ANALISIS PEMISAHAN ASAM KLOROGENAT, KAFEIN, DAN ASAM ASKORBAT DALAM BIJI DAN KULIT KOPI HIJAU DENGAN HPLC

Disusun Oleh:Herina Anesti10506021Pembimbing : Prof. Dr. BuchariANALISIS PEMISAHAN ASAM KLOROGENAT, KAFEIN, DAN ASAM ASKORBAT DALAM BIJI DAN KULIT KOPI HIJAU DENGAN HPLCKelompok Keahlian Kimia AnalitikProgram Studi KimiaInstitut Teknologi Bandung

Agenda PresentasiPendahuluanTahapan PenelitianHasil dan Pembahasan KesimpulanSeminar Tugas Akhir, 27 Mei 2010Latar Belakang BERDASARKAN PENELITIAN TERBARU, KOPI MENGANDUNG SENYAWA ANTIOKSIDAN YANG BERMANFAAT BAGI KESEHATANMETODE ANALISA PEMISAHAN Spektrofotometri UV/VisKANDUNGAN ASAM KLOROGENATKOPI HIJAU > KOPI SANGRAIHPLCPendahuluanSeminar Tugas Akhir, 27 Mei 2010Kafein memberi dampak negati bagi kesehatanAsam askorbat sebagai antioksidanTujuan Menganalisa pemisahan asam klorogenat, kafein dan asam askorbat di dalam biji dan kulit kopi hijau dan kopi jemur yang berasal dari daerah Pangalengan, Bandung dengan menggunakan HPLC.

PendahuluanSeminar Tugas Akhir, 27 Mei 2010Lingkup Kajian Senyawa yang akan dianalisis yaitu kafein, asam askorbat dan asam klorogenat di dalam kopi Analisa dilakukan dengan menggunakan HPLCEluen yang digunakan adalah metanol :air, metanol : asam sitrat, dan metanol : asetonitrilSampel kopi arabika jenis ateng super. Bagian yang di analisis meliputi :Kulit dan biji kopi hijau meliputi kopi mentah, setengah matang dan matangKopi jemur

PendahuluanSeminar Tugas Akhir, 27 Mei 2010Tahapan PenelitianSeminar Tugas Akhir, 27 Mei 2010Penentuan Panjang Gelombang Maksimum Standar Kafein dan Asam askorbat dengan Spektrofotometri UV/VisEkstraksi kulit dan biji kopi hijau, kopi jemur dengan pelarut metanol selama 6, 9 dan 12 jam dengan SoxhletPemisahan senyawa di dalam ekstrakstan kopi dengan menggunakan HPLC Analisis HasilEluen:Metanol : airMetanol : Asam sitrat Metanol : asetonitrilPanjang Gelombang Maksimum Standar Kafein Seminar Tugas Akhir, 27 Mei 2010Hasil dan Pembahasan Konsentrasi (ppm)Panjang gelombang maks (nm)Absorbansi 22740.112042740.202762740.287582740.3764102720.4815Panjang Gelombang Maksimum Standar Asam AskorbatHasil dan PembahasanSeminar Tugas Akhir, 27 Mei 2010Konsentrasi (ppm)Panjang gelombang maks (nm)Absorbansi 22680.054942680.073662680.117182660.1969102500.2680Konsentrasi (ppm)Panjang gelombang maks (nm)Absorbansi 22680.054942680.073662680.117182660.1969102500.2680Panjang Gelombang Maksimum Campuran StandarKonsentrasi asam askorbat (ppm)Absorbansi kafein 272 nmAbsorbansi asam askorbatPanjang Gelombang (nm)0.20.09590.26982040.40.09890.23232060.60.09890.24452060.80.09990.244620410.10.25206Hasil dan PembahasanPenambahan standar kafein 2 ppmPenambahan kafein 4, 6, 8 dan 10 ppm memberikan hasil panjang gelombang maksimum kafein 272 nm dan asam askorbat 204 - 208 nmSeminar Tugas Akhir, 27 Mei 2010Konsentrasi kafein (nm)Absorbansi Kafein pada panjang gelombang 272 nmAbsorbansi asam askorbatPanjang gelombang asam askorbat (nm)20.06860.084720840.16020.281120860.23610.494620680.34270.7164208100.40770.8499208Panjang Gelombang Maksimum Campuran StandarHasil dan PembahasanPenambahan standar asam askorbat 0,2 ppmPenambahan asam askorbat 0,4; 0,6; 0,8 dan 1 ppm memberikan hasil panjang gelombang maksimum kafein antara 272 dan 274 nm dan asam askorbat 204 - 208 nmSeminar Tugas Akhir, 27 Mei 2010

Hasil Pengukuran Sampel Hasil dan PembahasanSeminar Tugas Akhir, 27 Mei 2010 Berdasarkan jurnal SimuItaneous determination of total chlorogenicacid, trigonelline and caffeine in green coffee samples by high performance gel filtration chromatography (1994) oleh C. A. B. De Maria, L. C. Trugo,* R. F. A. Moreira , panjang gelombang asam klorogenat 325 nmC. A. B. De Maria, L. C. Trugo,* R. F. A. MoreiraBanyaknya EkstraksiHasil dan PembahasanSeminar Tugas Akhir, 27 Mei 2010Kulit kopi Ekstraksi 6 jamEkstraksi 9 jam 15 kali 21 kaliBiji kopi matang Ekstraksi 6 jamEkstraksi 9 jam 12 kali19 kaliEkstraksi 12 jam 23 kaliKadar air 12, 7438 %Banyaknya EkstraksiHasil dan PembahasanBiji kopi jemurEkstraksi 6 jamEkstraksi 9 jam 12 kali17 kaliEkstraksi 12 jam 24 kaliBiji kopi mentah Ekstraksi 6 jamEkstraksi 9 jam 13 kali17 kaliEkstraksi 12 jam 24 kaliSeminar Tugas Akhir, 27 Mei 2010Kadar air 29,6373%Kadar air 15,7727 %Analisis Pemisahan dengan HPLCHasil dan PembahasanSeminar Tugas Akhir, 27 Mei 2010Eluen Metanol : AirKomposisi eluen Metanol : air (85:15) Metanol : air (60: 40) Metanol : air (70:30)Hasil dan PembahasanSeminar Tugas Akhir, 27 Mei 2010

Hasil dan PembahasanSeminar Tugas Akhir, 27 Mei 2010Pengukuran Standar Kafein 100 ppm Pada Panjang Gelombang 270 nm Menggunakan Eluen 15 air/ 85 MetanolPengukuran Standar Asam Askorbat 100 ppm Pada Panjang Gelombang 260 nm Menggunakan eluen 15 Air/ 85 Metanol

Hasil dan PembahasanSeminar Tugas Akhir, 27 Mei 2010Pengukuran Standar Kafein, Asam Askorbat, dan Trigonelin 100 ppm pada Panjang Gelombang 260 nm Menggunakan eluen 15 Air/ 85 Metanol

Hasil dan PembahasanSeminar Tugas Akhir, 27 Mei 2010Seminar Tugas Akhir, 27 Mei 2010Hasil dan PembahasanStandar Kafein 100 ppm Pada Panjang Gelombang 270 Menggunakan Eluen 60 Air/ 40 Metanol

Kulit Kopi Ateng Super Setengah Matang Ekstraksi 6 jam Dengan Eluen 60 Air/ 40 Metanol Pada Panjang Gelombang 270 nm

Seminar Tugas Akhir, 27 Mei 2010Hasil dan PembahasanHasil dan PembahasanSeminar Tugas Akhir, 27 Mei 2010Standar kafein 100 ppm dengan eluen 30 air-70 metanol pada panjang gelombang 270 nm

Standar asam askorbat 100 ppm dengan eluen 30 air-70 metanol pada panjang gelombang 270 nm

Standar campuran kafein, asam askorbat, trigonelin 100 ppm dgn eluen 30 air - 70 metanol pada panjang gelombang 270 nm

Eluen Metanol : Asam SitratHasil dan PembahasanSeminar Tugas Akhir, 27 Mei 2010

Pengukuran Standar Kafein, Asam Askorbat, dan Trigonelin 100 ppm pada Panjang Gelombang 270 nm Menggunakan Eluen 85 Asam Sitrat 10 mM/ 15 MetanolPengukuran Sampel Kopi Ateng Super dengan Eluen 85 Asam Sitrat - 15 Metanol pada Panjang Gelomabang 325 nm

Hasil dan PembahasanSeminar Tugas Akhir, 27 Mei 2010Kopi Ateng Super Kulit setengah matang Ekstraksi 6 jamEluen Metanol : AsetonitrilHasil dan PembahasanSeminar Tugas Akhir, 27 Mei 2010Metanol : asetonitril (85 : 15)Metanol : asetonitril (80 : 20) Hasil dan PembahasanSeminar Tugas Akhir, 27 Mei 2010Standar Kafein 100 ppm dengan eluen 15 asetonitril 85 metanol pada panjang gelombang 270 nm

Standar asam askorbat 100 ppm dengan eluen 15 asetonitril - 85 metanol pada panjang gelombang 270 nm

Standar Campuran(kafein, asam askorbat dan trigonelin) 100 ppm dengan eluen 15 asetonitril - 85 metanol pada panjang gelombang 270 nm

Hasil dan PembahasanSeminar Tugas Akhir, 27 Mei 2010Standar Campuran (asam askorbat, trigonelin, dan kafein) 100 ppm Pada Panjang Gelombang 260 nm Dengan Eluen 80 Metanol-20 Asetonitril

Hasil dan PembahasanSeminar Tugas Akhir, 27 Mei 2010Sampel Biji Mentah 6 jam

Sampel Ateng Super pengenceran lima kali dengan eluen 20 asetonitril-80 metanol pada panjang gelombang 260 nmSampel Biji Mentah 9 jam

Hasil dan PembahasanSeminar Tugas Akhir, 27 Mei 2010Sampel Biji Matang 6 jam

Sampel Kulit Setengah Matang 6 jam

Sampel Biji Jemur pengenceran lima kali dengan eluen 20 asetonitril-80 metanol pada panjang gelombang 260 nm Hasil dan PembahasanSeminar Tugas Akhir, 27 Mei 2010Biji Jemur 6 jam

Sampel Biji Jemur pengenceran lima kali dengan eluen 20 asetonitril - 80 metanol pada panjang gelombang 260 nm Hasil dan PembahasanSeminar Tugas Akhir, 27 Mei 2010Kurva Kalibrasi Standar30Kadar kafein dengan Eluen Metanol : Air (70 : 30)Hasil dan PembahasanSeminar Tugas Akhir, 27 Mei 2010Sampel Ateng SuperLuas Area Konsentrasi kafein (1)Konsentrasi kafein (2)Massa sampel awal(gr)Massa kafein (mg)% Massa kafein dalam sampelKulit kopi ekstraksi 6 jam17086.158156.97465813.204531.39490.2378Kulit kopi ekstraksi 9 jam18781.158172.640092411.101734.52800.3110Biji kopi matang ekstraksi 6 jam47128.763467.756010.231593.55120.9143Biji kopi matang ekstraksi 9 jam51420.858516.074110.3572103.21480.9966Biji kopi matang ekstraksi 12 jam58294.875593.458010.202118.69161.1634Biji kopi mentah ekstraksi 6 jam37910.668363.98376.053572.79671.2026Biji kopi mentah ekstraksi 9 jam39525.141382.15855.665876.43171.3490Biji kopi mentah ekstraksi 12 jam33701.087316.59454.360163.31891.4522Biji kopi jemur ekstraksi 6 jam6023.31454.730258785.01318.023610.94610.1364Biji kopi jemur ekstraksi 9 jam17820.461137.81908.05927.56380.3420Biji kopi jemur ekstraksi 12 jam52711.673530.60538.0906106.12111.3117Faktor kapasitas (K)Hasil dan PembahasanSeminar Tugas Akhir, 27 Mei 2010Eluen 70Metanol : 30 Air Sampel Ateng Supert0t retensiFaktor kapasitas (K)Kulit kopi ekstraksi 6 jam0.63.5170.829400057Kulit kopi ekstraksi 9 jam0.613.5570.828507169Biji kopi matang ekstraksi 6 jam0.653.6070.819794843Biji kopi matang ekstraksi 9 jam0.643.5570.820073095Biji kopi matang ekstraksi 12 jam0.693.5870.807638695Biji kopi mentah ekstraksi 6 jam0.653.570.817927171Biji kopi mentah ekstraksi 9 jam0.643.580.82122905Biji kopi mentah ekstraksi 12 jam0.623.540.824858757Biji kopi jemur ekstraksi 6 jam0.453.670.877384196Biji kopi jemur ekstraksi 9 jam0.463.6370.873522134Biji kopi jemur ekstraksi 12 jam0.633.470.818443804Faktor kapasitas (K)Eluen 80 Metanol : 20 asetonitril Sampel Ateng Supert0t retensiFaktor kapasitas (K)Kulit kopi ekstraksi 6 jam0.122.0270.940799211Kulit kopi ekstraksi 9 jam0.122.0230.940682155Biji kopi matang ekstraksi 6 jam0.132.020.935643564Biji kopi matang ekstraksi 9 jam0.122.0270.940799211Biji kopi matang ekstraksi 12 jam0.132.0230.935739001Biji kopi mentah ekstraksi 6 jam0.182.7870.935414424Biji kopi mentah ekstraksi 9 jam0.122.0130.940387481Biji kopi mentah ekstraksi 12 jam0.112.0230.945625309Biji kopi jemur ekstraksi 6 jam0.112.010.945273632Biji kopi jemur ekstraksi 9 jam0.122.0230.940682155Biji kopi jemur ekstraksi 12 jam0.111.9930.944806824Hasil dan PembahasanSeminar Tugas Akhir, 27 Mei 2010Kesimpulan Panjang gelombang maksimum yang diperoleh untuk asam klorogenat, asam askorbat dan kafein dengan spektrofotometri UV/Vis adalah 325 nm, 268 nm, dan 272 nm. Pemisahan yang paling baik untuk kafein adalah dengan eluen methanol : asetonitril (80 : 20). Waktu retensi kafein dengan eluen tersebut adalah 2.8 menit. Asam askorbat dan asam klorogenat tidak ditemukan pemisahan yang baik pada kedua variasi eluen tersebut.

Seminar Tugas Akhir, 27 Mei 2010Daftar PustakaFujioka.K, T. Shibamoto. Chlorogenic Acid and Caffine Contents in Various Commercial Brewed Coffees. Food Chemistry. ScienceDirect. 2008 Harvey, david. 2000. Modern Analytical Chemistry. 1 st ed. Singapore. Page 212Duarte, Giselle S, Antonio A. Pereire, Adriana Farah. Chlorogenic Acids and Other Relevnt Compounds in Brazilizn Coffees Processed by Semi-Dry and Wet Post-Harvestung Methods. Food Chemistry. ScienceDirect.2009.H.-D. Belitz W. Grosch P. Schieberle. Coffee, Tea, Cocoa. Food Chemistry. Springer 2009Maria, De. L. C. Trugo,* R. F. A. Moreira. SimuItaneous determination of total chlorogenic acid, trigonelline and caffeine in green coffee samples by high performance gel filtration chromatography. Analytical Nutritional md Comical Methoda Sectton. Food Chemlet5ry2 (1995) 447 449

Seminar Tugas Akhir, 27 Mei 2010Terima KasihSeminar Tugas Akhir, 27 Mei 2010