skripsi - repository.unimus.ac.idrepository.unimus.ac.id/142/1/skripsi fulltex.pdf · tujuan...
TRANSCRIPT
TEPUNG AMPAS TAHU SEBAGAI MEDIA PERTUMBUHAN
BAKTERI Serratia marcescens
SKRIPSI
Diajukan sebagai salah satu syarat menyelesaikan
Pendidikan Diploma IV Kesehatan
Program Studi Analis Kesehatan
Diajukan oleh:
Umi Rosidah
NIM. G1C215008
PROGRAM STUDI D IV ANALIS KESEHATAN
FAKULTAS ILMU KEPERAWATAN DAN KESEHATAN
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SEMARANG
TAHUN 2016
http://lib.unimus.ac.id
http://lib.unimus.ac.id
http://lib.unimus.ac.id
TEPUNG AMPAS TAHU SEBAGAI MEDIA PERTUMBUHAN
BAKTERI Serratia marcescens
Umi Rosidah1, Ana Hidayati Mukaromah
2, Sri Sinto Dewi
3
1Program Studi D IV Analis Kesehatan Fakultas Ilmu Keperawatan dan
Kesehatan Universitas Muhammadiyah Semarang, 2Laboratorium Kimia Fakultas Ilmu Keperawatan dan Kesehatan Universitas
Muhammadiyah Semarang, 3Laboratorium Mikrobiologi Fakultas Ilmu Keperawatan dan Kesehatan
Universitas Muhammadiyah Semarang,
ABSTRAK Media yang paling sering digunakan untuk pemeriksaan mikrobiologi salah
satunya adalah Nutrient Agar karena sebagai media umum, namun harga media
tersebut mahal. Ampas tahu adalah salah satu bahan alami yang mengandung
protein cukup tinggi dan harganya murah, pemanfaatan ampas tahu saat ini hanya
sebagai pakan ternak dan sebagian kecil diolah sebagai bahan pangan. Tujuan
penelitian yaitu mengetahui pengaruh variasi konsentrasi tepung ampas tahu
terhadap jumlah koloni bakteri Serratia marcescens. Metode Penelitian yang
digunakan adalah eksperimen dengan variabel bebas tepung ampas tahu
konsentrasi 6% b/v , 7% b/v, 8% b/v, 9% b/v, dan 10 % b/v dengan pengulangan
tiga kali. Pada kondentrasi 6% b/v , 7% b/v dan 8% penambahan agar netral
sebanyak 1,75 g, dan pada konsentrasi 9% b/v dan 10 % b/v dengan penambahan
agar 1,5 g.Hasil penelitian menunjukan rerata jumlah koloni pada kelompok
kontrol menggunakan media Nutrient Agar sebanyak 20 x 108 CFU/ml, pada
kelompok perlakuan media tepung ampas tahu dengan konsentrasi 6% sebanyak
22 x 108 CFU/ml, konsentrasi 7% sebanyak 24 x 10
8 CFU/ml, konsentrasi 8%
sebanyak 26 x 108 CFU/ml, konsentrasi 9 % sebanyak 27 x 10
8 CFU/ml dan pada
konsentrasi 10 % sebanyak 29 x 108 CFU/ml. Hasil uji ANOVA dengan derajat
kepercayaan 0,05 didapatkan p value = 0,150 (p > 0,05) sehingga diperoleh
kesimpulan tidak ada pengaruh signifikan variasi konsentrasi tepung ampas tahu
terhadap jumlah koloni bakteri Serratia marcescens.
Kata Kunci: Tepung Ampas Tahu, Jumlah Koloni, Serratia marcescens.
iv
http://lib.unimus.ac.id
FLOUR TOFU KNOW AS A BACTERIA GROWTH MEDIA
Serratia marcescens
Umi Rosidah1, Ana Hidayati Mukaromah
2, Sri Sinto Dewi
3
1 Study Program of DIV Medical Laboratory Faculty of Nursing and Health
sciences , University of Muhammadiyah Semarang. 2
Chemical Laboratory Faculty of Nursing and Health Sciences University of
Muhammadiyah Semarang. 3
Microbiology Laboratory Faculty Faculty of Nursing and Health Sciences
University of Muhammadiyah Semarang.
Abstract
The most commonly used media for microbiological examination is Nutrient Agar
as a general media, but the media price is expensive. Tofu dregs is one of the
natural ingredients that contain protein is high enough and the price is cheap, the
use of tofu dregs current only as animal feed and processed as food. The purpose
of research is to know the effect of variations in the concentration of flour from
tofu dregs toward the number of colonies of bacteria Serratia Marcescens. The
research method used is experiment of independent variables with flour from tofu
dregs that has a concentration 6% b/v, 7% b/v, 8% b/v, 9%bv, and 10% b/v with
repetition three times. At a concentration 6% b/v, 7% b/v and 8% addition of as
much as 1,75 grams Agar Netral, and teh concentration of 9% and 10% with the
addition of 1,5 grams Agar. Research shows the average number of colonies in
the control group using media Nutrient Agar as much as 20x 108 CFU/ml, In the
treatment group were using the media flour from tofu dregs with a concentration
6% as much as 22 x 108 CFU/ml, concentration 8% as much as 26 x 10
8 CFU/ml,
concentration 9% as much as 27 x 108 CFU/ml and at a concentration 10% as
much as 29 x 108 CFU/ml. ANOVA test results with a confidence degree of 0,05
has been obtained p value =0,150 (p > 0,05) so it can be concluded that there was
no significant effect of varying concentrations of flour from tofu dregs to the
number of Serratia Marcescens bacterial colonies.
Keywords: flour of tofu dregs, number of colonies, Serratia Marcescens.
v http://lib.unimus.ac.id
http://lib.unimus.ac.id
KATA PENGANTAR
Puji syukur penulis panjatkan kepada Allah SWT yang telah melimpahkan
segala rahmat, hidayah dan inayah-Nya, sholawat dan salam kepada junjungan
kita Baginda Rosulullah SAW beserta keluarga dan para Sahabat-nya sehingga
penulis dapat menyelesaikan tugas akhir yang berjudul “Tepung Ampas Tahu
Sebagi Media Pertumbuhan Bakteri Seratia marcescens”.
Penyusunan skripsi ini merupakan salah satu syarat untuk menyelesaikan
Pendidikan Diploma IV Analis Kesehatan di Universitas Muhammadiyah
Semarang 2016.
Penulis menyadari bahwa terselesaikannya Tugas Akhir ini tidak lepas dari
bimbingan, dukungan dan bantuan dari berbagai pihak. Oleh karena itu pada
kesempatan ini, penulis ingin menyampaikan ucapan terimakasih kepada :
1. Ibu Dra. Ana Hidayati Mukaromah, M.Si selaku Pembimbing I atas waktu dan
tenaganya sehingga proposal ini dapat selesai.
2. Ibu Dra. Sri Sinto Dewi, M.Si.Med selaku Pembimbing II dan Ketua Program
Studi DIV Analis Kesehatan dalam memberikan petunjuk dan pengarahan
selama penyusunan proposal ini.
3. Bapak Sugiyanto, S.Pd, M.App, Sc, selaku Direktur Poltekkes Kemenkes
Semarang yang telah memberikan ijin belajar bagi penulis.
4. Suami dan anak tercinta yang telah memberikan doa restu dan dukungan baik
secara moril maupun materiil.
5. Ayah, Kakak dan Adekku yang selalu memberikan do’a dan dukungan.
6. Serta seluruh pihak yang telah membantu dalam pembuatan skripsi ini.
Penulis menyadari masih banyak ketidak sempurnaan dan kekurangan
dalam penulisan tugas akhir ini. Kritik dan saran yang membangun. Semoga tugas
akhir ini dapat bermanfaat bagi para pembaca.
Semarang, September 2016
Penulis
vii http://lib.unimus.ac.id
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL ................................................................................. i
HALAMAN PERSETUJUAN ................................................................. ii
HALAMAN PENGESAHAN ................................................................... iii
ABSTRAK ............................................................................................... iv
ABSTRACT ............................................................................................... v
HALAMAN PERNYATAAN ORIGINALITAS .................................... vi
KATA PENGANTAR ............................................................................... vii
DAFTAR ISI .............................................................................................. viii
DAFTAR TABEL ..................................................................................... x
DAFTAR GAMBAR ................................................................................. xi
DAFTAR LAMPIRAN ............................................................................. xii
BAB I PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang ................................................................................ 1
1.2 Rumusan Masalah ........................................................................... 3
1.3 Tujuan Penelitian ............................................................................. 3
1.4 Manfaat Penelitian ........................................................................... 4
1.5 Orisinalitas Penelitian ...................................................................... 4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA
2.1. Tinjauan Teoritis ............................................................................. 6
2.1.1 Media Pertumbuhan Bakteri .................................................. 6
2.1.2 Ampas Tahu ........................................................................... 10
2.1.3 Pertumbuhan Bakteri ............................................................. 15
2.1.4 Pengukuran Pertumbuhan Bakteri ......................................... 18
2.1.5 Serratia marcescens ........................................................... 22
2.2 Kerangka Teori ................................................................................ 24
2.3 Kerangka Konsep ............................................................................ 24
2.4 Hipotesis Penelitian ......................................................................... 24
BAB III METODOLOGI PENELITIAN
3.1 Jenis Penelitian ............................................................................... 25
3.2 Desain Penelitian ............................................................................ 25
3.3 Tempat dan waktu Penelitian ......................................................... 26
3.4 Variabel Penelitian ......................................................................... 26
3.5 Definisi Operasional ....................................................................... 27
3.6 Obyek Penelitian ............................................................................ 27
3.7 Alat dan Bahan ............................................................................... 27
3.8 Prosedur Penelitian........................................................................... 28
3.9 Alur Penelitian ................................................................................ 31
3.10 Teknik Pengumpulan dan Analisis Data ........................................ 32
viii http://lib.unimus.ac.id
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN
1.1 Hasil penelitian ............................................................................... 33
1.2 Pembahasan .................................................................................... 33
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN
5.1 Kesimpulan ...................................................................................... 37
5.2 Saran ................................................................................................ 37
DAFTAR PUSTAKA
LAMPIRAN
ix
http://lib.unimus.ac.id
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1. Keaslian Penelitian ........................................................................ 4
Tabel 2. Karakteristik Kimia Tepung Ampas Tahu .................................... 13
Tabel 3. Kandungan Lisin dan Metionin Ampas Tahu ............................... 13
Tabel 4. Kombinasi Perlakuan dan Ulangan Percobaan............................... 26
Tabel 5. Definisi Operasional ..................................................................... 27
Tabel 6. Jumlah Koloni Bakteri Serratia marcescens ................................ 34
Tabel 7. Ukuran dan Warna Koloni Bakteri Serratia marcescens.............. 35
Tabel 8. Data Mentah Hasil Penelitian ....................................................... 42
Tabel 9. Hasil Uji Formalin ........................................................................ 43
Tabel 10. Penentuan Jumlah Agar Sebagai Pemadat .................................. 44
Tabel 11. Hasil Kuisioner Kecocokan Penambahan Agar .......................... 45
x
http://lib.unimus.ac.id
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1. Diagram Alir Proses Pembuatan Tepung Ampas Tahu ............ 12
Gambar 2. Kurva Pertumbuhan Bakteri ...................................................... 17
Gambar 3. Serratia marcescens .................................................................. 23
Gambar 4. Kerangka Teori .......................................................................... 24
Gambar 5. Kerangka Konsep ...................................................................... 24
Gambar 6. Prosedur Plate Count dengan seri pengenceran.......................... 29
Gambar 7. Alur Penelitian............................................................................ 31
xi
http://lib.unimus.ac.id
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1. Data Mentah Hasil Penelitian ................................................. 41
Lampiran 2. Uji Formalin Pada Ampas Tahu ............................................. 43
Lampiran 3. Optimasi Variasi Agar Netral ................................................. 44
Lampiran 4. Hasil Uji Statistik.................................................................... 45
Lampiran 5. Dokumentasi Penelitian .......................................................... 46
xii http://lib.unimus.ac.id
1
BAB I
PENDAHULUAN
1.1. Latar Belakang
Semua mahluk hidup terutama manusia maupun jasad renik
(mikroorganisme) memerlukan nutrisi. Mikroorganisme merupakan mahluk
yang mempunyai ukuran sel sangat kecil diantaranya adalah bakteri. Bakteri
memerlukan tempat dan nutrisi yang cukup untuk tumbuh dan berkembang.
Dalam lingkup laboratorium mikrobiologi, bakteri dapat ditumbuhkan pada
sebuah media pertumbuhan (Ariesta, 2013).
Bakteri yang sering dibiakkan untuk pemeriksaan mikrobiologi
diantaranya Serratia marcescens. Bakteri ini bersifat gram negatif, berbentuk
basil (bulat lonjong), bergerak dengan cepat (motil) karena mempunyai flagel
peritrik, kadang – kadang berkapsul. Pada suhu kamar, bakteri patogen ini
menghasilkan pigmen merah yang disebut prodiogisin, fakultatif anaerob atau
tidak terlalu membutuhkan oksigen (Pelczar, 2008). Menurut penelitian
Pratami (2012), Serratia marcessens merupakan salah satu bakteri penyebab
infeksi nosokomial dan sering ditemukan dalam makanan terutama pada
tepung. Bakteri ini dapat tumbuh hampir disemua media.
Berdasarkan sifat dan fungsinya, media terbagi menjadi beberapa
kelompok antara lain media transport, media diperkaya, media selektif
(selective and differential media), media pengujian, media perhitungan
jumlah dan media umum (universal media). Sedangkan berdasarkan bahan
http://lib.unimus.ac.id
penyusunnya media dibedakan dua macam yaitu media sintetis dan media
alami. Media sintetis yaitu media yang terdiri dari bahan-bahan yang telah
diketahui komposisinya seperti media Nutrient Agar. Media alami yaitu
media yang terdiri dari bahan-bahan alami seperti ekstrak kentang, sari
wortel dan umbi-umbian (Rizky, 2013)
Media yang paling sering digunakan untuk pemeriksaan
mikrobiologi adalah Nutrient Agar karena sebagai media umum (universal
media) yang memiliki komposi 0,8% protein, 1,2% agar dan sisanya adalah
air (Merck). Seiring dengan meningkatnya permintaan pemeriksaan
mikrobiologi di laboratorium maka jumlah penggunaan media Nutrient Agar
juga mengalami peningkatan, dan sementara harga media Nutrient Agar
cukup mahal.
Ampas tahu adalah salah satu bahan alami yang mengandung protein
cukup tinggi dan harganya murah yang berasal dari limbah padat suatu
industri tahu. Limbah ini dihasilkan setiap hari dalam jumlah yang cukup
melimpah dan kandungan protein yang tertinggal relatif masih tinggi.
Pemanfaatan ampas tahu saat ini hanya sebagai pakan ternak sapi dan babi,
dan sebagian kecil diolah sebagai bahan pangan. Karakteristik kimia tepung
ampas tahu mengandung protein 10,80% dalam 100 gram tepung ampas tahu
( Yustina, 2012).
Berdasarkan uraian tersebut, protein nabati dari tepung ampas tahu
juga dapat digunakan sebagai pengganti pepton dan meat ekstrak yang
merupakan sumber protein hewani pada media Nutrient Agar. Oleh karena itu
http://lib.unimus.ac.id
peneliti melakukan penelitian tentang tepung ampas tahu sebagai media
pertumbuhan bakteri Serratia marcescens.
1.2. Rumusan Masalah
Berdasarkan latar belakang diatas dapat dirumuskan masalah
sebagai berikut “Bagaimana pertumbuhan bakteri Serratia marcescens pada
media tepung ampas tahu?”
1.3. Tujuan Penelitian
1.3.1. Tujuan Umum
Mengetahui pengaruh variasi konsentrasi tepung ampas tahu
terhadap jumlah koloni bakteri Serratia marcescens.
1.3.2. Tujuan Khusus
1.3.2.a Menghitung jumlah bakteri Serratia marcescens pada
media tepung ampas tahu dengan berbagai konsentrasi
(6% b/v, 7% b/v, 8% b/v, 9% b/v dan 10% b/v).
1.3.2.b Menganalisis konsentrasi tepung ampas tahu yang paling
baik untuk pertumbuhan bakteri Serratia marcescens.
1.3.2.c Menganalisis pengaruh variasi konsentrasi tepung ampas
tahu terhadap jumlah koloni bakteri Serratia marcescens.
1.4. Manfaat Penelitian
1.4.1. Bagi Masyarakat
Mengurangi dampak pencemaran limbah ampas tahu dan
memberikan informasi bahwa ampas tahu dapat digunakan
sebagai media pertumbuhan bakteri.
http://lib.unimus.ac.id
1.4.2. Bagi Pengembangan Program
Menghemat pembelian media Nutrient Agar karena dapat diganti
dengan media tepung ampas tahu.
1.5. Orisinalitas Penelitian
Penelitian sebelumnya yang berkaitan dengan penelitian yang akan
dilakukan yaitu:
Tabel 1. Keaslian Penelitian
No Nama
Peneliti
Judul Penelitian Perlakuan Kesimpulan
1. Rizky DW
(2013)
Pengaruh Kandungan
Protein Tepung Bulu
Ayam Sebagai Media
Pertumbuhan Bakteri
Escherichia coli
Pemberian tepung
bulu ayam : 0,5 g, 1
g, 2 g, 3 g, 4 g, 5 g
dalam 100 ml
metode spread plate
(tabur)
Ada pengaruh tepung bulu
ayam terhadap pertumbuhan
bakteri Escherichia coli.
Pertumbuhan optimum bakteri
Escherichia coli pada
konsentrasi 5% b/v.
2. Anisah dan
rahayu
(2015)
Media alternatif
untuk Pertumbuhan
Bakteri
Menggunakan
Sumber Karbohidrat
yang Berbeda
Ekstrak umbi
ganyong, umbi
gembili dan umbi
garut masing-masing
300 g dalam 1000 ml
metode : Spread
Plate( Tabur)
Pertumbuhan optimum bakteri
Escherichia coli dan
Staphylococcus aureus pada
media umbi ganyong.
3. Bimbi M
(2012)
Tepung Sagu Sebagai
Pemadat Media
Kultur Untuk Bakteri
Konsentrasi tepung
sagu 52g, 56g, 60g,
64g dan 68g masing-
masing dilarutkan
dalam 500 ml.
Metode Gores
Sagu dapat memadatkan dan
memberikan hasil positif pada
konsentrasi 68g dalam 500
ml.
Media sagu dapat ditumbuhi
bakteri.
http://lib.unimus.ac.id
Dari penelitian sebelumnya, peneliti mengacu pada penelitian Rizky DW
(2013). Perbedaan penelitian tersebut dengan penelitian ini terletak pada jenis
sumber protein yang digunakan, konsentrasi dan bakteri yang diujikan. Pada
penelitian sebelumnya, sumber protein yang digunakan adalah tepung bulu ayam
yang ditambahkan sebanyak 0,5 g, 1 g, 2 g, 3 g, 4 gr dan 5 g dan menggunakan
bakteri Escherichia coli. Sedangkan pada penelitian ini menggunakan sumber
protein yang berasal dari tepung ampas tahu dengan konsentrasi 6% b/v, 7% b/v,
8% b/v, 9% b/v dan 10% b/v menggunakan bakteri Serratia marcescens.
http://lib.unimus.ac.id
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2.1.Tinjauan Teoritis
2.1.1. Media Pertumbuhan Bakteri
Media merupakan nutrien yang dibutuhkan oleh mikroorganisme
untuk pertumbuhan secara in vitro (Harti, 2014). Pemilihan media yang akan
digunakan disesuaikan sifat penelitian atau pemeriksaan. Fungsi dari media
yaitu secara kualitatif digunakan untuk isolasi dan identifikasi
mikroorganisme, sedangkan secara kuantitatif digunakan untuk perbanyakan
dan perhitungan jumlah mikroorganisme. Media digolongkan menjadi 3
golongan yaitu media berdasarkan konsistensinya, media berdasarkan bahan
penyusunnya dan media berdasarkan sifat dan fungsinya. Menurut golongan
media yang berdasarkan sifat dan fungsinya, media terbagi lagi menjadi
beberapa kelompok antara lain media transport, media diperkaya, media
selektif (selective and differential media), media pengujian, media
perhitungan jumlah, (universal media) atau media umum (Harti, 2014).
Menurut Rizky (2013), Media berdasarkan komposisinya ada 2
macam meliputi :
a. Media alami yaitu media yang terdiri dari bahan-bahan alami contohnya
ekstrak kentang, sari wortel.
b. Media sintetis (chemically defined media) yaitu media yang terdiri dari
bahan-bahan yang telah diketahui komposisinya.
6
http://lib.unimus.ac.id
Sedangkan media berdasarkan konsistensinya ada 3 macam yaitu :
a. Media padat (solid media), media yang mengandung agar-agar 1,5-2 %,
biasanya dalam bentuk plate agar (lempeng agar) atau lant agar atau agar
miring (Brooks, Butel & Morse, 2008).
Media padat sangat bermanfaat untuk isolasi kultur murni, perhitungan
mikroba, dan seleksi galur yang diinginkan. Media padat berisi substansi
yang memadat ketika didinginkan pada suhu kamar. Substansi pemadat
yang sering digunakan adalah agar-agar ( Ariesta, 2013).
b. Media semi padat (semi solid media), media yang mengandung agar-agar
0,6-0,75%, contohnya media SIM (Sulfide Indole Motility) untuk
pengamatan motilitas bakteri (Brooks, Butel & Morse, 2008).
c. Media cair (liquid media), media yang tidak mengandung bahan pemadat,
contohnya Nutrient Broth (Brooks, Butel & Morse, 2008).
Nutrisi dalam suatu media seharusnya mengandung unsur - unsur
yang diperlukan untuk pertumbuhan mikroorganisme antara lain:
1. Air
Air merupakan komponen utama di dalam sel mikroba dan medium.
Fungsi air sebagai sumber energi berupa substrat yang dapat dioksidasi,
sebagai sumber oksigen untuk bahan organik sel pada respirasi, selain itu air
berfungsi sebagai pelarut dan alat pengangkut dalam metabolisme (Brooks,
2008)
http://lib.unimus.ac.id
2. Sumber Karbon
Banyak bakteri yang membutuhkan karbon dioksida sebagai sumber
karbonnya. Semua bakteri yang membutuhkan karbon dari senyawa
anorganik disebut autotrof. Bila mereka memperoleh energi dari cahaya maka
disebut fotoautotrof dan bila mereka memperoleh energinya dengan cara
mengoksidasi senyawa kimiawi maka disebut kemoautotrof. Ada pula bakteri
yang tidak menggunakan karbon dioksida sebagai sumber karbon satu-
satunya namun membutuhkan senyawa organik sebagai sumber karbonnya,
bakteri semacam ini disebut heterotrof (Pelczar, 2010).
3. Sumber Nitrogen
Nitrogen adalah salah satu unsur yang diperlukan oleh semua jasad
hidup untuk sintesis protein asam nukleat dan senyawa–senyawa lain yang
mengandung nitrogen. Nitrogen sangat dibutuhkan dalam pertumbuhan,
karena nitrogen tersebut terkandung di dalam protein dan asam nukleat.
Dalam hal memperoleh nitrogen setiap organisme berbeda-beda, ada yang
dengan cara menggunakan gas nitrogen dari udara dan ada juga yang
menggunakan sumber nitrogen anorganik, seperti garam-garam ammonium.
Tapi ada juga yang menggunakan sumber nitrogen organik, seperti glutamik
dan asparagin (Brooks, 2008).
4. Sumber Belerang
Belerang adalah komponen dari banyak substansi organik sel.
Belerang membentuk bagian struktur beberapa koenzim dan ditemukan dalam
http://lib.unimus.ac.id
rantai samping sistein dan metonin pada protein. Belerang dalam bentuk
asalnya tidak dapat digunakan oleh tumbuhan atau hewan. (Jawetz, Melnick,
Adelberg, 2005)
5. Sumber Phospor
Fosfat (PO43-
) dibutuhkan sebagai komponen ATP, asam nukleat
dan sejumlah koenzim seperti NAD, NADP dan flavin. Selain itu, banyak
metabolit, lipid (fosfolipid, lipid A), komponen dinding sel (teichoic acid),
beberapa polisakarida kapsul dan beberapa protein adalah bergugus fosfat
(Jawetz, Melnick, Adelberg, 2005)
6. Sumber Oksigen
Sebagian besar mikroorganisme bersifat aerob obligat, secara khusus
memerlukan oksigen sebagai penerima hidrogen, beberapa bersifat fakultatif
yang sanggup hidup secara aerob atau anaerob, dan beberapa lagi bersifat
anaerob obligat yang memerlukan zat bukan oksigen sebagai penerima
hidrogen dan sangat peka terhadap hambatan oleh oksigen.
Toksisitas O2 merupakan hasil reduksi oleh enzim dalam sel
(misalnya flavoprotein) menjadi hidrogen peroksida (H2O2) atau reduksi ion
fero menjadi radikal bebas yang lebih beracun lagi. Bakteri-bakteri aerob dan
anaerob terbebas dari zat-zat ini karena adanya superoksida dismutase yaitu
enzim yang mengkatalisis reaksi
2O2-
+ 2H+ O2 + H2O2
Dan adanya katalase, enzim yang mengkatalisis reaksi
http://lib.unimus.ac.id
2H2O2 2H2O + O2 (Jawetz, Melnick, Adelberg, 2005).
7. Sumber Mineral
Bakteri membutuhkan mineral misalnya natrium, kalium, kalsium,
magnesium, mangan, besi, seng, tembaga, dan kobalt untuk pertumbuhan
yang normal, namun jumlah yang dibutuhkan hanya sedikit dan diukur dalam
ppm (parts per million) (Pelczar & Chan, 2010).
8. Faktor Pertumbuhan
Faktor pertumbuhan adalah suatu senyawa organik yang harus
dimiliki sel agar dapat tumbuh, tetapi sel tersebut tidak mampu
mensintesisnya. Senyawa penting yang dibutuhkan bakteri disintesis melalui
serangkaian rekasi enzimatik, masing-masing enzim diproduksi dibawah
kontrol gen spesifik. Bila bakteri mengalami mutasi gen yang menyebabkan
kegagalan fungsi salah satu enzim maka rantai akan rusak dan produk akhir
tidak lagi dihasilkan. Untuk itu bakteri tersebut memperoleh senyawa yang
dibutuhkan tadi dari lingkungan. Senyawa tersebut telah menjadi faktor
pertumbuhan bagi bakteri (Brooks, Butel & Morse, 2008).
2.1.2. Ampas Tahu
Ampas tahu merupakan hasil samping dari proses pengolahan tahu.
Kandungan protein ampas tahu relatif tinggi karena pada proses pembuatan
tahu tidak semua bagian protein pada kacang kedelai bisa diekstrak, apalagi
jika menggunakan proses penggilingan tradisional. Diketahui jumlah ampas
tahu di Indonesia cukup tinggi, konsumsi kacang kedelai di Indonesia tercatat
http://lib.unimus.ac.id
pada tahun 2013 sebanyak 2.115.700 ton. Bila 50% kacang kedelai tersebut
digunakan untuk membuat tahu dan konversi kacang kedelai menjadi ampas
tahu sebesar 100-112%, maka jumlah ampas tahu tercatat 1.184.792 ton
secara nasional (Fadlun, Firdauz & Ariyanti, 2015).
Pada penelitian ini, peneliti memanfaatkan ampas tahu sebagai media
pertumbuhan bakteri dengan menggunakan bahan dasar tepung ampas tahu.
Pengolahan tepung ampas tahu pada intinya yaitu untuk mengurangi kadar air
dalam ampas tahu dan menghaluskannya sehingga menjadi tepung. Tepung
ampas tahu adalah tepung yang diperoleh dari hasil pengeringan dari bahan
ampas tahu yang masih basah, dengan alat pengering atau sinar matahari.
Menurut Yustina (2012), proses pembuatan tepung ampas tahu meliputi
:1) Penirisan dan pengepresan dapat dilakukan dengan menggunakan
pengepres hidrolik atau peras manual menggunakan kain saring, bertujuan
untuk mengurangi kadar air ampas tahu. Kadar air yang rendah dapat
memperlambat proses pembusukan pada ampas tahu dan mempercepat proses
pengeringan. 2) Pengukusan berfungsi sebagai sterilisasi dengan suhu 1210C
selama 15 menit dapat membunuh semua jasad renik yang ada dan dapat
meningkatkan daya simpan ampas tahu. 3) Penyangraian untuk membantu
mengurangi kadar air bahan sehingga pengeringan selanjutnya dapat lebih
cepat serta dapat mencegah timbulnya jamur. 4) Pengeringan menggunakan
sinar matahari ataupun oven sebaiknya bahan sering dibolak-balik agar cepat
kering. 5) Penggilingan menggunakan disc mill menghasilkan ampas kering
dalam bentuk butiran dengan tingkat kehalusan tertentu. 6) Pengayakan
http://lib.unimus.ac.id
menggunakan ayakan 80-100 mesh. Pengayakan bertujuan untuk
memisahkan butiran ampas tahu yang masih kasar.
Gambar 1. Diagram Alir Proses Pembuatan Tepung Ampas Tahu (Yustina,
2012)
Menurut Sulistiani (2004), Karakteristik kimia tepung ampas tahu
dalam 100 g yaitu mengandung 5,74% air, 10,8% Protein, 14,49% Lemak,
9,02% Abu dan 59,95% Karbohidrat.
Ampas tahu
Penirisan/ peras
Sterilisasi/pengukusan
15 menit
Pengeringan
Penggilingan
Pengayakan (80-100
mesh)
Tepung ampas tahu
halus
Air
Tepung ampas
tahu kasar
http://lib.unimus.ac.id
Tabel 2. Karakteristik Kimia Tepung Ampas Tahu (Sulistiani, 2004)
Karakteristik Kimia Ampas Tahu basah Tepung Ampas Tahu
Air (%) 89,88 5,74
Protein (%) 1,32 10,80
Lemak (%) 2,2 14,49
Abu (%) 0,32 9,02
Karbohidrat (%) 6,33 59,95
Tepung ampas tahu mengandung rendah lemak, kaya protein dan
serat. Protein tersusun atas asam amino yang penting bagi sintesis protein
yaitu lisin dan metionin. Hasil penelitian menunjukkan bahwa kandungan
asam amino lisin dan metionin ampas tahu lebih tinggi dibanding ampas
kelapa ( Kailaku, 2010 dalam Yustina 2012)
Tabel 3. Kandungan Lisin dan Metionin Ampas Tahu
Bahan Kecernaan Protein Lisin Metionin
Ampas Kelapa 67 0,54 0,33
Ampas Tahu 91 2,8 0,7
Dari hasil penelitian tersebut, dapat diketahui bahwa kandungan dan
fungsi masing – masing komponen tepung ampas tahu dalam 100 g untuk
pertumbuhan bakteri yaitu :
a. Air 5,74%
Air dapat digunakan sebagai sumber energi, sumber oksigen, sebagai pelarut
dan alat pengangkut dalam metabolisme mikroba ( Brooks, 2008).
b. Protein 10,8% ( Lisin dan Metionin )
Protein merupakan nutrisi terpenting bagi pertumbuhan bakteri karena
digunakan untuk mensintesis makanan dalam pembentukan sel dan
pertumbuhan ( Brooks, 2008).
http://lib.unimus.ac.id
c. Lemak 14,49%
Lemak dapat digunakan sebagai sumber energi. Energi lemak, sedikitnya dua
kali lebih besar daripada karbohidrat, lemak juga berfungsi untuk melarutkan
vitamin yang larut dalam lemak seperti vitamin A.D,E dan K. Untuk itu
lemak juga diperlukan untuk pertumbuhan bakteri ( Elisabeth ,W,2013).
d. Karbohidrat 59,95%
Kandungan karbohidrat yang tinggi dapat digunakan sebagai sumber energi
untuk membangun sel ( sintesis protoplasma) dan bagian – bagian sel lainnya
( Bimbi, 2012).
e. Kadar Abu 9,02%
Abu merupakan residu dari senyawa anorganik dari proses pembakaran atau
oksidasi. Kadar abu menunjukkan total mineral yang terkandung dalam
bahan. Sebagian besar bakteri membutuhkan karbon dari senyawa anorganik
atau disebut autotrof. Bakteri membutuhkan mineral misalnya natrium,
kalium, kalsium, magnesium, mangan, besi, seng, tembaga, dan kobalt untuk
pertumbuhan yang normal (Pelczar, 2010).
f. β-Karoten
Dalam 100 g ampas tahu mengandung 245,54 µg, yang menunjukkan ampas
mengandung serat dan vitamin yang akan disintesis oleh bakteri sebagai
prekursor koenzim ( Brooks, 2008).
http://lib.unimus.ac.id
2.1.3. Pertumbuhan Bakteri
Bila bakteri diinokulasikan ke dalam suatu medium yang sesuai dan
pada keadaan yang optimum bagi pertumbuhannya, maka terjadi kenaikan
jumlah yang tinggi dalam waktu yang relatif pendek. Pada beberapa spesies,
populasi (panen sel terbanyak yang dapat diperoleh) tercapai dalam waktu 24
jam, populasinya dapat mencapai 10 sampai 15 milyar sel bakteri per
mililiter. Perbanyakan seperti ini disebabkan oleh pembelahan sel secara
aseksual (Pelczar, 2008).
Komposisi tepung ampas tahu dengan 5,75% air, 10,8% Protein,
14,49% Lemak, 9,02% Abu dan 59,95% Karbohidrat dapat dimanfaatkan
sebagai media pertumbuhan bakteri.
Menurut Harti (2014), Pertumbuhan bakteri dibedakan menjadi dua
yaitu : 1) Pertumbuhan secara individu, sebagai pertambahan bagian-bagian
sel, dapat diamati dari pertambahan ukuran sel, dan adanya pembelahan sel.
2) Pertumbuhan secara populasi, sebagai akibat pertumbuhan individu, dapat
diamati dari pertambahan jumlah (kuantitas) sel atau massa sel.
Sedangkan menurut Rizky (2013), Terdapat 4 fase pertumbuhan bakteri
ketika ditumbuhkan pada kultur curah (batch culture) yaitu:
1. Fase Adaptasi (Lag Phase)
Sel dalam fase statis ketika dipindah ke media baru maka sel akan
melakukan proses adaptasi. Proses adaptasi meliputi sintesis enzim baru yang
sesuai dengan medianya dan pemulihan terhadap metabolit yang bersifat
toksik (misalnya asam, alkohol, dan basa) pada waktu di media lama.
http://lib.unimus.ac.id
Pada fase ini tidak dijumpai pertambahan jumlah sel. Akan tetapi terjadi
pertambahan volume sel, karena pada fase statis biasanya sel melakukan
pengecilan ukuran. Akan tetapi fase adaptasi dapat dihindari (langsung ke
fase perbanyakan), jika sel di media lama dalam kondisi fase perbanyakan
dan dipindah ke media baru yang sama komposisinya dengan media lama
(Pelczar & Chan 2008).
2. Fase Perbanyakan (Exponential Phase)
Setelah sel memperoleh kondisi ideal dalam pertumbuhannya sel akan
melakukan pembelahan. Pembelahan sel merupakan persamaan eksponensial,
maka fase ini disebut juga fase eksponensial. Pada fase perbanyakan jumlah
sel meningkat sampai batas tertentu atau sampai memasuki fase statis. Pada
fase perbanyakan sel melakukan konsumsi nutrien dan proses fisiologis
lainnya (Pelczar & Chan 2008).
3. Fase Statis (Stationer Phase)
Pada fase statis bakteri tidak melakukan pembelahan sel. Alasan
bakteri tidak melakukan pembelahan sel pada fase ini bermacam-macam
antara lain:
a. Nutrien habis
b. Akumulasi metabolit toksik (misalnya alkohol, asam dan basa)
c. Penurunan kadar oksigen
d. Penurunan nilai aw (ketersediaan air)
http://lib.unimus.ac.id
Pada fase ini juga biasanya sel melakukan adaptasi terhadap kondisi yang
kurang menguntungkan. Akibat dari adaptasi ini dapat menghasilkan senyawa
antibiotika dan antioksidan yang diinginkan manusia (Pelczar & Chan 2008).
4. Fase Kematian (Death Phase)
Penyebab utama kematian adalah autolisis sel dan penurunan energi seluler.
Beberapa bakteri hanya mampu bertahan beberapa jam selama fase statis dan
kemudian masuk ke fase kematian, sementara itu ada bakteri yang mampu
bertahan harian sampai mingguan atau tahunan pada fase statis dan kemudian
baru memasuki fase kematian. Untuk bakteri yang mampu bertahan tahunan
pada fase statis biasanya bakteri tersebut membentuk spora (Pelczar & Chan
2008)
Gambar 2. Kurva Pertumbuhan Bakteri; (1) Fase Adaptasi, (2) Fase
Perbanyakan, (3) Fase Statis, (4) Fase Kematian
http://lib.unimus.ac.id
2.1.4. Pengukuran pertumbuhan bakteri
Pengukuran pertumbuhan media dapat dilakukan pada media padat
dan media cair yaitu :
1. Pada Media Cair
Pengukuran pertumbuhan bakteri pada media cair yaitu dengan
menggunakan alat turbidimetri dan standart McFarland untuk mengukur
kekeruhan atau masa sel pada media cair. Standart McFarland yang sering
digunakan untuk pembuatan suspensi yaitu 0,1 McFarland jumlah bakteri
sebanyak 3x108 CFU/ml dan 0,5 McFarland jumlah bakteri 1,5 x 10
8 CFU /ml
(Rizky, 2013),
Menurut Komarawidjaja (2009), pengukuran pertumbuhan bakteri
pada media cair dapat dilakukan dengan alat spektrofotometer dengan
mengukur nilai absorbansi pada panjang gelombang 600 nm dengan
dikonversikan pada kurva linier.
2. Pada Media Padat
Pengukuranan pertumbuhan bakteri pada media padat dapat dilakukan
dengan beberapa metode salah satunya dengan metode hitung cawan. Prinsip
dari metode hitung cawan adalah jika sel bakteri yang masih hidup
ditumbuhkan pada medium agar, maka sel bakteri tersebut akan berkembang
biak dan membentuk koloni yang dapat dilihat langsung dan dihitung dengan
mata tanpa menggunakan mikroskop. Metode ini dibedakan atas dua cara
yaitu metode tuang dan metode permukaan (Brooks, 2008).
http://lib.unimus.ac.id
Metode hitung cawan merupakan cara yang paling sensitif untuk
menentukan jumlah bakteri karena:
1. Hanya sel yang masih hidup yang dihitung
2. Beberapa jenis bakteri dapat dihitung sekaligus
3. Dapat digunakan untuk isolasi dan identifikasi bakteri karena koloni
yang terbentuk mungkin berasal dari suatu bakteri yang mempunyai
penampakan pertumbuhan yang spesifik.
Selain keuntungan yang telah disebutkan, metode hitung cawan
juga mempunyai kelemahan antara lain:
1. Hasil perhitungan tidak menunjukkan jumlah sel yang sebenarnya,
karena beberapa sel yang berdekatan mungkin membentuk satu koloni
2. Medium dan kondisi inkubasi yang berbeda mungkin menghasilkan
nilai yang berbeda
3. Bakteri yang ditumbuhkan harus dapat tumbuh pada medium padat dan
membentuk koloni yang kompak dan jelas (tidak menyebar)
4. Memerlukan persiapan dan waktu inkubasi relatif lama sampai
pertumbuhan koloni dapat dihitung.
Dalam metode hitung cawan, sampel yang diperkirakan mengandung
lebih dari 300 sel bakteri per ml atau per gram atau per cm memerlukan
perlakuan pengenceran sebelum ditumbuhkan pada medium agar. Setelah
inkubasai maka akan terbentuk koloni pada medium agar yang dapat
dihitung. Jumlah bakteri yang paling baik dalam satu cawan petri antara 30
sampai 300 koloni. Pengenceran dapat dilakukan dengan perbandingan 1:10,
http://lib.unimus.ac.id
1:100, 1:1000 dan seterusnya. Larutan pengencer yang digunakan dapat
berupa larutan bufer fosfat, NaCl 0,85% atau larutan Ringer (Pelczar, 2010).
a. Metode Permukaan (Surface / Spread Plate)
Pada pemupukan dengan metode permukaan, agar steril terlebih
dahulu dituangkan ke dalam cawan petri steril dan dibiarkan membeku.
Setelah membeku dengan sempurna, kemudian sebanyak 0,1 ml contoh yang
telah diencerkan dipipet pada permukaan agar tersebut. Sebuah batang gelas
melengkung dicelupkan ke dalam alkohol 95% dan dipijarkan sehingga
alkohol habis terbakar. Setelah dingin, batang gelas tersebut digunakan untuk
meratakan contoh di atas medium agar. Selanjutnya inkubasi dilakukan
seperti pada metode tuang (Madigan et al, 2013).
b. Rumus Perhitungan
Jumlah koloni dalam sampel dapat dihitung dengan rumus:
Untuk melaporkan hasil analisa mikrobiologi dengan cara hitung
cawan digunakan suatu standar yang disebut “Standard Plate Count” (SPC)
sebagai berikut:
1. Cawan yang dipilih dan dihitung adalah yang mengandung jumlah
koloni antara 30 dan 300
2. Beberapa koloni yang bergabung menjadi satu merupakan satu
kumpulan koloni yang besar dimana jumlah koloninya diragukan
dapat dihitung sebagai satu koloni
http://lib.unimus.ac.id
3. Satu deretan rantai koloni yang terlihat sebagai suatu garis tebal
dihitung sebagai satu koloni (Fardiaz, 1989).
c. Pelaporan dan Perhitungan
Sedangkan pelaporan dan perhitungan koloni bakteri dalam SPC
sebagai berikut:
1. Hasil yang dilaporkan hanya terdiri dari dua angka yaitu angka
pertama (satuan) dan angka kedua (desimal). Jika angka yang ketiga
sama dengan atau lebih besar dari 5, harus dibulatkan satu angka
lebih tinggi pada angka kedua.
2. Jika pada semua pengenceran dihasilkan kurang dari 30 koloni pada
cawan petri, berarti pengenceran yang dilakukan terlalu tinggi, oleh
karena itu jumlah koloni pada pengenceran yang terendah yang
dihitung. Hasilnya dilaporkan kurang dari 30 dikalikan dengan
besarnya pengenceran, tetapi jumlah yang sebenarnya harus
dicantumkan di dalam tanda kurung.
3. Jika pada semua pengenceran dihasilkan lebih dari 300 koloni pada
cawan petri, berarti pengenceran yang dilakukan terlalu rendah, oleh
karena itu jumlah koloni pada pengenceran yang tertinggi yang
dihitung. Hasilnya dilaporkan sebagai lebih dari 300 dikalikan
dengan faktor pengenceran, tetapi jumlah yang sebenarnya harus
dicantumkan di dalam tanda kurung.
4. Jika pada cawan dari dua tingkat pengenceran dihasilkan koloni
dengan jumlah antara 30 dan 300, dan perbandingan antara hasil
http://lib.unimus.ac.id
tertinggi dan terendah dari kedua pengenceran tersebut lebih kecil
atau sama dengan dua, dilaporkan rata-rata dari kedua nilai tersebut
dengan memperhitungkan faktor pengencernya. Jika perbandingan
antara hasil tertinggi dan terendah lebih besar dari 2, yang
dilaporkan hanya hasil yang terkecil.
4. Jika digunakan dua cawan petri (duplo) per pengenceran, data yang
diambil harus dari kedua cawan tersebut, tidak boleh diambil salah
satu. Oleh karena itu harus dipilih tingkat pengenceran yang
menghasilkan kedua cawan duplo dengan koloni di antara 30 dan
300 (Fardiaz, 1989).
2.1.5. Serratia marcescens
Kingdom : Bakteri
Phylum : Proteobakteri
Class : Gamma Proteobakteri
Marga : Enterobacteriales
Famili : Enterobacteriaceae
Genus : Serratia
Spesies : Serratia marcescens
Mikroskopis : Serratia marcescens merupakan bakteri berbentuk
batang, bersifat gram negatif dari famili Enterobactericeae. Makroskopis :
Serratia marcescens membentuk koloni cembung, lembut, dengan tepi yang
berbeda, dapat menghasilkan pigmen merah atau prodigiosin ( Pelzcar, 2008).
http://lib.unimus.ac.id
Sifat Biokimia : Batang motil dengan flagelum peritrikus, membentuk
kapsul. Sitrat dan acetat dapat digunakan sebagai sumber karbon satu-
satunya, pada suhu kamar menghasilkan pigmen merah muda, merah atau
magenta. Glukosa difermentasi dengan atau tanpa produksi gas ( Pelzcar,
2008). Patogenitas : Serratia marcescens merupakan bakteri yang paling
sering menyebabkan infeksi nosokomial, biasa ditemukan dalam makanan,
terutama pada tepung. Penularan melalui kontak langsung, dan jika bakteri ini
masuk ke dalam aliran darah dan sistem pernafasan, maka dapat
menyebabkan abses paru, empiema, meningitis, ISK, endokarditis, septic
arthritis, osteomyelitis, peritonisis, sinusitis dan seoticaemia ( Pratami, 2012)
Gambar 3. Serratia marcescens
http://lib.unimus.ac.id
2.2.Kerangka Teori
Gambar 4. Kerangka Teori
2.3.Kerangka Konsep
Gambar 5. Kerangka Konsep
2.4. Hipotesis Penelitian
Ada pengaruh variasi konsentrasi tepung ampas tahu terhadap jumlah koloni
bakteri Serratia Marcescens.
Variasi konsentrasi
tepung ampas tahu Jumlah koloni bakteri
Serratia Marcescens
Media Pertumbuhan
Agar dan Tepung Ampas
Tahu Konsentrasi
6%,7%,8%,9% dan 10%
Jumlah Koloni Bakteri
Serratia Marcescens
Bakteri
Serratia Marcescens
Cair Semi Solid Padat
http://lib.unimus.ac.id
BAB III
METODE PENELITIAN
3.1. Jenis Penelitian
Jenis penelitian ini adalah eksperimen atau percobaan (experimental
research) yaitu suatu metode penelitian dengan melakukan kegiatan percobaan
(experiment), yang bertujuan untuk mengetahui gejala atau pengaruh yang timbul,
sebagai akibat dari adanya perlakuan tertentu atau eksperimen tersebut
(Notoatmodjo, 2010).
3.2. Desain Penelitian
Variasi konsentrasi sampel terdiri dari lima perlakuan yaitu 6%,7%,8%,9%
dan 10%. Pengulangan sampel menggunakan rumus Gomez and Gomez
(Hanafiah, 1995). Rumus ulangan yaitu:
(t – 1) (r – 1) ≥ V2
(5 – 1) (r – 1) ≥ 6 Keterangan:
4 (r – 1) ≥ 6 r = replikasi
4r – 4 ≥ 6 t = treatmen sampel
4r ≥ 10/4 V2 = derajat bebas galat
r ≥ 2,5 = 3 N = unit sampel
N = r x t
= 3 x 5
= 15
http://lib.unimus.ac.id
Pengulangan yang digunakan pada tiap-tiap perlakuan sampel sebanyak 3
kali, sehingga sampel yang akan dibuat adalah 15 unit sampel yang
dikerjakan.Kombinasi perlakuan dan ulangan dalam satu percobaan dapat dilihat
pada Tabel 3.
Tabel 4. Kombinasi Perlakuan dan Ulangan Dalam Satu Percobaan
Pengulangan
Sampel
Konsentrasi Tepung Ampas Tahu
6% 7% 8% 9% 10%
1 A-1 B-1 C-1 D-1 E-1
2 A-2 B-2 C-2 D-2 E-2
3 A-3 B-3 C-3 D-3 E-3
Keterangan :
A-1 sampai A-3: Konsentrasi tepung ampas tahu sebanyak 6% pengulangan
ke-1 sampai 3.
B-1 sampai B-3:Konsentrasi tepung ampas tahu sebanyak 7% pengulangan
ke-1 sampai 3.
C-1 sampai C-3:Konsentrasi tepung ampas tahu sebanyak 8% pengulangan
ke-1 sampai 3.
D-1 sampai D-3: Konsentrasi tepung ampas tahu sebanyak 9% pengulangan
ke-1 sampai 3.
E-1sampai E-3 : Konsentrasi tepung ampas tahu sebanyak 10% pengulangan
ke-1 sampai 3.
3.3. Tempat dan Waktu Penelitian
Tempat Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Mikrobiologi Analis
Kesehatan Fakultas Ilmu Keperawatan dan Kesehatan Universitas
Muhammadiyah Semarang Jalan Kedungmundu Raya No.18 Semarang dan
Laboratorium Mikrobiologi Poltekkes Kemenkes Semarang Jl.Woltermonginsidi
No.115 Pedurungan Semarang dimulai dari bulan Agustus 2016.
http://lib.unimus.ac.id
3.4. Variabel Penelitian
3.4.1. Variabel Bebas
Variabel bebas pada penelitian ini adalah variasi konsentrasi tepung
ampas tahu.
3.4.2. Variabel Terikat
Variable terikat pada penelitian ini adalah jumlah koloni bakteri
Serratia marcescens.
3.5. Definisi Operasional
Tabel 5. Definisi Operasional No. Variabel
Penelitian
Definisi Operasional Skala
1. Tepung Ampas
Tahu
Bahan dasar pembuatan media tepung ampas
tahu. Tepung ampas tahu tersebut diayak
dengan ayakan 100 mesh dengan kadar air
4,8034 % dan dibuat media dalam berbagai
konsentrasi yaitu 6%,7%, 8%, 9% dan 10%
dengan menambahkan agar sesuai dengan
hasil optimasi agar netral.
Rasio
2. Jumlah Bakteri
Serratia
marcescens
Jumlah koloni bakteri Serratia marcesens
yang tumbuh pada media tepung ampas tahu
dengan menggunakan metode hitung cawan
spread plate.
Rasio
3.6. Obyek Penelitian
Obyek penelitian ini adalah biakan bakteri Serratia marcescens dan ampas
tahu yang dibeli di pabrik tahu di daerah Tandang Semarang.
3.7. Alat dan Bahan
Alat yang digunakan yaitu oven, timbangan analitik, yellow tip dan blue
tip steril, Cawan Petri, Autoklaf, Bunsen, Vortex, Triangle, Inkubator.
http://lib.unimus.ac.id
Bahan yang digunakan dalam penelitian yaitu NaCl fisiologis 0,85% steril,
Aquadest, Biakan bakteri Serratia marcescens, Tepung ampas tahu, Agar putih,
Nutrient Agar, media NA dan MC.
3.8. Prosedur Penelitian
3.8.1. Tahap Persiapan
a. Pembuatan tepung ampas tahu
Ampas tahu dibeli dari pabrik tahu, diperas menggunakan kain peras.
Kemudian dikeringkan menggunakan oven suhu 1000C sampai
kering, kemudian dihaluskan menggunakan blender tepung.Tepung
ampas tahu diayak dengan ayakan tepung 100 mesh supaya butiran
tepung lebih halus.
b.Optimasi variasi agar netral untuk menentukan tekstur yang
paling baik
Ditimbang agar netral masing-masing sebanyak 1,5g, 1,75g dan 2g.
Ditambahkan tepung ampas tahu sebanyak 6g, 7g, 8g, 9g dan 10g
dilarutkan dengan 100 ml aquades dalam erlenmeyer. Kemudian
dipanaskan dan diaduk sampai larut dan dituang kedalam cawan
petri dan didiamkan sampai mengeras. Diamati tekstur yang paling
baik digunakan untuk media tepung ampas tahu yaitu tidak terlalu
padat dan tidak terlalu lunak ( Jawetz, Melnick, Adelberg, 2005)
http://lib.unimus.ac.id
c. Pembuatan suspensi dan Orientasi Pengenceran Serratia
marcescens
Koloni bakteri Serratia marcescens yang akan digunakan dikultur
pada media penyubur BHI (Brain Heart Infusion)lalu diinkubasi
370C selama 24 jam kemudian dikultur pada media MC (Mac
Conkey) dan diinkubasi 370C selama 24 jam lalu diuji biokimia,
setelah diidentifikasi positif Serratia marcescens, lalu gores pada
media HIA ( Heart Infusion Agar)dan diinkubasi 370C selama 24
jam sebagai stok strain.
Dilakukan uji kekeruhan standar McFarland yaitu 0,5 McFarland
diperkirakan jumlah bakteri sebanyak 1,5x108 sel/ml. Dilakukan
pengenceran suspensi sebanyak 6 kali yaitu 10-1
, 10-2
, 10-3
,10-4
, 10-5
10-6
dan 10-7
dengan NaCl fisiologis steril.
Gambar.6 Prosedur plate count atau hitung cawan dengan
menggunakan seri pengenceran (Madigan et al,2013)
http://lib.unimus.ac.id
d. Pembuatan media tepung ampas tahu
Ditimbang tepung ampas tahu sebanyak 6g, 7g, 8g, 9g dan10g
ditambahkan agar netral sesuai hasil optimasi dan dilarutkan dengan
100 ml aquades dalam erlenmeyer. Dipanaskan dan dihomogenkan.
Diperiksa pH pada media dengan kertas indikator pH, syarat media
pH harus netral. Larutan media tepung ampas tahu ditutup dengan
menggunakan kapas. Disterilkan dengan autoklaf suhu 1210C
tekanan 2 atm selama 15 menit. Media tepung ampas tahu dituang
kedalam cawan petri, masing – masing konsentrasi dibuat sebanyak
tiga media tepung ampas tahu dan dilebihkan untuk stok media.
e. Pembuatan Media NA
Ditimbang 2 gram NA dengan menggunakan neraca analitik dan
dilarutakan dalam 100 ml aquades. dipanaskan sambil diaduk hingga
larut sempurna. Dimasukkan kedalam erlemeyer kemudian ditutup
dengan kapas. Sterilisasi dengan autoklaf selama 15 menit pada suhu
1210C. Setelah suhu turun ± 60
0C, tuang secara aseptis pada cawan
petri steril sebanyak ± 20 mL.
3.8.2. Tahap penelitian
Suspensi bakteri Serratia marcescens yang sudah diencerkan sampai 10-7
diinokulasi sebanyak 0,1 ml pada masing – masing media tepung ampas tahu
dengan berbagai variasi yang siap digunakan. Diinkubasi pada inkubator suhu
ruang selama 48 jam kemudian dilakukan perhitungan jumlah koloni.
Dilakukan pada media Nutrient Agar sebagai media kontrol.
http://lib.unimus.ac.id
3.9. Alur Penelitian
Gambar. 7 Alur Penelitian
Persiapan Alat dan Bahan
Tahap Persiapan Tahap Penelitian
Pembuatan tepung ampas
tahu
Optimasi Agar Netral
Pembuatan media tepung
ampas tahu dengan variasi
konsentrasi 6% b/v, 7% b/v,
8% b/v, 9% b/v dan 10% b/v
Tahap Persiapan Tahap Penelitian
Pembuatan tepung ampas
tahu
Uji kenormalan dan
homogenitas Data
Uji Statistik
Analisa Data
Kesimpulan
Pembuatan suspensi dan
Pengenceran bakteri
Serratia Marcescens
Hitung jumlah koloni
pada media Tepung
ampas tahu
http://lib.unimus.ac.id
3.10. Teknik Pengumpulan dan Analisis Data
a. Pengumpulan Data
Data pada penelitian ini adalah menggunakan data primer yaitu
semua data yang diperoleh secara langsung dari penelitian yang dilakukan
oleh peneliti. Pengumpulan data primer dilakukan dengan cara
perlakuanterhadap sampel dan kemudian dilakukan pemeriksaan
bakteriologis terhadap pertumbuhan bakteri Serratia marcescens berupa
jumlah koloni dari masing-masing sampel.
b. Analisis Data
Data yang telah terkumpul diinput dalam program statistik. Uji
kenormalan data dilakukan dengan uji Shapiro Wilk karena sampel yang
digunakan kurang dari 50. Data yang diperoleh berdistribusi normal
dengan p value>0,05, dan dilakukan uji homogenitas dengan hasil data
homogen nilai pvalue>0,05. Analisis data dilanjutkan menggunakan uji
Analysis of Variance (ANOVA) dengan p value >0,05 maka Ho diterima
dan Ha ditolak. Kesimpulan yang diperoleh tidak ada pengaruh variasi
konsentrasi tepung ampas tahu terhadap jumlah koloni bakteri Serratia
marces
http://lib.unimus.ac.id
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Hasil Penelitian
Gambaran umum sampel berdasarkan hitung jumlah koloni bakteri
Serratia marcescens pada media tepung ampas tahu dengan berbagai
konsentrasi tepung ampas tahu yaitu 6% b/v, 7% b/v, 8% b/v, 9% b/v dan
10% b/v. Metode yang digunakan adalah spread plate dengan waktu inkubasi
2x24 jam pada suhu ruang didapatkan hasil sebagai berikut :
Tabel 6. Jumlah koloni bakteri Serratia marcescens pada media
tepung ampas tahu
Pengulangan
Sampel
Jumlah Koloni CFU/ml pada Konsentrasi Tepung
Ampas Tahu (108)
Kontrol
(108)
Uji Sterilitas
Media
6% 7% 8% 9% 10% NA
1 26
13
26
25
35
25
0
2 24
35
24
26
24
11
0
3 15
25
27
29
27
25
0
Rata-rata
Jumlah Koloni
22
24
26
27
29
20
0
4.2 Pembahasan
Tabel 5 menunjukkan bahwa jumlah koloni pada semua konsentrasi
meningkat jika dibandingkan dengan media kontrol. Pengulangan sampel
sebanyak tiga kali dapat dilihat perbedaan jumlah koloni yang sangat jauh,
dapat dilihat pada konsentrasi 6% pengulangan sampel ketiga diperoleh 15
koloni dan konsentrasi 7% pada pengulangan kesatu diperoleh 13 koloni, hal
ini dapat disebabkan pada saat homogenisasi suspensi kurang homogen
sehingga diperoleh jumlah koloni lebih sedikit (Lampiran 5). Pada media
33
http://lib.unimus.ac.id
kontrol pengulangan kedua juga dapat dilihat jumlah koloni sebanyak 11, hal
ini disebabkan karena koloni menumpuk sehingga dihitung 1 koloni
meskipun terdapat 5 koloni yang menumpuk (dapat dilihat pada lampiran 5).
Uji sterilitas media juga dilakukan dengan inkubasi pada suhu ruang selama
2x24 jam, dari semua variasi konsentrasi tidak dijumpai adanya pertumbuhan
bakteri, hal ini menunjukkan media tepung ampas tahu steril. Ukuran dan
warna koloni dapat dilihat pada tabel berikut :
Tabel 7. Ukuran dan warna koloni bakteri Serratia marcescens
Koloni
bakteri
Konsentrasi tepung ampas tahu pada inkubasi suhu ruang 2x24 jam
6% 7% 8% 9% 10 % Media Kontrol
Gambar
Ukuran 2mm 2mm 2mm 2mm 2mm 3mm
Warna merah merah merah merah merah merah
Tabel 6 menunjukkan koloni bakteri Serratia marcescens yang tumbuh
pada media tepung ampas tahu pada semua konsentrasi berukuran lebih kecil
dari koloni yang dihasilkan oleh media kontrol. Selain itu laju pertumbuhan
bakteri lebih lambat jika dibandingkan dengan media kontrol. Inkubasi
dilakukan pada suhu ruang dikarenakan bakteri Serratia marcescens bersifat
fakultatif anaerob atau tidak terlalu membutuhkan oksigen. Pada inkubasi
1x24 jam, ukuran koloni sangat kecil dan berwarna merah muda atau pigmen
merah belum terbentuk sehingga diperlukan penambahan waktu inkubasi
yaitu 2x24 jam sehingga didapatkan hasil koloni ukuran 2 mm selain itu
http://lib.unimus.ac.id
pigmen merah atau prodigiosin yang dihasilkan pada media tepung ampas
tahu lebih bagus dibanding pigmen merah yang dhasilkan pada media
Nutrient Agar. Jumlah koloni dari semua konsentrasi menunjukkan bahwa
pada konsentrasi 6% dapat digunakan sebagai pengganti Nutrient Agar
karena dari jumlah koloninya paling mendekati dengan media kontrol.
Menurut Yustina (2012), tepung ampas tahu mengandung protein
sebesar 10,80%, kadar air 5,74%, lemak 14,49%, abu 9,02% dan karbohidrat
59,95%, sedangkan kandungan protein pada media Nutrient Agar sebanyak
98%. Kandungan nutrisi tersebut dapat menyebabkan bakteri Serratia
marcescens tumbuh pada media tepung ampas tahu meskipun ukurannya
lebih kecil dibanding dengan media Nutrient Agar, selain itu dari jenis protein
tepung ampas tahu adalah protein nabati dan pada Nutrient Agar adalah
protein hewani.
Faktor-faktor yang dapat mempengaruhi pertumbuhan diantaranya
adalah faktor nutrisi, suhu, pH dan tekanan osmotik (Pelczar & Chan, 2010).
Nutrisi dapat digunakan sebagai sumber energi, karbon, sulfur, nitrogen,
sulfur, fosfor, mineral dan vitamin. Ukuran koloni juga dapat disebabkan
nutrisi pada tepung ampas lebih sedikit dibanding dengan Nutrient Agar
untuk pertumbuhan bakteri Serratia marcescens.
Suhu optimum untuk pertumbuhan bakteri Serratia marcescens berkisar
antara 50C – 40
0C dengan dengan derajat keasaman berkisar antara 5 – 9
(Brooks, Butel, & Morse, 2008). Pada pembuatan media tepung ampas tahu
didapatkan pH media tepung ampas tahu adalah 7 maka dapat diketahui
http://lib.unimus.ac.id
faktor yang paling berpengaruh terhadap pertumbuhan bakteri Serratia
marcescens yaitu faktor nutrisi. Selain faktor nutrisi, bakteri tersebut sedang
berada pada fase adaptasi yaitu ketika bakteri dipindahkan ke lingkungan
baru maka ia akan mengalami proses adaptasi meliputi sintesis enzim baru
yang berbeda dengan media tumbuh sebelumnya dan pemulihan terhadap
metabolik yang bersifat toksik seperti asam, alkohol dan basa. Respon
adaptasi dapat dikarenakan kekurangan nutrien pada media tepung ampas
tahu ini ditunjukkan dengan ukuran bakteri yang kecil (Jawetz, Melnick,
Adelberg, 2005).
Penelitian diolah dan dianalisis dengan uji ANOVA, syarat uji anova
adalah data berdistribusi normal dan homogen ditunjukkan dengan uji
kenormalan data menunjukkan bahwa nilai p value > 0,05 (lampiran 4) yang
berarti data yang dihasilkan berdistribusi normal dan uji homogenitas
menunjukkan bahwa nilai p value > 0,05 (lampiran 4) yang berarti data yang
dihasilkan bersifat homogen. Dilanjutkan dengan uji ANOVA diperoleh nilai
signifikasi 0,150 (p > 0,05), hal ini menunjukkan bahwa tidak ada pengaruh
signifikan tepung ampas tahu terhadap jumlah koloni bakteri Serratia
marcescens.
http://lib.unimus.ac.id
BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
A. Kesimpulan
1. Rerata jumlah koloni pada kelompok kontrol menggunakan media
Nutrient Agar sebanyak 20 x 108 CFU/ml, pada kelompok perlakuan
media tepung ampas tahu dengan konsentrasi 6 % sebanyak 22 x 108
CFU/ml, konsentrasi 7 % sebanyak 24 x 108
CFU/ml, konsentrasi 8 %
sebanyak 26 x 108 CFU/ml, konsentrasi 9 % sebanyak 27 x 10
8 CFU/ml
dan pada konsentrasi 10 % sebanyak 29 x 108 CFU/ml.
2. Konsentrasi tepung ampas tahu yang paling baik untuk pertumbuhan
bakteri Serratia marcescens adalah pada konsentrasi 6 % b/v, dimana
pada konsentrasi tersebut jumlah koloninya hampir sama dengan media
kontrol yaitu Nutrient Agar.
3. Tidak ada pengaruh variasi konsentrasi tepung ampas tahu terhadap
jumlah koloni bakteri Serratia marcescens.
B. Saran
1. Tepung ampas tahu dapat dimanfaatkan sebagai media alternatif
pengganti media Nutrient Agar yaitu dengan penggunaan konsentrasi 6%.
2. Bagi peneliti selanjutnya, perlu dilakukan penelitian lebih lanjut dengan
melakukan penelitian dengan metode dan jenis bakteri yang berbeda.
Selain itu dapat lebih disempurnakan komposi tepung ampas tahu seperti
penambahan enzim.
37 http://lib.unimus.ac.id
3. Peneliti selanjutnya dapat memanfaatkan filtrat atau perasan awal ampas
tahu sebagai media cair yang dapat digunakan sebagai media uji misalnya
uji indol atau MR (Methyl Red) dan VP(Voges Proskauer).
http://lib.unimus.ac.id
DAFTAR PUSTAKA
Anisah, Rahayu T. (2015). Media Alternatif untuk Pertumbuhan Bakteri
Menggunakan Sumber Karbohidrat yang Berbeda.Seminar Nasional XII
Pendidikan Biologi Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas
Muhammadiyah Surakarta.Indonesia.855-860
Ariesta, R. (2013). Jumlah Bakteri Pada Media Nutrient Agar Dengan Pemadat
Swallow Globe Putih Dan Bacto –Agar Dengan Variasi Konsentrasi Pada
Metode Tuang.Program Studi DIII Analis Kesehatan Universitas
Muhammadiyah Semarang.
Bimbi, M.(2012). Tepung Sagu Sebagai Pemadat Media Kultur Untuk
Bakteri.Program Studi DIII Analis Kesehatan Universitas Muhammadiyah
Semarang.
Brooks, G.F., Butel, J.S. & Morse, S.A. (2008).Jawetz, Melnick & Adleberg’s.
Mikrobiologi Kedokteran. (23th ed.). Jakarta: EGC
Elizabeth, W & Susana ,IWR (2013). Manfaat Lemak Terproteksi Untuk
Meningkatkan Produksi dan Reproduksi Ternak Ruminansia. Wartazoa23
(4):176-184.
Fadlun A., Firdauz M & Ariyanti,V. “Pelor Pasta”(Pelet Organik Ampas Tahu)
Peluang Usaha Hasil Pemanfaatan Limbah Ampas Tahu di Desa Tempel
Sari, Wonosobo. PKM-Kewirausahaan, Universitas Negeri Semarang.
http://www.uap.unnes.ac.id
Diakses tanggal 17 Desember 2015
Fardiaz, S. (1989). Mikrobiologi Pangan.Bogor: Jurusan Teknologi Pangan dan
Gizi, Fakultas Tekonologi Pertanian, Institut Pertanian Bogor.
Hanafiah, K.A. (2003). Rancangan Percobaan Teori dan Aplikasi (3th ed).
Jakarta: PT Raja Grafindo Persada Jakarta.
Harti, A. S. (2014). Mikrobiologi Kesehatan. Yogyakarta: CV. Andi Offset.
Jawetz, Melnick, & Adelberg’s. 2005. Mikrobiologi Kedokteran. Salemba
Medika. Jakarta
Komarawidjaja, W.(2009). Karakteristik dan Pertumbuhan Konsorsium Mikroba
Lokal dalam Media Mengandung Minyak Bumi. Pusat Teknologi
Lingkungan Badan Pengkajian dan Penerapan Teknologi.Jakarta.(ISSN
1441-318X:114-119).
Madigan, MT., Martinko, JM., Stahl, D.A & Clark, D.P. 2013. Brock Biology of
Microorganisms. Trirteenth Edition. Benjamin Cummings.New York.
Notoatmodjo, S.(2010). Metodologi Penelitian Kesehatan, PT Rangka
Cipta.Jakarta.
Pelczar, M.J. &Chan, E.C.S. (2010).Dasar-dasar Mikrobilogi I. (Hadioetomo RS,
Imas T, Tjitrosomo SS, Angka SL). Jakarta: UI Press
Pelczar, M.J. &Chan, E.C.S. (2008). Dasar-dasar Mikrobilogi lI. (Hadioetomo
RS, Imas T, Tjitrosomo SS, Angka SL). Jakarta: UI Press
42
http://lib.unimus.ac.id
Pratami H.A, Apriliana E & Prambudi R. (2012).Identifikasi Mikroorganisme
Pada Tangan Tenaga Medis dan Paramedis di Unit Perinatologi Rumah
Sakit Abdoel Moeloek .Bandar Lampung.Fakultas Kedokteran Universitas
Lampung.
Rizky, W.D. (2013). Pengaruh Kandunngan Protein Tepung Bulu Ayam Sebagai
Media Pertumbuhan Bakteri Escherichia coli. Semarang: Jurusan Analis
Kesehatan, Poltekkes Kemenkes Semarang.
Sulistiani. (2004). Pemanfaatan Ampas Tahu dalam Pembuatan Tepung Tinggi
Serat dan Protein Sebagai Alternatif Bahan Baku Pangan
Fungsional.Departemen Gizi Masyarakat dan Sumber Daya Keluarga,
Fakultas Pertanian, Institut Pertanian Bogor.http://www.repository.ipb.ac.id.
Diakses tanggal 2 januari 2016 Yustina, I. & Abadi, F.R. (2012). Potensi Tepung dari Ampas Industri
Pengolahan Kedelai Sebagai Bahan Pangan.Seminar Nasional Kedaulatan
Pangan dan Energi, Fakultas Pertanian, Universitas Trunojoyo Madura.
http://lib.unimus.ac.id
Lampiran 1. Data Mentah Hasil Penelitian
Tabel 8. Data Mentah Hasil Penelitian
Pengulangan
Sampel
Konsentrasi Tepung Ampas Tahu Kontrol
Media NA
Uji
Sterilitas
Media 6% 7% 8% 9% 10%
1 26 13 26 25 35 25 0
2 24 35 24 26 24 11 0
3 15 25 27 29 27 25 0
Rata-rata jumlah
koloni bakteri
22
24
26
27
29
20
0
http://lib.unimus.ac.id
Lampiran 2. Uji Formalin
Uji formalin bertujuan untuk memastikan bahwa ampas tahu bebas dari
formalin yang dapat menghambat pertumbuhan bakteri. Uji formalin
menggunakan kit tes formalin, ampas tahu dilarutkan dalam 2 ml aquadest.
Diambil 1 ml presipitat ampas tahu, ditambahkan 3-5 tetes pereaksi I
formalin dengan hati-hati tetes demi tetes. Ditambahkan pereaksi II formalin
kurang lebih 1 mg kedalam tabung dan dikocok kemudian didiamkan
selama 5 menit. Formalin positif jika terbentuk warna ungu kebiruan.
Adapun hasil Uji formalin sebagai berikut:
Tabel 9. Hasil Uji Formalin
Gambar Keterangan Hasil
Ampas Tahu Negatif
Kontrol Positif Positif
http://lib.unimus.ac.id
Lampiran 3. Optimasi variasi agar netral
Tabel 10. Penentuan Jumlah Agar-Agar Sebagai Pemadat Media
Konsentrasi Tepung
Ampas Tahu
1,5 g 1,75 g 2 gr
6% lunak padat keras
7% lunak padat keras
8% lunak padat keras
9% padat keras keras
10% padat keras keras
Keterangan:
Berdasarkan hasil optimasi agar netral dari tiga variasi jumlah agar
dihasilkan satu tekstur yang mendekati atau sesuai denhgan tekstur media
universal yaitu dengan jumlah agar pemadat 1,5 g/100 ml pada konsentrasi
tepung ampas tahu 9% dan 10%, sedangkan jumlah agar pemadat 1,75
g/100 ml pada konsentrasi tepung ampas tahu 6%, 7% dan 8%. Data ini
diperoleh dari hasil kuisioner :
Tabel 11. Hasil Kuisioner Kecocokan Penambahan Agar
NO NAMA Kecocokan penambahan jumlah agar pada konsentrasi tepung
ampas tahu
6 % 7 % 8 % 9% 10 %
1 Devinda 1,75 g 1,75 1,75 1,5 1,5
2 Bimo Rizky 1,75 g 1,75 1,75 1,5 1,5
3 Ika Rahma 1,75 g 1,75 1,75 1,5 1,5
4 Diana H 2 g 1,75 1,75 1,5 1,5
5 Desi Astuti 1,75 g 1,75 1,75 1,5 1,5
6 Dian Yulia 1,75 g 1,75 1,75 1,5 1,5
7 Diego Tri A 1,75 g 1,75 1,75 1,5 1,5
8 Okta 1,75 g 1,75 1,75 1,5 1,5
9 Ni Putu 1,75 g 1,75 1,75 1,5 1,5
10 Luluk Nur. A 1,75 g 1,75 1,75 1,5 1,5
http://lib.unimus.ac.id
Lampiran 4. Hasil Uji Statistik
Uji Kenormalan Data
Tests of Normality
Konsentrasi tepung ampas tahu
Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk
Statistic df Sig. Statistic df Sig.
jumlah_koloni_bakteri 6% .321 3 . .881 3 .328
7% .191 3 . .997 3 .900
8% .253 3 . .964 3 .637
9% .292 3 . .923 3 .463
10% .282 3 . .936 3 .510
Tabel diatas menunjukkan bahwa nilai p value > 0,05 yang berarti data yang
dihasilkan berdistribusi normal.
Uji homogenitas
Test of Homogeneity of Variances
jumlah_koloni_bakteri
Levene Statistic df1 df2 Sig.
2.143 4 10 .150
Dari tabel diatas menunjukkan bahwa nilai p value > 0,05 yang berarti data yang
dihasilkan bersifat homogen. Syarat uji anova adalah data berdistribusi normal
dan homogen
http://lib.unimus.ac.id
ANOVA
Jumlah
Sum of Squares df Mean Square F Sig.
Between Groups 178.902 5 35.780 .808 .568
Within Groups 487.333 11 44.303
Total 666.235 16
Tabel diatas menunjukkan bahwa nilai p value > 0,05 yang berarti perbedaan dari
berbagai variasi konsentrasi tepung ampas tahu dibandingkan dengan media
Nutrient Agar tersebut tidak signifikan. Artinya bahwa tidak ada pengaruh tepung
ampas tahu terhadap pertumbuhan bakteri Serratia marcescens.
http://lib.unimus.ac.id
Lampiran 5. Dokumentasi Penelitian
a
Pengulangan 1
b
Pengulangan 2
c
Pengulangan 3
Gambar 1. hasil jumlah koloni pada tepung ampas tahu konsentrasi 6%
a
Pengulangan 1
b
Pengulangan 2
c
Pengulangan 3
Gambar 2. hasil jumlah koloni pada tepung ampas tahu konsentrasi 7%
a
Pengulangan 1
b
Pengulangan 2
c
Pengulangan 3
Gambar 3. hasil jumlah koloni pada tepung ampas tahu konsentrasi 8%
http://lib.unimus.ac.id
Lanjutan Lampiran 5.
a
Pengulangan 1
b
Pengulangan 2
c
Pengulangan 3
Gambar 4. hasil jumlah koloni pada tepung ampas tahu konsentrasi 9%
a
Pengulangan 1
b
Pengulangan 2
c
Pengulangan 3
Gambar 5. hasil jumlah koloni pada tepung ampas tahu konsentrasi 10%
a b c
Gambar 6. Hasil Jumlah Koloni pada Media Nutrient Agar 3 pengulangan
http://lib.unimus.ac.id
Lanjutan Lampiran 5.
Pengenceran 10
-1
Pengenceran 10-2
Pengenceran 10-3
Pengenceran 10
-4
Pengenceran 10
-5 Pengenceran 10
-6
Pengenceran 10-6
inkubasi 48 jam
Pengenceran 10-7
inkubasi 48 jam
Gambar 7. Hasil Orientasi Pengenceran suspensi10-1
sampai dengan 10
-7
http://lib.unimus.ac.id
Gambar 8. Perataan Suspensi
Gambar 9. inkubasi bakteri Serratia marcescens pada suhu ruang
Gambar 10. Hasil Uji Sterilitas Media
http://lib.unimus.ac.id
Lanjutan Lampiran 5.
Gambar 11. Proses pengeringan ampas tahu dengan oven
a
Gambar ampas tahu
basah
b
Gambar ampas tahu
kering
c
Gambar tepung ampas
tahu
Gambar 11. Ampas tahu basah – kering - tepung ampas tahu
Gambar 12.Kit Tes Formalin
Gambar 13. Pengecatan Gram pada
koloni berwarna putih
http://lib.unimus.ac.id
http://lib.unimus.ac.id