PENEMPELAN (AFFIXING)

Affiksasi atau proses pelekatan adalah proses pelekatan atau penetapan sayatan

jaringan pada kaca preparat dengan bantuan media perekat tertentu.

Pada proses ini, diperlukan berbagai persiapan, antara lain :

a) Kaca preparat

b) Media perekat

c) Akuades

d) Meja pemanas/Hot Plate

e) Peralatan berupa pinset,skalpel,gunting,kuas,dll

A. KACA PREPARAT

Kebersihan kaca preparat yang digunakan hendaklah selalu dijaga dan

diperhatikan. Kotoran yang masih melekat pada proses pewarnaan nati akan ikut

menyerap warna, sehingga kaca preparat akan tampak tidak rapi dan kotor.

Kaca preparat baru, umumnya sudah cukup bersih. Guna memperoleh hasil yang

cukup baik, maka sebaiknya kaca preparat baru itu sebelsum digunakan

direndam dalam alkohol. Pada penyiapan preparat darah dengan metode ulas

(smear),kebersihan kaca preparat merupakan syarat mutlak.

Jenis kaca preparat bekas pakai. Untuk kaca preparat bekas pakai, diperlukan

tahapan cara membersihkan yang lebih panjang. Pertama, kaca preparat tersebut

harus direndam dalam xylol bekas pakai selama 24 jam, dilanjutkan dengan

perendaman air sabun hangat beberapa lama hingga mulai tampak bersih.

Kemudian cuci beberapa kali dengan air dan dibilas dengan akuades, lalu

dengan alkohol yang dibubuhi beberapa tetes asam nitrit. Akhirnya dikeringkan

dan disimpan.

1

B. MEDIA PEREKAT

Dari beberapa jenis formula media perekat yang umum digunakan, jenis yang

paling umum ialah media perekat “Mayer`s albumin” yang formulanya adalah sbb :

Putih telur..........................................................................................50 bagian

Gliserin..............................................................................................50 bagian

Kristal thymol............................................................................beberapa butir

Akuades.....................................................................................beberapa tetes

Mula-mula putih telur dan gliserin dikocok hingga rata, busa yang terbentuk dibuang

dan bila perlu dilakukan penyaringan. Kemudian dibubuhkan Kristal thymol yang

berfungsi sebagai pencegah berkembangnya jamur dan bakteri serta beberapa tetes

akuades sebagai pengencer. Sebagai pengganti tnhymol dapat digunakan Natrium

salisilat sebanyak 0,5-1 gram.

Substitusi albumin lainnya adalah :

1. Water-glass................................................................................................1 bagian

Akuades......................................................................................................3 bagian

2. Serum manusia (human serum) segar.............................................................15 ml

Akuades..........................................................................................................10 ml

5% formalin dalam Akuades............................................................................6 ml

Setelah diaduk, kemudian disaring dengan menggunakan kertas saring

Media perekat lainnya adalah Metode Gelatin Mason bagi sayatan parafin yang

memperoleh perlakuan dengan larutan perak hangat. Untuk penyiapannya, larutkan 0,5

g gelatin dalam 200 ml akuades yang dipanaskan sedikit hingga hangat. Selagi panas,

larutan tersebut disaring ke dalam wadah yang digunakan untuk mengapungkan sayatan

dengan cara sbb :

Letakkan sayatan pada cairan hangat yang ada dalam wadah dan biarkan

hingga sayatan (yang biasanya menggulung) tersebut tampak lurus mendatar

2

Angkatlah sayatan tersebut deng Agar diperoleh hasil yang memuaskan, hal-hal

dibawah ini perlu diperhatikan selama melakukan penempelan sayatan pada

permukaan slide.

1. Gunakan hanya slide bersih. Jika ragu, bersihkan terlebih dahulu

2. Lapisan slide dengan albumen Mayer setipis mungkin dengan cara mengoleskan

jari bersih 3 sampai 4 kali. Terlalu banyak albumen akan memberi latar belakan

gelapdan artifak kotor pada slide pada saat pengamatan. Disamping itu, albumen

yang terlalu tebal akan sulit dikeringkan, padahal penempelan sayatan baru bisa

dilakukan jika albumen sudah benar-benar kering.

3. Jangan pernah menyentuh permukaan slide yang sudah dilapisi albumen Mayer.

Jika tidak digunakan, simpan segera slide beralbumen dalam posisi berdiri

dalam oven hangat (bukan panas) dan bebas debu

4. Buang seluruh albumen pada permukaan slide yang tidak ditempati oleh jaringan

dengan cara melapnya dengan kain linen atau kertas tissue. Albumen yang

tersisa akan dikoagulasikan oleh alkohol dan kemudian terwarnai sehingga

memberi kesan kotor pada permukaan slide.

5. Selalu letakkan (tempelkan) permukaan sayatan pita yang mengkilap menghadap

permukaan slide, dan jangan sebaliknya

6. Ketika memanaskan diatas hotplate, jaga agar parafin jangan sampai mencair,

karena ini bisa merusak jaringan. Kerusakan jaringan juga bisa terjadi jika

peregangan terlalu dipaksakan dengan cara menarik kedua sisi sayatan dengan

ujung jarum. Kedua hal ini harus dihindari.

7. Agar sayatan benar-benar melekat kuat di atas permukaan slide, sebaiknya slide

yang sudah ditempeli disimpan di dalam oven yang hangat dan bebas debu

minimal selama tiga hari

an kaca preparat bersih

Miringkan pada salah satu kaca preparat hingga sayatan tiris, tetapi usahakan

jangan sampai kering sekali

Serap air dengan kertas tisu

Letakkan kaca preparat berisi syatan tersebut pada wadah lain yang berisi uap

formalin dengan suhu 370C dan biarkan selama 18-24 jam.

3

PERTANYAAN DAN JAWABAN :

1. Mengapa kebersihan kaca preparat yang digunakan hendaklah selalu dijaga dan

diperhatikan?

Jb : Karena kotoran yang masih melekat pada kaca preparat, pada proses pewarnaan

nanti akan ikut menyerap warna, sehingga kaca preparat akan tampak tidak rapi dan

kotor.

2. Bolehkah apabila kita menggunakan kaca preparat bekas pakai? Dan apabila

boleh, langkah apa yang harus dilakukan agar kaca preparat tersebut dapat

digunakan kembali?

Jb : Bisa. Langkah-langkahnya adalah sebagai berikut :

a) Kaca preparat tersebut harus direndam dalam xylol bekas pakai selama 24

jam

b) Perendaman air sabun hangat beberapa lama hingga mulai tampak bersih

c) Cuci beberapa kali dengan air dan dibilas dengan akuades,

d) lalu dengan alkohol yang dibubuhi beberapa tetes asam nitrit.

e) Akhirnya dikeringkan dan disimpan.

3. Peralatan apa saja yang dibutuhkan dalam proses penempelan (Affixing)?

Jb :

a) Kaca preparat

b) Media perekat

c) Akuades

d) Meja pemanas/Hot Plate

e) Peralatan berupa pinset,skalpel,gunting,kuas,dll

4. Apa fungsi dibubuhkannya kristal thymol pada media perekat “albumin Mayer”?

Jb : Kristal thymol berfungsi sebagai pencegah berkembangnya jamur dan bakteri

5. Bahan apa yang bisa digunakan jika kristal thymol tidak ada?

Jb : Sebagai pengganti tnhymol dapat digunakan Natrium salisilat sebanyak 0,5-1 gram

4