Efek samping Epoetin Alpha• Epoetin Alpha secara umum dapat di toleransi tubuh• Biasaya efek samping yang sering terjadi :– Hipertensi (pd pasien gagal ginjal kronis)– Sakit kepala– Arthralgia– Diare– Demam– Batuk– Gangguan pernafasan– Kemerahan– Edema (pd pasien kanker)

Perkembangan Hematopoietic Growth Factors

1950an Konsep modern mengenai pertumbuhan dan

diferensiasi sel hematopoetik dikembangkan,

para peneliti membuktikan

peranan sel-sel limpa dan sumsum

tulang dalam pembentukan

kembali jaringan hematopoetik dan

hewan-hewan yang diradiasi.

Tahun 1961, Till dan McCulloch

mampu menunjukkan bahwa tiap sel hematopoetik

dapat membentuk nodul (benjolan)

hematopoetik makroskopik pada limpa tikus yang

diradiasi,

1966, ditemukan peranan faktor pertumbuhan

dalam hematopoesis menggunakan tehnik kultur

sumsum tulang.

Kemudian tahun 1977 dilakukan penelitian yang

menyeluruh mengenai

terbentuknya eritropoetin

Perkembangan• Eritropoietin manusia atau yang lebih dikenal dengan

EPO merupakan glikoprotein hormon yang telah dipurifikasi sejak 3 dasawarsa yang lalu.

• Sejak tahun 1980 eritropoietin rekombinan menjadi komoditas utama dalam industri bioteknologi karena penjualannya meningkat dari tahun ke tahun hingga mencapai miliaran dolar (Sytkowsky 2004).

• Dalam situs resmi Glythera melaporkan bahwa penjualan protein terapeutik pada tahun 2008 menunjukkan bahwa hematopoietik menduduki urutan pertama, yaitu sebesar 23%.

• EPO adalah golongan hematopoietik faktor pertumbuhan pertama yang telah berhasil diklon.

EPO(Eritropoetin) rekombinan

EPO rekombinan telah tersedia dan digunakan untuk pengobatan klinis pada penderita anemia yang disebabkan oleh kanker, infeksi human immunodeficiency virus (HIV), sindrom meilodisplastik, gagal ginjal, dan transplantasi sumsum tulang.

Terapi dengan EPO rekombinan dapat menurunkan kebutuhan transfusi darah pasien sehingga dapat mengurangi risiko penularan penyakit seperti hepatitis atau HIV

produksi EPO• Epogen ® adalah nama dagang Amgen (pionir EPO) untuk Epoetin

alfa , sebuah erythropoietin manusia rekombinan . Ini adalah hormon protein yang dihasilkan di ginjal.

• erythropoietin merangsang sel-sel progenitor yang ditemukan dalam sumsum tulang untuk membentuk eritrosit matang ( sel darah merah )

• Pasien dengan penyakit ginjal kronis sering tidak dapat membuat jumlah yang memadai dari erythropoietin untuk menjaga konsentrasi normal eritrosit dalam sirkulasi . Akibatnya, pasien ini biasanya kronis dan anemia berat , Dalam beberapa kasus , selain dialisis , pasien ini membutuhkan transfusi darah.

• Sayangnya , tubuh memproduksi erythropoietin dalam jumlah yang sangat kecil , sehingga tak terbayangkan untuk mengisolasi erythropoietin alami cukup untuk mengobati semua pasien dengan penyakit tersebut .

Oleh peneliti Amgen , awalnya diperoleh jumlah yang sangat kecil

dari erythropoietin manusia

Para ilmuwan menentukan urutan asam

amino di bagian molekul

erythropoietin .

Berbekal informasi urutan, mampu

merancang potongan-

potongan yang sangat pendek DNA , disebut

oligonukleotida yang mungkin cocok dengan urutan DNA

manusia

secara acak diklon ke bakteri .

Dgn menggunakan potongan-

potongan pendek DNA sebagai tag ,

untuk menemukan gen erythropoietin

dalam teknik autoradiografi

mengisolasi gen manusia untuk erythropoietin

kemudian mengkloning gen manusia ke dalam Chinese Hamster

Ovary cell line untuk produksi

Cell line ini terus digunakan saat ini

untuk produksi Epogen®

http://www.amgen.nl/english/about_biotechnology_recombinant_dna_technology.html

Indonesia

• Pusat Penelitian Bioteknologi LIPI telah berhasil mengekspresikan EPO rekombinan dalam sistem ragi P. pastoris dan telah berhasil membuktikan bahwa supernatan hasil fermentasi, mengandung EPO dengan teknik blot Western. Namun masih dalam tahap pengembangan purifikasi .

• Adi Santoso et al. 2012. EFFECT OF METHANOL INDUCTION AND INCUBATION TIME ON EXPRESSION OF HUMAN ERYTHROPOIETIN IN METHYLOTROPIC YEAST Pichia pastoris. LIPI Cibinong. Makara hal 29-34

Kesimpulan• Hematopoietic atau sel darah merupakan hal yg vital

dalam kehidupan karena berfungsi sebagai transport oksigen, imunitas dan pembekuan darah.

• Faktor pertumbuhan Hematopoietic :– Granulocyte colony stimulating factor (G-CSF)– Granulocyte macrophage colony stimulating factor (GM-

CSF)– Eritropoietin (EPO)– Macrophage colony stimulating factor– Interleukin-3 (IL-3)– Fusion protein antara (GM-CSF) & (IL-3)– Trombopoietin– Stem cell factor