90759444 kromatografi lapis tipis laporan

7/22/2019 90759444 Kromatografi Lapis Tipis Laporan

1/9

KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS

LAPORAN

PRAKTIKUM DASAR DASAR PEMISAHAN ANALITIK

PERCOBAAN V


OLEH :

NAMA : RADEN ALIP RAHARJO

STAMBUK : A1C4 08027

KELOMPOK :

PROGRAM STUDI : PENDIDIKAN KIMIA

ASISTEN : TIDAK DICANTUMKAN

LABORATORIUM PENGEMBANGAN UNIT KIMIA

FAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKAN

UNIVERSITAS HALUOLEO

KENDARI

2010

http://2.bp.blogspot.com/-RAupdvlVIEw/TVZUW4l3T6I/AAAAAAAAAEY/ttss959_3Fg/s1600/sapi.png


2/9

I. Tujuan dan Prinsip Percobaan

A. Tujuan Praktikum

a. Dapat mengetahui dan memahami tehnik pemisahan dengan metode kromatografi lapis tipis.

b. Dapat melakukan pemisahan logamlogam Pb2+, Ag+, Mn2+, Hg2 atau protein/ karbohidrat

dalam campuran larutan dengan tehnik kromatografi lapis tipis.

Dapat menentukan Rf komponen komponen yang dipisahkan dan mengidentifikasi zat yang

dipisahkan

B. Prinsip Percobaan

Pemisahan dengan tehnik kromatografi lapis tipis didasarkan pada adsorpsi larutan (fase gerakatau eluennya) terhadap adsorbens yang di gunakan, dimana Adsorbens dilapiskan pada lempeng

kaca yang bertindak sebagai penunjang fase diamnya.

II. Teori

Kromatografi lapis tipis (KLT) adalah suatu tehnik yang sederhana dan banyak digunakan.Metode ini menggunakan lempeng kaca atau lembaran plastik yang ditutupi penyerap untuk

lapisan tipis dan kering bentuk silika gel, alomina, selulosa dan polianida. Untuk menotolkan

larutan cuplikan pada lempeng kaca, pada dasarnya dgunakan mikro pipet/ pipa kapiler. Setelah

itu, bagian bawah dari lempeng dicelup dalam larutan pengulsi di dalam wadah yang tertutup(Chamber) (Rudi, 2010)

Pemisahan campuran dengan cara kromatografi didasarkan pada perbedaan kecepatan merambatantara partikel-partikel zat yang bercampur pada medium tertentu. Dalam kehidupan sehari-hari

pemisahan secara kromatografi dapat kita temui pada rembesan air pada dinding yang

menghasilkan garis-garis dengan jarak ternentu.

Tinta hitam merupakan campuran beberapa warna. Kita dapat memisahkan campuran warnatersebut dengan cara kromatografi. Pemisahan warna tinta dapat dilakukan seperti pada Gambar

18, dengan tahap-tahap sebagai berikut:

- Tinta diteteskan pada ujung kertas saring (1,5 cm dari ujung)

- Tinta dibiarkan hingga mengering

- Ujung kertas saring dimasukkan dalam air sedalam 1 cm dan kertas saring dipasang tegak


3/9

- Air akan merambat naik

- Tinta akan ikut merambat naik dan memisah menjadi beberapa

Warna ( Sukarmin , 2004)

Kromatografi adalah Suatu metoda untuk separasi yang menyangkut komponen suatu contoh di

mana komponen dibagi-bagikan antara dua tahap, salah satu yang mana adalah keperluan selagi

gerak yang lain . Di dalam gas chromatography adalah gas mengangsur suatu cairan atau tahapkeperluan padat. Di dalam cairan chromatography adalah campuran cairan pindah gerakkan

melalui cairan yang lain , suatu padat, atau suatu 'gel' agar. Mekanisme separasi komponen

mungkin adalah adsorpsi, daya larut diferensial, ion-exchange, penyebaran/perembesan, atau

mekanisme lain (David. 2001)

adsorpsi Chromatography telah membantu untuk menandai komposisi kelompok minyak mentah

dan produk hidrokarbon sejak permulaan abad ini. Jenis dan sanak keluarga jumlah kelashidrokarbon tertentu di (dalam) acuan/matriks dapat telah a efek dalam pada atas pencapaian dan

mutu dari produk hidrokarbon dan dua orang metoda test standard telah digunakan sebagian

besar dari tahun ke tahun ( ASTM D2007, ASTM D4124). adsorpsi indikator Yang berpijar (

FIA) metoda ( ASTM D1319) telah melayani untuk di atas 30 tahun sebagai metoda pejabat dariminyak tanah industri untuk mengukur yang mengandung parafin, olefinic, dan isi bahan bakar

pancaran dan bensin berbau harum. Teknik terdiri dari dalam pemindahan a mencicip di bawah

iso-propanol memaksa melalui suatu kolom tanah kerikil 'gel' agar-agar ramai; sesak di (dalam)kehadiran tentang indikator berpijar dikhususkan untuk masing-masing keluarga hidrokarbon. Di

samping penggunaan tersebar luas nya, adsorpsi indikator berpijar mempunyai banyak ( Speight,

2006)

Penentuan jumlah komponen senyawa dapat dideteksi dengan kromatografi lapis tipis (KLT)

dengan menggunakan plat KLT yang sudah siap pakai. Terjadinya pemisahan komponen-

komponen pada KLT dengan Rf tertentu dapat dijadikan sebagai panduan untuk memisahkankomponen kimia tersebut dengan menggunakan kolom kromatografi dan sebagai fasa diam dapat

digunakan silika gel dan eluen yang digunakan berdasarkan basil yang diperoleh dari KLT dan

akan lebih baik kalau kepolaraan eluen pada kolom kromatografi sedikit dibawah kepolaraneluen pada KLT (Lenny, 2006)

Pada hakekatnya KLT merupakan metoda kromatografi cair yang melibatkan dua fasa yaitu fasa

diam dan fasa gerak. Fasa geraknya berupa

campuran pelarut pengembang dan fasa diamnya dapat berupa serbuk halus yang berfungsi

sebagai permukaan penyerap (kromatografi cair-padat) atau berfungsi sebagai penyangga untuk

lapisan zat cair (kromatografi cair-cair). Fasa diam pada KLT sering disebut penyerap walaupunberfungsi sebagai penyangga untuk zat cair di dalam sistem kromatografi cair-cair. Hampir

segala macam serbuk dapat dipakai sebagai penyerap pada KLT, contohnya silika gel (asam

silikat), alumina (aluminium oksida), kiselgur (tanah diatomae) dan selulosa. Silika gelmerupakan penyerap paling banyak dipakai dalam KLT (Iskandar, 2007)


4/9

III. Metode Praktikum

A. Alat dan bahan yang digunakan

Alat alat yang digunakan pada praktikum ini adalah

a. Cahmber 2 buah

b. Plat KLT

c. Slinder Kaca

d. Pipet volume 25 mL

e. Pipet Tetes

f. Penotol 3 batang

g. Filler atau Sprayer

h. Mistar

i. Pensil

j. Benang

Bahan-bahan yang digunakan pada praktikum ini adalah

a. Untuk Pemisahan ion Logam

Cuplikan yang mengandung ionion Pb2+, Mn2+, Hg2+

Larutan standar dalam bentuk klorida: Pb2+, Ag+, Mn2+, Hg2 (4 mg/mL)

Fase gerak (campuran Etil aseto asetat 10% + Butanol 75% + aquades 15% + asam asetat glacial

sampai pH 3,55 atau Piridin + aquades (10:1).

Penampak noda larutan K2CrO4 1 M (dielusi ulang)

b. Untuk Pemisahan Karbohidrat

Cuplikan yang mengandung campuran karbohidrat (glukosa, fruktosa, laktosa, dan sukrosa)


5/9

Larutan standar karbohidrat yang akan dipisahkan masingmasing dengan konsentrasi 4 mg/mL

Larutan penampak: asam sulfat 10% (disemprot)

Larutan eluen, campuran aseton + air (9:1)

B. Prosedur kerja

- ditotolkan pada plat KLT yang telah diberi batas pada masingmasing bagian

- di ikatkan benang bagian tengah atas pada kertas selulosa

- di masukkan dalam wadah kromatografi chamber yang berisi campuran etil aseto asetat 10% +Butanol 75% + aquades 15% + asam asetat glacial sampai pH 3,5 5 atau Piridin + aquades

(10:1) sebagai eluen


6/9

- di elusi, hingga gerak eluen mencapai garis batas atas (Perhatian!!..kertas yang tercelup aluen

dibawah garis batas bawah plat)

- dikeringkan di udara bebas atau dalam oven pada suhu 100oC selama 10 menit (atau hairdryer

jika ada)

- di masukkan lagi dalam wadah kromatografi ke dua yang berisi larutan K2CrO4 1 M, sebagaipenampak noda (dielusi ulang)

- dikeringkan plat dengan cara diovenkan atau diudara bebas.

- .Di amati bentuk noda (spot) yang terbentuk.

- di tentukan nilai Rf dari masingmasing komponen yang terpisah.

Keterangan: Dilakukan prosedur yang sama untuk pemisahan karbohidrat, dimana yang menjadi

larutan eluennya, campuran aseton + air (9:1) dan larutan penampak asam sulfat 10%

(disemprot).

IV. Hasil Pengamatan

A. Perhitungan

No Perlakuan Pengamatan

1 Pb2+ Hitam

2 Mn2+ Hitam

3 Hg2+ Hitam

4 Sampel campuran

5 Glukosa Merah Muda

6 Maltosa Tidak Nampak

7 Laktosa Tidak Nampak

8 Sukrosa Ungu

Perhitungan untuk pemisahan logam


7/9

Rf Pb2+ = 6,9/7,9 = 0,87

Rf Mn2+ = 6,6/7,9 = 0,84

Rf Hg2+ = 6,5/7,9 = 0,82

Rf campuran = 7,0/7,9 = 0,88

Perhitungan untuk pemisahan karbohidrat

Rf glukosa = jarak gerak sampel/ jarak gerak pelarut

= 6,4/7,9

= 0,81

C. Pembahasan

Analisis kuantitatif dengan KLT ada dua macam. Yang pertama noda cuplikan setelah

dikembangkan diukur langsung luasnya atau kerapatannya (density). Secara manual ataumenggunakan alatalat yang disebut densitometer. Tehnik ini disebut evaluasi in one. Luas

atau kerapatan noda dibandingkan dengan kerapatan noda senyawa standar yang telah diketahui

konsentrasinya. Cara yang kedua, noda diambil dengan cara dikerok atau diisap dengan suatualat kemudian dilarutkan dalam suatu pelarut dan larutan terakhir diamati dengan spectrometer

UV vis atau ditimbang (gravimetric) setelah pelarut diuapkan. Cara gravimetric hanya dapat

dilakukan apabila jumlah cuplikan cukup besar. Cara ini tidak membutuhkan standar

pembanding

Pada percobaan ini, tehnik kromatografi lapis tipis yang digunakan adalah suatu plat tipis

(aluminium) yang berfungsinya untuk tempat berjalannya adsorbens sehingga proses migrasi

analit oleh solventnya bisa berjalan. Hal ini Inilah yang membedakan antara kromatografi kertasdengan kromatografi lapis tipis. Yang dimana pada KLT menggunakan plat tipis sedangkan pada

KK menggunakan kertas (lapisan selulosa) sehingga proses elusinya lebih lama (kira kira 10

20 menit lebih lama dari KLT). Perbedaan lainnya dari kedua kromatografi tersebut adalahpembentukan noda pada adsorbensnya dimana pada KLT noda yang dihasilkan lebih tajam


8/9

dibandingkan noda yang nampak dalam KK. Hal ini disebabkan pada KK penyusun dari

adsorbens berupa selulosa yang dapat mengikat air, sehingga ketika dielusi dengan suatu pelarut

atau fase gerak maka noda yang dihasilkan mengalami penyebaran akibat terdapatnya gugus OH dalam adsorbens yang masih tertingal dalam fase diamnya sehingga penampakan nodanya

terlihat lebih pudar dan bentuk nodanya tidak bulat. Sedangkan dalam KLT adsorbens yang

digunakan berupa slika gel (SiO2) yang tidak mengikat molekul air, sehingga noda yang terciptalebih terfokus dan tajam.

Pada percobaan ini, adsorbens yang digunakan bukan slika gel tetapi justru selulosa yang dilapisi

plat tipis (aluminuium). Dimana sifat adsorbens selulosa pada KLT mempunyai sifat sebagaipenukar ion, sehingga keadaan ini akan berdampak pada penampakan noda yang nantinya akan

diamati dalam KLT ini, dimana ion ion dalam sample dipertukarkan sehingga penentuan

komponen yang terpisah akan sulit di tentukan. Hal inilah yang menjadi salah satu penyebab

sampai tidak munculnya warna noda pada KLT dalam percobaan ini. Sedangkan faktor penyebablainnya disebut dengan faktor yang mempengaruhi nilai Rf pada KLT seperti kualitas adsorben,

ketebalan lapisan, kejenuhan ruang kromatografi, tehnik pengembangan (elusi), suhu, dan

kualitas pelarut.

Penentuan nilai Rf suatu standar analit pada KLT pada dasarnya sama dengan penentuan nilai Rf

dalam KK, dimana nilai Rf ditentukan dengan membandingkan jarak noda yang dihasilkan dari

migrasi solvent/ pelarutnya dengan jarak sample/ standar. Nilai Rf menyatakan ukuran dayapisah suatu zat dengan kromatografi planar (KK mapun KLT), dimana jika nilai Rfnya besar

berarti daya pisah zat yang dilakukan solvent (eluenya) maksimum sedangkan jika nilai Rfnya

kecil berarti daya pisah zat yang dilakukan solvent (eluenya) minimum. Tidak munculnya nodadalam percobaan kali ini dapat disebabkan oleh faktor faktor yang mempengaruhi nilai Rf

seperti diatas, akan tetapi ada juga kemungkinan lain misalnya noda yang tidak nampak,

sehingga untuk menampakkan noda tersebut harus direaksikan dengan reagen penampak warna

berupa ion logam transisi untuk membentuk kompleks, karena salah satu ciri senyawa kompleksadalah berwarna akibat adanya bilangan koordinasi dari atom pusatnya. Adapun untuk

identifikasi dan deteksi zat setelah terbentuknya noda dilakukan dengan beberapa cara misalnya;

planimetri, densitometri, spektrofotometri, dan fluorensis, dimana masingmasing alat tersebutmemeliki kelebihan dan kekurangan yang jika dijabarkan akan lebih panjang dan rumit karena

dihubungkan dengan proses penggunaanya.

Pada percobaan ini, didapatkan nilai Rf yang berbeda-beda dari tiap analit. Pada penentuan nilai

Rf pada ion logam, secara berturut-turut nilai Rf dari Pb2+, Mn2+, Hg2+, dan campuran adalah

0,87 , 0,84 , 0,82 , dan 0,88. Sedangkan pada penentuan nilai Rf dari karbohidrat yakni pada

glukosa didapatkan nilai Rf sebesarm0,81

V. Simpulan

Berdasarkan hasil pengamatan dan pembahasan dari percobaan diatas, maka dapat disimpulkansebagai berikut yakni Tehnik pemisahan dengan kromatografi lapis tipis merupakan tehnik


9/9

pemisahan kromatografi planar dimana zat zat dipisahkan berdasarkan perbedaan migrasi

solute/ zat terlarut antara dua fase (fase gerak dan fase diamnya). Dimana fase diamnya/

adsorbensnya dilapisi dengan plat tipis (aluminium) sebagai penunjang adsorbennya dan nilai Rfyang didapatkan adalah nilai Rf dari Pb2+, Mn2+, Hg2+, dan campuran adalah 0,87 , 0,84 , 0,82

, dan 0,88. Sedangkan pada penentuan nilai Rf dari karbohidrat yakni pada glukosa didapatkan

nilai Rf sebesarm0,81.

\

Daftar Pustaka

Iskandar, Yusuf. 2007. Karakteristik Zat Metabolit Sekunder Dalam Ekstrak Bunga Krisan

(Chrysanthemum cinerariaefolium) Sebagai Bahan Pembuatan Biopestisida.FMIPA. Semarang

Lide, David. 2001. Handbook of Chemistry And Physic. Copyright CRC Press LLC

Rudi,L. 2010. Penuntun Dasar-Dasar Pemisahan Analitik. Universitas Haluoleo. Kendari

Sofia, Lenny. 2006. Isolasi dan Uji Bioaktifitas Kandungan Kimia Utama Puding Merah dengan

Metoda Uji Brine Shrimp. USU Repository. Sumatera Utara

Speight, James. G. 2006. The Chemistry and Technology of Petroleum. Taylor & Francis Group,

LLC.

Sukarmin. 2004. Materi dan Perubahannya. Direktorat Pendidikan Menegah Kejuruan.

Direktorat Jendral Dasar dan Menegah. Departemen Pendidikan Nasional

90759444 kromatografi lapis tipis laporan

Documents