8/18/2019 Tincion de Romanowsky para microbiologia

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Tinción de Romanowsky:

En 1891 Dmitry Leonidovich Romanowsky (ruso) desarrolló una tinción utilizando una mezcla

de eosina y azul de metileno. Derivado de este método surieron diversas modi!icaciones

"roduciendo di!erentes tinciones denominadas #tinciones ti"o Romanowsky$ %ue cum"len con

las siuientes caracter&sticas'

1. olorante *+sico' ,zul de metileno y sus derivados de o-idación (azur , azur / y azur ).

0. olorante *+sico' osina

2e o*tiene una tinción di!erencial. De"endiendo de la "ro"orción entre azul de metileno y

eosina suren distintos métodos de tinción. ntre ellos método de 3iemsa y 4riht.

Tinción de Giemsa:

 Elaborada por 3ustav 3iemsa ("olaco) el método de Giemsa es la tinción más

utilizada para buscar protozoarios o microflarias en la sangre, el colorante se

prepara con azul azur y eosina.

Contenido:

-Eosina

-Azul de metileno y sus productos de oidación !azur A, azur ", #ioleta de

metilo$

Fundamento:

Eosina siendo un colorante ácido tendrá afnidad por estructuras básicas, como

la %emoglobina !ro&o$, las prote'nas de granulaciones !rosa-naran&a$ y elcitoplasma !rosa-naran&a$

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El azul de metileno y sus deri#ados son colorantes básicos, tendrán afnidad

por estructuras ácidas como los ácidos nucleicos, ()A, mitocondrias,

ribosomas. *ue #an desde tonalidades de azul, #ioletas y morados.

El +rypanosoma tiene inetoplasto. Es una masa de A) circular etracelular

ue se encuentra dentro de la doble membrana mitocondrial.

Método:

El /rotis se f&a en Et01 o 2e01 absoluto durante 3 o 4 minutos para e#itar lades%emoglobinizacion. 5a gota gruesa no reuiere f&ación, por cuanto es

necesaria la des%emoglobinizacion para #er a tra#és de #arias capas de G(.

3. Coloue los portaob&etos en canastillas para tinción y sumér&ala en un

recipiente con metanol durante #einte minutos.

 4. e&e secar el /rotis al aire

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. 6. Coloue la canastilla en el recipiente ue contiene colorante de Giemsa

durante diez minutos.

7. 8aue y de&e secar la preparación y la#ar con solución amortiguador !unas

gotas del colorante en agua destilada$ por 7 minutos.

 9. 8i se llega a sobre teir repita el la#ado.

;. 8eue y lea al microscopio a seco débil <=>, seco /uerte 6=> e inmersión

<==>.

 +inciones

?lasmodium sp

Giardia lamblia

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 +rypanosoma crusi

5oa loa

2ansonella perstans