p4-penetapan kadar protein secara biuret
Post on 26-Oct-2015
325 Views
Preview:
DESCRIPTION
TRANSCRIPT
PRAKTIKUM FARMASI BIOKIMIA
P 2PENETAPAN KADAR PROTEIN
SECARA BIURET
TUJUAN
Mahasiswa dapat menetapkan kadar protein dengan metode biuret
DASAR TEORI
Penentuan kadar protein secara Biuret berdasarkan atas pengukuran serapan cahaya oleh ikatan kompleks yang berwarna ungu. Ini terjadi apabila protein bereaksi dengan tembaga dalam lingkungan alkali.
Pelajari . . .
Protein…?Memahami mekanisme reaksi….?Metode analisis kolorimetri…?Spektrofotometri visibel…?
mekanismenya?Manfaat menetapkan kadar protein
dalam dunia medis……?
ALAT & BAHANAlat :o Tabung Reaksio PipetTteteso Spuit Injeksi
1ml&5mlo Rak Tabung Reaksio Gelas Ukur
Bahan:o Lar. Standar
Proteino Pereaksi Biureto Albumin(Putih
Telur)o NaOH 3 %o Aquadest
CARA KERJA• Reagen Biuret
Larutan 1,5 gr CuSO4 5H2O dalam 500ml air
Larutan 1,5 gr CuSO4 5H2O dalam 500ml air
+ 300ml NaOH 10% , kocok+ 300ml NaOH 10% , kocok
Ad air sampai TandaAd air sampai Tanda
Lar. Standar Protein
Timbang albumin murni 1 gramTimbang albumin murni 1 gram
Larutkan dengan air ad 100mlLarutkan dengan air ad 100ml
+ beberapa tetes NaOH 3% untuk mempermudah melarutkan+ beberapa tetes NaOH 3% untuk mempermudah melarutkan
Uji Kadar
Ambil Lar.Standar 0,1;0,3;0,4;0,5;0,7 ml + Aquadest ad 1ml
Ambil Lar.Standar 0,1;0,3;0,4;0,5;0,7 ml + Aquadest ad 1ml
+ Reagen Biuret 4ml , vortex+ Reagen Biuret 4ml , vortex
Biarkan 30 menit dan ukur serapannya pada Panjang Gelombang 540nmBiarkan 30 menit dan ukur serapannya pada Panjang Gelombang 540nm
• Sampel
• Blanko
1 ml sampel + 4ml Reagen Biuret , Vortex
Diamkan 30 menit, Baca serapan pada panjang gelombang 540nm
1ml Aquadest + 4ml Reagen Biuret , vortex dan diamkan 30 menit
Ukur serapan pada panjang gelombang 540 nm
PERHITUNGAN
y = bx+ay = absorbansi x = Kadar
• Perhitungan kadarx = y – a x f.pengenceran
b
top related