i

PENGEMBANGAN DAN VALIDASI METODE ANALISIS

TABLET ATORVASTATIN SECARA KROMATOGRAFI CAIR

KINERJA TINGGI (KCKT)

Disusun Oleh :

ARDIAN DEWANGGA

M0613009

SKRIPSI

Diajukan untuk memenuhi sebagian

persyaratan mendapatkan gelar Sarjana Farmasi

PROGRAM STUDI S1 FARMASI

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

UNIVERSITAS SEBELAS MARET

SURAKARTA

JULI, 2017

ii

HALAMAN PENGESAHAN

Skripsi dengan judul : Pengembangan dan Validasi Metode Analisis Tablet

Atorvastatin Secara Kromatografi Cair Kinerja Tinggi

(KCKT)

Yang ditulis oleh

Nama : Ardian Dewangga

NIM : M0613009

Telah diuji dan dinyatakan lulus oleh dewan penguji pada :

Hari : Jumat

Tanggal : 21 Juli 2017

Dewan Penguji :

1. Ketua Sidang/Pembimbing I

Adi Yugatama, S.Farm., M.Sc.,Apt.

NIP. 198801312014041001 ………………………………

2. Pembimbing II

Sholichah Rohmani, S.Farm.,M.Sc.,Apt.

NIP. 1983112420130201 ………………………………

3. Penguji I

Dr. rer.nat. Saptono Hadi S.Si,M.Si,Apt.

NIP. 197604032005011001 ………………………………

4. Penguji II

Fea Prihapsara, S.Farm., M.Sc., Apt.

NIP. 1987060620140401 ………………………………

Disahkan pada tanggal …………………..

Oleh :

Kepala Program Studi S1 Farmasi

Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam

Universitas Sebelas Maret Surakarta

Dr. rer.nat. Saptono Hadi S.Si,M.Si,Apt

NIP. 197604032005011001

iii

PERNYATAAN

Dengan ini saya menyatakan bahwa skripsi saya yang berjudul

PENGEMBANGAN DAN VALIDASI METODE ANALISIS TABLET

ATORVASTATIN SECARA KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI

(KCKT) belum pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu

perguruan tinggi, dan sepanjang pengetahuan saya juga belum pernah ditulis atau

dipublikasikan oleh orang lain, kecuali yang secara tertulis diacu dalam naskah ini

dan disebutkan dalam daftar pustaka.

Apabila di kemudian hari dapat ditemukan adanya unsur penjiplakan maka

gelar yang telah diperoleh dapat ditinjau dan/ dicabut.

Surakarta, 12 Juni 2017

Ardian Dewangga

M0613009

iv

PENGEMBANGAN DAN VALIDASI METODE ANALISIS TABLET

ATORVASTATIN SECARA KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI

(KCKT)

ARDIAN DEWANGGA

Program Studi S1 Farmasi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam

Universitas Sebelas Maret

ABSTRAK

Atorvastatin menjadi pilihan utama dalam terapi dislipidemia. Dengan

berakhirnya masa paten atorvastatin, mengakibatkan industri farmasi membuat

copy obat tersebut. Oleh karena itu, pengembangan metode untuk uji kualitas

tablet yang menyangkut kadar atorvastatin pada tablet perlu dilakukan. Tujuan

dari penelitian ini adalah mengembangkan serta melakukan validasi metode

analisis tablet atorvastatin secara KCKT yang lebih sederhana.

Pada penelitian ini, digunakan sistem KCKT terdiri dari fase diam kolom

fase terbalik Cosmosil C18 (150 x 4,6 mm, 5 µm), fase gerak campuran metanol

dan air pH 3 (80 : 20 v/v), kecepatan alir 1 mL/menit dengan detektor UV 245

nm. Validasi metode analisis yang dilakukan meliputi: selektivitas, linearitas,

akurasi, presisi, limit of detection (LOD), dan limit of quantitation (LOQ).

Hasil dari penelitian ini menunjukkan bahwa metode yang dikembangkan

memiliki validasi yang baik meliputi selektivitas, linearitas, akurasi, presisi, LOD,

dan LOQ untuk analisis kadar tablet atorvastatin. Nilai LOD dan LOQ sebesar 0,2

dan 0,7 ng/mL, serta rentang linearitas berada pada 20 – 120 ng/mL. Hasil

keseragaman kadar atorvastatin dalam tablet atrorvastain generik yaitu pada

rentang 96,93 – 105,09 %.

Kata kunci : Atorvastatin, KCKT, tablet, validasi

v

DEVELOPMENT AND VALIDATION OF ATORVASTATIN TABLET

ANALYSIS METHOD BY HIGH PERFORMANCE LIQUID

CHROMATOGRAPHY

(HPLC)

ARDIAN DEWANGGA

Pharmacy Department, Mathematics and Sciences Faculty

Sebelas Maret University

ABSTRACT

Atorvastatin is the primary choice for dyslipidemia treatment. Due to

patent expiration of atorvastatin, the pharmaceutical industry makes copy of the

drug. Therefore, the development methods for tablet quality tests involving

atorvastatin levels on tablets needs to be performed. The purpose of this research

is to develop and validate the simple atorvastatin tablet analytical method by

HPLC.

HPLC system used in this experiment consisted of column Cosmosil C18

(150 x 4,6 mm, 5 µm) as the stationary reverse phase chomatography, a mixture

of methanol-water at pH 3 (80 : 20 v/v) as the mobile phase, flow rate of 1

mL/min, and UV detector at wavelength of 245 nm. Validation methods were

including: selectivity, linearity, accuracy, precision, limit of detection (LOD), and

limit of quantitation (LOQ).

The results of this study indicate that the developed method has good

validation including selectivity, linearity, accuracy, precision, LOD, and LOQ for

analysis of atorvastatin tablet content. LOD and LOQ were 0.2 and 0.7 ng/mL,

and the linearity range were 20 - 120 ng/mL. Results uniformity of atorvastatin

levels in generic atrorvastatin tablets are in the range 96.93 - 105.09 %.

Keywords : Atorvastatin, HPLC, tablet, validation

vi

MOTTO

“Percaya, Semua Pasti Ada Jalannya”

“Yang Penting Selalu Yakin”

“LIVE THE LIFE”

Hidupkan Kehidupanmu

vii

PERSEMBAHAN

Skripsi ini kupersembahkan untuk papa,

mama tercinta serta untuk almamaterku.

viii

KATA PENGANTAR

Puji syukur penulis haturakan kepada Tuhan YME karena berkat karunia-

Nya penulis dapat menyelesaikan penulisan Skripsi dengan judul

“PENGEMBANGAN DAN VALIDASI METODE ANALISIS TABLET

ATORVASTATIN SECARA KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI

(KCKT)” dengan baik.

Skripsi merupakan salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana

Farmasi pada Program Studi S1 Farmasi di Fakultas Matematika dan Ilmu

Pengetahuan Alam Universitas Sebelas Maret Surakarta. Dalam penulisan Skripsi

ini tidak akan selesai tanpa adanya bantuan dari banyak pihak, karena itu penulis

menyampaikan terima kasih kepada:

1. Prof. Ir. Ari Handono Ramelan, M.Sc.(Hons), Ph.D, selaku Dekan

Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Sebelas

Maret Surakarta.

2. Dr. rer. nat Saptono Hadi S.Si., M.Si., Apt. selaku Kepala Program Studi

S1 Farmasi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas

Sebelas Maret Surakarta.

3. Adi Yugatama S.Farm., M.Sc., Apt. dan Sholichah Rohmani, S.Farm.,

M.Sc., Apt. selaku pembimbing atas ilmu yang diberikan dengan segala

ketulusan, kesabaran, dan keikhasannya dalam memberikan arahan, saran,

serta telah membiayai penelitian ini.

4. Bapak Ediyanto dan Ibu Artiningrum kedua orang tua yang selalu

mendoakan, menasehati, membimbing dan mendorong untuk selalu

semangat.

5. Estu Retnaningtyas N, S.TP., M.Si. selaku pembimbing akademik yang

sabar membimbing dari awal kuliah sampai sekarang.

6. Segenap dosen pengajar Program Studi S1 Farmasi yang telah

memberikan ilmu dan pelajaran untuk saya lebih maju.

7. Mbak Siti dan Mbak Indah selaku laboran farmasi yang selalu memberi

bantuan saat melakukan penelitian di laboratorium farmasi

ix

8. Mas Anton selaku admin prodi S1 Farmasi yang selalu memberikan waktu

untuk mengurus masalah administrasi.

9. Teman-teman S1 Farmasi 2013 yang berjuang bersama selama berada di

Farmasi UNS.

10. Teman-teman “LIVE THE LIFE” Fendi, Isham, Arifin, Bhisma yang

selalu bersama saat belajar maupun bermain selama kuliah.

11. Teman-teman penelitian analisis Kiky, Andre, Bela, Erwin yang sering

membantu melakukan penelitian.

12. Teman-teman grup riset “PHARMATECH RSC” yang selalu berbagi

ilmu-ilmu seputar teknologi farmasi.

13. Teman-teman “KKN TANGGAN” yang selalu memberi hiburan disela-

sela penulisan skripsi.

14. Teman-teman operator dari laboratorium MIPA Terpadu yang memberi

banyak informasi tentang alat.

15. Bapak dan Ibu Sahuri selaku bapak dan ibu kos Arista Puri yang

memberikan tempat tinggal selama empat tahun masa kuliah.

16. Semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu persatu, yang telah

membantu dalam Skripsi ini.

Penulis menyadari bahwa banyak kekurangan dalam penulisan skripsi ini.

Oleh karena itu, penulis mengharapkan kritik dan saran untuk menyempurnakan

karya ini. Namun demikian, penulis berharap semoga karya kecil ini bermanfaat

bagi pembaca pada umumnya dan dapat menjadi bekal bagi penulis dalam

pengabdian Sarjana Farmasi di masyarakat pada khususnya.

Surakarta, Juni 2017

Penulis

x

DAFTAR ISI

Halaman

PERNYATAAN ........................................................................................ iii

ABSTRAK ................................................................................................ iv

ABSTRACT ................................................................................................ v

MOTTO .................................................................................................... vi

PERSEMBAHAN ..................................................................................... vii

KATA PENGANTAR .............................................................................. viii

DAFTAR ISI ............................................................................................. x

DAFTAR TABEL ..................................................................................... xii

DAFTAR GAMBAR ................................................................................ xiii

DAFTAR LAMPIRAN ............................................................................. xiv

DAFTAR SINGKATAN .......................................................................... xv

BAB I ........................................................................................................ 1

PENDAHULUAN .................................................................................... 1

A. Latar Belakang Masalah ................................................................ 1

B. Rumusan Masalah ......................................................................... 2

C. Tujuan dan Manfaat Penelitian ..................................................... 2

BAB II ....................................................................................................... 4

LANDASAN TEORI ................................................................................ 4

A. Tinjauan Pustaka ........................................................................... 4

B. Kerangka Pemikiran ...................................................................... 16

C. Hipotesis ........................................................................................ 17

BAB III ..................................................................................................... 18

METODOLOGI PENELITIAN ................................................................ 18

A. Metode Penelitian.......................................................................... 18

B. Tempat dan Waktu Penelitian ....................................................... 18

C. Alat dan Bahan .............................................................................. 18

D. Prosedur Penelitian........................................................................ 19

1. Pembuatan Larutan Stok Atorvastatin .................................... 19

xi

2. Optimasi Metode Analisis ....................................................... 19

3. Validasi Metode Analisis ........................................................ 20

4. Prosedur Analisis Sampel Tablet Atorvastatin ...................... 22

E. Pengumpulan dan Teknik Analisis Data ....................................... 22

BAB IV ..................................................................................................... 23

HASIL DAN PEMBAHASAN ................................................................. 23

Penentuan Panjang Gelombang Maksimum ............................................. 23

A. Optimasi Komposisi dan Kecepatan Alir Fase Gerak................... 23

B. Uji Kesesuaian Sistem................................................................... 25

C. Validasi Metode Analisi ................................................................ 26

1. Penentuan Selektivitas ............................................................ 26

2. Penentuan Linearitas ............................................................... 28

3. Penentuan Akurasi dan Presisi ................................................ 29

4. Penentuan LOD dan LOQ ....................................................... 31

D. Uji Keseragaman Kadar Tablet ..................................................... 33

BAB V ....................................................................................................... 35

KESIMPULAN DAN SARAN ................................................................. 35

A. Kesimpulan ................................................................................... 35

B. Saran .............................................................................................. 35

DAFTAR PUSTAKA ............................................................................... 36

LAMPIRAN .............................................................................................. 40

xii

DAFTAR TABEL

Halaman

Tabel 1. Beberapa Metode Analisis Tablet Atorvastatin Menggunakan

KCKT .................................................................................................... 6

Tabel 2. Hasil Optimasi Perbandingan Komposisi Fase Gerak Metanol-Air

pH 3 ....................................................................................................... 24

Tabel 3. Hasil Optimasi Kecepatan Alir Fase Gerak .......................................... 25

Tabel 4. Hasil Uji Kesesuaian Sistem KCKT untuk Analisis Atorvastatin

120 ng/mL dalam Larutan Fase Gerak.................................................. 26

Tabel 5. Nilai Recovery dan Koefisien Variasi (CV) .......................................... 30

Tabel 6. Hasil injeksi berulang atorvastatin 0,2 ng/mL ...................................... 33

Tabel 7. Nilai Recovery dan Koefisien Variasi (CV) pada penentuan LOQ ...... 33

Tabel 8. Kadar Tablet Atorastatin Generik ......................................................... 34

xiii

DAFTAR GAMBAR

Halaman

Gambar 1. Rumus Molekul Atorvastatin ............................................................ 4

Gambar 2. Spektrum UV Atorvastatin dalam Fase Gerak Metanol : Air

pH 3 (80:20, v/v) dengan Konsentrasi 100 µg/mL23 ...................... 23

Gambar 3. Profil Kromatogram : A) Standar Atorvastatin, B) Sampel Tablet

Atorvastatin, C) Pelarut Fase Gerak ................................................. 27

Gambar 4. Kurva Hubungan Luas Area Kromatogram Atorvastatin

Terhadap Konsentrasi Atorvastatin Pada Penentuan Linearitas ...... 29

Gambar 5. Profil Kromatogram Atorvastatin : A) Konsentrasi 0,05 ng/mL,

B) Konsentrasi 0,1 ng/mL, C) Konsentrasi 0,2 ng/mL .................... 32

xiv

DAFTAR LAMPIRAN

Halaman

Lampiran 1. Sertifikat Analisis Atorvastatin ...................................................... 40

Lampiran 2. Penentuan Panjang Gelombang Maksimum ................................... 44

Lampiran 3. Profil Kromatogram Optimasi Perbandingan Komposisi

Fase Gerak Metanol-Air pH 3. ...................................................... 45

Lampiran 4. Profil Kromatogram Optimasi Kecepatan Alir Fase Gerak............ 48

Lampiran 5. Hasil Uji Kesesuaian Sistem KCKT untuk Analisis Atorvastatin

120 ng/mL ...................................................................................... 50

Lampiran 6. Profil Kromatogram Uji Selektivitas .............................................. 51

Lampiran 7. Perhitungan Regresi Linier untuk Uji Linearitas ............................ 53

Lampiran 8. Nilai Recovery dan Koefisien Variasi CV (%) untuk penentuan

Akurasi dan Presisi ........................................................................ 54

Lampiran 9. Profil Kromatogram Uji LOD (Limit Of Detection) ....................... 56

Lampiran 10. Perhitungan Nilai LOQ (Limit Of Quantifitation) ........................ 58

Lampiran 11. Keseragaman Kadar Tablet Atorvastatin Generik ........................ 60

xv

DAFTAR SINGKATAN

ATR = Atorvastatin

KCKT = Kromatografi Cair Kinerja Tinggi

HPLC = High Performance Liquid Chromatography

UV = Ultraviolet

mg = miligram

µg = mikrogram

mL = mililiter

ng = nanogram

nm = nanometer

µL = mikroliter

ƛmax = Panjang Gelombang Maksimum

Rs = Resolusi

TF = Tailling Factor

Rt = Retention Time

SD = Standart Deviation

CV = Koefisien Variasi

LOD = Limit Of Detection

LOQ = Limit Of Quantitation