metode f

Post on 12-Jan-2016

216 Views

Category:

Documents

4 Downloads

Preview:

Click to see full reader

DESCRIPTION

pkm

TRANSCRIPT

Metode F

1. Pindahkan DNA ke dalam sebuah container yang berisi kurang dari seperempat volume total2. Tambahkan sodium asetat beffer sebanyak 1/10 volume DNA untuk menyeimbangkan

konsentrasi ion3. Tambahkan 2-3 volume etanol dingin 100% dan letakkan sampel pada freezer ber suhu -20⁰C

selama 1 jam4. Sentrifugasi sampel selama 15 menit pada kecepatan tertinggi (12000-13000 rpm) pada

microcentrifuge bersuhu 4⁰C5. Pisahkan supernatant sebanyak mungkin dengan pipet 1 mL atau glass capillary tube. Hati-hati

agar pellet tidak terganggu. Jika berhasil mengambil seluruh supernatannya skip langkah 66. Jika tidak re-centrifuge, lalu ambil sisa supernatant pipetnya 200 µl7. Tambahkan 250 µl etanol dingin 70%8. Sentrifuge selama 5 menit dengan kecepatan maksimal9. Buang supernatant dengan pipet 200 µl, uapkan sisa etanol pada waterbath bersuhu 37⁰C.

jangan panaskan terlalu lama karena dapat mempersulit dalam meresuspend pellet10. Resuspend pellet pada desired volume air atau TE buffer.

top related