Daya Antibakteri Ekstrak Tumbuhan Majapahit (Crescentia cujete L.)Terhadap

Bakteri Aeromonas hydrophila

Noorkomala Sari1506 100 018

Dosen pembimbing :

N.D Kuswytasari, S.Si, M.Si

Awik Puji Dyah N., S.Si, M.Si

Penyakit ikanMAS (Motile Aeromonas Septicemia)

Agen Patogen Bakteri

Aeromonas hydrophila

antibiotik

Resistensi dan Pencemaran Lingkungan

Pengobatan alami dengan terapi herbal

Majapahit(Crescentia cujete)

Senyawa metabolit sekunder yang

berpotensi sebagai antibakteri

Uji daya antibakteri

Akibat serangan

Pengobatan umum

berdampak

Alternatif

Kandidatkandungan

LATAR BELAKANG

Batasan Masalah

Permasalahan

a. Penentuan nilai zona bening, Konsentrasi Hambat Minimum (KHM), Konsentrasi Bunuh Minimum (KBM) ekstrak tumbuhan Majapahit (Crescentia cujete L.) terhadap bakteri uji Aeromonas hydropila.

b. Proses ekstraksi menggunakan pelarut etanol 96 % secara maserasi dan dibuat ekstrak basah dan kering meliputi daun, buah dan kulit batang.

Bagaimana daya antibakteri ekstrak tumbuhan Crescentia cujetedalam mempengaruhi pertumbuhan bakteri uji Aeromonas hydropilaberdasarkan konsentrasi hambat dan bunuh terhadap pertumbuhan bakteri tersebut

Bahan informasi penggunaan tumbuhan Majapahit

(Crescentia cujete L.) sebagai sumber daya lokal menjadi

obat herbal yang mempunyai nilai ekonomis dalam

mengobati penyakit MAS yang disebabkan oleh

Aeromonas hydrophila guna meningkatkan produksi

sektor perikanan air tawar di Indonesia

Mengetahui daya antibakteri ekstrak tumbuhan Majapahit

(Crescentia cujete) yaitu daun, buah dan batang terhadap

bakteri uji Aeromonas hydrophila secara in vitro.

TUJUAN DAN MANFAAT

PENULISAN

tujuanMETODOLOGI PENELITIAN

Sampel daun, buah dan kulit batang Majapahit (C. cujete) didapatkan di sekitar lingkungan Institut Teknologi Sepuluh Nopember (ITS) Surabaya.

Proses ekstraksi dilakukan di Laboratorium Tropical Disease Center (TDC) Kampus C Universitas Airlangga, sedangkan uji antibakteri terhadap A. hydrophila dilakukan di Laboratorium Mikrobiologi Program Studi Biologi ITSSurabaya

Penelitian telah dilaksanakan pada bulan Maret-Juni 2010

TAHAPAN PENELITIAN

Penyiapan bahan segar dan kering

Ekstraksi senyawa polar

Penyiapan kultur bakteri A. hydrophila

Metode Difusi Agar dan Broth Dilusi

Pengamatan

Hasil

500 gr daun, buah dan kulit batang tumbuhan Majapahit

Dibersihkan dan dicuci dengan aquades steril

Dikeringkan beberapa menitpada suhu kamar

Dikeringkan beberapa hari pada suhu kamar

Bahan segar Bahan kering

Dipotong-potong kecil

Penyiapan bahan segar dan kering

Bahan segar atau Bahan

kering

Dihaluskan dalam

blenderdisaring

Dishaker dalam larutan

etanol 96%

Filtrat

disentrifug

asi

supernatanDikeringkan dalam

frezee dryerSerbuk kering

0% 10% 20% 30% 40% 50% 60% 90% 100% tetrasiklin80%70%

Ekstraksi

1 % BaCl2

1% H2SO4

0.5 ml 9.5 ml

Lar. fisiolo

gis

Ditambah kultur A.hydrophila sedikit demi sedikit hingga

kekeruhannya sama (1,5.108

CFU/ml)

diukur dengan spektrofotometer dengan

panjang gelombang 600 nm

diencerkan 10-3 untuk mendapatkan jumlah

bakteri 1,5x105 CFU/ml

Pembuatan Larutan 0.5 Mc Farland

Kertas cakram

d=10mm

Direndam

0%100%

ekstrak majapahit

tetrasiklin

Konsentrasi

Cawan petri berisi agar Mueller-Hinton dan bakteri A.hydrophila

Diletakkan di atas permukaan agar

Diinkubasi pada suhu kamar selama 24 jam

Pengamatan

Metode Difusi Agar

TSB 4,5 ml

0% 10% 20% 30% 40% 50% 60% 90% 100% tetrasiklin

80%70%

Kultur A. hydrophila0.25 ml

Konsentrasi antibakteri 0,5

ml

dimasukkan

Divortex hingga homogen

Diinkubasi pada suhu kamar selama 24 jam

Pengamatan

Metode Dilusi (Penentuan KHM)

Tabung yang mulai jernih

sampai benar-benar jernih dari metode penentuan

KHM

Diambil masing-masing 0,1 ml

Ditumbuhkan pada medium TSA secara pour plate

Medium TSA

Diinkubasi pada suhu kamar selama 24 jam

Pengamatan

Metode Dilusi (Penentuan KBM)

HASIL PENELITIAN

Tipe ekstrak

Rata-rata

diameter zona

bening (mm)

Respon hambatan

Aquades 0a tidak ada

Buah kering 0a tidak ada

Buah segar 3.22b tidak ada

Kulit batang kering 0a tidak ada

Kulit batang segar 12.81c lemah

Daun kering 0a tidak ada

Daun segar 20.06d kuat

Tetrasiklin 31.11e kuat

Keterangan: Angka-angka pada kolom tipe ekstrak yang didampingi oleh huruf kecil yang sama menunjukkan tidak berbeda nyata pada taraf kepercayaan 95%

Metode Difusi Agar Kirby-Bauer

Tabel 1. Rata-rata diameter zona bening ekstrak Majapahit terhadap A. hydrophila Jam ke-24

Pengaruh ekstrak terbentuknya zona bening

Zona bening adanya aktivitas antibakteri

Aktivitas antibakteri karena adanya kandungan bahan aktif seperti saponin, alkaloid, flavonoid, polifenol, dan tanin (Hutapea, 1993; Poeloengan et al., 2006; Cushine dan Lamb, 2005)

Perbedaan respon hambatan perbedaan konsentrasi senyawa aktif

Tabel 2. Rata-rata diameter zona bening ekstrak Majapahit terhadap A. hydrophila Jam ke-18, 24 dan 48

GO

Diagram batang nilai rata-rata diameter zona hambat (mm) ekstrak tanaman Majapahit terhadap A. Hydrophila pada jam ke-18, 24 dan

48

0

5

10

15

20

25

30

35

BK BS BtK BtS DK DS Tetrasiklin Aquades

Rat

a-ra

ta d

iam

ete

r zo

na

be

nin

g (m

m)

konsentrasi 100% ekstrak Majapahit dan kontrol

Jam ke-18

Jam ke-24

Jam ke-48

• Apabila daerah zona bening tetap bening hingga 48 jam

• Termasuk ekstrak segar daun, kulitbatang, dan buahBakterisid

• zona bening mengalamami kekeruhan atau pertumbuhan koloni baru hingga rentang waktu 48 jam

• Termasuk estrak kering daun dankulit batang

Bakteriostatik

Sifat Antibakteri

MIC dan MBC ekstrak daun segar

Keterangan:

•Jumlah koloni 1,5X 105 CFU/ml

•Tanda (*) pada kolom menunjukkan tidak dilakukan penghitungan

•Warna biru pada baris menunjukkan nilai KHM, sedangkan warna merah menunjukkan

nilai KBM

• 80%

• ditunjukkan dengan tabung yang mulai jernih atau mendekati kejernihan kontrol 80% (lampiran 2)

KHM

• 100%

• perubahan koloni berkurang sebesar 99,9% dari inokulum bakteri semula yaitu 1,5.105 CFU/ml (Gilespie, 1994)

KBM

Pelczar and Chan (2005) semakin besar konsentrasi obat, maka semakin besar pula

kemampuannyamengendalikan bakteri

Mekanisme penghambatan pertumbuhan A. hydrophila oleh ekstrak Majapahit diduga karena kandungan senyawa

antibakteri yaitu alkaloid, saponin, flavonoid, polifenol dan

tanin

GO

Kesimpulan

a. Ekstrak tumbuhan Majapahit (Crescentia cujete L.) memberikan pengaruh terhadap pertumbuhan bakteri Aeromonas hydrophila. Daya antibakteri ekstrak segar menunjukkan hasil yang lebih baik dibandingkan ekstrak kering. Rata-rata diameter zona bening tertinggi metode difusi agar Kirby-Bauer ekstrak daun segar yaitu 20,6 mm (‘kuat’) kulit batang segar sebesar 12,81 mm (‘lemah’), dan ekstrak buah segar sebesar 3,22 mm (‘tidak ada’). Sedangkan diameter zona bening ekstrak daun, buah dan kulit batang kering 0 mm (‘tidak ada’).

b. Nilai KHM (Konsentrasi Hambat Minimum) ekstrak daun segar Majapahit terhadap Aeromonas hydrophila adalah 80% sedangkan nilai KBM (Konsentrasi Bunuh Minimum) adalah 100%.

Saran

Perlu dilakukan uji antibakteri ekstrak daun segar tumbuhan Majapahit (Crescentia cujete L.) terhadap ikan yang terserang Aeromonas hyrophila.