AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAN BIOAUTOGRAFI FRAKSI

NONPOLAR EKSTRAK ETANOL DAUN SIRSAK (Annona

muricata L.) TERHADAP Klebsiella pneumoniae DAN

Staphylococous epidermidis

SKRIPSI

Oleh:

RISKA UMAMI DWI SEPTIANINGRUM

K 100 080 181

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA

SURAKARTA

2012

ii

AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAN BIOAUTOGRAFI FRAKSI

NONPOLAR EKSTRAK ETANOL DAUN SIRSAK (Annona

muricata L.) TERHADAP Klebsiella pneumoniae DAN

Staphylococcus epidermidis

SKRIPSI

Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai

derajat sarjana farmasi (S.Farm) pada fakultas farmasi

Universitas Muhammadiyah Surakarta

di Surakarta

Oleh:

RISKA UMAMI DWI SEPTIANINGRUM

K 100 080 181

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA

SURAKARTA

2012

iii

iv

MOTTO

“ Sesungguhnya sesudah kesulitan itu ada kemudahan. Maka apabila

kamu telah selesai dari satu urusan, kerjakanlah dengan sungguh-

sungguh urusan yang lain.”

(QS. Alam Naysrah : 6-7)

Serendah-rendah ilmu adalah yang berhenti di lidah, dan yang paling

tinggi adalah yang tampak di anggota-anggota badan.

(„Ali bin Abi Thalib)

Bila kau menginginkan pengetahuan sebagaimana kau menginginkan

udara, kau akan mendapatkannya.

(Socrates)

Jika orang lain bisa untuk mengerjakan sesuatu dan berhasil

mendapatkan sesuatu, maka kita harus optimis bahwa kita pasti

juga bisa untuk mendapatkanya.

(Penulis)

v

PERSEMBAHAN

Kupersembahkan karya sederhana ini teruntuk:

Ibunda (Sri Widayati) dan Ayahanda (Marwoto) tercinta Sebagai wujud rasa hormat, bakti, terima kasih, serta kasih sayangku kepadamu. Engkau telah memberiku doa, kesabaran, pengorbanan dan motivasi yang tak pernah letih dan selalu menuntun dengan cinta serta kasih sayang. Keluarga kecil kakakku tersayang mas Riki, mbak Yani serta keponakan cantikku Bilqis Dafila Meca yang selalu memberiku motivasi dan rasa kasih sayang yang tiada henti. Seluruh keluarga besarku dan Septian Ilham Yulyansyah yang senantiasa memberikan motivasi , perhatian dan kasih sayang .

Almameter Universitas Muhammadiyah Surakarta

vi

vii

KATA PENGANTAR

Assalamu`alaikum warohmatullahi wabarokatuh

Alhamdulillahirobbil`alamin, puji syukur penulis panjatkan hanya untuk-

Mu ya Allah atas segala rahmat, nikmat, barokah, dan kekuatan yang tak

terhingga untukku untuk terus melangkah.

Alhamdulillah, penulis telah dapat menyelesaikan skripsi dengan judul

aktivitas antibakteri fraksi nonpolar ekstrak etanol daun sirsak (Annona

muricata L.) Terhadap Klebsiella pneumoniae dan Staphylococcus

epidermidis sebagai salah satu syarat mencapai derajat sarjana Farmasi (S. Farm)

Program Studi Ilmu Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah

Surakarta.

Penulis menyampaikan terima kasih sebesar-besarnya kepada :

1. Bapak Dr. Muhammad Da'i, M.Si., Apt., Dekan Fakultas Farmasi Universitas

Muhammadiyah Surakarta.

2. Bapak Dr. Haryoto, M. Sc. Dosen Pembimbing I yang dengan penuh kesabaran

memberikan bimbingan, nasihat, pengarahan, dan petunjuk, serta perhatian

selama penelitian, penyusunan, dan penyelesaian skripsi ini.

3. Bapak Peni Indrayudha, M.,Biotech., Apt. Dosen pembimbing II yang telah

meluangkan waktu dan kesempatan untuk memberikan bimbingan nasihat,

pengarahan, dan petunjuk serta perhatian selama penelitian, penyusunan, dan

penyelesaian skripsi ini.

viii

4. Ibu Ika Trisharyanti D.K., M.Farm., Apt, Reviewer yang memberikan

pengarahan, petunjuk, serta perhatian selama penyusunan, dan penyelesaian

usulan skripsi.

5. Ibu Ratna Yuliani, M.Biotech. St dan Bapak Dr. Muhtadi, M.Si Dosen penguji

yang telah banyak memberi masukan dan saran.

6. Bapak dan Ibu dosen beserta seluruh staf dan karyawan Fakultas Farmasi UMS

yang telah banyak membantu.

7. Teman terbaik satu tim yang telah dengan setia melewati berbagai suka duka

bersama selama penelitian dan penyusunan skripsi : Yuli, Wikan, dan

Kosworo, serta semua anak bimbing bapak Haryoto.

8. Sahabat-sahabat tersayang : Yennie, Lisa, Puput, Nuvia, Bety, Ira dan Esty

dengan penuh perhatian selalu memberikan semangat bagi penulis.

9. Sahabat-sahabat satu perjuangan serta teman-teman kelas D angkatan 2008 atas

semangatnya..

Akhir kata semoga apa yang penulis sajikan bisa bermanfaat bagi

perkembangan dunia ilmu pengetahuan khususnya di bidang kefarmasian.

Wassalamu’alaikum Wr. Wb.

Surakarta, 18 januari 2012

Penulis

ix

DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN JUDUL ......................................................................................... i

HALAMAN PENGAJUAN ............................................................................... ii

HALAMAN PENGESAHAN ........................................................................... iii

MOTTO ............................................................................................................ iv

PERSEMBAHAN ............................................................................................ v

DEKLARASI .................................................................................................... vi

KATA PENGANTAR ...................................................................................... vii

DAFTAR ISI ..................................................................................................... ix

DAFTAR TABEL ............................................................................................. xii

DAFTAR GAMBAR ........................................................................................ xiii

DAFTAR LAMPIRAN ..................................................................................... xiv

DAFTAR SINGKATAN .................................................................................. xv

INTISARI .......................................................................................................... xvi

BAB I. PENDAHULUAN ................................................................................ 1

A. Latar Belakang Masalah ............................................................... 1

B. Perumusan Masalah ..................................................................... 2

C. Tujuan Penelitian ......................................................................... 3

D. Tinjauan Pustaka .......................................................................... 3

1. Daun Sirsak (Annona muricata L.) ........................................ 3

2. Metode Penyarian ................................................................... 4

3. Klebsiella pneunomiae ............................................................ 4

4. Staphylococcus epidermidis ................................................... 5

5. Fraksinasi ............................................................................... 6

6. Uji Aktivitas Antibakteri ........................................................ 6

7. Kromatografi Lapis Tipis ....................................................... 7

x

8. Bioautografi ............................................................................ 7

E. Landasan Teori ............................................................................. 8

F. Hipotesi…………………………………………………………..

BAB II. CARA PENELITIAN ......................................................................... 9

A. Metode Penelitian ......................................................................... 9

B. Variabel Penelitian ....................................................................... 9

C. Bahan dan Alat ............................................................................. 9

D. Tempat Penelitian ……………………………………………... 10

E. Jalannya Penelitian ....................................................................... 11

1. Determinasi Tanaman ............................................................ 11

2. Pengumpulan Bahan ............................................................... 11

3. Ekstraksi ................................................................................ 11

4. Fraksinasi ………………………………………………….. 11

5. Sterilisasi Alat dan Bahan ...................................................... 12

6. Pembuatan Media ................................................................... 12

7. Pemeliharaan Bakteri ............................................................. 12

8. Pewarnaan bakteri ………………………………………… 13

9. Identifikasi Bakteri ……………………………………….. 13

10. Penyiapan Stok Bakteri .......................................................... 13

11. Pembuatan Seri Konsentrasi .................................................. 14

12. Pembuatan Kontrol ................................................................. 15

13. Uji Antibakteri Metode Dilusi Padat ..................................... 15

14. Uji Kromatografi Lapis Tipis ................................................. 15

15. Uji Bioautografi ..................................................................... 15

F. Analisis Data…………………………………………………… 16

BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN .......................................................... 17

A. Determinasi Tanaman .................................................................. 17

B. Ekstraksi ....................................................................................... 17

C. Fraksinasi ……………………………………………………… 18

D. Identifikasi Bakteri ....................................................................... 19

E. Uji Aktivitas Antibakteri .............................................................. 22

7

8

8

9

9

9

9

10

11

11

11

11

11

12

12

12

13

13

13

14

15

15

15

15

16

17

17

17

18

19

22

xi

F. Analisis Kualitatif Fraksi Nonpolar Ekstrak Etanol Daun Sirsak 25

G. Uji Bioautografi ........................................................................... 28

BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN ......................................................... 32

A. Kesimpulan .................................................................................. 32

B. Saran ............................................................................................. 32

DAFTAR PUSTAKA ....................................................................................... 33

LAMPIRAN ...................................................................................................... 36

xii

DAFTAR TABEL

Halaman

Tabel 1. Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi Nonpolar Ekstrak

Etanol Daun Sirsak terhadap K. pneunomiae ....................................... 23

Tabel 2. Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi Nonpolar Ekstrak

Etanol Daun Sirsak terhadap S. epidermidis ....................................... 24

Tabel 3. Keterangan Hasil Analisis KLT Fraksi Nonpolar Ekstrak

Etanol Daun Sirsak ............................................................................... 27

xiii

DAFTAR GAMBAR

Halaman

Gambar 1. Skema Pembuatan Seri Konsentrasi Fraksi Nonpolar Ekstrak

Etanol Daun Sirsak ..................................................................

Gambar 2. Gambar KLT fraksinasi ...........................................................

Gambar 3. Hasil Pengecatan Gram ... .............................................................

Gambar 4. Hasil Test Manitol terhadap S. epidermidis .. ...............................

Gambar 5. Hasil Test KIA, LIA, MIO terhadap K. Pneunomiae ...............

Gambar 6. Hasil Uji Antibakteri Fraksi Nonpolar Ekstrak Etanol Daun

Sirsak terhadap K. pneunomiae .. .................................................

Gambar 7. Hasil Uji Antibakteri Fraksi Nonpolar Ekstrak Etanol Daun

Sirsak terhadap S. epidermidis . ....................................................

Gambar 8. Hasil KLT Fraksi Nonpolar Ekstrak Etanol Daun Sirsak ............

Gambar 9. Hasil Uji Bioautografi Fraksi Nonpolar Ekstrak Etanol Daun

Sirih terhadap K. pneunomiae .. ....................................................

Gambar 10. Hasil Uji Bioautografi Fraksi Nonpolar Ekstrak Etanol Daun

Sirih terhadap S. epidermidis ………………........................... 30

Gambar 11. Struktur Senyawa Antibakteri Dalam Fraksi Nonpolar Ekstrak

Etanol Daun Sirsak……………………………………………… 31

14

18

19

20

21

23

23

24

26

30

xiv

DAFTAR LAMPIRAN

Halaman

Lampiran 1. Surat Determinasi ......................................................................

Lampiran 2. Surat Bakteri Staphylococcus epidermidis .................................

Lampiran 3. Surat Bakteri Klebsiella pneunomiae .................................

Lampiran 4. Perhitungan ...............................................................................

Lampiran 5. Komposisi Media Bakteri ........................................................

Lampiran 6. Komposisi Cat Gram .................................................................

Lampiran 7. Pembuatan reagen …………………………………………

Lampiran 8. Foto Daun Sirsak.............................................................

Lampiran 9. Foto Alat........................................................................

37

39

40

42

46

47

48

49

50

xv

DAFTAR SINGKATAN

BHI : Brain Heart Infusion

CFU : Colony Forming Unit

CMC-Na : Carboxyl Methyl Cellulosa Natrium

KBM : Kadar Bunuh Minimum

KIA : Kligler Iron Agar

KLT : Kromatografi Lapis Tipis

K.pneunomiae : Klebsiella pneunomiae

LAF : Laminar Air Flow

LIA : Lysine Iron agar

MH : Mueller Hinton

MIO : Motility Indol Ornithine

MSA : Mannitol Salt Agar

Rf : Retardation factor

SDA : Sabouroud Dextrose Agar

S. epidermidis : Staphylococcus epidermidis

UV : Ultraviolet

xvi

INTISARI

Famili dari Annonaceae mengandung senyawa asetogenin yang

toksisitasnya tinggi pada sel manusia, bakteri, virus dan serangga. Penelitian ini

bertujuan untuk mengetahui Kadar Bunuh Minimum (KBM) fraksi nonpolar

ekstrak etanol daun sirsak (Annona muricata .L) terhadap Klebsiella pneumoniae

dan Staphylococcus epidermidis serta mengetahui golongan senyawa yang

terdapat dalam fraksi nonpolar ekstrak etanol daun sirsak (Annona muricata .L).

Daun sirsak diekstraksi dengan etanol 96% secara maserasi. Fraksi

nonpolar ekstrak etanol daun sirsak diperoleh dengan cara fraksinasi

menggunakan Kromatografi Cair Vakum (KCV). Uji aktivitas antimikroba

menggunakan metode dilusi padat. Seri konsentrasi ekstrak yang digunakan

adalah 2,5% b/v, 3% b/v, 3,5% b/v, 4% b/v, dan 4,5% b/v. Kromatografi Lapis

Tipis menggunakan fase diam silika gel GF254 dan fase gerak heksan:etilasetat

(7:3) untuk identifikasi golongan senyawa dalam ekstrak. Metode bioautografi

digunakan untuk mengetahui golongan senyawa dalam ekstrak yang memiliki

aktivitas antibakteri.

Hasil penelitian menunjukkan bahwa fraksi nonpolar ekstrak etanol daun

sirsak mempunyai aktivitas antimikroba terhadap Klebsiella pneumoniae dan

Staphylococcus epidermidis dengan Kadar Bunuh Minimum berturut-turut sebesar

3,5% b/v dan 4% b/v. Golongan senyawa kimia yang terkandung dalam ekstrak

tersebut adalah saponin, flavonoid, polifenol, antrakuinon, triterpenoid. Golongan

senyawa dari fraksi nonpolar ekstrak etanol daun sirsak yang memiliki aktivitas

antibakteri terhadap K. pneumoniae kemungkinan merupakan senyawa golongan

polifenol dan flavonoid, sedangkan golongan senyawa yang memiliki aktivitas

antibakteri terhadap S. epidermidis kemungkinan merupakan senyawa golongan

flavonoid, antron, antranol dan polifenol.

Kata kunci : Annona muricata Linn, Klebsiella pneumoniae, Staphylococcus

epidermidis, ekstrak etanol, fraksi nonpolar, KLT, bioautografi.