pengaruh ekstrak daun lamtoro gung (leucaena …repository.ump.ac.id/7372/1/andika nursetiaji...

PENGARUH EKSTRAK DAUN LAMTORO GUNG (Leucaena

leucocephala ssp. Glabrata) TERHADAP PERTUMBUHAN

BAKTERI Staphylococcus aureus DAN Pseudomonas aeruginosa

SECARA IN VITRO

SKRIPSI

Oleh

ANDIKA NURSETIAJI

1301070017

PROGRAM STUDI PENDIDIKAN BIOLOGI

FAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKAN

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO

2018

ii

Pengaruh Ekstrak Daun..., Andika Nursetiaji, FKIP UMP, 2018

iii


iv


v

HALAMAN MOTO

“Jangan biarkan hatimu berlarut-larut dalam kesedihan atas masa lalu, atau kamu

tidak akan pernah siap untuk menghadapi apa yang akan terjadi.”

(Ali bin Abi Thalib)

“Jangan biarkan kesulitan membuatmu gelisah, karena bagaimanapun juga hanya

di malam yang paling gelap lah bintang-bintang tampak bersinar terang.”

(Ali bin Abi Thalib)


vi

HALAMAN PERSEMBAHAN

Dengan puja dan puji syukur kepada Allah SWT. Atas segala rahmat-Nya

penulis mempersembahkan karya ini untuk:

1. Ibu dan bapak tersayang (Ibu Casriyah dan Bapak Slamet) atas segala

dukungan moril dan materil serta kasih sayang yang tiada henti kepada

penulis, doa yang tiada henti, serta nasehat yang selalu diberikan kepada

penulis untuk menjadi lebih baik.

2. Adik – adik (Rizkiyani Barokatul F. dan Fitri Wijayanti) serta seluruh

keluarga yang selalu memberikan Semangat, doa, dan dukungan.


vii

UCAPAN TERIMAKASIH

Alhamdulillah, puji syukur kehadirat Allah SWT atas Rahmat dan

Karunia-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi dengan judul


leucocephala ssp. Glabrata) TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI

Staphylococcus aureus DAN Pseudomonas aeruginosa SECARA IN VITRO.

Terimakasih dengan setulus-tulusnya penulis sampaikan kepada Drs. Heri

Maryanto, M.Si. dan Drs. Arief Husin, M.Si. yang telah membimbing dan

mengarahkan penulis dalam menyelesaikan skripsi ini. Selanjutnya penulis juga

mengucapkan terima kasih kepada Teguh Julianto, S.Pd., M.Si. dan Dr. Susanto,

M.Si. selaku penguji yang telah menyumbangkan masukan dan pemikiran untuk

kesempurnaan penulisan skripsi ini.

Penulis juga mengucapkan terima kasih dan penghargaan kepada:

1. Drs. Pudiyono, M.Hum., selaku Dekan Fakultas Keguruan dan Ilmu

Pendidikan Universitas Muhammadiyah Purwokerto.

2. Drs. Arief Husin, M.Si., selaku Ketua Program Studi Pendidikan Biologi

Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas Muhammadiyah

Purwokerto.

3. Seluruh dosen Program Studi Pendidikan Biologi Fakultas Keguruan dan

Ilmu Pendidikan Universitas Muhammadiyah Purwokerto.

4. Staf laboratorium Program Studi Pendidikan Biologi dan Staf Laboratorium

Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto.


viii

5. Teman-teman Biologi angkatan 2013 yang saya sayangi, terima kasih atas

dukungan dan semangatnya, sehingga penulis mampu menyelesaikan

penyusunan skripsi dengan penuh semangat.

6. Teman seperjuangan dalam penelitian Ahmad Arif S., Titin Mutiana sari, Nur

Ardiyati, Efri F.A, Tyas U.K, dan Rosita S. yang sudah bersama-sama dalam

segala rasa senang dan keluh kesah dalam melakukan penelitian.

7. Teman-teman Kos (Mas Ismail, Fendi Amerudin, Wahyu G.P, dan Torik

Mustakim) yang menjadi teman tidur dan keluarga di Purwokerto.

Penulis menyadari bahwa dalam penyusunan skripsi ini masih banyak

sekali kekurangan dan jauh dari kesempurnaan. Demikian, semoga dengan

terselesaikannya skripsi ini berguna bagi para pembaca dan khususnya bagi

penulis serta Program Studi Pendidikan Biologi.

Purwokerto, Januari 2017

Penulis


ix


leucocephala ssp. Glabrata) TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI

Staphylococcus aureus DAN Pseudomonas aeruginosa SECARA IN VITRO

ANDIKA NURSETIAJI

1301070017

ABSTRAK

Bakteri Staphylococcus aureus dan Pseudomonas aeruginosa dikenal

mampu menyebabkan penyakit infeksi pada kulit. Penyakit tersebut seperti

penyakit furunkel (bisul), selulitis, infeksi luka bakar, infeksi luka paska operasi

dan lain sebagainya. Menurut penelitian, 92% masyarakat indonesia tidak

menggunakan antibiotik secara tepat. Penggunaan antibiotik yang tidak tepat

dapat menimbulkan masalah resistensi. Oleh karena itu, perlu dikembangkan

alternatif obat berbahan herbal untuk menghindari timbulnya resistensi tersebut.

Penelitian yang bertujuan untuk mengetahui bagaimana pengaruh ekstrak daun

Lamtoro Gung Leucaena leucocephala ssp. Glabrata dalam menghambat

pertumbuhan bakteri S. aureus dan P. aeruginosa secara in-vitro, telah

dilaksanakan pada bulan April – Agustus 2017 di Laboratorium Farmasi dan

Laboratorium Mikrobiologi Terpadu Universitas Muhammadiyah Purwokerto.

Rancangan percobaan berupa Rancangan Acak Lengkap (RAL) pola Faktorial.

Faktor pertama yaitu organ daun lamtoro gung yang dibedakan antara helaian dan

tangkainya; faktor kedua yaitu konsentrasi ekstrak helaian dan tangkai daun

lamtoro gung (20%, 25%, 30%, 35%, 40%), kontrol positif/ salep kulit, dan

kontrol negatif/ DMSO; faktor ketiga berupa strain bakteri yang digunakan yaitu

bakteri S. aureus dan P. aeruginosa. Ulangan dilakukan sebanyak 3 kali.

Parameter yang diamati adalah diameter zona hambat. Analisis data

menggunakan uji F pada taraf kepercayaan 95% dengan analisis varian (ANOVA)

dan dilanjutkan uji DMRT pada taraf uji 95%. Hasil penelitian menunjukkan

bahwa ekstrak daun lamtoro gung mampu menghambat pertumbuhan bakteri S.

aureus dan P. aeruginosa. Ekstrak helaian daun lamtoro gung menghasilkan zona

hambat terbaik terhadap bakteri S. aureus terdapat pada konsentrasi 35% dengan

rata-rata sebesar 0,950 cm, sedangkan terhadap bakteri P. aeruginosa pada

konsentrasi 20% dengan rata-rata sebesar 1,190 cm. Ekstrak tangkai daun lamtoro

gung menghasilkan zona hambat terbaik terhadap bakteri S. aureus pada

konsentrasi 35% dengan rata-rata sebesar 1,556 cm, sedangkan terhadap bakteri

P. aeruginosa pada konsentrasi 20% dengan rata-rata sebesar 1,416 cm. Zona

hambat pada kontrol negatif sebesar 0 cm, sedangkan pada kontrol positif sebesar

3,47 cm. Jika dibandingkan dengan kontrol negatif, perlakuan ekstrak tangkai dan

helaian daun mempunyai daya hambat yang lebih tinggi, sedangkan dengan

kontrol positif lebih rendah.

Kata kunci : Ekstrak Lamtoro Gung Leucaena leucocephala ssp. Glabrata,

Staphilococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, maserasi, zona

hambat.


x

DAFTAR ISI

UCAPAN TERIMAKASIH ......................................................................... vii

ABSTRAK .................................................................................................. ix

DAFTAR ISI ............................................................................................... x

DAFTAR TABEL ........................................................................................ xiii

DAFTAR GAMBAR ................................................................................... xv

DAFTAR LAMPIRAN ................................................................................ xvi

BAB I PENDAHULUAN ..................................................................... 1

1.1. Latar Belakang .................................................................. 1

1.2. Rumusan Masalah ............................................................. 3

1.3. Tujuan ............................................................................... 3

1.4. Manfaat Penelitian ............................................................. 4

BAB II TINJAUAN PUSTAKA ............................................................. 5

1.1. Tumbuhan Lamtoro Gung (Leucaena leucocephala ssp.

Glabrata) ........................................................................... 5

1.1.1. Klasifikasi Tumbuhan Lamtoro Gung ..................... 6

1.1.2. Deskripsi Tumbuhan Lamtoro Gung....................... 6

1.1.3. Kegunaan dan Kandungan Kimia Tumbuhan

Lamtoro Gung ........................................................ 7

1.2. Tinjauan Bakteri Uji .......................................................... 10

1.2.1. Bakteri Staphilococcus aureus ................................ 11

1.2.1.1. Klasifikasi Bakteri ................................... 11

1.2.1.2. Karakteristik Bakteri ................................. 11

1.2.1.3. Sifat Pathogenik Bakteri ........................... 12

1.2.2. Bakteri Pseudomonas aeruginosa ........................... 13

1.2.2.1. Klasifikasi Bakteri .................................... 13

1.2.2.2. Karakteristik Bakteri ................................. 13

1.2.2.3. Sifat Pathogenik Bakteri ........................... 14

1.3. Penelitian Terdahulu .......................................................... 14


xi

BAB III METODE PENELITIAN ............................................................ 15

3.1. Tempat dan Waktu............................................................. 15

3.2. Alat dan Bahan .................................................................. 15

3.2.1. Alat yang Digunakan dalam Penelitian ................... 15

3.2.2. Bahan yang Digunakan dalam Penelitian ................ 15

3.3. Rancangan penelitian ......................................................... 16

3.4. Prosedur Penelitian ............................................................ 17

3.4.1. Pembuatan Medium NA (Nutrient Agar) ................ 17

3.4.2. Pembuatan Medium NB (Nutrient Broth) ............... 18

3.4.3. Pembuatan Medium GSP (Glutamat Starch

Phenile) .................................................................. 18

3.4.4. Pembuatan Medium MSA (Manitol Salt Agar) ....... 18

3.4.5. Purifikasi Isolat Bakteri Staphilococcus aureus dan

Pseudomonas aeruginosa ....................................... 19

3.4.6. Penghitungan Jumlah Sel Bakteri Uji ..................... 19

3.4.7. Ekstraksi Helaian dan Tangkai Daun Lamtoro

Gung (Leucaena leucocephala ssp. Glabrata) ........ 20

3.4.8. Pembuatan Ekstrak Daun Lamtoro Gung

Konsentrasi 20%, 25%, 30%, 35%, dan 40% .......... 22

3.4.9. Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) Helaian dan

Tangkai Daun Lamtoro Gung ................................. 23

3.4.10. Uji Pengaruh Ekstrak Helaian dan Tangkai Daun

Lamtoro Gung ........................................................ 25

3.5. Analisis Data ..................................................................... 26

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ................................................... 27

4.1. Hasil .................................................................................. 27

4.1.1. Pembuatan Ekstrak Daun Lamtoro Gung

(Leucaena leucocephala ssp. Glabrata) .................. 27

4.1.2. Uji Fitokimia Ekstrak Kental Helaian dan Tangkai

Daun Lamtoro Gung Menggunakan Metode KLT .. 29

4.1.3. Purifikasi Bakteri Uji.............................................. 32


xii

4.1.4. Perhitungan Jumlah Sel Bakteri Uji Metode

Turbidimetri ........................................................... 34

4.1.5. Uji Daya Hambat Bakteri Staphylococcus aureus

dan Pseudomonas aeruginosa ................................ 35

4.2. Pembahasan ....................................................................... 37

4.2.1. Pembuatan Ekstrak Helaian dan Tangkai Daun

Lamtoro Gung (Leucaena leucocephala ssp.

Glabrata) ............................................................... 37

4.2.2. Uji Fitokimia Menggunakan Uji Warna pada Plat

KLT ....................................................................... 39

4.2.3. Uji Daya Hambat ................................................... 42

BAB V SIMPULAN DAN SARAN ........................................................ 50

5.1. Simpulan ........................................................................... 50

5.2. Saran ................................................................................. 51

DAFTAR PUSTAKA .................................................................................. 52

LAMPIRAN ................................................................................................. 57


xiii

DAFTAR TABEL

Tabel 3.1. Bentuk Tabel Hasil Pengukuran Diameter Zona Hambat .............. 17

Tabel 4.1. Berat Bahan Baku Pembuatan Ekstrak Tumbuhan Lamtoro Gung

(Leucaena leucocephala ssp. Glabrata) ........................................ 27

Tabel 4.2. Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Lamtoro Gung (Leucaena

leucocephala ssp. Glabrata) .......................................................... 28

Tabel 4.3. Hasil Uji Fitokimia Ekstrak Helaian dan Tangkai Daun Lamtoro

Gung (Leucaena leucocephala ssp. Glabrata) ............................... 30

Tabel 4.4. Hasil Perhitungan Jumlah Bakteri Menggunakan Metode

Spektrofotometer .......................................................................... 34

Tabel 4.5. Hasil Uji Daya Hambat Bakteri Staphylococcus aureus Oleh

Ekstrak Etanol Tangkai dan Helaian Daun Lamtoro Gung


Tabel 4.5. Hasil Uji Daya Hambat Bakteri Pseudomonas aeruginosa Oleh

Ekstrak Etanol Tangkai dan Helaian Daun Lamtoro Gung


Tabel 7.1. Hitungan Ekstrak Helaian Daun Lamtoro Gung ............................ 71

Tabel 7.2. Hitungan Ekstrak Tangkai Daun Lamtoro Gung ........................... 71

Tabel 7.3. Data Mentah Analisis Bakteri Staphylococcus aureus ................... 72

Tabel 7.4. Data Mentah Analisis bakteri Pseudomonas aeruginosa ............... 73

Tabel 7.5. Univariate Analysis of Variance bakteri Staphylococcus aureus ... 75

Tabel 7.6. Test of Between-Subjects Effect Bakteri Staphylococcus aureus .. 77

Tabel 7.7. Homogeneous Subsets Ekstrak Bakteri Staphylococcus aureus..... 77

Tabel 7.8. Homogeneous Subsets Konsentrasi Bakteri Staphylococcus

aureus ........................................................................................... 78

Tabel 7.9. Univariate Analysis of Variance Bakteri Pseudomonas

aeruginosa .................................................................................... 78

Tabel 7.10. Test of Between-Subject Effects Bakteri Pseudomonas

aeruginosa .................................................................................. 80


xiv

Tabel 7.11. Homogeneous Subsets Ekstrak Bakteri Pseudomonas

aeruginosa .................................................................................. 80

Tabel 7.12. Homogeneous Subsets Konsentrasi Bakteri Pseudomonas

aeruginosa .................................................................................. 81


xv

DAFTAR GAMBAR

Gambar 2.1. Tumbuhan Lamtoro Gung (Leucaena leucocephala ssp.

Glabrata) (Sumber : Dokumen Pribadi) .................................... 7

Gambar 3.1. Posisi atau Letak Kertas Cakram pada Biakan Bakteri Uji......... 26

Gambar 4.1. Hasil Ekstrak Kental Daun Lamtoro Gung (Leucaena

leucocephala ssp. Glabrata) : A = Ekstrak Kental Helaian

Daun Lamtoro Gung, dan B = Ekstrak Kental Tangkai Daun

Lamtoro Gung. ......................................................................... 29

Gambar 4.2. Uji Fitokimia Menggunakan Plat KLT Esktrak Helaian Daun

Lamtoro Gung (Leucaena leucocephala ssp. Glabrata) : A.

Flavonoid, B. Alkaloid, C. Tanin, dan D. Saponin. ................... 31

Gambar 4.3. Uji Fitokimia Menggunakan Plat KLT Esktrak Tangkai Daun

Lamtoro Gung (Leucaena leucocephala ssp. Glabrata) : A.

Flavonoid, B. Alkaloid, C. Tanin, dan D. Saponin. ................... 31

Gambar 4.4. Hasil Purifikasi Isolat Bakteri Pseudomonas aeruginosa

Menggunakan Medium GSP (Glutamat Starch Phenile)

Menunjukkan Koloni Berwarna Merah. .................................... 33

Gambar 4.5. Hasil Purifikasi Isolat Bakteri Staphylococcus aureus

Menggunakan Medium MSA (Manitol Salt Agar), Warna

Koloni Berwarna Kuning (Krem). ............................................ 33


xvi

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Diagram Alir Kerja ................................................................... 58

Lampiran 2. Skema Kerja.............................................................................. 59

1.1 Proses Pembuatan Ekstrak Daun Lamtoro Gung

(Leucaena leucocephala ssp. Glabrata)......................... 59

1.2 Prosedur kerja uji reaksi warna metode KLT

(Kromatografi Lapis Tipis) ekstrak daun lamtoro gung

(Leucaena leucocephala ssp. Glabrata) ........................ 63

1.3 Prosedur Kerja Pembuatan Konsentrasi (20%, 25%,

30%, 35%, dan 40%) Ekstrak Daun Lamtoro Gung

(Leucaena leucocephala ssp. Glabrata) ........................ 64

1.4 Hasil Perhitungan Sel Bakteri Metode Spektrofotometri

Bakteri Uji (Staphilococcus aureus & Pseudomonas

aeruginosa) ................................................................... 65

1.5 Prosedur Kerja Uji Daya Hambat Ekstrak Daun

Lamtoro Gung (Leucaena leucocephala ssp. Glabrata)

Metode Kirby-Bauer ..................................................... 66

1.6 Hasil Uji Daya Hambat Ekstrak Daun Lamtoro Gung

(Leucaena leucocephala ssp. Glabrata) Metode Kirby-

Bauer ............................................................................ 67

Lampiran 3. Hasil Perhitungan Rendemen Ekstrak Tangkai dan Helaian

Daun Lamtoro Gung (Leucaena leucocephala ssp. Glabrata) ... 71

3.1 Helaian Daun Lamtoro Gung ........................................ 71

3.2 Tangkai Daun Lamtoro Gung ........................................ 71

Lampiran 4. Hasil Analisis Data Menggunakan Uji Faktorial ....................... 72

4.1 Data Mentah Analisis .................................................... 72

4.2 Hasil Analisis Data ....................................................... 75


pengaruh ekstrak daun lamtoro gung (leucaena …repository.ump.ac.id/7372/1/andika nursetiaji...

Documents