EFEK ANTISEPTIK BERBAGAI MERK HAND

SANITIZER TERHADAP BAKTERI Staphylococcus aureus

Laporan penelitian diajukan sebagai salah satu syarat untuk

memperoleh gelar SARJANA KEDOKTERAN

OLEH

IZKAR RAMADHAN

NIM : 1110103000008

PROGRAM STUDI PENDIDIKAN DOKTER

FAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU KESEHATAN

UNIVERSITAS ISLAM NEGERI SYARIF HIDAYATULLAH

JAKARTA

1434H/2013 M

LEMBAR PERNYATAAN KEASLIAN KARYA

Dengan ini saya menyatakan bahwa :

1. Laporan penelitian ini merupakan hasil karya asli yang saya ajukan untuk memenuhi

salah satu syarat memperoleh gelar sarjana kedokteran di UIN Syarif Hidayatullah

Jakarta.

Semua sumber yang saya gunakan dalam penulisan ini telah saya canfumkan sesuai

dengan ketentuan yang berlalar di UIN Syarif Hidayatullah Jakarta.

Jika di kemudian hari terbukti bahwa karya ini bukan karya asli saya atau merupakan

hasil jiplakan dari karya orang lain, maka saya bersedia menerima sanksi yang

berlaku di UIN Syarif Hidayatullah Jakarta.

3.

I

'ii'I"

EFEK AI\ITISEPTIK BERBAGAI MERK HAND SANITIZERTERIIADAP BAKTDNI Staphyloc occ us aureus

Laporan Penelitian Diajukan kepada Program Snrdi Pendidikan Dolcter, FakultasKedokteran dan Ilmu Kesehatan untuk Memenuhi Persyaratan Memperoleh Gelar

Sarjana Kedokteran (S.KeO

Oleh

Izkar Ramadhan

NIM: 1110103000008

Pembimbing I

rB*"dr. Intan Keumala Dewi, SpMK.

Pembimbing II

<WRatna Pelawati, S.Kp, M.Biomed

PROGRAM STUDI PENDIDIKAI\ DOKTDR

FAKI]LTAS KEDOKTERAN DAI\ ILMU KE,SEHATA}I

UIN SYARIF HIDAYATULLAH

JAKARTA

7434H/ 2013 M

PENGESAIIAIY PATIITIA UJIANL,aporan penelitian berjudul EFEK Ai\rrrsEprlK BERBAGAT MERK HANDSANITIZER TERIIADAP BAI(TERI Staphylococcus aureus yang diajukan olehl** Ramadhan (NIM : 1110103000008), telah diujil@n dalam-siding ii rukrltu,Kedokteran dan Ilmu Kesehatan pada September 20t3. Iaporan peneli-tian ini telahditerima sebagai salah_satu syarat memperoleh gelar Sarjana Kedokieran (S.Ked) padaProgram studi Pendidikan Dokter'

ciputat, 9 septembe r 2013

Penguji 2

UoJrd-dr. Dyah Ayu Woro, M.Biomed

Kaprodi PSPD FKIK UIN SH Jakarta

Ketua Sidang

@qdidr. Intan k"umula

Dewi, SpMK

DEWA}I PENGUJI

Pembimbing 1

tW*^rdr.,intan rrlo*"ru

Dewi, SpMK

l//''

, S.Si, M.Biomed

PIMPINAN FAKULTAS

Pembimbing 2

Ratna Pelawati, S.Kp,M.Biomed

Rr.Ayu ,rH

Dekan FKIK UIN SH Jakarta

lv

Prof. Dr (hc). dr. M.IC Tadjudin SpAnd

V

KATA PENGANTAR

Bismillahirrahmanirrahim.

Assalamu’alaikum Warahmatullahi Wabarakatuh.

Segala puji bagi Allah SWT yang telah memberikan berbagai macam nikmat dan

karunia-Nya, sehingga dengan nikmat dan karunia yang telah diberikan dapat

menyelesaikan penelitian ini, sebagai syarat mendapatkan Gelar Sarjana Kedokteran

(S.Ked). Sepanjang perjalanan penelitian terdapat berbagai macam halangan, cobaan,

dan kesulitan yang didapatkan, namun semua ini Alhamdulillah sudah dilewati dengan

bantuan, bimbingan dan support dari berbagai pihak. Karena itu saya sebagai peneliti

mengucapkan terima kasih kepada :

1. Prof. DR. ( hc ) dr. M.K. Tadjudin, Sp. And sebagai Dekan FKIK UIN Syarif

Hidayatullah Jakarta yang selalu membimbing seluruh mahasiswa FKIK UIN dan

memberikan kesempatan kepada saya untuk menempuh pendidikan di Program Studi

Pendidikan Dokter FKIK UIN Syarif Hidayatullah Jakarta.

2. dr. Witri Ardini, M.Gizi, SpGK sebagai Ketua Program Studi dan untuk seluruh dosen

Program Studi Pendidikan Dokter FKIK UIN Syarif Hidayatullah Jakarta yang selalu

membimbing serta memberikan ilmu kepada saya selama menjalani masa pendidikan di

Program Studi Pendidikan Dokter FKIK UIN Syarif Hidayatullah Jakarta.

3. dr. Intan Keumala Dewi, SpMK dan Ratna Pelawati, S.Kep, M.Biomed sebagai

pembimbing yang selalu memeberi arahan yang baik dan menemani saya

menyelesaikan penelitian ini.

4. Seluruh anggota keluarga saya yang selalu memberikan dukungan dari semua aspek

untuk menyelesaikan tugas penelitian ini.

5. Ayu Budi lestari, sebagai teman yang memberikan inspirasi untuk menyelesaikan dan

menyempurnakan dari semua kegiatan penelitian. Yahya Kholid, Latansa Dina, Dhea

Rachmawati dan Nadia Entus sebagai teman kelompok riset yang telah membantu dan

memberikan dukungan moril.

6. Ibu novi, Ibu Yuliati, S.Si, M.Biomed, Angga Maulana Ibrahim, Aida Julia Ulfah,

Karlina Sari Sujana, Rina Karin, Nida khofiah, dan Shidqa Hanif yang telah membantu

VI

dalam proses pengambilan data di laboratorium mikrobiologi FKIK UIN Syarif

Hidayatullah.

7. Naparudin, teman yang telah membantu menyelesaikan laporan penelitian.

8. Semua mahasiswa Program Studi Pendidikan Dokter angkatan 2010 yang memberikan

berbagai motivasi untuk terus maju dan membuat saya selalu tersenyum dalam

menyelesaikan pendidikan dokter.

Demikian laporan ini saya buat, semoga bermanfaat bagi saya dan semua yang

membaca. Semua kritik dan saran yang disampaikan sangat diharapkan, untuk

menyempurnakan penelitian ini.

Ciputat, September 2013

Penulis

VII

ABSTRAK

Izkar Ramadhan. Program Studi Pendidikan Dokter Universitas Islam Negeri

Syarif Hidayatullah Jakarta. Efek Hambat Berbagai Macam Hand Sanitizer

Terhadap Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus aureus. 2013.

Infeksi adalah penyakit penyebab kematian utama setelah penyakit gangguan

kardiovaskuler. Cuci tangan adalah salah satu cara untuk menjaga hegienitas tangan dan

mencegah dari penyebaran infeksi. Staphylococcus aureus adalah patogen utama pada

manusia dan salah satu bakteri tersering yang ada di telapak tangan. Baru-baru ini

ditemukan cara terbaru untuk mencuci tangan yang lebih praktis, cepat, dan tanpa

menggunakan air yaitu dengan hand sanitizer. Hand sanitizer memiliki bahan

antimikroba dan menurut beberapa penelitian pemakaian produk hand sanitizer dapat

menurunkan angka kematian yang disebabkan oleh penyakit yang disebarkan melalui

telapak tangan. Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui aktivitas antimikroba pada

berbagai hand sanitizer yang mudah didapatkan di pasaran dalam menghambat

pertumbuhan Staphylococcus aureus. Pengujian sifat antimikroba ini dilakukan dengan

menggunakan metode disc diffusion, yaitu dengan menginokulasi kertas cakram disc di

atas agar Muller Hillton Agar yang telah dibiakkan bakteri Staphylococcus aureus.

Hand sanitizer yang diuji berjumlah Sembilan buah. Uji hipotesis yang digunakan

adalah uji Kruskall-Wallis dan di dapatkan p<0.05 yang menunjukkan bermaknanya uji

ini dengan ditemukannya lima buah hand sanitizer yang membentuk zona hambat.

Kata kunci: Hand sanitizer, Staphylococcus aureus, Difus Cakram

ABSTRACT

Izkar Ramadhan. Medical Education Study Program, Faculty of Medicine and

Health Sciences, State Islamic University Syarif Hidayatullah Jakarta. Effect of

Inhibition of Various Hand Sanitizer on The Growth of Staphylococcus aureus

Bacteria. 2013

Infection is the primary cause of death besides cardiovascular disease. Hand washing is

one the way to maintain hand hygiene and also prevent the transmission of infection.

Staphylococcus aureus is the primary pathogen in humans and is one of the bacteria

most found on palms of the hands. Recently, a new way of hand washing and much

practical, faster and without water by using hand sanitizers was introduced. Hand

sanitizer contains an antimicrobal effect. According to some studies done before, using

hand sanitizers can decrease the number of deaths caused by diseases that is transmitted

via hands. This study is done to find out the antimicrobial activity of various hand

sanitizers that can be easily obtained in the market towards the inhibition of

Staphylococcus aureus growth. The test used in this study is done by using disc

diffusion method by inoculating disc on top of muller Hilton agar which already has

Staphylococcus aureus on it. A total of 9 hand sanitizers was tested. Hypothesis test

used in this study is kruskall-wallis tes and p value <0.05 was obtained. There was

significancy that is shown by five hand sanitizers that made a inhibition zone.

Keyword : Hand sanitizer, Staphylococcus aureus, disc diffusion

VIII

DAFTAR ISI

Halaman

LEMBAR PERNYATAAN KEASLIAN KARYA .............................................. ii

LEMBAR PERSETUJUAN PEMBIMBING ...................................................... iii

LEMBAR PENGESAHAN PANITIAN UJIAN ................................................. iv

KATA PENGANTAR ............................................................................................ v

ABSTRAK .............................................................................................................. vii

BAB I PENDAHULUAN ....................................................................................... 1

1.1 Latar Belakang .............................................................................................. 1

1.2 Rumusan Masalah ......................................................................................... 1

1.3 Tujuan Penelitian .......................................................................................... 1

1.4 Manfaat Penelitian ........................................................................................ 2

BAB II TINJAUAN PUSTAKA ............................................................................ 3

2.1 Antimikroba ................................................................................................... 3

2.2 Imunologi Infeksi Bakteri ............................................................................. 5

2.3 Flora Normal Kulit ....................................................................................... 7

2.4 Staphylococcus aureus ................................................................................. 8

2.5 Hand sanitizer ............................................................................................... 11

2.6 Pengujian Antimikroba ................................................................................. 13

2.7 Kerangka Teori ............................................................................................. 15

2.8 Kerangka Konsep ......................................................................................... 15

2.9 Definisi Operasional ..................................................................................... 15

BAB III METODOLOGI PENILITIAN ............................................................ 17

3.1 Desain Penelitian .......................................................................................... 17

3.2 Waktu dan Tempat Penelitian ....................................................................... 17

3.3 Bahan yang Diuji ........................................................................................... 17

3.4 Sampel Bakteri ............................................................................................. 17

3.5 Identifikasi Variabel ..................................................................................... 17

IX

3.6 Alat dan Bahan Penelitian ............................................................................ 17

3.7 Alur Penelitian .............................................................................................. 18

3.8 Cara Kerja Penelitian .................................................................................... 18

3.9 Analisis Data ................................................................................................. 19

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN .............................................................. 21

4.1 Hasil .............................................................................................................. 21

4.1.1 Komposisi Bahan Aktif Hand sanitizer ............................................... 21

4.1.2 Efek Hambat Hand Sanitizer Terhadap Pertumbuhan Bakteri

Staphylococus aureus .......................................................................... 22

4.1.3 Hasil Uji Statistik ................................................................................. 24

4.2 Pembahasan .................................................................................................. 25

BAB V SIMPULAN DAN SARAN ...................................................................... 28

5.1 Simpulan ....................................................................................................... 28

5.2 Saran ............................................................................................................. 28

DAFTAR PUSTAKA ............................................................................................ 29

LAMPIRAN ........................................................................................................... 32

X

DAFTAR TABEL

Halaman

Tabel 2.1 Contoh Biosida ........................................................................................ 3

Tabel 2.2 Flora Normal Kulit .................................................................................. 8

Tabel 2.3 Klasifikasi Respon Hambatan Pertumbuhan Bakteri .............................. 13

Tabel 2.4 Definisi Operasional ............................................................................... 16

Tabel 4.1 Konsentrasi Bahan Aktif Hand sanitizer yang Diuji .............................. 21

Tabel 4.2 Hasil Uji Kruskall-Wallis ........................................................................ 24

Tabel 4.3 Hasil Uji Man Whitney ........................................................................... 25

XI

DAFTAR GAMBAR

Halaman

Gambar 2.1 Aktivitas Imunologi Bakteri Ekstraseluler .......................................... 7

Gambar 2.2 Pembiakkan Staphylococcus aureus ................................................... 9

Gambar 2.3 Protein Permukaan Staphylococus aureus .......................................... 10

Gambar 2.4 Patogenenis Infeksi Staphylococcus aureus ........................................ 11

Gambar 4.1 Hand sanitizer yang Diuji .................................................................. 21

Gambar 4.2 Hambatan Pertumbuhan Bakteri Staphylococus aureus .................... 22

Gambar 4.3 Hasil Uji Efek Antimikroba Hand sanitizer Terhadap Pertumbuhan

Staphylococcus aureus ........................................................................ 23

XII

DAFTAR BAGAN

Halaman

Bagan 2.1 Kerangka Teori ...................................................................................... 15

Bagan 2.2 Kerangka Konsep ................................................................................... 15

Bagan 3.1 Alur Penelitian ....................................................................................... 18

XIII

DAFTAR LAMPIRAN

Halaman

Lampiran 1. Hasil Uji Statistik ....................................................................... 32

Lampiran 2. Alat dan Bahan .......................................................................... 47

Lampiran 3. Riwayat Penulis ......................................................................... 49

1

BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Cuci tangan adalah sebuah kegiatan sederhana yang bermaksud untuk

menghilangkan kotoran dan meminimalisir jumlah kuman yang ada di tangan dan

telapak tangan dengan menggunakan air dan suatu zat tambahan, dimana zat tersebut

dapat berupa antiseptik atau yang lainya.1

Pada sebuah penelitian menunjukkan bahwa dengan cuci tangan dapat

menurunkan kuman sekitar 58 % pada telapak tangan. Penurunan angka yang nyata

ini sangat berkaitan erat dengan kesehatan individu. Seperti pada penelitian dari

Dorson pada tahun 2000 menyatakan bahwa dengan cuci tangan dapat menurunkan

angka kematian satu juta pertahun yang disebabkan diare.2

Seiring dengan perkembangan zaman, mencuci tangan terlihat lebih praktis yaitu

dengan menggunakan suatu cairan atau gel antiseptik yang bisa digunakan dimana

saja dan kapan saja tanpa harus membilasnya dengan air, cairan atau gel antiseptik ini

disebut “Hand sanitizer”.2

Hand sanitizer adalah zat antiseptik yang di dalamnya terdapat alkohol dengan

persentase 60-95 %. 4,5 Selain alkohol, hand sanitizer mengandung bahan-bahan

antibakterial seperti triclosan, glycerol atau agen antimikroba lainnya.3,4

Staphylococcus aureus adalah bakteri Gram positif mikrokokus yang sering

dianggap sebagai patogen utama bagi manusia.5 Selain sangat patogen Staphylococcus

aureus merupakan bakteri yang sering ditemukan pada telapak tangan. Sebuah

penelitian sebelumnya dari Indian Journal of Public Health yang menjelaskan

prevalensi bakteri yang ada di tangan, menunjukkan hasil bahwa Staphylococcus

aureus adalah bakteri yang sering ditemukan pada telapak tangan.6,7

Berdasarkan penjelasan diatas, maka penelitian ini dilakukan untuk mengetahui

daya antimikroba dari berbagai hand sanitizer terhadap bakteri Staphylococcus aureus

dan membandingkannya terhadap berbagai merk dagang yang banyak ditemukan.

1

2

1.2 Rumusan Masalah

Berdasarkan uraian latar belakang di atas, rumusan masalah pada

penelitian ini adalah bagaimana efek antiseptik berbagai merk hand sanitizer yang

sering ditemukan di Indonesia terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus?

1.3 Tujuan Penelitian

1.3.1 Tujuan umum

Mengetahui adanya efek antiseptik hand sanitizer terhadap pertumbuhan bakteri

Staphylococcus aureus.

1.3.2 Tujuan Khusus

Mengetahui efek antiseptik berbagai merk hand sanitizer yang tersebar di Indonesia

dalam menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus.

1.3.3 Manfaat penelitian

a. Bagi Peneliti

- Menambah pengetahuan Penulis dalam menerapkan ilmu yang diperoleh selama

menjalani perkuliahan.

- Mempelajari metodologi dalam pembuatan suatu penelitian

- Menambah pengetahuan tentang pemakaian hand sanitizer dan bagaimana

efeknya terhadap bakteri Staphylococcus aureus

- Mengasah keterampilan bekerja di laboratorium

b. Bagi Institusi

- Menambah informasi dan literatur mengenai keilmuan mikrobiologi.

c. Bagi Keilmuan

- Dapat memberikan informasi mengenai efek antiseptik hand sanitizer terhadap

pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus.

- Dapat dijadikan sumber referensi bagi praktisi lain yang tertarik dalam penelitian

mikrobiologi yang sesuai.

d. Bagi Sosial

- Memberikan informasi tentang ada atau tidaknya efek hand sanitizer dalam

menghambat pertumbuhan kuman tersering di telapak tangan, yaitu

Staphylococcus aureus.

3

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Antimikroba

Antimikroba adalah zat atau substansi pembasmi mikroba, khususnya

mikroba yang merugikan. Antimikroba pada dasarnya memiliki dua mekanisme yaitu

Bakteriostatik (melemahkan bakteri) dan Bakterisida (membunuh bakteri), namun

secara terperinci mekanisme agen antimikroba memiliki beberapa mekanisme, yaitu

mengganggu metabolisme sel mikroba, menghambat sintesis dinding mikroba,

mengganggu permeabilitas membran sel mikroba, menghambat sintesis protein sel

mikroba, dan merusak asam nukleat sel mikroba.8,9

Agen antimikroba memiliki kandungan “biosida”, yaitu suatu zat kimia yang

mempunyai efek sebagai anti mikroba.5 (table 2.1)

Tabel 2.1 Contoh Biosida

Agen Penggunaan

Alkohol

Etanol

Isopropanol

Aldehid

Glutaraldehid

Formaldehid

Biguanid

Khlorheksidin

Bisfenol

Triclosan

Heksaklorofen

Bahan penghasil

halogen

Senyawa Klorin

Senyawa Iodine

Turunan Logam berat

Senyawa silver

Antiseptik, disinfektan, preservasi

Disinfektan, sterilisasi, preservasi

Antiseptik, antiplak, preservasi, disinfektan

Antiseptik, antiplak

Deodoran, Preservasi

Desinfektan, antiseptik

Preservasi, antiseptik

Disinfektan

3

4

Senyawa merkuri

Peroksigen

Hidrogen Peroksida

Ozon

Asam Peraseat

Fenol dan Kresol

Fenol

Kresol

Ammonion

Compounds

Setrimid

Benzalkonium

Klorida

Vapor Phase

Etilen Oksida

Formaldehid

Hidrogen Peroksida

Disinfektan, Sterilisasi

Disinfektan, preservasi

Disinfektan, antiseptik, preservasi

Sterilisasi, disinfektan

Sumber : Jawetz, Melnick, & Adelberg's . Medical Microbiology; 2007.

Berdasarkan mekanisme agen antimikroba berkerja, ada beberapa target dari

bagian tubuh mikroba dimana agen antimikroba berkerja, yaitu dinding sel mikroba,

permeabilitas membran mikroba, molekul protein, asam nukleat, enzim dan DNA atau

RNA.10,11

Target kerja antimikroba adalah sebagai berikut:

a. Dinding sel

Dinding sel adalah bagian terluar dari bakteri yang berfungsi untuk mempertahankan

struktur bentuk bakteri dan melindungi struktur lainnya yang terdapat di bawahnya.

Salah satu antimikroba yang menganggu aktivitas dinding sel adalah antibiotik

golongan penicillin.

b. Perubahan permeabilitas sel

Sifat permeabilitas pada bakteri di dapatkan dari struktur membran sel bakteri yang

bersifat selektif terhadap zat yang ada di luar tubuh bakteri, zat tersebut dapat

mendorong masuk ke dalam tubuh bakteri karena adanya tekanan osmotik.

5

c. Molekul protein dan asam nuklleat

Salah satu kerja antimikroba seperti fenolat memiliki kerja mendenaturasi protein dan

asam nukleat bakteri yang sangat penting digunakan sebagai bahan dasar DNA dan

RNA, dinding sel, dan struktur lainnya yang penting untuk kehidupan bakteri

d. Enzim

Seperti halnya pada manusia, bakteri memiliki beratus-ratus macam enzim yang

memiliki struktur berbeda begitupun dengan fungsinya yang berbeda. Salah satu

fungsinya yang sangat penting adalah untuk keperluan metabolisme bakteri, bila agen

antimikroba yang diberikan ternyata bersifat mengacaukan atau menghambat produksi

enzim tertentu maka jalur kerja yang menggunakan enzim tersebut terhambat.

e. DNA dan RNA

DNA atau RNA adalah pengatur keseluruhan dari kehidupan mikroba, antimikroba

atau antibiotik seperti tetrasiklin langsung menghambat pembentukkan DNA atau

RNA yang menyebabkan kematian pada mikroba tersebut.

2.2 Imunologi Infeksi Bakteri

Pada dasarnya sistem pertahanan terhadap infeksi yang disebabkan bakteri terbagi

menjadi dua kategori besar, yaitu sistem pertahanan bakteri ekstraseluler dan pertahanan

bakteri intraseluler.12,13

2.2.1 Sistem Pertahanan Bakteri Ekstraseluler

Bakteri ekstraseluler dapat hidup dan berkembang biak di luar sel penjamu misalnya

dalam sirkulasi, jaringan ikat dan rongga-rongga jaringan sepeti lumen saluran nafas

dan saluran cerna

2.2.1.1 Imunitas Non Spesifik

komponen utama sistem pertahanan nonspesifik terhadap infeksi bakteri adalah

komplemen, fagositosis, dan respon inflamasi. Awalnya bakteri yang masuk dapat

mengaktifkan beberpa sistem imun nonspesifik, diantaranya protein dan

peptidoglikan yang ada di permukaan bakteri dapat mengaktifkan fagosit dan

pengaktifan komplemen secara jalur alternatif atau jalur lektin ( seperti bakteri

yang menghasilkan manosa pada permukaanya. Pengaktifan fagosit ini dapat

langsung memusnahkan bakteri yang masuk dengan lansung memfagositosisnya,

sedangkan dengan pengaktifan komplemen dapat berlanjut ke kaskade

komplemen yang mengakibatkan lisis dan opsonisasi bakteri oleh komplemen

6

sehingga dapat dengan mudah difagositosis. Selain itu pengaktifan kedua sistem

pertahanan ini mengaktifkan respon inflamasi lokal sehingga monosit dan leukosit

lainnya datang ke lokasi tersebut. (Gambar 2.3 )

2.2.1.2 Imunitas Spesifik

imunitas spesifik pada bakteri ekstraselluler terdiri dari respon humoral dan

sitokin, pada respon humoral antibodi yang mengambil peran penting seperti

menetralkan toksin bakteri dan berperan sebagai pengaktifan komplemen jalur

klasik, dengan bantuan komplemen ini bakteri diopsonisasi oleh antibodi dan

komplemen, lalu hasil dari kaskade komplemen yang diaktifkan saperti C3a, C5a

dan C5b dapat mengaktifkan degranulasi sel mast dan kemotaksis dari fagosit.

Pada dasarnya Th yang sangat berperan disini, karena Th yang berfungsi sebagai

pelipat gandaan antibodi melalui persentasi antigen bakteri terhadap APC

(biasanya fagosit) yang memperkenalkan antigen bakteri ke sel T.

2.2.2 Sistem Pertahanan Bakteri Intraseluler

Bakteri intraseluler adalah bakteri yang dapat bersembunyi dari respon imun

ekstraseluler, biasanya bakteri ini dapat hidup dalam sel fagosit.

2.2.2.1 Imunitas Non Spesifik

Fagosit dan sel Natural Killer (NK) mengambil peran penting, fagosit bekerja

dengan memfagositosis bakteri dan dapat menghasilkan IL-12 sebagai

pengaktivasi sel NK, namun sebaliknya sel NK juga menghasilkan IFN-y yang

berfungsi sebagai pengaktifan makrofag dan menambah sifat fagositosis

makrofag.

2.2.2.2 Imunitas Spesifik

Pada imunitas intraseluller, CD4+ dan CD8+ yang berperan penting sebagai sistem

pertahanan tubuh. CD4+ aktif dengan peptide antigen MHC-II yang dapat

berdifrensiasi menjadi Th1 yang mengaktifkan fagosit dan Th2 yang mencegah

aktivasi fagosit.

Peptide antigen MHC-I mengaktifkan CD8+ yang akan berdiferensiasi menjadi T

toksik menghasilkan sitokin-sitokin yang bersifat toksik terhadap bakteri.

7

Gambar 2.1 Aktivitas Imunologi Bakteri Ekstraseluler

Sumber : Baratawidjaja, Karnen Garna. Imunologi dasar: 2012

2.3 Flora Normal Kulit

Flora normal dapat diartikan sebagai kumpulan mikroorganisme yang

berkumpul pada kulit dan mukosa pada manusia normal dan sehat. Pada dasarnya

kulit dan mukosa manusia selalu dihuni oleh berbagai macam mikroba yang dapat

dibagi menjadi dua klasifikasi, yaitu flora tetap dan flora sementara. Flora tetap

adalah mikroorganisme tertentu yang hidup di tempat tertentu di tubuh manusia yang

mengikuti perubahan pada manusia dan beradaptasi dengan lingkungan yang ada di

tubuh manusia yang biasanya terdapat hubungan umpan balik antara mikroba dan

manusia sedangkan Flora sementara yang juga disebut Flora transient adalah

8

mikroorganisme patogen ataupun tidak yang berasal dari lingkungan dan hanya hidup

beberapa saat di tubuh manusia. Jumlah flora sementara ini sangat tergantung dengan

flora tetap yang ada di tubuh manusia sebagai inhibitor kompetitifnya.1,5,14

Flora normal kulit adalah mikroorganisme yang hidup di kulit manusia,

namun karena kulit adalah lapisan terluar dari tubuh manusia memungkinkan kulit

cenderung berisikan banyak flora sementara. Mikroorganisme yang sering ditemukan

pada kulit manusia diantaranya tercantum dalam tabel 2.2

Tabel 2.2 Flora Normal Kulit

Tempat Predileksi Mikroorganisme

Kulit

Staphylococcus epidermidis

Staphylococcus aureus (dalam jumlah kecil)

Spesies mirococcus

Spesies neissera non patogen

Streptococcus Alpha-hemolytic, non hemolytic

Diptheroids

Spesies Propionbacterium

Spesies Peptostreptococcus

Dan yang lainnya (candida, acinobacter dll)

Sumber : Sumber : Jawetz, Melnick, & Adelberg's . Medical Microbiology; 2007.

Faktor-faktor yang sangat berperan untuk menghilangkan flora sementara di

kulit ialah pH rendah, asam lemak sebasea, lisozim, pada flora tetap, ia sudah

beradaptasi sehingga bila terdapat pH rendah, asam lemak dan lisozim flora tetap

masih dapat hidup, berbeda dengan flora sementara yang belum beradaptasi.5,14

2.4 Staphylococcus aureus

Staphylococcus adalah suatu nama marga dari bakteri yang berbentuk bulat

(kokus), hidup secara berkoloni tak beraturan yang menyerupai buah anggur dan

memiliki sifat katalase yang membedakannya dengan marga Streptokokus.

Stafilokokus terbagi menjadi 32 spesies berdasarkan komposisi DNA, namun hanya

14 spesies yang hidup pada tubuh manusia. Staphylococcus aureus merupakan satu-

9

satunya spesies yang menghasilkan enzim koagulase dan membedakannya dengan 14

spesies lainnya.1,5

Sistematika Staphylococus aureus adalah sebagai berikut 5:

Divisi : Protophyta

Kelas : Schizomycetes

Bangsa : Eubacteriales

Suku : Micrococcaceae

Marga : Staphylococcus

Jenis : Staphylococcus aureus

Staphylococcus aureus adalah salah satu dari keluarga mikrokokus berbentuk

bulat (kokus) yang berdiameter 0.5 – 1.5 μm, bersifat Gram positif, amotil dan tidak

berspora. Bakteri ini hidup di suasana aerobik atau mikroaerofilik, tumbuh pada suhu

37 °C namun dalam membentuk pigmen yang terbaik dibutuhkan suhu kamar (20 –

35 °C). Pada biakan bakteri ini menghasilkan pigmen berwarna putih abu-abu sampai

kuning.5

Gambar 2.2 Pembiakan Staphylococcus aureus

Staphylococus aureus dapat tumbuh di berbagai macam biakan dan tahan

terhadap kondisi kering, panas (bakteri ini bertahan pada temperatur 50 oC selama 30

menit) dan natrium klorida 9 %. Hampir seluruh dinding sel bakteri ini terdiri dari

peptidoglikan yang dapat merangsang pengeluaran sitokin-sitokin proinflamasi pada

tubuh manusia. Di permukaan dinding sel tertanam protein permukaan yang

mengambil alih penting dalam sifat virulensi Staphylococus aureus , diantaranya yaitu

ligand-binding domain terdapat pada N terminal berfungsi sebagai penempelan

bakteri terhadap sel inang, Protein A yang mencegah proses fagositosis karena

memblokir salah satu ujung IgG, dan protein permukaan lainya yang membantu

10

dalam proses adhesi bakteri yang dikenal sebagai microbial surface components

recognizing adhesive matrix molecules (MSCRAMM).15,16

Gambar 2.3 Protein Permukaan Staphylococus aureus

Sumber : Lowy FD. Staphylococcus aureus Infection: 1998

Staphylococcus aureus merupakan patogen utama pada manusia, karena

mensekresikan beberapa toxin dan enzim yang berbahaya bagi manusia. Selain sangat

patogen bakteri ini terdapat dimana-mana seperti pada lesi manusia, benda-benda

yang terkontaminasi oleh lesi tersebut, saluran respirasi manusia dan kulit yang dapat

berpindah-pindah secara kontak langsung maupun melalui udara. Gejala yang

ditimbulkan dari infeksi dapat berupa peradangan lokal, nekrosis, dan pembentukan

abses. Pada penyebaran ke bagian tubuh lain melewati pembuluh getah bening dan

pembuluh darah.1 Infeksinya dapat berupa furunkel yang ringan pada kulit sampai

berupa suatu piemia yang fatal, serta keracunan makanan, dan toxic shock

syndrome.1,15

Penyakit yang disebabkan Staphylococcus aureus bermacam-macam dari yang

lokal di kulit, paru, mukosa sampai sistemik seperti sindrome syok toksik dan

keracunan makanan (gambar 2.4)

11

Gambar 2.4 Patogenenis Infeksi Staphylococcus aureus

Sumber : Baratawidjaja, Karnen Garna. Imunologi dasar: 2012

2.5 Hand sanitizer

Hand sanitizer adalah suatu cairan atau gel antiseptik yang digunakan untuk

mencuci tangan tanpa menggunakan air untuk membilasnya.2 Menurut food and drug

administration (FDA) Hand sanitizer dapat menghilangkan kuman kurang dari 30

detik. Berdasarkan penelitian sebelumnya membuktikan bahwa hand sanitizer efektif

untuk mengurangi penyakit saluran pencernaan.17,18,19,

CDC (Center for desease control) mengungkapkan bahwa pada dasarnya hand

sanitizer terbagi dua berdasarkan bahan aktif yang terkandung, yaitu hand sanitizer

dengan alkohol dan tanpa alkohol yang memiliki bahan aktif berupa agen antimikroba

lain yang biasa digunakan sebagai higenitas tangan yaitu Chlorhexidine,

Chloroxylenol, Hexachlorophene, Iodine and iodophors, Quaternary ammonium

compounds, dan Triclosan. Namun paling banyak ditemukan mengandung alkohol

dan triclosan.3,4,20,

Alkohol pada hand sanitizer biasanya diukur dengar skala ukuran “%”

terhadap volume air yang terkandung dengan kandungan alkohol yang sering

digunakan di hand sanitizer, yaitu etil alkohol, isopropil alkohol dan n-propanolol,

ketiga bahan ini sering digunakan sebagai bahan aktif di produk-produk pembersih

tangan karena bahan-bahan ini menunjukkan aktivitas antimikroba yang cepat dengan

spektrum yang luas melawan bakteri vegetatif, virus dan jamur, namun tidak bersifat

12

sporosidal.3,7 Kemampuan antimikroba dari alkohol ini adalah dengan mendenaturasi

protein mikroba dan aktifitas antimikroba ini optimal bila diencerkan dengan air

sekitar 60 – 95 %.3, 17,18,19,21

Alkohol memiliki kemampuan aktivitas bakteriosida yang baik terhadap Gram

positif dan Gram negatif termasuk juga MRSA(Methicilin Resistent of Staphylococcus

aureus), virus dan beberapa jamur. Tetapi alkohol tidak memiliki efek antimikroba

terhadap bakteri berspora dan efeknya sangat lemah terhadap non-enveloped (non-

lipophilic) viruses. 3,19,22,23

Aktivitas antimikroba pada alkohol berpengaruh pada beberapa faktor, yaitu

jenis alkohol yang digunakan, konsentrasi alkohol, waktu kontak, volume yang

digunakan, dan keadaan tangan yang sedang menggunakan. Menurut beberapa

penelitian menyatakan bahwa efek dari antimikroba etil etanol dengan isopropil

alkohol berbeda terhadap virus Hemofilus A, yaitu etil alkohol sudah biasa

memberikan efek antimikroba terhadap virus Hemofilus A dengan kadar 60 – 80 %

sedangkan isopropil alkohol pada kadar 70 – 90 %, selain itu volume alkohol 3 ml

lebih menunjukkan sifat antimikroba dibandingkan dengan volume alkohol 1 ml,

namun sampai sekarang belum ada kepastian mengenai berapa volume alkohol yang

efektif digunakan sebagai antimikroba. 3,4

Selain alkohol salah satu bahan aktif yang sering digunakan di dalam hand

sanitizer adalah triclosan. Triclosan adalah salah satu jenis bisfenol yang biasa

digunakan secara luas sebagai bahan aktif di sabun antiseptik atau beberapa produk

antiseptik lainnya, triclosan ini dipakai karena memiliki sifat bakteriostatik,

sporostatik dan bakterisidal (dengan kadar tertentu).7 Meneurut WHO triclosan

efektif dipakai dengan kadar 0.2 – 2 % karena dengan kadar itu triclosan memiliki

efek antimikroba dengan mekanisme menghambat enoyl ACP-reductases essential

enzymes yang berguna sebagai sistesis asam lemak bakteri.3 Namun triclosan lebih

efektif terhadap bakteri Gram positif dibandingkan Gram negatif, hampir tidak

memiliki efek pada bakteri Gram negatif seperi Pneumonia aeruginosa.3,23,24,25

Walaupun alkohol mempunyai efek antimikroba namun hanya bekerja pada

short acting bukan long acting, sehingga tidak berifat persisten. Menurut hasil

beberapa penelitian mengungkapkan bahwa pemakaian kombinasi alkohol dan

13

antimikroba lainnya seperti triclosan dan lainnya menyebabkan terciptanya sifat efek

antimikroba yang persisten.3,25

2.6 Pengujian Antimikroba

Pengujian antimikroba bertujuan untuk memperoleh suatu sistem

pengobatan yang efektif dan efisien dengan menentukan potensi dan kontrol kualitas

selama proses produksi senyawa antimikroba di pabrik, untuk menentukan

farmakokinetik obat pada hewan atau manusia, dan untuk memonitor dan mengontrol

kemotrapi obat. Pengujian antimikroba ini terdapat berbagai macam metode, namun

secara garis besar dibagi menjadi dua metode, yaitu metode difusi dan dilusi.5,26,27,28

2.6.1 Metode Difusi

2.6.1.1 Metode disc diffusion (Tes Kirby & Bauer).

Tes ini menggunakan piringan kertas cakram yang berisikan agen antimikroba

dan ditanam di atas agar berisikan pembiakan bakteri tertentu dan nantinya akan

diinkubasi selama 18 – 24 jam dengan suhu 37oC. Interpretasi dari uji ini akan

terbentuknya daerah bening yang tidak ditumbuhi oleh pembiakan bakteri di agar

yang disebut sebagai zona hambat, jika semakin besar zona hambat yang terbentuk,

maka semakin efektif agen antimikroba tersebut.5,26,27

Tabel 2.3 Klasifikasi Respon Hambatan Pertumbuhan Bakteri

Sumber : Seila I. Efek Ekstrak Daun Sirih Hijau (Piper betle L.) : 2009

2.6.1.2 Metode Lubang (Cup-plate technique),

Metode ini dilakukan dengan membuat lubang dan diisi dengan uji antimikroba

pada agar yang sudah diisikan biakan bakteri tertentu. Interpretasi dari uji ini dengan

melihat daerah bening yang terbentuk disekitar lubang.5,26,

2.6.1.3 Metode Parit (Dith-plath technique),

Pada metode ini antimikroba yang ingin diuiji diletakkan pada potongan agar

DIAMETER ZONA

TERANG

RESPON HAMBATAN

PERTUMBUHAN

> 20 MM Kuat

16-20 MM Sedang

10-15 MM Lemah

< 10 MM Tidak ada

14

yang dipotong secara membujur pada bagian tengah Petridis yang menyerupai parit.26

2.6.1.4 Gradient-Plate technique,

Pada metode ini konsentrasi agen antimikroba pada media agar yang akan

dicampurkan bervariasi menurut jenisnya. Awalnya media agar dicairkan dan

ditambahkan dengan larutan agen antimikroba yang ingin diuji, kemudian campuran

dituangkan ke dalam cawan petri dan diletakkan dengan posisi miring yang

selanjutnya dituangkan nutrisi kedua diatasnya. Plate diinkubasi selama 24 jam untuk

memungkinkan agen antimikroba berdifusi dan permukaan media mengering.

Mikroba uji (maksimal 6 macam) digoreskan pada arah mulai dari konsentrasi hingga

rendah, lalu hasil diperhitungkan sebagai panjang total pertumbuhan mikroorganisme

maksimum yang mungkin dibandingkan dengan panjang pertumbuhan hasil

goresan.26

2.6.2 Metode Dilusi

Metode dilusi dibedakan menjadi dua, yaitu dilusi cair (broth dilution) dan

dilusi padat (Solid dilution).

2.6.2.1 Metode Dilusi Cair

Metode ini mengukur kadar hambat minimum dan kadar bunuh minimum. Cara

yang dilakukan dengan membuat seri pengenceran agen antimikroba pada medium

cair yang ditambahkan dengan bakteri yang ingin diujikan. Larutan uji agen

antimikroba pada kadar terkecil yang terlihat jernih tanpa adanya pertumbuhan

mikroba itu, maka ditetapkan sebagai kadar hambat minimum. Namun larutan yang

ditetapkan sebagai kadar hambat minimum itu selanjutnya dikultur ulang pada media

cair tanpa penambahan bakteri yang diuji maupun agen antimikroba lalu diinkubasi

selama 18 – 24 jam. Media cair yang tetap jernih setelah inkubasi ditetapkan sebagai

kadar bunuh minimum.5,26

2.6.2.2 Metode Dilusi Padat

Metode ini sama dengan metode dilusi cair, perbedaanya hanya pada media

yang digunakan yaitu media padat (solid). 5,26,27,28

15

2.7 Kerangka Teori

Bagan 2.1 Kerangka Teori

2.8 Kerangka konsep

Bagan 2.2 Kerangka Konsep

mencegah

Penyebaran infeksi

Alkohol nonalkohol

Infeksi

Hand sanitizer Biakan bakteri Staphylococcus aureus

Terbentuk zona

hambat

tidak terbentuk

zona hambat

Melalui telapak tangan

Kebersihan tangan

Bakteri tersering ditemukan pada telapak tangan (Staphylococcus aureus)

Hand sanitizer

Pengukuran efek antimikroba

16

2.9 Definisi Operasional

Tabel 2.4 Definisi Operasional

No Variable Definisi

Operasional

Alat

Ukur

Hasil Ukur

1 Biakan bakteri

Staphylococcus

aureus

Bakteri

Staphylococcus

aureus yang

ditanam di

MHA dan

diinkubasi

selama 24

jam.23,26,27

Pertumbuhan

bakteri

2 Hand sanitizer Merk dagang

hand sanitizer

yang tersebar di

Indonesia

Hand sanitizer

yang

memberikan

efek hambat

pertumbuhan

staphylococcus

aureus

3 Zona Hambat Daerah bening

yang terbentuk

tanpa ada

pertumbuhan

dari bakteri

Staphylococcus

aureus. 26

Penggaris Diameter zona

hambat24

3 Kontrol positif Antibiotik yang

digunakan

(amoxicillin)18

Penggaris Diameter zona

hambat24

4 Kontrol

negative

Bahan non aktif

dari hand

sanitizer yaitu

aquades steril

Penggaris Diameter zona

hambat24

17

BAB III

METODOLOGI PENELITIAN

3.1 Desain Penelitian

Penelitian ini menggunakan metode ekperimental disc diffusion, untuk melihat

efek antimikroba hand sanitizer terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus

aureus.

3.2 Waktu dan Tempat Penelitian

Penelitian ini dilakukan pada bulan Januari 2013 sampai bulan Juli 2013 di

Laboratorium Mikrobiologi Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan UIN Syarif

Hidayatullah Jakarta.

3.3 Bahan yang Diuji

Berbagai merk hand sanitizer yang mudah ditemukan di Indonesia yang

mengandung alkohol atau antibakterial lain dan gabungan dari keduanya, yang dibeli

di pasar swalayan daerah Ciputat.

3.4 Sampel Bakteri

Bakteri Staphylococcus aureus diisolasi pada media MHA (Mueller-Hinton

Agar), dan diinkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam.

3.5 Identifikasi Variabel

3.5.1 Variabel Bebas

Sembilan merk dagang hand sanitizer yang mudah ditemukan di Indonesia, yaitu

hand sanitizer A, B, C, D, E, F, G, H, I.

3.5.2 Variabel Terikat

Pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus di media Mueller Hinton Agar,

diukur dengan diameter zona hambatan yang terbentuk dalam milimeter (mm).

17

18

3.6 Alat dan Bahan Penelitian

3.6.1 Alat Penelitian

Alat yang digunakan dalam penelitian ini yaitu : tabung reaksi, mikro pipet,

vortex, bunsen, korek api, ose, spatula besi, cawan petri, penggaris, rak tabung,

timbangan, autoclave, baki, alumunium foil, swab kapas, erlenmeyer, pengukur

waktu, inkubator, penggaris, cakram uji kosong, label, alat tulis, kamera, laminar air

flow, tisu, pinset, alkohol.

3.6.2 Bahan Penelitian

Bahan yang digunakan dalam penelitian ini yaitu media Mueller Hinton

Agar, NaCl, aquades steril sebagai kontrol negatif, biakan Staphylococcus aureus,

cakram uji kosong, cakram amoksilin sebagai kontrol positif, Mc farland 0.5 %,

hand sanitizer yang akan diujikan.

3.7 Alur Penelitian

Bagan 3.1 Alur Penelitian

Pengumpulan Hand sanitizer

Sterilisasi alat dan bahan

Pembuatan agar MHA dan penanaman

bakteri S.aureus di agar

Perendaman cakram pada Hand

sanitizer

Tahap pengujian pertumbuhan bakteri

Pengukuran zona terang yang terbentuk

19

3.8 Cara Kerja Penelitian

3.8.1 Tahap Persiapan

3.8.1.1 Sterilisasi Alat dan Bahan

Seluruh alat dan bahan yang akan digunakan disterilisasi di dalam

autoclave selama 30 menit pada suhu sebesar 121°C yang sebelumnya dicuci bersih,

dikeringkan dan dibungkus dengan kertas atau alumunium foil.

3.8.1.2 Pembuatan Media

Sebanyak 9 gram Mueller Hinton Agar ditimbang dan dimasukkan ke dalam

erlenmeyer lalu ditambahkan dengan aquades sampai menjadi 250 ml, serta

dipanaskan sambil diaduk sampai semua bahan larut dengan sempurna, kemudian

disterilkan dalam autoclave selama 100 menit dengan suhu 121°C.

3.8.1.3 Perkembang Biakan Bakteri

Pembuatan stok bakteri ini dilakukan untuk memperbanyak bakteri,

dengan cara menanamkan 1 ose biakan murni bakteri Staphylococcus aureus ke

dalam Mueller Hinton Agar, kemudian diinkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam di

dalam inkubator.

3.8.2 Tahap Pengujian

Bakteri diencerkan dengan mencampurkan 1 ose suspensi bakteri

Staphylococcus aureus ke dalam tabung reaksi yang telah berisi NaCl steril.

Kemudian dihomogenkan dengan menggunakan vortex dan kekeruhannya

distandarisasi dengan konsentrasi 0.5 Mc Farland agar jumlah bakteri memenuhi

syarat untuk uji kepekaan yaitu: 105–108/ml. Kemudian larutan bakteri dioleskan

pada media pertumbuhan Mueller Hinton Agar. Cakram uji kosong yang telah

direndam di dalam cairan hand sanitizer selama 15-45 menit lalu diletakkan di atas

permukaan agar di dalam laminar air flow. Lalu media diinkubasi ke dalam

inkubator. Inkubasi dilakukan pada suhu 37°C selama 24 jam, keesokan harinya

diukur diameter zona hambat (clear zone) yang terbentuk dengan sekala millimeter

(mm) dan dilakukan oleh tiga orang pemeriksa.

3.9 Analisis Data

Jenis Hipotesis yang diteliti merupakan jenis komparatif dengan variabel

kategorik-numerik (Skala numerik) lebih dari 2 kelompok dan tidak berpasangan,

karena yang diukur sebagai skala numerik, maka untuk uji hipotesis yang digunakan

20

adalah uji parametrik yaitu One Way Annova, namun uji hipotesis ini dilakukan bila

memenuhi syarat uji parametrik diantaranya data yang diperoleh berdistribusi normal

dan terdapat varians yang sama. Apabila data yang diperoleh tidak memenuhi syarat,

maka uji hipotesis yang dipakai adalah uji non parametric yaitu Kruska-Wallis, yang

akan dilanjutkan dengan uji posthock.

21

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Hasil

4.1.1 Komposisi Bahan aktif Hand sanitizer

Terdapat sembilan hand sanitizer yang diujikan, yaitu hand sanitizer A, B,

C, D, E, F, G, H, I

Gambar 4.1 Hand sanitizer yang Diuji

Dari kesembilan hand sanitizer ini memiliki kandungan bahan aktif alkohol

dan triklosan yang memiliki konsentrasi berbeda-beda yang menyebabkan

perbedaan efek antimikroba yang dihasilkan. (tabel 4.1)

Tabel 4.1 Konsentrasi Bahan Aktif Hand sanitizer yang Diuji

Hand sanitizer Akohol (%) Triklosan (%)

HS A

HS B

HS C

HS D

HS E

HS F

HS G

HS H

HS I

60

70

60

52

78

60

51

62

68

0.15

0.05

0.1

Tidak dicantumkan

Tidak dicantumkan

-

-

-

-

21

22

4.1.2 Efek Hambat Hand Sanitizer Terhadap Pertumbuhan Bakteri

Staphylococus aureus.

Dari hasil penelitian yang dilakukan dengan menggunakan metode disc

diffusion dan dilakukan secara triplo yaitu 3 kali berturut-turut didapatkan tidak

semua hand sanitizer memiliki efek antimikroba terhadap bakteri Staphylococus

aureus. Berdasarkan hasil ditemukan 5 dari 9 hand sanitizer yang ditemukan

memiliki efek hambat pertumbuhan Staphylococus aureus, yaitu hand sanitizer A,

B, C, D, E, F, G, H, I. Dari kelima merk hand sanitizer yang disebutkan didapatkan

bahwa merk dagang A memiliki efek hambat yang paling kuat dengan terbentuk

zona hambat dari ketiga kali percobaan dengan rata-rata sebesar 12.5 mm,

sedangkan hand sanitizer dengan merk dagang E hanya mempunyai nilai rata-rata

6 mm yang merupakan hasil terkecil zona hambat yang terbentuk (Gambar 4.1. dan

4.3)

Gambar 4.2 Hambatan Pertumbuhan Bakteri Staphylococus aureus

0

10

20

30

40

(-) I H G F E D C B A (+)

23

Gambar 4.3 Hasil Uji Efek Antimikroba Hand sanitizer Terhadap Pertumbuhan

Staphylococcus aureus

24

4.1.3 Hasil Uji Statistik

Dari data yang diperoleh menunjukkan distribusi data tidak normal dan

setelah ditransformasikan, distribusi data tetap tidak normal. Hal itu menandakan

bahwa data yang diperoleh tidak memenuhi syarat untuk menggunakan uji

parametrik berupa One-way ANOVA, maka sebagai gantinya digunakan uji

hipotesis alternatif (non parametrik) dari data komparatif tidak berpasangan lebih

dari dua kelompok yaitu Krusskall-Wallis (Tabel 4.1)

Tabel 4.2 Hasil Uji Kruskall-Wallis

Sampel

Jumlah

Zona hambat

Kontrol (-)

I

H

G

F

E

D

C

B

A

Kontrol (+)

8

3

3

3

3

3

3

3

3

3

8

0

0

0

0

0

6

8.3

9.3

11

12

32

P value

p=0.00

*keterangan : Semakin besar zona hambat yang terbentuk semakin besar efek yang

ditimbulkan dalam menghambat pertumbuhan Staphylococus aureus

Uji ini dikatakan bermakna bila nilai p<0.05. Pada hasil dari penelitian

ini didapatkan nilai p=0.00 (p<0.05) yang diartikan bahwa terdapat perbedaan

bermakna antara Hand sanitizer dengan efek hambat pertumbuhan bakteri

Staphylococus aureus.

25

Dari hasil uji Kruskal-Wallis didapatkan bahwa nilai p<0.05, maka selanjutnya

melakukan uji Man Whitney (bentuk uji post hock yang digunakan pada uji non

parametrik). Uji ini bertujuan untuk melihat mana saja hand sanitizer yang bermakna

menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus.

Tabel 4.3 Hasil Uji Man Whitney

hand sanitizer A B C D E F G H I Aquades Amoksilin

A

B

C

D

E

F

G

H

I

Aquades

Amoksilin

-

1.00

-

1.00

1.00

-

1.00

1.00

1.00

-

0.025

0.025

0.025

0.025

-

0.034

0.034

0.034

0.034

0.034

-

0.034

0.034

0.034

0.034

0.034

0.099

-

0.037

0.037

0.037

0.037

0.037

0.046

0.072

-

0.037

0.037

0.037

0.037

0.037

0.046

0.046

0.261

-

1.00

1.00

1.00

1.00

0.02*

0.02*

0.02*

0.02*

0.02*

-

0.00

0.07

0.07

0.07

0.07

0.07

0.07

0.07

0.08

0.08

0.00

-

Keterangan : *(p<0.05, yaitu terdapat perbedaan bermakna)

Berdasarkan hasil uji Man Whitney, membandingkan antara aquades (kontrol

negatif) dengan berbagai macam hand sanitizer yang diuji, didapatkan terdapat 5

hand sanitizer yang bernilai P<0.05, yaitu hand sanitizer A, B, C, D, E. Hal ini

menandakan bahwa 5 hand sanitizer tersebut memiliki perbedaan bermakna

terhadap aquades sebagai kontrol negatif, yang berarti terdapat 5 hand sanitizer

memiliki sifat menghambat pertumbuhan Staphylococcus aureus.

4.2 Pembahasan

Aktivitas antimikroba Hand sanitizer terhadap bakteri Staphylococus aureus

tergantung pada kandungan bahan aktif yang dipakai seperti alkohol, triclosan,

ammonion, iodine dan agen antimikroba lainnya yang digunakan untuk kebersihan

tangan. Namun kebanyakan Hand sanitizer yang tersebar di Indonesia mengandung

triclosan dan alkohol.3

Hasil dari penelitian ini didapatkan bahwa terdapat 5 merk dagang Hand

sanitizer yang memiliki efek menghambat pertumbuhan dari Staphylococus aureus

dan dari kelimanya merk dagang A yang didapatkan paling kuat menghambat

26

pertumbuhan bakteri Staphylococus aureus. Hal ini dikarenakan dari kandungan

Hand sanitizer A yang terdiri dari kombinasi dua bahan aktif agen antimikrobial

yaitu alkohol dan triclosan. Kandungan alkohol yang terdapat pada Hand sanitizer

ini memiliki kadar 60 % dan menurut suatu guideline berasal dari CDC menyatakan

bahwa dengan kadar 60 – 95 % dapat dipakai sebagai bahan aktif antimikrobial suatu

produk pembersih tangan. Kerja alkohol adalah mendenaturasi protein dinding sel

bakteri dan bersifat bakterisidal terhadap bakteri Gram positif, Gram negatif, virus

dan beberapa jamur.3, 17,20,21 Namun berdasarkan penelitian sebelumnya alkohol

hanya bersifat short acting tidak bersifat persisten, bahkan pada guideline WHO

menyatakan bahwa tangan sehabis didesinfektan oleh alkohol akan rentan terhadap

flora transient yang menyebar secara kontak langsung, untuk mengatasi hal tersebut

biasanya alkohol di kombinasikan dengan antimikroba lain yang bersifat persisten

seperti triclosan. Triclosan adalah biosida berasal dari bisfenol bekerja dengan

menghambat pembentukkan asam lemak yang dibentuk oleh mikroorganisme,

triclosan efektif terhadap kuman Gram positif dan tidak terlalu sensitif terhadap

Gram negatif dan pada dasarnya bersifat bakteriostatik namun pada kadar tertentu

biosida ini dapat juga bersifat sebagai bakterisida. Kadar yang dianjurkan untuk

triclosan menurut FDA (Food and Drug Administration) adalah 0.1 – 2 % namun

menurut sebuah jurnal penelitian efek triclosan terhadap stafilokokus menyatakan

bahwa hanya dengan kadar 0.0005% triclosan sudah memberi efek terhadap family

Staphylococcus. Pada hand sanitizer A didapatkan bahwa kadar triclosan dalam

kandungannya sebesar 0.15% hal itu menandakan kadar triclosan yang terkandung

mempunyai efek antimikroba yang efektif.3,24,29

Hand sanitizer selanjutnya yang terbentuk zona hambat terhadap pertumbuhan

bakteri Staphylococcus aureus adalah merk dagang B. Di dalam hand sanitizer ini

terkandung bahan aktif alkohol sebanyak 70 %, triclosan 0.05 %. Berdasarkan dari

komposisi bahan aktif yang terkandung, konsentrasi kandungan alkohol telah

memenuhi syarat yaitu dalam rentang yang telah ditentukan, namun konsentrasi

triclosan yang terkandung kurang dari rentang yang telah ditentukan, yaitu 0.1% -

2%. Pada kadar triklosan dibawah 0.1% hanya mempunyai efek bakteriostatik yang

menghambat pertumbuhan bakteri. 3,24,25

Hand sanitizer C memiliki bahan aktif alkohol 60 % dan Irgasan DP 300

0.1%. Irgasan DP 300 adalah analogi dari triclosan. Bila dibandingkan dengan

27

bahan aktif yang terdapat pada A, konsentrasi triclosan yang terkandung lebih

sedikit. Hal itu yang menyebabkan zona hambat yang terbentuk lebih kecil

dibandingkan A.29 Selain itu bila dibandingkan dengan hand sanitizer B, konsentrasi

alkohol yang terkandung pada hand sanitizer C lebih sedikit dibandingkan

handsanotozer B.

Hand sanitizer D dan E memiliki kandungan kombinasi dari alkohol dan

triclosan. Konsentrasi alkohol yang terkandung keduanya berbeda. Hand sanitizer D

memiliki kadar alkohol kurang dari 60 %, namun menghasilkan zona hambat lebih

dibandingkan hand sanitizer E. Hal ini mungkin disebabkan karena perbedaan

kandungan triclosan, yang kadarnya tidak diketahui. Karena semakin besar kadar

konsentrasi triclosan yang dipakai dan tidak melebihi 2 %, maka semakin kuat juga

efek antimikroba yang dihasilkan dan triclosan dapat bersifat bakterisidal yang

awalnya hanya bersifat bakteriostatik.3,29

Sedangkan, hand sanitizer yang tidak terbentuk zona hambat meliputi hand

sanitizer F, G, H, dan I. Hal ini didasari karena keempat hand sanitizer ini hanya

mengandung bahan aktif alkohol yang tidak bersifat persisten terhadap pertumbuhan

bakteri. Selain itu kadar alkohol di salah satu merk tidak memenuhi kadar efek

antimikroba yang biasa digunakan untuk kebersihan tangan, seperti hand sanitizer H

hanya memiliki kadar alkohol sebesar 51 % (kurang dari 60 – 95 %.) Hal ini

menandakan bahwa hand sanitizer tersebut tidak memiliki efek antimikroba untuk

membersihkan tangan sesuai ketentuan yang ada.3,23,24,29

28

BAB V

SIMPULAN DAN SARAN

5.1 Kesimpulan

Berdasarkan hasil penelitian yang dikerjakan, dapat disimpulkan;

1. Terdapatnya efek hambat hand sanitizer terhadap pertumbuhan Staphylococcus

aureus, namun tidak semua semua merk hand sanitizer.

2. Terdapat 5 merk dagang hand sanitizer yang memiliki efek antimikroba atau yang

menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus yaitu hand sanitizer A, B,

C, D, E. Sedangkan 4 merk dagang lainnya, hand sanitizer F, G, H dan I tidak

memiliki antimikroba terhadap Staphylococcus aureus

3. Semua merk dagang hand sanitizer yang membentuk zona hambat memliki

kandungan bahan aktif alkohol yang dikombinasikan dengan triclosan, sedangkan

yang tidak membentuk zona hambat hanya mengandung alkohol sebagai bahan aktif

yang bersifat antimikroba

5.2 Saran

1. Melakukan penelitian lanjutan dengan membandingkan efek antimikroba yang

terdapat pada hand sanitizer dengan bahan pembersih tangan lainnya.

2. Dilakukan penelitian lebih lanjut hand sanitizer lain yang memiliki agen antimikroba

lainnya yang memiliki pengaruh terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus

aureus.

3. Dilakukan penelitian selanjutnya secara invivo.

28

29

DAFTAR PUSTAKA

1. Soedarmo SSP, Gama H, Hadinegoro SRS, Satari HI. Buku Ajar Infeksi & Pediatri

Tropis. Edisi 2. Jakarta: Ikatan Dokter Anak Indonesia; 2012.

2. Rachmawati FJ, Triyana SY. Perbandingan Angka Kuman pada Cuci Tangan dengan Beberapa Standarisasi Pembersih Tangan di Lab Mikrobiologi. Logika. 2008; 26 - 31.

3. WHO. WHO Guidelines on Hand Hygiene in Healthcare (Advanced Draft). World

Health Organization 2005–2006; 27–41. April 2006. http://www.agreecollaboration.org/pdf/agreeinstrumentfinal.pdf. Di akses pada 8

Agustus 2013.

4. CDC. Hand Sanitizer Ingredients. 2009; http://www.hand-sanitizer-dispenser-review.com/hand-sanitizer- ingredients.htm. Diakses pada 9 Agustus 2013.

5. Brooks GF, Butel JS, Carroll KC, Morse SA. Jawetz, Melnick, & Adelberg's

Medical Microbiology. 24th

Ed. USA : Mc Graw Hill. 2007; 224 – 7.

6. Pretami, Heme anggika dkk. Identifikasi Mikroorganisme pada Tangan Tenaga Medis dan Paramedis di Unit Perinatologi Rumah Sakit Abdul Moeloek Bandar Lampung. Maret 2011. (belum diterbitkan)

7. Ray, Sandip Kumar dkk. A Study on Prevalence of Bacteria in The Hands of

Children and Their Perception on Hand Washing in Two Schools of Bangalore and Kolkata. Indian Journal of Public Health. Vol 55. 2011; 293 – 297.

http://www.ijph.in/article.asp?issn=0019557X;year=2011;volume=55;issue=4;spage=293;epage=297;aulast=Ray. Diakses pada 14 Agustus 2013.

8. Setawati, A. Farmakologi dan Terapi. Edisi 5. Jakarta : Departemen Farmakologi dan Terapeutik Fakultas Kedokteran UI. 2007.

9. Bull, Tony. R. Color Atlas of ENT Diagnosis. Edisi 4. New York: Thieme. 2003;

215-246.

10. Pelczar, M.J. E.S.Chan. Dasar-dasar Mikrobiologi .Edisi 2. Jakarta: Penerbit Universitas Indonesia. 1988.

11. Bertram G. Katzung, et al. Basic Clinical Pharmacology. Edisi 10. California:

Lange. 2005.

30

12. Baratawidjaja, Karnen Garna. Imunologi Dasar. Edisi 10. Jakarta : Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia. 2012

13. Weintraub, Andrej. Immunology of Bacterial Polysaccharide Antigens.

Carbohydrate Research 338. July 2003. www.elsevier.com/locate/carres. Di akses pada tanggal 13 Agustus 2013

14. Ahvaz, Iran. The Evaluation of Bacterial Colonization on Skin Lesions of

Hospitalized Patients in Dermatology Department of Ahvaz Zahra Beigom Moosavi, Galal Lotfi. Jundishapur Journal of Microbiology. Vol 2(4). 2009; 148-151. www.uiweb.uidaho.edu. Di akses pada tanggal 12 Juli 2013

15. Lowy FD. Staphylococcus aureus Infection. N Engl J Med, 1998; 339-520

16. L.G. Harris, S.J. Foster, and R.G. Richards. An Introduction to Staphylococcus

aureus, and Techniques for Identifying and Quantifyings Adhesins In Relation to Adhesion to Biomaterials: Review. European Cells and Materials Vol. 4. 2002; 39

– 67.

17. Ardianti, Dwina, dkk. Perbandingan Efektivitas Hand sanitizer dengan Cuci tangan Pakai Sabun dalam Membunuh Kuman di Tangan. November 2011. (Belum dipublikasikan).

18. Radji, Maksum dkk. Uji Efektivitas Antimikroba Beberapa Merek Dagang

Pembersih Tangan Antiseptik. Majalah Ilmu Kefarmasian, Vol. IV, No. 1. 2007; 1-6.

19. Sandora TJ, Taveras EM, Shih M-C, Resnick EA, Lee GM, Ross-Degnan D, et al.

Hand sanitizer reduces illness transmission in the home. 2009.

20. CDC. Guideline for Hand Hygiene in Healthcare Settings. Morbidity and Mortality Weekly Reports (MMWR). 2002.

21. FDA/CFSAN. Hand Hygiene in Retail & Food Service Establishments. Food Service Safety Fact Sheet. 2003.

http://www.fda.gov/Food/FoodSafety/RetailFoodProtection/IndustryandRegulatoryAssistanceandTrainingResources/ucm135577.htm. Diakses pada 5 Agustus 2013.

22. Amy J. Pickering, Jennifer Davis and Alexandria B. Boehm. 2011. Efficacy of

Alcohol-based Hand sanitizer on Hands Soiled with Dirt and Cooking Oil. Journal of Water and Health. Vol 09.3. 2011.

23. Desmares, Catherine dkk. Short Communication: Is Ethanol-BasedHand Sanitizer Involved inAcute Pancreatitis after Excessive Disinfection?—An Evaluation with

the Use of PBPK Model. Journal of Toxicology. 2012.

31

24. Salha H.M. Al-Zahrani and Afraa M. Baghdadi. Evaluation of The efficiency of Non Alcoholic-Hand Gel Sanitizers Products as an Antibacterial. Nature and Science, 2012. Vol 10. 6; Hal. 2012. http://www.sciencepub.net/nature. Diakses

pada tanggal 20 Juni 2013.

25. Joseph R. Grubbs Jr. The Effects of Triclosan Derivatives Against the Growth of Staphylococcus aureus. 2008. (belum dipublikasikan)

26. Pratiwi, S. T. Mikrobiologi Farmasi. Jakarta: Penerbit Airlangga. 2008; Hal 188-

191

27. Seila I. Efek Ekstrak Daun Sirih Hijau (Piper betle L.) Terhadap Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus aureus. Jakarta: Fakultas Kedokteran Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah. 2012 (belum diterbitkan)

28. Umaro, Abe. Efek Ekstrak Siwak (salvadora persica) Terhadap Pertumbuhan

Bakteri Streptococcus mutan. Jakarta: Fakultas Kedokteran Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah. 2012 (belum diterbitkan)

29. David L. Dyer dkk. Alcohol-free Instant Hand Sanitizer Reduces Elementary

School Illness Absenteeism. Vol 32, No.9. 2011; 633 - 638

32

Lampiran 1

(Hasil Statistik)

1. Hasil Uji Normalitas

2. Hasil Uji Normalitas Setelah Transform Data

3. Hasil Uji Kruskall Wallis

Tests of Normality

Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk

Statistic df Sig. Statistic df Sig.

hasil pengukuran zona

hambat .246 43 .000 .730 43 .000

a. Lilliefors Significance Correction

Tests of Normality

Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk

Statistic Df Sig. Statistic Df Sig.

tran_zona .237 23 .002 .823 23 .001

a. Lilliefors Significance Correction

Test Statisticsa,b

hasil pengukuran

zona hambat

Chi-Square 41.667

df 10

Asymp. Sig. .000

a. Kruskal Wallis Test

b. Grouping Variable: nama

handsanitizer

33

4. Hasil Uji Posthock menggunakan Uji Mann Whitney

34

35

36

37

38

39

40

41

42

43

44

45

46

47

Lampiran 2

(Alat dan Bahan)

NACL & Mc. Farland Vortex

Laminar Airflow Alat-alat setelah disterilisasi

48

Biakan Staphylococcus aureus di MHA Alat dan bahan tambahan

Inkubasi

Cawan Petris

49

LAMPIRAN 3

(Riwayat Hidup)

DAFTAR RIWAYAT HIDUP

Nama : Izkar Ramadhan

Tempat, Tanggal Lahir : Jakarta, 25-02-1993

Alamat : Jl. Duri Kosambi No.6 Cengkareng Jakarta Barat

Email : Izkar.ramadhan@yahoo.com

No.Telpon : 085772970186

Riwayat Pendidikan

1998– 2004 : Madrasah Ibtida’yah Negri Zahratul Athfal III

2005 – 2007 : SMP A.S.I.A

2008 – 2010 : Madrasah Aliyah Negri 12 Jakarta

2010 – sekarang : Program Studi Pendidikan Dokter, FKIK Universitas Islam

Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta