latihan mikrobiologi

7/21/2019 Latihan mikrobiologi

http://slidepdf.com/reader/full/latihan-mikrobiologi 1/8

1. Penanaman bakteri atau biasa disebut juga inokulasi adalah pekerjaan

memindahkan bakteri dari medium yang lama ke medium yang baru

dengan tingkat ketelitian dan kesterilan yang sangat tinggi.2. Untuk melakukan penanaman bakteri (inokulasi) terlebih dahulu

diusahakan agar semua alat yang ada dalam hubungannya dengan

medium agar tetap steril, hal ini untuk menghindari terjadinya

kontaminasi.3. Tahapan yang harus dilakukan sebelum inokulasi :

a) enyiapkan ruangan.

1) !uang tempat penanaman bakteri harus bersih dan keadannya

harus steril agar tidak terjadi kesalahan dalam pengamatan atau

per"obaaan di labotarium pembuataan serum #aksin dan

sebagainya.

2) $nokulasi dapat dilakukan dalam sebuah kotak ka"a (en"ast)

dimana udara dile%atkan dalam saringan melalui suatu jalan agar

tekena sinar ultra#iolet (Pel"&ar, 1').

b) Pemindahan dengan pipet.

1) *ara ini dilakukan dalam penyelidikan air minum atau pada

penyelidikan untuk diambil 1 ml "ontoh yang akan dien"erkan oleh

air sebanyak '' ml murni (Pel"&ar, 1').

") Pemindahan dengan ka%at inokulasi.

1) Ujung ka%at inokulasi sebaliknya dari platina atau nikel,

2) Ujungnya boleh lurus juga boleh berupa kolongan yang

diameternya 1+3 mm.

3) alam melakukuan penanaman bakteri ka%at ini terlebih dahulu

dipijarkan sedangkan sisanya berupa tungkai "ukup dile%atkan

nyala api saja setelah dingin kembali ka%at itu disentuhkan lagidalam nyala (Pel"&ar, 1').

-. Peralatan yang digunakan saat inokulasi:

a) *a%an petri

b) arum /se

") 0n"ast (aminar lo%)

d) $nkubator

. etode untuk menginokulasi bakteri sesuai dengan jenis medium tujuan:



a) Pada medium agar tegak, dilakukan metode tusuk menggunakan

jarum ose.

b) Pada medium agar miring dilakukan metode gors dengan loop ose.

") Pada medium dalam "a%an petri, dapa digunakan metode:

1) Streak plate (metode gores)

2) Pour plate (metode tuang)

3) Spread plate (metode sebar)

. $nkubasi adalah memyimpan medium pada alat atau kontainer pada

temperatur tertentu dan periode tertent, sehingga ter"ipta lngkungan

yang menyediakan kondisi "o"ok untuk pertumbuhan bakteri.

4. etode $nokulasi pada "a%an petri yang paling sering digunakan adalah

metode "a%an gores dan metode "a%an tuang.

. Prinsip pengen"eran : Untuk memperoleh spesies indi#idu, melalui

anggapan bah%a setiap koloni dapat terpisah dari satu jenis sel yang

dapat diamati (56rianto, 277-).

'. 8iakan murni diperlukan dalam berbagai metode mikrobiologis, "ontoh

peman6aatannya yaitu digunakan dalam mengidenti9kasi mikroba.

17. Untuk mengamati "iri+"iri kultural mor6ologi, 9siologi, dan serologi

daabutuhkan mikroba dari satu spesies.11. enurut adioetomo (1''3), terdapat dua metode yang dilakukan

untuk memperoleh biakan murni:

a) etode "a%an gores

1) etode ini mempunyai dua keuntungan, yaitu menghemat bahan

dan %aktu

2) etode "a%an gores yang dilaksanakan dengan baik ;

terisolasinya mikroorganisme yang diinginkan

3) etode gores atrau streak plate menggunakan loop ose dan

menggoreskannya ke permukaan medium agar dengan pola

tertentu dengan harapan pada ujung goresan, hanya sel bakteri

tunggal yang terkepas dari ose dan menempel ke medium.

-) Prinsip metode "a%an gores: endapat koloni yang benar+benar

terpisah dari koloni yang lain, sehingga mempermudah proses

isolasi.

) Tahapan dalam melakukan metode "a%an gores pada saat

inokulasi:



a) embagi 3+- "a%an petri. /se steril yang telah disiapkan

diletakkan pada sumber isolat

b) <emudian menggores ose tersebut pada "a%an petri berisi

media steril, =oresan dapat dilakukan 3+- kali membentuk garis

hori&ontal disatu "a%an.

") /se disterilkan lagi dengan api bunsen.

d) >etielah kering, ose tersebut digunakan untuk menggores

goresan sebelumnya ada sisi "a%an ke dua. angkah ini

dilanjutakn hingga keempat sisi "a%an tergores.

12. Penggoresan yang sempurna akan menghasilkan koloni yang terpisah

13. $nokulum digoreskan di permukaan media agar nutrien dakan "a%an

petrri dengan jarum pindah (loop ose)

1-. i antara garis+garis goresan akan terdapat sel+sel yang "ukup terpisah

sehingga dapat tumbuh menjadi koloni (?inarni, 1''4)

1. ua ma"am kesalahan yang umum sekali dilakuan oleh para sis%a

yang baru memulai mempelajari mikrobiologi:

a) Tidak meman6aatkan permukaan medium sebaik+baiknya untuk

digores sehingga pengen"eran mikroorganisme menjadi kurang lanjut.

b) *enderung untuk menggunakan inokulum terlalu banyak sehiunggamenyulitkan pemisahan sel+sel yang digoreskan@ (!atna, 1''7)

1. *ara penggarisan dilakukan pada medium pembiakan padat bentuk

lempeng. 8ila dilakukan dengan baik teknik inilah yang paling praktis.

14. alam pengerjaannya terkadang berbeda pada masing+masing

laboratorium tapi tujuannya sama yaiitu untuk

membuat goresan sebanyak

mungkin pada lempeng medium pembiakan (<us $rianto, 277).

1. Teknik dalam metode goresan (di "a%an):

a) Teknik =ores T

b) Teknik =ores >inambung (gambar)

") Teknik =ores <uadran



1'. eskripsi "a%an tuang : Untuk memperoleh koloni murni dari populsi

"ampuran mikroorrganisme dalam metode ini ialah dengan

mengen"erkan spe"imen dalam medium agar yang telah di"airkan dan

didinginkan (A7 o*) yang kemudian di"a%ankan.

27. <arena konsentrasi sel+sel mikroba dalam spe"imen pada umunya tidak

diketahui sebelumnya, maka pengen"eran perlu dilakukan beberapa

tahap sehingga sekurang+kurangnya satu di antara "a%an tersebut

mengandung koloni terpisah di atas permukaan ataupun di dalam agar.

21. etode ini memboroskan bahan dan %aktu, namun tidak memerlukan

keterampilan yang tinggi.

22. 5da dua "ara melakukan metode tuang atau pour plate:

a) *ara $ : en"ampurkan suspensi bakteri dengan medium agar pada

suhu 7 o* kmemudian menugnkannya pada "a%an petri

b) *ara $$ : engan menyemprotkan suspensi pada dasar "a%an petri,

kemudian menuang medium agar dan diaduk.

23. >etelah agar mengeras, bakteri akan berada pada tempatnya dandiharapkan baktei tidak mengelompok sehingga terbentuk koloni tunggal.

2-. eskripsi etode >ebar (spread plate) ; enyemprotkan suspensi ke

atas medium agar kemudian menyebarkannya se"ara merata dengan

trigalski (driglaski).

2. Perbedaan teknik spread plate dengan teknik pour plate = Teknik

spread plate (cawan sebar) adalah suatu teknik di dalam menumbuhkan

mikroorganisme di dalam media agar dengan "ara menuangkan stok

kultur bakteri atau menghapuskannya di atas media agar yang telah

memadat, sedangakan pada teknik pour plate kultur di"ampurkan ketika

media masih "air (belum memadat).

2. <elebihan teknik spread plate : ikroorganisme yang tumbuh pada

"a%an petri dapat tersebar merata pada bagian permukaan agar.

24. >alah satu "ontoh metode "a%an sebar adalah metode s%ab atau

hapus.

a) b) ")



2. $solasi bakteri adalah proses mengambil bakteri dari medium atau

lingkungan asalnya dan menumbuhkannya di medium buatan sehingga

diperoleh biakan yang murni.

2'. 8akteri dipindahkan dari satu tempat ke tempat lainnya harus

menggunakan prosedur aseptik.

37. 5septik berarti bebas dari sepsis, yaitu kondisi terkontaminasi karena

mikroorganisme lain.

31. 8eberapa alat yang diguanakan untuk menjalankan prosedur isolasi

adalah bunsen dan laminar air Bo%

32. 8ila tidak dijalankan dengan tepat, ada kemungkinan kontaminasi oleh

miroorganisme lain sehingga akan mengganggu hasil yang diharapkan.33. Teknik aseptik juga melindungi laboran dari kontaminasi bakteri

(>ingleton dan >ainsbury, 277).

3-. Prinsip dari isolasi mikroba adalah memisahkan satu jenis mikroba

dengan mikroba lain yang berasal dari "ampuran berma"am+ma"am

mikroba.

3. al ini dapat dilakukan dengan menumbuhkannya dalam media padat,

sel+sel mikroba akan membentuk koloni yang tetap pada tempatnya (CurD

5snani, 2774).

3. untuk mendapatkan biakan murni, sumber bakteri harus diperlakukan

dengan pengen"eran agar didapat hanya 177+277 bakteri yang ditrans6er

ke medium, sehingga dapat tumbuh menjadi koloni yang berasal dari

bakteri tunggal.

34. $solasi bakteri merupakan suatu "ara untuk memisahkan atau

memindahkan mikroba tertentu dari lingkungan sehingga diperoleh kultur

murni atau biakan murni



3. 5da beberapa "ara yang dapat dilakukan yaitu dengan "ara goresan

(streak plate), "ara tuang ( pour plate), "ara sebar (spread plate) dan

mikromanipulator (8u"kle,1'').

3'. Persyaratan utama bagi isolasi dan kultivasi fage adalah harus adanya

kondisi optimum untuk pertumbuhan organisme inangnya.

-7. >umber bakteriofage yang paling baik dan paling utama adalah habitat

inang.

-1. >ebagai "ontoh fage koli yang dijumpai di dalam pen"ernaan dapat

diisolasi dari limbah atau pupuk kandang

-2. al ini dilakukan dengan senti6ugasi atau 9ltrasi bahan sumbernya dan

penambahan kloro6orm untuk membunuh sel+sel bakterinya (5dams,

2777).

-3. etode pemaparan pada udara terbuka adalah metode untuk

mengisolasi bakteri udara.

--. etode ini sangat simpel, yaitu dengan memaparkan medium pada

udara terbuka, dengan harapan ada bakteri yang menempel dan

kemudian akan tumbuh menjadi koloni.

-. Tujuan pengen"eran atau dilusi adalah melarutkan atau melepaskan

mikroba dari subteratnya ke dalam air sehinnga lebih mudahpenanganannya.

-. Tujuan pengen"eran yaitu untuk mengurangi kepadatan bakteri yang

ditanam (ais, 277').

-4. Pengen"eran menurut Curohainah et al, 2774 merupakan proses yang

dilakukan untuk menurunkan atau memperke"il konsentrasi larutan

dengan menambah &at pelarut ke dalam larutan sehingga #olume larutan

menjadi berubah.

-. >ampel yang telah diambil kemudian disuspensikan dalam aEuades

steril.

-'. Teknik dilusi sangat penting dalam analis mikrobiologi karena hampir

semua metode peneitian dan perhitungan jumlah sel mikroba

menggunakan teknik seperti TP* (Total Plate *ount).

7. >etelah mikroba ditumbuhkan pada media agar tabung maupun "a%an

dan setelah inkubasi akan terlihat pertumbuhan bakteri dengan berbagai

ma"am bentuk, ukuran, si6at, dan berbagai "iri khas lain.



1. *iri+"iri ini akan mengarahkan ke si6at+si6at mikroba tersebut pada

media pertumbuhan, sehingga pengamatan mor6ologi ini sangat penting

untuk diperhatikan (!atna,1''7).

2. 8akteri yang memiliki Bagella sering kali membentuk koloni yang

menyebar terutama jika menggunakan lempengan agar basah, untuk

men"egah menyebarnya koloni maka harus digunakan agar benar+benar

kering (jida, 2777).

3. enurut %idjoseputro (1'7), si6at+si6at koloni yang tumbuh pada

agar+agar lempengan, pada agar+agar miring dan pada tusukan gelatin

adalah sebagai berikut:

a) >i6at+si6at koloni pada agar+agar lempengan mengenai bentuk,

permukaan dan tepi.

1) 8entuk koloni dilukiskan sebagai titik+titik, bulat berbenang, tak

teratur, serupa akar, serum kumparan.

2) Permukaan koloni dapat datar, timbul mendatar, timbul

melengkung, timbul men"embung, timbul membukit dan timbul

berka%ah.

3) Tepi koloni ada yang utuh, ada yang berombak, ada yang berbelah+

belah, ada yang bergerigi, ada yang berbenang+benang dan adayang keriting.

b) >i6at+si6at koloni pada agar+agar miring.

1) >i6at ini berkisar pada bentuk dan tepi koloni dan si6at itu

dinyatakan dengan kata+kata seperti : serupa pedang, serupa duri,

serupa tasbih, serupa titik+titik, serupa batang dan serupa akar.

") >i6at koloni tusukan dalam gelatin.

1) 5da bakteri yang dapat mengen"erkan gelatin. <arena itu, maka

bentuk+bentuk koloninya juga berbeda+beda.

2) 5dapula bentuk koloni yang tidak dapat mengen"erkan gelatin.

8ila dilihat dari samping koloni yang tidak mengen"erkan gelatin

dapat serupa pedang, tasbih, bertonjol+tonjol dan berjonjot.

3) ika bakteri mampu mengen"erkan gelatin, maka bentuk koloninya

dapat serupa ka%ah, serupa mangkuk, serupa "orong, pundi+pundi

dan berlapis.

latihan mikrobiologi

Documents