. tanarius… 97
Tabel XVIII. Bobot pengeringan ekstrak metanol-air daun M.
tanarius………………………………………………..
98
Tabel XIX. Hasil pengukuran validitas dan reabilitas…………….. 98
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xvii
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Struktur kandungan senyawa daun M. tanarius……… 8
Gambar 2. Struktur mikroskopik hati…………………………….. 11
Gambar 3. Struktur mikroskopik hati yang mengalami steatosis… 13
Gambar 4. Struktur mikroskopik hati yang mengalami nekrosis… 13
Gambar 5. Struktur molekul karbon tetraklorida…………………. 16
Gambar 6. Mekanisme biotransformasi dan oksidasi karbon
tetraklorida…………………………………………….
17
Gambar 7. Diagram batang rata-rata aktivitas serum ALT tikus
setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2
ml/kgBB pada selang waktu 0, 24, dan 48 jam……….
39
Gambar 8. Diagram batang rata-rata aktivitas serum AST tikus
setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2
ml/kgBB pada selang waktu 0, 24, dan 48 jam……….
41
Gambar 9. Diagram batang rata-rata aktivitas serum ALT tikus
praperlakuan ekstrak metanol-air daun M. tanarius 1 x
sehari selama 6 hari terinduksi karbon tetraklorida 2
ml/kgBB……………………………………………….
44
Gambar 10. Diagram batang rata-rata aktivitas serum AST tikus
praperlakuan ekstrak metanol-air daun M. tanarius 1 x
sehari selama 6 hari terinduksi karbon tetraklorida 2
ml/kgBB…….................................................................
46
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xviii
Gambar 11. Diagram batang rata-rata aktivitas serum ALT tikus
setelah pemberian olive oil dosis 2 ml/kgBB pada
selang waktu 0 dan 24 jam…………………………….
50
Gambar 12. Diagram batang rata-rata aktivitas serum AST tikus
setelah pemberian olive oil dosis 2 ml/kgBB pada
selang waktu 0 dan 24 jam…………………………….
50
Gambar 13. Persamaan garis ED50 ekstrak metanol-air daun M.
tanarius………………………………………………..
56
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xix
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Foto daun M. tanarius………………………………….. 68
Lampiran 2. Foto ekstrak metanol-air daun M. tanarius…………….. 68
Lampiran 3. Foto larutan ekstrak metanol-air daun M. tanarius…….. 68
Lampiran 4. Surat pengesahan determinasi tanaman M. tanarius…… 69
Lampiran 5. Surat pengesahan Medical and Health Research Ethics
Committee (MHREC)…………………………………..
70
Lampiran 6. Analisis statistik aktivitas serum ALT pada uji
pendahuluan penentuan dosis hepatotoksin karbon
tetraklorida dosis 2 ml/kgBB….………………………...
71
Lampiran 7. Analisis statistik aktivitas serum AST pada uji
pendahuluan penentuan dosis hepatotoksin karbon
tetraklorida dosis 2 ml/kgBB….………………………...
74
Lampiran 8. Analisis statistik aktivitas serum ALT perlakuan ekstrak
metanol air daun M. tanarius setelah induksi karbon
tetraklorida dosis 2 ml/kgBB……………………………
78
Lampiran 9. Analisis statistik aktivitas serum AST perlakuan ekstrak
metanol air daun M. tanarius setelah induksi karbon
tetraklorida dosis 2 ml/kgBB……………………………
83
Lampiran 10. Analisis statistik aktivitas serum ALT dan serum AST
perlakuan kontrol negatif olive oil dosis 2 ml/kgBB……
88
Lampiran 11. Perhitungan efek hepatoprotektif………………………. 93
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xx
Lampiran 12. Perhitungan penetapan peringkat dosis ekstrak metanol-
air daun M. tanarius kelompok perlakuan……………...
93
Lampiran 13. Perhitungan konversi dosis untuk manusia…………….. 94
Lampiran 14. Perhitungan efektif dosis tengah (ED50) hepatoprotektif
ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius (L.) pada
tikus jantan terinduksi karbon tetraklorida……………..
95
Lampiran 15. Penetapan kadar air serbuk daun M. tanarius………….. 96
Lampiran 16. Hasil rendemen ekstrak metanol-air daun M. tanarius… 97
Lampiran 17. Bobot pengeringan ekstrak metanol-air daun M.
tanarius………………………………………………….
98
Lampiran 18. Hasil pengukuran validitas dan reabilitas…..................... 98
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xxi
INTISARI
Penelitian ini bertujuan untuk mendapatkan informasi tentang pengaruh
hepatoprotektif pemberian dari ekstrak metanol : air daun M. tanarius untuk
menurunkan aktivitas serum ALT dan AST pada tikus terinduksi karbon
tetraklorida, serta mendapatkan besar dosis efektifnya.
Penelitian ini bersifat eksperimental murni dengan rancangan acak
lengkap pola searah. Penelitian yang dilakukan menggunakan tikus jantan galur
Wistar, umur 2-3 bulan, dan berat ± 150-200 gram. Tikus dibagi secara acak ke
dalam enam kelompok perlakuan. Kelompok I (kontrol hepatotoksin) diberi
karbon tetraklorida 2 ml/kgBB secara ip. Kelompok II (kontrol negatif) diberi
olive oil 2 ml/kgBB. Kelompok III (kontrol ekstrak) diberi ekstrak metanol-air
daun M. tanarius 3,840 g/kgBB. Kelompok IV-VI (perlakuan) berturut-turut
diberi ekstrak metanol : air daun M. tanarius dosis 0,426; 1,280; dan 3,840
g/kgBB secara oral sekali sehari selama enam hari berturut-turut kemudian pada
hari ke tujuh semua perlakuan diberi karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB secara
i.p. Dua puluh empat jam sesudahnya, darah diambil dari sinus orbitalis mata
untuk diukur aktivitas serum ALT dan AST. Data serum ALT dan AST yang
didapat dianalisis secara statistik.
Berdasarkan hasil penelitian, ekstrak metanol-air M. tanarius
memberikan efek hepatoprotektif dengan menurunkan aktivitas serum ALT dan
ASTpada tikus yang terinduksi karbon tetraklorida. Ada kekerabatan dosis dengan
respon yang muncul terlihat dari semakin besar dosis praperlakuan ekstrak
metanol-air daun M. tanarius yang diberikan, maka semakin besar efek
hepatoprotektif. Jadi ekstrak metanol-air M. tanarius dosis 0,426; 1,280; dan
3,840 g/kgBB memiliki efek hepatoprotektif berturut-turut 29,5%, 43,6%, dan
62,4%. Nilai ED50 hepatoprotektif ekstrak metanol-air daun M. tanarius adalah
1,776 g/kgBB.
Kata kunci : Macaranga tanarius, metanol, hepatoprotektif, karbon
tetraklorida
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xxii
ABSTRACT
This research has purpose to get information about hepatoprotective
effect of water-methanol extract M. tanarius leaf for reducing activity of ALT and
AST serum in rats induced by carbon tetrachloride and get an effective dose.
This research was experimentally pure with direct sampling design. This
research used Wistar male rats, age 2-3 months, and weight ± 150-200 g. The rats
were divided into six treatment groups. The first group (hepatotoxin control) was
given carbon tetrachloride 2 ml/kgBW i.p. Then, the second group (negative
control) was given olive oil 2 ml/kgBW. Third group (extract control) was given
water-methanol extract of M. tanarius leaf 3.840 g/kgBW. The fourth until sixth
group (treatment) was given water-methanol extract of M. tanarius leaf dose
0.426; 1.280; and 3.840 g/kgBW orally once a days for six days successively and
then in the seventh day all of the treatments group were given carbon tetrachloride
2 ml/kgBB by i.p. Twenty-four hours later, blood was collected from the orbital
sinus eye to be measured ALT and AST serum activity. It was analyzed
statistically.
Based of the result of the research, water-methanol extract M. tanarius
leaf give hepatoprotective effects for reducing activity of ALT and AST serum in
rats induced by carbon tetrachloride. There was a relation between dose and
response which was seen from the greater pre-experimental dose methanol-water
extract of M. tanarius leaf given, thus the hepatoprotective was bigger.
Hepatoprotective effect with dose of 0.426; 1.280, and 3.840 g/kgBW
successively were 29.5%, 43.6%, and 62.4%. The value of ED50 hepatoprotective
of water-methanol extract of M. tanarius leaf was 1.776 g / kgBW.
Keywords : Macaranga tanarius, methanol, hepatoprotective, carbon
tetrachloride
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
1
BAB I
PENGANTAR
A. Latar Belakang
Hati merupakan organ atau kelenjar terbesar dari tubuh dan mempunyai
fungsi utama sebagai pusat metabolisme (Wibowo dan Paryana, 2009). Gangguan
fungsi hati seringkali dihubungkan dengan beberapa penyakit hati tertentu.
Penyebab penyakit hati antara lain infeksi virus hepatitis, zat-zat toksik seperti
alkohol dan obat-obatan tertentu (Direktorat Bina Farmasi Komunitas dan Klinik,
2007).
World Health Organization (WHO) mencatat sekitar 180 juta umat
manusia terinfeksi virus hepatitis C. Angka ini meliputi 3% dari seluruh populasi
manusia di bumi. Bila memakai acuan angka kejadian rata-rata dunia yaitu 3%
dan dikalikan penduduk Indonesia sebanyak 220 juta, maka ada sekitar tujuh juta
penduduk Indonesia yang mengidap virus ini (WHO, 2009). Berdasarkan
penelitian yang ada, prevalensi penyakit perlemakan hati di Indonesia adalah
30,6% (Sofia, Nurdjanah, dan Ratnasari, 2009). Menurut Hian (2009), diantara
beberapa penyakit yang dapat disembuhkan melalui pengobatan herbal adalah
penyakit hati. Oleh karena itu, dalam penelitian ini dicari alternatif terapi
pengobatan dari sumber daya alam hayati untuk penyakit hati.
Salah satu tanaman asli Indonesia dan dapat dikembangkan di daerah
tropis beberapa negara adalah Macaranga tanarius L. (M. tanarius) (Starr, Starr,
dan Loope, 2003). Matsunami, Takamori, Shinzato, Aramoto, Kondo, Otsuka,
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
2
dkk (2006) melaporkan kandungan ekstraksi metanol dari tanaman M. tanarius
adalah macarangioside A-C, mallophenol A-B menunjukkan aktivitas
penangkapan radikal terhadap DPPH. Phommart, Sutthivaiyakit, Chimnoi,
Ruchirawat, dan Sutthivaiyakit (2005) melaporkan kandungan senyawa M.
tanarius berupa tanarifuranolol, tanariflavanon B,C,D, dan nymphaeol A-C
digunakan sebagai antiinflamasi, antioksidan, dan antitumor. Akar M. tanarius di
daerah Malaysia dibuat dekok sebagai antitusif dan antipiretik. Di daerah Taiwan
dan Cina, daun yang dikeringkan digunakan sebagai teh herbal (Lim, Lim, dan
Yule, 2008).
Karbon tetraklorida merupakan senyawa model hepatotoksik yang akan
mengalami reduksi oleh enzim sitokrom P-450 (CYP2E1) sehingga terbentuk
radikal bebas triklorometil (•CCl3) dan radikal bebas triklorometilperoksida
(•OOCCl3) yang lebih reaktif (Gregus dan Klaaseen, 2001). Radikal triklorometil
berikatan secara kovalen dengan lemak mikrosomal dan protein, dan akan
bereaksi secara langsung dengan membran fosfolipid dan kolesterol yang bersifat
toksik. Hasil lainnya adalah radikal lipid yang mengaktifkan senyawa oksigen
reaktif selanjutnya mengakibatkan peroksidasi lipid (Timbrell, 2008).
Adanya kandungan M. tanarius sebagai senyawa antioksidan berpotensi
mengurangi radikal bebas yang terbentuk dari reaksi tersebut. Ekstrak metanol-air
daun M. tanarius dilaporkan dapat menurunkan enzim Alanin Transferase (ALT)
dan Aspartat Transferase (AST) pada tikus terinduksi parasetamol dan
memberikan efek antiinflamasi pada tikus terinduksi karagenin (Kurniawati,
Adrianto, dan Hendra, 2011).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
3
Bentuk sediaan yang digunakan pada penelitian ini adalah ekstrak. Hal
ini berdasarkan penelitian Matsunami, dkk (2006) bahwa senyawa antioksidan
yang dapat diperoleh dari daun M. tanarius adalah hasil isolasi dengan pelarut
yang bersifat polar. Selain itu, berdasarkan penelitian Kurniawati, dkk (2011),
ekstrak metanol-air daun M. tanarius dapat memberi efek hepatoprotektif pada
model hepatotoksin parasetamol. Dengan penggunaan pelarut yang sama,
diharapkan dapat memperoleh efek hepatoprotektif dengan model hepatotoksin
lain yaitu karbon tetraklorida. Tipe kerusakan hati akibat induksi karbon
tetraklorida berbeda dengan parasetamol. Karbon tetraklorida dapat menyebabkan
steatosis, sedangkan parasetamol mengakibatkan necrosis. Eksplorasi tanaman M.
tanarius di Indonesia masih belum banyak dilakukan. Oleh karena itu, penelitian
tentang pengaruh pemberian ekstrak metanol-air daun M. tanarius terhadap kadar
serum Alanin Transferase (ALT) dan Aspartat Transferase (AST) pada tikus
terinduksi karbon tetraklorida menarik untuk diteliti.
1. Perumusan masalah
a. Apakah pemberian ekstrak metanol-air daun M. tanarius mempunyai
pengaruh hepatoprotektif dengan menurunkan kadar ALT dan AST
serum pada tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida ?
b. Berapa besar nilai dosis efektif tengah (ED50) hepatoprotektif ekstrak
metanol-air daun M. tanarius pada tikus jantan galur Wistar terinduksi
karbon tetraklorida ?
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
4
2. Keaslian penelitian
Sejauh pengamatan penulis, penelitian terhadap M. tanarius pernah
dilakukan oleh Matsunami, dkk (2006) yang melaporkan kandungan hasil
ekstraksi dengan metanol dari tanaman M. tanarius adalah macarangioside A-C,
mallophenol A- B. Senyawa tersebut menunjukkan aktivitas penangkapan radikal
terhadap DPPH. Phommart, dkk (2005) melaporkan kandungan senyawa baru,
yaitu tanarifuranolol, tanariflavanon C,D,B, nymphaeol A-C, blumenol A,
blumenol B, dan annuionone E yang antara lain dapat digunakan sebagai
antiinflamasi, antioksidan, dan antitumor. Penelitian Puteri dan Kawabata (2010)
melaporkan lima senyawa baru sebagai antidiabetik yaitu asam mallotinic,
corilagin, asam chebulagic, macatannin A dan macatannin B. Selain itu, juga
dilakukan penelitian efek hepatoprotektif ekstrak metanol-air daun M. tanarius
(Kurniawati, dkk., 2011) dan infusa daun M. tanarius pada tikus terinduksi
parasetamol (Mahendra dan Hendra, 2011). Penelitian Handayani (2012)
melaporkan bahwa ekstrak metanol-air daun M. tanarius dapat menurunkan kadar
glukosa darah pada tikus yang terbebani glukosa. Penelitian Permadi (2012)
melaporkan bahwa ekstrak metanol-air daun M. tanarius memiliki kemampuan
meningkatkan efek penurunan kadar glukosa darah dari insulin pada tikus ketika
digunakan secara bersamaan.
Penelitian ini berbeda dengan penelitian sebelumnya karena ingin melihat
pengaruh ekstrak metanol-air daun M. tanarius terhadap serum ALT dan serum
AST pada tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
5
3. Manfaat penelitian
a. Manfaat teoritis. Hasil penelitian ini diharapkan mampu
memberikan sumbangan dan tambahan ilmu pengetahuan baik di bidang farmasi
ataupun di bidang obat herbal.
b. Manfaat praktis. Hasil penelitian ini diharapkan dapat
meningkatkan penggunaan tanaman M. tanarius bagi masyarakat khususnya
sebagai alternatif pencegahan untuk penyakit hati.
B. Tujuan Penelitian
1. Pemberian ekstrak metanol-air daun M. tanarius mempunyai pengaruh
hepatoprotektif dengan menurunkan kadar ALT dan AST serum pada tikus
jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida.
2. Mengetahui berapa besar nilai dosis efektif tengah (ED50) hepatoprotektif
pemberian ekstrak metanol-air daun M. tanarius pada tikus jantan galur
Wistar terinduksi karbon tetraklorida.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
6
BAB II
PENELAAHAN PUSTAKA
A. Macaranga tanarius L.
1. Taksonomi
Kingdom : Plantae
Subkingdom : Tracheobionta (tumbuhan berpembuluh)
Divisio : Spermatophyta (menghasilkan biji)
Sub-Divisi : Magnoliophyta (tumbuhan berbunga)
Classis : Magnoliopsida (berkeping dua/dikotil)
Sub-classis : Rosidae
Ordo : Euphorbiales
Familia : Euphorbiaceae
Genus : Macaranga
Spesies : Macaranga tanarius L
(Plantamor, 2008).
2. Sinonim
Ricinus tanarius L., Macaranga molliuscula, Macaranga tomentosa
Druce, Mappa tanarius Blume (Starr, dkk., 2003).
3. Nama daerah
Tutup ancur (Jawa), mapu (Batak), mara (Sunda) (Proseanet, 2012).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
7
4. Morfologi
M. tanarius berupa pohon kecil sampai sedang dengan ketinggian 4-5
meter, berdaun hijau dengan dahan agak besar. Daun berseling, agak membundar,
dengan stipula besar yang luruh. Perbungaan bermalai di ketiak, bunga ditutupi
oleh daun gagang. Buah kapsul berkokus dua, ada kelenjar kekuningan di luarnya
dan biji membulat (Proseanet, 2012).
5. Kandungan kimia
Penelitian tentang kandungan kimia daun M. tanarius dilaporkan
senyawa megastigma glukosida yaitu macarangioside A, macarangioside B,
macarangioside C, macarangioside D, mallophenol B, lauroside E, methyl
brevifolin carboxylate, hyperin dan isoquercitrin (Matsunami, dkk., 2006).
Kandungan lain yang berhasil diidentifikasi adalah dua megastigman glukosida
yaitu macarangioside E dan F, bersama 15 komponen lain (Matsunami, Otsuka,
Kondo, Shinzato, Kawahata, Yamaguchi, dkk., 2009). Dari daun M. tanarius
ditemukan 3 kandungan senyawa baru, yaitu tanarifuranonol, tanariflavanon C,
dan tanariflavanon D (Gambar 1) bersama dengan 7 kandungan, yaitu nymphaeol
A, nymphaeol B, nymphaeol C, tanariflavanone B, blumenol A (vomifoliol),
blumenol B (7,8 dihydrovomifoliol), dan annuionone E (Phommart, dkk., 2005).
Penelitian Puteri dan Kawabata (2010) melaporkan terdapat lima senyawa baru,
yaitu asam mallotinic, corilagin, asam chebulagic, macatannin A dan macatannin
B.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
8
Gambar 1. Struktur kandungan senyawa daun M. tanarius (Matsunami,
dkk., 2006 dan Phommart, dkk., 2005)
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
9
6. Khasiat dan kegunaan
Di Malaysia dan Thailand, dekok akar M. tanarius digunakan sebagai
antipiretik dan antitusif. Akar keringnya digunakan untuk agen emetik dan daun
segarnya untuk mencegah inflamasi (Phommart, dkk., 2005). Ekstrak metanol-air
daun M. tanarius dapat digunakan sebagai hepatoprotektif karena adanya aktivitas
antioksidan yang dapat menghambat oksidasi metabolit reaktif parasetamol
(NAPQI) oleh sitokrom P-450. Hal ini didukung oleh penelitian uji antiinflamasi
pada tikus terinduksi karagenin (Kurniawati, dkk., 2011). Penelitian Puteri dan
Kawabata (2010) melaporkan terdapat lima senyawa baru, yaitu asam mallotinic,
corilagin, asam chebulagic, macatannin A dan macatannin B. Senyawa tersebut
berpotensi sebagai antidiabetik, yaitu sebagai senyawa penghambat enzim α-
glucosidase. Penelitian Handayani (2012) melaporkan bahwa ekstrak metanol-air
daun M. tanarius dapat menurunkan kadar glukosa darah pada tikus yang
terbebani glukosa.
B. Anatomi dan Fisiologi Hati
Hati merupakan organ atau kelenjar terbesar dari tubuh. Hati disebut
kelenjar karena menghasilkan empedu dan juga mengeluarkan hasil produksi dari
makanan (Wibowo dan Paryana, 2009). Hati memiliki berat sekitar 1400 g pada
orang dewasa dan dibungkus oleh suatu fibrosa. Hati menerima hampir sekitar
1500 ml darah per menit melalui dua sumber, yaitu vena porta dan arteri hepatica
(Ganong dan McPhee, 2011).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
10
Hati mempunyai dua facies, yaitu facies diaphragmatica dan facies
visceralis. Facies diaphragmatica terletak di sebelah atas dengan bentuk sesuai
lengkung diafragma dan mempunyai permukaan yang halus. Permukaan ini terdiri
dari bagian anterior dan posterior, sedangkan facies visceralis atau posteroinferior
menghadap ke bawah dan ke belakang sehingga permukaannya ireguler. Pada
facies visceralis terdapat porta hepatis, yaitu suatu hilum dari hati yang
merupakan tempat masuk dan keluar pembuluh darah, saluran empedu, pembuluh
getah bening, dan plexus nervorum (Wibowo dan Paryana, 2009).
Hati dibagi menjadi dua lobus, yaitu lobus kanan dan lobus kiri. Lobus
kanan dibagi menjadi bagian superior dan posterior oleh fisura segmentalis.
Lobus kiri dibagi oleh ligamentum falsiformis menjadi segmen medial dan lateral.
Setiap lobus pada hati dibagi menjadi struktur-stuktur yang disebut lobulus.
Lobulus terdiri dari lempeng-lempeng sel hati yang berbentuk kubus dan tersusun
mengelilingi vena sentralis. Di antara lempeng-lempeng sel hati terdapat kapiler-
kapiler yang disebut sinusoid yang merupakan cabang vena porta dan arteri
hepatica. Sinusoid dibatasi oleh sel Kupffer (Gambar 2). Sel Kupffer (sel
fagositik) memiliki fungsi utama yaitu untuk menelan bakteri dan benda asing lain
dalam darah (Price dan Wilson, 2005).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
11
Gambar 2. Struktur mikroskopik hati (Ganong dan McPhee, 2011)
Hati menerima darah dari vena portae hepatis (70%) dan arteri hepatica
(30%). Arteri hepatica membawa darah yang berisi oksigen yang berasal arteria
hepatica communis, di sebelah kiri ductus choledocus dan di depan vena porta
(Wibowo dan Paryana, 2009). Vena portae membawa darah vena dari usus halus
yang kaya akan nutrient yang baru diserap, obat, dan racun langsung ke hati. Vena
portae membentuk jalinan khusus yang memungkinkan setiap hepatosit dibasuh
langsung oleh darah porta (Ganong dan McPhee, 2011).
Hati mempunyai fungsi utama sebagai pusat metabolisme. Hati
mempunyai struktur seragam yang terdiri dari kelompok sel-sel yang saling
dipersatukan oleh sinusoid. Sel-sel hati mendapat suplai darah dari vena portae
hepatis yang kaya makanan, tidak mengandung oksigen, dan kadang-kadang
toksik, serta dari arteria hepatica yang mengandung oksigen. Karena memiliki
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
12
sistem peredaran darah yang tidak biasa ini, sel hati mendapat darah yang relatif
kurang oksigen. Hal inilah yang menyebabkan sel hati lebih rentan terhadap
kerusakan dan penyakit (Wibowo dan Paryana, 2009).
C. Kerusakan Hati
Toksikan dapat mengakibatkan berbagai jenis kerusakan hati seperti :
1. Perlemakan hati (Steatosis)
Perlemakan hati terjadi bila penimbunan lemak melebihi 5% dari berat
hati atau mengenai lebih dari separuh jaringan sel hati. Perlemakan hati ini sering
berpotensi menjadi penyebab kerusakan hati dan sirosis hati. Steatosis adalah
respon umum untuk banyak pemejanan akut tetapi tidak semua hepatotoksin.
Seringkali, toksin yang menginduksi steatosis (Gambar 3) adalah reversibel dan
tidak menyebabkan kematian hepatosit. Hepatosit yang mengandung lemak
berlebih tampaknya memiliki beberapa putaran, vakuola kosong yang
menggantikan nukleus ke pinggiran sel. Perlemakan hati dapat berasal dari satu
atau lebih peristiwa berikut: kelebihan pasokan asam lemak bebas ke hati,
gangguan pada siklus trigliserida, penurunan oksidasi asam lemak, dan penurunan
sintesis lipoprotein densitas sangat rendah (Gregus dan Klaaseen, 2001).
Toksikan-toksikan yang menyebabkan penimbunan lipid dalam hati dengan
mekanisme yang paling umum yaitu adanya kerusakan pelepasan trigliserida hati
ke plasma. Karbon tetraklorida terutama bekerja melalui metabolit reaktifnya,
radikal triklorometil yang secara kovalen mengikat protein dan lipid tidak jenuh
dan menyebabkan peroksidasi lipid (Lu, 1995).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
13
Gambar 3. Struktur mikroskopik hati yang mengalami steatosis
(Mercer University School of Medicine, 2012)
2. Kematian sel (Necrosis)
Nekrosis (Gambar 4) merupakan kematian sel-sel hati yang ditandai
dengan pembengkakan sel, kebocoran, hancurnya inti dan masuknya sel-sel
radang. Ketika nekrosis pada hepatosit terjadi, kebocoran plasma membran dapat
dideteksi secara kimiawi dengan menguji kadar enzim yang berasal dari sitosol di
plasma atau serum. Keterangan yang informatif adalah tingkat aktivitas ALT,
sebagai enzim hepatosit yang paling utama (Treinen dan Moslen, 2001).
Gambar 4. Struktur mikroskopik hati yang mengalami nekrosis
(Mercer University School of Medicine, 2012)
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
14
3. Kolestasis
Kolestasis adalah jenis kerusakan hati yang bersifat akut, dan lebih jarang
ditemukan dibandingkan dengan perlemakan hati dan nekrosis. Mekanisme utama
terjadinya kolestasis adalah berkurangnya aktivitas ekskresi empedu pada
membran kanalikulus (Lu, 1995). Ciri kolestasis yaitu meningkatnya level serum
dari konsentrasi normal dalam empedu, khususnya garam empedu dan bilirubin.
Bila ekskresi empedu dari pigmen bilirubin kekuningan terganggu, pigmen ini
terakumulasi di kulit dan mata, menghasilkan penyakit kuning, dan tumpahan ke
dalam urin, yang menjadi kuning coklat atau gelap terang. Toksin diinduksi
kolestasis dapat bersifat sementara atau kronis, ketika besar, hal ini terkait dengan
pembengkakan sel, kematian sel, dan peradangan. Banyak jenis bahan kimia
termasuk logam, hormon dan obat-obatan menyebabkan kolestasis (Gregus dan
Klaaseen, 2001).
4. Sirosis
Sirosis merupakan bentuk kerusakan yang terakhir, sering fatal, tahap
kerusakan hati kronis. Sirosis ditandai dengan akumulasi sejumlah jaringan
fibrosa yang luas, khususnya serabut-serabut kolagen, sebagai respon terhadap
kerusakan atau terhadap peradangan. Akibat peradangan zat kimia berulang kali,
sel-sel hepatik yang hancur digantikan dengan jaringan parut fibrotik. Akibat
endapan kolagen yang terus-menerus, anatomi hati terganggu oleh jaringan parut
fibrotik yang saling berhubungan. Ketika jaringan parut fibrotik membagi-bagi
massa hati yang masih baik menjadi nodul-nodul dengan hepatosit yang masih
beregenerasi, fibrosis telah berkembang menjadi sirosis dan hati memiliki
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
15
kapasitas cadangan fungsional yang sangat kecil untuk menjalankan fungsi hati.
Sirosis bersifat irreversibel, memiliki harapan hidup kecil, biasanya merupakan
hasil paparan berulang zat kimia beracun contohnya alkohol (Gregus dan
Klaaseen, 2001).
D. Hepatotoksin
Obat-obat dan senyawa yang dapat menyebabkan kerusakan hati
diklasifikasikan menjadi dua, yaitu:
1. Hepatotoksin teramalkan (tipe A)
Merupakan obat atau senyawa yang bila diberikan dapat mempengaruhi
sebagian besar orang yang menelan senyawa tersebut dalam jumlah yang cukup
untuk menimbulkan efek toksik. Jenis hepatotoksin ini bergantung pada dosis
pemberian. Contoh dari obat-obat tipe ini adalah parasetamol, karbon tetraklorida,
salisilat, tetrasiklin, dan metotrexat.
2. Hepatotoksin tak teramalkan (tipe B)
Merupakan obat atau senyawa yang tidak bersifat toksik pada hati tetapi
jika diberikan kepada orang tertentu akan dapat menimbulkan efek toksik. Jenis
ini tidak bergantung pada dosis pemberian dan frekuensi terjadinya sangat jarang,
hanya terjadi pada 1 : 1000 orang. Contoh obat-obat yang tipe ini adalah
isoniazid, halothane, dan chlorpromazine.
(Forrest, 2006).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
16
E. Karbon tetraklorida
Gambar 5. Struktur molekul karbon tetraklorida
(Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan, 1995)
Karbon tetraklorida (Gambar 5) merupakan cairan jernih mudah
menguap, tidak berwarna, dan bau khas. Senyawa ini memiliki BM 153,82 dan
sangat sukar larut dalam air (Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan,
1995). Karbon tetraklorida merupakan molekul sederhana, yang jika diberikan
kepada berbagai spesies, menyebabkan nekrosis sentrilobuler dan perlemakan
hati. Pemejanan secara kronis menyebabkan sirosis hati, tumor hati dan juga
kerusakan ginjal. Hati menjadi target utama dari ketoksikan karbon tetraklorida
karena ketoksikan senyawa ini tergantung pada metabolisme aktivasi oleh
sitokrom P-450 (CYP2E1). Dosis rendah karbon tetraklorida hanya menyebabkan
perlemakan hati dan destruksi sitokrom P-450 (Timbrell, 2008).
Destruksi sitokrom P-450 terjadi terutama di sentrilobular dan daerah
tengah hati. Senyawa ini selektif untuk isoenzim tertentu, pada tikus diketahui
selektif untuk CYP2E1 sedangkan pada isoenzim lain seperti CYP1A1 tidak
terpengaruh. Destruksi CYP2E1 tampaknya dipengaruhi oleh jumlah oksigen
yang tersedia, yang mana menjadi lebih besar ketika lebih banyak oksigen tersedia
(Timbrell, 2008).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
17
Gambar 6. Mekanisme biotransformasi dan oksidasi karbon tetraklorida
(Timbrell, 2008)
Sebagai enzim mikrosomal, CYP2E1 akan mempengaruhi aktivasi
metabolit dari senyawa yang terbentuk, hal ini dapat meningkatkan atau
mengurangi sifat toksik dari senyawa induk. Dalam hal ini CYP2E1 berfungsi
sebagai agen pereduksi dan mengkatalis adisi elekron yang mengakibatkan
hilangnya satu ion klorin sehingga terbentuk radikal bebas triklorometil (•CCl3)
(Gambar 6) yang merupakan metabolit reaktif. Radikal bebas triklorometil ini
dengan adanya O2 (oksigen) akan berubah menjadi radikal bebas
triklorometilperoksi (•OOCCl3) yang lebih reaktif (Gregus dan Klaaseen, 2001).
Radikal triklorometil yang dihasilkan dapat mengalami suatu reaksi,
senyawa reaktif tersebut merusak sekitar dari sitokrom P-450. Radikal bebas
triklorometil berikatan secara kovalen dengan lemak mikrosomal dan protein, dan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
18
akan bereaksi secara langsung dengan membran fosfolipid dan kolesterol yang
bersifat toksik. Reaksi ini juga akan menghasilkan kloroform, yang merupakan
salah satu metabolit dari karbon tetraklorida. Hasil lain dari reaksi ini adalah
radikal lipid yang akan mengaktifkan senyawa oksigen reaktif selanjutnya
mengakibatkan peroksidasi lipid (Gambar 6) (Timbrell, 2008). Selama satu
sampai tiga jam setelah pemejanan karbon tetraklorida, trigliserida menumpuk di
hepatopsit dan terlihat sebagai droplet lipid. Lipid dalam hati yang terbentuk ini
dapat menghambat sintesis protein sehingga menurunkan produksi lipoprotein,
yang bertanggungjawab dalam transport lipid untuk keluar dari hepatosit,
sehingga transport lipid akan terhambat sehingga mnyebabkan steatosis (Timbrell,
2008).
Peroksidasi lipid juga dapat menyebabkan kerusakan membran sel dan
kerusakan mitokondria. Kerusakan ini berupa gangguan integritas membran yang
menyebabkan keluarnya berbagai isi sitoplasma, antara lain enzim ALT. Enzim
ALT yang ada di dalam sel akan keluar dan masuk peredaran darah sehingga
jumlah enzim ALT meningkat. Terjadinya penghambatan sintesis protein juga
diakibatkan adanya gangguan keluarnya lipid dari hati yang disebabkan karena
hambatan sintesis lipoprotein yang membawa trigliserida meninggalkan hati
sehingga menimbulkan steatosis (perlemakan hati). Pada keadaan steatosis ini,
struktur retikulum endoplasma mengalami distorsi, sintesa protein menjadi
lambat, selanjutnya akan terjadi penyimpangan dengan cepat terhadap aktivitas
enzim yang berada di retikulum endoplasma (Wahyuni, 2005). Tubuh manusia
sebenarnya mempunyai sistem pertahanan untuk mengatasi radikal bebas, salah
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
19
satunya yaitu glutation-S-transferase (GSH) yang berperan sebagai antioksidan
endogen. Jika terdapat radikal bebas di dalam tubuh, senyawa ini akan menangkap
radikal bebas tersebut (Timbrell, 2008).
Peningkatan aktivitas serum ALT yang menyebabkan steatosis akibat
induksi karbon tetraklorida mencapai tiga kali lipat dari kondisi normal (Tabel I)
dan peningkatan aktivitas serum AST mencapai empat kali lipat dari kondisi
normal (Ziemmerman, 1999). Bai, Zhang, Chen, Zong, Guo, dan Liu (2011)
melaporkan adanya peningkatan aktivitas ALT kurang lebih tiga kali lipat
dibanding kelompok kontrol pada tikus terinduksi karbon tetraklorida. Hal yang
sama juga dilaporkan oleh Rajendran, Hemalatha, Akasakalai, MadhuKrishna,
Sohil, Vittal, dkk (2009) dalam penelitian daun Mimosa pudica menyebutkan
aktivitas serum ALT akibat induksi karbon tetraklorida mencapai kurang lebih
dua kali lipat dibanding kelompok kontrol pada tikus terinduksi karbon
tetraklorida.
Tabel I. Peningkatan aktivitas enzim serum akibat induksi senyawa toksik
(Ziemmerman, 1999).
F. Metode Uji Hepatotoksisitas
Evaluasi terjadinya kerusakan hepatik dapat dilakukan dengan beberapa
uji penting di laboratorium. Evaluasi tersebut dapat dikategorikan sebagai berikut:
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
20
1. Tes enzim serum
Untuk mengidentifikasi kerusakan hati, dapat digunakan enzim serum
didasarkan spesifikasi dan sensitivitas berbagai tipe kerusakan hati. Berbagai
parameter dapat diukur dalam plasma. Dengan demikian, penentuan AST dan
ALT enzim adalah cara paling umum untuk mendeteksi kerusakan hati, enzim
yang dihasilkan beberapa kali lipat dalam 24 jam pertama setelah kerusakan
(Timbrell, 2008). Namun, ada sejumlah enzim lain yang dapat digunakan sebagai
penanda. Alkalinfosfatase dan gamma-glutamiltranspeptidase ( -GT), kenaikan
aktivitas enzim-enzim serum tersebut menunjukkan kerusakan kolestatik (Plaa
dan Charbonneau, 2001).
2. Tes ekskretori hepatik
Zat kimia yang memasuki sirkulasi sistemik dapat diekskresikan oleh hati
dalam bentuk tidak berubah atau diubah di dalam hepatosit. Senyawa seperti
bilirubin dan xenobiotika lainnya digunakan untuk mendeteksi dan menentukan
kerusakan hepatik (Plaa dan Charbonneau, 2001). Plasma bilirubin juga dapat
diukur, yang meningkat pada kerusakan hati, dan albumin plasma menurun oleh
kerusakan hati (meskipun juga oleh kerusakan ginjal) (Timbrell, 2008).
3. Analisis histologik kerusakan hati
Analisis potensi hepatotoksik zat kimia tidak lengkap tanpa deskripsi
histologi kerusakan yang dihasilkan. Ciri-ciri kerusakan hati ditentukan dengan
pengamatan mikroskopik cahaya (Plaa dan Charbonneau, 2001).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
21
G. ALT dan AST
Kerusakan hepatoseluler dapat dideteksi dengan mengukur indeks
fungsional dan dengan mengamati produk hepatosit yang rusak atau nekrotik. Uji
enzim sering menjadi satu-satunya petunjuk adanya cedera sel pada penyakit hati
dini karena perubahan ringan kapasitas ekskretorik mungkin tersamar akibat
kompensasi dari bagian hati lain yang masih fungsional (Sacher dan McPherson,
2002). Penentuan enzim AST dan ALT adalah cara paling umum untuk
mendeteksi kerusakan hati, enzim yang dibesarkan beberapa kali lipat dalam 24
jam pertama setelah kerusakan (Timbrell, 2008).
Meskipun terjadi variasi dalam level plasma, baik AST dan ALT dalam
kondisi yang mempengaruhi integritas hati, ALT adalah enzim hati yang lebih
spesifik. Hal ini terutama hadir dalam hati dengan hanya sejumlah kecil di organ
lain. Hati adalah sumber terkaya dari ALT. Transaminase ini sebagai nilai indeks
kemungkinan kerusakan hati, dalam mendeteksi adanya toksisitas pada hati atau
perubahan dalam arsitektur membran sel hati. Enzim ALT lebih spesifik untuk
organ hati karena proporsinya paling banyak berada pada organ ini dibanding
organ tubuh lainnya (Edem dan Akpanabiatu, 2006).
H. Ekstraksi
Ekstrak adalah sediaan kental yang diperoleh dengan mengekstraksi
senyawa aktif dari simplisia nabati atau simplisia hewani menggunakan pelarut
yang sesuai, kemudian semua atau hampir pelarut diuapkan dan massa atau serbuk
yang tersisa diperlakukan sedemikian rupa hingga memenuhi baku yang telah
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
22
ditetapkan (Badan Pengawasan Obat dan Makanan Republik Indonesia, 2005).
Ekstraksi dengan metode maserasi merupakan cara penyarian sederhana yang
dilakukan dengan cara merendam serbuk simplisia dalam cairan penyari selama
beberapa hari pada temperatur kamar dan terlindung dari cahaya sambil diaduk
(Badan Pengawasan Obat dan Makanan Republik Indonesia, 2010).
Pada metode ini, cairan penyari akan masuk ke dalam sel melewati
dinding sel sehingga isi sel akan larut akibat perbedaan konsentrasi antara larutan
di dalam sel dengan di luar sel. Larutan dengan konsentrasi tinggi akan terdesak
keluar dan diganti oleh cairan penyari dengan konsentrasi rendah (proses difusi).
Peristiwa tersebut terjadi secara berulang hingga terjadi keseimbangan konsentrasi
antara larutan di luar sel dan di dalam sel. Selanjutnya endapan dipisahkan dan
filtrat dipekatkan (Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan Republik
Indonesia, 1986).
I. Landasan Teori
Ada bermacam-macam bentuk kerusakan hati, salah satunya adalah
perlemakan hati. Perlemakan hati dapat terjadi karena induksi senyawa toksik.
Karbon tetraklorida digunakan sebagai model dengan dosis tertentu untuk
menimbulkan perlemakan hati. Karbon tetraklorida akan direduksi oleh enzim
sitokrom P-450 menjadi radikal bebas triklorometil (•CCl3) dan
triklorometilperoksida (•OOCCl3) yang lebih reaktif (Gregus dan Klaaseen, 2001).
Radikal triklorometil berikatan secara kovalen dengan lemak mikrosomal dan
protein, dan akan bereaksi secara langsung dengan membran fosfolipid dan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
23
kolesterol yang bersifat toksik. Hasil lainnya adalah radikal lipid yang
mengaktifkan senyawa oksigen reaktif selanjutnya mengakibatkan peroksidasi
lipid (Timbrell, 2008).
Oleh karena itu, dapat digunakan senyawa antioksidan dari luar untuk
mengurangi radikal bebas dari karbon tetraklorida. Salah satu kandungan M.
tanarius hasil ekstraksi dengan metanol-air adalah glikosida yang berperan
sebagai antioksidan terhadap penangkapan radikal bebas DPPH. Secara umum,
dapat dikatakan bahwa senyawa turunan glikosida mampu memberikan efek
antioksidan (Matsunami, dkk., 2006). Pada penelitian Kurniawati, ddk (2011),
ekstrak metanol-air daun M. tanarius menghambat terjadinya toksisitas hati pada
tikus terinduksi parasetamol.
J. Hipotesis
Pemberian ekstrak metanol-air daun M. tanarius mempunyai efek
hepatoprotektif dengan menurunkan aktivitas kadar ALT-AST serum pada tikus
jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
24
BAB III
METODE PENELITIAN
A. Jenis dan Rancangan Penelitian
Penelitian ini termasuk jenis penelitian eksperimental murni dengan
rancangan acak lengkap pola searah.
B. Variabel dan Definisi Operasional
1. Variabel utama
a. Variabel bebas. Variabel bebas penelitian ini adalah variasi dosis
dalam pemberian ekstrak daun M. tanarius. Dosis ekstrak daun M. tanarius
adalah sejumlah (gram) ekstrak daun M. tanarius tiap satuan kg berat badan dari
subyek uji. Ekstrak daun M. tanarius dibuat dengan mengekstraksi sejumlah
(gram) serbuk daun M. tanarius dalam pelarut polar (metanol-air).
b. Variabel tergantung. Variabel tergantung penelitian ini adalah
penurunan aktivitas serum ALT dan AST akibat pemberian jangka panjang
ekstrak metanol-air daun M. tanarius terhadap sel hati tikus jantan galur Wistar
terinduksi karbon tetraklorida.
2. Variabel pengacau
a. Variabel pengacau terkendali. Variabel pengacau terkendali dalam
penelitian ini adalah kondisi hewan uji, yaitu tikus jantan galur Wistar dengan
berat badan 150-250 g dan umur 2-3 bulan, frekuensi pemberian ekstrak daun M.
tanarius satu kali sehari selama enam hari berturut-turut dengan waktu pemberian
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
25
yang sama, cara pemberian senyawa pada tikus dilakukan secara per oral dan
intraperitonial, dan bahan uji yang digunakan berupa daun M. tanarius yang
diperoleh dari Kebun Obat Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma
Yogyakarta dan diambil pada bulan Mei.
b. Variabel pengacau tak terkendali. Variabel pengacau tak terkendali
dalam penelitian ini adalah kondisi patologis dari tikus jantan galur Wistar yang
digunakan.
3. Definisi operasional
a. Ekstrak metanol-air daun M. tanarius. Ekstrak daun M. tanarius
adalah ekstrak kental yang diperoleh dengan mengekstrasi serbuk kering daun M.
tanarius seberat 10,0 g yang dilarutkan dalam 100 ml pelarut metanol 50% secara
maserasi selama 72 jam, dengan putaran 140 rpm. Kemudian disaring dengan
kertas saring, dievaporasi dan diuapkan dalam oven selama 24 jam pada suhu 500
C, hingga bobot pengeringan tetap dengan susut pengeringan sebesar 0%.
b. Penurunan aktivitas serum ALT dan serum AST. Didefinisikan
sebagai kemampuan ekstrak metanol-air daun M. tanarius pada dosis tertentu
untuk menurunkan kadar serum ALT dan AST pada tikus jantan galur Wistar
terinduksi karbon tetraklorida.
c. Efek hepatoprotektif jangka panjang. Pemberian ekstrak metanol-
air daun M. tanarius satu kali sehari selama enam hari berturut-turut.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
26
C. Bahan Penelitian
1. Bahan utama
a. Hewan uji yang digunakan berupa tikus jantan galur Wistar dengan
umur 2-3 bulan dan berat badan 150-250 g yang diperoleh dari
Laboratorium Imono Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma
Yogyakarta.
b. Daun M. tanarius yang diperoleh dari Kebun Obat Fakultas Farmasi
Universitas Sanata Dharma Yogyakarta pada bulan Mei.
2. Bahan kimia
a. Bahan hepatotoksin yang digunakan adalah karbon tetraklorida yang
diperoleh dari Laboratorium Kimia Analisis Fakultas Farmasi
Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.
b. Metanol dan air suling sebagai pelarut yang digunakan untuk
pembuatan sediaan uji, yang diperoleh dari Laboratorium
Farmakognosi Fitokimia Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma
Yogyakarta.
c. Aqua bidestilata untuk blanko pengujian ALT dan AST, yang
diperoleh dari Laboratorium Kimia Analisis Instrumental Fakultas
Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.
d. Kontrol serum ALT-AST Cobas® (PreciControl ClinChem Multi 2)
Roche/Hitachi analyzer
e. Olive oil Bertolli®
f. Reagen serum ALT
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
27
Reagen serum yang digunakan adalah reagen serum ALT diasys.
Komposisi dan konsentrasi dari reagen serum ALT adalah sebagai
berikut.
Tabel II. Komposisi dan konsentrasi reagen serum ALT
R1 : TRIS pH 7.15 140 mmol/L
L-Alanine 700 mmol/L
LDH
(lactatedehydrogenase) ≥ 2300 U/L
R2 : 2-Oxoglutarate 85 mmol/L
NADH 1 mmol/L
Pyridoxal-5-phosphate FS : Good’s buffer pH 9.6 100 mmol/L
g. Reagen serum AST
Reagen serum yang digunakan adalah reagen serum AST diasys.
Komposisi dan konsentrasi dari reagen serum AST adalah sebagai
berikut.
Tabel III. Komposisi dan konsentrasi reagen serum AST
R1 : TRIS pH 7.65 110 mmol/L
L-Aspartate 320 mmol/L
MDH
(malate dehydrogenase) ≥ 800 U/L
LDH
(lactate dehydrogenase) ≥ 1200 U/L
R2 : 2-Oxoglutarate 65 mmol/L
NADH 1 mmol/L
Pyridixal-5-posphate FS : Good’s buffer pH 9.6 100 mmol/L
Pyridoxal-5-phosphate 13 mmol/L
D. Alat atau Instrumen Penelitian
1. Alat ekstraksi
Seperangkat alat gelas berupa Bekker glass, Erlenmeyer, gelas ukur, labu
ukur, cawan porselen, corong Buchner, pipet tetes, batang pengaduk (Pyrex Iwaki
Glass®). Mesin penyerbuk Retsch
®, ayakan No. 40 Electric Sieve Shaker
Indotest
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
28
Multi Lab®, timbangan analitik Mettler Toledo
®, moisture balance, orbital shaker
Optima®, rotary vacuum evaporator IKAVAC
®, oven Memmert
®.
2. Alat uji hepatoprotektif
Seperangkat alat gelas berupa Bekker glass, gelas ukur, tabung reaksi,
labu ukur, pipet tetes, batang pengaduk (Pyrex Iwaki Glass®). Timbangan elektrik
Mettler Toledo®, sentrifuge Centurion Scientific
®, vortex Genie Wilten
®, spuit per
oral dan syringe 3 cc Terumo®, spuit ip. dan syringe 1 cc Terumo
®, pipa kapiler,
tabung Eppendorf, Microlab 200 Merck®.
E. Tata Cara Penelitian
1. Determinasi tanaman M. tanarius
Determinasi tanaman M. tanarius dilakukan dengan mencocokan ciri-ciri
tanaman M. tanarius dengan buku acuan Flora of Java (Backer dan Brink, 1963).
Determinasi dilakukan oleh Bapak Yohanes Dwiatmaka, M.Si., Dosen Program
Studi Farmasi, Fakultas Farmasi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.
2. Pengumpulan bahan
Bahan uji yang digunakan adalah daun M. tanarius yang masih segar dan
berwarna hijau, tidak berlubang, tidak terlalu muda dan tidak terlalu tua, dipetik
dari Kebun Obat Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta pada
bulan Mei.
3. Pembuatan serbuk
Daun M. tanarius dicuci bersih di bawah air mengalir. Setelah bersih,
daun diangin-anginkan hingga daun tidak tampak basah kemudian dilakukan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
29
pengeringan di bawah kain berwarna gelap dan sinar matahari. Tujuan dari
pengeringan ini adalah melindungi daun dari kerusakan paparan matahari secara
langsung. Selain itu, kain berwana gelap menjadikan proses pemanasan
berlangsung konstan karena kain berwarna gelap akan menyerap panas dan juga
melindungi daun terpapar kotoran di udara. Pengeringan dilanjutkan
menggunakan oven pada suhu 50° C selama 24 jam. Setelah kering daun dibuat
serbuk dan diayak dengan ayakan nomor 40 supaya kandungan fitokimia yang
terkandung dalam daun M. tanarius lebih mudah terekstrak karena luas
permukaan serbuk yang kontak dengan pelarut semakin besar.
4. Penetapan kadar air serbuk daun M. tanarius
Berdasarkan Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan
Republik Indonesia (1989), penetapan kadar air secara sederhana menggunakan
alat moisture balance. Sebanyak 5 g serbuk daun M. tanarius dimasukkan ke
dalam alat moisture balance, kemudian diratakan. Serbuk ditimbang dihitung
sebagai bobot sebelum pemanasan. Serbuk dipanaskan pada suhu 110 0C selama
15 menit. Kemudian serbuk ditimbang ulang dihitung sebagai bobot sesudah
pemanasan. Selisih bobot sebelum pemanasan dan sesudah pemanasan merupakan
kadar air dari sampel yang diteliti.
5. Pembuatan ekstrak metanol-air daun M. tanarius
Sebanyak 10 g serbuk kering daun M. tanarius diekstraksi secara
maserasi dengan melarutkan serbuk dalam 100 ml pelarut metanol 50% pada suhu
kamar selama 3x24 jam dengan kecepatan 140 rpm. Tujuan dilarutkan dalam
pelarut metanol agar senyawa kimia yang terkandung dalam daun M. tanarius
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
30
dapat larut dalam pelarut. Setelah dilakukan perendaman, hasil maserasi disaring
menggunakan corong Buchner dilapisi kertas saring. Larutan hasil saringan
dipindahkan dalam labu alas bulat untuk dievaporasi. Tujuan proses evaporasi
adalah menguapkan cairan penyari pada proses maserasi. Prinsip alat vaccum
evaporator adalah menguapkan pelarut dengan suhu rendah dan berputar dan
menggunakan tekanan tinggi untuk membantu proses penguapan. Hasil evaporasi
dituangkan dalam cawan porselen yang telah ditimbang sebelumnya, agar
mempermudah perhitungan randemen ekstrak yang akan diperoleh. Cawan
porselen yang berisi larutan hasil maserasi dimasukkan dalam oven untuk
diuapkan selama 24 jam dengan suhu 50° C untuk mendapatkan ekstrak metanol-
air daun M. tanarius yang kental dengan bobot pengeringan ekstrak yang tetap.
Menghitung rata-rata rendemen enam replikasi ekstrak metanol-air daun M.
tanarius kental yang telah dibuat.
Rendemen ekstrak = berat cawan ekstrak kental – berat cawan kosong
Hasil menunjukkan bahwa sebanyak 1 kg serbuk kering daun M. tanarius
menghasilkan 63 cawan ekstrak kental. Rata-rata rendemen setiap cawan 3,77 g
ekstrak kental. Pada pembuatan 1 kg serbuk kering daun M. tanarius
menghasilkan 237,51 g ekstrak kental, dengan rendemen 23,75%.
6. Penetapan konsentrasi pekat ekstrak
Konsentrasi yang dapat digunakan adalah konsentrasi pekat yang dapat
dibuat dimana pada konsentrasi tersebut ekstrak dapat dimasukkan serta
dikeluarkan dari spuit oral. Cara pembuatannya adalah dengan melarutkan ekstrak
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
31
per cawannya, yaitu 1,92 g dalam labu ukur terkecil dengan pelarut yang sesuai
CMC Na 1%. Labu ukur terkecil yang tersedia adalah labu ukur 5 ml sehingga
konsentrasi ekstrak dapat ditetapkan sebesar 0,384 g/ml atau 384 mg/ml atau 38,4
% b/v (Kurniawati, dkk., 2011).
7. Penetapan dosis ekstrak metanol-air daun M. tanarius
Menurut Kurniawati, dkk (2011), dasar penetapan peringkat dosis adalah
bobot tertinggi tikus dan pemberian cairan secara peroral separuhnya yaitu 2,5 ml.
Penetapan dosis tertinggi ekstrak metanol-air daun M. tanarius adalah sebagai
berikut.
D x BB = C x V
D x 0,250 kg BB = 384 mg/ml x 2,5 ml
D = 3840 mg/kg BB
Dua dosis lainnya diperoleh dengan menurunkan 3 dan 6 kalinya dengan
pembulatan dari dosis tertinggi sehingga didapatkan dosis 1280 dan 426 mg/kg
BB. Dosis yang akan digunakan dalam penelitian adalah 426; 1280; dan 3840
mg/kg BB atau 0,426; 1,280; dan 3,840 g/kg BB.
8. Pembuatan larutan karbon tetraklorida
Berdasarkan penelitian Janakat dan Al-Merie (2002), pembuatan larutan
Karbon tetraklorida dibuat dalam konsentrasi 50%. Larutan karbon tetraklorida
dalam olive oil dibuat dengan cara melarutkankan 50 ml karbon tetraklorida ke
dalam olive oil sebanyak 50 ml.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
32
9. Pembuatan suspending agent CMC-Na 1%
Suspending agent CMC-Na 1% dibuat dengan cara mendispersikan lebih
kurang 1,0 g CMC-Na yang telah ditimbang seksama ke dalam air mendidih
sampai volume 100,0 ml dan digunakan untuk membuat suspensi ekstrak
metanol-air daun M.tanarius.
10. Uji pendahuluan
a. Penetapan dosis hepatotoksin karbon tetraklorida. Pemilihan dosis
karbon tetraklorida dilakukan untuk mengetahui pada dosis berapa karbon
tetraklorida mampu menyebabkan kerusakan hati tikus yang ditandai dengan
peningkatan aktivitas serum ALT paling tinggi. Dosis hepatotoksik yang
digunakan dalam penelitian ini mengacu pada penelitian Janakat dan Al-Merie
(2002), bahwa dosis 2 ml/kg BB terbukti mampu meningkatkan aktivitas serum
ALT dan AST pada tikus bila diberikan secara intraperitonial (i.p).
b. Penetapan waktu pencuplikan darah. Menurut Janakat dan Al-
Merie (2002), kenaikan serum ALT dan AST akan terjadi pada waktu 24 jam dan
terjadi penurunan pada waktu 48 jam setelah pemejanan karbon tetraklorida. Pada
penelitian ini dilakukan orientasi dengan cuplikan dari jam 0, 24, dan 48 jam
setelah pemejanan karbon tetraklorida untuk melihat profil kenaikan ALT dan
AST serum. Untuk mendapatkan waktu pencuplikan darah dilakukan orientasi
dengan tiga kelompok perlakuan waktu. Setiap kelompok terdiri dari 5 ekor tikus.
Pengambilan darah dilakukan melalui sinus orbitalis mata. Kelompok I-III
diambil darah masing-masing pada jam ke 0, 24, dan 48 setelah pemejanan karbon
tetraklorida. Kemudian diukur aktivitas serum ALT dan AST.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
33
11. Pengelompokkan dan perlakuan hewan uji
Sejumlah tiga puluh ekor tikus dibagi secara acak ke dalam enam
kelompok perlakuan masing-masing sejumlah lima ekor tikus.
a. Kelompok I (kontrol hepatotoksin) diberi larutan karbon tetraklorida :
olive oil (1:1) dosis 2 ml/kgBB secara i.p.
b. Kelompok II (kontrol negatif) diberi olive oil dosis 2 ml/kgBB secara
i.p.
c. Kelompok III (kontrol ekstrak) diberi ekstrak daun M.tanarius dosis
3,840 g/kgBB selama enam hari berturut-turut secara per oral.
d. Kelompok IV (dosis rendah) diberi ekstrak metanol-air daun M.
tanarius dosis 0,426 g/kg BB secara per oral sekali sehari selama
enam hari berturut-turut.
e. Kelompok V (dosis tengah) diberi ekstrak metanol-air daun M.
tanarius dosis 1,280 g/kg BB secara per oral sekali sehari selama
enam hari berturut-turut.
f. Kelompok VI (dosis tinggi) diberi ekstrak metanol-air daun M.
tanarius dosis 3,840 g/kg BB secara per oral sekali sehari selama
enam hari berturut-turut.
Pada hari ke tujuh kelompok IV-VI diberi larutan karbon tetraklorida dosis 2
ml/kgBB secara intraperitonial. Setelah 24 jam diambil darahnya melalui sinus
orbitalis mata, diukur aktivitas serum ALT dan serum AST.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
34
12. Pembuatan serum
Darah diambil melalui bagian sinus orbitalis mata tikus, kemudian
ditampung dalam tabung Eppendorf. Darah didiamkan selama kurang lebih 15
menit. Darah disentrifugasi selama 10 menit dengan kecepatan 3500 rpm dan
bagian supernatannya diambil.
13. Penetapan aktivitas serum kontrol, serum ALT, dan serum AST
Alat yang digunakan untuk menganalisis aktivitas serum ALT dan AST
adalah Mikrolab 200 Merck®. Aktivitas enzim dinyatakan dengan satuan U/l.
pengukuran aktivitas serum ALT dan AST dilakukan di laboratorium Biokimia
Fisiologi Manusia, Fakultas Farmasi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.
a. Penetapan aktivitas serum kontrol. Bertujuan untuk validitas dan
reliabilitas alat yang digunakan. Analisis dilakukan dengan cara mencampur 800
µL reagen I, kemudian dicampurkan 200 µL reagen II, didiamkan selama satu
menit. Setelah itu, ditambahkan 100 µL serum kontrol (rentang nilai 33,9-48,9
U/l) dan dibaca resapan setelah dua menit. Pengukuran kontrol serum digunakan
untuk mengetahui validasi alat yang digunakan.
b. Penetapan aktivitas serum ALT dan AST. Analisis serum ALT
dilakukan dengan cara mencampur 800 µL reagen I, kemudian dicampurkan 200
µL reagen II, didiamkan selama satu menit. Setelah itu, ditambahkan 100 µL
serum dan dibaca resapan setelah dua menit. Untuk analisis serum AST dilakukan
dengan cara mencampur 800 µL reagen I, kemudian dicampurkan 200 µL reagen
II, didiamkan selama satu menit. Setelah itu, ditambahkan 100 µL serum dan
dibaca resapan setelah dua menit.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
35
F. Tata Cara Analisis Hasil
Data aktivitas serum ALT-AST diuji dengan Kolmogorov-Smirnov untuk
mengetahui distribusi data dan analisis varian untuk melihat homogenitas varian
antar kelompoknya sabagai syarat analisis parametrik. Jika data terdistribusi
normal dan homogen maka dilanjutkan dengan analisis variansi pola searah
(ANOVA one way) dengan taraf kepercayaan 95% untuk mengetahui perbedaan
masing-masing kelompok. Kemudian dilanjutkan dengan uji Scheffe untuk
melihat perbedaan antar kelompok bermakna (signifikan) (p<0,05) atau tidak
bermakna (tidak signifikan) (p>0,05). Bila data tidak homogen dilanjutkan dengan
uji Tamhane’s-T2. Tetapi bila distribusi tidak normal dilakukan analisis dengan
Kruskal Wallis untuk mengetahui perbedaan aktivitas serum ALT-AST antar
kelompok. Kemudian dilanjutkan uji dengan Mann Whitney untuk melihat
perbedaan tiap kelompok.
Perhitungan persen efek hepatoprotektif terhadap hepatotoksin karbon
tetraklorida diperoleh dengan rumus :
x 100 %
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
36
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh pemberian dan besar
dosis efektif hepatoprotektif ekstrak metanol-air daun M. tanarius pada tikus
jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida dengan melihat aktivitas serum
ALT dan serum AST. Tujuan tersebut dapat tercapai dengan serangkaian
pengujian.
A. Penyiapan Bahan
1. Hasil determinasi tanaman
Determinasi tanaman dilakukan dengan tujuan memastikan bahwa
tanaman yang digunakan adalah benar M. tanarius. Determinasi dilakukan di
Laboratorium Farmakognosi Fitokimia, Fakultas Farmasi Universitas Sanata
Dharma Yogyakarta. Bagian tanaman yang digunakan untuk determinasi adalah
daun, batang, bunga, dan buah. Determinasi dilakukan dengan cara mencocokkan
kesamaan ciri tanaman dengan buku acuan Flora of Java (Backer dan Brink,
1963). Hasil determinasi membuktikan bahwa benar tanaman yang digunakan
dalam penelitian adalah Macaranga tanarius.
2. Penetapan kadar air serbuk daun M. tanarius
Penetapan kadar air serbuk daun M. tanarius bertujuan untuk mengetahui
kadar air dalam serbuk dan untuk memenuhi persyaratan serbuk yang baik, yaitu
kurang dari 10% (Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan, 1995).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
37
Penetapan kadar air serbuk daun M. tanarius dilakukan dengan alat moisture
balance menggunakan metode Gravimetri. Serbuk yang akan digunakan
dipanaskan pada suhu 110 0C selama 15 menit. Digunakan suhu 110
0C dengan
maksud supaya kandungan air telah menguap dan waktu 15 menit dianggap
bahwa kadar air dalam serbuk daun M. tanarius telah memenuhi persyaratan
parameter standarisasi non spesifik. Hasil perhitungan menunjukkan serbuk daun
M. tanarius memiliki kadar air sebesar 7,59%. Hal ini menunjukkan kadar air
serbuk daun M. tanarius telah memenuhi persyaratan serbuk yang baik (Direktorat
Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan, 1995).
3. Hasil penimbangan bobot ekstrak metanol-air daun M. tanarius
Pembuatan ekstrak metanol-air daun M. tanarius menggunakan metode
penyarian yaitu maserasi. Metode ini dipilih karena proses pengerjaan dan
peralatan yang digunakan sederhana. Selain itu, metode maserasi digunakan untuk
menyari simplisia dimana zat aktif yang terkandung di dalamnya mudah larut
dalam cairan penyari. Cairan penyari yang digunakan adalah metanol : air (50:50)
karena senyawa hipotesis yang diketahui adalah senyawa golongan glikosida
fenolik yang dapat larut dalam pelarut polar. Hal ini berdasarkan penelitian
Matsunami, dkk (2006) bahwa senyawa antioksidan yang dapat diperoleh dari
daun M. tanarius adalah hasil isolasi ekstrak metanol yang bersifat polar.
Parameter standarisasi ekstrak metanol-air daun M. tanarius dilihat dari
bobot pengeringan tetap dengan susut pengeringan 0%. Tujuannya untuk
menghitung sisa zat dengan bobot tetap setelah dilakukan pengeringan pada
temperatur 50 0C. Ekstrak dalam cawan ditimbang setiap satu jam selama 24 jam
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
38
atau hingga bobot konstan. Hasil proses pengeringan didapatkan bahwa tidak ada
perubahan bobot ekstrak pada jam ke 23 dan 24. Susut pengeringan ekstrak
metanol-air daun M. tanarius pada jam ke 23 dan 24 sebesar 0% sehingga
diketahui pelarut penyari ekstrak sudah tidak ada. Pada penelitian ini, waktu
pengeringan 24 jam digunakan untuk memperoleh bobot pengeringan tetap
ekstrak metanol-air daun M. tanarius. Hasil menunjukkan bahwa sebanyak 1 kg
serbuk kering daun M. tanarius menghasilkan 63 cawan cairan kental. Rata-rata
rendemen setiap cawan 3,77 g ekstrak kental. Pada pembuatan 1 kg serbuk kering
daun M. tanarius menghasilkan 237,51 g ekstrak kental, dengan rendemen
23,75%.
B. Uji Pendahuluan
1. Penentuan dosis hepatotoksik karbon tetraklorida
Tujuan dari penentuan dosis hepatotoksik karbon tetraklorida adalah
untuk menentukan dosis karbon tetraklorida yang dapat menyebabkan kerusakan
hati ringan yaitu steatosis pada hati tikus yang ditandai dengan terjadinya
peningkatan aktivitas serum ALT dan serum AST. Peningkatan serum ALT yang
dapat menyebabkan steatosis mencapai tiga kali lipat terhadap kontrol, sedangkan
peningkatan aktivitas serum AST mencapai empat kali lipat terhadap kontrol
(Ziemmerman, 1999). Dosis yang digunakan pada penelitian ini mengacu dari
penelitian Janakat dan Al-Merie (2002), di mana pada dosis 2 ml/kgBB tikus
sudah menimbulkan efek hepatotoksik.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
39
2. Penentuan waktu pencuplikan darah
Penentuan waktu pencuplikan darah bertujuan untuk mengetahui selang
waktu dimana karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB dapat memberikan efek
hepatotoksik maksimal yang ditunjukkan dengan aktivitas serum ALT dan serum
AST tertinggi pada selang waktu tertentu. Karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB
diujikan pada tikus dengan selang waktu pengambilan cuplikan darah 0, 24, dan
48 jam.
Data aktivitas serum ALT setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2
ml/kgBB pada selang waktu 0, 24, dan 48 jam tersaji pada tabel IV serta gambar 7
dan data aktivitas serum AST setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2
ml/kgBB pada selang waktu 0, 24, dan 48 jam tersaji pada tabel V serta gambar 8.
Tabel IV. Rata-rata aktivitas serum ALT tikus setelah pemberian karbon
tetraklorida dosis 2 ml/kgBB pada selang waktu 0, 24, dan 48 jam
Selang waktu
(jam)
Jumlah hewan uji
(ekor)
Purata aktivitas serum ALT
± SE (U/l)
0 5 73,2 ± 12,9
24 5 246,4 ± 17,0
48 5 102,2 ± 14,6
Gambar 7. Diagram batang rata-rata aktivitas serum ALT tikus setelah
pemberian karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB pada selang waktu 0, 24,
dan 48 jam
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
40
Data serum ALT yang telah dianalisis dengan analisis variansi satu arah
menunjukkan nilai signifikansi 0,000 (< 0,05). Hasil ini menunjukkan bahwa
antara ketiga kelompok terdapat perbedaan. Selanjutnya, untuk mengetahui
kebermaknaan perbedaan antar kelompok digunakan uji Scheffe. Hasil analisis
dari uji Scheffe dapat dilihat pada tabel V.
Tabel V. Hasil uji Scheffe aktivitas serum ALT tikus setelah pemberian karbon
tetraklorida dosis 2 ml/kgBB pada selang waktu 0, 24, dan 48 jam
Selang waktu (jam) 0 24 48
0 - B TB
24 B - B
48 TB B -
Keterangan :
B = Berbeda bermakna (p ≤ 0,05) TB = Berbeda tidak bermakna (p > 0,05)
Hastuti (2008) melaporkan nilai normal serum ALT pada tikus normal
adalah 29,8-77,0 U/l sedangkan nilai normal serum AST sebesar 19,3-68,9 U/l.
Pada tabel IV, terlihat aktivitas ALT yang paling tinggi pada jam ke 24, yakni
246,4 ± 17,0 U/l yang memberikan peningkatan ALT yang signifikan dan berbeda
bermakna dibandingkan dengan jam ke 0 dan 48 (Tabel V). Aktivitas tersebut
mengalami penurunan pada jam ke 48 (102,2 ± 14,6 U/l), yang berbeda tidak
bermakna terhadap jam ke 0. Ini berarti aktivitas ALT pada jam ke 48 sudah
kembali normal.
Hasil analisis statistik serum AST menunjukkan bahwa distribusi tidak
normal sehingga tidak bisa dilanjutkan ke analisis variansi satu arah. Analisis
dilakukan dengan Kruskal Wallis untuk mengetahui perbedaan aktivitas serum
AST antar kelompok. Dari uji menggunakan Kruskal Wallis, diketahui
signifikansi 0,03 (<0,05), hal ini menunjukkan terdapat perbedaan bermakna
diantara kelompok. Oleh karena itu, untuk melihat perbedaan tiap kelompok
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
41
dilanjutkan uji dengan Mann Whitney. Hasil analisis dari uji Mann Whitney dapat
dilihat pada tabel VII.
Tabel VI. Rata-rata aktivitas serum AST tikus setelah pemberian karbon
tetraklorida dosis 2 ml/kgBB pada selang waktu 0, 24, dan 48 jam
Selang waktu
(jam)
Jumlah hewan uji
(ekor)
Purata aktivitas serum AST
± SE (U/l)
0 5 151,2 ± 14,3
24 5 596,2 ± 25,3
48 5 188,6 ± 3,3
Gambar 8. Diagram batang rata-rata aktivitas serum AST tikus setelah
pemberian karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB pada selang waktu 0, 24,
dan 48 jam
Tabel VII. Hasil uji Mann Whitney aktivitas serum AST tikus setelah pemberian
karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB pada selang waktu 0, 24, dan 48 jam
Selang waktu (jam) 0 24 48
0 - B B
24 B - B
48 B B -
Keterangan :
B = Berbeda bermakna (p ≤ 0,05) TB = Berbeda tidak bermakna (p > 0,05)
Dari tabel VI dan gambar 8 dapat dilihat aktivitas AST paling tinggi
terjadi pada jam ke 24, yakni 596,2 ± 25,3 U/l, yang menunjukkan adanya
perbedaan bermakna antara jam ke 0 dan 48 (Tabel VII). Seperti halnya aktivitas
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
42
ALT, aktivitas AST pada jam ke 48 juga mengalami penurunan dan memberikan
perbedaan bermakna terhadap jam ke 0 dan 24. Hal ini berarti aktivitas AST pada
jam ke 48 menurun, namun kerusakan yang terjadi belum mencapai keadaan
normal. Berdasarkan hasil tersebut maka pada penelitian ini menggunakan waktu
pencuplikan darah pada jam ke 24 setelah pemberian karbon tetraklorida.
3. Penetapan lama pemejanan ekstrak metanol-air daun M. tanarius
Kurniawati, dkk (2011), dalam penelitian efek hepatoprotektif ekstrak
metanol-air M. tanarius terhadap tikus terinduksi parasetamol, menjelaskan
bahwa praperlakuan ekstrak metanol-air daun M. tanarius pada kelompok hewan
uji diberikan selama enam hari dan pada hari ke 7 diberikan hepatotoksin.
Penetapan lama pemejanan ekstrak metanol-air daun M. tanarius pada
penelitian ini berdasarkan penelitian Kurniawati, dkk (2011), yang mengikuti
model pemberian praperlakuan selama enam hari dan pada hari ke 7 diberi karbon
tetraklorida dosis 2 ml/kgBB. Hal ini karena penelitian ini merupakan penelitian
lanjutan yang diharapkan dapat memperoleh efek hepatoprotektif dengan model
hepatotoksin lain, yaitu karbon tetraklorida.
4. Penetapan dosis ekstrak metanol-air daun M. tanarius
Tujuan dari penetapan dosis ekstrak metanol-air daun M. tanarius adalah
untuk menentukan tingkatan dosis ekstrak metanol-air daun M. tanarius yang
akan digunakan dalam penelitian ini. Penentuan dosis ekstrak metanol-air daun M.
tanarius didasarkan pada dosis maksimal ekstrak metanol-air daun M. tanarius
pada tikus. Dosis maksimal ekstrak metanol-air daun M. tanarius pada tikus
didasarkan pada konsentrasi tertinggi ekstrak metanol-air daun M. tanarius.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
43
Konsentrasi yang dapat digunakan adalah konsentrasi pekat yang dapat dibuat di
mana pada konsentrasi tersebut ekstrak dapat dimasukkan serta dikeluarkan dari
spuit oral. Dari hasil orientasi diketahui bahwa konsentrasi tertinggi ekstrak
metanol-air daun M. tanarius yang dapat dipejankan secara oral pada tikus adalah
384 mg/ml sehingga diperoleh dosis maksimal 3,840 g/kgBB. Kemudian
ditentukan tiga tingkatan dosis ekstrak metanol-air daun M. tanarius, yaitu 0,426;
1,280; dan 3,840 g/kgBB.
C. Hasil Uji Efek Hepatoprotektif Ekstrak Metanol-Air Daun M. tanarius
Evaluasi terhadap efek hepatoprotektif ekstrak metanol-air daun M.
tanarius pada tikus jantan terinduksi karbon tetraklorida didasarkan pada
penurunan aktivitas serum ALT dan serum AST akibat praperlakuan ekstrak
metanol-air daun M. tanarius satu kali sehari selama enam hari secara per oral
berturut-turut terinduksi Karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB. Data aktivitas
serum ALT dianalisis dengan analisis variansi satu arah menunjukkan nilai
signifikansi 0,000 (< 0,05). Hasil ini menunjukkan bahwa antar kelompok
terdapat perbedaan. Selanjutnya, untuk mengetahui kebermaknaan perbedaan
antar kelompok digunakan uji Scheffe, sedangkan data aktivitas serum AST
kelompok perlakuan tidak homogen sehingga dilakukan analisis dengan uji
Tamhane’s-T2 untuk mengetahui kebermaknaan perbedaan antar kelompok.
Aktivitas serum ALT dan serum AST (U/l) disajikan dalam bentuk purata ± SE
pada tabel VIII dan IX serta gambar 9 dan 10.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
44
Tabel VIII. Purata ± SE aktivitas serum ALT tikus praperlakuan ekstrak metanol-
air daun M. tanarius terinduksi karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB
Kelompok Perlakuan Jumlah hewan
uji (ekor)
Purata
aktivitas serum
ALT ± SE
(U/l)
I Kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida
2 ml/kgBB 5 246,4 ± 17,0
II Kontrol negatif olive oil 2 ml/kgBB 5 82,2 ± 2,7
III EMMT 3,840 g/kgBB 5 82,4 ± 5,4
IV EMMT 0,426 g/kgBB + karbon
tetraklorida 2 ml/kgBB 5 173,8 ± 10,9
V EMMT 1,280 g/kgBB + karbon
tetraklorida 2 ml/kgBB 5 139,0 ± 5,9
VI EMMT 3,840 g/kgBB + karbon
tetraklorida 2 ml/kgBB 5 92,6 ± 3,2
Keterangan :
EMMT = Ekstrak metanol-air daun M. tanarius
Data serum ALT yang telah dianalisis dengan analisis variansi satu arah
menunjukkan nilai signifikansi 0,000 (< 0,05). Hasil ini menunjukkan bahwa
antara keenam kelompok terdapat perbedaan. Selanjutnya, untuk mengetahui
kebermaknaan perbedaan antar kelompok digunakan uji Scheffe. Hasil analisis
dari uji Scheffe dapat dilihat pada tabel IX.
Gambar 9. Diagram batang rata-rata aktivitas serum ALT tikus
praperlakuan ekstrak metanol-air daun M. tanarius 1 x sehari selama 6 hari
terinduksi karbon tetraklorida 2 ml/kgBB
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
45
Tabel IX. Hasil uji Scheffe aktivitas serum ALT tikus setelah pemberian karbon
tetraklorida dosis 2 ml/kgBB pada kelompok perlakuan
Kelompok
Perlakuan
Kontrol
hepatotok
sin karbon
tetraklorida
2 ml/kgBB
Kontrol
negatif
olive oil
2
ml/kgBB
EMMT
3,840
g/kgBB
EMMT
0,426
g/kgBB
+ karbon
tetraklori
da 2
ml/kgBB
EMMT
1,280
g/kgBB
+ karbon
tetraklori
da 2
ml/kgBB
EMMT
3,840
g/kgBB
+ karbon
tetraklori
da 2
ml/kgBB
Kontrol
hepatotoksin
karbon
tetraklorida 2
ml/kgBB
- B B B B B
Kontrol negatif
olive oil 2
ml/kgBB
B - TB B B TB
EMMT
3,840 g/kgBB
B TB - B B TB
EMMT 0,426
g/kgBB +
karbon
tetraklorida 2
ml/kgBB
B B B - TB B
EMMT 1,280
g/kgBB +
karbon
tetraklorida 2
ml/kgBB
B B B TB - B
EMMT 3,840
g/kgBB +
karbon
tetraklorida 2
ml/kgBB
B TB TB B B -
Keterangan :
B = Berbeda bermakna (p ≤ 0,05) TB = Berbeda tidak bermakna (p > 0,05)
EMMT = Ekstrak metanol-air daun M. tanarius
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
46
Tabel X. Purata ± SE aktivitas serum AST tikus praperlakuan ekstrak metanol-air
daun M. tanarius terinduksi karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB
Kelompok Perlakuan
Jumlah
hewan uji
(ekor)
Purata
aktivitas serum
AST ± SE
(U/l)
I Kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida
2 ml/kgBB 5 596,2 ± 25,3
II Kontrol negatif olive oil 2 ml/kgBB 5 118,6 ± 5,1
III EMMT 3,840 g/kgBB 5 162,6 ± 6,4
IV EMMT 0,426 g/kgBB + karbon
tetraklorida 2 ml/kgBB 5 521,6 ± 10,9
V EMMT 1,280 g/kgBB + karbon
tetraklorida 2 ml/kgBB 5 442,8 ± 8,2
VI EMMT 3,840 g/kgBB + karbon
tetraklorida 2 ml/kgBB 5 171,6 ± 13,6
Keterangan :
EMMT = Ekstrak metanol-air daun M. tanarius
Gambar 10. Diagram batang rata-rata aktivitas serum AST tikus
praperlakuan ekstrak metanol-air daun M. tanarius 1 x sehari selama 6 hari
terinduksi karbon tetraklorida 2 ml/kgBB
Data serum AST yang telah dianalisis dengan analisis variansi satu arah
menunjukkan nilai signifikansi 0,000 (< 0,05). Hasil ini menunjukkan bahwa
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
47
antara keenam kelompok terdapat perbedaan. Selanjutnya, untuk mengetahui
kebermaknaan perbedaan antar kelompok digunakan uji Tamhane’s-T2 karena
data tidak homogen (< 0,05). Hasil analisis dari uji Tamhane’s-T2 dapat dilihat
pada tabel XI.
Tabel XI. Hasil uji Tamhane’s-T2 aktivitas serum AST tikus setelah pemberian
karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB pada kelompok perlakuan
Kelompok
Perlakuan
Kontrol
hepatotok
sin karbon
tetraklorida
2 ml/kgBB
Kontrol
negatif
olive oil
2
ml/kgBB
EMMT
3,840
g/kgBB
EMMT
0,426
g/kgBB
+ karbon
tetraklori
da 2
ml/kgBB
EMMT
1,280
g/kgBB
+ Karbon
tetraklori
da 2
ml/kgBB
EMMT
3,840
g/kgBB
+ Karbon
tetraklori
da 2
ml/kgBB
Kontrol
hepatotoksin
karbon
tetraklorida 2
ml/kgBB
- B B TB B B
Kontrol negatif
olive oil 2
ml/kgBB
B - B B B TB
EMMT
3,840 g/kgBB
B B - B B TB
EMMT 0,426
g/kgBB +
karbon
tetraklorida 2
ml/kgBB
TB B B - B B
EMMT 1,280
g/kgBB +
karbon
tetraklorida 2
ml/kgBB
B B B B - B
EMMT 3,840
g/kgBB +
karbon
tetraklorida 2
ml/kgBB
B TB TB B B -
Keterangan :
B = Berbeda bermakna (p ≤ 0,05) TB = Berbeda tidak bermakna (p > 0,05)
EMMT = Ekstrak metanol-air daun M. tanarius
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
48
1. Kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB
Tujuan pengukuran aktivitas serum ALT dan serum AST pada kontrol
hepatotoksin karbon tetraklorida 2 ml/kgBB (Kelompok I) adalah mengetahui
pengaruh pemberian karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB terhadap sel hati tikus.
Selain itu, kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida 2 ml/kgBB digunakan untuk
patokan dalam menganalisis efek hepatoprotektif ekstrak metanol-air daun M.
tanarius. Uji dilakukan berdasarkan penelitian Janakat dan Al-Merie (2002)
dengan cara memberikan karbon tetraklorida 2 ml/kgBB secara intraperitonial
pada tikus. Dua puluh empat jam kemudian diambil darahnya untuk diukur
aktivitas serum ALT dan serum AST.
Aktivitas serum ALT kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida 2
ml/kgBB adalah 246,4 ± 17,0 U/l. Bila dibandingkan dengan kontrol negatif olive
oil 2 ml/kgBB (Kelompok II) sebesar 82,2 ± 2,7 U/l, maka secara statistik
menunjukkan perbedaan bermakna antara kedua kelompok tersebut (Tabel IX).
Aktivitas serum AST kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida 2 ml/kgBB sebesar
596,2 ± 25,3 U/l. Nilai serum AST kontrol negatif olive oil 2 ml/kgBB sebesar
118,6 ± 5,1 U/l. Data dianalisis dengan uji lanjutan uji Tamhane’s-T2 terdapat
perbedaan yang bermakna antara kelompok kontrol hepatotoksin karbon
tetraklorida dan kelompok kontrol negatif olive oil.
Parameter utama terjadinya kerusakan hati adalah aktivitas serum ALT.
Hasil menunjukkan terjadi kerusakan ringan sel hati tikus, yaitu steatosis.
Menurut Ziemmerman (1999), nilai serum ALT kerusakan hati ringan steatosis
meningkat mencapai tiga kali lipat terhadap nilai normal dan nilai serum AST
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
49
mencapai empat kali lipat terhadap nilai normal. Berdasarkan penelitian Janakat
dan Al-Merie (2002), kenaikan aktivitas serum AST mencapai 695 U/l. Hasil
penelitian menunjukkan serum AST yang meningkat sebesar 596,20 ± 25,3 U/l.
Serum AST kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida 2 ml/kgBB sebagai
parameter pendukung kerusakan sel hati menunjukkan adanya peningkatan
terhadap kontrol negatif olive oil 2 ml/kgBB.
2. Kontrol negatif olive oil dosis 2 ml/kgBB
Kontrol negatif olive oil (Kelompok II) dibuat dengan tujuan memastikan
bahwa olive oil sebagai pelarut dari karbon tetraklorida tidak berpotensi
menimbulkan efek toksik. Pemilihan dosis olive oil sebesar 2 ml/kgBB sesuai
dengan dosis pemberian hepatotoksin karbon tetraklorida bertujuan memastikan
bahwa peningkatan aktivitas serum ALT dan serum AST tikus akibat pemberian
karbon tetraklorida dan bukan akibat pemberian olive oil. Aktivitas serum ALT
dan serum AST kontrol negatif olive oil pada jam ke 24 berturut-turut adalah 82,2
± 2,7 U/l dan 118,6 ± 5,1 U/l. Aktivitas serum ALT dan serum AST kontrol
negatif olive oil pada jam ke 0 sebesar 90,2 ± 4,9 U/l dan 122,8 ± 5,7 U/l (Tabel
XII).
Apabila aktivitas serum ALT dan serum AST antara kontrol negatif olive
oil 2 ml/kgBB jam ke 24 dibandingkan dengan jam ke 0, maka secara statistik
berbeda tidak bermakna (Tabel XIII). Hal ini berarti olive oil sebagai pelarut
karbon tetraklorida memberikan aktivitas serum ALT dan serum AST seperti
keadaan normal.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
50
Tabel XII. Rata-rata aktivitas serum ALT dan serum AST tikus setelah
pemberian olive oil dosis 2 ml/kgBB pada selang waktu 0 dan 24 jam
Selang waktu
(jam)
Jumlah hewan
uji (ekor)
Purata aktivitas
serum ALT ± SE
(U/l)
Purata aktivitas
serum AST ± SE
(U/l)
0 5 90,2 ± 4,9 122,8 ± 5,7
24 5 82,2 ± 2,7 118,6 ± 5,1
Gambar 11. Diagram batang rata-rata aktivitas serum ALT tikus setelah
pemberian olive oil dosis 2 ml/kgBB pada selang waktu 0 dan 24 jam
Gambar 12. Diagram batang rata-rata aktivitas serum AST tikus setelah
pemberian olive oil dosis 2 ml/kgBB pada selang waktu 0 dan 24 jam
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
51
Tabel XIII. Hasil uji Mann Whitney aktivitas serum ALT dan serum AST tikus
setelah pemberian olive oil dosis 2 ml/kgBB pada selang waktu 0 dan 24 jam
Selang waktu (jam) Aktivitas serum ALT Aktivitas serum AST
0 24 0 24
Aktivitas serum
ALT
0 - TB
24 TB -
Aktivitas serum
AST
0 - TB
24 TB -
Keterangan :
B = Berbeda bermakna (p ≤ 0,05) TB = Berbeda tidak bermakna (p > 0,05)
Hasil pengujian terhadap aktivitas serum ALT dan serum AST kontrol
negatif olive oil 2 ml/kgBB tidak menaikkan aktivitas serum ALT dan serum
AST, artinya apabila pada kelompok kontrol maupun perlakuan terjadi kenaikan
aktivitas serum ALT dan serum AST itu bukan karena penggunaan olive oil
sebagai pelarut. Kelompok kontrol negatif olive oil nantinya akan dipakai sebagai
dasar nilai aktivitas serum ALT dan serum AST normal pada penelitian ini.
3. Kontrol ekstrak metanol-air daun M. tanarius dosis 3,840 g/kgBB
Tujuan pembuatan kontrol ekstrak metanol-air daun M. tanarius
(Kelompok III) adalah melihat pengaruh ekstrak metanol-air daun M. tanarius
terhadap sel hati tikus tanpa induksi karbon tetraklorida 2 ml/kgBB. Digunakan
dosis sebesar 3,840 g/kgBB sesuai dengan dosis terbesar ekstrak metanol-air daun
M. tanarius dengan harapan hasil kelompok ini berlaku untuk praperlakuan
ekstrak metanol-air daun M. tanarius dari dosis rendah 0,426 mg/kgBB hingga
dosis tertinggi 3,840 g/kgBB.
Aktivitas serum ALT kontrol ekstrak metanol-air daun M. tanarius dosis
3,840 g/kgBB adalah 82,2 ± 2,7 U/l. Bila dibandingkan dengan aktivitas ALT
serum kontrol negatif olive oil 2 ml/kgBB sebesar 82,4 ± 5,4U/l maka terlihat
angka aktivitas yang hampir mendekati sama (0,00). Data dianalisis dengan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
52
analisis variansi satu arah dilanjutkan uji Scheffe, nilai aktivitas serum ALT
kontrol ekstrak metanol-air daun M. tanarius 3,840 g/kgBB terhadap kontrol
negatif olive oil 2 ml/kgBB adalah tidak bermakna. Bila dibandingkan dengan
kelompok hepatotoksin karbon tetraklorida 2 ml/kgBB menunjukkan perbedaan
bermakna seperti pada tabel IX. Hal ini menggambarkan bahwa ekstrak metanol-
air daun M. tanarius tidak memberikan pengaruh hepatotoksik pada sel hati tikus.
Aktivitas serum AST kontrol ekstrak metanol-air daun M. tanarius
adalah 162,6 ± 6,4 U/l. Secara statistik, bila dibandingkan dengan aktivitas serum
AST kontrol negatif olive oil 2 ml/kgBB sebesar 118,6 ± 5,1 U/l terdapat
perbedaan bermakna. Terjadinya peningkatan aktivitas serum AST kontrol ekstrak
metanol-air daun M. tanarius bisa terjadi akibat kerja otot rangka atau jantung
karena enzim aspartate di dalam tubuh, sebagian besar tidak spesifik berada di
dalam hati saja, tetapi berada dalam otot rangka, jantung, serta tersebar ke seluruh
jaringan tubuh.
4. Kelompok perlakuan ekstrak metanol-air daun M. tanarius dosis 0,426
g/kg BB, 1,280 g/kg BB, dan 3,840 g/kg BB pada tikus jantan galur
Wistar terinduksi karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB
Evaluasi terhadap efek hepatoprotektif ekstrak metanol-air daun M.
tanarius pada tikus jantan terinduksi karbon tetraklorida didasarkan pada ada
tidaknya penurunan aktivitas serum ALT dan serum AST akibat praperlakuan
ekstrak daun metanol-air daun M. tanarius terhadap aktivitas serum ALT dan
serum AST. Tabel VIII dan X menunjukkan bahwa ada kekerabatan dosis dengan
respon yang muncul terlihat dari semakin besar dosis praperlakuan ekstrak
metanol-air daun M. tanarius yang diberikan, maka semakin besar efek
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
53
hepatoprotektif. Hal ini berarti semakin besar perlindungan yang diberikan pada
sel hati tikus, terbukti dengan terjadinya penurunan aktivitas serum ALT dan
serum AST tikus.
Kelompok IV perlakuan ekstrak metanol-air daun M. tanarius dosis
0,426 g/kgBB aktivitas serum ALT sebesar 173,8 ± 10,9 U/l. Bila dibandingkan
dengan kelompok kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida 2 ml/kgBB secara
statistik terdapat perbedaan bermakna (Tabel IX). Aktivitas serum ALT kelompok
IV memberikan perbedaan bermakna terhadap kelompok kontrol negatif olive oil
2 ml/kgBB. Hal yang sama juga terlihat pada aktivitas serum AST kelompok IV
terhadap kontrol negatif olive oil 2 ml/kgBB. Aktivitas serum AST pada
kelompok IV dibandingkan dengan kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida 2
ml/kgBB berbeda tidak bermakna secara statistik. Hal ini berarti ekstrak metanol-
air daun M. tanarius memiliki efek hepatoprotektif, namun kerusakan yang
ditimbulkan belum bisa kembali seperti keadaan normal. Hal ini kemungkinan
terjadi karena kandungan antioksidan pada dosis terendah yaitu 0,426 g/kgBB
belum cukup untuk menurunkan aktivitas serum AST akibat induksi karbon
tetraklorida. Parameter utama kerusakan hati adalah serum ALT sehingga
diartikan bahwa kelompok IV mampu melindungi sel hati dari induksi karbon
tetraklorida 2 ml/kgBB.
Kelompok V perlakuan ekstrak metanol-air daun M. tanarius dosis 1,280
g/kgBB aktivitas serum ALT sebesar 139,0 ± 5,9 U/l. Bila dibandingkan dengan
kelompok kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida 2 ml/kgBB secara statistik
terdapat perbedaan bermakna (Tabel IX). Aktivitas serum ALT kelompok V
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
54
memberikan perbedaan bermakna terhadap kelompok kontrol negatif olive oil 2
ml/kgBB. Hal yang sama juga terlihat pada aktivitas serum AST kelompok V
terhadap kontrol negatif olive oil 2 ml/kgBB. Aktivitas serum AST pada
kelompok V dibandingkan dengan kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida 2
ml/kgBB berbeda bermakna secara statistik. Hal ini berarti ekstrak metanol-air
daun M. tanarius memiliki efek hepatoprotektif, namun kerusakan yang
ditimbulkan belum bisa kembali seperti keadaan normal. Hal ini kemungkinan
terjadi karena kandungan antioksidan pada dosis tengah yaitu 1,280 g/kgBB
belum cukup untuk menurunkan aktivitas serum ALT dan serum AST akibat
induksi karbon tetraklorida.
Kelompok VI perlakuan ekstrak metanol-air daun M. tanarius dosis
3,840 g/kgBB aktivitas serum ALT sebesar 92,6 ± 3,2 U/l. Bila dibandingkan
dengan kelompok kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida 2 ml/kgBB secara
statistik terdapat perbedaan bermakna (Tabel IX). Aktivitas serum ALT kelompok
IV memberikan perbedaan tidak bermakna terhadap kelompok kontrol negatif
olive oil 2 ml/kgBB. Hal yang sama juga terlihat pada aktivitas serum AST
kelompok IV terhadap kontrol negatif olive oil 2 ml/kgBB. Aktivitas serum AST
pada kelompok IV dibandingkan dengan kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida
2 ml/kgBB secara statistik berbeda bermakna. Hal ini berarti ekstrak metanol-air
daun M. tanarius dosis 1,280 g/kgBB memberikan efek hepatoprotektif.
Ketiga dosis ekstrak metanol-air daun M. tanarius menunjukkan bahwa
ada kekerabatan dosis dengan respon yang muncul terlihat dari semakin besar
dosis praperlakuan ekstrak metanol-air daun M. tanarius yang diberikan, maka
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
55
semakin besar efek hepatoprotektif. Kelompok perlakuan ekstrak metanol-air
daun M. tanarius dosis 3,840 g/kgBB (Kelompok VI) merupakan kelompok yang
memiliki tingkat kerusakan hati paling rendah. Sedangkan aktivitas serum ALT
kelompok perlakuan ekstrak metanol-air daun M. tanarius dosis 0,426 dan dosis
1,280 g/kgBB secara statistik berbeda tidak bermakna memiliki tingkat kerusakan
lebih besar (Tabel IX). Hal ini kemungkinan karena jumlah kandungan zat aktif
antioksidan dalam ekstrak metanol-air daun M. tanarius dosis 0,426 dan 1,280
g/kgBB belum cukup memberikan efek hepatoprotektif pada hewan uji yang
terinduksi karbon tetraklorida 2 ml/kgBB. Selain itu, karena penggunaan penyari
kombinasi metanol : air (50:50) dimana belum diketahui secara pasti kandungan
glikosida yang dapat larut dan tertarik dari ekstrak tersebut, sehingga
kemungkinan mempengaruhi penggunaan dosis ekstrak 0,426 dan 1,280 g/kgBB
karena dimungkinkan bahwa kandungan dalam kombinasi tersebut akan
menurunkan aktivitas penangkapan radikal bebas. Dengan demikian, perlu
dilakukan pengembangan lebih lanjut mengenai penggunaan penyari yang
berbeda untuk dapat menarik senyawa yang mempunyai aktivitas penangkapan
radikal bebas yang lebih kuat sehingga dapat menjangkau dosis ekstrak yang
kecil.
Dari ketiga penurunan nilai aktivitas serum ALT dan serum AST pada
peringkat dosis tersebut maka dapat dihitung nilai efektif dosis tengah (ED50)
hepatoprotektif. Hasil perhitungan menunjukkan dosis ekstrak metanol-air daun
M. tanarius yang dapat menghambat kenaikan aktivitas serum ALT dan serum
AST terhadap sel hati terinduksi karbon tetraklorida sebesar 50%, membutuhkan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
56
dosis sebesar 1,766 g/kgBB. Rangkuman secara singkat dapat dilihat pada tabel
XIV. Adapun persamaan regresi linear yang didapat yaitu y=34,448 x – 61,853
dengan r=0,996. Persamaan ini didapat dengan cara memplotkan log dosis vs
persen efek hepatoprotektif (Gambar 13). Nilai ED50 ekstrak metanol-air daun M.
tanarius yang dapat menghambat kenaikan aktivitas serum ALT dan serum AST
terhadap sel hati terinduksi karbon tetraklorida adalah 1,776 g/kgBB dengan
aktivitas serum ALT sebesar 246,4 ± 17,0 U/l dan efek hepatoprotektif 62,4%.
Tabel XIV. Efektif Dosis Tengah (ED50) Hepatoprotektif ekstrak metanol-air
daun M. tanarius
Kelompok Perlakuan Dosis
(mg/kgBB)
Log
dosis
Efek
hepatoprotektif (%)
ED50
(g/kgBB)
EMMT 0,426 g/kgBB
+ karbon tetraklorida
2 ml/kgBB
426 2,629 29,5
1,766
EMMT 1,280 g/kgBB
+ karbon tetraklorida
2 ml/kgBB
1280 3,107 43,6
EMMT 3,840 g/kgBB
+ karbon tetraklorida 2
ml/kgBB
3840 3,584 62,4
Keterangan :
EMMT = Ekstrak metanol-air daun M. tanarius
0
10
20
30
40
50
60
70
0 1 2 3 4
% e
fek
he
pat
op
rote
ktif
Log dosis
y=34,448 x – 61,853, r=0,996
Gambar 13. Persamaan garis ED50 ekstrak metanol-air daun M. tanarius
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
57
Berdasarkan Adrianto (2011), ED50 ekstrak metanol-air daun M. tanarius
yang dapat menghambat kenaikan aktivitas serum ALT dan serum AST terhadap
sel hati terinduksi parasetamol sebesar 0,629 g/kgBB dengan aktivitas serum ALT
sebesar 977,2 ± 85,2 U/l dan efek hepatoprotektif 90,7%. Apabila kedua hasil
dibandingkan, maka terlihat ED50 ekstrak metanol-air daun M. tanarius terhadap
induksi karbon tetraklorida lebih besar daripada ED50 terhadap induksi
parasetamol. Hal ini dapat dijelaskan bahwa semakin besar kerusakan hati yang
muncul, maka akan menghasilkan efek hepatoprotektif yang semakin besar. Ini
berdampak pada dosis yang semakin kecil untuk dapat menimbulkan 50% efek
hepatoprotektif. Oleh karena itu, untuk menegaskan hal tersebut dapat digunakan
model hepatotoksin lain, misal galaktosamin.
Dengan demikian, ED50 ekstrak metanol-air daun M. tanarius yang dapat
menghambat kenaikan aktivitas serum ALT dan serum AST terhadap sel hati
terinduksi karbon tetraklorida adalah 1,766 g/kgBB. Bila dikonversikan ke
manusia dengan berat badan 70 kg adalah sebesar 19,768 g, untuk manusia
Indonesia (50 kg) maka 50/70 x 19,768 menjadi 14,12 g.
Mekanisme hepatotoksik dari karbon tetraklorida yang mengakibatkan
perlemakan hati adalah enzim sitokrom P-450 (CYP2E1) sebagai agen pereduksi
dan mengkatalis adisi elekron yang mengakibatkan hilangnya satu ion klorin
sehingga terbentuk radikal bebas triklorometil (•CCl3) yang merupakan metabolit
reaktif. Radikal bebas triklorometil ini jika dengan adanya O2 (oksigen) akan
berubah menjadi radikal bebas triklorometilperoksi (•OOCCl3) yang lebih reaktif.
Radikal triklorometil yang dihasilkan dapat mengalami suatu reaksi, senyawa
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
58
reaktif tersebut merusak sekitar dari sitokrom P-450, termasuk enzim itu sendiri
dan retikulum endoplasma. Dengan demikian, radikal bebas triklorometil
berikatan secara kovalen dengan lemak mikrosomal dan protein, dan akan
bereaksi secara langsung dengan membran fosfolipid dan kolesterol yang bersifat
toksik. Hasil lain dari reaksi ini adalah radikal lipid yang akan mengaktifkan
senyawa oksigen reaktif selanjutnya mengakibatkan peroksidasi lipid. Setelah
pemejanan karbon tetraklorida selama satu sampai tiga jam, trigliserida
menumpuk di hepatopsit dan terlihat sebagai droplet lipid. Lipid dalam hati yang
terbentuk ini dapat menghambat sintesis protein sehingga menurunkan produksi
lipoprotein, yang bertanggungjawab dalam transport lipid untuk keluar dari
hepatosit. Akibat menurunnya produksi lipoprotein, transport lipid akan terhambat
sehingga menyebabkan steatosis.
Peroksidasi lipid juga dapat menyebabkan kerusakan membran sel dan
kerusakan mitokondria. Terjadinya penghambatan sintesis protein juga
diakibatkan adanya gangguan keluarnya lipid dari hati yang disebabkan karena
hambatan sintesis lipoprotein yang membawa trigliserida meninggalkan hati
sehingga menimbulkan steatosis (perlemakan hati). Pada keadaan steatosis ini,
struktur retikulum endoplasma mengalami distorsi, sintesa protein menjadi
lambat, selanjutnya akan terjadi penyimpangan dengan cepat terhadap aktivitas
enzim yang berada di retikulum endoplasma.
Kandungan daun M. tanarius adalah glikosida yang dapat tersari oleh
pelarut yang bersifat polar. Pada penelitian ini digunakan larutan penyari
metanol:air (50:50) sehingga kemungkinan besar zat yang akan tertarik dalam
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
59
kombinasi pelarut tersebut. Berdasarkan Matsunami, dkk (2006), senyawa
glikosida memiliki aktivitas penangkapan radikal bebas DPPH, sehingga dapat
digunakan sebagai antioksidan.
Kemungkinan mekanisme kerja kandungan antioksidan dalam daun M.
tanarius memberikan efek hepatoprotektif adalah menangkap radikal bebas
triklorometil (•CCl3) yang merupakan metabolit reaktif. Akibatnya serangkaian
peristiwa yang akan menyebabkan steatosis pada hati akan terhenti. Selain sebagai
antioksidan, kemungkinan senyawa tersebut mampu meningkatkan sintesis enzim
GSH dalam hati yang berfungsi sebagai enzim penetralisir setiap metabolit reaktif,
sehingga dapat dieliminasi dengan mudah oleh tubuh. Adanya kemungkinan
mekanisme efek hepatoprotektif antioksidan dalam daun M. tanarius, maka dapat
dilakukan pembuatan formulasi sediaan untuk pengembangan obat herbal.
D. Rangkuman Pembahasan
Hasil penelitian menunjukkan bahwa praperlakuan ekstrak metanol-air
daun M. tanarius kelompok IV dosis 0,426 g/kgBB, kelompok V dosis
1,280g/kgBB, dan kelompok VI dosis 3,840 g/kgBB mampu memberikan
pengaruh pada tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida dengan
cara menurunkan aktivitas serum ALT dan serum AST. Ada kekerabatan dosis
dengan respon yang muncul terlihat dari semakin besar dosis praperlakuan ekstrak
metanol-air daun M. tanarius yang diberikan, maka semakin besar efek
hepatoprotektif. Hal ini terbukti dari perolehan hasil purata ± SE aktivitas serum
ALT dari dosis rendah hingga tinggi berturut-turut sebesar 173,8 ± 10,9; 139,0 ±
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
60
5,9; dan 92,6 ± 3,2 U/l. Sedangkan hasil purata ± SE untuk aktivitas serum AST
berturut-turut adalah 521,6 ± 10,9; 442,8 ± 8,2; dan 171,6 ± 13,6 U/l. Hasil ini
menjawab permasalahan pertama dalam penelitian ini yaitu pemberian ekstrak
metanol-air daun M. tanarius mempunyai pengaruh pada tikus jantan galur Wistar
terinduksi karbon tetraklorida dengan cara menurunkan serum ALT dan serum
AST.
Aktivitas serum ALT kelompok kontrol ekstrak metanol-air daun M.
tanarius 3,840 g/kgBB secara statistik menunjukkan perbedaan yang tidak
bermakna dibandingkan kelompok kontrol negatif olive oil 2 ml/kgBB. Namun,
aktivitas serum AST kelompok kontrol ekstrak metanol-air daun M. tanarius
3,840 g/kgBB terdapat perbedaan bermakna dibandingkan kelompok kontrol
negatif olive oil 2 ml/kgBB. Dapat disimpulkan bahwa pemberian ekstrak
metanol-air daun M. tanarius tidak memberikan pengaruh terhadap sel hati tikus
jantan terinduksi karbon tetraklorida 2 ml/kgBB dan kenaikan serum ALT dan
serum AST akibat induksi karbon tetraklorida 2 ml/kgBB. Dosis ekstrak metanol-
air daun M. tanarius yang paling baik memberikan efek hepatoprotektif adalah
dosis 3,840 mg/kgBB. Pada dosis 3,840 g/kgBB ini dapat menurunkan aktivitas
serum ALT dan serum AST yang paling besar dibandingkan dua dosis lainnya.
Nilai ED50 ekstrak metanol-air daun M. tanarius yang dapat menghambat
kenaikan aktivitas serum ALT dan serum AST terhadap sel hati terinduksi karbon
tetraklorida adalah 1,776 g/kgBB dengan efek hepatoprotektif 62,4%.
Kandungan dalam daun M. tanarius adalah glikosida yang dapat tersari
oleh pelarut yang bersifat polar. Kemungkinan mekanisme kerja kandungan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
61
antioksidan dalam daun M. tanarius dalam memberikan efek hepatoprotektif
adalah menangkap radikal bebas triklorometil (•CCl3) yang merupakan metabolit
reaktif. Akibatnya serangkaian peristiwa yang akan menyebabkan steatosis pada
hati akan terhenti. Selain sebagai antioksidan, kemungkinan senyawa tersebut
mampu meningkatkan sintesis enzim GSH dalam hati yang berfungsi sebagai
enzim penetralisir setiap metabolit reaktif, sehingga dapat dieliminasi dengan
mudah oleh tubuh.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
62
BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
A. Kesimpulan
Berdasarkan hasil yang diperoleh dan analisis statistik yang telah
dilakukan, maka dapat disimpulkan :
1. Pemberian ekstrak metanol-air daun M. tanarius pada dosis 0,426; 1,280;
dan 3,840 g/kgBB mempunyai pengaruh hepatoprotektif pada tikus jantan
galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida berupa penurunan kadar ALT
dan AST serum.
2. Dosis efektif tengah (ED50) hepatoprotektif ekstrak metanol-air daun M.
tanarius pada tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida adalah
sebesar 1,776 g/kgBB.
B. Saran
Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut tentang :
1. Uji efek hepatoprotektif ekstrak metanol-air daun M. tanarius pada tikus
jantan terinduksi galaktosamin.
2. Formulasi sediaan daun M. tanarius sebagai alternatif pengobatan penyakit
hati.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
63
DAFTAR PUSTAKA
Adrianto, E.E., 2011, Efek Hepatoprotektif Ekstrak Metanol : Air Daun
Macaranga tanarius (L.) Pada Tikus Jantan terinduksi Parasetamol,
Skripsi, 59-61, Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma,
Yogyakarta.
Backer, C.A., dan Brink, R.C.B.V.D., 1963, Flora of Java, Volume I, NV.P.
Noordhoff – Groningen, The Netherlands.
Badan Pengawasan Obat dan Makanan RI, 2005, Standarisasi Ekstrak Tumbuhan
Obat Indonesia, Salah Satu Tahapan Penting dalam Pengembangan
Obat Asli Indonesia, 6, Badan pengawasan Obat dan Makanan RI, pp.5.
Badan Pengawasan Obat dan Makanan RI, 2010, Acuan Sediaan Herbal, 5 (1),
Badan Pengawasan Obat dan Makanan RI, pp.6.
Bai, X., Zhang, W., Chen, W., Zong, W., Guo, Z., dan Liu, X., 2011, Anti-
hepatotoxic and anti-oxidant effects of extracts from Piper nigrum L.
root, African J. Biotechnology, 10 (2), pp. 267-272.
Direktorat Bina Farmasi Komunitas dan Klinik, 2007, Pharmaceutical Care
Untuk Penyakit Hati, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, pp.7.
Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan, 1995, Farmakope Indonesia,
Edisi IV, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta, pp.46.
Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan Republik Indonesia, 1986,
Sediaan Galenik, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta,
pp.25.
Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan Republik Indonesia, 1989,
Materia Medika Indonesia, Edisi V, Departemen Kesehatan Republik
Indonesia, Jakarta, pp.538.
Edem, D.O., dan Akpanabiatu, M.I., 2006, Effects of palm oil-containing diets on
enzyme activities of rats. Pakistan J. Nutr., 5 (4), pp.301- 305.
Forrest, E., 2006, Hepatic Disorders, in Lee, A., (Ed.), Adverse Drug Reaction,
2nd
edition, Pharmaceutical Press, London, pp.193, 201-202.
Ganong, W., dan McPhee, S.J., 2011, Patofisiologi Penyakit : Pengantar Menuju
Kedokteran Klinis, Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta, pp.431-432.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
64
Gregus dan Klaaseen, C. D., 2001, Mchanism of Toxicity, in Klaaseen, C. D.,
Cassarett and Doull’s Toxicology: the Basic Science Poisons, 6th edition,
McGraw-Hill, New York, pp.57-64.
Handayani, M.T., 2012, Pengaruh Pemberian Ekstrak Metanol-Air Daun
Macaranga tanarius L. Terhadap Penurunan Kadar Glukosa Darah Pada
Tikus Yang Terbebani Glukos, Skripsi, 47, Fakultas Farmasi Universitas
Sanata Dharma, Yogyakarta.
Hastuti, T., 2008, Aktivitas enzim Transaminase dan Gambaran Histopatologi
Tikus yang Diberikan Kelapa Kopyor Pasca Induksi Parasetamol,
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Laporan Penelitian,
Institut Pertanian, Bogor.
Hian, J., 2009, Tanaman Herbal Penyembuh Penyakit Liver,
http://id.shvoong.com/medicine-and-health/alternative-
medicine/1943124-tanaman-herbal-penyembuh-penyakit-liver/, diakses
tanggal 21 April 2012.
Janakat, S., dan Al-Merie, H., 2002, Optimization of the dose and route of
injection, and characterization of the time course of carbon tetrachloride-
induced hepatotoxicity in the rat, J. Pharm. Tox. Methods, 48, 41-44.
Kurniawati, A.Y., Adrianto, E.E., dan Hendra, P., 2011, Uji Praklinik Ekstrak
Metanol-Air Macaranga tanarius L. Kajian : Aktivitas Antiinflamasi dan
Hepatoprotektif, Kongres Ilmiah dan Rapat Kerja Nasional IAI 2011,
IAI, Manado.
Lim, T.Y., Lim Y.Y., Yule C.M., 2008, Evaluation of antioxidant, antibacterial
and anti-tyrosinase activities of four Macaranga species, Food Chemistry,
114, 594.
Lu, F.C., 1995, Toksikologi Dasar, Edisi 2, UI Press, Jakarta, pp.209-210.
Mahendra, A.A., dan Hendra, P., 2011, Efek Hepatoprotektif Infusa Daun
Macaranga tanarius L. pada Tikus Jantan Terinduksi Parasetamol, J.
Far. Sains dan Komunitas, 8 (2), 91-99.
Matsunami, K., Takamori, I., Shinzato, T., Aramoto, M., Kondo, K., Otsuka, H.,
dkk, 2006, Radical-Scavenging Activities of New Megastigmane
Glucosides from Macaranga tanarius (L.) MÜLL.-ARG., Chem. Pharm.
Bull., 54 (10), 1403-1406.
Matsunami, K., Otsuka, H., Kondo, K., Shinzato, T., Kawahata, M., Yamaguchi,
K., dkk., 2009, Absolute configuration of (+)-pinoresinol 4-O-[600-O-
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
65
galloyl]-b-D-glucopyranoside, macarangiosides E, and F isolated from
the leaves of Macaranga tanarius, Phytochemistry, 70, 1277-1285.
Mercer University School of Medicine, 2012, Hepatic Pathology,
http://library.med.utah.edu/WebPath/webpath.html, diakses tanggal 4
Januari 2013.
Permadi, R.B., 2012, Efek Hipoglikemik Kombinasi Ekstrak Metanol-Air Daun
Macaranga tanarius L. Dengan Insulin Pada Tikus Wistar Jantan
Terbebani Glukosa, Skripsi, 61, Fakultas Farmasi Universitas Sanata
Dharma, Yogyakarta.
Phommart, S., Sutthivaiyakit, P., Chimnoi, N., Ruchirawat, S., dan Sutthivaiyakit,
S., 2005, Constituents of the Leaves of Macaranga tanarius, J. Nat. Prod.,
68, 927-930.
Plaa, G.L., dan Charbonneau, M., 2001, Detection and Evaluation of Chemically
Induced Liver Injury, in Hayes, W.A., Principles and Methods of
Toxicology, 4th edition, Taylor and Francis, Philadelphia, pp.1148-1175.
Plantamor, 2008, Informasi Spesies- Mara Macaranga tanarius L. M.A.
http://www.plantamor.com/index.php?plant=804, diakses tanggal 31
Maret 2012.
Price, S. A., dan Wilson, L. M., 2005, Patofisiologi : Konsep Klinis Proses – Proses
Penyakit, Edisi 6, EGC, Jakarta, pp.472 – 476.
Proseanet, 2012,Prosea-Macarangatanarius,
http://www.proseanet.org/prohati4/browser.php?docsid=162, diakses
tanggal 31 Maret 2012.
Puteri, M.D.P.T., dan Kawabata, J., 2010, Novel a-glucosidase inhibitors from
Macaranga tanarius leaves, Food Chem., 123, 384–389.
Rajendran, R., Hemalatha, S., Akasakalai, K., MadhuKrishna, C.H., Sohil, B.,
Vittal, dkk., 2009, Hepatoprotective activity of Mimosa pudica leaves
against Carbontetrachloride induced toxicity, I J. Nat. Prod., 2, pp. 116-
122.
Sacher, R.A., dan McPherson, R.A., 2002, Tinjauan Klinis Hasil Pemeriksaan,
Edisi II, Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta, pp.369-370.
Sofia, N.A., Nurdjanah, S., dan Ratnasari, N., 2009, Kadar Leptin pada Populasi
non Diabetes dengan dan tanpa Non Alcoholic Fatty Liver (NAFL),
Berkala Kesehatan Klinik, 15 (1), 49-55.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
66
Starr, F., Starr, K., and Loope, L., 2003, Macaranga tanarius, United States
Geological Survey, Haleakala Field Station, Mau’I, pp.1-2.
Timbrell, J. A. 2008, Principles of Biochemical Toxicology, 4th Edition, Informa
Healthcare, New York, pp.308-311.
Treinen, M., dan Moslen, 2001, Toxic Responses of The Liver, in Klaassen, C.D.,
Cassarett and Doull’s Toxicology : The Basic Science of poisons, 6th
edition, Mc. Graw Hill Companies, Inc., New York, pp.467-481.
Wahyuni, S., 2005, Pengaruh Daun Sambiloto (Andrographis paniculata, Ness)
Terhadap Kadar SGPT dan SGOT Tikus Putih, GAMMA, 1(1), 45-53.
Wibowo, D.S., dan Paryana, W., 2009, Anatomi Tubuh Manusia, Graha Ilmu,
Bandung, pp.347-352.
World Health Organization (WHO), 2009, Initiative for Vaccine Research, Viral
Cancers, Hepatitis C,
http://www.who.int/vaccine_research/diseases/viral_cancers/en/index2.ht
ml, diakses tanggal 31 Agustus 2012.
Ziemmerman, H.J., 1999, Hepatotoxicity, 2nd
edition, Lippincott Williams and
Wilkins, Philadelphia, pp. 195-210.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
67
LAMPIRAN
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
68
LAMPIRAN
Lampiran 1. Foto daun M. tanarius
Lampiran 2. Foto ekstrak metanol-air daun M. tanarius
Lampiran 3. Foto larutan ekstrak metanol-air daun M. tanarius
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
69
Lampiran 4. Surat pengesahan determinasi tanaman M. tanarius
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
70
Lampiran 5. Surat pengesahan Medical and Health Research Ethics
Committee (MHREC)
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
71
Lampiran 6. Analisis statistik aktivitas serum ALT pada uji pendahuluan
penentuan dosis hepatotoksin karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB
NPar Tests
Descriptive Statistics
N Mean Std. Deviation Minimum Maximum
ALT 15 1.4053E2 84.31901 51.00 311.00
One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test
ALT
N 15
Normal Parametersa Mean 1.4053E2
Std. Deviation 8.43190E1
Most Extreme Differences Absolute .204
Positive .204
Negative -.157
Kolmogorov-Smirnov Z .790
Asymp. Sig. (2-tailed) .561
a. Test distribution is Normal.
Oneway
Descriptives
ALT
N Mean
Std.
Deviation Std. Error
95% Confidence Interval for Mean
Minimum Maximum Lower Bound Upper Bound
CCl4 Dosis 2 ml/kgBB jam ke 0 5 73.2000 28.89983 12.92440 37.3161 109.0839 51.00 123.00
CCl4 Dosis 2 ml/kgBB jam ke
24 5 2.4640E2 38.02368 17.00471 199.1874 293.6126 219.00 311.00
CCl4 Dosis 2 ml/kgBB jam ke
48 5 1.0200E2 32.71085 14.62874 61.3841 142.6159 68.00 139.00
Total 15 1.4053E2 84.31901 21.77107 93.8390 187.2276 51.00 311.00
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
72
Test of Homogeneity of Variances
ALT
Levene Statistic df1 df2 Sig.
.296 2 12 .749
ANOVA
ALT
Sum of Squares df Mean Square F Sig.
Between Groups 86131.733 2 43065.867 38.555 .000
Within Groups 13404.000 12 1117.000
Total 99535.733 14
Post Hoc Tests
Multiple Comparisons
ALT
Scheffe
(I) Orientasi_CCl4 (J) Orientasi_CCl4
Mean Difference
(I-J) Std. Error Sig.
95% Confidence Interval
Lower Bound Upper Bound
CCl4 Dosis 2 ml/kgBB
jam ke 0
CCl4 Dosis 2 ml/kgBB jam ke 24 -173.20000* 21.13764 .000 -232.1228 -114.2772
CCl4 Dosis 2 ml/kgBB jam ke 48 -28.80000 21.13764 .422 -87.7228 30.1228
CCl4 Dosis 2 ml/kgBB
jam ke 24
CCl4 Dosis 2 ml/kgBB jam ke 0 173.20000* 21.13764 .000 114.2772 232.1228
CCl4 Dosis 2 ml/kgBB jam ke 48 144.40000* 21.13764 .000 85.4772 203.3228
CCl4 Dosis 2 ml/kgBB
jam ke 48
CCl4 Dosis 2 ml/kgBB jam ke 0 28.80000 21.13764 .422 -30.1228 87.7228
CCl4 Dosis 2 ml/kgBB jam ke 24 -144.40000* 21.13764 .000 -203.3228 -85.4772
*. The mean difference is significant at the 0.05 level.
Homogeneous Subsets
ALT
Scheffe
Orientasi_CCl4 N
Subset for alpha = 0.05
1 2
CCl4 Dosis 2 ml/kgBB jam ke 0 5 73.2000
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
73
CCl4 Dosis 2 ml/kgBB jam ke 48 5 102.0000
CCl4 Dosis 2 ml/kgBB jam ke 24 5 246.4000
Sig. .422 1.000
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
Means
Case Processing Summary
Cases
Included Excluded Total
N Percent N Percent N Percent
ALT * Orientasi_CCl4 15 100.0% 0 .0% 15 100.0%
Report
ALT
Orientasi_CCl4 Mean N Std. Deviation
CCl4 Dosis 2 ml/kgBB jam ke 0 73.2000 5 28.89983
CCl4 Dosis 2 ml/kgBB jam ke 24 2.4640E2 5 38.02368
CCl4 Dosis 2 ml/kgBB jam ke 48 1.0200E2 5 32.71085
Total 1.4053E2 15 84.31901
ANOVA Table
Sum of Squares df Mean Square F Sig.
ALT *
Orientasi_CCl4
Between Groups (Combined) 86131.733 2 43065.867 38.555 .000
Linearity 2073.600 1 2073.600 1.856 .198
Deviation from Linearity 84058.133 1 84058.133 75.253 .000
Within Groups 13404.000 12 1117.000
Total 99535.733 14
Measures of Association
R R Squared Eta Eta Squared
ALT * Orientasi_CCl4 .144 .021 .930 .865
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
74
Lampiran 7. Analisis statistik aktivitas serum AST pada uji pendahuluan
penentuan dosis hepatotoksin karbontetraklorida dosis 2 ml/kgBB
NPar Tests
Descriptive Statistics
N Mean Std. Deviation Minimum Maximum
AST 15 3.1200E2 211.52575 114.00 669.00
One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test
AST
N 15
Normal Parametersa Mean 3.1200E2
Std. Deviation 2.11526E2
Most Extreme Differences Absolute .373
Positive .373
Negative -.175
Kolmogorov-Smirnov Z 1.446
Asymp. Sig. (2-tailed) .031
a. Test distribution is Normal.
NPar Tests
Descriptive Statistics
N Mean Std. Deviation Minimum Maximum
AST 15 3.1200E2 211.52575 114.00 669.00
Orientasi_CCl4 15 2.0000 .84515 1.00 3.00
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
75
Kruskal-Wallis Test
Ranks
Orientasi_CCl4 N Mean Rank
AST CCl4 Dosis 2 ml/kgBB jam ke 0 5 3.40
CCl4 Dosis 2 ml/kgBB jam ke 24 5 13.00
CCl4 Dosis 2 ml/kgBB jam ke 48 5 7.60
Total 15
Test Statisticsa,b
AST
Chi-Square 11.580
df 2
Asymp. Sig. .003
a. Kruskal Wallis Test
b. Grouping Variable:
Orientasi_CCl4
NPar Tests
Descriptive Statistics
N Mean Std. Deviation Minimum Maximum
AST 15 3.1200E2 211.52575 114.00 669.00
Orientasi_CCl4 15 2.0000 .84515 1.00 3.00
Mann-Whitney Test
Ranks
Orientasi_CCl4 N Mean Rank Sum of Ranks
AST CCl4 Dosis 2 ml/kgBB jam ke 0 5 3.00 15.00
CCl4 Dosis 2 ml/kgBB jam ke 24 5 8.00 40.00
Total 10
Test Statisticsb
AST
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 15.000
Z -2.611
Asymp. Sig. (2-tailed) .009
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
76
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable: Orientasi_CCl4
NPar Tests
Descriptive Statistics
N Mean Std. Deviation Minimum Maximum
AST 15 3.1200E2 211.52575 114.00 669.00
Orientasi_CCl4 15 2.0000 .84515 1.00 3.00
Mann-Whitney Test
Ranks
Orientasi_CCl4 N Mean Rank Sum of Ranks
AST CCl4 Dosis 2 ml/kgBB jam ke 0 5 3.40 17.00
CCl4 Dosis 2 ml/kgBB jam ke 48 5 7.60 38.00
Total 10
Test Statisticsb
AST
Mann-Whitney U 2.000
Wilcoxon W 17.000
Z -2.193
Asymp. Sig. (2-tailed) .028
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .032a
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable: Orientasi_CCl4
NPar Tests
Descriptive Statistics
N Mean Std. Deviation Minimum Maximum
AST 15 3.1200E2 211.52575 114.00 669.00
Orientasi_CCl4 15 2.0000 .84515 1.00 3.00
Mann-Whitney Test
Ranks
Orientasi_CCl4 N Mean Rank Sum of Ranks
AST CCl4 Dosis 2 ml/kgBB jam ke 24 5 8.00 40.00
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
77
CCl4 Dosis 2 ml/kgBB jam ke 48 5 3.00 15.00
Total 10
Test Statisticsb
AST
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 15.000
Z -2.611
Asymp. Sig. (2-tailed) .009
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable: Orientasi_CCl4
Means
Case Processing Summary
Cases
Included Excluded Total
N Percent N Percent N Percent
AST * Orientasi_CCl4 15 100.0% 0 .0% 15 100.0%
Report
AST
Orientasi_CCl4 Mean N Std. Deviation Std. Error of Mean
CCl4 Dosis 2 ml/kgBB jam ke 0 1.5120E2 5 31.91708 14.27375
CCl4 Dosis 2 ml/kgBB jam ke 24 5.9620E2 5 56.67186 25.34443
CCl4 Dosis 2 ml/kgBB jam ke 48 1.8860E2 5 7.30068 3.26497
Total 3.1200E2 15 211.52575 54.61571
ANOVA Table
Sum of Squares df Mean Square F Sig.
AST *
Orientasi_CCl4
Between Groups (Combined) 609269.200 2 304634.600 213.344 .000
Linearity 3496.900 1 3496.900 2.449 .144
Deviation from Linearity 605772.300 1 605772.300 424.240 .000
Within Groups 17134.800 12 1427.900
Total 626404.000 14
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
78
Measures of Association
R R Squared Eta Eta Squared
AST * Orientasi_CCl4 .075 .006 .986 .973
Lampiran 8. Analisis statistik aktivitas serum ALT perlakuan ekstrak
metanol air daun M. tanarius setelah induksi karbon tetraklorida dosis 2
ml/kgBB
NPar Tests
Descriptive Statistics
N Mean Std. Deviation Minimum Maximum
ALT 30 1.3607E2 63.29075 62.00 311.00
One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test
ALT
N 30
Normal Parametersa Mean 1.3607E2
Std. Deviation 6.32908E1
Most Extreme Differences Absolute .216
Positive .216
Negative -.142
Kolmogorov-Smirnov Z 1.181
Asymp. Sig. (2-tailed) .123
a. Test distribution is Normal.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
79
Oneway
Descriptives
ALT
N Mean
Std.
Deviation Std. Error
95% Confidence Interval for Mean
Minimum Maximum Lower Bound Upper Bound
Kontrol Hepatotoksin CCl4
Dosis 2 ml/kgBB 5 2.4640E2 38.02368 17.00471 199.1874 293.6126 219.00 311.00
Kontrol Negatif Olive Oil Dosis
2 ml/kgBB 5 82.2000 6.09918 2.72764 74.6269 89.7731 77.00 92.00
Kontrol Ekstrak Daun
M.tanarius Dosis Tinggi 3,840
g/kgBB
5 82.4000 12.05404 5.39073 67.4329 97.3671 62.00 91.00
Ekstrak Daun M.tanarius Dosis
Rendah 0,426 g/kgBB 5 1.7380E2 24.32488 10.87842 143.5967 204.0033 153.00 215.00
Ekstrak Daun M.tanarius Dosis
Tengah 1,280 g/kgBB 5 1.3900E2 13.13393 5.87367 122.6921 155.3079 128.00 157.00
Ekstrak Daun M.tanarius Dosis
Tinggi 3,840 g/kgBB 5 92.6000 7.26636 3.24962 83.5776 101.6224 82.00 100.00
Total 30 1.3607E2 63.29075 11.55526 112.4335 159.6998 62.00 311.00
Test of Homogeneity of Variances
ALT
Levene Statistic df1 df2 Sig.
2.367 5 24 .070
ANOVA
ALT
Sum of Squares df Mean Square F Sig.
Between Groups 106384.667 5 21276.933 52.207 .000
Within Groups 9781.200 24 407.550
Total 116165.867 29
Post Hoc Tests
Multiple Comparisons
ALT
Scheffe
(I) Kelompok_Perlakuan (J) Kelompok_Perlakuan Mean Std. Error Sig. 95% Confidence Interval
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
80
Difference (I-J) Lower Bound Upper Bound
Kontrol Hepatotoksin CCl4
Dosis 2 ml/kgBB
Kontrol Negatif Olive Oil Dosis 2
ml/kgBB 164.20000
* 12.76793 .000 117.9821 210.4179
Kontrol Ekstrak Daun M.tanarius
Dosis Tinggi 3,840 g/kgBB 164.00000
* 12.76793 .000 117.7821 210.2179
Ekstrak Daun M.tanarius Dosis
Rendah 0,426 g/kgBB 72.60000
* 12.76793 .001 26.3821 118.8179
Ekstrak Daun M.tanarius Dosis
Tengah 1,280 g/kgBB 107.40000
* 12.76793 .000 61.1821 153.6179
Ekstrak Daun M.tanarius Dosis
Tinggi 3,840 g/kgBB 153.80000
* 12.76793 .000 107.5821 200.0179
Kontrol Negatif Olive Oil
Dosis 2 ml/kgBB
Kontrol Hepatotoksin CCl4
Dosis 2 ml/kgBB -164.20000
* 12.76793 .000 -210.4179 -117.9821
Kontrol Ekstrak Daun M.tanarius
Dosis Tinggi 3,840 g/kgBB -.20000 12.76793 1.000 -46.4179 46.0179
Ekstrak Daun M.tanarius Dosis
Rendah 0,426 g/kgBB -91.60000
* 12.76793 .000 -137.8179 -45.3821
Ekstrak Daun M.tanarius Dosis
Tengah 1,280 g/kgBB -56.80000
* 12.76793 .009 -103.0179 -10.5821
Ekstrak Daun M.tanarius Dosis
Tinggi 3,840 g/kgBB -10.40000 12.76793 .983 -56.6179 35.8179
Kontrol Ekstrak Daun
M.tanarius Dosis Tinggi
3,840 g/kgBB
Kontrol Hepatotoksin CCl4
Dosis 2 ml/kgBB -164.00000
* 12.76793 .000 -210.2179 -117.7821
Kontrol Negatif Olive Oil Dosis 2
ml/kgBB .20000 12.76793 1.000 -46.0179 46.4179
Ekstrak Daun M.tanarius Dosis
Rendah 0,426 g/kgBB -91.40000
* 12.76793 .000 -137.6179 -45.1821
Ekstrak Daun M.tanarius Dosis
Tengah 1,280 g/kgBB -56.60000
* 12.76793 .010 -102.8179 -10.3821
Ekstrak Daun M.tanarius Dosis
Tinggi 3,840 g/kgBB -10.20000 12.76793 .985 -56.4179 36.0179
Ekstrak Daun M.tanarius
Dosis Rendah 0,426
g/kgBB
Kontrol Hepatotoksin CCl4
Dosis 2 ml/kgBB -72.60000
* 12.76793 .001 -118.8179 -26.3821
Kontrol Negatif Olive Oil Dosis 2
ml/kgBB 91.60000
* 12.76793 .000 45.3821 137.8179
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
81
Kontrol Ekstrak Daun M.tanarius
Dosis Tinggi 3,840 g/kgBB 91.40000
* 12.76793 .000 45.1821 137.6179
Ekstrak Daun M.tanarius Dosis
Tengah 1,280 g/kgBB 34.80000 12.76793 .231 -11.4179 81.0179
Ekstrak Daun M.tanarius Dosis
Tinggi 3,840 g/kgBB 81.20000
* 12.76793 .000 34.9821 127.4179
Ekstrak Daun M.tanarius
Dosis Tengah 1,280
g/kgBB
Kontrol Hepatotoksin CCl4
Dosis 2 ml/kgBB -107.40000
* 12.76793 .000 -153.6179 -61.1821
Kontrol Negatif Olive Oil Dosis 2
ml/kgBB 56.80000
* 12.76793 .009 10.5821 103.0179
Kontrol Ekstrak Daun M.tanarius
Dosis Tinggi 3,840 g/kgBB 56.60000
* 12.76793 .010 10.3821 102.8179
Ekstrak Daun M.tanarius Dosis
Rendah 0,426 g/kgBB -34.80000 12.76793 .231 -81.0179 11.4179
Ekstrak Daun M.tanarius Dosis
Tinggi 3,840 g/kgBB 46.40000
* 12.76793 .049 .1821 92.6179
Ekstrak Daun M.tanarius
Dosis Tinggi 3,840 g/kgBB
Kontrol Hepatotoksin CCl4
Dosis 2 ml/kgBB -153.80000
* 12.76793 .000 -200.0179 -107.5821
Kontrol Negatif Olive Oil Dosis 2
ml/kgBB 10.40000 12.76793 .983 -35.8179 56.6179
Kontrol Ekstrak Daun M.tanarius
Dosis Tinggi 3,840 g/kgBB 10.20000 12.76793 .985 -36.0179 56.4179
Ekstrak Daun M.tanarius Dosis
Rendah 0,426 g/kgBB -81.20000
* 12.76793 .000 -127.4179 -34.9821
Ekstrak Daun M.tanarius Dosis
Tengah 1,280 g/kgBB -46.40000
* 12.76793 .049 -92.6179 -.1821
*. The mean difference is significant at the 0.05 level.
Homogeneous Subsets
ALT
Scheffe
Kelompok_Perlakuan N
Subset for alpha = 0.05
1 2 3
Kontrol Negatif Olive Oil Dosis 2 ml/kgBB 5 82.2000
Kontrol Ekstrak Daun M.tanarius Dosis Tinggi 3,840
g/kgBB 5 82.4000
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
82
Ekstrak Daun M.tanarius Dosis Tinggi 3,840 g/kgBB 5 92.6000
Ekstrak Daun M.tanarius Dosis Tengah 1,280 g/kgBB 5 1.3900E2
Ekstrak Daun M.tanarius Dosis Rendah 0,426 g/kgBB 5 1.7380E2
Kontrol Hepatotoksin CCl4 Dosis 2 ml/kgBB 5 2.4640E2
Sig. .983 .231 1.000
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
Means
Case Processing Summary
Cases
Included Excluded Total
N Percent N Percent N Percent
ALT * Kelompok_Perlakuan 30 100.0% 0 .0% 30 100.0%
Report
ALT
Kelompok_Perlakuan Mean N Std. Deviation
Kontrol Hepatotoksin CCl4 Dosis 2 ml/kgBB 2.4640E2 5 38.02368
Kontrol Negatif Olive Oil Dosis 2 ml/kgBB 82.2000 5 6.09918
Kontrol Ekstrak Daun M.tanarius Dosis Tinggi 3,840 g/kgBB 82.4000 5 12.05404
Ekstrak Daun M.tanarius Dosis Rendah 0,426 g/kgBB 1.7380E2 5 24.32488
Ekstrak Daun M.tanarius Dosis Tengah 1,280 g/kgBB 1.3900E2 5 13.13393
Ekstrak Daun M.tanarius Dosis Tinggi 3,840 g/kgBB 92.6000 5 7.26636
Total 1.3607E2 30 63.29075
ANOVA Table
Sum of Squares df Mean Square F Sig.
ALT *
Kelompok_Perla
kuan
Between Groups (Combined) 106384.667 5 21276.933 52.207 .000
Linearity 18375.131 1 18375.131 45.087 .000
Deviation from Linearity 88009.535 4 22002.384 53.987 .000
Within Groups 9781.200 24 407.550
Total 116165.867 29
Measures of Association
R R Squared Eta Eta Squared
ALT * Kelompok_Perlakuan -.398 .158 .957 .916
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
83
Lampiran 9. Analisis statistik aktivitas serum AST perlakuan ekstrak
metanol air daun M. tanarius setelah induksi karbon tetraklorida dosis 2
ml/kgBB
NPar Tests
Descriptive Statistics
N Mean Std. Deviation Minimum Maximum
AST 30 3.3557E2 195.75067 106.00 669.00
One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test
AST
N 30
Normal Parametersa Mean 3.3557E2
Std. Deviation 1.95751E2
Most Extreme Differences Absolute .248
Positive .248
Negative -.171
Kolmogorov-Smirnov Z 1.356
Asymp. Sig. (2-tailed) .051
a. Test distribution is Normal.
Oneway
Descriptives
AST
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
84
N Mean
Std.
Deviation
Std.
Error
95% Confidence Interval for Mean
Minimum Maximum Lower Bound Upper Bound
Kontrol Hepatotoksin CCl4 Dosis 2
ml/kgBB 5 5.9620E2 56.67186 25.34443 525.8326 666.5674 522.00 669.00
Kontrol Negatif Olive Oil Dosis 2
ml/kgBB 5 1.1860E2 11.50217 5.14393 104.3182 132.8818 106.00 133.00
Kontrol Ekstrak Daun M.tanarius Dosis
Tinggi 3,840 g/kgBB 5 1.6260E2 14.36315 6.42339 144.7658 180.4342 139.00 175.00
Ekstrak Daun M.tanarius Dosis Rendah
0,426 g/kgBB 5 5.2160E2 24.46017 10.93892 491.2287 551.9713 499.00 560.00
Ekstrak Daun M.tanarius Dosis Tengah
1,280 g/kgBB 5 4.4280E2 18.45806 8.25470 419.8813 465.7187 422.00 462.00
Ekstrak Daun M.tanarius Dosis Tinggi
3,840 g/kgBB 5 1.7160E2 30.42696 13.60735 133.8199 209.3801 123.00 205.00
Total 30 3.3557E2 195.75067 35.73902 262.4722 408.6612 106.00 669.00
Test of Homogeneity of Variances
AST
Levene Statistic df1 df2 Sig.
3.232 5 24 .023
ANOVA
AST
Sum of Squares df Mean Square F Sig.
Between Groups 1089570.967 5 217914.193 241.452 .000
Within Groups 21660.400 24 902.517
Total 1111231.367 29
Post Hoc Tests
Multiple Comparisons
AST
Tamhane
(I) Kelompok_Perlakuan (J) Kelompok_Perlakuan
Mean Difference
(I-J) Std. Error Sig.
95% Confidence Interval
Lower Bound Upper Bound
Kontrol Hepatotoksin CCl4
Dosis 2 ml/kgBB
Kontrol Negatif Olive Oil Dosis 2
ml/kgBB 477.60000
* 25.86117 .000 327.4110 627.7890
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
85
Kontrol Ekstrak Daun M.tanarius
Dosis Tinggi 3,840 g/kgBB 433.60000
* 26.14575 .000 286.6472 580.5528
Ekstrak Daun M.tanarius Dosis
Rendah 0,426 g/kgBB 74.60000 27.60435 .450 -61.8739 211.0739
Ekstrak Daun M.tanarius Dosis
Tengah 1,280 g/kgBB 153.40000
* 26.65483 .036 11.1249 295.6751
Ekstrak Daun M.tanarius Dosis
Tinggi 3,840 g/kgBB 424.60000
* 28.76630 .000 291.6271 557.5729
Kontrol Negatif Olive Oil
Dosis 2 ml/kgBB
Kontrol Hepatotoksin CCl4 Dosis
2 ml/kgBB -477.60000
* 25.86117 .000 -627.7890 -327.4110
Kontrol Ekstrak Daun M.tanarius
Dosis Tinggi 3,840 g/kgBB -44.00000
* 8.22922 .012 -78.3987 -9.6013
Ekstrak Daun M.tanarius Dosis
Rendah 0,426 g/kgBB -403.00000
* 12.08801 .000 -461.2204 -344.7796
Ekstrak Daun M.tanarius Dosis
Tengah 1,280 g/kgBB -324.20000
* 9.72625 .000 -367.2227 -281.1773
Ekstrak Daun M.tanarius Dosis
Tinggi 3,840 g/kgBB -53.00000 14.54716 .194 -127.7243 21.7243
Kontrol Ekstrak Daun
M.tanarius Dosis Tinggi
3,840 g/kgBB
Kontrol Hepatotoksin CCl4 Dosis
2 ml/kgBB -433.60000
* 26.14575 .000 -580.5528 -286.6472
Kontrol Negatif Olive Oil Dosis 2
ml/kgBB 44.00000
* 8.22922 .012 9.6013 78.3987
Ekstrak Daun M.tanarius Dosis
Rendah 0,426 g/kgBB -359.00000
* 12.68542 .000 -416.0758 -301.9242
Ekstrak Daun M.tanarius Dosis
Tengah 1,280 g/kgBB -280.20000
* 10.45945 .000 -324.1320 -236.2680
Ekstrak Daun M.tanarius Dosis
Tinggi 3,840 g/kgBB -9.00000 15.04726 1.000 -81.3871 63.3871
Ekstrak Daun M.tanarius
Dosis Rendah 0,426
g/kgBB
Kontrol Hepatotoksin CCl4 Dosis
2 ml/kgBB -74.60000 27.60435 .450 -211.0739 61.8739
Kontrol Negatif Olive Oil Dosis 2
ml/kgBB 403.00000
* 12.08801 .000 344.7796 461.2204
Kontrol Ekstrak Daun M.tanarius
Dosis Tinggi 3,840 g/kgBB 359.00000
* 12.68542 .000 301.9242 416.0758
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
86
Ekstrak Daun M.tanarius Dosis
Tengah 1,280 g/kgBB 78.80000
* 13.70401 .008 20.9114 136.6886
Ekstrak Daun M.tanarius Dosis
Tinggi 3,840 g/kgBB 350.00000
* 17.45910 .000 277.0638 422.9362
Ekstrak Daun M.tanarius
Dosis Tengah 1,280
g/kgBB
Kontrol Hepatotoksin CCl4 Dosis
2 ml/kgBB -153.40000
* 26.65483 .036 -295.6751 -11.1249
Kontrol Negatif Olive Oil Dosis 2
ml/kgBB 324.20000
* 9.72625 .000 281.1773 367.2227
Kontrol Ekstrak Daun M.tanarius
Dosis Tinggi 3,840 g/kgBB 280.20000
* 10.45945 .000 236.2680 324.1320
Ekstrak Daun M.tanarius Dosis
Rendah 0,426 g/kgBB -78.80000
* 13.70401 .008 -136.6886 -20.9114
Ekstrak Daun M.tanarius Dosis
Tinggi 3,840 g/kgBB 271.20000
* 15.91540 .000 200.2645 342.1355
Ekstrak Daun M.tanarius
Dosis Tinggi 3,840 g/kgBB
Kontrol Hepatotoksin CCl4 Dosis
2 ml/kgBB -424.60000
* 28.76630 .000 -557.5729 -291.6271
Kontrol Negatif Olive Oil Dosis 2
ml/kgBB 53.00000 14.54716 .194 -21.7243 127.7243
Kontrol Ekstrak Daun M.tanarius
Dosis Tinggi 3,840 g/kgBB 9.00000 15.04726 1.000 -63.3871 81.3871
Ekstrak Daun M.tanarius Dosis
Rendah 0,426 g/kgBB -350.00000
* 17.45910 .000 -422.9362 -277.0638
Ekstrak Daun M.tanarius Dosis
Tengah 1,280 g/kgBB -271.20000
* 15.91540 .000 -342.1355 -200.2645
*. The mean difference is significant at the 0.05 level.
Means
Case Processing Summary
Cases
Included Excluded Total
N Percent N Percent N Percent
AST * Kelompok_Perlakuan 30 100.0% 0 .0% 30 100.0%
Report
AST
Kelompok_Perlakuan Mean N Std. Deviation
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
87
Kontrol Hepatotoksin CCl4 Dosis 2 ml/kgBB 5.9620E2 5 56.67186
Kontrol Negatif Olive Oil Dosis 2 ml/kgBB 1.1860E2 5 11.50217
Kontrol Ekstrak Daun M.tanarius Dosis Tinggi 3,840
g/kgBB 1.6260E2 5 14.36315
Ekstrak Daun M.tanarius Dosis Rendah 0,426 g/kgBB 5.2160E2 5 24.46017
Ekstrak Daun M.tanarius Dosis Tengah 1,280 g/kgBB 4.4280E2 5 18.45806
Ekstrak Daun M.tanarius Dosis Tinggi 3,840 g/kgBB 1.7160E2 5 30.42696
Total 3.3557E2 30 195.75067
ANOVA Table
Sum of Squares df Mean Square F Sig.
AST *
Kelompok_
Perlakuan
Between Groups (Combined) 1089570.967 5 217914.193 241.452 .000
Linearity 44736.711 1 44736.711 49.569 .000
Deviation from Linearity 1044834.255 4 261208.564 289.422 .000
Within Groups 21660.400 24 902.517
Total 1111231.367 29
Measures of Association
R R Squared Eta Eta Squared
AST * Kelompok_Perlakuan -.201 .040 .990 .981
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
88
Lampiran 10. Analisis statistik aktivitas serum ALT dan serum AST
perlakuan kontrol negatif olive oil dosis 2 ml/kgBB
ALT
NPar Tests
Descriptive Statistics
N Mean Std. Deviation Minimum Maximum
ALT 10 86.2000 9.37846 77.00 108.00
One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test
ALT
N 10
Normal Parametersa Mean 86.2000
Std. Deviation 9.37846
Most Extreme Differences Absolute .193
Positive .193
Negative -.163
Kolmogorov-Smirnov Z .609
Asymp. Sig. (2-tailed) .851
a. Test distribution is Normal.
Means
Report
ALT
Kelompok_Perlakuan Mean N Std. Deviation Std. Error of Mean
Kontrol negatif olive oil 2 ml/kgBB jam ke 0 90.2000 5 10.98636 4.91325
Kontrol negatif olive oil 2 ml/kgBB jam ke
24 82.2000 5 6.09918 2.72764
Total 86.2000 10 9.37846 2.96573
NPar Tests
Descriptive Statistics
N Mean Std. Deviation Minimum Maximum
ALT 10 86.2000 9.37846 77.00 108.00
Kelompok_Perlakuan 10 1.50 .527 1 2
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
89
Kruskal-Wallis Test
Ranks
Kelompok_Perlakuan N Mean Rank
ALT Kontrol negatif olive oil 2
ml/kgBB jam ke 0 5 6.70
Kontrol negatif olive oil 2
ml/kgBB jam ke 24 5 4.30
Total 10
Test Statisticsa,b
ALT
Chi-Square 1.580
df 1
Asymp. Sig. .209
a. Kruskal Wallis Test
b. Grouping Variable:
Kelompok_Perlakuan
NPar Tests
Descriptive Statistics
N Mean Std. Deviation Minimum Maximum
ALT 10 86.2000 9.37846 77.00 108.00
Kelompok_Perlakuan 10 1.50 .527 1 2
Mann-Whitney Test
Ranks
Kelompok_Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
ALT Kontrol negatif olive oil 2
ml/kgBB jam ke 0 5 6.70 33.50
Kontrol negatif olive oil 2
ml/kgBB jam ke 24 5 4.30 21.50
Total 10
Test Statisticsb
ALT
Mann-Whitney U 6.500
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
90
Wilcoxon W 21.500
Z -1.257
Asymp. Sig. (2-tailed) .209
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .222a
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable: Kelompok_Perlakuan
AST
NPar Tests
Descriptive Statistics
N Mean Std. Deviation Minimum Maximum
AST 10 1.2070E2 11.65285 105.00 137.00
One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test
AST
N 10
Normal Parametersa Mean 1.2070E2
Std. Deviation 1.16528E1
Most Extreme Differences Absolute .206
Positive .142
Negative -.206
Kolmogorov-Smirnov Z .650
Asymp. Sig. (2-tailed) .792
a. Test distribution is Normal.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
91
Means
Report
AST
Kelompok_Perlakuan Mean N Std. Deviation Std. Error of Mean
Kontrol negatif olive oil 2 ml/kgBB jam ke 0 1.2280E2 5 12.73578 5.69561
Kontrol negatif olive oil 2 ml/kgBB jam ke 24 1.1860E2 5 11.50217 5.14393
Total 1.2070E2 10 11.65285 3.68495
NPar Tests
Descriptive Statistics
N Mean Std. Deviation Minimum Maximum
AST 10 1.2070E2 11.65285 105.00 137.00
Kelompok_Perlakuan 10 1.5000 .52705 1.00 2.00
Kruskal-Wallis Test
Ranks
Kelompok_Perlakuan N Mean Rank
AST Kontrol negatif olive oil 2
ml/kgBB jam ke 0 5 5.90
Kontrol negatif olive oil 2
ml/kgBB jam ke 24 5 5.10
Total 10
Test Statisticsa,b
AST
Chi-Square .176
df 1
Asymp. Sig. .675
a. Kruskal Wallis Test
b. Grouping Variable:
Kelompok_Perlakuan
NPar Tests
Descriptive Statistics
N Mean Std. Deviation Minimum Maximum
AST 10 1.2070E2 11.65285 105.00 137.00
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
92
Descriptive Statistics
N Mean Std. Deviation Minimum Maximum
AST 10 1.2070E2 11.65285 105.00 137.00
Kelompok_Perlakuan 10 1.5000 .52705 1.00 2.00
Mann-Whitney Test
Ranks
Kelompok_Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
AST Kontrol negatif olive oil 2
ml/kgBB jam ke 0 5 5.90 29.50
Kontrol negatif olive oil 2
ml/kgBB jam ke 24 5 5.10 25.50
Total 10
Test Statisticsb
AST
Mann-Whitney U 10.500
Wilcoxon W 25.500
Z -.419
Asymp. Sig. (2-tailed) .675
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .690a
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable: Kelompok_Perlakuan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
93
Lampiran 11. Perhitungan efek hepatoprotektif
Rumus perhitungan efek hepatoprotektif :
x 100 %
Maka perhitungan efek hepatoprotektif ALT serum sebagai berikut :
Kelompok perlakuan M. tanarius dosis 0,426 g/kg BB (po) + induksi karbon
tetraklorida :
29,5%
Kelompok perlakuan M. tanarius dosis 1,280 g/kg BB (po) + induksi karbon
tetraklorida :
43,6%
Kelompok perlakuan M. tanarius dosis 3,840 g/kg BB (po) + induksi karbon
tetraklorida :
62,4%
Lampiran 12. Perhitungan penetapan peringkat dosis ekstrak metanol-air
daun M. tanarius kelompok perlakuan
Dasar penetapan peringkat dosis:
Bobot tertinggi tikus = 250 g
Konsentrasi ekstrak metanol daun Macaranga tanarius yang dapat disedot
dan dikeluarkan lewat spuit peroral = 38,4 % atau 384 mg/ml
Pemberian cairan secara per oral maksimal 5 ml, digunakan separuhnya saja
menjadi 2,5 ml
Dengan dasar tersebut maka ditetapkan dosis tertinggi
V x C = BB x D
Volume Pemberian x Konsentrasi = Berat badan x Dosis
2,5 ml x 384 mg/ml = 250 g BB x Dosis
Dosis = 3,84 mg/gBB
= 3840 mg/kgBB (dosis tertinggi)
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
94
Untuk dua peringkat dosis di bawahnya, dosis tertinggi ini dibagi 3 kemudian
dibagi 3 lagi sehingga diperoleh 3 peringkat dosis : 3840 mg/kgBB; 1280
mg/kgBB; 426 mg/kgBB atau 3,840 g/kgBB; 1,280 g/kgBB; 0,426 g/kgBB.
Perhitungan konversi dosis dari tikus ke manusia :
Faktor konversi dari tikus 200 gram ke manusia 70 kg = 56,00
Rata-rata berat badan manusia Indonesia = 50 kg
Dosis untuk tikus = 3840 mg/kgBB= 3,84 g/kgBB
= 0,00384 g/gBB tikus
= 0,768 g / 200 gBB tikus
Dosis untuk manusia = 56,0 x 0,768 g = 43,008 g / 70 kgBB manusia
= 30,72 g/ 50 kgBB manusia
Lampiran 13. Perhitungan konversi dosis untuk manusia
Angka konversi Tikus 200 g ke Manusia 70 kg = 56,0
Dosis untuk manusia = Dosis untuk tikus 200 g x (angka konversi ke
manusia)
Maka ditetapkan dosis ekstrak metanol-air daun M. tanarius :
Ekstrak metanol-air daun M. tanarius dosis 0,426 g/kgBB tikus:
0,426 g/kgBB = 0,426 g/1000 gBB = 0,0852 g/200 gBB
0,0852 g/200 gBB x 56,0 = 4,77 g/70 kgBB manusia
Ekstrak metanol-air daun M. tanarius dosis 1,280 g/kgBB tikus:
1,280 g/kgBB = 1,280 g/1000 gBB = 0,256 g/200 gBB
0,256 g/200 gBB x 56,0 = 14,33 g/70 kgBB manusia
Ekstrak metanol-air daun M. tanarius dosis 3,840 g/kgBB tikus:
3,840 g/kgBB = 3,840 g/1000 gBB = 0,768 g/200 gBB
0,768 g/200 gBB x 56,0 = 43,01 g/70 kgBB manusia
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
95
Lampiran 14. Perhitungan efektif dosis tengah (ED50) hepatoprotektif
ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius (L.) pada tikus jantan
terinduksi karbon tetraklorida
Tabel XV. Dosis, log dosis, % efek hepatoprotektif dan ED50 pada masing-
masing kelompok perlakuan
Kelompok Perlakuan Dosis
(mg/kgBB)
Log
dosis
Efek hepatoprotektif
(%)
ED50
(g/kgBB)
EDM 0,426 g/kgBB
+ CCl4 2 ml/kgBB 426 2,629 29,5
1,766 EDM 1,280 g/kgBB
+ CCl4 2 ml/kgBB 1280 3,107 43,6
EDM 3,840 g/kgBB
+ CCl4 2 ml/kgBB 3840 3,584 62,4
Linear Regression log dosis vs efek hepatoprotektif :
A = -61,853
B = 34,448
r = 0,996
Persamaan regresi linear :
y = Bx + A
y = 34,448 x – 61,853
Efek hepatoprotektif sebesar 50 % maka :
50 = 34,448 x – 61,853
111,853 = 34,448 x
x = 3,247
Dosis yang menimbulkan 50% efek hepatoprotektif adalah :
ED50 = antilog 3,247
ED50 = 1766,04 mg/kgBB
ED50 = 1,766 g/kgBB
Jadi, efektif dosis tengah (ED50) hepatoptotektif ekdtrak metano-air daun M.
tanarius pada tikus jantan terinduksi karbon tetraklorida 2 ml/kgBB adalah
1,766 g/kgBB.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
96
Perhitungan konversi efektif dosis tengah hepatoprotektif untuk manusia :
Angka konversi Tikus 200 g ke Manusia 70 kg = 56,0
Dosis untuk manusia = Dosis untuk tikus 200 g x (angka konversi ke
manusia)
Maka, 1,766 g/kgBB = 1,766 g/1000g BB= 0,353 g/200 gBB
0,353 g/200 gBB x 56,0 = 19,768 g/70 kgBB manusia
Untuk manusia Indonesia (50 kg), maka 50kg/70kg x 19,768 = 14,12 g
Lampiran 15. Penetapan kadar air serbuk daun M. tanarius
Penetapan kadar air dilakukan menggunakan alat moisture balance dengan
metode Gravimetri. Pemanasan serbuk daun M. tanarius dilakukan pada suhu 110
0C selama 15 menit.
Tabel XVI. Hasil penetapan kadar air serbuk daun M. tanarius
Bobot Replikasi I Replikasi II Replikasi III
Sebelum pemanasan 5,008 g 5,002 g 5,001 g
Sesudah pemanasan 4,628 g 4,615 g 4,629 g
Kadar air 7,59 % 7,74 % 7,44 %
Rata-rata kadar air 7,59 %
Kadar air =
Replikasi I :
= 7,59%
Replikasi II :
= 7,74%
Replikasi III :
= 7,44%
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
97
Kadar air serbuk yang dipersyaratkan adalah kurang dari 10%. Kadar air serbuk
daun M. tanarius sebesar 7,59% sehingga memenuhi persyaratan.
Lampiran 16. Hasil rendemen ekstrak metanol-air daun M. tanarius
Tabel XVII. Hasil rendemen ekstrak metanol-air daun M. tanarius
Keterangan
(gram)
Cawan
1
Cawan
2
Cawan
3
Cawan
4
Cawan
5
Cawan
6
Cawan
kosong 60,42 58,85 59,10 53,08 58,86 59,11
Cawan +
ekstrak 64,16 62,69 62,90 56,84 62,56 62,90
Rendemen 3,74 3,84 3,80 3,76 3,70 3,79
= 3,77 g
% rendemen ekstrak kental = x 100%= 23,75%
Hasil menunjukkan bahwa sebanyak 1 kg serbuk kering daun M. tanarius
menghasilkan 63 cawan ekstrak kental. Rata-rata rendemen setiap cawan 3,77
gram ekstrak kental. Pada pembuatan 1 kg serbuk kering daun M. tanarius
menghasilkan 237,51 g ekstrak kental, dengan rendemen 23,75%.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
98
Lampiran 17. Bobot pengeringan ekstrak metanol-air daun M. tanarius
Tabel XVIII. Bobot pengeringan ekstrak metanol-air daun M. tanarius
Cawan
Berat
cawan
kosong
(gram)
Jam ke 0
10.00
5
15.00
10
20.00
21
07.00
22
08.00
23
09.00
24
10.00
1 60,42 Berat
ekstrak
(gram)
129,17 110,30 99,57 64,54 64,26 64,16 64,16
2 53,08 129,04 111,06 99,88 57,34 56,96 56,84 56,84
3 59,11 136,38 118,87 101,31 63,50 63,12 62,90 62,90
Lampiran 18. Hasil pengukuran validitas dan reabilitas
Tabel XIX. Hasil validitas dan reabilitas
Dilihat dari serum kontrol (range 33,9-48,9 U/l)
x (U/l) x-
42
41,2
0,8 0,64
40 -1,2 1,44
41 -0,2 0,04
42 0,8 0,64
41 -0,2 0,04
∑ = 2,8
Range = ± SD
= 41,2 ± 0,8
= 40,4 – 42
CV = (SD/ ) x 100%
= (0,8/41,2) x 100%
= 1,94%
Syarat CV yang baik ≤ 2%.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
99
BIOGRAFI PENULIS
Penulis skripsi dengan judul “Efek
Hepatoprotektif Ekstrak Metanol:Air (50:50) Daun
Macaranga tanarius L. Terhadap Kadar ALT-AST
Serum Pada Tikus Terinduksi Karbon Tetraklorida”
memiliki nama lengkap Theresia Garri Windrawati.
Penulis lahir di Bantul pada tanggal 15 Oktober 1990,
merupakan putri kedua dari dua bersaudara dalam
keluarga pasangan Gregorius Riswinarto dan Monica Muryanti. Penulis
mengawali masa pendidikannya di TK Pertiwi X Imogiri Bantul (1996-1997)
kemudian melanjukan pendidikan tingkat Sekolah Dasar di SD Negeri Pundung I
Imogiri Bantul (1997-2003). Pendidikan Sekolah Menengah Pertama ditempuh
oleh penulis di SMP Negeri I Imogiri Bantul (2003-2006), kemudian melanjutkan
pendidikan Sekolah Menengah Atas di SMA Negeri II Bantul (2006-2009).
Penulis kemudian melanjutkan pendidikan sarjana di Fakultas Farmasi Universitas
Sanata Dharma Yogyakarta pada tahun 2009. Semasa menempuh kuliah, penulis
aktif dalam berbagai kepanitiaan. Penulis pernah menjadi volunteer PIO
ISMAFARSI (2009), anggota divisi Dana Usaha Donor Darah (2009), anggota
divisi Acara Hari AIDS (2009), anggota divisi Kesekretariatan TITRASI (2010),
anggota divisi Humas Pharmacy Competition (2011), anggota divisi Acara
Pelepasan Wisuda Fakultas Farmasi (2011), koordinator Acara TITRASI (2011),
panitia seminar IAI (2012). Penulis pernah menjadi asisten praktikum Botani
Farmasi (2010 dan 2011), Kimia Analisis (2011), dan Toksikologi Dasar (2012).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI