ii
PENGGUNAAN EKSTRAK DAUN DAN BATANG TUMBUHAN
MANGROVE Rhizophora stylos DALAM MENGHAMBAT
PERTUMBUHAN BAKTERI Aeromonas hydrophila SECARA IN-
VITRO
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi sebagian syarat
Mencapai Derajat Sarjana S-1
Disusun oleh :
YUNITASARI
1201070053
PROGRAM STUDI PENDIDIKAN BIOLOGI
FAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKAN
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO
2017
PENGGUNAAN EKSTRAK DAUN, YUNITASARI, PEND. BIOLOGI, UMP2017.
iii
PENGGUNAAN EKSTRAK DAUN, YUNITASARI, PEND. BIOLOGI, UMP2017.
iv
PENGGUNAAN EKSTRAK DAUN, YUNITASARI, PEND. BIOLOGI, UMP2017.
v
PENGGUNAAN EKSTRAK DAUN, YUNITASARI, PEND. BIOLOGI, UMP2017.
vi
PERSEMBAHAN
Puji syukur penulis panjatkan ke hadirat Allah SWT yang telah memberikan
kenikmatan yang sungguh luar biasa dengan selesainya penulisan skripsi ini. Skripsi
ini penulis persembahkan untuk:
1. Kedua orang tua mama dan abah yang selalu memberikan do’a dan kasih
sayangnya.
2. Adik-adikku Anah dan Tito yang membuat penulis lebih semangat untuk
menyelesaikan skripsi ini.
PENGGUNAAN EKSTRAK DAUN, YUNITASARI, PEND. BIOLOGI, UMP2017.
vii
MOTTO
Barang siapa mempermudah kesulitan orang lain, maka Allah akan
mempermudah urusannya di dunia dan akhirat
(H.R. Muslim)
“Aku memang tidak bisa kembali ke masa lalu dan mengubah semua awal yang
buruk, namun aku bisa membuat akhir yang indah, mulai saat ini”
PENGGUNAAN EKSTRAK DAUN, YUNITASARI, PEND. BIOLOGI, UMP2017.
viii
PENGGUNAAN EKSTRAK DAUN DAN BATANG TUMBUHAN
MANGROVE Rhizophora stylosa DALAM MENGHAMBAT
PERTUMBUHAN BAKTERI Aeromonas hydrophila
SECARA IN-VITRO
ABSTRAK
Penelitian yang berjudul penggunaan ekstrak daun dan batang tumbuhan
mangrove Rhizophora stylosa dalam menghambat pertumbuhan bakteri Aeromonas
hydrophila secara in-vitro telah dilaksanakan pada bulan Februari-September 2016 di
Labolatorium Mikrobiologi dan Labolatorium Biologi Farmasi Universitas
Muhammadiyah Purwokerto. Tujuan dari penelitian ini yaitu untuk mengetahui
penggunaan ekstrak daun dan batang tumbuhan mangrove R. stylosa dalam
menghambat pertumbuhan bakteri A. hydrophila. Ekstraksi dilakukan dengan
mengambil daun dan batang mangrove R. stylosa menggunakan pelarut non polar (n-
heksana) dan pelarut polar (metanol). Rancangan penelitian yang digunakan
menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan 3 faktor yaitu : bagian organ
tumbuhan (daun dan batang), strain bakteri A. hydrophila (GPl-04, GL-01, GJ-01,
GK-01, GL-02, GB-01) dan konsentrasi ekstrak (0%, 10%, 20%, dan 30%). Metode
yang digunakan adalah eksperimen dengan 48 kali perlakuan dan 3 kali ulangan.
Parameter yang diamati adalah diameter zona hambatan. Analisis data menggunakan
analisis Nonparametrik (Kruskal-Wallis) dengan taraf kepercayaan 95%. Hasil
penelitian menunjukkan bahwa ekstrak metanol daun R. stylosa yang paling efektif
digunakan yaitu pada konsentrasi 30% dengan diameter zona hambat yang paling
tinggi yaitu dengan rata-rata 1.73 mm pada strain GJ-01, sedangkan pada ekstrak
metanol batang R. stylosa yang paling efektif digunakan pada konsentrasi 30%
menghasilkan diameter zona hambat yang paling tinggi dengan rata-rata 1.6 mm pada
strain GL-01. Hasil ekstrak n-heksan daun R. stylosa yang paling efektif digunakan
yaitu pada konsentrasi 20% dengan diameter zona hambat yang tertinggi dengan rata-
rata 1.16 mm pada strain GJ-01, sedangkan pada ekstrak n-heksan batang R. stylosa
yang paling efektif yaitu pada konsentrasi 10% dengan diameter zona hambat yang
paling tinggi dengan rata-rata 1.08 mm pada strain GK-01.
Kata kunci : Bakteri Aeromonas hydrophila, mangrove, Rhizophora stylosa, zona
hambat.
PENGGUNAAN EKSTRAK DAUN, YUNITASARI, PEND. BIOLOGI, UMP2017.
ix
UCAPAN TERIMA KASIH
Assalamu’alaikum Wr.Wb.
Alhamdulilah, segala puji dan syukur kehadirat Allah SWT yang telah
menunjukan kuasanya dengan memberikan rahmat dan karuniaNya kepada pelulis,
sehingga penulis dapat menyusun skripsi yang berjudul “PENGGUNAAN
EKSTRAK DAUN DAN BATANG TUMBUHAN MANGROVE Rhizophora
stylosa DALAM MENGHAMBAT PERTUMBUHAN BAKTERI Aeromonas
hydrophila SECARA IN-VITRO “ sebagai syarat untuk memperoleh gelar
kesarjanaan S1. Terimakasih dengan setulus-tulusnya penulis sampaikan kepada ibu
Dini Siswani Mulia, S.,Pi. M.Si selaku pembimbing I dan Drs. Heri Maryanto, M.Si
selaku pembimbing II yang telah memberikan arahan dan bimbingannya dalam
penyusunan skripsi ini.
Penyusunan skripsi ini terwujud atas dukungan dan bantuan dari berbagai
pihak. Oleh karena itu, pada kesempatan kali ini penulis mengucapkan terima kasih
kepada:
1. Bapak Drs. Pudiyono, M.Hum, selaku dekan Fakultas Keguruan dan Ilmu
Pendidikan Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
2. Bapak Drs. Arief Husin, M.Si, selaku Kepala Program Studi Pendidikan Biologi.
3. Dewan penguji skripsi Program Studi Pendidikan Biologi Fakultas Keguruan dan
Ilmu Pendidikan Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
PENGGUNAAN EKSTRAK DAUN, YUNITASARI, PEND. BIOLOGI, UMP2017.
x
4. Seluruh dosen Program Studi Pendidikan Biologi Fakultas Keguruan dan Ilmu
Pendidikan Universitas Muhammadiyah Purwokerto yang telah membimbing
dan memberikan ilmunya kepada penulis selama perkuliahan.
5. Kepada kedua Orang tua Mama Sri harti dan Abah Danusi yang selalu
memberikan kasih sayang dan Do’a yang tak pernah putus.
6. Adik-adik ku Nurjanah dan Tito yang selalu memberikan motivasi.
7. Kepada Irfan Rifa’i seseorang yang istimewa yang selalu menyemangati dan
menjadikan saya lebih baik lagi.
8. Sahabat-sahabat Kos (Indah, Tata, Isma dan Lina) yang selama ini
menyemangati dalam penulisan skripsi ini.
9. Seluruh teman-teman Pendidikan Biologi Universitas Muhammadiyah
Purwokerto angkatan 2012 yang selalu memotivasi dan memberikan masukan
dalam perbaikan penulisan sekripsi.
Penulis menyadari bahwa dalam penyusunan skripsi ini masih terdapat
banyak kekurangan bahkan jauh dari sempurna. Demikian, semoga dengan
terselesaikannya skripsi ini berguna bagi para pembaca pada umumnya dan
khususnya bagi penulis serta Program Studi Pendidikan Biologi.
Wassalamu’alaikum wr.wb.
Purwokerto, 13 Januari 2017
Penulis,
PENGGUNAAN EKSTRAK DAUN, YUNITASARI, PEND. BIOLOGI, UMP2017.
xi
DAFTAR ISI
Halaman
UCAPAN TERIMA KASIH ........................................................................................ ix
DAFTAR ISI ................................................................................................................ xi
DAFTAR TABEL ...................................................................................................... xiv
DAFTAR GAMBAR .................................................................................................. xv
DAFTAR LAMPIRAN .............................................................................................. xvi
BAB I PENDAHULUAN ............................................................................................. 1
1.1 Latar Belakang ............................................................................................... 1
1.2 Rumusan Masalah .......................................................................................... 4
1.3 Tujuan penelitian ............................................................................................ 4
1.4 Manfaat Penelitian .......................................................................................... 5
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ................................................................................... 6
2.1 Tumbuhan mangrove Rhizophora stylosa ...................................................... 6
2.1.1 Klasifikasi Rhizophora stylosa ................................................................ 6
2.1.2 Deskripsi Rhizophora stylosa .................................................................. 6
2.1.3 Kandungan fitokimia R. stylosa .............................................................. 8
2.2 Bakteri Aeromonas hydrophila ...................................................................... 9
2.2.1 Klasifikasi Aeromonas hydrophila .......................................................... 9
2.2.2 Deskripsi bakteri A. hydrophila .............................................................. 9
2.2.3 Strain bakteri A. hydrophila .................................................................. 10
BAB III METODE PENELITIAN.............................................................................. 12
3.1 Waktu dan tempat penelitian ........................................................................ 12
3.2 Alat yang digunakan dalam penelitian ......................................................... 12
3.2.1 Alat pengumpulan dan pembuatan simplisia daun dan batang tumbuhan
mangrove R. stylosa .............................................................................. 12
3.2.2 Alat pembuatan ekstrak tumbuhan mangrove R. stylosa ...................... 12
PENGGUNAAN EKSTRAK DAUN, YUNITASARI, PEND. BIOLOGI, UMP2017.
xii
3.2.3 Alat uji antibakteri................................................................................. 12
3.2.4 Alat uji fitokimia ekstrak daun dan batang tumbuhan mangrove R.
stylosa menggunakan uji warna pada plat KLT .................................... 13
3.3 Bahan yang digunakan dalam penelitian ...................................................... 13
3.3.1 Bakteri Aeromonas hydrophila ............................................................. 13
3.3.2 Daun dan batang tumbuhan mangrove R. stylosa ................................. 13
3.3.3 Media yang digunakan .......................................................................... 13
3.3.4 Bahan untuk uji fitokimia ekstrak daun dan batang tumbuhan mangrove
R. stylosa menggunakan uji warna pada plat KLT ............................... 13
3.3.5 Pelarut yang digunakan dalam pembuatan ekstrak dan pembuatan
konsentrasi ekstrak tumbuhan mangrove R. Stylosa ............................. 14
3.4 Rancangan penelitian ................................................................................... 14
3.5 Cara kerja ..................................................................................................... 14
3.5.1 Pengumpulan dan pembuatan simplisia daun dan batang tumbuhan
mangrove R. stylosa .............................................................................. 14
3.5.2 Pembuatan ekstrak daun dan batang tumbuhan mangrove R. stylosa
...............................................................................................................15
3.5.3 Uji fitokimia menggunakan uji warna pada plat KLT terhadap ekstrak
tumbuhan mangrove R. stylosa ............................................................ 15
3.5.4 Sterilisasi peralatan dan medium tumbuh ............................................. 17
3.5.5 Pembuatan media tumbuh bakteri A. hydrophila .................................. 17
3.5.6 Purifikasi isolat bakteri A. hydrophila .................................................. 18
3.5.7 Penentuan jumlah bakteri uji A. hydrophila menggunakan metode total
plate count (TPC) .................................................................................. 19
3.5.8 Pembuatan konsentrasi ekstrak daun dan batang tumbuhan mangrove R.
stylosa .................................................................................................... 19
3.5.9 Uji daya hambat ekstrak daun dan batang tumbuhan mangrove R.
stylosa terhadap bakteri A. hydrophila strain GPl-04, GB-01, GL-01,
GL-02, GJ-01, dan GK-01 .................................................................... 20
3.5.10 Parameter yang diamati ......................................................................... 23
3.5.11 Analisis Data ......................................................................................... 24
PENGGUNAAN EKSTRAK DAUN, YUNITASARI, PEND. BIOLOGI, UMP2017.
xiii
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN .................................................................... 25
4.1 Ekstraksi tumbuhan mangrove Rhizophora stylosa ..................................... 25
4.1.1 Ekstraksi n-heksan daun dan batang tumbuhan mangrove R. stylosa
...............................................................................................................27
4.1.2 Ekstraksi metanol daun dan batang tumbuhan mangrove R. stylosa
...............................................................................................................29
4.2 Uji fitokimia menggunakan uji warna pada plat KLT.................................. 31
4.2.1 Uji fitokimia kandungan ekstrak metanol daun dan batang tumbuhan
mangrove R. stylosa .............................................................................. 32
4.2.2 Uji fitokimia kandungan ekstrak n-heksan daun dan batang tumbuhan
mangrove R. stylosa .............................................................................. 35
4.3 Purifikasi bakteri A. hydrophila strain GB-01, GJ-01, GK-01, GL-01, GL-02,
dan GPl-04 ...................................................................................................... 38
4.4 Perhitungan jumlah koloni bakteri A. hydrophila strain GB-01, GJ-01, GK-01,
GL-01, GL-02, dan GPl-04 ............................................................................. 38
4.5 Uji daya hambat ekstrak R. stylosa terhadap pertumbuhan bakteri A.
hydrophila strain GB-01, GJ-01, GK-01, GL-01, GL-02, dan GPl-04 ........... 40
4.5.1 Uji daya hambat ekstrak metanol daun dan batang R. stylosa .............. 40
4.5.2 Uji daya hambat ekstrak n-heksan daun dan batang R. stylosa............. 45
BAB V SIMPULAN DAN SARAN .......................................................................... 49
5.1 Simpulan ....................................................................................................... 49
5.2 Saran ............................................................................................................. 50
DAFTAR PUSTAKA ................................................................................................. 51
LAMPIRAN ................................................................................................................ 56
PENGGUNAAN EKSTRAK DAUN, YUNITASARI, PEND. BIOLOGI, UMP2017.
xiv
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 4. 1 Bahan pembuatan ekstrak mangrove Rhizophora stylosa .......................... 25
Tabel 4. 2 Bahan pembuatan ekstrak metanol daun dan batang R. stylosa ................. 29
Tabel 4. 3 Hasil uji KLT ekstrak daun dan batang metanol R. stylosa ....................... 32
Tabel 4. 4 Hasil uji KLT ekstrak batang dan daun n- heksan R. stylosa .................... 36
Tabel 4. 5 Hasil perhitungan jumlah koloni bakteri A. hydrophila strain GB-01, GJ-
01, GK-01, GL-01, GL-02, dan GPl-04 ................................................. 39
Tabel 4. 6 Hasil uji daya hambat ekstrak metanol daun dan batang R. stylosa .......... 41
Tabel 4. 7 Hasil uji daya hambat ekstrak n-heksan daun dan batang R. stylosa ......... 46
PENGGUNAAN EKSTRAK DAUN, YUNITASARI, PEND. BIOLOGI, UMP2017.
xv
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 2. 1 Tumbuhan mangrove Rhizophora stylosa ................................................ 8
Gambar 4. 1 Bahan pembuatan ekstrak dan hasilnya ................................................. 26
Gambar 4. 2 Hasil ekstrak n-heksan daun dan batang R. stylosa ................................ 29
Gambar 4. 3 Hasil ekstrak metanol daun dan batang R. stylosa ................................. 31
Gambar 4. 4 Hasil uji fitokimia plat KLT ekstrak metanol batang dan daun R.
stylosa.....................................................................................................35
Gambar 4. 5 Hasil uji KLT ekstrak n-heksan batang dan daun R. stylosa..................37
Gambar 4. 6 Hasil purifikasi isolat bakteri A. hydrophila. ......................................... 38
PENGGUNAAN EKSTRAK DAUN, YUNITASARI, PEND. BIOLOGI, UMP2017.
xvi
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1 Hasil perhitungan randemen ekstrak daun dan batang tumbuhan
mangroveR.stylosa...............................................................................57
Lampiran 2 Hasil Penghitungan koloni bakteri Aeromonas hydrophila TPC........59
Lampiran 3 Gambar Koloni Bakteri Aeromonas hydrophila Strain GL-01, GJ-01,
GK-01, GB-01, GL-02, dan GPl-04 ..................................................61
Lampiran 4 Data hasil zona hambat metanol dan n-heksan ................................. 63
Lampiran 5 Hasil Analisis SPSS Non-Parametrik Ekstrak Tumbuhan Mangrove
Rizhophora stylosa terhadap bakteri Aeromonas hydrophila strain GB-
01, GK-01, GJ-01, GL-01, GL-02, dan GPl-04Hasil foto zona hambat
metanol................................................................................................71
Lampiran 6 Hasil zona hambat ekstrak metanol daun dan batang tumbuhan
mangrove R. stylosa.............................................................................86
Lampiran 7 Hasil zona hambat ekstrak n-heksan daun dan batang tumbuhan
mangrove R. Stylosa............................................................................92
Lampiran 8 Dokumentasi penelitian.......................................................................98
PENGGUNAAN EKSTRAK DAUN, YUNITASARI, PEND. BIOLOGI, UMP2017.