pipet dan mikropipet
TRANSCRIPT
Apa fungsi Pipet pada Laboratorium ?Pipet adalah salah satu alat Laboratorium yang umum digunakan. Pipet mempunyai ukuran yang kecil dan biasanya terbuat dari plastik atau kaca dengan ujung bawahnya meruncing serta ujung atasnya ditutupi karet. Berguna untuk mengambil cairan dalam skala tetesan kecil.
Terkadang pada proses penelitian kita diharuskan memindahkan cairan yang volumenya tidaklah terlalu besar, disaat itu lah kita membutuhkan pipet yang dapat memindahkan cairan yang tidak besar volumenya dari satu wadah ke wadah lainnya.
Pemindahan cairan dengan menggunakan pipet memang membutuhkan waktu yang agak lama, karena biasanya kita harus menggunakan pipet jenis pipet tetes yang memiliki volume maksimal tidak lebih dari 5ml. tapi demi hasil ukuran yang sesuai kita harus tetap menggunakan pipet tetes .
Pipet tetes memiliki berbagai bentuk ukuran mulai dari yang terkecil 1ml, hingga ukuran pipet tetes yang paling besar yaitu 5ml.
http://www.alatlabor.com/article/detail/52/apa-fungsi-pipet-pada-laboratorium-
N~ PIPET TETES ~
Pipet tetes (Pasteur Pippete) Fungsinya sama dengan pipet ukur, namun volume yang dipindahkan tidak diketahui. Salah satu penerapannya adalah dalam menambahkan HCl / NaOH saat mengatur pH media, penambahan reagen ada uji biokimia, dll.
O~ PIPET UKUR ~
Pipet ukur merupakan alat utk memindahkan larutan dengan volume yang diketahui. Tersedia berbagai macam ukuran kapasitas pipet ukur, diantaranya pipet berukuran 1 ml, 5 ml dan 10 ml. Cara penggunaanya adalah cairan disedot dengan pipet ukur dengan bantuan filler sampai dengan volume yang diingini. Volume yang dipindahkan dikeluarkan mengikuti skala yang tersedia (dilihat bahwa skala harus tepat sejajar dengan mensikus cekung cairan) dengan cara menyamakan tekanan filler dengan udara sekitar.
~ PIPET VOLUME ~
Pipet Gondok Pipet ini berbentuk seperti dibawah ini. Digunkan untuk mengambil larutan dengan volume tepat sesuai dengan label yang tertera pada bagian yang menggelembung (gondok) pada bagian tengah pipet. Gunakan propipet atau pipet pump untuk menyedot larutan.
http://antiserra.wen.su/alkes.html
A. PipetteSecara umum pipet adalah alat yang digunakan untuk mengambil atau memindahkan
suatu larutan sesuai ukuran yang dikehendaki.
a. Jenis pipette
Pipet tetes (Pasteur Pippete) Fungsinya sama dengan pipet ukur, namun volume yang
dipindahkan tidak diketahui. Salah satu penerapannya adalah dalam menambahkan HCl /
NaOH saat mengatur pH media, penambahan reagen ada uji biokimia, dll.
Pipet ukur merupakan alat untuk memindahkan larutan dengan volume yang diketahui.
Tersedia berbagai macam ukuran kapasitas pipet ukur, diantaranya pipet berukuran 1 ml, 5
ml dan 10 ml. Cara penggunaanya adalah cairan disedot dengan pipet ukur dengan bantuan
filler sampai dengan volume yang diingini. Volume yang dipindahkan dikeluarkan mengikuti
skala yang tersedia (dilihat bahwa skala harus tepat sejajar dengan mensikus cekung cairan)
dengan cara menyamakan tekanan filler dengan udara sekitar.
Pipet Gondok Pipet ini berbentuk seperti dibawah ini. Digunkan untuk mengambil larutan
dengan volume tepat sesuai dengan label yang tertera pada bagian yang menggelembung
(gondok) pada bagian tengah pipet. Gunakan propipet atau pipet pump untuk menyedot
larutan.
b. Mengenal Jenis-Jenis Pipet Volumetrik
Pipet Serologis. Pipet ini terbuat dari pipa kaca silinder yang lurus dan memiliki skala
volume. Ketelitian pipet serologis sesuai dengan skala terkecilnya.
Pipet Volumetrik Volume Tetap. Pipet jenis ini hanya memiliki 1 garis tera dengan volume
tertentu, berbentuk silinder tetapi bagian tengahnya lebih gendut. Ketelitiannya lebih tinggi
dibanding pipet pasteur karena garis tera berada pada bagian atas pipet yang memiliki
diameter kecil.
Pipet Volumetrik dengan Piston. Pipet jenis ini mulai berkembang pada tahun 1960-an.
Awalnya pipet ini memiliki volume yang tetap, namun kemudian berkembang hingga
memiliki volume yang dapat diatur pada range tertentu. Pipet jenis ini lebih disukai karena
selain volumenya yang dapat diatur, akurasi dan presisi yang tinggi, pemakaiannya pun
simpel dan mudah.
c. Gunakan Jenis Pipet yang Sesuai
Pipet yang digunakan harus disesuaikan dengan jenis sampelnya:
Sampel Cairan Biasa. Gunakan pipet jenis air-displacement
Sampel Cairan Khusus. Untuk cairan kental (gliserol, madu), mudah menguap (chloroform,
methanol), korosif dan mengandung radioaktif, gunakan pipet jenis positive-displacement.
Untuk sampel biologi molekular yang harus terbebas dari kontaminasi DNA, RNA, nuclease
dan bahan lain yang dapat menimbulkan degradasi pada sampel, maka bisa digunakan pipet
jenis air-displacement dengan menggunakan tips steril berfilter maupun menggunakan pipet
jenis positive-displacement juga dengan tips dan piston steril.
B. Mikropipet(Micropippete)danTip
Mikropipet adalah alat untuk memindahkan cairan yang bervolume cukup kecil, biasanya
kurang dari 1000 µl. Banyak pilihan kapasitas dalam mikropipet, misalnya mikropipet yang
dapat diatur volume pengambilannya (adjustable volume pipette) antara 1µl sampai 20 µl,
atau mikropipet yang tidak bisa diatur volumenya, hanya tersedia satu pilihan volume (fixed
volume pipette) misalnya mikropipet 5 µl. dalam penggunaannya, mukropipet memerlukan
tip.
Dan dalam bidang biotek, para peneliti lebih sering menggunakan Mikropipet. Istilah
Mikropipet digunakan karena pipet tersebut digunakan untuk memipet cairan berukuran
kurang lebih atau sama dengan 1000 ul (1 ml). Sedangkan pipet untuk ukuran lebih dari 1 ml
dikenal dengan istilah Makropipet. Ada 3 jenis dasar mikropipet sesuai ukurannya, yaitu
P1000, P200, dan P20 (lihat gambar di bawah).
P1000 (kanan) digunakan untuk memipet cairan berukuran lebih dari 200 ul sampai 1000
ul, P200 (tengah) untuk volume cairan antara 21 ul sampai 200 ul, dan P20 (kiri) digunakan
untuk volume dibawah 20 ul. Saat ini ada banyak sekali pilihan mikropipet yang dijual oleh
perusahaan-perusahaan yang bergerak di bidang biotek, biokimia, bahkan bidang kedokteran.
Mikro pipette digunakan untuk memindahkan secara akurat suatu larutan/cairan dalam
volume kecil. Pipet biasa seperti pipet gelas tidak memiliki keakuratan pada volume kurang
dari 1 mililiter (1 ml), sedangkan mikropipet memiliki keakuratan dan ketepatan
padavolumekurangdari1mililiter(1ml).
Dalam menggunakan mikropipet, yang perlu diperhatikan adalah volume cairan yang akan
dipindahkan. Ada beberapa jenis mikropipet berdasarkan volumenya, jenis mikropipet yang
sering digunakan memiliki kisaran 10-100 mikro liter (μl) dan 100-1000 mikro liter (μl).
Pada penggunaanya, biasanya dilakukan kombinasi pemakaian kedua jenis mikropipet ini,
misalnya untuk memindahkan 1030 μl cairan, maka digunakan pipet jenis pertama untuk
memindahkan 30 μl dan pipet jenis kedua untuk memindahkan cairan sebanyak 1000 μl.
Pemilihan jenis pipet yang tepat ini penting untuk menghemat waktu.
a) Cara Menggunakan Mikropipet
Tentunya cara penggunaan mikropipet tergantung dari tipe/ jenis mikropipet itu sendiri,
akan tetapi secara umum penggunaan mikropipet sebagai berikut:
1. Atur volume
Pegang mikropipet dengan genggaman menyerupai petinju (seperti mau meninju orang),
dengan ibu jari berada di bagian pengatur volume.
2. Pasang mikro tip (disposable tip)
Tambahkan tip pada ujung pipet dengan cara menekan tip yang berada dalam kotak tip. Lihat
dan pelajari kekuatan tekanan dengan cara melihat ujung tip.
3. Tekan tombol sampai batas yang pertama
Untuk memipet larutan, pengaturan berada di tombol bagian atas. Tekanlah tombol sampai
berhenti secara alami. Sebagai contoh dengan menggunakan P20, jarak tekanan untuk
memipet 2 ul larutan akan lebih dekat dibanding memipet 20 ul. Jadi singkatnya Masukkan
tip ke dalam cairan
4. Ambil sampel yang akan dipindahkan
untuk menggunakan mikropipet yaitu: tekan tombol sampai berhenti, tahan, masukkan ujung
tip (kira-kira 2 mm) ke dalam larutan yang akan diambil, dan lepaskan tekanan secara
perlahan. Hal ini penting, terlebih untuk mengambil larutan yang memiliki tingkat kekentalan
(viscosity) tinggi
5. Keluarkan sampel secara perlahan
Setelah itu, masukkan larutan yang telah diambil ke dalam wadah yang baru. Perlahan
tekanlah tombol untuk mengeluarkan larutan dari pipet. Setelah semua larutan keluar,
epaskanlah tekanan perlahan. Untuk memipet larutan yang sangat sedikit (kurang dari 10 ul
atau kurang dari satu tetes), maka tempelkanlah terlebih dahulu ujung tip pada dinding
wadah yang baru.
6. Buang mikrotip
Setelah semua selesai, lepaskan tip dari mikropipet dengan cara menekan tombol pembuang
(yang berada di bagian belakang), dan buang pada wadah khusus sampah tip. Perlu diingat,
gantilah tip jika menyentuh benda-benda lain sebelum memipet cairan yang dimaksud.
Agar penggunaan mikropipet optimal, ada beberapa hal yang harus diperhatikan seperti :
1. Konsisten SPEED dan kelancaran saat tekan dan lepaskan tombolnya
2. Konsisten tekanan pada plunger pada pertama
3. Konsisten dan cukup saat memasukkan tip ke dalam cairan
4. Posisi tip pada cairan “Posisinya Hampir Vertikal” dari pipet
5. Menghindari semua gelembung udara
6. Tidak pernah meletakkan pada SIDE pipet atau pipet membalikkan jika cairan di ujung
b) Beberapa Hal Yang Perlu Dihindari. Antara lain:
1) Jangan menggunakan pipet tanpa tip di ujungnya. Larutan tidak boleh masuk ke dalam pipet,
karena bisa menyebabkan kontaminasi.
2) Jangan memutar volume atau menggunakan pipet melebihi ukuran maksimalnya. Hal ini
akan menyebabkan ketidakakuratan ukuran, bahkan merusakkan pipet.
3) Saat mengambil tip, jangan menekan terlalu keras dan berulang-ulang. Juga jangan terlalu
lemah, karena tip bisa jatuh.
4) Ketika menekan tombol pipiet, jangan menekan melebihi penghentian normalnya, karena
akan menyebabkan larutan yang diambil berlebihan.
5) Ketika mengambil larutan, jangan melepas tombol penekan secara tiba-tiba. Hal ini akan
menyebabkan larutan masuk ke dalam pipet, dan ketidakakuratan ukuran. Lepaslah tombol
penekan secara perlahan dan terkontrol.
6) Ketika mengambil larutan, jangan angkat pipet sebelum seluruh larutan masuk ke dalam tip.
Jika mengambil larutan yang banyak, pastikan ujung tip masih terendam dalam larutan.
7) Selama ada larutan dalam tip di ujung pipet, jangan taruh pipet seenaknya. Karena larutan
bisa masuk ke dalam pipet dan menyebabkan kontaminasi.
http://yayan-biologi2009.blogspot.com/2012/04/pipet-tetes.html