uji aktivitas anti aging tetrahidrokurkumin, …repository.ump.ac.id/4257/1/ani yupitawati -...
TRANSCRIPT
UJI AKTIVITAS ANTI AGING TETRAHIDROKURKUMIN,
EKSTRAK PEGAGAN (Centella asiatica), DAN KOMBINASI
TETRAHIDROKURKUMIN - EKSTRAK PEGAGAN
SKRIPSI
Diajukan sebagai salah satu syarat
untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi
ANI YUPITAWATI
1308010002
PROGRAM STUDI FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO
2017
UJI AKTIVITAS ANTI AGING ...,ANI YUPITAWATI, FARMASI, , UMP 2017
ii
UJI AKTIVITAS ANTI AGING ...,ANI YUPITAWATI, FARMASI, , UMP 2017
iii
UJI AKTIVITAS ANTI AGING ...,ANI YUPITAWATI, FARMASI, , UMP 2017
iv
UJI AKTIVITAS ANTI AGING ...,ANI YUPITAWATI, FARMASI, , UMP 2017
v
MOTTO
Herbal gardening is an amazing of the performing
pharmacist art. Soil, water, air. Read the Alchemy’s
word on organic chemistry. See the miracle of many
secondary metabolites that heal our ill. Keep a faint
dream in the sky. Silent stage. If there are instant
ways….
(Griswold & Yui)
UJI AKTIVITAS ANTI AGING ...,ANI YUPITAWATI, FARMASI, , UMP 2017
vi
HALAMAN PERSEMBAHAN
Skripsi ini saya persembahkan untuk:
Bapak Jatiman Atmowinoto
Ibu Tasmiyah
Emira
An Yupita Garden
UJI AKTIVITAS ANTI AGING ...,ANI YUPITAWATI, FARMASI, , UMP 2017
vii
KATA PENGANTAR
Puji syukur kepada Tuhan Yang Maha Esa, karena atas berkat dan rahmat-
Nya, dapat menyelesaikan skripsi ini dengan judul Uji Aktivitas Anti Aging
Tetrahydrocurcumin (THC), Ekstrak Pegagan (Centella asiatica), dan Kombinasi
THC Ekstrak Pegagan. Penulisan skripsi ini dilakukan dalam rangka memenuhi
salah satu syarat untuk mencapai gelar Sarjana Farmasi pada Program Studi S1
Farmasi Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
Penulis menyadari bahwa tanpa bantuan dan bimbingan dari berbagai pihak,
dari masa perkuliahan sampai pada penyusunan skripsi ini, sangatlah sulit untuk
menyelesaikan skripsi ini. Oleh karena itu, pada kesempatan ini penulis
mengucapkan terimakasih kepada yang terhormat:
(1) Dr. H. Syamsuhadi Irsyad, S.H.,M.H., selaku Rektor Universitas
Muhammadiyah Purwokerto
(2) Dr. Agus Siswanto, M.Si.,Apt., selaku Dekan Farmasi yang telah memberi
berbagai informasi dan bimbingan tentang tata laksana penyusunan
skripsi;
(3) Wahyu Utaminingrum, M.Sc.,Apt selaku Ketua Program Studi S1 Farmasi
yang telah memberi berbagai informasi dan bimbingan tentang tata laksana
penyusunan skripsi;
(4) Yuni Astuti, M.Si.,Apt .dan Dr. Nunuk Aries Nurulita, M.Sc.,Apt. selaku
dosen pembimbing yang telah menyediakan waktu, tenaga, dan pikiran
untuk mengarahkan dalam penyusunan skripsi ini;
(5) Dr. Agus Siswanto, M.Si.,Apt. dan Erza Genartika, M.Si.,Apt. yang telah
memberi berbagai pertanyaan untuk menguji kelayakan sebagai sarjana
Farmasi;
(6) Segenap staf laboratorium Biologi Farmasi, laboratorium Teknologi
Farmasi, dan Laboratorium Farmakologi Universitas Muhammadiyah
Purwokerto yang telah memberi bantuan dan bimbingan dalam
pelaksanaan penelitian skripsi;
(7) Bapak dan ibu serta saudara tercinta yang telah memberi dukungan
material maupun moral
UJI AKTIVITAS ANTI AGING ...,ANI YUPITAWATI, FARMASI, , UMP 2017
viii
(8) Semua pihak yang tidak dapat penulis sebutkan satu persatu
Akhir kata, semoga Allah SWT memberikan balasan atas segala kebaikan
semua pihak yang telah membantu. Semoga skripsi ini dapat membawa manfaat
bagi pengembangan ilmu pengetahuan.
Purwokerto, 16 Agustus 2017
Penulis
ANI YUPITAWATI
1308010002
UJI AKTIVITAS ANTI AGING ...,ANI YUPITAWATI, FARMASI, , UMP 2017
ix
RIWAYAT HIDUP
Nama penulis : Ani Yupitawati
TTL : Banyumas, 26 Oktober 1976
Alamat : Bangsa, RT 02/01 Kebasen, Banyumas
Nama Bapak : Jatiman Atmowinoto
Nama Ibu : Tasmiyah
Riwayat Pendidikan : SDN Bangsa I tahun 1983-1989
SMPN Sampang Cilacap tahun 1990-1992
SMAN I Purwokerto tahun 1993-1995
UJI AKTIVITAS ANTI AGING ...,ANI YUPITAWATI, FARMASI, , UMP 2017
x
HALAMAN PERNYATAAN PERSETUJUAN
PUBLIKASI SKRIPSI UNTUK KEPENTINGAN AKADEMIS
Sebagai sivitas akademika Universitas Muhammadiyah Purwokerto dan
demi pengembangan ilmu pengetahuan, saya yang bertanda tangan di bawah ini:
Nama : Ani Yupitawati
Nim : 1308010002
Program Studi : Farmasi
Perguruan Tinggi : Universitas Muhammadiyah Purwokerto
Jenis Karya : Skripsi
menyetujui untuk memberikan Hak Bebas Royalti Noneksklusif (Non-exclusive
Royalty-Free Right) kepada Universitas Muhammadiyah Purwokerto atas karya
ilmiah saya yang berjudul:
Uji Aktivitas Anti Aging Tetrahidrokurkumin, Ekstrak Pegagan (Centella
asiatica), dan Kombinasi Tetrahidrokurkumin-Ekstrak Pegagan
Beserta perangkat yang ada (jika diperlukan). Dengan Hak Bebas Royalti
Noneksklusif ini Universitas Muhammadiyah Purwokerto berhak menyimpan,
mengalih media / mengalih formatkan, mengelola dalam bentuk pangkalan data
(database), merawat, dan mempublikasikan skripsi saya dengan tetap
mencantumkan nama saya sebagai penulis / pencipta dan sebagai pemilik Hak
Cipta.
Pernyataan ini saya buat dengan sebenarnya.
Dibuat di : Purwokerto
Pada tanggal : 29 Agustus 2017
Yang menyatakan
Ani Yupitawati
NIM 1308010002
UJI AKTIVITAS ANTI AGING ...,ANI YUPITAWATI, FARMASI, , UMP 2017
xi
Uji Aktivitas Anti Aging Tetrahidrokurkumin, Ekstrak Pegagan (Centella
asiatica), dan Kombinasi Tetrahidrokurkumin-Ekstrak Pegagan
Ani Yupitawati, Ika Yuni Astuti, M.Si., Apt., Dr. Nunuk Aries Nurulita, M.Si.,Apt.
ABSTRAK
Sinar ultraviolet matahari merupakan faktor utama penyebab penuaan kulit secara
ekstrinsik atau photoaging melalui pembentukan radikal bebas. Agen anti aging
topikal yang banyak digunakan pada saat ini adalah antioksidan vitamin C (asam
askorbat), namun formula vitamin C tidak stabil dan dapat mengiritasi. Pada
penelitian ini dilakukan uji aktivitas anti aging yang mengkombinasikan
Tetrahidrokurkumin (THC) dan ekstrak Pegagan yang diduga mempunyai
aktivitas anti aging sinergis. Penelitian ini menggunakan rancangan pre-test post-
test control group design. Mencit balb/c jantan, umur 6-8 minggu, BB 20-25 gram
dikelompokkan secara acak menjadi 5 kelompok uji. Mencit dicukur bulunya pada
bagian dorsal seluas 2x2 cm2.
Sebelum perlakuan uji, terlebih dahulu dilakukan
pengukuran parameter anti aging pada seluruh kelompok uji dengan Skin Analyzer
EH 900 U. Parameter anti aging meliputi sensitivitas kulit, kadar air, kadar
kolagen, elastisitas, dan besar pori. Proses uji dilakukan selama 4 minggu. Setiap
hari bagian dorsal mencit diolesi krim dengan dosis 2 mg/cm2
2 jam sebelum dan
15 menit sesudah penyinaran UV. Formula krim untuk KN; KP; THC; EP;
THCEP; masing – masing adalah basis krim; basis krim + 3% ethyl ascorbyl
ether; basis krim + 2% THC; basis krim + 10% EP; basis krim + 2% THC + 10%
EP. Penyinaran UV menggunakan lampu UV Repti Glo 13 W Exoterra®
yang
mengandung UVA 630 µW/cm2
dan UVB 105 µW /cm2. Setelah proses
perlakuan selama 4 minggu, seluruh mencit kembali diukur parameter anti
agingnya dengan Skin Analyzer EH 900 U. Hasil data sebelum dan sesudah
perlakuan dianalis secara statistik. Kombinasi THC dan EP dapat meningkatkan
kadar kolagen dan elastisitas dibanding THC dan EP tanpa kombinasi, namun
peningkatan tersebut tidak signifikan. Berdasarkan skor dari seluruh paramater
anti aging, kombinasi THC dan EP tidak memberikan aktivitas anti aging yang
lebih besar dibandingkan THC dan EP tanpa kombinasi.
Kata kunci: photoaging, radikal bebas, antioksidan, Tetrahydrocurcumin, ekstrak
pegagan, skin analyzer
UJI AKTIVITAS ANTI AGING ...,ANI YUPITAWATI, FARMASI, , UMP 2017
xii
Determination Anti Aging Activity of Tetrahydrocurcumin, Pegagan (Centella
asiatica) Extract, and Combination of Tetrahydrocurcumin - Pegagan Extract
Ani Yupitawati, Ika Yuni Astuti, M.Si., Apt., Dr. Nunuk Aries Nurulita, M.Si.,Apt.
ABSTRACT
Solar ultraviolet radiation is the main factor causing extrinsic skin aging or
photoaging, through the formation of free radicals. The most popular topical anti-
aging agent currently used is the antioxidant vitamin C (ascorbic acid), but the
vitamin C formula is unstable and can be irritating. The aim of this research is to
determinate anti aging activity of Tetrahydrocurcumin (THC) and Pegagan
extract combination which is suspected to have synergistic anti aging activity.
This research uses pre-test post-test control group design. Mice balb/c males, 6-8
weeks age, 20-25 grams body weight were randomly assigned to 5 groups. Mice
shaved his fur on a dorsal area of 2x2 cm2. Prior to the treatment of the test, first
measurement of anti aging parameters in all test groups with Skin Analyzer EH
900 U. Anti aging parameters include skin sensitivity, water content, collagen
levels, elasticity, and large pores. The test process is done for 28 days. Every day
the dorsal portion of the cream is smeared cream with a dose of 2 mg/cm2 2 hours
before and 15 minutes after UV irradiation. Cream formula for KN; KP; THC;
EP; THCEP; each is a cream base; Base cream + 3% ethyl ascorbyl ether; Base
cream + 2% THC; Base cream + 10% EP; Base cream + 2% THC + 10% EP. UV
irradiation uses UV Repti Glo 13 W Exoterra® that containing UVA 630 μW/cm2
and UVB 105 μW/cm2. After 4 weeks treatment process, all the anti aging
parameters of mice is measured again with Skin Analyzer EH 900 U. Results of
data before and after treatment were statistically analyzed. The combination of
THC and EP can increase collagen and elasticity levels compared to THC and EP
without combination, but the increase is not significant. Based on scores of all anti
aging parameters, THC and EP combinations do not provide greater anti-aging
activity than THC and EP without combination.
Keywords: photoaging, free radical, antioxidant, tetrahydrocurcumin, pegagan
extract, skin analyzer
UJI AKTIVITAS ANTI AGING ...,ANI YUPITAWATI, FARMASI, , UMP 2017
xiii
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL ........................................................................................ i
HALAMAN PERSETUJUAN ......................................................................... ii
HALAMAN PENGESAHAN .......................................................................... iii
HALAMAN PERNYATAAN ......................................................................... iv
MOTTO ........................................................................................................... v
PERSEMBAHAN ............................................................................................ vi
KATA PENGANTAR ..................................................................................... vii
RIWAYAT HIDUP .......................................................................................... ix
PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI SKRIPSI ............................ x
ABSTRAK ....................................................................................................... xi
ABSTRACT ..................................................................................................... xii
DAFTAR ISI .................................................................................................... xiii
DAFTAR TABEL ............................................................................................ xvi
DAFTAR GAMBAR ....................................................................................... xvii
DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................... xix
BAB I PENDAHULUAN ................................................................................ 1
A. Latar Belakang Masalah ................................................................ 1
B. Perumusan Masalah ....................................................................... 2
C. Tujuan Penelitian ........................................................................... 2
D. Manfaat Penelitian ........................................................................ 3
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ...................................................................... 4
A. Hasil Penelitian Terdahulu ............................................................. 4
B. Landasan Teori ............................................................................... 6
1. Kulit ........................................................................................ 6
2. Kolagen kulit ............................................................................ 8
3. Elastin ...................................................................................... 9
4. Teori Penuaan (Aging) ............................................................. 10
UJI AKTIVITAS ANTI AGING ...,ANI YUPITAWATI, FARMASI, , UMP 2017
xiv
5. Anti aging ................................................................................. 12
6. Radikal bebas ........................................................................... 13
7. Antioksidan ............................................................................. 14
8. Sinar Ultraviolet matahari ....................................................... 14
9. Pengaruh sinar UV matahari terhadap penuaan kulit ............ 15
10. Tetrahidrokurkumin (THC) ...................................................... 18
11. Pegagan (Centella asiatica) ..................................................... 20
12. Ethyl Ascorbil Ether ................................................................. 22
13. Remaserasi .............................................................................. 22
14. Krim ........................................................................................ 22
15. Sistem Pemberian Obat Melalui Kulit ..................................... 23
16. Skin Analyzer EH 900 U.......................................................... 24
BAB III METODE PENELITIAN................................................................... 25
A. Jenis dan Rancangan Penelitian ..................................................... 25
B. Variabel Penelitian ........................................................................ 29
C. Definisi Variabel Operasional ........................................................ 29
1. Variabel bebas .......................................................................... 29
2. Variabel tergantung .................................................................. 29
3. Variabel terkendali ................................................................... 30
D. Waktu dan Tempat Penelitian ....................................................... 30
E. Sampel Penelitian ........................................................................... 30
1. Kriteria inklusi ......................................................................... 30
2. Kriteria dropout ........................................................................ 30
3. Besar sampel ............................................................................ 30
F. Bahan dan Alat ............................................................................... 31
1. Bahan uji .................................................................................. 31
2. Alat penelitian ......................................................................... 31
G. Cara Penelitian ............................................................................... 31
1. Determinasi tanaman pegagan ................................................. 31
2. Pengeringan herba pegagan ..................................................... 32
3. Penyerbukan herba pegagan kering ......................................... 32
4. Ekstraksi herba pegagan ........................................................... 32
UJI AKTIVITAS ANTI AGING ...,ANI YUPITAWATI, FARMASI, , UMP 2017
xv
5. Uji total flavonoid ekstrak pegagan ........................................ 32
6. Uji kualitatif triterpenoid ekstrak pegagan .............................. 33
7. Pembuatan sediaan krim ......................................................... 34
8. Uji aktivitas anti aging ............................................................ 35
H. Analisis Data .................................................................................. 37
BAB IV HASIL DAN PEMBANASAN ......................................................... 38
A. Determinasi Tanaman Pegagan ..................................................... 38
B. Penyiapan dan Pengolahan Simplisia Pegagan ............................. 38
C. Ekstraksi herba pegagan ................................................................ 39
D. Uji total flavonoid ekstrak pegagan .............................................. 40
1. Uji kualitatif total flavonoid esktrak pegagan ......................... 40
2. Uji kuantitatif total flavonoid ekstrak pegagan ....................... 41
E. Uji kualitatif triterpenoid ekstrak pegagan .................................. 41
F. Pembuatan sediaan krim ................................................................ 42
G. Uji aktivitas anti aging .................................................................. 42
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ........................................................... 59
A. Kesimpulan .................................................................................... 59
B. Saran ............................................................................................... 59
DAFTAR PUSTAKA ...................................................................................... 60
LAMPIRAN ..................................................................................................... 69
UJI AKTIVITAS ANTI AGING ...,ANI YUPITAWATI, FARMASI, , UMP 2017
xvi
DAFTAR TABEL
Tabel 2.1 Parameter hasil pengukuran dengan Skin Analyzer EH 900 U
(Skin Analyzer EH 900 U, 2017) ................................................. 25
Tabel 3.1 Formula krim ................................................................................ 34
Tabel 4.1 Rerata umur mencit tiap kelompok uji sebelum perlakuan 43
Tabel 4.2 Rerata berat badan mencit tiap kelompok uji sebelum perlakuan 43
Tabel 4.3 Skor jumlah sensitivitas ............................................................... 56
Tabel 4.4 Skor diameter sensitivitas ............................................................. 56
Tabel 4.5 Skor kadar kolagen ....................................................................... 57
Tabel 4.6 Skor elastisitas .............................................................................. 57
Tabel 4.7 Skor besar pori ............................................................................. 57
UJI AKTIVITAS ANTI AGING ...,ANI YUPITAWATI, FARMASI, , UMP 2017
xvii
DAFTAR GAMBAR
Gambar 2.1. Struktur kulit (McLafferty et al., 2012) ................................... 7
Gambar 2.2. Histologi kolagen dermis dengan pewarnaan HE (Emmert
et al., 2013) .............................................................................. 8
Gambar 2.3. Perubahan susunan serat elastin karena photoaging ................ 10
Gambar 2.4. Penetrasi sinar UV matahari ke dalam lapisan kulit
(Dermatology.ca., 2016) .......................................................... 15
Gambar 2.5. Mekanisme penuaan kulit karena radiasi sinar UV
matahari (Jadoon et al., 2015) ............................................... 17
Gambar 2.6. Proses patofisiologi setelah kulit terpapar sinar UV
matahari (Yin, et al., 2015) ..................................................... 18
Gambar 2.7. Hidrolisis kurkumin menjadi tetrahidrokurkumin
(Aggarwal et al., 2015) ............................................................ 18
Gambar 2.9. Tanaman pegagan (Centella asiatica) ..................................... 20
Gambar 2.10. Struktur quersetin pegagan, suatu derivat dari flavonoid
(Roy et al, 2013) ...................................................................... 20
Gambar 2.11. Struktur kimia asiaticoside, madecassoside, asiatic acid,
madecassic acid (Wu et al., 2012) ........................................... 21
Gambar 3.1. Bagan rancangan penelitian pre test post test control
group design ............................................................................ 28
Gambar 4.1. Grafik jumlah sensitivitas sebelum dan sesudah perlakuan ..... 45
Gambar 4.2. Grafik diameter sensitivitas sebelum dan sesudah
perlakuan .................................................................................. 45
Gambar 4.3. Sensitivtas kelompok KN, EP, THC sebelum dan sesudah
perlakuan yang dianalisis dengan Skin Analyzer EH 900 U ..... 46
Gambar 4.5. Kadar air KN, EP, dan THC sebelum dan sesudah
perlakuan ................................................................................. 48
Gambar 4.6. Grafik kadar kolagen sebelum dan sesudah perlakuan ............ 50
Gambar 4.7. Analisis kadar kolagen salah satu sampel THC, THCEP
dengan skin analyzer EH 900 U. ............................................. 50
UJI AKTIVITAS ANTI AGING ...,ANI YUPITAWATI, FARMASI, , UMP 2017
xviii
Gambar 4.8. Grafik elastisitas sebelum dan sesudah perlakuan ................... 52
Gambar 4.9. Elastisitas dari kelompok uji THC, EP dan THCEP
sesudah perlakuan yang dianalisis dengan skin analyzer
EH 900 U .................................................................................. 52
Gambar 4.10. Grafik besar pori sebelum dan sesudah perlakuan. ................. 54
Gambar 4.11. Besar pori dari kelompok uji KN, KP, THC, THCEP yang
dianalisis dengan skin analyzer EH 900 U. ........................... 55
UJI AKTIVITAS ANTI AGING ...,ANI YUPITAWATI, FARMASI, , UMP 2017
xix
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Hasil determinasi tanaman ...................................................... 70
Lampiran 2. Pengolahan simplisia ............................................................... 71
Lampiran 3. Ekstraksi herba pegagan .......................................................... 73
Lampiran 4. Uji kualitatif total flavonoid ekstrak pegagan ......................... 74
Lampiran 5. Uji kuantitatif total flavonoid ekstrak pegagan ...................... 75
Lampiran 6. Uji kualitatif triterpenoid ekstrak pegagan .............................. 78
Lampiran 7. Pembuatan sediaan krim .......................................................... 79
Lampiran 8. Surat persetujuan etik dari Komisi Etik Penelitian .................. 80
Lampiran 9. Data umur dan berat badan mencit tiap kelompok uji
sebelum perlakuan ................................................................... 81
Lampiran 10. Pengelompokan hewan uji ....................................................... 84
Lampiran 11. Pencukuran bulu mencit pada bagian dorsal ........................... 85
Lampiran 12. Alat Skin Analyzer EH 900 U ................................................ 86
Lampiran 13. Penyinaran kulit dorsal mencit dengan lampu UV .................. 86
Lampiran 14. Hasil pengukuran sensitivitas dengan Skin Analyzer EH
900 U ....................................................................................... 87
Lampiran 15. Hasil pengukuran kadar air dengan Skin Analyzer EH 900
U .............................................................................................. 92
Lampiran 16. Hasil pengukuran kadar kolagen dengan Skin Analyzer EH
900 U ....................................................................................... 97
Lampiran 17. Hasil pengukuran elastisitas dengan Skin Analyzer EH 900
U .............................................................................................. 102
Lampiran 18. Hasil pengukuran besar pori dengan Skin Analyzer EH 900
U .............................................................................................. 107
Lampiran 19. Data hasil pengukuran parameter anti aging pada tiap
kelompok uji sebelum dan sesudah perlakuan ........................ 112
UJI AKTIVITAS ANTI AGING ...,ANI YUPITAWATI, FARMASI, , UMP 2017
xx
Lampiran 20 Rangkuman analisis statistik perbandingan parameter anti
aging pada tiap kelompok uji sebelum dan sesudah
perlakuan ................................................................................. 113
Lampiran 21 Rangkuman analisis statistik perbandingan parameter anti
aging antar kelompok uji sebelum dan sesudah perlakuan ...... 116
UJI AKTIVITAS ANTI AGING ...,ANI YUPITAWATI, FARMASI, , UMP 2017
xxi
DAFTAR SINGKATAN
AP-1 : Activator Protein-1
MMP : Matrix Metalloproteinase
RER : Rough Reticulum Endoplasmic
ROS : Reactive Oxygen Species
TGF : Transforming Growth Factor
THC : Tetrahydrocurcumin
UV : Ultra Violet
UJI AKTIVITAS ANTI AGING ...,ANI YUPITAWATI, FARMASI, , UMP 2017