analisis kandungan senyawa kasumba turate...

71
iii ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA FLAVONOID TOTAL DALAM SEDIAAN CAIR KASUMBA TURATE (Carthamus tinctorius Linn.) SECARA SPEKTROFOTOMETRI UV-VIS FITRIADI SUTIR N111 08 256 PROGRAM STUDI FARMASI FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS HASANUDDIN MAKASSAR 2012

Upload: others

Post on 03-Aug-2021

12 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

Page 1: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

iii

ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA FLAVONOID TOTAL DALAM SEDIAAN CAIR

KASUMBA TURATE (Carthamus tinctorius Linn.)

SECARA SPEKTROFOTOMETRI UV-VIS

FITRIADI SUTIR N111 08 256

PROGRAM STUDI FARMASI FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS HASANUDDIN MAKASSAR

2012

Page 2: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA FLAVONOID TOTAL DALAM SEDIAAN CAIR KASUMBA TURATE (

SECARA SPEKTROFOTOMETRI

untuk melengkapi tugassyarat-syarat untuk mencapai gelar sarjana

iv

ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA FLAVONOID TOTAL DALAM KASUMBA TURATE (Carthamus tinctorius

SECARA SPEKTROFOTOMETRI UV-VIS

SKRIPSI

ntuk melengkapi tugas-tugas dan memenuhi syarat untuk mencapai gelar sarjana

FITRIADI SUTIR N111 08 256

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS HASANUDDIN

MAKASSAR 2012

ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA FLAVONOID TOTAL DALAM Carthamus tinctorius Linn.)

Page 3: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA FLAVONOID TOTAL DALAM SEDIAAN CAIR KASUMBA TURATE (

SECARA SPEKTROFOTOMETRI

Prof. D

Pembimbing Pertama Dra. Rahmawati Syukur, M.Si., Apt

Apt.

NIP. 19651010 199203 2 002 NIP.

v

PERSETUJUAN

ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA FLAVONOID TOTAL DALAM

KASUMBA TURATE (Carthamus tinctorius SECARA SPEKTROFOTOMETRI UV-VIS

FITRIADI SUTIR

N 111 08 256

Disetujui oleh :

Pembimbing Utama

Prof. Dr. Gemini Alam, M.Si., Apt

NIP. 19641231 199002 1 005

Pembimbing Pertama Pembimbing Kedua

Rahmawati Syukur, M.Si., Apt Dra.Christiana Lethe

NIP. 19651010 199203 2 002 NIP. 19481002 198203 2 001

ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA FLAVONOID TOTAL DALAM Carthamus tinctorius Linn.)

Christiana Lethe, M.Si.,

19481002 198203 2 001

Page 4: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA FLAVONOID TOTAL DALAM SEDIAAN CAIR KASUMBA TURATE (

SECARA SPEKTROFOTOMETRI

Dipertahankan di hadapan Panitia Penguji

Fakultas Farmasi Universitas Hasanuddin

Pada Tanggal, 6 Desember

Panitia Penguji Skripsi

1. Ketua

Prof. Dr. Hj. Asnah Marzuki

:………………..

2. Sekretaris

Dra. Ermina Pakki, M.Si., Apt.

……………….

3. Anggota

Prof. Dr. H. Faisal Attamimi,

4. Ex Officio

Prof.Dr.Gemini Alam

5. Ex Officio

Dra. Rahmawati Syukur

……………….

6. Ex.Officio

Dra. Christiana Lethe, M.Si., Apt.

vi

Pada tanggal, 6 DesemberPENGESAHAN

ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA FLAVONOID TOTAL DALAM

KASUMBA TURATE (Carthamus tinctorius SECARA SPEKTROFOTOMETRI UV-VIS

Oleh :

Fitriadi Sutir N 111 08 256

Dipertahankan di hadapan Panitia Penguji Skripsi

Fakultas Farmasi Universitas Hasanuddin

Pada Tanggal, 6 Desember 2012

Panitia Penguji Skripsi

Prof. Dr. Hj. Asnah Marzuki, M.Si., Apt. .

:………………..

Dra. Ermina Pakki, M.Si., Apt. :

Prof. Dr. H. Faisal Attamimi, M.S. : ……………….

Prof.Dr.Gemini Alam, M.Si., Apt. : ……………….

Rahmawati Syukur, MSi., Apt. :

Dra. Christiana Lethe, M.Si., Apt. : ……………….

Mengetahui :

Dekan Fakultas Farmasi

6 Desember 2012

ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA FLAVONOID TOTAL DALAM Carthamus tinctorius Linn.)

: ……………….

: ……………….

: ……………….

Dekan Fakultas Farmasi

Page 5: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

vii

Universitas Hasanuddin

Prof. Dr. Elly Wahyudin, DEA., Apt. NIP. 19560114 198601 2 001

PERNYATAAN

Dengan ini saya menyatakan bahwa skripsi ini adalah karya saya

sendiri, tidak terdapat karya yang pernah diajukan untuk memperoleh

gelar kesarjanaan di suatu Perguruan Tinggi dan sepanjang pengetahuan

saya juga tidak terdapat karya atau pendapat yang pernah ditulis atau

diterbitkan oleh orang lain, kecuali yang secara tertulis diacu dalam

naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka.

Apabila dikemudian hari terbukti bahwa pernyataan saya ini tidak

benar, maka skripsi dan gelar yang diperoleh, batal demi hukum.

Makassar, Desember 2012

Penyusun,

Fitriadi Sutir

Page 6: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

viii

UCAPAN TERIMA KASIH

Subhanallahu Wal Hamdulillahu Wa Laa Ilaaha Illallahu

Wallahu Akbar. Tiada kata terinda yang patut keluar dari lisan penulis,

selain kata “syukur” ke hadirat Allah Subhanahu Wa Ta’ala yang telah

melimpahkan rahmat dan inayah-Nya kepada penulis sehingga skripsi ini

bisa terselesaikan. Shalawat serta salam selalu tercurahkan kepada

junjungan kita, Nabiyullah Muhammad Shallallahu ‘alaihi Wasallam,

Terima kasihku terucap dari hati yang paling dalam, serta rasa sayang

penulis haturkan kepada ayahanda Sutir Manjong dan ibunda Aminah

yang telah memberikan dukungan dan dorongan dengan penuh kasih

sayang baik dalam bentuk material maupun spiritual dalam meraih cita-

citaku. Penulis sadar bahwa tidak ada yang dapat penulis lakukan untuk

membalas pengorbanan tersebut, tetapi penulis hanya dapat

memanjatkan do’a kepada Allah SWT, sesungguhnya Allah Maha Tahu

dan Maha Bijaksana. “Sayangilah kedua orang tua hamba, sebagaimana

mereka telah menyayangi hamba pada waktu kecil. Ampunilah pula dosa

mereka, ya Allah.

Page 7: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

ix

1. Ucapan terima kasih yang sebesar-besarnya penulis sampaikan

kepada Bapak Prof. Dr. Gemini Alam, M.Si., Apt., Ibu Dra. Rahmawati

Syukur, M.Si.,Apt. dan Ibu Dra. Christiana lethe, M.Si. Apt. selaku

dosen pembimbing yang telah meluangkan waktu, tenaga, dan ilmunya

dalam memberikan bimbingan, bantuan, dan perhatian mulai dari

perencanaan sampai terselesainya skripsi ini.

2. Kepada ibu Dekan Fakultas Farmasi, Prof. Dr. Elly Wahyuddin, DEA.,

Apt.; Bapak Drs. H. Hasyim Bariun, M.Si., apt. Dan ibu Dra. Hj. Aisyah

Fatmawaty, MSi., Apt. selaku penasehat akademik penulis; dan

bapak/ibu dosen Fakultas Farmasi UNHAS; terima kasih atas ilmu,

nasehat, dan saran yang telah diberikan selama penulis menjalani

kehidupan perkuliahan ini, serta seluruh Pegawai Akademik dan staff

pegawai Fakultas Farmasi UNHAS yang telah banyak membantu

penulis dalam dunia kampus ini.

3. Saudara-saudaraku Suryadi Sutir dan Wardihan yang senantiasa

memberikan semangat dan keceriaan kepada penulis untuk mencapai

cita-cita.

4. Resa Alifyanty, terima kasih atas dukungan, motivasi, arahan,

perhatian dan pengertiannya selama ini.

5. Kak Hermanto utomo., Ferliem S.Si. dan Muhammad Tri Hidayat, yang

telah mendampingi penulis menggunakan instrumen spektrofotometer

UV-Vis selama penelitian ini berlangsung.

Page 8: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

x

6. Kepada Suswanda Surya, Fajrin Raharjo, Muhammad Raihan, Dwi

resky asalui, Alfred yusuf, agus Wahyudi, teman-teman EF serta

seluruh saudara/iku ”Steroid’08” Fakultas Farmasi UNHAS untuk

semangatnya selama penelitian dan penyusunan skripsi ini, terima

kasih atas persaudaraan yang terjalin selama masa-masa perkuliahan

hingga saat detik-detik akhir studi.

7. Terimakasih kepada semua pihak yang tidak dapat disebut satu per

satu dan telah banyak membantu penulis, baik didalam menyusun

skripsi ini ataupun dalam kehidupan sehari-hari. Semoga diberi

kemudahan oleh Allah SWT dalam menjalani hidup kalian.

Penulis menyadari bahwa skripsi ini masih jauh dari kesempurnaan,

banyak kekurangan dan kelemahan. Di dunia tak ada satupun yang

sempurna karena kesempurnaan hanya milik-Nya. Maka dari itu saran dan

kritik membangun sangat penulis harapkan guna tambahan wawasan agar

dalam pengerjaan penelitian selanjutnya dapat lebih baik.

Akhirnya semoga karya kecil ini dapat bermanfaat bagi

pengembangan ilmu pengetahuan terutama di bidang farmasi, amin.

Makassar, Desember 2012

Penulis,

FITRIADI SUTIR

Page 9: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

xi

ABSTRAK

Telah dilakukan penelitian analisis kualitatif dan kuantitatif kandungan senyawa flavonoid total sediaan cair Kasumba Turate secara spektrofotometri UV-Vis. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kadar senyawa flavonoid total dalam sediaan cair kasumba turate serta untuk memenuhi standardisasi produk sediaan obat herbal. Penelitian ini dilaksanakan dalam dua tahap yaitu analisis kualitatif flavonoid yang dilakukan melalui uji pendahuluan flavonoid pada lempeng kromatografi lapis tipis dan analisis kuantitatif dengan spektrofotometri UV-Vis. Uji pendahuluan senyawa flavonoid digunakan pereaksi semprot sitroborat. Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna kuning kehijauan dilanjutkan pada analisis kuantitatif secara spektrofotometri UV-Vis. Pada analisis kuantitatif senyawa flavonoid infusa bunga Kasumba Turate (Carthamus tinctorius Linn.) dan sediaan cair Kasumba Turate digunakan Metode Chang. Hasil penelitian menunjukkan kadar flavonoid sediaan cair Kasumba Turate lebih besar dibandingkan pada infusa bunga Kasumba Turate. Kadar senyawa flavonoid sediaan cair Kasumba Turate diperoleh sebesar 0,699% dan kandungan flavonoid infusa bunga Kasumba Turate diperoleh sebesar 0,673% dihitung sebagai kuersetin.

Kata kunci : sediaan cair Kasumba Turate, flavonoid, spektrofotometri UV-Vis

Page 10: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

xii

ABSTRACT

The research of qualitative and quantitative analysis of total flavonoid content in the Kasumba Turate liquid preparation by UV-Vis spectrophotometry method has been done. This research aimed to determine total flavonoid content in the Kasumba Turate liquid preparation and to comply with the standardization of herbal products medicinal preparations. This research done in two step, flavonoid screening on thin layer chromatography as qualitative analysis and UV-Vis spectrophotometry method as quantitative analysis. Sitroborat spray reagent was used in flavonoid screening. The samples showed positive results in qualitative analysis with greenish yellow spot was continued on the quantitative analysis by the UV-Vis spectrophotometrical method. Chang’s Method was used in flavonoid quantitative determination of kasumba turate (Carthamus tinctorius Linn.) petals infusion and kasumba turate liquid preparation. The results showed flavonoid content of Kasumba Turate liquid preparation is greater than the Kasumba Turate infusion. Flavonoids content of Kasumba Turate liquid preparation obtained for 0.699% and flavonoids content of Kasumba Turate infusion obtained for 0.673%, calculated as quercetin.

Keyword : Kasumba Turate liquid preparation, flavonoid, UV-Vis spectrophotometry

Page 11: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

xiii

DAFTAR ISI

halaman

HALAMAN PERSETUJUAN ..................................................................... iii

HALAMAN PENGESAHAN ....................................................................... iv

HALAMAN PERNYATAAN ........................................................................ v

UCAPAN TERIMA KASIH .......................................................................... vi

ABSTRAK .................................................................................................. ix

ABSTRACT ................................................................................................. x

DAFTAR ISI ............................................................................................... xi

DAFTAR TABEL ...................................................................................... xiv

DAFTAR LAMPIRAN ................................................................................ xv

DAFTAR GAMBAR .................................................................................. xvi

BAB I PENDAHULUAN .............................................................................. 1

BAB II TINJAUAN PUSTAKA..................................................................... 4

II.1 Uraian Tanaman ........................................................................ 4

II.1.1 Klasifikasi Tanaman ............................................................... 4

II.1.2 Nama Daerah ......................................................................... 4

II.1.3 Morfologi Tumbuhan............................................................... 5

Page 12: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

xiv

II.1.4 Kandungan Kimia ................................................................... 6

II.1.5 Pemanfaatan dan Kegunaan .................................................. 7

II.2 Seyawa Flavonoid ..................................................................... 7

II.2.1 Flavonoid ................................................................................ 7

II.2.2 Non Flavonoid ...................................................................... 13

II.2.3 Biosintesis Flavonoid ............................................................ 15

II.2.4 Sifat Fisika dan Kimia Flavonoid .......................................... 17

II.2.5 Kuersetin .............................................................................. 18

II.3 infundasi .................................................................................. 19

II.3.1 Definisi infus ......................................................................... 19

II.3.2 Definisi infundasi .................................................................. 19

II.3.3 Metode Infundasi .................................................................. 19

II.4 Freeze Drying (Liofilisasi) ........................................................ 21

II.5 Standarisasi ............................................................................. 21

II.5.1 Obat Herbal Terstandar ........................................................ 23

II.6 Larutan Oral ............................................................................ 23

II.7 Kromatografi Lapis Tipis .......................................................... 24

II.8 Analisis Spektrofotometri ......................................................... 25

II.8.1 Analisis Kimia ....................................................................... 25

II.8.2 Teori Spektrofotometri .......................................................... 25

II.8.3 Prinsip Kerja ......................................................................... 27

II.8.4 Instrumentasi Spektrofotometer UV-Vis ............................... 27

BAB III METODE PENELITIAN ............................................................... 32

Page 13: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

xv

III.1 Alat dan Bahan ...................................................................... 32

III.2 Pengambilan dan Penyiapan Sampel Penelitian ................... 32

III.3 Pembuatan dan Penyiapan Infusa ......................................... 32

III.4 Formula Sediaan Cair ............................................................. 33

III.4.1 Pembuatan Formula ............................................................ 33

III.5 Analisis ................................................................................... 34

III.5.1 Analisis Kualitatif ................................................................. 34

III.5.2 Analisis Kuantitatif ............................................................... 34

III.5.2.1 Pembuatan Larutan AlCl3 10% ......................................... 34

III.5.2.2 Pembuatan Larutan Natrium Asetat 1 M. ......................... 34

III.5.2.3 Penentuan Panjang Gelombang Maksimum .................... 35

III.5.2.4 Pembuatan Larutan standar dan Kurva Baku Kuersetin ... 35

III.5.2.5 Penentuan Kandungan Flavonoid Ekstrak ....................... 35

III.5.2.6 Penentuan Kandungan Flavonoid Sediaan ...................... 35

III.6 Pengumpulan data ................................................................. 36

III.7.Pembahasan Hasil ................................................................. 36

III.6 Pengambilan Kesimpulan ....................................................... 36

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ....................................................... 37

IV.1 Hasil Penelitian ................................................................................. 37

IV.1.1 Analisis Kualitatif ........................................................................... 37

IV.1.2 Analisis Kuantitatif ......................................................................... 38

IV.2 Pembahasan .................................................................................... 38

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ........................................................ 41

Page 14: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

xvi

V.1 Kesimpulan ........................................................................................ 41

V.2 Saran ................................................................................................. 41

DAFTAR PUSTAKA ................................................................................. 42

LAMPIRAN............................................................................................... 45

Page 15: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

xvii

DAFTAR TABEL

Tabel halaman

1. Warna-warna panjang gelombang ...................…………………...

2. Nilai Rf profil KLT infusa Bunga Kasumba Turate (Carthamus

tinctorius L.) dan Sediaan Cair Kasumba Turate ........................

3. Hasil Pengukuran kadar flavonoid total infusa Bunga Kasumba

Turate (Carthamus tinctorius Linn.) dan Sediaan Cair Kasumba

Turate .………………..................................................................

4. Nilai Serapan baku kuersetin ...................................................

26

37

38

47

Page 16: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

xviii

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran halaman

1. Skema Kerja...............................................................................

2. Kurva baku Kuersetin ................................................................

3. Perhitungan kadar flavonoid ....................................................

4. Formula sediaan cair Kasumba Turate .......................................

5. Foto bunga Kasumba Turate (Carthamus tinctorius Linn.) ........

45

46

47

53

Page 17: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

xix

DAFTAR GAMBAR

Gambar halaman

1. Kasumba Turate (carthamus tinctorius Linn.)…............................

2. Kerangka dasar flavonol dan turunannya .....................................

3. Kerangka dasar flavon dan turunannya ........................................

4. Kerangka dasar flavan-3-ol dan turunannya .................................

5. Kerangka dasar antosianidin dan turunannya ..............................

6. Kerangka dasar flavonon dan turunannya....................................

7. Kerangka dasar isoflavon dan turunannya....................................

8. Kerangka dasar asam hidroksibenzoat dan turunannya..............

9. Kerangka dasar asam hidroksinamat dan turunannya.................

10. Biosintesis asam hidroksinamat, asam hidroksibenzoat, dan flavonoid

......................................................................................

11. Kaitan antara biosintesis fenilpropanoid dan flavonoid ................

12. Alat infundasi ...............................................................................

13. Gambar skematis spektrofotometer UV-Vis.................................

14. Diagram sederhana sperktrofotometer Single-Beam ..................

15. Diagram sederhana spektrofotometer Double-Beam ..................

16. Profil KLT infusa bunga Kasumba Turate dan Sediaan Cair Kasumba

Turate .........................................................................

6

8

9

10

11

12

12

13

14

16

17

19

28

Page 18: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

xx

Page 19: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

1

BAB I

PENDAHULUAN

Pemakaian bahan alam, terutama yang berasal dari bahan tumbuh-

tumbuhan untuk tujuan pencegahan dan pengobatan penyakit telah

dikenal sejak jaman dahulu. Bahan-bahan alam ini sekarang sering

dikenal dengan nama obat tradisional (1). Salah satu obat tradisional yang

secara umum telah digunakan oleh masyarakat Sulawesi Selatan adalah

Kasumba Turate (Carthamus tinctorius Linn.) sebagai obat campak (2).

Kasumba pada umumnya dikenal dengan nama ‘kusum’ (India,

Pakistan), merupakan derivate dari Sanskrit, ‘kusumbha’ (Chavan 1961),

dan ‘honghua’ (red flower) di China (3). Safflower (kasumba) di Indonesia

dikenal dengan kembang pulu (Jawa), kesumba (Jawa), rale (Sulawesi

Selatan) (4).

Semua bagian dari tanaman Kasumba sangat berguna dalam

penggunaan di bidang herbal, tanaman ini paling banyak ditemukan di

Cina sebagai tanaman obat. Safflower mengandung 2 kelompok besar

pigmen warna, yang larut dalam air yaitu carthamidin yang berwarna

kuning sebanyak 30% dan carthamin yang berwarna orange-merah yang

larut dalam larutan alkali sebanyak 0,83% selain itu, safflower

mengandung flavonoid, glikosida, sterol dan derivat serotonin pada bagian

bunga dan biji (4,5). Senyawa flavonoid yang terdapat pada bunga

kasumba turate diketahui memiliki aktivitas antioksidan yang dapat

Page 20: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

2

mencegah terjadinya reaksi oksidatif pada makanan dan fungsi fisiologis

tubuh manusia (6).

Ekstrak air bunga Kasumba menunjukkan aktivitas antioksidan

yang baik. Mekanismenya yaitu membasmi radikal bebas, meningkatkan

klirens, serta meningkatkan aktivitas antioksidan endogen (7). Infusa

bunga Kasumba juga telah dikembangkan menjadi formulasi sediaan cair

oleh Alfianti (4).

Dalam Materia Medika Indonesia, penggunaan bahan baku obat

herbal atau simplisia yang akan digunakan untuk produksi sediaan harus

dilakukan standardisasi, supaya keterulangannya dapat menjamin mutu

bahan seperti komposisi kandungan kimia yang spesifikasinya terdapat

dalam monografi sebagai persyaratan mutu (8).

Mayoritas penggunaan bahan obat berbasis herbal di Indonesia

masih bersifat tidak terukur baik kepastian tanaman, takaran, cara

penyiapan sehingga tidak menjamin konsistensi khasiat. Salah satu tujuan

standardisasi adalah menjaga konsistensi dan keseragaman khasiat dari

obat herbal. Standardisasi melibatkan pemastian kadar senyawa aktif

farmakologis melalui analisis kuantitatif metabolit sekunder yang akan

menjamin keseragaman khasiat. Ketentuan umum mutu ekstrak menurut

Depkes-BPOM (2000, 2004) menyebutkan bahwa salah satu aspek yang

harus ditetapkan pada parameter spesifik adalah aspek kandungan total

golongan senyawa aktifnya, diantaranya yaitu penetapan kadar flavonoid

total, alkaloid total, atau polifenolnya (9).

Page 21: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

3

Berdasarkan hal tersebut, maka telah dilakukan penelitian analisis

senyawa flavonoid total dalam sediaan cair kasumba turate secara

spektrofotometri. Tujuan penelitian ini untuk mengetahui kadar senyawa

flavonoid total yang terkandung dalam sediaan cair bunga Kasumba, serta

untuk memenuhi standardisasi produk sediaan obat herbal.

Page 22: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

7

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

II.1 Uraian Tanaman

II.1.1 Klasifikasi Tanaman (10)

Kerajaan : Plantae

Divisi : Magnoliophyta

Anak Divisi : Angiospermae

Kelas : Magnoliopsida

Anak Kelas : Asteridae

Bangsa : Asterales

Suku : Asteraceae

Marga : Carthamus

Jenis : Carthamus tinctorius

II.1.2 Nama Daerah (10)

Jawa : Kembang pulu

Makassar : Kasumba Turate

Bugis : Rale’

Umum : Kesumba

Page 23: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

8

II.1.3 Morfologi Tumbuhan

Safflower (Kasumba) merupakan salah satu tanaman dari suku

Compositae atau Asteraceae. tegak lurus bercabang banyak, tanaman

menahun, dtumbuh baik di daerah dengan iklim yang panas, tinginya 30-

180 cm. Sistem akar terbentuk dengan baik, berwarna coklat kehijauan,

akar tebal dan gemuk, menusuk sampai 3 m kedalam tanah, cabang

sampingnya tipis mendatar, sebagaian besar terdapat diatas 30 cm.

Tangkai berbentuk selinder, padat dengan intisari lunak, berkayu didekat

pangkal. Daun tersusun secara spiral dengan ukuran 4-20 cm x 1-5 cm.

Tepi daun berduri-bergerigi, berwarna hijau gelap mengkilap dan

berbentuk herba ketika masih muda, berubah menjadi keras dan kaku

setelah tua. Bagian kepala terletak di ujung berbentuk jambangan besar,

panjang sekitar 4 cm dan diameter 2,5-4 cm, hanya mengandung bunga-

bunga tunggal (florest). Dasar bunganya rata sampai berbentuk kerucut,

banyak, tegak, bebulu putih dengan panjang 1-2 cm dan terdapat 20-80

bunga tunggal (Florest) berkelamin ganda, tubular, aktinomorf,

panjangnya sekitar 4 cm glabrous, kebanyakan berwarna jingga

kemerahan yang menjadi merah gelap saat mekar, kadang-kadang

kuning; mahkotanya tersusun oleh 5 lobus, panjang tubular 18-22 mm,

lobus menyebar, sedikit oblongata sampai linier, 7 mm x 1 mm; benang

sari 5, epipetalous, tertanam pada bagian mulut, filamen 1-2 mm, anthers

5 mm, berkumpul, membentuk kolom; ovarium berbentuk elips,

panjangnya 3,5-4,5 mm, satu sel, satu ovulet, bearing cakram pada

Page 24: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

9

bagian atas; penghalang tipis, panjang 28-30 mm, glabrous, mendesak

mulut kolom serbuk sari, stigma panjangnya 5 mm, bifidus, kuning,

dengan rambut pendek (10).

Gambar 1. Kasumba Turate (Carthamus tinctorius L.) : 1. Tanaman utuh; 2. Cabang tanaman dengan bunga; 3. Kuncup bunga; 4. Bunga lengkap; 5. Bagian apikal dari floret yang membuka; 6. Ovarium dengan pappus; 7. Achene dengan pappus (10)

II.1.4 Kandungan Kimia

Safflower (kasumba) mengandung 2 kelompok besar pigmen yaitu

carthamin dan carthamidin. Safflower juga mengandung senyawa steroid,

flavonoid, poliasetilen, N-feruloil triptamin yg terdapat dalam bunga dan biji

(3,5).

Page 25: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

10

II.1.5 Pemanfaatan dan Kegunaan

Safflower banyak dimanfaatkan dalam industri sebagai obat dan

pewarna. Semua bagian dari tanamannya sangat berguna dalam

penggunaan di bidang herbal. Di Cina, bunganya digunakan untuk

pengobatan pada penyakit seperti penyumbatan pembuluh darah diotak,

sterilitas pada laki-laki, rematik dan bronkhitis, dan sebagai teh tonik untuk

memperkuat sirkulasi darah dan hati. Pengobatan dengan safflower juga

menunjukkan efek yang bermanfaat pada sakit dan pembengkakan

karena trauma. Kasumba turate juga biasanya digunakan oleh masyarakat

di daerah Sulawesi Selatan sebagai obat tradisional untuk mengobati

penyakit campak (morbili) (3,4).

II.2 Senyawa Flavonoid

II.2.1 Flavonoid

Flavonoid merupakan senyawa polifenol yang terdiri atas 15 atau

karbon dengan dua cincin aromatis yang dihubungkan oleh 3 atom

karbon. Favonoid merupakan senyawa fenolik yang paling sering

ditemukan pada tanaman. Terdapat dalam konsentrasi tinggi dalam

epidermis daun serta kulit buah dan memegang berbagai peran penting.

Salah satu peran flavonoid pada tanaman yaitu perlindungan terhadap

sinar UV dan berbagai penyakit serta sebagai pigmen pada tanaman.

Subkelas utama dari flavonoid adalah flavon, flavonol, flavan-3-ol,

isoflavon, flavanon, dan antosianidin. Subkelas lain dari flavonoid yang

hanya ditemukan dalam jumlah kecil pada tanaman adalah

Page 26: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

11

dihidroflavonol, flavan-3,4-diol, kumarin, kalkhon, dihidrokalkhon, dan

aurhon. Gugus hidroksil pada flavonoid biasanya terdapat pada posisi 4,

5, dan 7 dan seringkali berikatan dengan gula dalam bentuk glokosida.

Jika gula dan gugus hidroksil meningkatkan kelarutannya dalam air, maka

substituent lain seperti gugu metil dan unit isopentyl menjadikan flavonoid

bersifat lipofilik (11, 12).

a. Flavonol

Merupakan subkelas flavonoid yang paling banyak ditemukan di alam.

Myricetin, quercetin, isorhamnetin, dan kaempferol merupakan contoh

flavonol yang ditemukan dalam bentuk O-glikosida. Konjugasi terjadi

pada tiga posisi pada cincin-C. Substitusi dapat terjadi pada posisi 5, 7,

4’, 3’, dan 5’ pada cincin aromatis (11).

Gambar 2. Kerangka dasar flavonol dan contoh turunannya (11)

Page 27: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

12

b. Flavon

Memiliki struktur yang serupa dengan flavonol. Substitusi yang dapat

ditemukan [ada flavon adalah hidroksilasi, metilasi, O-alkilasi, C-

alkilasi, dan glikosilasi. Flavon paling banyak ditemukan dalam bentuk

7-O-glikosida (12).

Gambar 3. Kerangka dasar flavon dan contoh turunannya (11)

c. Flavan-3-ol

Merupakan subkelas flavonoid yang paling kompleks mulai dari

monomer sederhana catechin dan isomernya epicatechin hingga

oligomer dan polimer proantosianidin yang juga dikenal sebagai tannin

terkondensasi. Tidak seperti flavon, flavonol, isoflavon, dan

antosianidin yang memiliki molekul planar, flavan-3-ol, proantosianidin,

dan flavanon memiliki kerangka C3 tersaturasi pada cincin-C

heterosiklik dan menjadikannya non-planar (12).

Page 28: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

13

Gambar 4. Kerangka dasar flavan-3-ol dan contoh turunannya (11)

d. Antosianiadin

Antosianidin dan turunannya, antisianin, paling banyak ditemukan

pada buah dan bunga yang memberi warna merah, biru, dan ungu.

Selain itu, juga ditemukan pada jaringan daun, batang, biji, dan akar.

Senyawa ini berperan dalam mekanisme proteksi tanaman melawan

cahaya berlebih dengan jalan melindungi sel mesofil daun dan untuk

menarik perhatian serangga penyerbuk. Contoh antosianidin yaitu

pelargonidin, sianidin, delphinidin, peonidin, petunidin, dan malvidin

(12).

Page 29: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

14

Gambar 5. Kerangka dasar antisianidin dan contoh turunannya (11)

e. Flavanon

Pada sebagian besar senyawa flavanon, cincin-C terhubung dengan

cincin-B pada posis C2 dengan konfigurasi-α. Flavanon sangat reaktif

dan telah dilaporkan dapat mengalami reaksi hidroksilasi, glikosilasi,

dan O-metilasi (12).

f. Isoflavon

Isoflavon memiliki ciri khas pada ikatan cincin-B yang terikat pada

posis atom C3 dan bukan pada C2. Banyak ditemukan pada kacang-

kacangan dengan konsentrasi tertinggi yaitu pada kacang kedelai (12).

Page 30: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

15

Gambar 6. Kerangka dasar flavonon dan contoh turunannya (11)

Gambar 7. Kerangka dasar isoflavon dan contoh turunannya (11)

Page 31: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

16

II.2.2 Non Flavonoid

Senyawa fenolik non-flavonoid adalah asam fenolat, hidroksinamat,

dan stilbenes.

a. Asam fenolat

Asam fenolat juga dikenal dengan nama hidroksibenzoat. Contoh

senyawa dari subkelas ini adalah asam gallat (12).

Gambar 8. Kerangka dasar asam hidroksibenzoat dan contoh turunannya (11)

b. Hidroksinamat

Asam sinamat merupakan senyawa dengan kerangka C6-C3 yang

selanjutnya akan diubah menjadi hidroksinamat. Hidroksinamat yang

paling umum ditemukan adalah p-coumaric, caffeic, dan asam ferulic

Page 32: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

17

yang seringkali terakumulasi dalam bentuk tartrat ester, coutaric,

caftaric, dan asam fertarat (12).

Gambar 9. Kerangka dasar asam hidroksinamat dan contoh turunannya (11)

c. Stilbenes

Stilbenes merupakan senyawa fitoaleksin yaitu senyawa yang diproduksi

oleh tanaman untuk melawan fungi, bakteri, atau virus pathogen.

Resveratrol merupakan senyawa stilbenes yang paling umum ditemukan.

Terdapat dalam bentuk isomer cis dan trans serta terdapat dalam jaringan

tanaman dalam bentuk trans-resveratrol-O-glukosida (12).

Page 33: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

18

II.2.3 Biosintesis Flavonoid

Kerangka C6-C3-C6 flavonoid berasal dari dua jalur biosintesis yang

berbeda. Tiga atom C yang berperan sebagai penghubung antara dua

cincin aromatis dan cincin-B berasal dari jalur fenilpropanoid dan disintasis

dari senyawa p-coumaroyl-CoA. Atom C yang membentuk cincin-A

berasall dari kondensasi tiga unit asetat melalui jalur asam malonat.

Penggabungan dari dua bagian ini melibatkan proses kondensasi p-

coumaroyl-CoA dengan tiga unit residu malonyl CoA, yang masing-masing

mendonorkan dua atom C. reaksi ini dikatalisis oleh chalcone sintetase

(CHS). Proses ini kemudian akan menghasilkan naringenin-chalcone.

Sedikit modifikasi dari proses ini akan menghasilkan isoflavon misalnya

daidzein, yang merupakan turunan isoliquiritigenin. Sintesis

isoliquiritigenin dikatalisis oleh chalcone reduktase, enzim NADPH-

dependen yang akan berinteraksi dengan CHS. Langkah selanjutnya pada

sintesis flavonoid adalah konversi stereospesifik naringenin-chalcone

menjadi naringenin oleh chalcone isomerase (CHI). Naringenin

merupakan senyawa yang berperan penting dalam sintesis flavonoid

dimana selanjutnya akan terbagi-bagi dalam beberapa jalur yang yang

menghasilkan beberapa subkelas flavonoid misalnya isoflavon, flavanon,

flavon, flavonol, flavan-3-ol, dan antosianin (13,14).

Page 34: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

19

Gambar 10. Biosintesis asam hidroksinamat, asam hidroksibenzoat, dan flavonoid. Garis panah tebal menandakan reaksi yang dikatalisis oleh enzim tunggal. Garis panah putus-putus menandakan reaksi dikatalisis lebih dari satu enzim yang beragam tergantung dari jenis tanaman. Enzim yang terlibat adalah asam sinamat 4-hidroksilase (CA4H), chalcone sintetase (CHS), 4-coumarate:coenzyme A ligase (4CL), fenilalanin ammonialyase (PAL). (14)

Page 35: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

20

Gambar 11. Kaitan antara biosintesis fenilpropanoid dan flavonoid. Enzim yang terlibat antara lain fenilalanin ammonialyase (PAL), cinamat-4-hidroksilase (C4H), 4-coumarate CoA ligase (4CL), chalcone sintetase (CHS), chalcone isomerase (CHI), isoflavon sintetase (IFS), dihidroflavonol reduktase (DFR), flavonol sintetase (FS), antosianidin sintetase (ANS). (13)

II.2.4 Sifat Fisika dan Kimia Flavonoid

Flavonoid merupakan senyawa polifenol sehingga bersifat kimia

senyawa fenol yaitu agak asam dan dapat larut dalam basa, dan karena

merupakan senyawa polihidroksi(gugus hidroksil) maka juga bersifat polar

sehingga dapat larut dalan pelarut polar seperti metanol, etanol, aseton,

air, butanol, dimetil sulfoksida, dimetil formamida. Disamping itu

Page 36: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

21

dengan adanya gugus glikosida yang terikat pada gugus flavonoid

sehingga cenderung menyebabkan flavonoid mudah larut dalam air.

Pemisahan senyawa golongan flavonoid berdasarkan sifat

kelarutan dalam berbagai macam pelarut dengan polaritas yang

meningkat adalah sebagai berikut :

1. Flavonoid bebas dan aglikon,dalam eter .

2. O-Glikosida,dalam etil asetat.

3. C-Glikosida dan leukoantosianin dalam butanol dan amil alkohoI.

Oleh karena itu banyak keuntungan ekstraksi dengan polaritas yang

meningkat (14).

II.2.5 Kuersetin

Kuersetin adalah senyawa kelompok flavonol terbesar, kuersetin

dan glikosidanya berada dalam jumlah sekitar 60-75% dari flavonoid.

Kuersetin dipercaya dapat melindungi tubuh dari beberapa jenis penyakit

degenerative dengan cara mencegah terjadinya proses peroksidasi lemak.

Kuersetin memperlihatkan kemampuan mencegah proses oksidasi dari

Low Density Lipoproteins (LDL) dengan cara menangkap radikal bebas

dan menghelat ion logam transisi. Ketika flavonol kuersetin bereaksi

dengan radikal bebas, kuersetin mendonorkan protonnya dan menjadi

senyawa radikal (15).

Page 37: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

22

Gambar 12. Alat infundasi: A. Panci berisi bahan air; B. Tangas air (Sumber : Anonim, 1986).

II.3 Infudasi

II.3.1 Definisi Infus

Infusa adalah sediaan cair yang dibuat dengan menyari simplisia

dengan air pada suhu 90° selama 15 menit.

II.3.2 Definisi Infundasi

Infundasi adalah proses penyarian yang umumnya digunakan untuk

menyari zat kandungan aktif yang larut dalam air dari bahan-bahan nabati

(16).

II.3.3 Metode Infundasi

Infus dibuat dengan cara :

1. Membasahi bahan bakunya, biasanya dengan 2 kali bobot bahan,

untuk bunga 4 kali bobot bahan dan untuk karagen 10 kali bobot bahan.

2. Bahan baku ditambah dengan air dan dipanaskan selama 15 menit

pada suhu 90°- 98°C. Umumnya untuk 100 bagian sari diperlukan 10

bagian bahan. Pada simplisia tertentu tidak diambil 10 bagian. Hal ini

disebabkan karena :

Page 38: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

23

a. Kandungan simplisia kelarutannya terbatas, misalnya kulit kina

digunakan 6 bagian.

b. Disesuaikan dengan cara penggunaannya dalam Pengobatan,

misalnya daun kumis kucing, sekali minum infus 100 cc, karena itu

diambil ½ bagian.

c. Berlendir , misalnya karagen di gunakan 1 ½ bagian.

d. Daya kerjanya keras, misalnya digitalis digunakan ½ bagian.

3. Untuk memindahkan penyarian kadang-kadang perlu ditambahkan

bahan kimia misalnya :

a. Asam sitrat untuk infus kina.

b. Kalium atau natrium karbonat untuk infus kelembek

4. Penyaringan dilakukan pada saat cairan masih panas, kecuali bahan

yang mengandung bahan yang mudah menguap.

Infus dibuat dengan cara mencampur simplisia dengan derajat

halus yang sesuai dalam panci dengan air secukupnya, panaskan di atas

tangas air selama 15 menit terhitung mulai suhu mencapai 90° sambil

berkali-kali diaduk. Serkai selagi panas melalui kain flanel, tambahkan air

panas secukupnya melalui ampas hingga diperoleh volume infus yang

dikehendaki.

Page 39: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

24

II.4 Freeze Drying (Liofilisasi)

Beku kering (Freeze drying) juga biasa disebut liofilisasi adalah

proses pengeringan yang digunakan untuk bahan-bahan terlarut yang labil

menjadi padatan yang cukup stabil selama distribusi dan penyimpanan.

Alat yang digunakan terdiri dari wadah pengering, yang memiliki pengatur

temperatur tersendiri, yang terhubung dengan katup besar ke wadah

kondensor. Satu atau lebih pompa vakum tersambung ke kondensor untuk

memberi tekanan dalam kisaran 0,03-0,3 Torr selama sistem beroperasi.

Secara objektif proses beku kering adalah mengkonversi seluruh air

menjadi es dalam tahap pembekuan, sublimasi langsung dengan

menghilangkan es pada tahap utama pengeringan dan akhirnya

penyerapan untuk menghilangkan seluruh air yang tidak beku pada tahap

kedua pengeringan. Air dihilangkan dari produk direkonversi menjadi es

oleh kondensor (17).

II.5 Standardisasi

Standardisasi bahan obat alam atau standarisasi obat herbal

adalah rangkaian proses melibatkan berbagai metode analisis kimiawi

berdasarkan data farmakologis, melibatkan analisis fisik dan mikrobiologi

berdasarkan kriteria umum keamanan (toksikologi) terhadap suatu ekstrak

alam (tumbuhan obat).

Page 40: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

25

Standardisasi obat herbal meliputi dua aspek :

a. Aspek parameter spesifik, yakni berfokus pada senyawa atau

golongan senyawa yang bertanggung jawab terhadap aktivitas

farmakologis. Analisis kimia yang dilibatkan ditujukan untuk

analisis kualitatif dan kuantitatif terhadap senyawa aktif.

b. Aspek parameter non spesifik, yakni berfokus pada aspek kimia,

mikrobiologi, dan fisis yang akan mempengaruhi keamanan

konsumen dan stabilitas misalnya kadar logam berat, aflatoksin,

kadar air, dan lain-lain (18).

Ketentuan umum ekstrak menurut Depkes-BPOM, menyebutkan

aspek-aspek yang harus ditentukan pada parameter spesifik meliputi :

1. Aspek Profil KLT

2. Aspek penetapan kadar marker

3. Aspek penetapan kadar total golongan metabolit

4. Aspek kelarutan ekstrak dalam etanol dan air

Mikromolekul golongan metabolit sekunder seringkali dihubungkan

dengan aktivitas farmakologi tertentu, terutama jika senyawa kimiawi yang

bertanggung jawab terhadap khasiat belum diketahui. Senyawa-senyawa

alami di dalam tumbuhan/ekstrak seringkali tidak bekerja sendirian namun

banyak diantaranya bersifat sinergis atau golongan metabolit sekunder

tertentu mendukung aktivitas senyawa utama, oleh karena itu dengan

mengandalkan analisis pada satu senyawa target tunggal belum cukup.

Untuk itu pendekatan terhadap kadar golongan metabolit sekunder

Page 41: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

26

tertentu perlu dilakukan. Terdapat metode instrumental yang digunakan di

dalam menentukan metabolit sekunder : spektrofotometer UV-Vis, metode

HPLC-MS, GC-MS dan NMR. Metode spektrofotometer UV-Vis ini umum

digunakan untuk tujuan analisis karena cukup spesifik, mudah, dan

aplikatif. Metode spektrofotometer cukup adaptif untuk penentuan

golongan fenolat dan flavonoid (18).

II.5.1. Obat Herbal Terstandar

Obat herbal terstandar adalah sediaan obat bahan alam yang telah

dibuktikan keamanan dan khasiatnya secara ilmiah dengan uji praklinik

dan bahan bakunya telah distandardisasi (19).

II.6. Larutan Oral

Dalam istilah farmasi larutan didefinisikan sebagai sediaan cair

yang mengandung satu atau lebih bahan kimia terlarut, baik

menggunakan pembawa air atau bukan air, dengan mempertimbangkan

bahan-bahan, metode pembuatan atau kegunaannya. Dalam sediaan ini

zat obat umumnya diharapkan memberi efek sistemik karena dalam

bentuk larutan absorbsinya dalam sistem saluran cerna ke dalam sirkulasi

sistemik diharapkan lebih cepat terjadi daripada bentuk sediaan lainnya.

Larutan yang diberikan secara oral biasanya terdapat zat-zat

terlarut lain selain dari bahan obat. Bahan-bahan tambahan ini biasanya

meliputi pemberi warna, pemberi rasa, pemanis, atau penstabil larutan.

Salah satu bentuk sediaan larutan oral adalah sirup. Sirup

merupakan sediaan pekat dalam air dari gula atau pengganti gula dengan

Page 42: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

27

atau tanpa penambahan bahan pengaroma dan zat obat. Sirup yang

mengandung bahan pemberi rasa atau pengaroma tapi tidak mengandung

zat-zat obat dinamakan pembawa bukan obat, sedangkan sirup yang

dimaksudkan sebagai pembawa yang memberikan rasa enak pada zat

obat yang ditambahkan kemudian, baik dalam peracikan resep secara

mendadak atau dalam pembuatan formula standar dinamakan sirup obat

(3,20).

II.7. Kromatografi Lapis Tipis

Kromatografi lapis tipis (KLT) dikembangkan oleh Izmailoff dan

Schraiber pada tahun 1938. KLT merupakan bentuk kromatografi planar,

yang mana fase diamnya berupa lapisan yang seragam (uniform) pada

permukaan bidang datar yang didukung oleh lempeng kaca, plat

aluminium atau plat plastik. Fase gerak yang dikenal sebagai pelarut

pengembang akan bergerak sepanjang fase diam karena pengaruh

kapiler pada pengembangan secara menaik (ascending), atau karena

pengaruh gravitasi pada pengembangan secara menurun (descending)

(21).

Pada lempeng tipis konvensional (20x20 cm, 10x20 cm, 5x20 cm, tebal 0,2 mm)

cuplikan biasanya ditotolkan sebagai bercak bulat atau garis, 1,5-2 cm dari tepi bawah,

bercak sebaiknya berukuran sama dan mempunyai diameter 3-6 mm. Penotolan dapat

dilakukan dengan mikropipet dengan “microsyringe”, biasanya diperlukan 1-20 µL.

Volume lebih dari itu dapat ditotolkan bertahap dalam bagian-bagian kecil dengan

pengeringan di antara penotoloan itu (22).

Page 43: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

28

Jarak pengembangan senyawa pada kromatogram biasanya dinyatakan dengan

angka Rf (Retardation factor) .Nilai Rf didefinisikan sebagai perbandingan antara jarak

yang ditempuh senyawa dengan jarak yang ditempuh pelarut pengembang (23).

Rf = Jarak titik pusat bercak dari titik awal

Jarak yang ditempuh eluen dari titik awal

II.8 Analisis Spektrofotometri

II.8.1 Analisis Kimia

Analisis kimia merupakan pemisahan suatu senyawa kimia menjadi

bagian-bagian terkecil ataupunyang kurang lebih demikian. Dalam analisis

kimia juga dilakukan penetapan unsur-unsur ataupun zat-zat asing yang

terkandung dalam suatu sampel (24).

II.8.2 Teori Spektrofotometri

Dalam analisis spektrofotometri digunakan suatu sumber radiasi

yang menjorok ke dalam daerah ultraviolet spektrum itu. Dari spektrum ini,

dipilih panjang-panjang gelombang tertentu dengan lebar pita kurang dari

1 nm. Instrumen yang digunakan untuk maksud ini adalah

spektrofotometer, yaitu instrument yang terdiri dari dua instrument dalam

satu kotak sebuah spektrometer dan sebuah fotometer.

Warna Panjang Gelombang

Ultraviolet <400 nm

Violet 400-450 nm

Page 44: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

29

Biru 450-500 nm

Hijau 500-570 nm

Kuning 570-590 nm

Jingga 590-620 nm

Merah 620-760 nm

Inframerah >760 nm

Tabel 1. Warna-warna panjang gelombang (24)

Sebuah spektrofotometer dapat dianggap sebagai sebuah

fotometer fotolistrik yang diperhalus yang memungkinkan penggunaan

pita-pita cahaya yang sinambung variabelnya dan lebih mendekati

monokromatik. Bagian-bagian penting spektrofotometer adalah : suatu

sumber energi cahaya; sebuah monokromator, yakni suatu piranti untuk

memencilkan cahaya monokromatik; kuvet kaca atau silica untuk pelarut

dan larutan yang diuju; dan sebuah peranti untuk menerima atau

mengukur berkas-berkas energy cahaya yang melewati pelarut atau

larutan (24).

Spektrofotometer UV-Vis adalah alat instrument analisis yang

bekerja berdasarkan prinsip kolorimetri yaitu metode yang menyatakan

bahwa warna yang timbul pada larutan contoh tergantung pada kepekatan

konsentrasi suatu unsure. Metode analisis ini didasarkan pada

pengukuran energy cahaya tampak atau cahaya ultraviolet oleh suatu

senyawa sebagai fungsi dari panjang gelombang (25).

II.8.3 Prinsip Kerja

Spektra UV-Vis dapat digunakan untuk analisis kuantitatif. Suatu

berkas dikenakan pada cuplikan (larutan sampel) dan intensitas sinar

Page 45: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

30

radiasi yang diteruskan diukur besarnya. Radiasi yang diserap oleh

cuplikan ditentukan dengan membandingkan intensitas sinar yang

diteruskan dengan intensitas sinar yang diserap jika tidak ada spesies

penyerap lainnya. Intensitas atau kekuatan radiasi cahaya sebanding

dengan jumlah foton yang melalui satu satuan luas penampang perdetik.

Serapan dapat terjadi jika foton/radiasi yang mengenai cuplikan memiliki

energi yang sama dengan energi yang dibutuhkan untuk menyebabkan

terjadinya perubahan tenaga. Kekuatan radiasi juga mengalami

penurunan dengan adanya penghamburan dan pemantulan cahaya, akan

tetapi penurunan karena hal ini sangat kecil dibandingkan dengan proses

penyerapan (26).

II.8.4 Instrumentasi Spektrofotometer UV-Vis

Spektrofotometer yang sesuai untuk pengukuran di daerah

spektrum ultraviolet dan sinar tampak terdiri atas suatu system optik

dengan kemampuan mengahasilkan sinar monokromatis dalam jangkauan

panjang gelombang 200-800 nm.

Suatu diagram sederhana spektrofotometer UV-Vis dengan

komponen-komponennya meliputi sumber-sumber sinar, monokromator,

dan sistem optik.

Page 46: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

31

i. Sumber-sumber lampu; lampu deuterium digunakan untuk daerah

UV pada panjang gelombang dari 190-350 nm, sementara lampu

halogen kuarsa atau lampu tungsten digunakan untuk daerah visibel

(pada panjang gelombang antara 350-900 nm).

ii. Monokromator digunakan untuk mendispersikan sinar ke dalam

komponen-komponen panjang gelombangnya yang selanjutnya akan

dipilih oleh celah (slit). Monokromator berputar sedemikian rupa

sehingga kisaran panjang gelombang dilewatkan pada sampel

sebagai scan instrument melewati spektrum.

iii. Optik-optik; dapat didesain untuk memecah sumber sinar sehingga

sumber sinar melewati 2 kompartemen, dan sebagaimana dalam

spektrofotometer berkas ganda (double beam), suatu larutan blanko

dapat digunakan dalam satu kompartemen untuk mengkoreksi

pembacaan atau spektrum sampel. Yang paling sering digunakan

sebagai blanko dalam spektrofotometri adalah semua pelarut yang

digunakan untuk melarutkan sampel atau pereaksi (21).

Spektrofotometer tebagi dalam dua tipe yaitu :

a. Spektrofotometer Single-Beam

Gambar 13. Diagram skematis spektrofotometer UV-Vis (21)

Page 47: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

32

Panjang gelombang yang sesuai dipancarkan menggunakan prisma,

sebuah cermin pemantul, dan sebuah celah yang akan memancarkan

cahaya monokromator yang berasal dari instrument. Panjang

gelombang

yang tertera pada spektrofotometer dapat diatur menjadi nilai yang

lebih spesifik (26).

Gambar 14. Diagram sederhana sperktrofotometer Single-Beam (26)

Ket. A : sumber cahaya E : cermin collimator

B : cermin condensing F : prisma

C : celah masuk G : kuvet

D : celah H : phototube

Sumber cahaya (A) akan diarahkan menuju cermin condensing (B) dan

akan memancarkan berkas sinar menuju celah masuk (C) yang diatur

dengan sudut 45o. Selanjutnya, berkas sinar akan diarahkan menuju

celah (D) yang dapat diatur ukurannya sesuai dengan panjang

gelombang yang diinginkan. Berkas sinar yang dihasilkan kemudian

Page 48: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

33

menuju cermin collimator dimana berkas sinar akan menjadi parallel

dan direfleksikan oleh prisma (F) dan mengalami refraksi (22).

b. Spektrofotometer Double-Beam

Gambar 15. Diagram sederhana spektrofotometer Double-Beam (26)

Ket. VIS-LAMP : lampu tungsten

UV-LAMP : lampu hydrogen (HL)

: lampu deuterium (DL)

P1 : cermin pengatur sumber cahaya

M1,M2,M3,M4 : cermin

FW : filter

ES 1 : celah masuk

ES 2 : celah keluar

BS : pemecah berkas sinar

R : sampel baku

S : sampel

DD 1, DD2 : diode detector

Setelah melewati cermin 1 (M1), berkas sinar yang dipancarkan akan

direfleksikan dan memasuki filter (FW) menuju celah masuk (ES 1) dan

Page 49: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

34

dipancarkan ke monokromator. Selanjutnya, berkas sinar menuju celah

keluar (ES 2) dan jatuh pada cermin 2 (M2). Pemecah berkas sinar (BS)

akan memecah sinar yang berasal dari M2 menjadi dua bagian, satu beras

sinar akan menuju cermin 4 (M4) dan akan diarahkan pada sampel baku

(R) menuju diode detector (DD 1). Berkas sinar yang lainnya menuju

cermin 3 (M3) dan diarahkan pada sampel (S) menuju diode detector (DD

2) (26,27).

Page 50: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

35

BAB III

METODE PENELITIAN

III.1. Alat dan Bahan

Alat-alat yang digunakan adalah gelas ukur 10 mL dan 25 mL

(Pyrex®), timbangan analitik (Sartorius®), Lampu UV 366 & 254 nm,

mikropipet 10-1000 µl (Biohit®), labu tentukur 5 ml, 10 ml (Pyrex®), vial,

penangas air, wadah sediaan cair 100 mL, pipa kapiler, lempeng selulosa

(Merck®), bejana KLT (chamber twin trough (CAMAG)), Spektrofotometer

UV-VIS (Agilent®).

Bahan-bahan yang digunakan adalah air suling, bunga kasumba

turate (Carthamus tinctorius Linn.), sukrosa, sari markisa, natrium alginat,

natrium benzoat, quercetin, natrium asetat 1 M, AlCl3 10 %.

III.2. Pengambilan dan Penyiapan Sampel Penelitian

Sampel penelitian yang digunakan adalah bunga Kasumba Turate

(Carthamus tinctorius L.) diperoleh dari desa Wempubbu, kec. Amali, kab.

Bone.

III.3 Pembuatan dan Penyiapan Infusa

Bunga kasumba sebanyak 200 g dibasahi dengan 800 ml air suling,

direndam beberapa saat. Kemudian ditambahkan lagi air suling sebanyak

2000 ml, dan dipanaskan. Setelah suhu mencapai 90˚C dipanaskan

selama 15 menit, lalu diangkat dan diserkai selagi masih panas.

Kekurangan air ditambahkan dengan air panas, lalu kemudian diuapkan

Page 51: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

36

airnya dengan menggunakan pengering beku (freeze dryer). Ekstrak

kering yang diperoleh disimpan di dalam lemari pendingin.

III.4 Formula Sediaan Cair

Sediaan Cair dibuat dari hasil beku kering infusa mahkota bunga

Kasumba Turate (C. tinctorius L.). Formula lengkap dapat dilihat pada

lampiran IV.

III.4.1 Pembuatan Formula

Masing-masing bahan formula sediaan cair bunga Kasumba Turate

(C. Tinctorius L.) ditimbang sesuai perhitungan. Sirupus simpleks dibuat

terpisah dengan cara melarutkan sukrosa ke dalam air suling lalu

dididihkan hingga larut. Hasil freze dryer (beku kering) dari infusa mahkota

bunga kasumba turate dicampur dengan sirupus simpleks dan natrium

benzoat. Untuk pengental Na-alginat, air dipanaskan terlebih dahulu lalu

pengental dimasukkan ke dalam air panas sambil diaduk hingga homogen

menggunakan pengaduk elektrik, selanjutnya pengental ditambahkan ke

dalam campuran sebelumnya, kemudian ditambahkan sari markisa.

III.5 Analisis

III.5.1 Analisis Kualitatif

Untuk mengidentifikasi adanya senyawa flavonoid total dalam

ekstrak bahan, dilakukan analisis kualitatif dengan metode kromatografi

lapis tipis (KLT) menggunakan pelat aluminium selulosa (tanpa F). Sampel

ekstrak dan sediaan Kasumba ditotolkan pada pelat KLT dan dielusi

dengan fase gerak butanol:asam asetat:air suling (4:1:2). kemudian

Page 52: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

37

dilanjutkan dengan pengembangan dalam chamber kromatografi. Noda

yang terbentuk diperiksa di bawah lampu UV pada panjang gelombang

366 nm dan 254 nm. Selanjutnya, dihitung nilai Rf noda yang muncul pada

kromatogram. Noda-noda senyawa flavonoid ditandai dengan

terbentuknya warna kuning dengan pereaksi semprot sitroborat.

III.5.2 Analisis Kuantitatif

III.5.2.1 Pembuatan Larutan AlCl3 10%

AlCl3 10% ditimbang sebanyak 1 g, dimasukkan ke dalam labu tentukur dan

dicukupkan volumenya hingga 10 ml dengan air suling.

III.5.2.2 Pembuatan Larutan Natrium Asetat 1 M

Natrium asetat ditimbang sebanyak 0,8203 g, dimasukkan dalam labu tentukur

dan dicukupkan volumenya hingga 10 ml dengan air suling.

III.5.2.3 Penentuan Panjang Gelombang Maksimum

Pertama-tama dibuat larutan stock dengan konsentrasi 1000 bpj dengan cara

kuersetin ditimbang sebanyak 10 mg, kemudian dilarutkan dengan air suling hingga 10

ml. Selanjutnya dari larutan stock dipipet 100 µl, kemudian ditambahkan 100 µl AlCl3

10%, dihomogenkan dan ditambahkan 100 µl larutan natrium asetat 1 M,

dihomogenkan kembali dan dicukupkan volumenya hingga 5 ml dengan air suling.

Kemudian diukur serapannya pada rentang panjang gelombang 400-800 nm dan

ditentukan panjang gelombang maksimumnya.

III.5.2.4 Pembuatan Larutan Standar dan Kurva Baku Kuersetin

Dari larutan stock dibuat satu seri pengenceran dengan konsentrasi 60, 70, 80,

90, 100 bpj dengan cara dipipet larutan stock masing-masing 300 µl, 350 µl, 400 µl, 450

Page 53: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

38

µl, 500 µl, kemudian ditambahkan 100 µl larutan AlCl3 10%, dihomogenkan, lalu

ditambahkan 100 µl larutan natrium asetat 1 M, dihomogenkan kembali dan dicukupkan

volumenya hingga 5 ml dengan air suling, lalu masing-masing konsentrasi tadi diukur

serapannya pada panjang gelombang maksimum (431nm). Selanjutnya dibuat kurva

antara serapan terhadap konsentrasi.

III.5.2.5 Penentuan Kandungan Flavonoid Ekstrak

Sampel ditimbang sebanyak 100 mg dan dilarutkan dengan air

suling hingga volume 10 ml. larutan ini diambil 80 µl dan dimasukkan

dalam labu tentukur 10 ml, ditambahkan 100 µl larutan AlCl3 10% serta

100 µl larutan natrium asetat 1 M, dan dicukupkan volumenya dengan air

suling. Serapan sampel diukur pada panjang gelombang maksimum

(431nm). Selain itu juga diukur serapan larutan blanko.

III.5.2.6 Penentuan Kandungan Flavonoid Sediaan

Sampel sediaan cair Kasumba Turate dipipet sebanyak 80 µl,

ditambahkan 100 µl larutan AlCl3 10% serta 100 µl larutan natrium asetat

1 M, dan dicukupkan volumenya dengan air suling sebanyak 10 ml.

Serapan sampel diukur pada panjang gelombang maksimum (431nm).

Selain itu juga diukur serapan larutan blanko. Total senyawa flavonoid

dinyatakan sebagai equivalen quercetin dalam 100 ml sediaan cair

Kasumba (mg EQ/100 ml sediaan cair).

III.6 Pengumpulan dan Analisis Data

Data hasil uji Spektrofotometer UV-Vis dikumpulkan kemudian

dianalisis.

Page 54: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

39

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

IV.1. Hasil Penilitian

IV.1.1 Analisis Kualitatif

Profil KLT infusa Kasumba Turate (Carthamus tinctorius Linn.) dan

Sediaan Cair Kasumba Turate adalah sebagai berikut :

Sampel Warna Ket

Rf UV 254 UV 366 UV 366+

Ekstrak

Sediaan Cair Sitroborat

0,19 0,16 Jingga Jingga

Kuning kehijauan +

O,36 0,33

Kuning kecoklatan

Kuning kecoklatan

Kuning kehijauan +

UV 254 UV 366 Sitroborat

Gambar 16. Profil KLT infusa bunga Kasumba Turate dan Sediaan Cair Kasumba

Turate pada panjang gelombang 254 nm, 366 nm serta denganpereaksi

sitroborat. Eluen Butanol : Asam asetat : Air (4:1:2).

Tabel 2. Nilai Rf Profil Kromatografi Lapis Tipis Infusa dan sediaan pada Panjang

Gelombang 254 nm, 366 nm, dan Pereaksi Sitroborat

I S I S I S

Page 55: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

40

IV.1.2 Analisis Kuantitatif

Hasil penetapan kadar flavonoid total dalam infusa bunga Kasumba

Turate (Carthamus tinctorius Linn.) dan dalam sediaan cair Kasumba

Turate adalah sebagai berikut :

Sampel Serapan (A) Kadar (%)

0,412 0,708

Sediaan Cair 0,402 0,694

0,404 0,697

Rata-rata 0,406 0,699

0,387 0,672

Ekstrak 0,389 0,675

0,388 0,674

Rata-rata 0,388 0,673

IV.2 Pembahasan

Pada penelitian ini telah dilakukan analisis kualitatif dan kuantitatif

kandungan flavonoid total pada Sediaan Cair Kasumba Turate. Hasil

analisis kualitatif dengan kromatografi lapis tipis (KLT) menggunakan

eluen Butanol : Asam asetat : Air (4:1:2) dan pelat aluminium selulosa

(tanpa fluorosens).. Selulosa merupakan fase diam yang ideal untuk

pemisahan senyawa yang bersifat hidrofilik seperti asam amino,

karbohidrat, ion anorganik, dan derivat asam nukleat (28). Hasil yang

diperoleh pada lampu UV 366 nm, penampakan noda pertama

menghasilkan warna jingga dan pada noda kedua berwarna kuning

Tabel 3. Hasil Pengukuran Kadar Flavonoid Total Infusa Bunga Kasumba Turate

(Carthamus tinctorius Linn.) dan Sediaan Cair Kasumba Turate

Page 56: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

41

kecoklatan. Sedangkan pada lampu UV 254, tidak menunjukkan

perubahan yang signifikan. hal ini disebabkan lempeng selulosa yang

digunakan tidak berfluorosensi pada UV 254 nm. Nilai Rf ekstrak pada

noda pertama dan kedua yaitu 0,19 dan 0,36, dan nilai Rf sediaan cair

kasumba turate yaitu 0,16 dan 0,33. Pemberian pereaksi sitroborat

sitroborat dan diamati di UV 366 menghasilkan noda dengan warna

kuning kehijauan. Pada saat disemprot dengan sitroborat akan terjadi

ikatan kompleks pada gugus orto-hidroksi dan menimbulkan pergeseran

khas pada pita panjang gelombang yang tinggi yang berguna pada

analisis beberapa golongan flavonoid (29). Nilai Rf ekstrak dan cair tidak

jauh berbeda, begitu pula dengan penampakan noda setelah disemprot

dengan pereaksi sitroborat, berdasarkan hal tersebut dapat disimpulkan

bahwa sediaan cair Kasumba Turate memiliki kandungan senyawa

flavonoid.

Pada penentuan kandungan flavonoid menggunakan metode

Chang dengan pereaksi aluminium klorida 10% dan natrium asetat, serta

kuersetin sebagai baku pembanding (9). Penggunaan aluminium klorida

untuk memperoleh pergeseran panjnag gelombang atau sebagai pereaksi

geser. Selanjutnya pembuatan larutan standar yang digunakan adalah

kuersetin dengan konsentrasi 60, 70, 80, 90, 100 bpj, konsentrasi blanko

berupa air suling, kemudian ditentukan panjang gelombang maksimum

dengan mengukur serapan konsentrasi tertinggi kuersetin pada panjang

gelombang 400-800 nm. Dari pengukuran tersebut diperoleh panjang

Page 57: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

42

gelombang maksimum yaitu 431 nm. Kuersetin adalah senyawa kelompok

flavonol terbesar dengan jumlah glikosidanya sekitar 60-75% dari

flavonoid. Pada penelitian ini dilakukan pengukuran kandungan flavonoid

total pada sediaan cair kasumba turate (Carthamus tinctorius Linn.)

dengan membandingkan kadar flavonoid total pada infusa bunga

kasumba turate. Hasil analisis kuantitatif diperoleh rata-rata kadar

flavonoid total dalam sediaan cair kasumba turate yaitu 0.693%

sedangkan rata-rata kadar flavonoid total pada infusa bunga kasumba

turate yaitu 0,673%.Salah satu bahan tambahan dalam sediaan cair

kasumba turate adalah sari markisa ungu (Passiflora edulis Sims.).

Markisa ungu pada umumnya dikonsumsi dalam bentuk segar berupa jus

atau diolah menjadi cair atau sari buah Meningkatnya kadar flavonoid

total pada sediaan cair kasumba turate dibandingkan infusa bunga

kasumba turate dapat disebabkan oleh adanya interaksi antara flavonoid

dan vitamin C, dimana vitamin C dapat meningkatkan absorpsi dari

flavonoid (31). Buah markisa ungu mengandung kadar vitamin C

sebanyak 20-80 mg (30).

Page 58: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

43

BAB V

KESIMPULAN DAN SARAN

V.1 KESIMPULAN

Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan dapat

disimpulkan bahwa :

1. Berdasarkan analisis profil Kromatografi Lapis Tipis (KLT) sediaan

cair kasumba turate (Carthamus tinctorius Linn.) dan infusa bunga

kasumba turate menggunakan eluen butanol:asam asetat:air

(4:1:2) dengan penampak noda sinar UV 254 nm, 366 nm, dan

setelah disemprot sitroborat menunjukkan hasil positif flavonoid.

2. Analisa kuantitatif dari sediaan cair kasumba turate (Carthamus

tinctorius Linn.) menggunakan spektrofotometer UV-Vis

menunjukkan bahwa sediaan cair kasumba turate memiliki kadar

flavonoid total yang lebih tinggi sebesar 0,020% dibandingkan

kadar flavonoid total pada infusa bunga kasumba turate.

V. 2 Saran

Disarankan untuk melakukan identifikasi senyawa flavonoid total

sediaan cair kasumba turate dengan menggunakan instrumen lain, seperti

Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT).

Page 59: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

44

DAFTAR PUSTAKA

1. Kelompok Kerja Ilmiah Yayasan Pengembangan Obat Bahan Alam Phyto Medica. Penapisan Farmakologi, Pengujian Fitokimia dan Pengujian Klinik. Yayasan Pengembangan Obat Bahan Alam Phyto Medica. Jakarta. 1993. Hal.143-144

2. Usmar, Syukur R., Fatmawati A.. Uji Aktivitas Imunomodulator Kasumba Turate (Carthamus tinctorius L.) sebagi Upaya Pembuatan Sediaan Terstandar Menuju Prototipe Skala Industri Kecil. Majalah Farmasi dan Farmakologi Vol.14. No.1- Maret 2010. Fakultas Farmasi Universitas Hasanuddin. Makassar. 2010. Hal. 17-20

3. Dajue,Li & Mundle HH. Safflower: Carthamus tinctorius L. IPGRI.

Italy. 1996. hal.9

4. Alfianti. Formulasi dan Uji Kestabilan Fisik Sirup Kasumba Turate (Carthamus tinctorius L). Skripsi. Fakultas Farmasi Universitas Hasanuddin. Makassar. 2011. Hal. 4, 7

5. Ekin, Zehra. Novel Resurgence of Safflower (Carthamus tinctorius

L) Utilization: A Global View. Journal of Agronomy . 2005; 4 (2). hal.84

6. Baff Global. Safflower Yellow. [serial on the internet]. 16 Juni 2009

[dikutip 9 Mei 2012]. Available from : http://www.bkwell.com/bkherbwell/natural-food-color/Yellow-color/Safflower-Yellow/12.html

7. Fatahi N., Carapetian J., Heidari R. Spectrophotometric Measurement of Valuable pigments from Petals of Safflower (Carthamus tinctorius L.) and their identification by TLC Method. Research Journal of Biological Sciences. 2008. 3(7). Hal.761-763

8. Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Materia Medika Indonesia jilid V. Direktorat Jenderal Pengawasa Obat dan Makanan.Jakarta.1989.

9. Saifuddin A, Rahayu V, dan Teruna HY. Standardisasi bahan obat alam. Edisi I. Graha Ilmu. Yogyakarta.2010. Hal.4-5,22,26-28,45

10. Van der Vosen, H.A.M., Umali, B.E. ”Plant Resources of South-

East Asia: Vegetables oils and fats. Volume 14. Backhuys Publishers. Leiden. 2001. 70-72.

Page 60: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

45

11. Stalikas, D.C. Extraction, Separation, and Detection Method for

Phenolic Acid and Flavonoid. Journal Sep. Sci. 2007. 30, 3268-3295

12. Crozier, A., Clifford, M.N., Ashihara, H. Plants Secondary Matabolite: Occurance, Structure, and Role in The Human Diet. Iowa : Blackwell Publishing. 2006. Hal 2-20

13. Smirnoff, N. Antioxidant and Reactive Oxygen Species in Plants.

Iowa : Blackwell Publishing. 2005. Hal 142-145

14. Hakkinen, S. Flavonols and Phenolic Acids in Berries and Berry Product. University of Kuopio : Kuopio. 2000. Hal 17-20

15. Waji AR. Sugrani A. Flavonoid (Quercetin). Makalah Kimia Organik Bahan Alam. Program S2 Kimia Fakultas MIPA. Universitas Hasanuddin. Makassar. 2001. Hal.16-17

16. Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Sediaan Galenik. Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan. Jakarta. 1986. Hal. 8-9

17. Swarbrick. Encyclopedia of Pharmaceutical Technology 3rd Ed. Informa Healthcare USA Inc. New York. 2007. Hal. 1807, 2216, 2217, 2223-2227, 2222. Available as PDF file

18. Saifuddin A, Rahayu V, dan Teruna HY. Standardisasi bahan obat alam. Edisi I. Graha Ilmu. Yogyakarta.2010. Hal.4,22,26-28,48-51

19. Menteri Kesehatan RI. Keputusan Menteri Kesehatan Republik Indonesia No.121. Jakarta.2008

20. Ansel, Howard C. Pengantar Sediaan Farmasi. Edisi IV. Universitas Indonesia Press. Jakarta. 2005. Hal.304

21. Gandjar, IG dan Abdul Rohman. Kimia Analisis Farmasi . Pustaka Pelajar. Yogyakarta. 2007. Hal.220-262, 367

22. Sudjadi, A. Metode Pemisahan. Fakultas Farmasi Universitas Gajah Mada. Yogyakarta. 1988.

23. Hahn-Deinstrop E. Applied Thin-Layer Chromatography Best

Practice and Avoidance Mistakes. Ed.2. Wiley-VCH. 2007, 154

Page 61: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

46

24. Basset J., Denney R.C., Jeffery G.H., Mendham J. Buku Ajar Vogel Kimia Analisis Kuantitatif Anorganik. EGC. Jakarta. 1994. Hal.3, 809-810, 818

25. Underwood AL. Analisa Kimia Kuantitatif. Ed.IV. Erlangga. Jakarta. Hal.383.

26. Kar, A. Pharmaceutical Drug Analysis 2nd Ed. : Methodology, Theory, Instrumentation, Pharmaceutical Assays, Cognate Assays. New Delhi : New Age International Publisher. 2005

27. Hollas, M.J. Modern Spectroscopy 4th Ed. USA : John Willey and Sons Publisher. 2004

28. Wall Peter E. Thin Layer Chomatography ; A Modern Practical Aproach. VWR International Ltd., Poole, Dorset.

29. Harborne, J.B. Metode Fitokimia.Penerbit ITB.Bandung.1987. Hal.93

30. Hutabarat R.C., karsinah, A.Manshur.Markisa Asam (Passiflora edulis Sims.) Buah Eksotik Kaya Jurnal Iptek Hortikultura Agustus.2010, (6) : 33-34

31. Kandaswami, C., Perkins, E. Ascorbic Acid Enhanced Antiproliferative Effect of Flavonoid on Squamous Cell Carcinoma in Vitro. Anticancer Drug.1993, (13):2277-2280

Page 62: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

47

LAMPIRAN

Lampiran 1. Analisis Kandungan Flavonoid Total dalam Sediaan Cair Kasumba Turate (Carthamus tinctorius Linn.) secara Spektrofotometri UV-VIS

Sediaan Cair

Analisis Kualitatif : KLT dengan eluen Butanol:Asam Asetat:Air (4:1:2)

Penetapan Kadar

Flavonoid Totatl dengan

Spektrofotomoter UV-Vis

Hasil Pengukuran

Analisis Data

Pembahasan

Kesimpulan

Sampel Bunga Kasumba Turate (Carthamus tinctorius L.)

Infusa Bunga Kasumba Turate

(Carthamus tinctorius L.)

Dibeku keringkan

Hasil beku kering infusa mahkota bunga kasumba

turate(Carthamus tinctorius L.)

Page 63: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

48

Lampiran 2. Kurva Baku Kuersetin

A = 0,007x - 0,084R² = 0,980

0

0.1

0.2

0.3

0.4

0.5

0.6

0.7

0.8

0 20 40 60 80 100 120

ab

sorb

an

si

konsentrasi

kurva baku quersetin

Konsentrasi (bpj) Serapan (A)

100 0.65205

90 0.62183

80 0.52463

70 0.4369

60 0.36661

Gambar 17.Kurva baku Kuersetin

Tabel 4.Nilai serapan baku Kuersetin

Page 64: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

49

Lampiran 3. Perhitungan Kandungan Senyawa Flavonoid Sampel

1. Sediaan Cair Bunga Kasumba Turate (Carthamus tinctorius Linn.)

a. Replikasi I

Berat Sampel : 1 g

Volume Sampel : 0,08 ml

Faktor Pengenceran : 1250 ml

Serapan : 0,412

Persamaan kurva baku kuersetin adalah : y = 0,007x-0,084

Sehingga, kandungan flavonoid sampel adalah :

0,412+0,084 C = 0,007

= 70,857 bpj

= 70,857 mg/l

= 0,070857 mg/ml

V (ml).C(mg/ml).Fp Kadar flavonoid sampel (%) =

Bs (mg) x 100 %

0,08 ml . 0,0708 mg/ml . 1250 =

1000 mg x 100 %

= 0,708 %

Page 65: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

50

b. Replikasi II

Berat Sampel : 1 g

Volume Sampel : 0,08 ml

Faktor Pengenceran : 1250 ml

Serapan : 0,402

Persamaan kurva baku kuersetin adalah : y = 0,007x-0,084

Sehingga, kandungan flavonoid sampel adalah :

0,402+0,084 C = 0,007

= 69,428 bpj

= 69,428 mg/l

= 0,069428 mg/ml

V (ml).C(mg/ml).Fp Kadar flavonoid sampel (%) =

Bs (mg) x 100 %

0,08 ml . 0,0694 mg/ml .1250 =

1000 mg x 100 %

= 0,694 %

Page 66: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

51

c. Replikasi III

Berat Sampel : 1 g

Volume Sampel : 0,08 ml

Faktor Pengenceran : 1250 ml

Serapan : 0,404

Persamaan kurva baku kuersetin adalah : y = 0,007x-0,084

Sehingga, kandungan flavonoid sampel adalah :

0,404+0,084 C = 0,007

= 69,714 bpj

= 69,714 mg/l

= 0,069714 mg/ml

V (ml).C(mg/ml).Fp Kadar flavonoid sampel (%) =

Bs (mg) x 100 %

0,08 ml . 0,0697 mg/ml .1250 =

1000 mg x 100 %

= 0,697%

Rata-rata % kadar flavonoid total

dalam sediaan cair

0,708% + 0,694% + 0,697% =

3

= 0,699 %

Page 67: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

52

2. Infusa Bunga Kasumba Turate (Carthamus tinctorius Linn.)

a. Replikasi I

Berat Sampel : 1 g

Volume Sampel : 0,08 ml

Faktor Pengenceran : 1250 ml

Serapan : 0,387

Persamaan kurva baku kuersetin adalah : y = 0,007x-0,084

Sehingga, kandungan flavonoid sampel adalah :

0,387+0,084 C = 0,007

= 67,285 bpj

= 67,285 mg/l

= 0,067285 mg/ml

V (ml).C(mg/ml).Fp Kadar flavonoid sampel (%) =

Bs (mg) x 100 %

0,08 ml . 0,0672 mg/ml . 1250 =

1000 mg x 100 %

= 0,672 %

Page 68: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

53

b. Replikasi II

Berat Sampel : 1 g

Volume Sampel : 0,08 ml

Faktor Pengenceran : 1250 ml

Serapan : 0,389

Persamaan kurva baku kuersetin adalah : y = 0,007x-0,084

Sehingga, kandungan flavonoid sampel adalah :

0,389+0,084 C = 0,007

= 67,571 bpj

= 67,571 mg/l

= 0,067571 mg/ml

V (ml).C(mg/ml).Fp Kadar flavonoid sampel (%) =

Bs (mg) x 100 %

0,08 ml . 0,0675 mg/ml . 1250 =

1000 mg x 100 %

= 0,675 %

Page 69: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

54

c. Replikasi III

Berat Sampel : 1 g

Volume Sampel : 0,08 ml

Faktor Pengenceran : 1250 ml

Serapan : 0,388

Persamaan kurva baku kuersetin adalah : y = 0,007x-0,084

Sehingga, kandungan flavonoid sampel adalah :

0,388+0,084 C = 0,007

= 67,428 bpj

= 67,428 mg/l

= 0,067428 mg/ml

V (ml).C(mg/ml).Fp Kadar flavonoid sampel (%) =

Bs (mg) x 100 %

0,08 ml . 0,0674 mg/ml . 1250 =

1000 mg x 100 %

= 0,674 %

Rata-rata % kadar flavonoid total

Infusa bunga kasumba turate 0,672% + 0,675% + 0,674%

= 3

= 0,673%

Page 70: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

55

Lampiran 4. Formula Sediaan Cair dari Liofilisat Bunga Kasumba

Turate (Carthamus tinctorius Linn.)

(Sumber : Alfianti. Pengaruh Natrium Alginat Terhadap Kestabilan Fisik Sirup Kasumba

Turate (Carthamus tinctorius Linn.). Skripsi. Jurusan Farmasi. Fakultas

Farmasi. UNHAS. Makassar. 2011)

No Nama Bahan (%b/v, %v/v)

1 Liofilisat bunga Kasumba

Turate

1

2 Sirupus Simpleks 25

3 Na.Alginat 0,1

4 Sari Markisa 5

5 Na.Benzoat 0,1

6 Air Suling ad 100

Page 71: ANALISIS KANDUNGAN SENYAWA KASUMBA TURATE ...digilib.unhas.ac.id/uploaded_files/temporary/Digital...Sampel yang menunjukkan hasil positif pada analisis kualitatif berupa noda berwarna

56

Lampiran 5. Tanaman Kasumba Turate

Foto Tanaman Bunga Kasumba Turate (Carthamus tinctorius

Linn.)