pengaruh puasa terhadap kadar glukoda darah dan kandungan glikogen hati
TRANSCRIPT
7/23/2019 Pengaruh Puasa Terhadap Kadar Glukoda Darah Dan Kandungan Glikogen Hati
http://slidepdf.com/reader/full/pengaruh-puasa-terhadap-kadar-glukoda-darah-dan-kandungan-glikogen-hati 1/20
LAPORAN PRAKTIKUM BIOKIMIA ANALISA
Pengaruh puasa terhadap kadar glukosa darah dan
kandungan glikogen hati
Disusun oleh Kelompok :
Fitrahtunnisah 1113102000014
Auliyani Rosdiana 1113102000015
Lisa Fizhilalin 1113102000033
uni Rahmi 1113102000042
!aka As"ada 11131020000#4
$uhammad Faisal 11131020000%4
$uneerah Datu 1111102000134
Program Studi Farmasi
Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan
Uniersitas Islam Negeri S!ari" #ida!atullah $akarta %&'(
7/23/2019 Pengaruh Puasa Terhadap Kadar Glukoda Darah Dan Kandungan Glikogen Hati
http://slidepdf.com/reader/full/pengaruh-puasa-terhadap-kadar-glukoda-darah-dan-kandungan-glikogen-hati 2/20
7/23/2019 Pengaruh Puasa Terhadap Kadar Glukoda Darah Dan Kandungan Glikogen Hati
http://slidepdf.com/reader/full/pengaruh-puasa-terhadap-kadar-glukoda-darah-dan-kandungan-glikogen-hati 3/20
BAB I
PENDAHULUAN
A. LatarBelakang
Metabolisme karbohidrat merupakan salah satu metabolism yang
berlangsung dalam setiap tubuh mahluk hidup sepanjang hidupnya.
Kandungan pentingdalam metabolism karbohidrat diantaranya adalah
glukosa. Glukosa digunakan tubuh sebagai senyawa penting dalam sistem
aktivitas tubuh sehari hari. Perombakan cadangan glukosa
dalam darah dan otot , sedang kanperubahan senyawa non-karbohidrat
seperti asam amino, laktat, maupun gliserol menjadi senyawaglukosa dikenal dengan proses glukoneogenesis. Proses perubahan dari
dan menjadi senyawa glukosa ini dilakukan dalam tubuh menjaga kondisi
hemoestatis tubuh secara baik.
Padamacam-macam kondisi, seperti puasaglikogenhatiakanmenurunpadar
entangwaktu 1 jam karenaterjadi prosesglikonelisis !"malia
#$11%. Manusiamampumenyimpanglikogenhingga &'$ gr dimana ((.()kandungannyaberada di
hati.Glikogenhatiber*ungsiuntukmenjagakadargulapascaabsorpsi.
Padasaatkonsumsi normal, glukosadirubahmenjadiglikogenolehhormon
insulinsedangkanpadasaatpuasa+kelaparankadarglikogenmenurundrastisb
ahkandapatmencapaikadarnol karenaterjadi proses glukoneogenesis yang
ber*ungsimenyediakanglukosadarah. Padapraktikum kali
iniakandilakukanpengukurankandungan glikogen darah padakondisi konsumsi normal dan padakondisipuasa.
Kandunganglikogenhatidinyatakandandiukursecaratidaklangsungdenganm
enetapkankadarglukosayanberasal darihasilhidrolisisglikogenhati.Pengaru
hpuasatersebutjugadapatdilihatpadapengukuranglkosakeduakelompoktiku
s.
B. TujuanPraktikum
7/23/2019 Pengaruh Puasa Terhadap Kadar Glukoda Darah Dan Kandungan Glikogen Hati
http://slidepdf.com/reader/full/pengaruh-puasa-terhadap-kadar-glukoda-darah-dan-kandungan-glikogen-hati 4/20
Mengatahuikandunganglukosadarahdanglikokegnpadatikushatitikuspuasa
dantidakpuasa.
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
Metabolisme glukosa dibagi menjadi dua bagian yaitu tidak
menggunakan oksigen!anaerob% dan yang menggunakan oksigen !aerob%.
eaksi anaerob terdiri atas serangkaianreaksi yang mengubah glukosa
menjadi asam laktat. Proses ini disebut glikolisis. Glikolisisdapat
berlangsung dalam keadaan aerob apabila oksigen yang tersedia cukup
untukmempertahankan kadar "/ yang diperlukan, atau dalam keadaan
anaerob !hipoksik%,bila kadar "/ tidak dapat dipertahankan lewat
sistem sitokrom mitokondrial danbergantung pada usaha temporer
perubahan piruvat menjadi laktat. Karbohidrat khususnya glukosa
digunakan oleh sel-sel jaringan tubuh untukmenghasilkan energi. Glukosa
di dalam darah atau KG digunakan sebagai parameterkeberhasilan
metabolisme karbohidrat di dalam tubuh. Pada proses ini glukosa
akandipecah menjadi asam piruvat ataupun asam laktat sehinnga
menghasilkan sejumlah energidalam bentuk "0P. elain itu beberapa
proses metabolisme pada karbohidrat yang jugadapat bertujuan akhir
untuk menghasilkan energi adalah proses glikogenesis, glikogenolisis dan
glukoneogenesis.
2ariasi kadar laktat darah mengikuti perubahan-perubahan akibat
aktivitas jasmani.Ketika keperluan energi tinggi seperti latihan ekstrim
atau hiperventilasi esen*alitis, danketika laju pengangkutan oksigen kedalam sel tidak sama kecepatannya dengan reaksikatabolik oksidati*
penghasil "0P akan menyebabkan konversi piruvat menjadi laktat.
3ilakadar laktat dalam darah meningkat akan menyebabkan p4 turun.
5aktat yang diproduksidan dilepaskan kedalam darah diubah kembali
menjadi piruvat dalam hati apabila diperolehcukup oksigen
el darah merah hanya dapat menggunakanglukosa sebagai bahan
bakar karena sel ini tidak memiliki mitokondria. 3ahan bakkar lain
7/23/2019 Pengaruh Puasa Terhadap Kadar Glukoda Darah Dan Kandungan Glikogen Hati
http://slidepdf.com/reader/full/pengaruh-puasa-terhadap-kadar-glukoda-darah-dan-kandungan-glikogen-hati 5/20
misalnya lemak, dioksidasi di mitokondria, tempat berlangsungnya
sebagian besar reaksi oksidasi bahan bakar dan reaksi yang menghasilkan
"0P. Glikolisis adalah pengubahan glukosa menjadi piruvat. i dalam sel
darah merah piruvat dapat dilepaskan secara langsung ke dalam darahatau diubah menjadi laktat kemudian dibebaskan. Pada sel yang memiliki
mitokondria, piruvat yang dihasilkan melalui glikolisis tersebut dapat
diubah menjadi unit asetil # karbon asetil Ko" dan dioksidasi sempurna
menjadi 67# dan 4#7.
0anpa glukosa, sel darah merah tidak dapat bertahan hidup. el
darah membawa 7# dari paru ke jaringan. 0anpa sel darah merah,
sebagian besar jaringan tubuh akan kekuranganenergi karena jaringan
memerlukan 7# agar dapat secara sempurna mengubah bahan bakar
menjadi 67# dan 4#7.
Proses glikolisis8
Glikolisis adalah pemecahan glukosa menjadi asam piruvat atau
asam laktat. 9alur ini terutama terjadi dalam otot bergaris untuk
7/23/2019 Pengaruh Puasa Terhadap Kadar Glukoda Darah Dan Kandungan Glikogen Hati
http://slidepdf.com/reader/full/pengaruh-puasa-terhadap-kadar-glukoda-darah-dan-kandungan-glikogen-hati 6/20
menghasilkan energi !"0P%. "pabila glikolisis terjadi dalam suasana
anaerobik maka akan berakhir dengan asam laktat, dan menghasilkan dua
"0P.
0ahapan reaksi glikolisis8
9alur ini disebut juga jalur :mbden-Meyerho*. emua en;im yang terlibat
terdapat dalam *raksi ekstra mitokondria !dalamsitosol%. Mula-mula
glukosa mengalami esteri<kasi dengan *os*at, reaksi inidisebut juga
*os*orilasi glukosa oleh "0P menjadiglukosa =-P.
4eksokinase !glukokinase%
Mg//
-glukosa / "0P → -glukosa =-P / "P.
alamsel ,sedikitsekaliglukosaberadasebagaiglukosabebas,
sebagianbesarterdapatdalambentuk ester glukosa =-P.
eaksiinidikatalisisduaen;im 8 he>okinase danglukokinase.
Hexokinaseterdapatdalambermacam-macamsel,kecuali di
selhepardanpankreas.:n;iminisesuaidengannamanya,
dapatmengkatalisisesteri<kasiheksosalainnyadengan "0P misal
*ruktosamenjadi*ruktosa =-P.
alamselbinatangdanmanusiaen;iminimerupakanen;im regulator,
karenadapatdihambatolehhasilreaksinya.
Glukokinaseterdapatdalamhepardanpankreas. Mempunyai Km untuk
-glukosajauhlebihtinggidarien;imhe>okinase.Glukokinasememerlukanglukosalebihtinggiuntukmenjadiakti*bi
ladibandingkandenganheksokinase.
Glukokinasetidakdihambatolehhasilreaksinyayaituglukosa =-P.
Glukokinaseberperanbiasanyapadawaktukadarglukosadarahtinggi
!sesudahmakan%. Padapenderita iabetes Mellitus
en;iminijumlahnyaberkurang.eaksi*os*orilasiinibolehdikatakanreaksisatu
arah.
7/23/2019 Pengaruh Puasa Terhadap Kadar Glukoda Darah Dan Kandungan Glikogen Hati
http://slidepdf.com/reader/full/pengaruh-puasa-terhadap-kadar-glukoda-darah-dan-kandungan-glikogen-hati 7/20
elanjutnyaglukosa =-P diubahmenjadi*ruktosa =-P.
eaksiinidikatalisisen;im*os*oheksosaisomerase, dimanaterjadialdosa-
ketosaisomerasi.4anya -anomerdariglukosa =-P yang
bisadipakaisebagaisubstrat.eaksiinimerupakanreaksibolak-balik.
eaksiselanjutnyaadalahpembentukan*ruktosa 1,=-di*os*at
olehen;im *os*o*ruktokinase-1.
eaksiinibolehdikatakanreaksisatuarah.:n;im *os*o*ruktokinase-1
merupakanen;im yang bisadiinduksi.:n;iminimemegangperan
yangpentingdalammengaturkecepatanglikolisis.
Glikolisisdalameritrositsekalipundalamkeadaanaerobikakanmenghasilkana
samlaktat, karenaen;im-en;im yang
dapatmengoksidasiasampiruvatsecaraaerobiktidakadadalamsel da-rah
merah.
alameritrositgolonganmammaliatahapanyang dikatalisis*os*ogliserat
kinase di ? by passed ?
denganadanyaen;imbisfosfogliseratmutasedanenzim 2,3-bisfosfogliserat
fosfatase !gambar-&%. "kibatadanyaduaen;imini "0P
tidakterbentukdaninimemungkinkanglikolisisberlangsungapabilakebutuha
n "0P minimum. #,(-bis*os*ogliserat bergabungdengan hemoglobin
sehinggamenyebabkana@nitas hemoglobin terhadapoksigenmenurun.
Kurvedissosiasioksigen hemoglobin
bergerakkekanan.engandemikianadanya #,(-bis*os*ogliserat
dalamseldarahmerahmembantupelepasanoksigenuntukkeperluanjaringan.
eaksinya 8
:n;im 1
1,(-bis*os*ogliserat → #,(-bis*os*ogliserat
:n;im #
↓
(-*os*ogliserat.
7/23/2019 Pengaruh Puasa Terhadap Kadar Glukoda Darah Dan Kandungan Glikogen Hati
http://slidepdf.com/reader/full/pengaruh-puasa-terhadap-kadar-glukoda-darah-dan-kandungan-glikogen-hati 8/20
:n;im1 8bis*os*ogliseratmutase
:n;im #8 #,(-bis*os*ogliserat *os*atase
alamglikolisisadatigareaksibolehdikatakansecara<siologissatuarah,yaitureaksi yang dikatalisisen;im-en;im 8
1. heksokinase ! danglukokinase %
#. *os*o*ruktokinase
(. piruvat kinase
BAB III
METODOLOGI
3ahan dan "lat8
a% Perangkat bedah tikus *%46lb% 4ati tikus yang baru diambil g%:tanol absolutc% Pelumat jaringan !blender% h% 5arutan a74d% 5arutan a6l $,A g+d5 i% pektro*otometere% 5arutan asam asetat 1$)
6ara Kerja8
1% Pengambilan hati tikusa. Matikan tikus dengan menempatkannya dalam bejana kerja
yang telah berisi uap eter jenuh.b. egera setelah mati, keluarkan dan telentangkan tikus di atas
papan gabus atau polistiren.c. entangkan keempat kaki sejauh mungkin dan <ksasi ke
papan operasi dengan menggunakan jarum pentul.
7/23/2019 Pengaruh Puasa Terhadap Kadar Glukoda Darah Dan Kandungan Glikogen Hati
http://slidepdf.com/reader/full/pengaruh-puasa-terhadap-kadar-glukoda-darah-dan-kandungan-glikogen-hati 9/20
d. 3asahkan permukaan perut dengan alkohol, dan jepit dinding
perut di daerah median dengan pinset dan gunting dengan
arah melintang. "kan segera tampak peritonium.e. Gunting peritonium dalam arah yang sama sejauh-jauhnya
dan lakukan pengguntingan ke arah dada sampai dia*ragma.*. Gunting dia*ragma ke arah belakang.g. 5epaskan hati dan jaringan sekitarnya secara tumpul,
sebagian mati dan sebagian dia*ragma lepas dari tubuh.h. 0empatkan hati tersebut dalam larutan a6l $,A gr+d5, suhu
&B6.i. etelah pengambilan hati, teteskan jantung dengan heparin
dan segera gunting bagian apeksinya. j. "mbil darah dan rongga dada dengan pipet pasteur dan
tampung dalam tambung reaksi untuk penetapan kadar
glukosa darah.
#% Pelumatan hatia. Keluarkan hati dari larutan a6l $,A gr+d5 dingin dan
keringkan menggunakan kertas saring.b. Kumpulkan hati tikus masing-masing kelompok puasa dan
tidak puasa dan timbang serta catat beratnya.
c. 5umatkan hati tikus dengan blender untuk tiap kelompok dantambahkan 1$$ ml aCuadest ke dalam blender.
(%:kstraksi glikogen
a. Masukkan lumatan hati dalam kaserol dan panaskan hinggamendidih.
b. 0ambahkan ' ml asam asetat untuk mendapatkan protein.c. 0eruskan pendidihan hingga volumenya tinggal separuh dari
semula.d. aring selagi panas dan tampung ke dalam gelas ukur.e. etelah dingin, tambahkan alkohol A') dengan & kali lebih
banyak.*. Glikogen akan mengendapkan dan disimpan sampai prakikum
berikutnya.
7/23/2019 Pengaruh Puasa Terhadap Kadar Glukoda Darah Dan Kandungan Glikogen Hati
http://slidepdf.com/reader/full/pengaruh-puasa-terhadap-kadar-glukoda-darah-dan-kandungan-glikogen-hati 10/20
&% Pengukuran kadar glukosa darah
a. 5akukan penetapan kadar glukosa darah dengan cara Dolin-Eu.b. ebelum penetapan kadar glukosa darah, pisahkan protein darah
terlebih dahulu dengan metode Dolin-Eu.
'% pengukuran kadar glukosa jaringan hati
a. Pisahkan endapan glikogen dengan menyaring atau
memusingkan.b. Pindahkan ke dalam gelas kimia '$ m5 dan tambahkan 1$ m5
aCudest dan 1$ tetes 46l pekat, campur dengan baik.c. idihkan selama 1$ menit dan tambahkan a74 untuk
menetralkan larutan menggunakan lakmus sebagai indikator.d. Pindahkan ke dalam tabung reaksi yang telah diberi tanda
volume 1$ m5. 0ambahkan aCuades hingga volume 1$ m5.e. 5akukan penetapan kadar glukosa hati hidrolisis glikogen hati
dengan cara Dolin-Eu !tidak perlu dilakukan pembuatan <ltrat
bebas protein%.
7/23/2019 Pengaruh Puasa Terhadap Kadar Glukoda Darah Dan Kandungan Glikogen Hati
http://slidepdf.com/reader/full/pengaruh-puasa-terhadap-kadar-glukoda-darah-dan-kandungan-glikogen-hati 11/20
7/23/2019 Pengaruh Puasa Terhadap Kadar Glukoda Darah Dan Kandungan Glikogen Hati
http://slidepdf.com/reader/full/pengaruh-puasa-terhadap-kadar-glukoda-darah-dan-kandungan-glikogen-hati 12/20
BAB I
HASIL DAN PEMBAHASAN
!." Ha#il
A$#%r$an&atitiku#ti'ak(ua#a
I II III )ata*
rata
A+ua'e $,$$$ $,$$$ $,$$$ $
7/23/2019 Pengaruh Puasa Terhadap Kadar Glukoda Darah Dan Kandungan Glikogen Hati
http://slidepdf.com/reader/full/pengaruh-puasa-terhadap-kadar-glukoda-darah-dan-kandungan-glikogen-hati 13/20
#tStan'ar $,1'$ $,1'= $,#( $,1A=Blank% $,$1' $,$1$ $,$$A $,$(1Sam(el $,1#A $,1($ $,1(1 $,1(
Ka'ar gluk%#a&a#il&i'r%li#i#glik%gen&ati ,mg-g &ati
Kadar= Ru− Rb
Rs− Rb ×
1
Berat hati
Kadar=
0,13−0,031
0,196−0,031 ×
1
2
Kadar=0 ,3mg/gr
A$#%r$an&atitiku#(ua#a
I II III )ata*
rataA+ua'e
#t$,$$$ $,$$$ $,$$$
$Stan'ar $,#$& $,1AF $,#$ $,#$(Blank% $,$1 $,$1 $,$1 $,$1Sam(el $,11 $,11 $,11# $,11$=F
Ka'ar gluk%#a&a#il&i'r%li#i#glik%gen&ati ,mg-g &ati
Kadar= Ru− Rb
Rs− Rb ×
1
Berat hati
Kadar=0,11067−0,01
0,203−0,01×
1
2
Kadar=0,26mg / gr
7/23/2019 Pengaruh Puasa Terhadap Kadar Glukoda Darah Dan Kandungan Glikogen Hati
http://slidepdf.com/reader/full/pengaruh-puasa-terhadap-kadar-glukoda-darah-dan-kandungan-glikogen-hati 14/20
9aringan di dalamtubuhsepertiotakdanseldarah
merahbergantungpadaglukosauntukmemperolehenergi.
ebagianbesarjaringanjugamemerlukanglukosauntuk*ungsi lain
dalamjangkapanjang,misalnyamembentukgugusribosapadanukleotidaataubagiankarbohidratpa
daglikoprotein. 7lehkarenaitu, agar dapatbertahanhidup,
manusiaharusmemilikimekanismeuntukmemeliharakadarguladarah.
etelahmemakanmakanan yang mengandungkarbohidrat,
kadarglukosadarahmeningkat.
ebagianglukosadalammakanandisimpandalamhatisebagaiglikogen.
etelah # atau ( jam berpuasa, glikogeninimulaidiuraikanoleh proses
glikogenolisisdanglukosa yang terbentukdibebaskankedalamdarah. Gula
!glukosa% darahmerupakankadargula yang
terdapatdalamdarahbaikituberasaldari proses metabolismemakanan yang
mengandungkarbohidrat maupunhasilrombakandari;at lain
sepertiglikogen !Marks #$1#%.
Kadar glukosa darah dipertahankan tidak saja selama puasa tetapi juga
sewaktu berolahraga saat sel otot menyerap glukosa dari darah dan
mengoksidasinya untuk memperoleh energi. elamaberolahraga,
hatimemasokglukosakedalamdarahmelalui proses
glikogenolisisdanglukoneogenesis. Kadar
glukosadarahsenantiasadipertahankankarenaglukosadarahmemiliki*ungsip
entingbagitubuhsalahsatunyauntukmenghasilkanenergiuntukmelakukanak
tivitas !Marks #$1#%.
Praktikum yang dilakukan kali ini bertujuan untuk mengukur dan
membandingkan kadar glukosa darah dan kandungan glikogen hati tikus
pada keadaan puasa dan tidak puasa. alam keadaan puasa, kadar
glikogen hati akan berkurang karena mengalami pemecahan
!glikogenolisis% untuk mempertahankan kadar glukosa darah. Kandungan
glikogen hati diukur secara tidak langsung dengan menetapkan kadar
glukosa yang berasal dari hasil hidrolisis glikogen hati. Kandungan
glikogen hati dinyatakan+diukur secara tidak langsung dengan
menetapkan kadar glukosa yang berasal dari hasil glikogen hati.
7/23/2019 Pengaruh Puasa Terhadap Kadar Glukoda Darah Dan Kandungan Glikogen Hati
http://slidepdf.com/reader/full/pengaruh-puasa-terhadap-kadar-glukoda-darah-dan-kandungan-glikogen-hati 15/20
Pengukurankadarglukosadarah pada sampel akan dilakukan
dengan menggunakan metode *olin wu. Prinsipmetodeiniadalah protein
akanmengendappadapenambahanasam tungstate. Pada awalnya,
darahdiambil dari tubuhsampel yangtelahdimatikankemudiandilakukanpemisahanprotein.
Pemisahanproteindarahsampel inidilakukandengan cara menambahkan
akuades kedalam darah sampel di dalamlabu :rlenmeyer,
kemudianditambahkanlarutanatungstat 1$ ).Penambahan a
tungstatbertujuanmengendapkan protein yang terlarutdalam air
!Poedjiadji 1AA&%. elanjutnya, larutan ditambahkan denganlarutan 4#7&
#+( secara perlahan-lahan tetes demi tetes. Penambahan
4#7&ber*ungsisebagaikatalisatoruntukmempercepatreaksipengendapan
protein oleh a tungstat. elanjutnya,labu :rlenmeyer digoyang dan
dididamkanselama 1$ menit.
5arutandisaringhinggamenghasilkan<ltratjernih.
Diltratjernih yang dihasilkanditambahkanpereaksitembagaalkalis
!6u#7% sebanyak dan dicampurkandenganmenggoyang-
goyangkantabung.ionkupri !6u/% akandireduksioleh gula menjadikupro
!6u#/% dan mengendapsebagai 6u#7 !kuprooksida%. elanjutnyamasing-
masinglarutandipanaskanselama menitdalam air 1$$ $6 kemudian di
dinginkandalam air esselama ( menit.
Pemanasaniniber*ungsiuntukmenambahlajureaksi 6u#7,
sementarapendinginandimaksudkanuntukmenghentikanlajureaksidari
6u#7 itusendiri !Poedjiadji 1AA&%. elanjutnya dilakukan penambahan
pereaksi *os*omolibdat. Pereaksi ini akan melarutkan 6u#7 dan warna
larutan menjadi biru tua, karena ada oksida Mo. engandemikian,
banyaknya 6u#7 yang terbentukberhubungan linier
denganbanyaknyaglukosa di dalamdarah. Diltrat yang berwarnabirutua
yang terbentukakibatmelarutnya 6u#7 karenaoksida Mo
dapatdiukurkadarglukosanyadenganmenggunakanspektro*otometerpadap
anjanggelombang &#$ nm !Poedjiadji 1AA&%.
Nilai a$#%r$an#i /ang 'i'a(atkan 'ari &ati tiku# ti'ak (ua#a
7/23/2019 Pengaruh Puasa Terhadap Kadar Glukoda Darah Dan Kandungan Glikogen Hati
http://slidepdf.com/reader/full/pengaruh-puasa-terhadap-kadar-glukoda-darah-dan-kandungan-glikogen-hati 16/20
I II III )ata*
rataA+ua'e
#t
$,$$$ $,$$$ $,$$$
$
Stan'ar $,1'$ $,1'= $,#( $,1A=Blank% $,$1' $,$1$ $,$$A $,$(1Sam(el $,1#A $,1($ $,1(1 $,1(
Ka'ar gluk%#a&a#il&i'r%li#i#glik%gen&ati ,mg-g &ati
Kadar= Ru− Rb
Rs− Rb ×
1
Berat hati
Kadar= 0,13−0,031
0,196−0,031 × 1
2
Kadar=0,3mg/gr
3erdasarkan diatas didapati bahwa kadar glukosa darah pada tikus
yang sedang tidak berpuasa adalah sebear $,( mg+dl. 4asil praktikum
yang diperoleh telah sesuai dengan literatur !Murray K et al. #$$(%dimana pada saat berpuasa, glukosa yang didapat dari asupan makanan
tidak memenuhi kebutuhan tubuh sedangkan pada keadaan tidak
berpuasa kebutuhan glukosa dapat diperoleh dari asupan makanan
sehingga nilai glukosa darah pada saat berpuasa akan lebih kecil jika
dibandingkan pada saat tidak berpuasa. Padakeadaanberpuasa,
kekuranganglukosadapatdiminimalisirdengancaraperombakanglikogenata
ucadanganglukosadalamhatimenjadiglukosa yang dinamakan proses
glikogenolisis. amun, lama-kelamaancadangankarbohidrat di
hatiakanmenurunsecaraperlahansehinggatubuhtidakdapatmempertahank
ankadarguladarah yang cukup !hipoglikemia%.
Percobaan selanjutnya adalah melakukan pengukuran kadar glikogen
pada hati tikus yang sedang berpuasa.
4atimemilikiperananpentingdalampenyimpanancadanganglukosa.
ebagianglukosa yang diserapdariususakandisimpan di dalamhati !liver%.
Padasaattubuhtidakmendapatkanmakanan !puasa%,
7/23/2019 Pengaruh Puasa Terhadap Kadar Glukoda Darah Dan Kandungan Glikogen Hati
http://slidepdf.com/reader/full/pengaruh-puasa-terhadap-kadar-glukoda-darah-dan-kandungan-glikogen-hati 17/20
hatiakanmelepaskankembalicadanganglukosa yang tersimpan !Pudjiadi
1AA&%.
Pengukurankadarglukosahatidilakukandenganmembandingkanglukosahati
padatikus yang dilakukanperlakuanpuasadengantidakpuasa. 0ahap awal dari percobaan ini sama dengan percobaan pengukuran
kadar glukosa darah pada tikus. 4ati tikus diambil kemudian dimasukkan
pada tabung yang berisi larutan a6l $.A g+dl. etelah itu, hati dikeluarkan
kembali untuk selanjutnya dilumatkan dengan cara hati dikeluarkan dari
larutan a6l , kemudian dikeringkan diantara kertas saring, lalu
ditimbang. etelah mengetahui berapa berat dari hati, kemudian hati
dilumatkan kemudian ditambahkan akuades 1$$ ml. Penambahan
akuades ini bertujuan untuk melarutkan+mengencerkan hati tikus
sehingga bisa dilakukan ekstraksi. Pada proses pengekstraksian ini,
larutan ini di masukkan kedalam kaserol. elanjutnya dipanaskan dan
ditambahakan asam asetat. etelah itu dididihkan kembali sambil diaduk.
etelah mendidih, larutan disaring kemudian dilarutkan dengan alkohol
A'). etelah itu, ekstraksi larutan ini disimpan selama lebih kurang 1
minggu. etelah satu minggu,ekstraksi disaring. Kemudian ditambahkan
1$ ml akuades dan 1$ tetes 46l pekat. Penambahan larutan 46l adalah
untuk menghidrolisis glikogen sehingga membantu pada saat proses
homogenisasi!Montgomery 1A(%. elanjutnya didihkan selama 1$ menit
dan didinginkan. etelah itu, dinetralkan kembali dengan a74. ntuk
mengetahui, apakah laturan+<ltrat sudah netral atau belum, digunakan p4
meter. etelah netral, larutan di tera dengan akuades.
Diltrat selanjutnya ditambahkanpereaksitembagaalkalis !6u#7%
sebanyak dan dicampurkandenganmenggoyang-
goyangkantabung.ionkupri !6u/% akandireduksioleh gula menjadikupro
!6u#/% dan mengendapsebagai 6u#7 !kuprooksida%. elanjutnya, sama
seperti pada percobaan pemgukuran kadar glukosa darah pada
tikus,masing-masinglarutandipanaskanselama menitdalam air 1$$ $6
kemudian di dinginkandalam air esselama ( menit.
Pemanasaniniber*ungsiuntukmenambahlajureaksi 6u#7,
7/23/2019 Pengaruh Puasa Terhadap Kadar Glukoda Darah Dan Kandungan Glikogen Hati
http://slidepdf.com/reader/full/pengaruh-puasa-terhadap-kadar-glukoda-darah-dan-kandungan-glikogen-hati 18/20
sementarapendinginandimaksudkanuntukmenghentikanlajureaksidari
6u#7 itusendiri !Poedjiadji 1AA&%. elanjutnya dilakukan penambahan
pereaksi *os*omolibdat. Peraeksi ini akan melarutkan 6u#7 dan warna
larutan menjadi biru tua, karena ada oksida Mo. engandemikian,banyaknya 6u#7 yang terbentukberhubungan linier
denganbanyaknyaglukosa di dalamdarah. Diltrat yang berwarnabirutua
yang terbentukakibatmelarutnya 6u#7 karenaoksida Mo
dapatdiukurkadarglukosanyadenganmenggunakanspektro*otometerpadap
anjanggelombang &#$ nm !Poedjiadji 1AA&%.
Ha#il (er&itungan ka'ar glik%gen &ati tiku# /ang men'a(at
(erlakukan (ua#a
A$#%r$an&atitiku#(ua#a
I II III )ata*
rataA+ua'e
#t$,$$$ $,$$$ $,$$$
$Stan'ar $,#$& $,1AF $,#$ $,#$(Blank% $,$1 $,$1 $,$1 $,$1Sam(el $,11 $,11 $,11# $,11$=F
Ka'ar gluk%#a&a#il&i'r%li#i#glik%gen&ati ,mg-g &ati
Kadar= Ru− Rb
Rs− Rb ×
1
Berat hati
Kadar=0,11067−0,01
0,203−0,01 ×1
2
Kadar=0,26mg /gr
3erdasarkan hasil perhitungan terhadap kadar glikogen hati
memberikan hasil dimana nilai kadar glikogen hati pada tikus yang
mendapat perlakukan puasa masing masing sampel adalah sebesar $,#=
!mg+dl%+gr hati .
7/23/2019 Pengaruh Puasa Terhadap Kadar Glukoda Darah Dan Kandungan Glikogen Hati
http://slidepdf.com/reader/full/pengaruh-puasa-terhadap-kadar-glukoda-darah-dan-kandungan-glikogen-hati 19/20
MenurutPrijanti !#$$%, kadarglukosadidalamhati pada
saatpuasaakanlebihsedikitdibandingkansaattidakpuasa6adanganglikogen
dalamhatiakandigunakanketikakeadaanlapar,
halini dikarenakandalamkeadaanpuasaglikogen dihatidipecahmelaluiprosesglikogenolisismenjadiglukosa yang
langsungditrans*erkedarah. Glikogen yang
dipecahakanmenyebabkanglukosa di hatimenjadilebihsedikit !Prijanti
#$$%.
K:HMP5"
PadaPraktikum yang dilakukan kali ini bertujuan untuk mengukur dan
membandingkan kadar glukosa darah dan kandungan glikogen hati tikus
pada keadaan puasa dan tidak puasa. alam keadaan puasa, kadar
glikogen hati akan berkurang karena mengalami pemecahan
!glikogenolisis% untuk mempertahankan kadar glukosa darah. Kandunganglikogen hati diukur secara tidak langsung dengan menetapkan kadar
glukosa yang berasal dari hasil hidrolisis glikogen hati. Proses
pengukurankadarinimenggunakanmetode*olin-wu yang
bertujuanuntukmengendapkan protein darahpadasampel yang
berasaldaritubuhsampel yang telahdimatikanterlebihdahulu.
3erdasarkanhasilpercobaan didapat bahwa kadar glukosa darah pada
tikus yang sedang tidak berpuasa adalah sebear $,( mg+dlsedangkanhasilperhitungan terhadap kadar glikogen hati memberikan hasil dimana nilai
7/23/2019 Pengaruh Puasa Terhadap Kadar Glukoda Darah Dan Kandungan Glikogen Hati
http://slidepdf.com/reader/full/pengaruh-puasa-terhadap-kadar-glukoda-darah-dan-kandungan-glikogen-hati 20/20
kadar glikogen hati pada tikus yang mendapat perlakukan puasa masing
masing sampel adalah sebesar $,#= !mg+dl%+gr. Kadarglukosadidalamhati
pada
saatpuasaakanlebihsedikitdibandingkansaattidakpuasa6adanganglikogendalamhatiakandigunakanketikakeadaanlapar,
halini dikarenakandalamkeadaanpuasaglikogen di
hatidipecahmelaluiprosesglikogenolisismenjadiglukosa yang
langsungditrans*erkedarah. Glikogen yang
dipecahakanmenyebabkanglukosa di hatimenjadilebihsedikit !Prijanti
#$$%.
Da0tar (u#taka
3. Marks , awn dkk . #$$$. Biokimia Kedokteran Dasar. 9akarta 8 :G6