RESUME SENSOR MIP :

Analisis Benzo [a] pyrene dalam Minyak Nabati Menggunakan Molecularly Imprinted

Solid Phase (MISPE) Ditambah dengan Enzim Linked Immunosorbent Assay-(ELISA)

Makalah ini menjelaskan pengembangan molekuler dicantumkan berbasis polimer fasa

padat ekstraksi (MISPE) metode ditambah dengan enzim-Linked Immunosorbent Assay

(ELISA) untuk penentuan PAH benzo [a] pyrene (B [a] P) dalam sayuran minyak. Bagian

Eksperimen terdiri dari :

2.1. Bahan dan Reagen

2.2. MIP Persiapan

2.3. Percobaan rebinding

2.4. Metode ekstraksi

2.5. Cross-Reaktivitas (CR) Penentuan

2.6. GC / MS Pengukuran

2.7. Selektivitas MIP

Berbeda molekuler polimer dicetak (MIPS) disusun menggunakan non-kovalen 4-

Vinylpyridine / divinylbenzene co-polimerisasi pada rasio yang berbeda dan diklorometana

sebagai porogen. Pencantuman dilakukan dengan campuran template fenantrena dan pyrene

menghasilkan polimer luas khusus untuk PAH dengan kapasitas mengikat maksimum (Q)

dari ~ 32 mg B [a] P per 50 mg polimer. The minyak sayur / n-heksana campuran (1: 1, (v /

v)) adalah pre-diekstraksi dengan asetonitril, pelarut diuapkan, residu dilarutkan dalam n-

heksana dan dikenakan MISPE. Mencuci berturut-turut dengan n-heksana dan isopropanol

mengungkapkan yang paling cocok untuk menghilangkan konstituen matriks lipid. Setelah

elusi PAH terikat dari MISPE kolom dengan diklorometana, pelarut diuapkan, residu

dilarutkan dengan dimetil sulfoksida dan diencerkan 100 kali lipat dengan metanol / air

(10:90, (v / v)) untuk analisis B [a] P setara dengan ELISA. B [a] P tingkat pemulihan sampel

minyak nabati berduri komposisi asam lemak yang berbeda ditentukan antara 63% dan 114%.

Kehadiran beberapa PAH dalam sampel minyak, karena MIP selektivitas dan reaktivitas

silang dari ELISA, dapat menghasilkan berlebihan B [a] P nilai.Dari makalah ini dapat ditarik

kesimpulan yaitu untuk pertama kalinya, molekuler dicantumkan ekstraksi fase padat

(MISPE) dan ELISA dikombinasikan untuk menganalisis B [a] P dalam minyak nabati.

Berbeda dengan investigasi sebelumnya, yang difokuskan pada persiapan MIP untuk B [a] P

menggunakan target analit sebagai template, molekul PAH Template kurang beracun pyrene

dan fenantrena yang digunakan untuk membuat situs affine mengikat. Pengikatan B [a] P dari

pelarut yang berbeda diuji dengan menggunakan n-heksana, DMSO dan MeCN. Ditemukan,

bahwa sekitar 95% dari B [a] P yang terikat pada kolom dari n-heksana dan MeCN,

sedangkan dengan DMSO lebih dari 60% dari dimuat B [a] P terdeteksi dalam aliran melalui.

Untuk elusi, bagaimanapun, DCM terbukti elusi paling berguna dan lengkap B [a] P dari

kolom dapat dicapai dengan 5 mL pelarut. Prosedur cuci yang efisien untuk kolom MISPE

setelah penambahan ekstrak minyak nabati dapat dibentuk dengan menggunakan 3 mL n-

heksana dan 5 mL isopropanol berturut-turut. Bisa ditunjukkan, bahwa kedua pelarut

menjamin efisiensi tinggi removal matriks sementara tetap mempertahankan B [a] P pada

kolom MISPE. Untuk deteksi B [a] P, MISPE dikombinasikan dengan deteksi

immunoanalytical menggunakan anti-B [a] P ELISA. Untuk itu, residu yang tersisa setelah

penguapan pelarut elusi DCM diangkat dalam DMSO dan diencerkan dalam air yang

mengandung 10% metanol. Volume DMSO serta faktor pengenceran dalam air / metanol

dioptimalkan untuk memastikan deteksi dalam rentang konsentrasi yang relevan secara

hukum (2 mg / kg untuk B [a] P dalam minyak nabati). Kalibrasi ELISA dilakukan pada

ekstrak berbagai jenis sampel minyak dengan berbagai komposisi asam lemak. B [a] P tingkat

pemulihan sampel minyak berduri ditentukan antara 63% dan 114% untuk minyak zaitun,

minyak bunga matahari dan minyak biji rami. Analisis sampel minyak zaitun yang berisi

semua 15 (+1) PAH dari daftar prioritas Uni Eropa dan ditentukan secara paralel dengan GC /

MS mengungkapkan terlalu tinggi dari B [a] P konsentrasi dengan faktor sekitar 2. Ini adalah

jelas terbukti disebabkan oleh selektivitas luas pola MIP polimer dan reaktivitas silang as-

siap dari yang digunakan anti-B [a] P-antibodi. Terlepas dari keterbatasan ini, setiap B [a] P

konsentrasi di bawah set nilai BMR dari 2 mg / kg seperti yang diperoleh dengan dijelaskan

MISPE-ELISA jelas akan menunjukkan kualitas yang dapat diterima dari minyak nabati.

Mengabaikan hasil yang diperoleh menjanjikan, metode ini masih pada tahap awal, yaitu,

adalah bukti dari konsep daripada metode divalidasi sepenuhnya yang harus terdiri dari

jaminan kualitas yang sangat rinci / kontrol kualitas (QA / OC) prosedur [47].