Ada beberapa cara untuk mengukur atau menghitung mikroba yaitu dengan perhitungan jumlah sel, perhitungan massa sel secara langsung, dan pendugaan massa sel secara tak langsung. Perhitungan jumlah sel dapat dilakukan dengan 3 metode yaitu dengan hitungan mikroskopik, MPN (Most Probable Number), dan hitungan cawan. Dari ketiga metode tersebut metode hitungan cawan paling banyak dan mudah digunakan (Brady, 1999).

Ada berbagai macam cara untuk mengukur jumlah sel, antar lain dengan hitungan cawan (plate count), hitungan mikroskopis langsung (direct microscopic count) yang menggunakan mikroskop serta ruang hitung (haemositometer) atau secara elektonis dengan bantuan alat yang disebut penghitung coulter (coulter counter) (Zaraswati, 2004).

Pertumbuhan mikroorganisme yang membentuk koloni dapat dianggap bahwa setiap koloni yang tumbuh berasal dari satu sel, maka dengan menghitung jumlah koloni dapat diketahui penyebaran bakteri yang ada pada bahan. Jumlah mikroba pada suatu bahan dapat dihitung dengan berbagai macam cara, tergantung pada bahan dan jenis mikrobanya. Ada 2 macam cara perhitungan jumlah mikroba/bakteri, yaitu perhitungan secara langsung dan tidak langsung. Perhitungan jumlah mikroba secara langsung yaitu jumlah mikroba dihitung secara keseluruhan, baik yang mati atau yang hidup, sedangkan perhitungan jumlah miroba secara tidak langsung yaitu jumlah mikroba dihitung secara keseluruhan baik yang mati atau yang hidup atau hanya untuk menentukan jumlah mikroba yang hidup saja, ini tergantung cara-cara yang digunakan (Brady, 1999).

Isolasi gores merupakan metode isolasi dengan cara menggeser atau menggoreskan ujung jarum ose yang telah mengandung mikroorganisme dengan hati-hati di atas permukaan agar secara zig-zag yang dimulai dari dasar tabung menuju ke bagian atastabung. Dwidjoseputro, 2005. Tujuan

utama dari penggoresan ini adalah untuk menghasilkan koloni-koloni bakteri yang  terpisah

dengan baik dari suspensi sel yang pekat. Cara ini lebih menguntungkan bila  ditinjau dari

sudut ekonomi dan waktu, tapi memerlukan ketrampilan yang diperoleh  dengan latihan.

Penggoresan yang sempurna akan menghasilkan koloni yang terpisah.  Ada beberapa teknik

goresan, antara lain :

1. Goresan T

2. Goresan kuadran

3. Goresan radian

4. Goresan sinambung (Nuniek, 2001).Ada beberapa metode untuk memperoleh biakan murni dari suatu sampel tertentu. Dua

diantaranya yang paling digunakan adalah metode cawan gores (baik dengan cara

penggoresan kuadran maupun cara penyebaran) dan metode cawan tuang. Pada kegiatan

ini akan diperkenalkan metode cawan gores, yang dilakukan dengan menggoreskan

inokulum/sampel pada permukaan medium agar dengan cara penggoresan kuadran.

Tujuan :

untuk mempelajari cara perhitungan jumlah sel/spora mikroba baik secara

langsung maupun tidak langsung

untuk mempelajari teknik penggoresan .......

Alat : petroff hausser bakteria counter (phbc) , ose, pipet , gelas penutup, Mikroskop Petridish steril Tabung reaksi steril Pipet steril Lampu spirtus Mortil Stumper steril Colony counter Spatel streril Tabung durham steril Petridish steril Tabung reaksi Pipet streil

Bahan :

Suspensi bakteri Aquades Tanah sawah Tanah tegalan Tanah pasiran medium nutrient agar tegak Aquades Kapas Air minum yg berasal dari tanah/plesteran Medium laktosa broth Indikator btb Aquades steril Tabung reaksi steril Pipet steril

Brady, J. E. 1999. Kimia Universitas Asas dan Struktur. Binarupa Aksara. Bandung

Zaraswati. 2004. Dasar-Dasar Mikrobiologi. Universitas Hasanuddin. MakassarDwidjoseputro, D. 2005. Dasar-Dasar Mikrobiologi. Djambatan. Malang

Alat : jarum ose steril, bunsen, tabung reaksi, cawan petriBahan : mikroorganisme yang tumbuh, agar miring, kapas, aumiuim foilSkema : Mikroorganisme yg tumbuh dipilih sesuai kebutuhanMikroorganisme diambil dgn jarum ose sterilIkroorganisme digored di agar miring dlm tabung reaksi

Tabung reaksi ditutup dgn kapas dan aluminum foilDi masukan dalam inkubator

Mikroorganisme yang tumbuh dalam cawan petri yang telah diinkubasi dipilih sesuai dengan kebutuhan. Mikroorganisme diambil dengan menggunakan jarum ose. Jarum ose yang digunakan adalah jarum ose yang telah steril. Jarum ose disterilkan dengan cara memanaskan ujung jarum dengan bunsen. Mikroorganisme digores kedalam agar miring yang telah mengeras secara zig-zag dan hati-hati. Tabung reaksi yang telah digores dengan mikroorganisme ditutup dengan kapas dan aluminium foil dan diinkubasi hingga tumbuh isolat murni