informe de genetica (1) de jesus

8/11/2019 Informe de Genetica (1) de Jesus

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Laboratorio de Gentica

Informe de cruces en la drosophila melanogaster

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OBJETIVOS

Determinar las caractersticas morfolgicas externas de la Drosophila Melanogaster.

Comprobar las proporciones mendelianas. Comparar las diferencias anatmicas entre hembras y machos de la Drosophila

Melanogaster.

Identificar presencia de mutaciones en las muestras recogidas.

MARCO TERICO

Biologa de drosophila melanogaster

Fuente: http://explorerbiogen.blogspot.com/2011/06/drosophila-melanogaster-como-

modelo.html

Ciclo de vida

El desarrollo de la mosca de fruta presenta 2 fases:

la embrionaria y la post embrionaria. La secuencia

de duracin de los diferentes estadios en el ciclo

de vida es:

Huevo (1 da), larva de primer, segundo y tercer

estadio (1 da), pupa (4 a 5 das). As la duracin delciclo de vida completo es de 9 a 10 das en

condiciones controladas de temperatura y

humedad relativa. En su hbitat natural la duracin

del ciclo es ms variable como resultado de los

cambios climticos y la adversidad del ambiente.
http://explorerbiogen.blogspot.com/2011/06/drosophila-melanogaster-como-%20%20modelo.htmlhttp://explorerbiogen.blogspot.com/2011/06/drosophila-melanogaster-como-%20%20modelo.htmlhttp://explorerbiogen.blogspot.com/2011/06/drosophila-melanogaster-como-%20%20modelo.htmlhttp://explorerbiogen.blogspot.com/2011/06/drosophila-melanogaster-como-%20%20modelo.html


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Morfologa externa

Cabeza

En la estructura general de los insectos la cabeza se forma por 6 segmentos: 1)

labrum, 2) clipeus, 3) antenal-ocular, 4) mandibular, 5) maxilar y 6) labial.

En la cabeza se encuentran sobre todo los rganos de los sentidos.

Los ojos compuestos son relativamente grandes, estn separados con amplitud y

son del mismo tamao y forma en los dos sexos, presentan setas pequeas y

rgidas que surgen de cada ngulo de unin de los aproximadamente 750

omatidios.

Los tres ocelos se encuentran juntos en un arreglo triangular en la parte superiorde la cabeza.

Entre los ojos estn las antenas, que se encuentran muy cercanas entre s.

En la regin ventral de la cabeza se encuentran las partes bucales: el labrumy el

clipeus, que estn altamente modificadas con respecto al plan general de los

insectos ya que forman un aparato chupador o proboscis.

Trax

El trax se forma de tres segmentos: el protrax o segmento anterior, el

mesotrax o segmento medio y el metatrax o segmento posterior. Todos los

segmentos del trax de Drosophilase encuentran fusionados formando una caja

casi slida.

El protrax por s mismo es muy reducido y slo sirve de soporte para el primer

para de patas.

Se presenta un marcado alargamiento del mesotrax y una reduccin del

metatrax, por los que las alas mesotorcicas tienen la funcin total del vuelo,mientras que las alas metatorcicas se han reducido a los halterios (balancines)

que funcionan como rganos de equilibrio.


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Abdomen

La hembra muestra ser ms generalizada; el 8 segmento no tiene espirculos ni

esternito definido. Despus de ste slo se encuentra un pequeo segmento

donde aparece el ano, este segmento presenta una placa dorsal y una ventral; la

abertura genital se encuentra entre los segmentos 8 y 9.

En el macho la situacin es ms complicada. El 7 segmento desaparece

aparentemente y queda representado slo por su espirculo y el 8 slo por una

placa pequea en cada lado, el 9 est fuertemente modificado, muestra un

terguito muy grande y un esternito muy pequeo y el 10 se representa por un par

de placas situadas al lado del ano.


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Especies mutantes en Drosophila melanogaster

MUTANTE NOMENCLATURAPARTE DEL CUERPO

AFECTADA

Yellow Y Cuerpo amarillo

White eyes W Ojos blancosCarmine eyes Cm Ojos carmn

Vermillion wing V Ojos bermellnMiniatura wing M Alas miniatura

Forked bristies F Quetas en forma de tenedorBar eyes B Ojos en forma de barra

Helout Ho Alas extendidas en 45

Dumpy wing Dp Alas regordetasCinnabar eyes Cu Ojos color cinabrio

Vestigial wing Vg Alas vestigiales

Brown eyes Bw Ojos pardosSepia eyes Se Ojos color sepia

Hairless H Sin quetas o pelosEbony body E Cuerpo color bano

Eyeless Ey Ojos reducidos a la mitad

Jaunti JAlas con extremos doblados

hacia arriba

A continuacin presentaremos algunas caractersticas de las mutaciones con las que hemos

trabajado:

White w (I, 1.5): de origen espontneo. Descubierto por Morgan. Fenotipo: ojos color

blanco puro. Los ocelos, la cubierta de los testculos del adulto y los tubos de Malpighi de

las larvas son incoloros.


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Vestigial vg (II, 67.0): de origen espontneo. Descubierto por Morgan. Fenotipo: alas

reducidas a vestigios; por lo general dispuestas en ngulo recto respecto al cuerpo. Las

venas de las alas ligeramente visibles.

Miniatura m (I, 36.1): de origen espontneo, descubierto por Morgan. Su fenotipo: el

tamao de las alas est reducido. Alas de color gris oscuro y menos transparente que lo

normal.

Yellow y (I, 0.0): de origen espontneo. Descubierto por E.M Wallace. Fenotipo: cuerpo

color amarillo; pelos y cerdas cafs con puntas amarillas. Venas y pelos de las alas color

amarillo.


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PARTE EXPERIMENTAL

Preparacin de los tapones de algodn

Corte la gasa de tal manera que la abertura del frasco sea ms chica que el pedazo cortado.

Formar una bola de algodn un poco dura que abarque el dimetro de la boca del frasco; quedeber colocar sobre la gasa para luego recoger los extremos y envolver con la misma, probar

nuevamente en la boca del frasco de tal manera que ajuste perfectamente. Amarrar la gasa con

pabilo, cortar los sobrantes, tapar el frasco para su posterior esterilizacin.

Los frascos con sus respectivos tapones deben ser esterilizados. Para ello, lleve los frascos a la

estufa por 30 minutos a 100C. Dejar enfriar para agregar el medio de cultivo.

Preparacin del medio de cultivo

Existen diversas frmulas de preparar el medio de cultivo deDrosophila melanogaster nosotros

emplearemos las siguientes proporciones:

Agar (20 gr) Levadura (20 gr) Azcar (30 gr) Ac. Propinico (5 ml)

Para la preparacin se disuelve el azcar en 800 ml de agua corriente y se hace hervir, luego

agregar poco a poco el agar en tiras. La levadura se disuelve en restantes 200ml de agua tibia.

Cuando todo el agar esta disuelto agregue la solucin que contiene levadura lentamente y dejar

hervir por unos minutos, a esta solucin final agregue los 5ml de cido propinico. Agregue en los

frascos esterilizados de 1 a 1,5 cm de medio de cultivo. Dejar enfriar durante 24 horas.

Preparacin del eterizador

El eterizador es un frasco que deber tener el mismo dimetro de abertura que los que contienen

el medio de cultivo y cuyo tapn deber estar limpio y esterilizado. En este frasco se narcotizan a

las moscas con cloroformo para el recuento.


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Recomendaciones en general

En todo momento los frascos con medio, solamente se destapan para el recuento de las moscas,

no halar sobre ellos para evitar la contaminacin con las bacterias. Los frascos con medio de

cultivo no pueden ser expuestos directamente al sol. Todo frasco con medio de cultivo viejo o

contaminado debe ser inmediatamente separado y luego lavado. Al utilizar el eterizador no se

debe embeber el tapn en demasa.

CLCULOS

(1)MONOHIBRIDISMO

Frasco 1:

P: vg vg x ++

F1: todas heterocigotos de fenotipo silvestre +/vg

vg vg

+ +vg +vg

+ +vg +vg

En segundo frasco cruzamos la F1, es decir F1XF1, para obtener la F2, esquematizando tenemos:

+ vg+ ++ +vg

vg +vg vg vg

Obteniendo la siguiente proporcin genotpica 1(++):2(+vg):1(vg vg) y como consecuencia de esto

la siguiente proporcin fenotpica 3/4 silvestre(15) y (4) vestigial.


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Frasco 2:

P: ++ x vg vg

F1: todas heterocigotos de fenotipo silvestre +/vg (19)

+ +

vg +vg +vg

vg +vg +vg

En segundo frasco cruzamos la F1, es decir F1XF1, para obtener la F2, esquematizando tenemos:

+ vg

+ ++ +vg

vg +vg vg vg

Obteniendo la siguiente proporcin genotpica 1(++):2(+vg):1(vg vg) y como consecuencia de esto

la siguiente proporcin fenotpica 3/4 silvestre(25) y vestigial(10).

ANLISIS DEL CHI CUADRADO

Para el frasco 1:

Proporcinesperada

fenotipos Observado(o)

Esperado(e)

Desviacin(o-e)

Desviacin2(d2)

Desviacin2/esperado

(d2/e)

3/4 silvestre

1/4 vestigial

total X2=

Grados de libertad (gl)=1 P=%-%

Para el frasco 2:

Proporcinesperada


Esperado(e)

Desviacin(o-e)

Desviacin2(d2)

Desviacin2/esperado

(d2/e)

3/4 silvestre

1/4 vestigial

total X2=

Grados de libertad (gl)=1 P=%-%


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CHI CUADRADO DE HOMOGENEIDAD PARA FRASCO 1 DE MONOHIBRIDISMO (GRUPO: MARTES 4-

8 PM)

Fenotipos Silvestres Vestigiales Grado de libertad X2

1

Observado

Esperado

O-E

D2/E

53 18

14,69 x 10-3

53,25 17,75

-0,25 0,25

1,17 x 10-3 3,52 x 10-3

2

Observado

Esperado

O-E

D2/E

79 29

1 0,19781 27

-2 2

0,049 0,148

3

Observado

EsperadoO-E

D2/E

107 37

1 0,037108 36-1 1

9,26 x 10-3 0,028

Total 239 84 3 0,239


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DATOS ACUMULADOS

Observado 239 84

1 0,175Esperado 242,25 80,75

OE -3,25 3,25

D2/E 0,044 0,131

En la tabla anterior se han obtenido los resultados para el total de los individuales para el X 2

acumulado.

El X2de homogeneidad se determina entonces de la siguiente manera:

X2 Grados de libertad

X2total 0,239 3

X2ac 0,175 1

X2h 0,064 2

El X2h obtenido es 0,064, mayor del 5% (entre 90 95 %), entonces s pueden sumarse.


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CHI CUADRADO DE HOMOGENEIDAD PARA FRASCO 2 DE MONOHIBRIDISMO (GRUPO: MARTES 4-

8 PM)

Fenotipos Silvestres Vestigiales Grado de libertad X2

1

Observado

Esperado

O-E

D2/E

134 43

10,047

132,75 44,25

1,25 -1,25

0,012 0,035

2

Observado

Esperado

O-E

D2/E

99 28

1 0,59195,25 31,75

3,75 -3,75

0,148 0,443

3

Observado

EsperadoO-E

D2/E

122 48

1 0,749127,5 42,5-5,5 5,5

0,237 0,712

Total 355 119 3 1,387


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DATOS ACUMULADOS

Observado 355 119

1 2,81 x 10-3Esperado 355,5 118,5

OE -0,5 0,5

D2/E 7,03 x 10-4 2,11 x 10-3

En la tabla anterior se han obtenido los resultados para el total de los individuales para el X 2

acumulado.

El X2de homogeneidad se determina entonces de la siguiente manera:

X2 Grados de libertad

X2total 1,387 3

X2ac 2,81 x 10-3 1

X2h 1,384 2

El X2h obtenido es 1,384, mayor del 5% (entre el 30 50 %), entonces s pueden sumarse.


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(2) HERENCIA LIGADA AL SEXO

Frasco 1: P: XY x XWXW

F1: 1/2White, 1/2silvestres. Es la proporcin de los fenotipos esperados.

De acuerdo a esto, los datos fueron:

fenotipo totalSilvestre 16 16

White 10 10

Para F2, F1XF1, tenemos lo siguiente: F1: XWY x XXW

F2: 1/4White, 1/4 Silvestre, 1/4White y 1/4 silvestres. Estas son las proporciones

esperada de los cuatro fenotipos del frasco I.

En efecto, los datos de laboratorio fueron los siguientes:

fenotipo total

Silvestre 11 13 24

White 9 8 17

XW

(1/2)XW

(1/2)

X (1/2) XXW

(1/4)XXW

(1/4)

Y (1/2) XWY

(1/4)XWY

(1/4)

X

(1/2)

XW

(1/2)

XW

(1/2)XXW

(1/4)XWXW

(1/4)

Y

(1/2)XY

(1/4)XWY

(1/4)


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Frasco 2: P: XWY x XX (gametos)

F1: 1/2sivestres, 1/2silvestres. Luego, los datos de laboratorio fueron los siguientes:

fenotipo total

silvestre 23 15 38

Para F2: F1XF1, tenemos lo siguiente: F1: XY x X Xw

F2:1/4White, 1/4silvestres, 1/2silvestres; esto es la proporcin esperada de los dos

fenotipos del frasco II.

Los datos de laboratorio fueron los siguientes:

fenotipo total

Silvestre 21 45 66White 25 25

X

(1/2)

X

(1/2)

XW

(1/2)XXW

(1/4)XXW

(1/4)

Y

(1/2)XY

(1/4)XY

(1/4)

X

(1/2)XW

(1/2)

X(1/2)

XX(1/4)

XXW

(1/4)

Y

(1/2)X Y

(1/4)XWY

(1/4)


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ANLISIS DEL CHI CUADRADO:

Frasco 1:

Proporcinesperada


Esperado(e)

Desviacin(o-e)

Desviacin2(d2)

Desviacin2/esperado

(d2/e)

1/4 White 9 10,25 -1,25 1,56 0,15

1/4 Silvestre 11 10,25 0,75 0,56 0,05

1/4 White 8 10,25 -2,25 5,06 0,49

1/4 silvestres 13 10,25 2,75 7,56 0,74

Total 41 41 X2=1,43

Grado de libertad (gl)=3 P=50%-70%

Frasco 2:

Proporcinesperada


Esperado(e)

Desviacin(o-e)

Desviacin2(d2)

Desviacin2/esperado

(d2/e)

1/4 White 25 22,75 2,25 5,06 0,22

1/4 Silvestre 21 22,75 -1,75 3,06 0,13

1/2 silvestre 45 45,50 -0,50 0,25 0,01

total 91 91 X2=0,36

Grado de libertad (gl)=2 P=70%-90%


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(3) LIGAMIENTO

Se usarn moscas con las mutaciones Yellow y ( I, 0.0), White w (I,1.5) y Miniatura m (I, 36.1).

Pero por indicaciones del profesor, solo tomaremos en cuenta las mutaciones White (ojos) y

miniatura (alas).

Frasco I:

Macho silvestre x hembra whiteminiatura

P: ++/++ x ww/mm

F1: silvestres (18) y white miniatura (12)

F2:

wm Y

Gametos parentaleswm wm / wm (2) wm / Y (1)

++ ++ / wm (11) ++ / Y (8)

Gametosrecombinantes

w+ w+ / wm (7) w+ / Y (5)

+m +m / wm (6) +m / Y (4)Hembras (26) Machos (18)

Frasco 2:

Macho white-miniatura x hembra silvestre

P: ww/mm x ++/++

F1: silvestres (15) y silvestre (24)

F2:

++ Y

Gametos parentales++ ++ / ++ (17) ++ / Y (26)

wm wm / ++ (21) wm / Y (14)

Gametosrecombinantes

+w +w / ++ (1) +w / Y (4)

m+ m+ / ++ (1) m+ / Y (3)Hembras (40) Machos (47)


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ANALISIS DEL CHI CUADRADO

Frasco 1

Proporcinesperada


Esperado(e)

Desviacin(o-e)

Desviacin2(d2)

Desviacin2/esperado

(d2/e)

1/8 Whiteminiatura

1

1/8 silvestre 8

1/8 white 5

1/8 miniatura

4

1/8 whiteminiatura

2

1/8 silvestre 11

1/8 white 7

1/8 miniatura 6

Total X2=

Grado de libertad (gl)=7 P=%-%


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Frasco 2

% de Recombinacin a partir de la F2

% R frasco 1: (5+4) x100/18= 50

%R frasco 2: (4+3) x100/47= 14,89

Proporcinesperada


Esperado(e)

Desviacin(o-e)

Desviacin2(d2)

Desviacin2/esperado

(d2/e)

1/8 silvestre 26

1/8 whiteminiatura

14

1/8 white 4

1/8 miniatura 3

1/2 silvestre 40

Total 87 X2=

Grado de libertad (gl)=4 P=%-%


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Distancia entre los genes white (w) y miniatura (m)

Observando los datos de la F2: FRASCO 1 LIGAMIENTO.

MACHOS HEMBRAS

Parentales 1 28 11

Recombinantes 5 74 6

Distancia (ym) = # recombinantes/ total de moscas = 22/44 = 0,5

Observando los datos de la F2: FRASCO 2 LIGAMIENTO.

MACHOS HEMBRAS

Parentales 26 17

14 21

Recombinantes 4 1

3 1

Distancia (ym) = # recombinantes/ total de moscas = 9/87 = 0,103


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RESULTADOS

CONCLUSIONES

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