Morfologi Fungi dan Khamir

Praktikum mikrobiologi

Jurusan BiologiFakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam

Universitas Jember

I. MORFOLOGI FUNGI

Kelompok 1. Aspergillus sp.

Kelompok 2. Penicillium sp.

Kelompok 3. Fusarium sp.

Kelompok 4. Rhizopus sp.

Kelompok 5. Tricoderma sp.

Kelompok 6. Metharizium

A. Mikroskopis PDA dipanaskan di atas bunsen

sampai agak meleleh

Ambil satu ose PDA dan diletakkan pada tepi kanan dan kiri slide kultur

Di beri isolat diatas PDA

Ditutup deck glass

Tisu ditetesi akuades steril

Di inkubasi

Diamati dengan mikroskop

B. Makroskopis

PDA di petri+isolat

Diamati menggunakan loupe, meliputi: ada tidaknya exudat, pigmentasi, garis radial, garis konsentris, dan morfologi koloni

(permukaan, warna dan bentuk koloni).

II. MORFOLOGI KHAMIR

Isolat : Yeast dan Candidaa. Pengecatan sel 1. Ditetesi MB

2. Di beri isolat di PDA umur 24 jam.

Ditutup dengan deck glass

Tepi deck glas di usap sampai kering

Di amati dengan mikroskop

b. Pengecatan sporaIsolat pada wortel umur 7x24 jam

akuades steril akuades steril

vortex

Dimasukkan isolat dalam objek glass

Dilakukan pengecatan

Fiksasi

a. Isolat Yeast

a. Isolat Candida

1. Cat A = gram A2. Larutan Alkohol3. Cat B = gram D

TERIMA KASIH

a. Pengecatan sel khamirKaca objek

Dibersihkan dengan alkohol 70%

Ditetesi sedikit MB

Ambil sedikit khamir dengan ose dan letakkan dalam larutam MB

Ditutup dengan gelas obyek

Diamati di bawah mikroskop, meliputi: bentuk sel, ada atau tidaknya pertunasan dan miselium semu serta banyaknya tunas taip sel.

B. Pengecatan spora khamirBiakan murni khamir

Disuspensikan dalam akuades steril

Diambil satu ose dan diratakan diatas gelas objek

Kering anginkan dan di fiksasi diatas api

Noda ditetesi dengan cat A dan dipanasi selama 3 menit

Cuci dengan air mengalir

Dilunturkan dengan alkohol asam dan cuci dengan air mengalir

Ditetesi cat B selama 10-15 detik

Cuci kembali dengan air mengalir

Amati dengan mikroskop tentang sel khamir dan sporanya.

c. Pengecatan negatifGelas objek dibersihkan

dengan alkohol 70%

Ditetesi larutan nigrosin di

sebelah kanan

Diletakkan sedikit biakan diatas

larutan nigrosin

Diratakan (gelas objek dimiringkan

45o) sambil digerakkan

(kekanan dan kekiri)

Kering anginkan

Diamati dengan mikroskop yang

telah ditetesi minyak imersi

dengan perbesaran 100x

Diulangi pada preparat yang

berbeda

d. Pengecatan sederhanaPreparat olesan bakteri (B.

substilis dan E. coli)

Ditetesi 1-2 tetes larutan cat

Dibiarkan 1-2 menit

Dicuci dengan air mengalir

Di keringanginkan dan di amati di bawah mikroskop

Morfologi bakteri

e. Pengecatan Ziehl Nielsen (acid fast)Preparat olesan bakteri (B.

substilis dan E. coli)

Dikering anginkan dan difiksasi

Ditetesi larutan ZN-A dan difiksasi kembali

Dicuci dengan ZN-B

Dicuci dDicuci dengan air mengalir dan dikering anginkanengan ZN-B

Ditetesi ZN-C selama 30 detik dan dicuci air mengalir

Diamati dibawah mikroskop

Bakteri acid fast berwarna merahBakteri non acid fast berwwarna

biru

f. Pengecatan gramGelas objek dibersihkan dengan alkohol

Diambil 1 ose suspensi B. substilis dan E. coli

Diratakan pada kanan dan kiri gelas objek

Dikering anginkan dan di fiksasi

Ditetesi cat Gram A 2-3 tetes selama 1 menit dan Dicuci dengan air mengalir lalu dikering anginkan

Ditetesi cat Gram B selama 1 menit, di cuci dan dikering anginkan

Ditetesi cat Gram C selama 30 detik, di cuci dan dikering anginkan

Ditetesi cat Gram D selama 2 menit, dicuci dan dikering anginkan

Diamati dibawah mikroskop (bakteri gram positif atau negatif)

g. Pengamatan bakteri dengan preparat gantung

Gelas objek berlekuk

dibersihkan dengan alkohol

Dipanaskan diatas lampu

bunsen

Gelas penutup dibersihkan dan dioles vaseline

Diambil 1 ose B. substilis

diletakkan diatas gelas penutup

Gelas penutup yang

mengandung suspensi dibalik

Gelas penutup posisi berada

dibawah