LAPORAN PRAKTIKUM

PENILAIAN STATUS GIZI BIOKIMIA DARAH

“ALBUMIN”

OLEH :

CHICA RISKA ASHARI

K21110004

KELOMPOK C1

PROGRAM STUDI ILMU GIZIFAKULTAS KESEHATAN MASYARAKAT

UNIVERSITAS HASANUDDINMAKASSAR

2012

BAB I

PENDAHULUAN

I.1 Latar Belakang

Darah merupakan bagian terpenting dari manusia yang memiliki fungsi

utama dalam memelihara homeostasis tubuh. Fungsi darah sebagian besar

dilaksanakan oleh plasma dan berbagai konstituennya. Plasma terdiri atas air,

elektrolit, metabolit, nutrient, protein dan hormon1.

Dalam pengklasifikasian protein, albumin merupakan protein globular.

Protein ini umumnya berbentuk bulat atau elips dan terdiri atas rantai polipeptida

yang berlipat. Pada umumnya gugus R polar terletak disebelah luar rantai

polipeptida, sedangkan gugus R yang hidrofob terletak disebelah dalam molekul

protein. Protein globular pada umumnya mempunyai sifat dapat larut dalam air,

dalam larutan asam atau basa dan dalam etanol2.

Protein globular berbentuk bola, terdapat dalam cairan jaringan tubuh.

Protein ini larut dalam larutan garam dan asam encr, mudah berubh dibawah

pengaruh suhu, konsentrasi garam serta mudah mengalami denaturasi3.

Abumin adalah protein yang dapat larut dalam air serta dapat terkoagulasi

oleh panas. Larutan albumin dalam air dapat diendapkan dngan penambahan

amoniumsilfat hingga jenuh2.

Albumin terdapat dalam telur, susu, plasma, dan hemoglobin. Albumin larut

dalam air dan mengalmi koagulasi bila dipanaskan3.

Menurut jurnal Plasma and Albumin Transfusions: Incations and

Controversies, albumin memainkan peran penting dalam kesehatan dan penyakit.

Albumin merupakan penyumbang utama oncotic koloid Tekanan (COP),

mengikat molekul endogen dan eksogen, koagulasi menengahi, dan membantu

1 Murray, R. K. 2006. Plasma Protein & Immunoglobulins.2 Poedjiadi Anna dan F.M. TItin Supriyanti.2009.Dasar-Dasar Biokimia 3 Almatsier Sunita. 2010. Prinsip Dasar Ilmu Gizi

untuk mempertahankan permeabilitas mikrovaskular normal. Konsekuensi klinis

hipoalbuminemia mencerminkan fungsi beragam. Hipoalbumenia signifikan

berkontribusi terhadap peningkatan morbiditas dan mortalitas. Lbumin dapat

diberikan melalui tranfusi produk plasma, atau melalui infus albumin serum

manusia (HAS)4.

Menurut jurnal Protein-Which is Best?, peran protein adalah Protein adalah

zat yang mengandung nitrogen yang dibentuk oleh asam amino. Mereka

melayani sebagai utama struktural komponen otot dan jaringan lain di tubuh.

Selain itu, mereka digunakan untuk memproduksi hormon, enzim dan

hemoglobin. Protein dapat juga dapat digunakan sebagai energi, namun, mereka

tidak. Pilihan utama sebagai sumber energi. Untuk protein digunakan oleh tubuh

mereka perlu dimetabolisme menjadi yang paling sederhana bentuk, asam amino.

Ada memiliki telah diidentifikasi 20 asam amino yang dibutuhkan untuk manusia

pertumbuhan dan metabolisme. Dua belas di antaranya asam amino (sebelas pada

anak-anak) yang disebut tidak penting, yang berarti bahwa mereka dapat

disintesis oleh tubuh kita dan tidak perlu dikonsumsi dalam diet. Asam amino

yang tersisa tidak bisa disintesis dalam tubuh dan digambarkan sebagai penting

yang berarti bahwa mereka harus dikonsumsi dalam diet kita. Ketiadaan salah

satu asam amino akan membahayakan kemampuan jaringan untuk tumbuh,

menjadi diperbaiki atau dipertahankan5.

Albumin, sebuah protein 69,00 D, yang disintesis dalam hati. Sintesis hati

fisiologis terjadi pada sekitar 30% dari kapasitas, menggantikan sekitar 4% dari

total tubuh albumin setiap hari. Selama masa meningkat butuhkan, sintesis hati

meningkat secara dramatis. Di bidang kesehatan, tingkat sintetis dipengaruhi

secara dominan oleh COP. Ketika COP menurun, meningkatkan sintesis albumin.

(Memang, koreksi hipoalbuminemia oleh sintetik infus koloid secara signifikan

dapat menekan sintesis albumin) Peradangan berkurang albumin. Sintesis

4 G. Hackner, Susan. Plasma and Albumin Transfusions: Incations and Controversies.5 Jay R. Hoffman, Jay dan J. Falvo, Michael. 2004. Protein-Which is Best?

sebanyak 90%. Sitokin inflamasi shunt asam amino untuk meningkatkan sintesis

akut protein fase penting dalam proses inflamasi, dan jauh dari sintesis albumin4.

Oleh karena itu, dilakukan percobaan ini untuk mengetahui status gizi

biokimia darah individu dengan menghitung kadar albumin dalam plasma darah.

I.2 Tujuan Praktikum

I.2.1 Tujuan Umum

Tujuan umum kegiatan praktikum ini adalah untuk menilai status gizi

individu secara biokimia

I.2.2 Tujuan Khusus

Tujuan khsusus kegiatan praktikum ini yaitu untuk menentukan kadar

albumin dalam plasma darah manusia.

I.3 Manfaat Praktikum

Manfaat dari percobaan ini agar kita dapat menentukan banyaknya jumlah

albumin dalam serum manusia dan plasma pada kedua sistem baik manual

maupun otomatis.

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

Albumin merupakan koloid alamiah pertama yang digunakan sebagai volume

expander sehubungan dengan fungsinya dalam meningkatkan tekanan ankotik

intravaskular sehingga mampu memperbesar volume intravaskular dan memperbaiki

perfusi jaringan. Albumin juga berfungsi sebagai alat transport beberapa zat penting

seperti lemak, toksin, obat-obatan6.

Albumin memiliki sejumlah fungsi. Pertama, mengangkut molekul-molekul kecil

melewati plasma dan cairan sel. Fungsi ini erat kaitannya dengan bahan metabolisme

—asam lemak bebas dan bilirubuin—dan berbagai macam obat yang kurang larut

dalam air tetapi harus diangkat melalui darah dari satu organ ke organ lainnya agar

dapat dimetabolisme atau diekskresi. Fungsi kedua yakni memberi tekanan osmotik

di dalam kapiler6.

Albumin merupakan protein utama dalam plasma manusia dan membentuk

sekitar 60% protein plasma total. Sekitar 40% albumin terdapat dalam plasma,

sedangkan 60% lainnya terdapat di ekstrasel. Setiap harinya, hepar menghasilkan

sekitar 12 gram albumin, yang berarti sekitar 25% dari seluruh sintesis protein oleh

hepar. Albumin awalnya dibentuk sebagai suatu praproprotein. Peptida sinyalnya

dikeluarkan sewaktu protein tersebut memasuki sisterna retikulum endoplasma kasar,

dan heksapeptida di terminal amino yang terbentuk kemudian diputuskan ketika

protein tersebut menempuh jalur sekretorik. Karena massa molekulnya yang realtif

rendah (69 kDa) dan konsentrasinya yang tinggi, albumin diperkirakan menentukan

sekitar 75-80% tekanan osmotik plasma pada manusia1.

Albumin, sebuah protein 69,00 D, yang disintesis dalam hati. Sintesis hati

fisiologis terjadi pada sekitar 30% dari kapasitas, menggantikan sekitar 4% dari total

tubuh albumin setiap hari. Selama masa meningkat butuhkan, sintesis hati meningkat

6 Hartono, Andry. 2006. Terapi Gizi & Diet Rumah Sakit

secara dramatis. Di bidang kesehatan, tingkat sintetis dipengaruhi secara dominan

oleh COP. Ketika COP menurun, meningkatkan sintesis albumin. (Memang, koreksi

hipoalbuminemia oleh sintetik infus koloid secara signifikan dapat menekan sintesis

albumin) Peradangan berkurang albumin. Sintesis sebanyak 90%. Sitokin inflamasi

shunt asam amino untuk meningkatkan sintesis akut protein fase penting dalam

proses inflamasi, dan jauh dari sintesis albumin4.

Albumin didistribusikan antara intravaskuler (40%) dan (60%) ekstravaskuler

kompartemen, dengan paruh sekitar 8 hari. Ada fluks lambat konstan antara

kompartemen. Dalam kasus intravaskular albumin kerugian, bergerak albumin dari

extravascualr ke kompartemen intravaskuler ke mempertahankan COP. Karena

konsentrasi albumin serum hanya mengukur bagian intravaskular, tidak mungkin

perkiraan akurat dari seluruh tubuh albumin pada pasien yang sakit4.

Albumin melayani fungsi beragam. Konsekuensi klinis dari hipoalbuminemia

mencerminkan fungsi molekul. Sementara hipoalbuminemia ringan umumnya

memiliki konsekuensi kecil, sedang dari. Kekurangan yang parah dapat memiliki

hidup yang mengancam efek. Major pentingnya adalah peran albumin dalam

pemeliharaan COP. Albumin bertanggung jawab atas 50% dari konsentrasi protein

plasma total dan 80% dari COP plasma. Pada pasien sakit kritis, hubungan ini kurang

diprediksi4.

Albumin juga tampaknya berperan dalam menjaga integritas mikrovaskuler.

Meskipun mekanismenya tidak jelas, ada kemungkinan bahwa albumin menempati

saluran air antara sel-sel endotel untuk mempersempit saluran dan mengusir

makromolekul. Parah hipoalbuminemia menyebabkan akumulasi cairan

ekstravaskuler. Dengan asumsi integritas pembuluh darah normal, ini umumnya

tidak terjadi sampai penurunan albumin serum di bawah 1,5 g / dl. Ketika integritas

vaskular dikompromikan (misalnya, vaskulitis), atau dalam menghadapi terapi cairan

intravena, hipoalbuminemia ringan dapat mengakibatkan extravascation. Akumulasi

cairan biasanya dinyatakan sebagai edema perifer (anggota badan distal, ventrum,

daerah bergantung), organ edema dan / atau efusi rongga. Edema paru kurang umum

dan, pada manusia, berhubungan langsung dengan kelangsungan hidup menurun.

Edema bisa kompromi penyembuhan luka, dan edema gastrointestinal dapat

menyebabkan anoreksia, penurunan penyerapan gizi, ileus, dan pemberian makanan

enteral intoleransi, serta eksaserbasi hipoalbuminemia melalui kehilangan GI4.

Albumin mengikat sejumlah zat endogen dan eksogen, termasuk bilirubin,

kalsium, edotoxin, dan obat-obatan tertentu (digoxin, furosemid, warfarin, beberapa

antibiotik). Hipoalbuminemia hasil peningkatan konsentrasi protein-terikat obat

dalam bentuk terikat, yang mengarah ke salah satu efek samping atau metabolisme

yang cepat dan penurunan kemanjuran. Albumin juga mengikat dan mengeruk

radikal oksigen bebas, dan dapat mengikat zat besi, menghambat peroksidasi lipid.

Hipoalbuminemia mengurangi efek protektif4.

Albumin berperan dalam modulasi koagulasi, oleh asam arakidonat mengikat dan

dengan demikian menghambat sintesis tromboksan A2, Dan dengan menambah

aktivitas antitrombin (AT). Penting hipoalbuminemia dapat menyebabkan atau

memberikan kontribusi terhadap hyperaggregability pada pasien cenderung4.

Albumin bermanfaat untuk pembentukan jaringan sel baru. Di dalam ilmu

kedokteran, albumin ini dimanfaatkan untuk mempercepat pemulihan jaringan sel

tubuh yang terbelah, misalnya karena operasi atau pembedahan. Pada masa krisis saat

ini, impor serum albumin yang dimanfaatkan sering membebani biaya pasien. Untuk

satu kali pembedahan, penggunaan serum ini bisa mencapai tiga kali 10 mililiter itu2.

Albumin bermanfaat juga dalam pembentukan jaringan tubuh yang baru.

Pembentukan jaringan tubuh yang baru dibutuhkan pada saat pertumbuhan (bayi,

kanak-kanak, remaja dan ibu hamil) dan mempercepat penyembuhan jaringan tubuh

misalnya sesudah operasi, luka bakar dan saat sakit . Begitu banyaknya manfaat

albumin sehingga dapat dibayangkan apabila mengalami kekurangan maka banyak

organ tubuh yang sakit6.

Jurnal Seven-year large cohort study for the association of serum albumin level

and aging among community dwelling elderly memperjelas hubungan albumin serum

dan penuaan dalam komunitas hunian mandiri berusia 65 dan lebih tua. Subyek

penelitian adalah 36.674 orang yang telah memiliki dasar pemeriksaan kesehatan

setidaknya satu kali 2001-2007 di Habikino-kota, Osaka. Sebagai sebuah studi cross-

sectional, prevalensi hipoalbuminemia (Alb ≦ 3.5g/dl) lebih tinggi pada usia yang

lebih tua dari laki-laki dan perempuan. Membandingkan kadar albumin menurut

kelompok umur, orang tua menunjukkan lebih tinggi albumin tingkat. Sebagai studi

longitudinal, kita menghitung perubahan kadar albumin selama tujuh tahun. Hasil

penelitian menunjukkan bahwa kadar albumin menurun 4,25 ± 0,25 g / dl menjadi

4,21 ± 0,23 g / dl untuk pria (p <.001), 4,30 ± 0,23 g / dl menjadi 4,25 ± 0,22 g / dl

untuk wanita (p <.001). Temuan dari penelitian ini menunjukkan bahwa penurunan

kadar albumin dari laki-laki dan perempuan kalangan masyarakat yang tinggal di tua

secara bermakna dikaitkan dengan penuaan7.

Sedangkan jurnal Prognostic value of admission serum albumin levels in patients

with head injury meneliti tentang cedera kepala yang merupakan penyebab utama

kecacatan dan kematian di masyarakat, namun secara biokimia tidak efektif penanda

prognostik yang tersedia. Dan hasil penelitian ini menyatakan Rata-rata serum

albumin cedera kepala dan kontrol adalah 3,24 dan 4,15 g / dL masing-masing (p

<0,001). Pengakuan albumin memiliki korelasi positif yang signifikan dengan skor

Glasgow koma (GCS) (p <0,001). Hipoalbuminemia (≤ 3,5 g/dL) saat masuk tercatat

pada 88%, 52% dan 33% dari pasien dengan cedera kepala berat, sedang dan ringan

masing-masing (P <0,001). Tingkat albumin secara signifikan lebih rendah diamati

pada pasien dengan cedera sistemik terkait; mereka membutuhkan dekompresi bedah

dan pada orang tua. Kematian pada 1 bulan adalah 43% pada pasien dengan masuk

hipoalbuminemia dibandingkan dengan 17% pada mereka dengan tingkat albumin

normal (rasio odds [OR] 3,7, p = 0,003). Hasil yang kurang baik pada 3 bulan tercatat

pada 62% pasien dengan hipoalbuminemia masuk dibandingkan dengan 18% dari

mereka yang memiliki kadar albumin normal (OR 7.3, p <0,001). Dalam analisis

regresi logistik, masuk hipoalbuminemia muncul sebagai prediktor independen untuk

7 Miyake, Motoko. 2011. Seven-year large cohort study for the association of serum albumin level and aging among community dwelling elderly

hasil yang tidak menguntungkan, di samping usia dan GCS. Sebagai kesimpulan dari

hasil percobaan ini yaitu hipoalbuminemia Penerimaan merupakan indikator yang

efektif dari keparahan cedera kepala, dan independen prediktor hasil yang tidak

menguntungkan pada 3 bulan8.

Albumin merupakan komponen utama dari protein serum total dalam individu

yang sehat. Serum albumin diuji dalam sebagian besar laborat klinik melalui metode

penguat warna (dye-binding methode) yang menggunakan bromocesol green. Serum

albumin berikatan secara spesifik dengan brocresol green untuk membentuk senyawa

BCG albumin biru yang menyerap secara maksimal pada 600 nm9.

Prosedur penentuan serum albumin.

1. Berilah label setiap tabung uji, yaitu kosong, standar, referensi, pool, dan setiap

subjek uji.

2. Tambahkan 5,0 ml reagen celup penyangga pada masing-masing tabung.

3. Pada tabung kosong tambahkan 20 µl air distilasi terionisasi. Pada tabung standar

tambahkan 20 µL larutan standar. Pada tabung referensi tambahkan 20 µL serum

referensi. Pada tabung pool. Untuk masing-masing subjek uji tambahkan 20 µL

serum pool. Untuk masing-masing subjek uji tambahkan 20 µL serum uji.

4. Campurkan masing-masing tabung secara merata, dan biarkan pada posisis berdiri

selama 2 menit.

5. Pindahkan masing-masing isi tabung pada cuvet.

6. Tempatkan spektofotometer pada panjang gelombang 600 nm.

7. Aturla pada titik nol dengan menggunakan reagen blank.

8. Baca dan catat penyerapan sampel standar, referensi, dan pool.

Warna akhir yang berkembang menjadi stabil selama 1 jam. Sampel yang

mempunyai lebih dari 6 g/dL albumin harus didilusikan dengan salin isotonik

(isotonic saline) dan diuji lagi. Hasilnya kemuian harus dikoreksi pada dilusi ini.

8 Dhandapani, SS. 2011. Prognostic value of admission serum albumin levels in patients with head injury9 Supariasa, IDN., Bachyar B., & Ibnu F. (2012). Penilaian Status Gizi.

Reagen yang digunakan dalam pemeriksaan albumin, ditujukan untuk menentukan

bnyaknya jumlah albumin dalam serum manusia dan plasma pada kedua system baik

manual dan system otomatis. Prinsipnya yaitu berdasarkan pada metode Daumas et

al4 dimana albumin mengikat BCG sehingga menyebabkan perubahan dalam

penyerapan spectrum pencelupan. Penceluan dan pembentukan albumin kompleks

mempunyai puncak penyerapan pada 625 nm yang sangat proporsional pada

konsentrasi albumin dalam sampel10.

BAB III10 Sirajuddin, S., Nurhaedar J., & Rahayu I. (2012). Penuntun Praktikum.

METODOLOGI PERCOBAAN

III.1 Alat

Alat yang digunakan dalam percobaan ini adalah tabung sentrifius,

sentrifuge, rak tabung, cupet, pipet 20 µl, pipet 2,0 mL, dan Photometer

Analyzer.

III.2 Bahan

Bahan yang digunakan dalam percobaan ini adalah darah, serum jernih,

aquadest, standard albumin, dan reagen albumin.

III.3 Prosedur Percobaan

1. Diambil darah dari sampel (orang dewasa) dan dialirkan perlahan-lahan ke

dalam tabung sentrifuge untuk dipisahkan serumnya, didiamkan 5-10 menit

sebelum di sentrifuge.

2. Dimasukkan ke dalam sentrifuge dengan kecepatan 3000 rpm selama 10

menit (bertahap setiap 5 menit).

3. Diambil 3 buah cupet dan diberi tanda :

Cupet I untuk blank

Cupet II untuk standard

Cupet III untuk test

4. Diambil aquadest sebanyak 10 μl dengan menggunakan mikropipet 20 μl,

dimasukkan dalam cupet I. Ganti pipet.

5. Diambil standar albumin sebanyak 10 μl dengan menggunakan mikropipet

20 μl, dimasukkan dalam cupet II. Ganti pipet.

6. Diambil serum/plasma 10 μl dengan menggunakan pipet 20 μl, secara

perlahan-lahan agar darah yang menggumpal dibawahnya tidak ikut

terambil, kemudian dimasukkan dalam cupet III.

7. Diambil larutan kerja albumin1,0 mL dengan enggunakan Pipet 1,0 mL diisi

dalam cupet I. Ganti pipet.

8. Diambil larutan kerja albumin 1,0 mL dengan menggunakan Pipet 1,0 mL

dan diisi dalam Tabung I. Ganti pipet.

9. Diambil larutan kerja albumin 1,0 mL dengan menggunakan Pipet 1,0 mL

dan diisi dalam Tabung II

10. Diambil larutan kerja albumin 1,0 mL dengan menggunakan Pipet 1,0 mL

dan diisi dalam Tabung III. Ganti pipet.

Campur merata bahan pada tabung I dan II kemudian biarkan pada suhu

kamar selama 20 menit atau pada suhu 37oC selama 10 menit.

11. Dibaca absorbance test dan standar terhadap blank pada gelombang 570-620

nm dengan menggunakan photometer analyzer.

DAFTAR PUSTAKA

1. Murray, R. K. 2006. Plasma Protein & Immunoglobulins. In: Murray, R.K. Granner, D.K., Rodwel, V. W. (eds). Harper’s Illustrated Biochemistry. McGraw-Hill. New York.

2. Poedjiadi, Anna. 2009. Dasar-Dasar Biokimia. Jakarta : Penerbit Universitas Indonesia.

3. Almatsier, Sunita dkk. 2010. Gizi Seimbang dalam daur Kehidupan. Jakarta: PT Gramedia Pustaka Utama.

4. G. Hackner, Susan. 2011. Plasma and Albumin Transfusions: Incations and Controversies.

5. Jay R. Hoffman, Jay dan J. Falvo, Michael. 2004. Protein-Which is Best?

6. Hartono, Andry. 2006. Terapi Gizi & Diet Rumah Sakit, Jakarta : Penerbit Buku Kedokteran ECG.

7. Miyake, Motoko. 2011. Seven-year large cohort study for the association of serum albumin level and aging among community dwelling elderly.

8. Dhandapani, SS. 2011. Prognostic value of admission serum albumin levels in patients with head injury

9. Supariasa, IDN., Bachyar B., & Ibnu F. 2012. Penilaian Status Gizi. EGC: Jakarta

10. Sirajuddin, S., Nurhaedar J., & Rahayu I. (2012). Penuntun Praktikum. Universitas Hasanuddin: Makassar