i

ANALISIS KANDUNGAN EUGENOL DALAM SALEP

EKSTRAK ETANOL RIMPANG LENGKUAS (Alpinia galanga

L. Willd) DENGAN METODE SPEKTROFOTOMETRI UV-VIS

Disusun Oleh:

RIZKY APRILIANY

M0613036

HALAMAN SAMPUL

SKRIPSI

Diajukan untuk memenuhi sebagian

persyaratan mendapatkan gelar Sarjana Farmasi

PROGRAM STUDI S1 FARMASI

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

UNIVERSITAS SEBELAS MARET

SURAKARTA

September, 2017

ii

HALAMAN PENGESAHAN

iii

PERNYATAAN

iv

ANALISIS KANDUNGAN EUGENOL DALAM SALEP EKSTRAK

ETANOL RIMPANG LENGKUAS (Alpinia galanga L. Willd) DENGAN

METODE SPEKTROFOTOMETRI UV-VIS

RIZKY APRILIANY

Program Studi S1 Farmasi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam

Universitas Sebelas Maret

ABSTRAK

Lengkuas (Alpinia galanga L.) merupakan salah satu tanaman yang sering

dimanfaatkan oleh masyarakat sebagai pengobatan tradisional. Berbagai senyawa

terkandung dalam rimpang lengkuas seperti galangin, metilsinamat, sineol, kamfer,

δ-pinen, dan eugenol. Eugenol merupakan salah satu senyawa yang memiliki

aktivitas antioksidan, analgetik, dan antibakteri yang penggunaannya biasanya

terdapat dalam suatu sediaan. Pada pembuatan suatu sediaan, perlu dilakukan

pemeriksaan kandungan senyawa aktifnya yang merupakan salah satu persyaratan

dalam menjamin kualitasnya. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kandungan

eugenol dalam salep ekstrak etanol rimpang lengkuas.

Metode untuk mengekstraksi metabolit sekunder dari rimpang lengkuas

menggunakan digesti dengan pelarut etanol 70%. Proses pemisahan eugenol dari

salep ekstrak etanol rimpang lengkuas dilakukan dengan metode ekstraksi cair-cair

menggunakan pelarut kloroform. Eugenol yang diperoleh dianalisis menggunakan

Spektrofotometer UV-Vis karena eugenol memiliki kromofor berupa cincin

benzena sehingga mampu menyerap sinar ultraviolet. Pada penelitian ini juga

dilakukan validasi terhadap metode analisis eugenol secara Spektrofotometri UV-

Vis dengan parameter validasi yang digunakan meliputi linearitas akurasi, presisi,

Limit of Detection (LOD) dan Limit of Quantification (LOQ).

Hasil penelitian menunjukkan bahwa metode analisis eugenol dalam salep

ekstrak etanol rimpang lengkuas memiliki validasi yang baik, dengan linearitas,

akurasi dan presisi yang memenuhi persyaratan serta nilai LOD sebesar 2,388

µg/mL dan nilai LOQ sebesar 7,235 µg/mL. Pada penentuan kandungan eugenol

dalam salep ekstrak etanol rimpang lengkuas diperoleh hasil sebesar 5,187 mg/gr

salep.

Kata kunci : eugenol, salep ekstrak etanol rimpang lengkuas, Spektrofotometri

UV-Vis, validasi metode

v

ANALYSIS OF EUGENOL CONTENT IN ETHANOLIC EXTRACT OF

GALANGAL RHIZOME (Alpinia galanga L. Willd) OINTMENT USING

UV-VIS SPECTROPHOTOMETRY METHOD

RIZKY APRILIANY

Pharmacy Department, Faculty of Mathematics and Natural Sciences

Sebelas Maret University

ABSTRACT

Galangal (Alpinia galanga L.) is a plant often be used by people as

traditional medicines. Galangal rhizome contain various compounds such as

galangin, methylcinnamate, cineole, camphor, δ-pinene, and eugenol. Eugenol has

analgetic, antioxidant, and antibacterial activity that is usually used in topical

preparations. In manufactured of drugs, it necessary to examine active compound

which is one of the requirements to ensuring its quality. This study aims to find out

eugenol levels in ointment of ethanolic extract from galangal rhizome.

Method used to extracted secondary metabolite from galangal rhizome is

digestion using ethanol 70%. Separation eugenol from ointment of ethanolic extract

of galangal rhizome was done by liquid-liquid extraction using chloroform as

solvent. The eugenol analyzed using UV-Vis Spectrophotometer because eugenol

has chromofor, a benzene ring so able to absorb ultraviolet light. Parameters of

validation method used in this study are linearity, accuracy, precision, Limit of

Detection (LOD) and Limit of Quantification (LOQ).

The result showed that analysis method of eugenol in ointment of ethanolic

extract galangal rhizome has good validation, with linearity, accuracy and precision

occupied the requirements, LOD level is 2,388 µg/mL and LOQ level 7,235 µg/mL.

Determination eugenol level in ointment of ethanolic extract galangal rhizome

obtained result is 5,187 mg/gr sample.

Keyword : eugenol, ointment of ethanolic extract galangal rhizome, UV-Vis

Spectrophotometry, validation method

vi

KATA PENGANTAR

Puji syukur penulis haturkan kepada Tuhan Yang Maha Esa karena atas

rahmat dan karunia-Nya penulis dapat menyelesaikan penulisan skripsi ini.

Shalawat serta salam semoga senantiasa terlimpahkan kepada Rasulullah SAW.

Dalam penulisan skripsi ini, penulis tidak lepas dari bantuan dari berbagai pihak

yang telah membantu dan mendukung penulis dalam menyelesaikan skripsi ini.

Ucapan terima kasih secara khusus penulis sampaikan kepada:

1. Bapak Prof. Ir. Ari Handono Ramelan, M.Sc. (Hons). Ph.D selaku Dekan

Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Sebelas Maret

Surakarta

2. Bapak Dr.rer.nat. Saptono Hadi, S.Si., M.Si., Apt. selaku Kepala Program

Studi S1 Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam

Universitas Sebelas Maret Surakarta

3. Bapak Adi Yugatama, S.Farm., M.Sc., Apt. selaku pembimbing I atas

bimbingannya selama penelitian dan penyusunan skripsi

4. Ibu Sholichah Rohmani, S.Farm., M.Sc., Apt. selaku pembimbing II atas

bimbingannya selama penelitian dan penyusunan skripsi

5. Bapak Fea Prihapsara, S.Farm., M.Sc., Apt. selaku pembimbing akademis atas

segala bimbingannya

6. Ketua Laboratorium Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan

Alam Universitas Sebelas Maret Surakarta

7. Bapak dan Ibu dosen Program Studi S1 Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu

Pengetahuan Alam Universitas Sebelas Maret Surakarta

8. Mbak Siti dan Mbak Indah selaku laboran Laboratorium Farmasi serta Mas

Anton selaku admin Prodi S1 Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu

Pengetahuan Alam Universitas Sebelas Maret Surakarta

9. Orang tua saya yang telah memberikan kasih sayang, doa serta dukungan moral

dan materi kepada saya

10. Kakak dan adik saya yaitu Hesti Pratiwi dan Ignes Anisa Agustina yang telah

memberi dukungan dan doanya kepada saya

vii

11. Indah, Andin, Fatim, Ulfa, Trias atas bantuan dan dukungannya selama

pelaksanaan skripsi

12. Angga, Bela, Erwin, Aya, Rara, Titi dan Andre atas bantuan dan diskusinya

selama penelitian

13. Teman-Teman seperjuangan S1 Farmasi angkatan pertama (2013) serta

berbagai pihak yang telah banyak membantu

Penulis menyadari bahwa banyak kekurangan dalam penulisan skripsi ini. Oleh

karena itu, penulis mengharapkan kritik dan saran dari berbagai pihak untuk

menyempurnakannya. Penulis berharap semoga skripsi ini bermanfaat bagi seluruh

pihak yang telah berkenan membaca.

Surakarta, 18 September 2017

Penulis

viii

DAFTAR ISI

HALAMAN SAMPUL ............................................................................................ i

HALAMAN PENGESAHAN ................................................................................. ii

PERNYATAAN ..................................................................................................... iii

ABSTRAK ............................................................................................................. iv

ABSTRACT ............................................................................................................ v

KATA PENGANTAR ........................................................................................... vi

DAFTAR ISI ........................................................................................................ viii

DAFTAR TABEL .................................................................................................. xi

DAFTAR GAMBAR ............................................................................................ xii

DAFTAR LAMPIRAN ........................................................................................ xiii

DAFTAR SINGKATAN ..................................................................................... xiv

BAB I PENDAHULUAN ...................................................................................... 1

A. Latar Belakang Masalah ....................................................................... 1

B. Rumusan Masalah ................................................................................ 3

C. Tujuan Penelitian.................................................................................. 3

D. Manfaat Penelitian................................................................................ 3

BAB II LANDASAN TEORI ................................................................................. 4

A. Tinjauan Pustaka .................................................................................. 4

1. Lengkuas.......................................................................................... 4

2. Eugenol ............................................................................................ 5

3. Ekstraksi .......................................................................................... 7

4. Salep ................................................................................................ 8

5. Spektrofotometri UV-Vis .............................................................. 11

6. Validasi Metode............................................................................. 18

ix

B. Kerangka Pemikiran ........................................................................... 22

C. Hipotesis ............................................................................................. 23

BAB III METODOLOGI PENELITIAN.............................................................. 24

A. Metode Penelitian ............................................................................... 24

B. Waktu dan Tempat Penelitian ........................................................... 24

C. Alat dan Bahan ................................................................................... 24

D. Prosedur Penelitian ............................................................................. 25

1. Pengumpulan dan Determinasi Tanaman ...................................... 25

2. Pembuatan Ekstrak Etanol Rimpang Lengkuas ............................ 25

3. Uji Kualitatif Ekstrak Etanol Rimpang Lengkuas ......................... 25

4. Pembuatan Salep Ekstrak Etanol Rimpang Lengkuas ................... 26

5. Penentuan Panjang Gelombang Maksimum Eugenol ................... 26

6. Proses Pemisahan Eugenol dari Sampel ........................................ 27

7. Validasi Metode............................................................................. 27

8. Penentuan Kadar Eugenol dalam Salep Ekstrak Etanol Rimpang

Lengkuas........................................................................................ 29

E. Pengumpulan dan Teknik Analisis Data ............................................ 30

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN .............................................................. 31

A. Determinasi Tanaman ........................................................................ 31

B. Hasil Pembuatan Ekstrak Etanol Rimpang Lengkuas ........................ 31

C. Analisis Kualitatif Ekstrak Etanol Rimpang Lengkuas...................... 33

D. Hasil Formulasi Salep Ekstrak Etanol Rimpang Lengkuas ............... 35

E. Penentuan Panjang Gelombang Maksimum Eugenol ........................ 36

F. Hasil Pemisahan Eugenol dari Salep Ekstrak Etanol Rimpang

Lengkuas ............................................................................................ 37

x

G. Validasi Metode Analisis ................................................................... 39

1. Linearitas dan Rentang .................................................................. 39

2. Presisi ............................................................................................ 40

3. Akurasi .......................................................................................... 41

4. LOD dan LOQ ............................................................................... 42

H. Hasil Penentuan Kadar Eugenol dalam Salep Ekstrak Etanol Rimpang

Lengkuas ............................................................................................ 43

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ................................................................ 45

A. Kesimpulan......................................................................................... 45

B. Saran ................................................................................................... 45

DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 46

LAMPIRAN .......................................................................................................... 51

xi

DAFTAR TABEL

Tabel 1. Kriteria penerimaan presisi (%RSD) ..................................................... 20

Tabel 2. Kriteria penerimaan rentang recovery ..................................................... 21

Tabel 3. Formula salep ekstrak etanol rimpang lengkuas 10% ............................. 26

Tabel 4. Hasil pemeriksaan profil KLT ekstrak etanol rimpang lengkuas ........... 34

Tabel 5. Hasil uji presisi........................................................................................ 40

Tabel 6. Hasil uji akurasi ...................................................................................... 42

Tabel 7. Hasil perhitungan kandungan eugenol dalam salep ekstrak etanol

rimpang lengkuas .................................................................................... 44

xii

DAFTAR GAMBAR

Gambar 1. Rimpang lengkuas ................................................................................ 4

Gambar 2. Struktur kimia eugenol ......................................................................... 5

Gambar 3. Spektrum elektromagnetik ................................................................. 11

Gambar 4. Spektrofotometer konvensional.......................................................... 14

Gambar 5. Spektrofotometer dioda array ............................................................. 14

Gambar 6. Kromatogram ekstrak etanol rimpang lengkuas (A) dan standar

pembanding (B) .................................................................................. 34

Gambar 7. Spektra panjang gelombang eugenol.................................................. 36

Gambar 8. Pembentukan kalium eugenolat melalui reaksi antara eugenol dengan

KOH ................................................................................................... 38

Gambar 9. Kurva persamaan linier ...................................................................... 39

Gambar 10. Kurva kalibrasi dengan LOD dan LOQ ........................................... 43

xiii

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Hasil Determinasi Rimpang Lengkuas (Alpinia galanga L. Willd) . 52

Lampiran 2. Certificate of Analysis Eugenol Standar ........................................... 53

Lampiran 3. Hasil Ekstrak Etanol Rimpang Lengkuas ......................................... 54

Lampiran 4. Hasil Salep Ekstrak Etanol Rimpang Lengkuas ............................... 55

Lampiran 5. Data Pengambilan Bahan dan Perhitungan Konsentrasi Larutan

Standar ............................................................................................. 56

Lampiran 6. Skema Proses Pemisahan Eugenol dari Salep Ekstrak Etanol

Rimpang Lengkuas .......................................................................... 57

Lampiran 7. Perhitungan Regresi Linier pada Uji Linearitas ............................... 58

Lampiran 8. Data Hasil Uji Presisi (Repeatability dan Intermediate Precision) .. 59

Lampiran 9. Data Hasil Uji Akurasi ..................................................................... 61

Lampiran 10. Hasil Perhitungan LOD dan LOQ .................................................. 62

Lampiran 11. Perhitungan Kandungan Eugenol dalam Salep Ekstrak Etanol

Rimpang Lengkuas .......................................................................... 63

Lampiran 12. Perhitungan Kadar Eugenol yang Sebenarnya ............................... 68

Lampiran 13. Dokumentasi Penelitian .................................................................. 69

xiv

DAFTAR SINGKATAN

AOAC = Association of Official Analytical Chemists

CV = Coefficient Variation

ICH = International Conference on Harmonization

KLT = Kromatografi Lapis Tipis

LLE = Liquid-Liquid Extraction

LOD = Limit of Detection

LOQ = Limit of Quantification

Rf = Retardation factor

RSD = Relative Standard Deviation

SD = Standard Deviation

USP = United States Pharmacopeia

UV = Ultraviolet

VIS = Visibel/cahaya tampak